Производные пиридазина в качестве ингибиторов smo

В изобретении описаны новые соединения, применяющиеся при диагностике и лечении патологий,связанных с путем Hedgehog, включая, но не ограничиваясь только ими, образование опухоли,рак, неоплазию и незлокачественные гиперпролиферативные нарушения. В изобретении описаны новые соединения, новые композиции, способы их применения и способы их получения, и такие соединения обычно являются фармакологически полезными в качестве средств для лечения,механизм действия которых включает подавление онкогенеза, роста опухоли и жизнедеятельности опухоли с помощью средств, которые ингибируют путь передачи сигнала Hedgehog и Smo. Уровень техники Передача сигнала белком Hedgehog (Hh) впервые обнаружена у дрозофил, как важный механизм регуляции формирования структуры эмбриона или процесс, с помощью которого клетки эмбриона образуют упорядоченные пространственные группировки дифференцированных тканей (Nusslein-Volhard etal. (1980) Nature 287, 795-801). В клетках млекопитающих идентифицированы три гена Hedgehog: SonicHedgehog (Shh), Indian Hedgehog (Ihh) и Desert Hedgehog (Dhh). Гены Hedgehog кодируют секретированные белки, которые подвергаются посттрансляционным модификациям, включая аутокаталитическое расщепление, и модификацию липидов (пальмитоилирование) на N-конце, и модификацию холестерина на С-конце. Модифицированный липидом N-концевой белок Hedgehog вызывает сигнальную активность на пути белка, и коммуникация между клетками возникает вследствие отправки растворимого белка Hedgehog от сигнализирующей клетки и его приема отвечающей клеткой. В отвечающих клетках содержащий 12 трансмембранных спиралей рецептор Patched (Ptch) действует в качестве негативного регулятора передачи сигнала Hh и содержащий 7 трансмембранных спиралей белок Smoothened (Smo) - в качестве позитивного регулятора передачи сигнала Hh. В состоянии покоя свободный Ptch (т.е. не связанный с Hh) стехиометрически подавляет активность пути, индуцируемого Smo (Taipale et al. (2002) Nature 418: 892); однако на связывающем лиганд белке Hh репрессия Smo ослабляется и результирующий каскад сигналов приводит к активации и ядерной транслокации факторов транскрипции Gli (Gli1, Gli2 и Gli3). Расположенные в прямом направлении гены-мишени транскрипции передачи сигнала белком Hh включают Wnts, TGF, Ptc и Gli1, которые являются элементами регуляторной петли положительной и отрицательной обратной связи. Генами-мишенями передачи сигнала посредством Hh также являются несколько генов клеточного цикла и генов, регулирующих пролиферацию, такие как c-Myc, циклин D и Е. Известно, что передача сигнала с помощью Hh регулирует самые различные биологические процессы,такие как пролиферация и дифференциация клеток и образование органа тканеспецифическим и зависимым от дозы образом. При развитии нервных трубок Shh экспрессируется в вентральной пластинке нервной трубки и направляет дифференциацию специфических подтипов нейронов, включая моторные и допаминергические нейроны. Также известно, что Hh регулирует пролиферацию клеток-предшественников нейронов, таких как невроциты-зерна мозжечка и нервные стволовые клетки. При развитии желудочнокишечного тракта для развития поджелудочной железы необходим низкий уровень передачи сигнала белком Hh, тогда как высокий уровень передачи сигнала белком Hh блокирует развитие поджелудочной железы. Также известно, что Hh играет важную роль в пролиферации стволовых клеток и органогенезе кожи, предстательной железы, яичек и костного мозга. Обычно передача сигнала с помощью Hh точно регулируется во время пролиферации, дифференциации клеток и формирования структуры эмбриона. Однако аберрантная активация пути передачи сигнала Hedgehog вследствие мутаций, которые конститутивно активируют этот путь, например, может привести к патологическим последствиям. Например, мутации, ведущие к потере функции Patched, обнаружены при синдроме Горлина (наследственный синдром, характеризующийся высоким риском раковых заболеваний кожи и головного мозга, также известный как синдром базально-клеточного невуса(BCNS; и мутации Smo и Gli, ведущие к потере функции, связаны с базально-клеточной карциномой и глиобластомой. Базально-клеточная карцинома (ВСС) является самой распространенной формой рака кожи, ежегодно обнаруживающейся более чем у 90000 американцев. Обнаружено, что конститутивная активация Hh стимулирует онкогенез при ВСС, медуллобластоме (самая распространенная опухоль головного мозга), рабдомиосаркоме, раке поджелудочной железы, мелкоклеточном раке легких, раке предстательной железы и раке молочной железы. Кроме участия в онкогенезе передача сигнала белком Hh также участвует в метастазировании рака предстательной железы. Передача сигнала белком Hh может участвовать во многих других типах опухолей, и такие взаимосвязи, видимо, будут еще обнаруживаться; такие исследования активно проводятся во многих центрах по изучению рака во всем мире. Для пролиферации этих раковых клеток необходима активация пути Hh, и блокирование путей передачи сигнала Hh часто подавляет пролиферацию раковых клеток. В действительности, антагонист Hh циклопамин и Gli1 siРНК могут эффективно блокировать пролиферацию этих раковых клеток и могут уменьшить размер опухоли в моделях ксенотрансплантата, указывая на то, что новые антагонисты Hh могут стать новыми химиотерапевтическими средствами лечения этих типов рака. На экспериментальных моделях на животных показано, что антагонист Hh циклопамин подавляет метастазирование рака предстательной железы. Кроме участия в раке передача сигнала с помощью Hh также играет важную роль в нормальном гомеостазе и регенерации тканей. Путь Hh активируется после повреждения сетчатки, желчного протока,легких, кости и предстательной железы на моделях мышей. Путь Hh также всегда является активным в волосяных фолликулах, костном мозге и некоторых областях центральной нервной системы (ЦНС), и для доброкачественной гиперплазии предстательной железы и образования кровеносных сосудов при экссудативной дегенерации желтого пятна необходима активность пути Hedgehog. Процессы регенерации клеток можно блокировать антителами анти-Shh и циклопамином. Поэтому небольшие молекулыантагонисты пути передачи сигнала Hh могут быть применимы для лечения нейрональных пролифера-1 020710 тивных заболеваний, доброкачественной гиперплазии предстательной железы, при экссудативной дегенерации желтого пятна, псориазе, пролиферативных заболеваниях костного мозга и лейкозах, остеопетрозе и выпадении волос. Данные о том, что конститутивная активация Smo приводит к раку (например, ВСС) и что Smo может быть онкогенным при его высвобождении при ингибировании посредством Ptch, указывают на применимость антагонистов Smo в качестве терапевтических средств для лечения таких нарушений (Stone etal. (1996) Nature 384: 129). Поэтому молекулы, которые модулируют активность пути передачи сигналаHedgehog, например которые модулируют активность Smo, применимы в терапии. Краткое изложение сущности изобретения Настоящее изобретение относится к новым соединениям формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям, гдеR1 обозначает С 6-С 14-арильную группу или 5-14-членную гетероарильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом, выбранный из О и N, каждая из которых может быть незамещенной или замещенной 1 или более заместителями, выбранными из C1-C8-алкила, С 6-С 14-арильной группы, C1-C8-алкоксигруппы, галогена, CN, CF3;X и W независимо обозначают N или CR5, и по меньшей мере один из X и W обозначает N;R7 обозначает С 6-С 14-арильную группу, 5-14-членную гетероарильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом азота, или 3-14-членную циклогетероалкильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом азота;R4 обозначает метил, фенил, пиридинил, метоксигруппу, Cl, F, C(O)OC1-C8-алкил, C(O)OH,C(O)NHC6-C14-арил, C(O)- 5-14-членную гетероарильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом, выбранный из O или N, C(O)- 3-14-членную циклогетероалкильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом, выбранный из O или N, CF3, CH2OH,CH2CH2OH, C(CH3)(CH3)OH, C(O)CH3, C(O)CH2CH3, SO2C1-C8-алкил, SO2CF3, C(O)NHC1-C8-алкил-ОН,C(O)NHC1-C8-алкил-CF3, SO2NHC1-С 8-алкил, OCF3, NHC(O)CH3 или CH2OC(O)NHCH3;R4 может быть незамещенным или замещенным 1 или более заместителями, выбранными из C1-C8 алкила, С 3-С 14-циклоалкила, С 6-С 14-арильной группы, 5-14-членной гетероарильной группы, которая содержит в качестве гетероатома атом кислорода, 3-14-членной циклогетероалкильной группы, которая содержит в качестве гетероатома атом кислорода, C1-C8-алкил-OH, OH, оксогруппы, C1-C8-галогеналкила, карбокси-С 1-С 8-алкила или SO2C1-С 8-алкила, галогена, -OCH3, -OCF3, -OH, -NH2. В предпочтительном варианте R7 обозначает В предпочтительном варианте R1 может быть незамещенным или замещенным 1 или более заместителями, выбранными из метила, этила, изопропила, Cl, F, CN, метоксигруппы или CF3; и R4 обозначает C(O)CH3, C(O)NH-фенил, C(O)OH, CF3, C(CH3)(CH3)OH, C(O)OCH3 или C(O)OCH2CH3. Другим объектом настоящего изобретения является соединение формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемая соль, в которойR13 и R14 независимо обозначают H, C1-C8-алкил, OH, OCH3, С 3-С 6-циклоалкил, 5- или 6-членный насыщенный или ароматический гетероцикл, включающий 1 или 2 гетероатома N или О; илиR13 и R14, присоединенные к одному атому азота, могут образовать 6-членный насыщенный гетероцикл, необязательно включающий дополнительный атом азота; иR11, R13 и R14 являются незамещенными или замещенными 1 или более заместителями, выбранными из С 1-С 4-алкила, С 1-С 4-алкокси, OH, CF3, оксогруппы или -OCH3. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для подавления возникновения и развития опухоли, содержащая охарактеризованные выше соединение формулы (I) или соединение формулы (Ia) в терапевтически эффективном количестве. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания, нарушения или синдрома, связанного с ингибированием Smoothened, который включает введение нуждающемуся в этом субъекту охарактеризованных выше соединения формулы (I) или соединения формулы(Ia) или фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I, и фармацевтически приемлемые инертные наполнители. В предпочтительном варианте заболевание, нарушение или синдром у субъекта является гиперпролиферативным, выбранным из группы, включающей рак и воспаление, где субъектом является животное,в т.ч. человек. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является применение соединений согласно настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства, которое ингибирует путь передачи сигнала Hedgehog и Smo. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для подавления возникновения и развития опухоли, содержащая соединение согласно настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для подавления возникновения и развития опухоли, содержащая соединение согласно настоящему изобетению и фармацевтически приемлемый носитель в форме, пригодной для перорального введения. Предложенные в настоящем соединения формулы (I) предпочтительно выбирают из группы, включающей 2-[(R)-4-(4,5-диметил-6-феноксипиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил 5'-ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(6-гидроксифенилметил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н[1,2]бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(4,5-диметил-6-пиридин-4-илметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(4,5-диметил-6-пиридин-2-илметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'ил]пропан-2-ол; 2-[4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан 2-ол; 2-[(S)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-этил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'ил]пропан-2-ол; 2-[4-(4-бензил-6,7-дигидро-5 Н-циклопента[d]пиридазин-1-ил)-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол; 2-[(R)-4-(4-бензил-6,7-дигидро-5 Н-циклопента[d]пиридазин-1-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол; 1-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'ил]этанон и 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'ил]пропан-1,2-диол. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является соединение 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5 диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол или его фармацевтически приемлемая соль. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для подавления возникновения и развития опухоли, содержащая 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3 ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является способ лечения медуллобластомы,-4 020710 базально-клеточной карциномы, рака поджелудочной железы или мелкоклеточного рака легких, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2 метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ола или его фармацевтически приемлемой соли в эффективном количестве. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является соединение 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5 диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция для подавления возникновения и развития опухоли, содержащая 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3 ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол и фармацевтически приемлемый носитель. Еще одним другим объектом настоящего изобретения является способ лечения медуллобластомы,базально-клеточной карциномы, рака поджелудочной железы или мелкоклеточного рака легких, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту 2-[(R)-4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2 метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ола в эффективном количестве. Подробное описание изобретения В настоящем описании термин "лечение" включает профилактическое или предупредительное лечение, а также излечивающее или подавляющее заболевание лечение, включая лечение пациентов, подверженных риску возникновения нарушения, указанного в настоящем изобретении (например, нарушения, связанного с Hedgehog (например, рака, а также заболевших пациентов. Этот термин также включает лечение, предназначенное для задержки прогрессирования заболевания."Подавлением и/или обращением", например, связанного с Hedgehog нарушения (например, рака) заявители считают устранение указанного связанного с Hedgehog нарушения (например, диабета) или его приведение в менее тяжелое состояние, чем до лечения или без проведения лечения."Излечивание" при использовании в настоящем изобретении означает обеспечиваемую путем лечения ремиссию связанного с Hedgehog нарушения (например, рака) или его непрерывных приступов у пациента. Термины "профилактика" или "предупреждение" означают блокирование возникновения или рецидива метаболических нарушений, например диабета."Лечение" означает терапию, предупреждение и профилактику и предпочтительно означает введение пациенту лекарственного средства или выполнение лечебных процедур для профилактики (предупреждения), или излечивания, или уменьшения степени проявления или вероятности возникновения нарушения, заболевания или патологического состояния или проявления, если пациент страдает заболеванием."Диагностика" означает постановку диагноза, прогноз, мониторинг, описание, подбор пациентов,включая участников клинических исследований, и выявление пациентов, подверженных риску возникновения нарушения или страдающих от конкретного нарушения или клинического проявления, и тех,которые с наибольшей вероятностью будут реагировать на конкретное лечение, или оценку, или мониторинг реакции пациента на конкретное лечение."Соединение (соединения), предлагаемое в настоящем изобретении" при использовании в настоящем изобретении включает, но не ограничивается только ими, соединения формулы (I) (например, соединения формулы (I), включая все ее варианты). Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении,включает соединения, специально перечисленные в настоящем изобретении, включая перечисленные в примерах, приведенных в настоящем изобретении."Задержка прогрессирования" при использовании в настоящем изобретении означает, что введение соединения, предлагаемого в настоящем изобретении (например, соединения формулы (I, пациентам на предварительной стадии или ранней стадии связанного с Hedgehog нарушения (например, рака) предупреждает дальнейшее развитие или замедляет развитие заболевания по сравнению с развитием заболевания без введения активного соединения."Усиление функции Hedgehog" означает аберрантную модификацию или мутацию гена Ptc, генаHedgehog или гена Smoothened или изменение (например, уменьшение) степени экспрессирования такого гена, которое приводит к фенотипу, который сходен с взаимодействием клетки с белком Hedgehog, например аберрантную активацию пути Hedgehog. Усиление функции может включать утрату способности генного продукта Ptc регулировать степень экспрессирования генов Gli, например Gli1, Gli2 и Gli3, или утрату способности регулировать процессинг, стабильность, локализацию или активность белков Gli,например Gli1, Gli2 и Gli3. Термин "усиление функции Hedgehog" в настоящем изобретении также используется для указания любого сходного клеточного фенотипа (например, проявление чрезмерной пролиферации), который наблюдается вследствие происходящего где-либо изменения пути передачи сигнала Hedgehog, включая, но не ограничиваясь только ими, модификацию или мутацию самого Hedgehog. Например, опухолевая клетка с аномально высокой скоростью пролиферации вследствие активации пути передачи сигнала Hedgehog будет обладать фенотипом "усиление функции Hedgehog", даже если в этой клетке Hedgehog не подвергся мутации."Потеря функции Patched" означает аберрантную модификацию или мутацию гена Ptc или уменьшение степени экспрессирования такого гена, которое приводит к фенотипу, который сходен с взаимодействием клетки с белком Hedgehog, например аберрантную активацию пути Hedgehog. Потеря функции может включать утрату способности генного продукта Ptc регулировать степень экспрессирования, процессинг,стабильность, локализацию, регуляцию или активность генов и белков Gli, например Gli1, Gli2 и Gli3."Усиление функции Gli" означает аберрантную модификацию или мутацию гена Gli или повышенную степень экспрессирования этого гена, что приводит к фенотипу, который сходен с взаимодействием клетки с белком Hedgehog, например аберрантную активацию пути Hedgehog."Усиление функции Smoothened" означает аберрантную модификацию или мутацию гена Smo или повышенную степень экспрессирования этого гена, что приводит к фенотипу, который сходен с взаимодействием клетки с белком Hedgehog, например аберрантную активацию пути Hedgehog. При использовании в настоящем изобретении "небольшая органическая молекула" означает органическое соединение (или органическое соединение, образовавшее комплекс с неорганическим соединением (например, металлом, которое обладает молекулярной массой, равной менее 3 кДа, и предпочтительно менее 1,5 кДа. При использовании в настоящем изобретении термин "репортерный ген" используется взаимозаменяемым образом с термином "маркерный ген" и означает нуклеиновую кислоту, которая легко обнаруживает и/или кодирует генный продукт, который легко обнаруживается, такой как люцифераза. Транскрипционные и трансляционные контрольные последовательности представляют собой регуляторные последовательности ДНК, такие как промоторы, усилители, терминаторы и т.п., которые обеспечивают экспрессирование кодирующей последовательности в клетке-хозяине. В эукариотных клетках контрольными последовательностями являются сигналы полиаденилирования."Промотирующая последовательность" представляет собой регуляторный участок ДНК, способный связывать РНК-полимеразу в клетке и инициировать транскрипцию кодирующей последовательности в прямом направлении (в направлении 3'). Для определения настоящего изобретения промотирующая последовательность связана по своему 3'-концу сайтом инициации транскрипции и располагается в обратном направлении (в направлении 5') с включением минимального количества оснований или элементов,необходимых для инициирования транскрипции в степени, отличимой от фона. В промотирующей последовательности обнаруживается сайт инициации транскрипции (обычно определяемый, например, путем картирования с нуклеазой S1), а также домены связывания белка (консенсусные последовательности), обеспечивающие связывание РНК-полимеразы. Кодирующая последовательность "находится под контролем" транскрипционной и трансляционной контролирующих последовательностей в клетке, когда РНК-полимераза транскрибирует кодирующую последовательность в мРНК, которая затем подвергается сплайсингу посредством транс-РНК и транслируется в белок, кодируемый кодирующей последовательностью. Выражение "фармацевтически приемлемый" означает соединения и композиции, которые при введении человеку являются физиологически переносимыми и обычно не приводят к аллергическим или аналогичным нежелательным реакциям, таким как расстройства желудка, головокружение и т.п. При использовании в настоящем изобретении термин "фармацевтически приемлемый" предпочтительно означает утвержденный регулятивным органом федерального правительства или правительства штата или указанный в Фармакопее США или другой общепризнанной Фармакопее как применимый для животных и более предпочтительно для человека. Термин "носитель" означает разбавитель, вспомогательное вещество, инертный наполнитель или растворитель, вместе с которым вводят соединение. Такие фармацевтические носители могут представлять собой стерильные жидкости, такие как вода или масла, включая масла, полученные из нефти, и масла животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.п. В качестве носителей, в особенности для растворов,предназначенных для инъекций, предпочтительно использовать воду или водные физиологические растворы и водные растворы декстрозы и глицерина. Подходящие фармацевтические носители описаны в публикации "Remington's Pharmaceutical Sciences" by E.W. Martin. Выражение "терапевтически эффективное количество" используется в настоящем изобретении для указания количества, достаточного для составляющего по меньшей мере примерно 15%, предпочтительно по меньшей мере примерно 50%, более предпочтительно по меньшей мере примерно 90% ослабления клинически значимого дефицита активности, функции и ответа реципиента, и наиболее предпочтительно его предупреждение. Альтернативно, терапевтически эффективное количество достаточно для обеспечения улучшения клинически значимого состояния/симптома у реципиента."Средство" означает все вещества, которые можно использовать для приготовления фармацевтических и диагностических композиций или которыми могут быть соединения, нуклеиновые кислоты, полипептиды, фрагменты, изоформы, варианты или другие вещества, которые независимо можно использовать для таких целей, все в соответствии с настоящим изобретением."Аналог" при использовании в настоящем изобретении означает небольшое органическое соединение, нуклеотид, белок или полипептид, который обладает сходной или такой же активностью или функ-6 020710 цией (функциями), как соединение, нуклеотид, белок или полипептид или соединение, обладающее необходимой активностью и терапевтическим воздействием в соответствии с настоящим изобретением(например, подавляет рост опухоли), но не обязательно включает последовательность или структуру,которая сходна или идентична с последовательностью или структурой предпочтительного варианта осуществления."Производное" означает соединение, белок или полипептид, который включает аминокислотную последовательность исходного белка или полипептида, которая изменена путем замещений, удалений или прибавлений аминокислотных остатков, или нуклеиновую кислоту или нуклеотид, который модифицирован путем введения или удалений, прибавлений или мутаций нуклеотидных заместителей. Производное нуклеиновой кислоты, нуклеотида, белка или полипептида выполняет сходную или такую же функцию, как исходный полипептид."Ингибиторы" или "антагонисты" означают ингибирующие молекулы, идентифицированные с помощью проводимых in vitro и in vivo исследований функции пути Hh, например антагонисты Smo. Ингибиторы и антагонисты предпочтительно означают соединения или средства, которые ослабляют передачу сигналов для пути Hh. Ингибиторы могут представлять собой соединения, которые ослабляют, блокируют или предупреждают передачу сигналов для этого пути."Нарушение (нарушения), связанное с Hedgehog" при использовании в настоящем изобретении включает нарушения, связанные с разрушением или аберрацией пути Hedgehog, а также нарушения, связанные с нормальными, но нежелательными состояниями роста, связанные с активацией пути Hedgehog."Нарушение (нарушения), связанное с Hedgehog" включают, но не ограничиваются только ими, образование опухоли, рак, неоплазию, злокачественные гиперпролиферативные нарушения и незлокачественные гиперпролиферативные нарушения. "Нарушение (нарушения), связанное с Hedgehog" также включают доброкачественную гиперплазию предстательной железы, псориаз, экссудативную дегенерацию желтого пятна, остеопетроз и нежелательный рост волос. При использовании в настоящем изобретении термин "рак" включает солидные опухоли млекопитающих, а также злокачественные заболевания крови. "Солидные опухоли млекопитающих" включают раковые заболевания головы и шеи, легких, мезотелиому, заболевания средостения, пищевода, желудка,поджелудочной железы, гепатобилиарной системы, тонкого кишечника, ободочной кишки, ободочной и прямой кишки, прямой кишки, ануса, почек, уретры, мочевого пузыря, предстательной железы, пениса,яичек, половых органов женщин, яичников, молочной железы, эндокринной системы, центральной нервной системы, включая головной мозг; саркомы мягких тканей и костей; и меланому кожного и внутриглазного происхождения. Термин "злокачественные заболевания крови" включает детские лейкозы и лимфомы, болезнь Ходжкина, лимфомы лимфоцитарного и кожного происхождения, острый и хронический лейкоз, плазмоклеточную неоплазию и раковые заболевания, связанные со СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита). Кроме того, можно лечить рак на любой стадии прогрессирования, такой как первичный, метастатический и рецидивирующий рак. Информация о многочисленных типах рака приведена, например, в публикациях American Cancer Society или, например, Wilson et al. (1991) Harrison'sPrinciples of Internal Medicine, 12th Edition, McGraw-Hill, Inc. В объем настоящего изобретения входит применение в медицине и ветеринарии. Раковые заболевания, которые особенно хорошо поддаются лечению соединениями и способами,предлагаемыми в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими, глиомы, медуллобластомы, примитивные нейроэктодермальные опухоли (PNETS), базально-клеточную карциному(BCC), мелкоклеточные раковые заболевания легких, крупноклеточные раковые заболевания легких,опухоли желудочно-кишечного тракта, рабдомиосаркомы, саркомы мягких тканей, опухоли поджелудочной железы, опухоли мочевого пузыря и опухоли предстательной железы. При использовании в настоящем изобретении термин "злокачественное гиперпролиферативное нарушение (нарушения)" включает, но не ограничивается только ими, раковые заболевания, нейрональные пролиферативные нарушения, пролиферативные заболевания костного мозга и лейкозы. При использовании в настоящем изобретении термин "незлокачественное гиперпролиферативное нарушение (нарушения)" включает, но не ограничивается только ими, незлокачественные и ненеопластические пролиферативные нарушения, такие как гиперплазию гладких мышц в кровеносных сосудах,образование рубцов на коже и фиброз легких. При использовании в настоящем изобретении "галоген" означает фтор, хлор, бром или йод. При использовании в настоящем изобретении "алкил" означает обладающую линейной или разветвленной цепью насыщенную углеводородную группу. В некоторых вариантах осуществления алкильная группа может содержать от 1 до 10 атомов углерода (например, от 1 до 6 атомов углерода). Примеры алкильных групп включают метильную (Me), этильную (Et), пропильные (например, н-пропильную и изопропильную), бутильные (например, н-бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную),пентильные группы (например, н-пентильную, изопентильную, неопентильную) и т.п. Примеры низш. алкильных групп включают метильную, этильную, пропильные (например, н-пропильную и изопропильную) и бутильные группы (например, н-бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную). При использовании в настоящем изобретении "алкенил" означает обладающую линейной или раз-7 020710 ветвленной цепью алкильную группу, содержащую 1 или более углерод-углеродных двойных связей. В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа может содержать от 2 до 10 атомов углерода(например, от 2 до 8 атомов углерода). Примеры алкенильных групп включают этинильную, пропенильную, бутенильную, пентенильную, гексенильную, бутадиенильную, пентадиенильную, гексадиенильную группы и т.п. Одна или более углерод-углеродных двойных связей могут быть внутренними (как в 2-бутене) или концевыми (как в 1-бутене). При использовании в настоящем изобретении "алкинил" означает обладающую линейной или разветвленной цепью алкильную группу, содержащую 1 или более углерод-углеродных тройных связей. В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа может содержать от 2 до 10 атомов углерода(например, от 2 до 8 атомов углерода). Примеры алкинильных групп включают этинил, пропинил, бутинил, пентинил и т.п. Одна или более углерод-углеродных тройных связей могут быть внутренними (как в 2-бутине) или концевыми (как в 1-бутине). При использовании в настоящем изобретении "алкоксигруппа" означает группу -О-алкил. Примеры алкоксигрупп включают метоксигруппу, этоксигруппу, пропоксигруппу (например, н-пропоксигруппу и изопропоксигруппу), трет-бутоксигруппу и т.п. При использовании в настоящем изобретении "алкилтиогруппа" означает группу -S-алкил. Примеры алкилтиогрупп включают метилтиогруппу, этилтиогруппу, пропилтиогруппу (например, н-пропилтиогруппу и изопропилтиогруппу), трет-бутилтиогруппу и т.п. Термин "карбалкоксигруппа" означает алкоксикарбонильную группу, в которой присоединение к главной цепи происходит через карбонильную группу (C(O. Примеры включают, но не ограничиваются только ими, метоксигруппу карбонил, этоксигруппу карбонил и т.п. При использовании в настоящем изобретении "оксогруппа" означает кислород, связанный двойной связью (т.е. =O). Также следует понимать, что обозначение C(O) означает группу -C=O, которая может входить в кетон, альдегид, кислоту или производное кислоты. Аналогичным образом, S(O) означает группу -S=O. При использовании в настоящем изобретении "галогеналкил" означает алкильную группу, содержащую 1 или более галогенидных заместителей. В некоторых вариантах осуществления галогеналкильная группа может содержать от 1 до 10 атомов углерода (например, от 1 до 8 атомов углерода). Примеры галогеналкильных групп включают CF3, C2F5, CHF2, CH2F, CCl3, CHCl2, CH2Cl, C2Cl5 и т.п. Пергалогеналкильные группы, т.е. алкильные группы, в которых все атомы водорода заменены на атомы галогенов (например, CF3 и C2F5), включены в определение "галогеналкила". Например, C1-C10-галогеналкильная группа может описываться формулой -CiH2i+1-jXj, в которой X обозначает F, Cl, Br или I, i является целым числом в диапазоне от 1 до 10 и j является целым числом в диапазоне от 0 до 21 при условии, что j меньше или равно 2i+1. В настоящем изобретении, когда после алкильной группы следует функциональная группа, например алкил-OH, следует понимать, что это означает алкильную группу, содержащую 1 или более замещающих функциональных групп, которые могут находиться в любом положении алкильной цепи. Примеры групп C1-C8-алкил-OH без наложения ограничений включают CH2OH, CH2CH2OH, C(CH3)(CH3)OH,C(CH3)(CH2OH)OH и т.п. При использовании в настоящем изобретении "циклоалкил" означает неароматическую карбоциклическую группу, включая циклизованную алкильную, алкенильную и алкинильную группы. Циклоалкильная группа может быть моноциклической (например, циклогексил) или полициклической (например,содержащей конденсированные, мостиковые и/или спирановые кольцевые системы), в которых атомы углерода находятся внутри кольцевой системы или снаружи. Циклоалкильная группа, как целое, может содержать от 3 до 14 кольцевых атомов (например, от 3 до 8 атомов углерода в случае моноциклической циклоалкильной группы и от 7 до 14 атомов углерода в случае полициклической циклоалкильной группы). Любое подходящее положение циклоалкильной группы может быть ковалентно связано с определенной химической структурой. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропильную, циклобутильную, циклопентильную, циклогексильную, циклогептильную, циклопентенильную, циклогексенильную, циклогексадиенильную, циклогептатриенильную, норборнильную, норпинильную, норкарильную, адамантильную и спиро[4,5]деканильную группы, а также их гомологи, изомеры и т.п. При использовании в настоящем изобретении "гетероатом" означает атомы любого элемента, кроме углерода и водорода, и включает, например, азот, кислород, серу, фосфор и селен. При использовании в настоящем изобретении "циклогетероалкил" означает неароматическую циклоалкильную группу, которая содержит по меньшей мере 1 (например, 1, 2, 3, 4 или 5) кольцевой гетероатом, выбранный из группы, включающей О, N и S, и необязательно содержит 1 или более (например,1, 2 или 3) двойных или тройных связей. Циклогетероалкильная группа, как целое, может содержать от 3 до 14 кольцевых атомов и содержать от 1 до 5 кольцевых гетероатомов (например, 3-6 кольцевых атомов в случае моноциклической циклогетероалкильной группы и от 7 до 14 кольцевых атомов в случае полициклической циклогетероалкильной группы). Циклогетероалкильная группа может быть ковалентно связана с определенной химической структурой по любому гетероатому (гетероатомам) или атому (атомам) углерода, что приводит к стабильной структуре. Один или более атомов N или S в циклогетероалкильном кольце может быть окислен (например, образовать морфолин-N-оксид, тиоморфолин-S-оксид, тиоморфолин-S,S-диоксид). Циклогетероалкильные группы также могут содержать 1 или более оксогрупп, например фталимидил, пиперидонил, оксазолидинонил, 2,4(1 Н,3 Н)-диоксопиримидинил, пиридин-2(1 Н)онил и т.п. Примеры циклогетероалкильных групп, в частности, включают морфолинил, тиоморфолинил,пиранил, имидазолидинил, имидазолинил, оксазолидинил, пиразолидинил, пиразолинил, пирролидинил,пирролинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, пиперидинил, пиперазинил и т.п. При использовании в настоящем изобретении "арил" означает ароматическую моноциклическую углеводородную кольцевую систему или полициклическую кольцевую систему, где по меньшей мере одно из колец кольцевой системы является ароматическим углеводородным кольцом и любые другие ароматические кольца кольцевой системы являются только углеводородными. В некоторых вариантах осуществления моноциклическая арильная группа может содержать от 6 до 14 атомов углерода и полициклическая арильная группа может содержать от 8 до 14 атомов углерода. Арильная группа может быть ковалентно связана с определенной химической структурой по любому атому (атомам) углерода, что приводит к стабильной структуре. В некоторых вариантах осуществления арильная группа может содержать только ароматические карбоциклические кольца, например фенильная, 1-нафтильная, 2-нафтильная, антраценильная, фенантренильная группы и т.п. В других вариантах осуществления арильная группа может представлять собой полициклическую кольцевую систему, в которой по меньшей мере одно ароматическое карбоциклическое кольцо является конденсированным, т.е. содержащим общую связь с одним или большим количеством циклоалкильных или циклогетероалкильных колец. Примеры таких арильных групп, в частности, включают бензопроизводные циклопентана (т.е. инданильную группу, которая представляет собой 5,6-бициклическую циклоалкил/ароматическую кольцевую систему), циклогексан (т.е. тетрагидронафтильную группу, которая представляет собой 6,6-бициклическую циклоалкил/ароматическую кольцевую систему), имидазолин (т.е. бензимидазолинильную группу, которая представляет собой 5,6-бициклическую циклогетероалкил/ароматическую кольцевую систему), и пиран (т.е. хроменильную группу, которая представляет собой 6,6-бициклическую циклогетероалкил/ароматическую кольцевую систему). Другие примеры арильных групп включают бензодиоксанильную, бензодиоксолильную, хроманильную, индолинильную группы и т.п. При использовании в настоящем изобретении "гетероарил" означает ароматическую моноциклическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом, выбранный из группы,включающей О, N и S, или полициклическую кольцевую систему, где по меньшей мере одно из колец кольцевой системы является ароматическим и содержит по меньшей мере 1 кольцевой гетероатом. Гетероарильная группа, как целое, может содержать от 5 до 14 кольцевых атомов и содержать 1-5 кольцевых гетероатомов. В некоторых вариантах осуществления гетероарильные группы могут включать моноциклические гетероарильные кольца, сконденсированные с одним или большим количеством ароматических карбоциклических колец, неароматических карбоциклических колец или неароматических циклогетероалкильных колец. Гетероарильная группа может быть ковалентно связана с определенной химической структурой по любому гетероатому или атому углерода, что приводит к стабильной структуре. Обычно гетероарильные кольца не содержат связи O-O, S-S или S-O. Однако один или более атомов N или S в гетероарильной группе может быть окислен (например, образовать пиридин-N-оксид, тиофен-S-оксид,тиофен-S,S-диоксид). Примеры таких гетероарильных колец включают пирролильную, фурильную, тиенильную, пиридильную, пиримидильную, пиридазинильную, пиразинильную, триазолильную, тетразолильную, пиразолильную, имидазолильную, изотиазолильную, тиазолильную, тиадиазолильную, изоксазолильную, оксазолильную, оксадиазолильную, индолильную, изоиндолильную, бензофурильную, бензотиенильную, хинолильную, 2-метилхинолильную, изохинолильную, хиноксалильную, хиназолильную,бензотриазолильную, бензимидазолильную, бензотиазолильную, бензизотиазолильную, бензизоксазолильную, бензоксадиазолильную, бензоксазолильную, циннолинильную, 1 Н-индазолильную, 2 Н-индазолильную, индолизинильную, изобензофурильную, нафтиридинильную, фталазинильную, птеридинильную, пуринильную, оксазолопиридинильную, тиазолопиридинильную, имидазопиридинильную,фуропиридинильную, тиенопиридинильную, пиридипиримидинильную, пиридопиразинильную, пиридопиридазинильную, тиенотиазолильную, тиенооксазолильную, тиеноимидазолильную группы и т.п. Другие примеры гетероарильных групп включают 4,5,6,7-тетрагидроиндолильную, тетрагидрохинолинильную, бензотиенопиридинильную, бензофуропиридинильную группы и т.п. Как определено в настоящем изобретении, термин "низш. алкил" при использовании по отдельности или в комбинации означает алкил, содержащий 1-6 атомов углерода. Алкильная группа может обладать линейной или разветвленной цепью и является такой, как определено выше в настоящем изобретении. Термин "низш. алкенил" означает алкенильную группу, которая содержит 2-6 атомов углерода. Алкенильная группа представляет собой гидрокарбильную группу, содержащую по меньшей мере 1 углерод-углеродную двойную связь. Как определено в настоящем изобретении, она может быть незамещенной или замещенной заместителями, описанными в настоящем изобретении. Углерод-углеродные двойные связи могут находиться между любыми двумя атомами углерода алкенильной группы. Предпочтительно, если она содержит 1 или 2 углерод-углеродные двойные связи и более предпочтительно 1 углерод-углеродную двойную связь. Алкенильная группа может обладать линейной или разветвленной це-9 020710 пью. Примеры включают, но не ограничиваются только ими, этинил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-бутенил,2-бутенил, 2-метил-1-пропенил, 1,3-бутадиенил и т.п. Термин "низш. алкинил" при использовании в настоящем изобретении означает алкинильную группу, содержащую 2-6 атомов углерода. Алкинильная группа представляет собой гидрокарбильную группу,содержащую по меньшей мере 1 углерод-углеродную тройную связь. Углерод-углеродная тройная связь может находиться между любыми двумя атомами углерода алкинильной группы. Предпочтительно, если алкинильная группа содержит 1 или 2 углерод-углеродные тройные связи и более предпочтительно 1 углерод-углеродную тройную связь. Алкинильная группа может обладать линейной или разветвленной цепью. Примеры включают этинил, 1-пропинил, 2-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил и т.п. В объем настоящего изобретения входят все фармацевтически приемлемые изотопно-меченые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, т.е. соединения формулы (I), в которой один или более атомов заменены атомами, обладающими таким же атомным номером, но атомной массой или массовым числом, отличающимся от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, включают изотопы водорода, такие как 2H и 3H, углерода, такие как 11C, 13C и 14C, хлора, такие как 36O и 18O, фосфора, такие как 32P, и серы, такие как 35S. Некоторые изотопно-меченые соединения формулы (I), например содержащие радиоактивный изотоп, применимы для исследования распределения лекарственного средства или субстрата в тканях. Радиоактивные изотопы тритий, т.е. 3H, и углерод-14, т.е. 14C, являются особенно подходящими вследствие легкости их включения и простых средств детектирования. Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е. 2H, может привести к некоторым терапевтическим преимуществам, обусловленным большей метаболической стабильностью, например увеличенным периодом полувыведения in vivo или возможностью использования меньших доз, и, следовательно, при некоторых обстоятельствах может быть предпочтительным. Замещение изотопами, испускающими позитроны, такими как 11C, 18F, 15O и 13N, может быть полезно для изучения занятости рецепторов субстрата с помощью позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ). Изотопно-меченые соединения формулы (I) обычно можно получить по обычным методикам, известным специалистам в данной области техники, или по методикам, аналогичным описанным в прилагающихся примерах и разделах, посвященных синтезу, с использованием подходящего изотопно-меченого реагента, вместо использовавшегося ранее немеченого реагента. Фармацевтически приемлемые соли любых кислотных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, означают соли, образованные с основаниями, а именно соли катионов, такие как соли щелочных и щелочно-земельных металлов, таких как натрий, литий, калий, кальций, магний, а также соли аммония,такие как соли аммония, триметиламмония, диэтиламмония и трис-(гидроксиметил)метиламмония. Аналогичным образом, соли присоединения с кислотами, такие как образованные с неорганическими кислотами, органическими карбоновыми кислотами и органическими сульфоновыми кислотами, например с хлористо-водородной кислотой, малеиновой кислотой и метансульфоновой кислотой, являются возможными, если частью структуры является основная группа, такая как аминогруппа или пиридильная группа. Согласно изобретению было установлено, что пути передачи сигнала, регулируемые с помощью Hh и/или Smo, можно модулировать соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении. Предлагаемые в настоящем изобретении соединения формулы (I) предназначены для ингибирования зависимого от Smo пути активации. Кроме того, предлагаемые в настоящем изобретении соединения формулы (I) предназначены для ингибирования независимого от Hedgehog (лиганда) пути активации. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для противодействия фенотипическим эффектам нежелательной активации пути Hedgehog, таким как мутации, обусловленные усилением функции Hedgehog, потерей функции Ptc или усилением функции Smoothened. Например, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, и способ, предлагаемый в настоящем изобретении, могут включать взаимодействие клетки (in vitro или in vivo) с антагонистом Smo, таким как соединение формулы (I) в количестве, достаточном для подавления зависимого от Smoothened и/или независимого отHedgehog пути активации. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем блокирования трехмерной структуры белка Smo в неактивной конформации или препятствования образованию активной конформации Smo. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения эндогенно активирующих лигандов Smo от связывания со Smo или от активации Smo (т.е. воздействия путем негативной кооперации с эндогенными агонистами). Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем усиления связывания эндогенно инактивирующих лигандов Smo соSmo или инактивации Smo (т.е. воздействия путем позитивной кооперации с эндогенным антагонистом). Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения локализации Smo в плазматической мембране. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения передачи сигнала от Ptch к Smo в присутствии или при отсутствии лиганда Hh. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения стабилизации Smo. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения фосфорилирования Smo по активирующим центрам. В другом варианте соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем усиления фосфорилирования Smo по ингибирующим центрам. Еще в одном варианте соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем предотвращения осуществляющейся с помощью Smo активации расположенных в прямом направлении мишеней, таких как фактор транскрипции Gli. В другом варианте соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют передачу сигнала с помощью Hh путем осуществления инактивации, секвестрации и/или разрушения Smo. Предлагаемые в настоящем изобретении соединения можно использовать для регулирования пролиферации и/или дифференциации клеток in vitro и/или in vivo, например, при образовании ткани из стволовых клеток или для предупреждения роста гиперпролиферативных клеток. В другом предпочтительном варианте взаимодействие клетки с соединением, предлагаемым в настоящем изобретении, или его введение в клетку приводит к подавлению пролиферации клеток, подавлению роста и/или жизнедеятельности раковых/опухолевых клеток и/или подавлению онкогенеза. Таким образом, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать в способах торможения и/или подавления путиHh путем использования в опухолевых клетках. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут применяться в виде фармацевтического препарата, включающего фармацевтически приемлемый инертный наполнитель или носитель, и указанные препараты можно вводить пациенту для лечения патологических состояний, включая нежелательную пролиферацию клеток, такую как раковые заболевания и/или опухоли (такие, как медуллобластома, базально-клеточная карцинома и т.п.) и незлокачественные гиперпролиферативные нарушения. Предполагается, что соединения формулы I, которые препятствуют активности передачи сигналов для Hh, Ptc или Smoothened, также будут способны ингибировать пролиферацию (или другие биологические последствия) в нормальных клетках и/или клетках, обладающих фенотипом потери функцииPatched, фенитопом усиления функции Hedgehog, фенитопом усиления функции Smoothened или фенитопом усиления функции Gli. Таким образом, предполагается, что в некоторых вариантах осуществления эти соединения могут быть применимы для ингибирования активности Hedgehog в нормальных клетках,например в тех, которые не содержат генетических мутаций, которые активируют путь Hedgehog. В предпочтительных вариантах осуществления соединения способны ингибировать по меньшей мере часть биологических активностей белков Hedgehog, предпочтительно специфично в клетках-мишенях. Таким образом, способы, предлагаемые в настоящем изобретении, включают применение соединений формулы I, которые препятствуют ингибированию пути передачи сигнала Hedgehog с помощью Ptc,например, путем ингибирования активации Smoothened или расположенных в прямом направлении компонентов пути передачи сигнала, путем регулирования репарации и/или функциональных характеристик самых различных клеток, тканей и органов, включая нормальные клетки, ткани и органы, а также те, которые обладают фенотипом потери функции Ptc, усиления функции Hedgehog, усиления функцииSmoothened или усиления функции Gli. В некоторых вариантах осуществления соединение формулы I может ингибировать активацию путиHedgehog путем связывания со Smoothened или с его расположенными в прямом направлении белками. Лечение субъектов путем введения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении (например,соединения формулы I), может быть эффективным и для людей, и для животных. Животные, для которых применимо настоящее изобретение, включают и домашних животных, и домашний скот, которых держат в качестве домашних животных или для коммерческих целей. Примерами являются собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, овцы, свиньи, козы и ламы. Представители семейства сигнальных молекул Hedgehog опосредуют многие кратко- и долговременные процессы формирования структурной организации при развитии позвоночных. Формирование структурной организации представляет собой активность, при которой эмбриональные клетки образуют упорядоченные пространственные структуры дифференцированных тканей. Физическая сложность высших организмов возникает во время эмбриогенеза вследствие взаимодействия между внутренней линией дифференцировки клеток и внешними сигналами, идущими к клетке. Индуктивные взаимодействия важны для формирования эмбриональной структурной организации при развитии позвоночных от раннего образования плана организма до образования системы органов и до образования разных типов клеток во время дифференциации ткани. Влияние взаимодействия клеток при развитии меняется: отвечающие клетки переходят от одного пути дифференциации клеток к другому путем индуцирования клеток, которые отличаются от отвечающих клеток и в индуцированных, и в неиндуцированных состояниях (индукции). Иногда клетки приводят к дифференциации соседних клеток, такой как собственная (гомогенетическая индукция); в других случаях клетка подавляет дифференциацию соседних клеток, такую как собственная. Взаимодействия клеток на ранней стадии развития могут быть последовательными, такими что начальная индукция между двумя типами клеток приводит к прогрессивной амплификации разнообра- 11020710 зия. Кроме того, индуктивные взаимодействия происходят не только в эмбрионах, но и в зрелых клетках,и могут приводить к образованию и поддержанию морфологических характеристик, а также индуцировать дифференциацию. Группа генов Hedgehog позвоночных включает трех представителей, которые существуют у млекопитающих, известных как Desert (Dhh), Sonic (Shh) и Indian (Ihh) Hedgehogs, которые все кодируют секретированные белки. Эти разные белки Hedgehog включают сигнальный пептид, высококонсервативныйN-концевой участок и более дивергентный C-концевой домен. Биохимические исследования показали,что аутопротеолитическое расщепление предшественника белка Hh протекает путем первоначального образования сложного тиоэфирного промежуточного продукта, который затем расщепляется при нуклеофильном замещении. Вероятно, что нуклеофильный реагент представляет собой небольшую липофильную молекулу, которая ковалентно связывается с C-концевым концом N-пептида, присоединяя его к поверхности клетки. Биологические проявления являются значительными. В результате присоединения на поверхности клеток, продуцирующих Hedgehog, создается высокая локальная концентрация N-концевого пептида Hedgehog. Это N-концевой пептид, который необходим и достаточен для кратко- и долговременной активности пути передачи сигнала Hedgehog.Smoothened (Smo) кодирует содержащий 1024 аминокислоты трансмембранный белок, который действует как приемник сигнала Hedgehog (Hh). Белок Smo содержит 7 гидрофобных входящих в мембрану доменов, внеклеточную область с концевыми аминогруппами и внутриклеточную область с концевыми карбоксигруппами. Smo обладает определенным сходством со связанными с белком G рецепторами и наиболее гомологичен семейству Frizzled (Fz) серпентиновых белков (Alcedo et al. (1996) Cell 86: 221). Неактивным путь передачи сигнала Hedgehog является тогда, когда трансмембранный белковый рецептор Patched (Ptc) ингибирует стабилизацию, фосфорилирование и активность Smoothened (Smo). Фактор транскрипции Gli, расположенный в прямом направлении компонент пути передачи сигнала Hh,защищается от входа в ядро путем взаимодействия с цитоплазматическими белками, включая Fused иSuppressor fused (Sufu). Вследствие этого подавляется транскрипционная активация генов-мишенейHedgehog. Активация пути передачи сигнала инициируется путем связывания любого из трех лигандов млекопитающих (Dhh, Shh или Ihh) с Ptc. Связывание лигандов приводит к обращению подавления Smo и тем самым активирует каскад, что приводит к перемещению активной формы фактора транскрипции на ядра. Ядерный Gli активирует экспрессию гена-мишени, включая Ptc и сам Gli. Связывание лигандов с помощью Hh меняет взаимодействие Smo и Ptc, обращая подавление Smo,после чего Smo перемещается от внутренних структур клетки к плазматической мембране. ЛокализацияSmo на плазматической мембране инициирует гены-мишени активации пути передачи сигнала Hh независимым от Hh образом (Zhu et al. (2003) Genes Dev. 17 (10): 1240). Каскад, активированный с помощьюSmo, приводит к перемещению активной формы фактора транскрипции Gli на ядра. Активация Smo с помощью перемещенного ядерного Gli активирует экспрессию гена-мишени пути передачи сигнала Hh,включая Wnts, TGF, Ptc и сам Gli. Повышенные уровни передачи сигнала Hedgehog достаточны для инициирования образования рака и необходимы для жизнеспособности опухоли. Эти раковые заболевания включают, но не ограничиваются только ими, рак предстательной железы ("Hedgehog signalling in prostate regeneration, neoplasia and metastasis",Karhadkar S.S., Bova G.S., Abdallah N., Dhara S., Gardner D., Maitra A., Isaacs J.T., Berman D.M., Beachy P.A.,Nature. 2004 Oct. 7; 431 (7009): 707-12; "Inhibition of prostate cancer proliferation by interference with SONIC(2006), International Journal of Cancer; 118 (4): 1022-31), рак молочной железы ("Hedgehog signaling pathwaygrowth inhibition by hedgehog pathway blockade", Berman D.M., Karhadkar S.S., Hallahan A.R., Pritchard J.I.,Eberhart C.G., Watkins D.N., Chen J.K., Cooper M.K., Taipale J., Olson J.M., Beachy P.A., Science. 2002 Aug. 30; 297 (5586): 1559-61), не являющийся меланомой рак кожи, т.е. плоскоклеточную карциному (SCC) и базально-клеточную карциному (BCC) ("Identification of a small molecule inhibitor of the hedgehog signalingJr., de Sauvage F.J., Nature. 1998 Jan. 1; 391 (6662): 90-2), раковые заболевания поджелудочной железы,пищевода, желудка и печени ("Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis",- 12020710KRAS suppresses Gli1 degradation and activates Hedgehog signaling pathway in pancreatic cancer cells", Ji Z.,Mei F.C., Xie J., et al. (2007), J. Biol. Chem.; 282 (19): 14048-55), и мелкоклеточный рак легких ("Hedgehogsignaling in small-cell lung cancer: Frequent in vivo but a rare event in vitro", Vestergaard J., Pedersen M.W.,Pedersen N., et al. (2006), Lung Cancer; 52 (3): 281-90). Дополнительным типы рака, при которых наблюдаются повышенные уровни передачи сигналаHedgehog, достаточные для инициирования развития рака и необходимые для выживания опухоли,включают, но не ограничиваются только ими, рак толстой кишки ("Sonic Hedgehog-dependent proliferationof Sciences of the United States of America; 104 (14): 5895-900), немелкоклеточный рак легких (NSCLC)hedgehog signaling in chondrosarcoma up-regulates tumor cell proliferation", Tiet T.D., Hopyan S., Nadesan P.,et al. (2006), American Journal of Pathology; 168 (1): 321-30). Показано, что ингибиторы пути Hedgehog (например, циклопамин) применимы для лечения псориазаdecreased neurofibromin expression", Endo H., Momota Y., Oikawa A., Shinkai H.). Злокачественная лимфома (ML) включает клетки лимфатической системы и занимает пятое место среди самых распространенных видов рака в США. ML включает болезнь Ходжкина, а также неходжкинские болезни, которые образуют гетерогенную группу лимфоидных пролиферативных заболеваний. Неходжкинские лимфомы составляют примерно 14% от всех случаев злокачественных лимфом. Неходжкинские лимфомы образуют разнородную группу злокачественных заболеваний преимущественно Вклеточного происхождения. Согласно рабочей классификации указанные лимфомы подразделяют на низко-, средне- и высокодифференцированные лимфомы в зависимости от течения болезни (см. "TheNon-Hodgkin's Lymphoma Pathologic Classification Project", Cancer 49: 2112-2135, 1982). Низкодифференцированные лимфомы развиваются медленно, средний срок выживания от 5 до 10 лет (Horning и Rosenberg,N. Engl. J. Med. 311: 1471-1475, 1984). Несмотря на то, что химиотерапия приводит к ремиссии в большинстве случаев медленно развивающихся лимфом, случаи излечения наблюдаются редко, и у большинства пациентов со временем снова развивается заболевание, в связи с этим возникает потребность в дальнейшем лечении. Средне- и высокодифференцированные лимфомы являются более агрессивными опухолями, но в большей степени поддаются лечению химиотерапевтическими средствами. Однако у значительной части пациентов со временем снова развивается заболевание и возникает потребность в дальнейшем лечении. Множественная миелома (MM) является злокачественной опухолью, состоящей из плазматических клеток такого типа, которые обычно находятся в костном мозге. Эти злокачественные плазматические клетки накапливаются в костном мозге и обычно продуцируют моноклональные молекулы IgG или IgA. Злокачественные плазматические клетки возвращаются в костный мозг и размножаются в нем, вызывая анемию и подавление иммунитета вследствие нарушения нормального кроветворения. У индивидуумов,страдающих от множественной миеломы, часто наблюдается анемия, остеолитические повреждения, почечная недостаточность, гиперкальциемия и рецидивирующие бактериальные инфекции. MM занимает второе место среди наиболее распространенных злокачественных заболеваний кроветворной системы. Настоящее изобретение частично основано на открытии авторов изобретения, свидетельствующем о том, что развитие лимфомных и множественных миеломных заболеваний зависит от пути передачи сигнала Hedgehog (Hh), как было установлено с использованием лимфомных и плазмоцитомных клеток,выделенных из тканей трансгенных мышей линии Е-Мус и мышей, лишенных Cdkn2a. Полученные результаты свидетельствовали о том, что лиганды Hedgehog опосредуют взаимодействие между стромальными и лимфомными клетками. Аналогичные результаты были получены с использованием клеток лимфомы и множественной миеломы из образцов клеток пациентов, выделенных из кости (множественная миелома) или лимфатических узлов, костного мозга или селезенок пациентов с диагнозом неходжкинской лимфомы (NHL), а также из клеток при хроническом лимфоцитарном лейкозе (CLL). Кроме того, было установлено, что подавление пути передачи сигнала Hh вызывает апоптоз стромозависимых лимфомных клеток и что сверхэкспрессия компонентов пути Hedgehog подавляет вызванный циклопамином апоптоз лимфомных клеток in vitro. Кроме того, авторами было неожиданно установлено, что лечение мышей ингибиторами пути Hedgehog предотвращает распространение лимфомы in vivo. Наконец, авторами изобретения было неожиданно установлено, что экспрессия Gli3 в В-клетках селезенки и в большинстве случаев циклопамин-чувствительных лимфом отсутствует, но является характерным признаком во всех случаях резистентных к циклопамину лимфом. Эти данные показывают, что путь передачи сигнала Hh передает важный антиапоптотический сигнал на начальных стадиях трансформации под действием c-Myc и играет важную роль в поддержании лимфомы. Таким образом, прерывание пути передачи сигнала Hh является новым средством лечения лимфом(например, неходжкинской лимфомы), множественных миелом, CLL и других злокачественных заболеваний кроветворной системы. Кроме того, экспрессия Gli3 в лимфомах является фактором неблагоприятного прогноза для чувствительности к ингибированию Hh и важным показателем для стратификации пациентов. В связи с этими открытиями настоящее изобретение относится к способу подавления роста опухолевых клеток, например лимфомных и миеломных клеток. Настоящее изобретение относится к способам и композициям, предназначенным для лечения лимфомы и миеломы у субъекта путем подавления роста опухолевых клеток. Эти способы также можно использовать для предупреждения онкогенеза у субъекта. Некоторые способы предназначены для лечения лимфом, при которых не наблюдается существенной экспрессии Gli3 по сравнению с В-клетками селезенки. Способы включают введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, фармацевтической композиции, содержащей антагонистический агент пути передачи сигнала Hh (например, соединение формулы I). Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, снижает уровень в клетках или ингибирует биологическую активность компонента пути передачи сигнала Hh. Настоящее изобретение относится к способам профилактики или лечения онкологических заболеваний крови и лимфатической системы, включая лимфомы, лейкозы и миеломы. В этих способах используют антагонист пути передачи сигнала Hedgehog для подавления роста и пролиферации лимфомных клеток, лейкозных клеток или миеломных клеток. Лимфома является злокачественной опухолью лимфобластов, образующихся из лимфоцитов В. Миелома является злокачественной опухолью, состоящей из плазматических клеток такого типа,которые обычно находятся в костном мозге. Лейкоз является острым или хроническим заболеванием,затрагивающим кроветворные органы. Неходжкинские лимфомы характеризуются аномальным увеличением количества лейкоцитов в тканях организма, с соответствующим увеличением количества лейкоцитов в кровотоке или без него, и указанные лимфомы подразделяются на группы в зависимости от типа в наибольшей степени участвующих лейкоцитов. Например, субъектов, страдающих от лимфомы или входящих в группу риска развития лимфомы(например, В-клеточной лимфомы, плазмобластомы, плазмоцитомы или CLL), можно лечить способами,предлагаемыми в настоящем изобретении. Субъектом предпочтительно является человек. Способы включают введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I в эффективном количестве для ингибирования пути передачи сигнала Hedgehog. Субъектом является пациент, у которого диагностирован лимфома, сопровождающаяся или не сопровождающаяся метастазированием на любой стадии заболевания (например, стадии от I до IV согласно системе классификации стадии заболевания Ann Arbor Staging System). Лимфомы, поддающиеся лечению способом, предлагаемым в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими, болезнь Ходжкина и неходжкинскую лимфому. Болезнь Ходжкина является злокачественным нарушением лимфоидной ткани (лимфо- 14020710 мой) человека, которое, видимо, сначала развивается в отдельном лимфатическом узле и постепенно распространяется в селезенке, печени и костном мозге. Оно развивается преимущественно у индивидуумов в возрасте от 15 до 35 лет и характеризуется прогрессивным, безболезненным увеличением лимфатических узлов, селезенки и основной лимфоидной ткани. Классическую болезнь Ходжкина подразделяют на четыре подтипа: (1) атеросклерозная болезнь Ходжкина, (2) болезнь Ходжкина со смешанным типом клеток, (3) болезнь Ходжкина, сопровождающаяся лимфопенией, и (4) классическая болезнь Ходжкина с повышенным содержанием лимфоцитов. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения способы можно использовать для лечения неходжкинской лимфомы. Неходжкинскую болезнь также называют лимфосаркомой и относят к группе лимфом, которые по важным признакам отличаются от болезни Ходжкина и классифицируются по внешнему виду раковых клеток под микроскопом. Неходжкинская лимфома включает, но не ограничивается только ими: (1) медленно развивающиеся лимфомы и лимфоидные лейкозы (например, хронический лимфоцитарный лейкоз, мелкоклеточный лимфоцитарный лейкоз, лимфоплазмоцитоидную лимфому, лимфому клеток центрального фолликула, мелкоклеточную лимфому с расщепленными ядрами, лимфому со смешанными клетками фолликула, В-клеточную лимфому краевой зоны, волосатоклеточный лейкоз, плазмоцитому, миелому, крупноклеточный гранулярный лейкоз, фунгоидный микоз, синдром Сезари); (2) лимфомы средней агрессивности и лимфоидные лейкозы (например, пролимфоцитарный лейкоз, лимфому клеток мантийной зоны, лимфому центра фолликула, лимфому фолликула мелкоклеточную с расщепленными ядрами, хронический лимфоцитарный лейкоз/пролимфоцитарный лейкоз, лимфангиому, ангиоиммунобластную лимфому), (3) агрессивные лимфомы (например, В-крупноклеточную лимфому, периферическую Т-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому кишечника, анаплазированную крупноклеточную лимфому), и (4) высокоагрессивные лимфомы и лимфоидные лейкозы (например, В-лимфобластомный лейкоз/лимфому предшественников В-клеток, лимфому Беркитта, высокодифференцированную В-клеточную лимфому, Т-клеточный лимфобластный лейкоз/ лимфому предшественников Т-клеток, подобные лимфоме Беркитта). Способы, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для лечения лимфом как взрослых, так и детей, а также на любой стадии лимфомы, например на стадии I, II, III или IV. Способы, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно использовать для лечения других форм лейкоза, например острого лимфоцитарного лейкоза (ALL). Некоторые способы лечения, предлагаемые в настоящем изобретении, прежде всего, предназначены для лечения лимфом или миелом, при которых отсутствует экспрессия Gli3. Как описано ниже в примерах, было установлено, что в то время, как Gli1 и Gli2 экспрессируются во всех типах лимфом, детектируемая экспрессия Gli3 была выявлена преимущественно в лимфомах, нечувствительных к ингибированию пути Hh циклопамином. Экспрессия Gli3 не наблюдается в нормальных В-клетках селезенки в большинстве чувствительных к циклопамину лимфом. Следовательно, перед лечением антагонистамиHh субъектов, страдающих от лимфом, сначала следует провести анализ на наличие экспрессии Gli3 в образце лимфомных клеток, выделенных из ткани субъекта. Уровень экспрессии Gli3 в образце сравнивают с уровнем экспрессии Gli3 в нормальных В-клетках селезенки, выделенных из ткани субъекта. Уровни экспрессии Gli3 в образцах лимфомы или миеломы, а также в контрольных клетках определяют стандартным методом анализа, например, как описано ниже в примерах. Сходную чувствительность к лечению антагонистами Hh, описанными в настоящем изобретении, определяют по отсутствию детектируемой экспрессии Gli3 в образцах лимфом или миелом, или если выявлен незначительный уровень экспрессии в образцах (например, не превышающий 25, 50 или 100%) по сравнению с уровнем экспрессииGli3 в нормальных В-клетках. Указанный предварительный анализ на отсутствие экспрессии Gli3 не является дополнительной стадией способа лечения, предлагаемого в настоящем изобретении, и такой анализ можно независимо использовать для стратификации пациентов. Описанные выше способы и композиции можно использовать для лечения не только лимфом, но и миелом. Множественная миелома является летальной опухолью и характеризуется накоплением клона плазматических клеток, которое в большинстве случаев сопровождается секрецией цепей Ig. Инвазия опухоли в костный мозг связана с анемией, гипогаммаглобулинемией и гранулоцитопенией с сопутствующими бактериальными инфекциями. Присутствие в среде аномальных цитокинов, а главным образом, повышенные уровни IL-6 и IL-1, часто приводят к остеоклазии повышенной степени, вызывающей костные боли, переломы и гиперкальциемию. Несмотря на активную химиотерапию и трансплантацию,множественная миелома всегда является летальным плазматическим пролиферативным нарушением. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения нарушений, связанных с путем Hedgehog, таких как синдром базально-клеточного невуса (другое название синдром Горлина и/или невоидная базально-клеточная карцинома), редкий генетический аутосомно-доминантный онкологический синдром. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения базальноклеточной карциномы (BCC или канкроид кожи), опухоли надпочечников, развивающейся в корковом или мозговом слое медуллы надпочечников и опухоли яичников. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения нарушений, связанных с избыточным ростом костной ткани, включая, но не ограничиваясь только ими, акромегалию, макроцефалию, синдром Сотоса, прогрессирующую диафизарную дисплазию (PDD или болезнь Камурати- 15020710 Энгельманна), краниодиафизарную дисплазию и внутрикостный гиперостоз, включая болезнь Ван Бюхема (типы I и II) и рубцевание ткани. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения нежелательного роста волос, например волосяного невуса и в косметических целях для предотвращения повторного роста волос после эпиляции. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы для лечения фиброза печени. Таким образом, способы, предлагаемые в настоящем изобретении, включают применение соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, которые проявляют антагонистическую активность по отношению к подавлению Ptc пути передачи сигнала Hedgehog, например, за счет ингибирования активации компонентов Smoothened или компонентов следующего каскада пути передачи сигнала за счет регуляции регенерации и/или функциональной эффективности широкого спектра клеток, тканей или органов,включая нормальные клетки, ткани и органы, а также клетки, ткани и органы, характеризующиеся фенотипом с потерей функции Ptc, усилением функции Hedgehog, усилением функции Smoothened или усилением функции Gli. Например, способ можно использовать для лечения и косметических процедур,включая регуляцию активности нервных тканей, формирование и регенерацию костной и хрящевой ткани, регуляцию сперматогенеза, регуляцию доброкачественной гиперплазии предстательной железы, регуляцию образования кровеносных сосудов при влажной форме дегенерации желтого пятна, псориаз,регуляцию гладкой мускулатуры, регуляцию легких, печени и других органов, развивающихся из архэнтерона, регуляцию кроветворной функции, регуляцию роста кожи и волос. Кроме того, способы, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать при обработке клеток, полученных в культуре (invitro) или клеток из целого организма животного (in vivo). В соответствии с приведенным выше настоящее изобретение также относится к способу предупреждения или лечения любых описанных выше заболеваний или нарушений у субъекта, нуждающегося в таком лечении, и указанный способ включает введение указанному субъекту соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в терапевтически эффективном количестве (см. ниже раздел"Введение и фармацевтические композиции"). Для любого указанного выше применения требуемую дозировку изменяют в зависимости от способа введения, конкретного подвергающегося лечению патологического состояния и необходимого эффекта. Введение и фармацевтические композиции Обычно соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, вводят в состав фармацевтических композиций в терапевтически эффективных количествах по любому из обычных и применимых путей,известных в данной области техники, по отдельности или в комбинации с одним или большим количеством терапевтических средств. Терапевтически эффективное количество может значительно меняться в зависимости от тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, активности использующегося соединения и других факторов. Обычно указывают, что удовлетворительные результаты наблюдаются при системном введении в суточных дозах, составляющих примерно от 0,03 до 2,5 мг/кг массы тела. Показанная суточная доза для более крупного млекопитающего, например человека, находится в диапазоне от примерно 0,5 до примерно 100 мг, и ее обычно вводят, например, в виде разделенных доз до 4 раз в сутки или в форме пролонгированного действия. Подходящие для перорального введения разовые дозированные формы содержат примерно от 1 до 50 мг активного ингредиента. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в виде фармацевтических композиций любым обычным путем, в частности энтерально, например перорально, например в виде таблеток или капсул, или парентерально, например в виде растворов или суспензий для инъекций, местно, например в виде лосьонов, гелей, мазей или кремов, или в назальной форме, или в форме суппозитория. К фармацевтическим композициям, включающим соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем можно изготовить обычным образом по технологиям смешивания, гранулирования или нанесения покрытий. Например, композиции для перорального введения могут представлять собой таблетки или желатиновые капсулы, включающие активный ингредиент совместно с а) разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом,сорбитом, целлюлозой и/или глицином; b) смазывающими веществами, например диоксидом кремния,тальком, стеариновой кислотой, ее магниевой или кальциевой солью и/или полиэтиленгликолем; для таблеток также со с) связующими, например алюмосиликатом магния, крахмальной пастой, желатином,трагакантовой камедью, метилцеллюлозой, натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидоном; при необходимости с d) веществами, обеспечивающими распадаемость, например крахмалами, агаром, альгиновой кислотой или ее натриевой солью, или шипучими смесями; и/или е) абсорбентами, красителями, вкусовыми добавками и подсластителями. Композиции для инъекций могут представлять собой водные изотонические раствор или суспензии, и суппозитории можно приготовить из эмульсий или суспензий жирных веществ. Композиции могут быть стерилизованы и/или могут содержать вспомогательные вещества, такие как консервирующие, стабилизирующие или эмульгирующие агенты, способствующие растворению вещества, соли для регулирования осмотического давления и/или буферы. Кроме того, они также могут содержать другие терапевтически полезные вещества. Композиции, подходящие для чрескожного введения, включают терапевтически эффективное количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, с носителем. Предпочтительные носители включают впитывающиеся фармакологически приемлемые растворители, предназначенные для содействия прохождению через кожу пациента. Например,чрескожные устройства представляют собой повязку, включающую изнаночный слой, резервуар, содержащий соединение необязательно с носителями, необязательно регулирующий скорость барьерный элемент для доставки соединения в кожу пациента с регулируемой и заранее заданной скоростью в течение продолжительного периода времени и средства для закрепления устройства на коже. Также можно использовать матричные чрескожные препараты. Композиции, подходящие для местного введения, например, на кожу или в глаза, предпочтительно представляют собой водные растворы, мази, кремы или гели,хорошо известные в данной области техники. Они могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы,средства, усиливающие тоничность, буферы и консерванты. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в терапевтически эффективных количествах в комбинации с одним или большим количеством терапевтических средств (фармацевтические комбинации). Например, синергетический эффект может проявляться при использовании иммуномодулирующих, противовоспалительных, других противоопухолевых терапевтических средств, химиотерапевтических средств, абляции или других терапевтических гормонов, противоопухолевых средств и/или моноклональных антител, применимых против лимфом или миелом. Некоторые из хорошо известных противораковых лекарственных средств описаны в данной области техники, например, Cancer Therapeutics:Pharmacological Basis of Therapeutics, Hardman et al. (Eds.), McGraw-Hill Professional (10th ed., 2001). Примеры подходящих противораковых лекарственных средств включают 5-фторурацил, винбластинсульфат, эстрамустинфосфат, сурамин и стронций-89. Примеры подходящих химиотерапевтических средств включают аспарагиназу, блеомицинсульфат, цисплатин, цитарабин, флударабинфосфат, митомицин и стрептозоцин. Когда соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, вводят совместно с другими средствами, разумеется, дозы вводимых совместно соединений будут меняться в зависимости от типа используемого совместно лекарственного средства, конкретного используемого лекарственного средства, подвергающегося лечению патологического состояния и т.п. Способы получения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении Типичные примеры синтеза соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, например соединений формулы (I), приведены в настоящей заявке в разделе "Примеры". Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, можно получить в виде фармацевтически приемлемой соли присоединения с кислотой по реакции свободного основания соединения с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой. Альтернативно, фармацевтически приемлемую соль присоединения с основанием соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, можно получить по реакции соединения в форме свободной кислоты с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Альтернативно, соли соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить с использованием солей исходных веществ или промежуточных продуктов. Свободные кислоты или свободные основания соединений, предлагаемых в настоящем изобретении,можно получить из соответствующей молекулярной соли с основанием или кислотой, соответственно. Например, соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в виде соли присоединения с кислотой можно превратить в соответствующее свободное основание путем обработки подходящим основанием(например, раствором гидроксида аммония, гидроксида натрия и т.п.). Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в виде соли присоединения с основанием можно превратить в соответствующую свободную кислоту путем обработки подходящей кислотой (например, хлористо-водородной кислотой и т.п.). Пролекарственные производные соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить по методикам, известным специалистам с общей подготовкой в данной области техники (дополнительные подробности см., например, в публикации Saulnier et al., (1994), Bioorganic and MedicinalChemistry Letters, Vol. 4, p. 1985). Содержащие защитные группы производные соединений, предлагаемых в настоящем изобретении,можно получить по методикам, известным специалистам с общей подготовкой в данной области техники. Подробное описание методик, применимых для введения защитных групп и их удаления, приведено в публикации Т.W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно легко получить или образовать при осуществлении способа, предлагаемого в настоящем изобретении, в виде сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно легко получить путем перекристаллизации из водной/органической смеси растворителей с использованием таких органических растворителей, как диоксан, тетрагидрофуран или метанол. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно получить в виде своих индивидуальных стереоизомеров по реакции рацемической смеси соединения с оптически активным разделяющим реагентом с образованием пары диастереоизомерных соединений, с последующим разделением диасте- 17020710 реоизомеров и выделением оптически чистых энантиомеров. Хотя разделение энантиомеров можно выполнять с использованием ковалентных диастереоизомерных производных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, предпочтительными являются диссоциирующие комплексы (например, кристаллические диастереоизомерные соли). Диастереоизомеры обладают неодинаковыми физическими характеристиками (например, температурами кипения, температурами плавления, растворимостями, реакционной способностью и т.п.), и их можно легко разделить с учетом этих различий. Диастереоизомеры можно разделить с помощью хроматографии или предпочтительно по методикам разделения/выделения,основанным на различии растворимостей. Затем выделяют оптически чистый энантиомер вместе с разделяющим реагентом с помощью любой пригодной методики, не приводящей к рацемизации. Более подробное описание методик, применимых для выделения стереоизомеров соединений из их рацемической смеси, приведено в публикации Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates иResolutions", John Wiley And Sons, Inc., 1981. Примеры Настоящее изобретение дополнительно поясняется, но не ограничивается приведенными ниже типичными примерами, которые предназначены для иллюстрации настоящего изобретения, и их не следует рассматривать как ограничивающие. Структуру конечных продуктов, описанных в настоящем изобретении, подтверждают с помощью стандартных аналитических методик, например с помощью спектрометрических и спектроскопических методик (например, МС и ЯМР). Использованные аббревиатуры являются такими, как принято в данной области техники. Очистку соединений проводят с помощью стандартных методик, например с помощью кристаллизации, флэш-хроматографии или ВЭЖХ с обращенной фазой. В примерах используют следующие аббревиатуры: БИНАФ - -(1,1'-бинафталин-2-2'диил)бис(дифенилфосфин); ДАТС - диэтиламинотрифторид серы; Deoxofluor - бис-(2-метоксиэтил)аминотрифторид серы; ДХМ - дихлорметан; Ди-tbu X-Phos - 2-(ди-трет-бутилфосфино)-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил; ДИЭА - диэтиламин; ДИПЭА - диизопропилэтиламин; ДМФ - диметилформамид; ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография; МСВР - масс-спектрометрия высокого разрешения; HATU 1-[бис-(диметиламино)метилен]-1 Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксидгексафторфосфат; HBTU О-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат; HOBt - 1-гидрокси-1 Н-бензотриазол;HMDS - гексаметилдисилазан; МС - масс-спектрометрия; NBS - N-бромсукцинимид; NMM - N-метилморфолин; NMO - N-метилморфолин-N-оксид; NMP - N-метилпирролидин; ЯМР - ядерный магнитный резонанс; ДН - данных нет; НО - не определено; КТ - комнатная температура; SEM - 2-(триметилсилил)этоксиметил; ТФК - трифторуксусная кислота; ТГФ - тетрагидрофуран; X-Phos - 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил. Синтез соединений Пиридазинариловые простые эфиры и анилины. Как показано на схеме 1, соединения формулы Ia можно получить из промежуточных продуктовIIIa (получение описано на схеме 6), которые можно ввести в реакцию с фенолом или анилином посредством прямого термического нуклеофильного замещения или катализируемого палладием нуклеофильного замещения. Соединения Ia можно превратить в другие соединения примеров путем преобразования функциональной группы R". Схема 1 Синтез соединений примеров 1-5. Пример 1. Метиловый эфир (R)-4-(4,5-диметил-6-феноксипиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты. К раствору метилового эфира (R)-4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (соединение 54, 40 мг, 0,106 ммоля) в 2 мл толуола в колбе с двойными стенками с винтовой пробкой добавляют фенол (45 мг, 0,48 ммоля), фосфат калия(40,6 мг, 0,19 ммоля) и ди-tbu-X-Phos (5,3 мг, 0,014 ммоля). Колбу откачивают и продувают азотом, затем добавляют ацетат паладия(II) (2 мг, 0,01 ммоля). Реакционную смесь повторно продувают азотом и на- 18020710 гревают при 100 С в течение 16 ч. Смесь фильтруют через целит и фильтрат концентрируют и получают коричневое масло. Неочищенный продукт очищают с помощью ВЭЖХ при элюировании смесью 15-95% ацетонитрила в воде (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH) и получают искомый продукт в виде белого твердого вещества (9 мг, 22%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6 (диметилсульфоксид)= 8,69 (s, 1H), 8,39 (s, 1 Н), 7,40 (t, J=7,5 Гц,2 Н), 7,19 (t, J=7,5 Гц, 1 Н), 7,10 (d, J=7,5 Гц, 2 Н), 4,84-4,82 (m, 1 Н), 4,42-4,38 (m, 1H), 3,81 (s, 3 Н), 3,453,25 (m, 3 Н), 3,02-2,99 (m, 1H), 2,93-2,86 (m, 1 Н), 2,35 (s, 3 Н), 2,26 (s, 3 Н), 1,36 (d, J=6,6 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 435,2157, рассчитано 435,2145. Пример 2. 2-[(R)-4-(4,5-Диметил-6-феноксипиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-ил]пропан-2-ол. К раствору метилового эфира (R)-4-(4,5-диметил-6-феноксипиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро 2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (98 мг, 0,226 ммоля) в 2 мл безводного ТГФ в колбе с двойными стенками с мембраной при -78 С в атмосфере азота добавляют 3 М метилмагнийбромид (600 мкл,1,8 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при -78 С в течение 1,5 ч и затем нагревают до 0 С и перемешивают в течение еще 2 ч. Реакцию останавливают насыщенным водным раствором NH4Cl при-78 С и разбавляют с помощью ДХМ. Органический раствор промывают рассолом, сушат над Na2SO4 и концентрируют и получают неочищенное вещество. Полученное твердое вещество очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрила в воде (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяют и сушат вымораживанием и получают белое твердое вещество (58 мг, 59%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,33 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,41 (t, J=7,6 Гц, 2 Н), 7,20 (t, J=7,6 Гц,1 Н), 7,11 (d, J=7,6 Гц, 2 Н), 5,09 (s, 1H), 4,64 (m, 1H), 4,16-4,13 (m, 1 Н), 3,44-3,41 (m, 2 Н), 3,02-2,99 (m,1H), 2,89-2,85 (m, 1 Н), 2,34 (s, 3 Н), 2,25 (s, 3H), 1,41 (s, 6H), 1,28 (d, J=6,6 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 435,2508, рассчитано 435,2508. Пример 3. Метиловый эфир (R)-4-(4,5-диметил-6-фениламинопиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты. К метиловому эфиру (R)-4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (соединение 54, 250 мг, 0,663 ммоля) в пробирке для микроволновой печи добавляют анилин (2,4 мл, 26,5 ммоля). Реакционную смесь нагревают при 190 С в течение 30 мин в микроволновом реакторе. Реакционную смесь загружают в силикагель и очищают с помощью флэш-хроматографии при элюировании смесью 50-100% EtOAc:гептан в количестве, равном 6 объемам колонки, затем с помощью 3-10% MeOH в ДХМ. Соединения примеров 3 и 4 собирают и концентрируют и получают белые твердые вещества. Пример 3: 130 мг, 45%. 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 8,83 (s, 1 Н), 8,16 (s, 1H), 7,41-7,32 (m, 4H), 7,14-7,10 (m, 1H), 4,79-4,77 К раствору метилового эфира (R)-4-(4,5-диметил-6-фениламинопиридазин-3-ил)-2-метил-3,4,5,6 тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (пример 3, 360 мг, 0,14 ммоля) в 2 мл безводного ТГФ в колбе с двойными стенками с мембраной при -78 С в атмосфере азота добавляют 3 М метилмагнийбромид (554 мкл, 1,7 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при -78 С в течение 1,5 ч, затем нагревают до 0 С и перемешивают в течение еще 1 ч. Реакцию останавливают насыщенным водным раствором NH4Cl при -78 С и разбавляют с помощью ДХМ. Органический раствор промывают рассолом,сушат над Na2SO4 и концентрируют и получают неочищенное вещество. Полученное твердое вещество очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрила в воде (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяют и сушат вымораживанием и получают белое твердое вещество (25 мг, 42%). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 8,25 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,49 (d, J=7,5 Гц, 2H), 7,31 (t, J=7,5 Гц, 2H),7,02 (t, J=7,5 Гц, 1H), 6,59 (b, 1H), 4,63-4,61 (m, 1H), 4,16-4,12 (m, 1H), 3,44-3,09 (m, 5H), 2,36 (s, 3H), 2,18(s, 3H), 1,56 (s, 6H), 1,39 (d, J=7,1 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 434,2667, рассчитано 434,2668. Арилпиридазины. Как показано на схеме 2, соединения формулы Ib можно получить, например, путем замещения хлора в 1,4-дихлорпиридазине II на пиперазин с получением промежуточных продуктов III, которые вводят в реакцию сочетания Судзуки с бороновой кислотой или эфиром, и получают соединения IV. Нуклеофильное ароматическое замещение, например, арилхлоридами в щелочной среде дает соединения примеров Ib (путь А). Альтернативно, промежуточные продукты II можно ввести в реакцию с замещенными аминами и получить соединения IIIa, которые являются субстратами для реакций сочетания Судзуки с бороновыми кислотами или эфирами, с получением соединений примеров Ib (путь В, X=N, CH). Соединения Ib можно превратить в другие соединения примеров путем преобразования функциональной группы R", например путем гидролиза сложного эфира образования амида или присоединения реагента Гриньяра к сложноэфирным группам. Схема 2 В круглодонную колбу добавляют 3-хлор-4,5-диметил-6-R)-3-метилпиперазин-1-ил)пиридазин(500 мг, 2,07 ммоля), 4-фторфенилбороновую кислоту (580 мг, 4,15 ммоля), карбонат натрия (440 мг,4,15 ммоля), толуол (16 мл) и воду (8 мл). Реакционную смесь продувают азотом в течение 20 мин. Добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (50 мг, 0,103 ммоля) и смесь нагревают при 110 С в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрируют и подвергают распределению между этилацетатом и водой. Ее дважды экстрагируют этилацетатом и объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Ее очищают с помощью колоночной хроматографии (0-25% метанол/метиленхлорид) и получают 480 мг 3-(4-фторфенил)-4,5-диметил-6-R)-3-метилпиперазин-1-ил)пиридазина (83%). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 7,34-7,49 (m, 2 Н), 7,07 (t, J=8,8 Гц, 2 Н), 3,35 (m, 2 Н), 2,84-3,13 (m,4 Н), 2,63 (dd, J=12,0 Гц, 10,0 Гц, 1 Н), 2,20 (s, 3 Н), 2,14 (s, 3 Н), 1,67 (br s, 1H), 1,05 (d, J=6,5 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 301,1824, рассчитано 301,1829. 3-(4-Трифторметилфенил)-4,5-диметил-6-R)-3-метилпиперазин-1-ил)пиридазин (соединение 2). Соединение 2 получают аналогично получению соединения 1. Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 7,69-7,80 (m, 2H), 7,60-7,70 (m, 2H), 3,38-3,52 (m, 3 Н), 2,98-3,22 (m,4H), 2,69-2,83 (m, 1H), 2,30 (s, 3 Н), 2,23 (s, 3 Н), 1,15 (d, J=6,4 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 351,1806, рассчитано 351,1797. 3-Хлор-4,5-диметил-6-[4-(5-трифторметилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]пиридазин (соединение 3). 1 1-(5-Трифторметилпиридин-2-ил)пиперазин (10 г, 43,3 ммоля) объединяют с 3,6-дихлор-4,5-диметилпиридазином (14,4 г, 84,3 ммоля), триэтиламином (8,25 мл) и NMP (40 мл). Реакционную смесь нагревают при 180 С в течение 25 мин и затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (0-8% MeOH/CH2Cl2) и получают искомое соединение (13,2 г, 82%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,48-8,41 (m, 1H), 7,84 (dd, J=9,1 Гц, 2,4 Гц, 1 Н), 7,03 (d, J=9,1 Гц,1 Н), 3,88-3,76 (m, 4 Н), 3,28-3,20 (m, 4 Н), 2,31 (s, 6H). Метиловый эфир 2-[4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]-4-трифторметилпиримидин-5-карбоновой кислоты (соединение 4). В круглодонную колбу добавляют 3-хлор-4,5-диметил-6-пиперазин-1-илпиридазин (1 г, 4,41 ммоля),метиловый эфир 2-хлор-4-трифторметилпиримидин-5-карбоновой кислоты (2,12 г, 8,82 ммоля) и диизопропилэтиламин (2,3 мл, 13,23 ммоля) в растворе в диоксане (9 мл) и перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют и промывают водой и этилацетатом и получают 1,35 г метилового эфира 2-[4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]-4-трифторметилпиримидин-5-карбоновой кислоты (71%). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 8,96 (s, 1 Н), 4,09-4,22 (m, 4H), 3,93 (s, 3 Н), 3,35 (m, 4H), 2,39 (s, 3 Н),2,35 (s, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 431,1206, рассчитано 431,1210. Синтез соединений примеров 6-9 с помощью пути А. Пример 6. Метиловый эфир (R)-4-[6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил]-2-метил-3,4,5,6 тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты. В круглодонной колбе объединяют 3-(4-фторфенил)-4,5-диметил-6-R)-3-метилпиперазин-1-ил)пиридазин (522 мг, 1,73 ммоля), метиловый эфир 5-хлорпиразин-2-карбоновой кислоты (360 мг, 2,07 ммоля),диизопропилэтиламин (900 мкл, 5,19 ммоля) и диоксан (3 мл). Нагревают при 110 С в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии (0-100% этилацетат/гептан градиентный режим). Продукт растирают с ацетонитрилом и получают 480 мг метилового эфира (R)-4-[6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил]-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (63%). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 8,87 (s, 1 Н), 8,21 (s, 1H), 7,46-7,60 (m, 2H), 7,19 (t, J=8,5 Гц, 2H), 4,84 Соединение примера 7 получают аналогично получению соединения примера 6 из соединения примера 2. К раствору соединения примера 7 (0,26 г, 0,53 ммоля) и метанола (10 мл) добавляют 50% водный раствор LiOH (10 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляют. Остаток растворяют в воде и подкисляют с помощью 3 н. HCl примерно до pH 7 и экстрагируют этилацетатом. Содержащий этилацетат слой концентрируют и получают искомое соединение (0,25 г,98%) в виде желтого твердого вещества. 1 Н ЯМР (400 МГц, CD2Cl2)= 8,90 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,81 (d, J=8,0 Гц, 2H), 7,69 (d, J=8,0 Гц, 2H),4,88 (m, 1H), 4,48 (d, J=13,0 Гц, 1H), 3,66 (m, 3H), 3,40 (m, 1H), 3,23 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,53 К раствору соединения примера 6 (0,74 г, 1,31 ммоля) и метанола (10 мл) добавляют гидроксид натрия (100 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляют и остаток растворяют в воде и подкисляют с помощью 3 н. HCl примерно до pH 7 и экстрагируют этилацетатом. Содержащий этилацетат слой концентрируют и получают искомое соединение (0,68 г, 96%) в виде желтого твердого вещества. 1 Н ЯМР (400 МГц, CD2Cl2)= 8,90 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,22 (m, 2H), 4,67 (m, 1H), 4,48(d, J=12,0 Гц, 1H), 3,65 (m, 3H), 3,40 (m, 1H), 3,26 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 1,53 (d, J=6,5 Гц, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 423,1941. Синтез соединений примеров 10-40 с помощью пути В. Общая методика сочетания по Судзуки бороновых кислот с получением пиридизинилхлоридов IIIa. Методика А. В круглодонной колбе объединяют 3-хлорпиридазин (0,268 ммоля), бороновую кислоту (0,537 ммоля) и карбонат натрия (57 мг, 0,537 ммоля) в 1 мл воды и 1,8 мл ТГФ. Реакционную смесь продувают азотом в течение 20 мин, затем добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (10 мг) и нагревают при 110 С в течение 18 ч. Очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием смеси 070% этилацетат/гептан в градиентном режиме. Продукты растирают с метанолом и ацетонитрилом для удаления примесей из искомых продуктов. Методика В. В круглодонной колбе объединяют 3-хлорпиридазин (0,268 ммоля), бороновую кислоту (0,536 ммоля) и карбонат цезия (175 мг, 0,536 ммоля) в 2 мл 1,4-диоксана. Реакционную смесь продувают азотом в течение 1 мин и добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (30 мг, 0,026 ммоля). Нагревают при 115 С в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтруют через целит и концентрируют. Подвергают распределению между этилацетатом и водой, органический слой собирают. Повторно экстрагируют этилацетатом и собирают органические вещества. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют. Вещество растирают с ацетонитрилом, затем перекристаллизовывают из горячего ацетонитрила и получают искомые продукты. Методика С. В сосуде для микроволновой печи объединяют 3-хлорпиридазин (0,080 ммоля), бороновую кислоту(0,096 ммоля), фосфат калия (34 мг, 0,161 ммоля) и X-Phos (1,3 мг) в растворе в н-бутаноле (1,5 мл). Продувают азотом в течение 1 мин и добавляют ацетат палладия (1 мг), затем нагревают в микроволновом реакторе в течение 45 мин при 150 С. Фильтруют и реакционную смесь концентрируют, затем очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (вода/ацетонитрил с добавлением 1% гидроксида аммония) и получают искомые продукты. Методика D. В сосуде для микроволновой печи объединяют 3-хлорпиридазин (0,268 ммоля), бороновую кислоту(0,322 ммоля), фосфат калия (110 мг, 0,537 ммоля) и X-Phos (5 мг) в растворе в н-бутаноле (2,5 мл). Продувают азотом в течение 1 мин и добавляют ацетат палладия (3,5 мг), затем нагревают в микроволновом реакторе в течение 45 мин при 150 С. Фильтруют и реакционную смесь концентрируют. Подвергают распределению между этилацетатом и водой, органический слой собирают. Повторно экстрагируют и органические вещества собирают, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Очищают с помощью колоночной хроматографии с использованием смеси 0-100% этилацетат/гептан в градиентном режиме и получают искомые продукты. Примеры 10-31. В приведенной ниже таблице (табл. 1) приведены примеры соединений, полученных с помощью пути В по общим методикам A-D, описанным выше. Таблица 1 Синтез соединений примеров 32-34 путем присоединения реагента Гриньяра к сложным эфирам. Общая методика присоединения реагента Гриньяра. В круглодонную колбу, охлажденную до -78 С, содержащую раствор сложного эфира (1 ммоль) в безводном ТГФ (4 мл), по каплям добавляют 3 М раствор метилмагнийбромида (8 ммолей) в диэтиловом эфире. Дают нагреться до 0 С и после 20 мин перемешивания реакцию останавливают насыщенным вод- 23020710 ным раствором хлорида аммония. Дважды экстрагируют этилацетатом и собирают органические вещества. Сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Очищают с помощью колоночной хроматографии с использованием смеси 0-100% этилацетат/гептан в градиентном режиме. Продукт растирают с ацетонитрилом и фильтруют и получают 2-пропанол. Примеры 32-34. В приведенной ниже таблице (табл. 2) приведены примеры соединений, полученных по общей методике, описанной выше. Таблица 2 Синтез соединений примеров 35-40 путем образования амида. Общая методика образования амида. Смесь соединения примера 8 (40,0 мг, 0,08 ммоля), HATU (64,0 мг, 0,17 ммоля), диизопропилэтиламина(44,0 мг, 0,34 ммоля), диметилацетамида (1,5 мл) и амина (0,13 ммоля) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 ч. Неочищенный продукт очищают с помощью ВЭЖХ (колонка С 18, ацетонитрил/вода (3% пропанола), 30100%) и получают соединения примеров 35-40 (7482%). Примеры 35-40. В приведенной ниже таблице (табл. 3) приведены примеры соединений, полученных по общей методике, описанной выше. Таблица 3 Пиперидин-4-илпиридазины. Как показано на схеме 3, соединения формулы Ic можно получить по реакциям Судзуки сочетания содержащих защитные группы 1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-бороновых кислот с пиридазинхлоридами V и получить промежуточные продукты VI, которые после удаления защитных групп и нуклеофильного замещения дают промежуточные продукты VII. Гидрирование дает соединения примеров Ic. В круглодонной колбе к раствору 3-бензил-6-хлор-4,5-диметилпиридазина (800 мг, 3,44 ммоля) в 20 мл ДМФ добавляют трет-бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2 Н)карбоксилат (1,3 г, 4,1 ммоля), затем карбонат калия (1,43 г, 10,3 ммоля) и Pd(PPh3)4 (397 мг, 0,344 ммоля). Колбу откачивают и продувают азотом. Реакционную смесь нагревают при 100 С в течение 16 ч. Смесь фильтруют через целит, и фильтрат концентрируют, и получают неочищенное вещество. Смесь очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле при элюировании смесью 3-15% MeOH:ДХМ. Фракции,содержащие искомый продукт, объединяют и концентрируют и получают коричневое твердое вещество К трет-бутиловому эфиру 4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-3,6-дигидро-2 Н-пиридин-1-карбоновой кислоты (170 мг, 0,358 ммоля) добавляют 50% ТФК в ДХМ. Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин и концентрируют и получают 3-бензил-4,5-диметил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4 ил)пиридазин в виде липкого желтого твердого вещества (125 мг, 100%). К раствору 3-бензил-4,5 диметил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиридазина (180 мг, 0,644 ммоля) в диоксане в пробирке для микроволновой печи добавляют метил-5-хлорпиразин-2-карбоксилат (222 мг, 1,29 ммоля) и ТЭА (триэтиламин) (0,45 мл, 3,22 ммоля). Реакционную смесь нагревают в микроволновом реакторе при 160 С в течение 40 мин. Смесь концентрируют и получают коричневое масло и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрил:вода (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяют и сушат вымораживанием и получают белое твердое вещество (80 мг, 30%). МС (m/z, MH+) найдено 416,5, рассчитано 416,2. 3-Бензил-4,5-диметил-6-(1-(5-(трифторметил)пиридин-2-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиридазин (соединение 7). К раствору 3-бензил-4,5-диметил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиридазина (70 мг, 0,175 ммоля) в 2 мл диоксана в пробирке для микроволновой печи добавляют 2-хлор-5-(трифторметил)пиридин (64 мг,0,35 ммоля) и ТЭА (0,122 мл, 0,88 ммоля). Реакционную смесь нагревают в микроволновом реакторе при 160 С в течение 40 мин. Смесь концентрируют и получают коричневое масло и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрил:вода (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяют и сушат вымораживанием и получают белое твердое вещество (33 мг, 42%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,44 (s, 1 Н), 7,83 (dd, J=2,5 Гц, 9,1 Гц, 2 Н), 7,30-7,26 (m, 2 Н), 7,207,16 (m, 3 Н), 6,99-6,97 (d, J=9,1 Гц, 1H), 5,96-5,94 (m, 1 Н), 4,32 (s, 2 Н), 4,27-4,26 (m, 2 Н), 3,97 (t, J=5,6 Гц,- 25020710 2 Н), 2,60-2,58 (m, 2 Н), 2,22 (s, 3 Н), 2,16 (s, 3 Н). МСВР (m/z, MH+) найдено 425,1958, рассчитано 425,1953. Синтез соединений примеров 41-44. Пример 41. Метил-5-(4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)пиперидин-1-ил)пиразин-2-карбоксилат. К раствору метил-5-(4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2 Н)-ил)пиразин 2-карбоксилата (60 мг, 0,144 ммоля) в 20 мл EtOH добавляют 10% Pd-C (77 мг, 72 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере водорода в течение 16 ч. Смесь фильтруют через целит, и фильтрат концентрируют, и получают желтое твердое вещество (60 мг, 100%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,66 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,28-7,26 (m, 2H), 7,19-7,15 (m, 3 Н), 4,67-4,64(30 мг, 0,07 ммоля) в 2 мл безводного ТГФ при -78 С в атмосфере азота добавляют 3 М CH3MgBr (287 мкл,0,862 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при -78 С в течение 1 ч и перемешивают при 0 С в течение еще 1 ч. Реакцию останавливают насыщенным водным раствором хлорида аммония при -78 С и смесь подвергают распределению между ДХМ и рассолом. Органический слой сушат над Na2SO4 и концентрируют и получают коричневое масло. Смесь очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрил:вода (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3%n-PrOH). Оба соединения примеров 42 и 43 собирают в виде белого твердого вещества. Пример 42: 8 мг, 27%. 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,33 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,28-7,24 (m, 2H), 7,19-7,15 (m, 3 Н), 5,08 К раствору 3-бензил-4,5-диметил-6-(1-(5-(трифторметил)пиридин-2-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин 4-ил)пиридазина (20 мг, 0,047 ммоля) в 8 мл EtOH добавляют 10% Pd-C (25 мг, 19 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере водорода в течение 16 ч. Смесь фильтруют через целит, и фильтрат концентрируют, и получают почти белое твердое вещество. Смесь очищают с помощью препаративной ВЭЖХ при элюировании смесью 10-100% ацетонитрил:вода (обе подвижные фазы модифицируют путем добавления 3% n-PrOH). Фракции, содержащие искомый продукт, объединяют и сушат вымораживанием и получают белое твердое вещество (8 мг, 40%). МС (m/z, MH+) найдено 427,4, рассчитано 427,48. Арилацил-, арилгидроксиметил- и арилметилпиридазины. Как показано на схеме 4, дихлорпиридазины II можно ввести в реакцию с арилзамещенным ацетонитрилом и после депротонирования и последующего окисления (например, воздухом) получить арилацилы VIII. Нуклеофильное замещение хлора аминами дает соединения примеров Id, которые затем можно восстановить, например, посредством NaBH4, и получить соединения примеров Ie (путь А). Реакция промежуточных продуктов VIII с пиперазинами дает соединения IX, которые после восстановления по Вольфу-Кижнеру дают промежуточные продукты X, которые после реакции нуклеофильного замещения дают соединения примеров If (путь В). Дополнительные преобразования функциональной группы R" могут дать дополнительные соединения. Соединения примеров Id и Ie путем обмена кислород-фтор также можно превратить в другие соединения, содержащие мостики -CF2- и -CHF- между Ar и пиридазиновым фрагментом. Схема 4 К (R)-1-boc-метилпиперазину (1 г, 5,0 ммоля) в ДМФ (20 мл) добавляют метиловый эфир 5-хлорпиразин-2-карбоновой кислоты (862 мг, 5,0 ммоля) и Na2CO3 (2,1 г, 20,0 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в микроволновом реакторе при 140 С в течение 3 ч. Затем смесь охлаждают до КТ и органический растворитель удаляют в вакууме и в качестве продукта получают коричневое твердое вещество К раствору метилового эфира (R)-2-метил-4-boc-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (2 г, 5,94 ммоля) в MeOH (17 мл) добавляют HCl (4 М в диоксане, 4,5 мл, 18 ммолей). Реакционную смесь перемешивают при 70 С в течение 1 ч. Раствор реакционной смеси концентрируют,растворяют в ДХМ и органический слой промывают с помощью Na2CO3 до установления значения pH равным 8,0. Растворители удаляют при пониженном давлении и получают коричневое масло (1,2 г, 77%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,81 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,22 (d, J=13,1 Гц, 1H), 3,96 К раствору метилового эфира (R)-2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2 Н-[1,2']бипиразинил-5'-карбоновой кислоты (60 мг, 0,24 ммоля) в ТГФ (3 мл) при -78 С добавляют MeMgBr (3 М раствор в Et2O 640 мкл,1,9 ммоля). Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 2 ч. Реакцию останавливают насыщенным водным раствором NH4Cl (3 мл). Дополнительно добавляют воду и смесь экстрагируют с помощьюEtOAc; органический слой промывают с помощью NaHCO3.Очистка неочищенного продукта с помощью ВЭЖХ с использованием ацетонитрила в воде (от 5 до 80% с добавлением 3% 1-пропанола) с детектированием при длине волны, равной 220 нм, дает искомый продукт в виде желтого масла (20 мг, 35%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,30 (s, 1H), 8,10 (s, 1 Н), 5,06 (s, 1H), 4,40 (m, 1H), 3,91 (m, 1 Н),3,98 (m, 2 Н), 2,85 (m, 2 Н), 2,65 (m, 1 Н), 1,40 (s, 6H), 1,13 (d, J=6,6 Гц, 3 Н). МС (m/z, MH+) найдено 237. 3,6-Дихлор-4,5-диметилпиридазин (1,00 г, 5,65 ммоля) и фенилацетонитрил (652 мл, 5,65 ммоля) растворяют в толуоле (17,5 мл), охлаждают до 0 С и добавляют NaHMDS (5,65 мл, 2 М в ТГФ, 11,3 ммоля). Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч, медленно нагревают от 0 С до КТ. Смесь энергично перемешивают на открытом воздухе в течение еще 24 ч. Реакцию останавливают путем добавления водного раствора NaHCO3, слои разделяют и водную фазу экстрагируют с помощью ДХМ. Объединенные органические фазы концентрируют и получают искомое соединение в виде коричневого твердого вещества (1,4 г, количественный выход). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)= 7,82 (m, 2 Н), 7,55 (m, 1 Н), 7,40 (m, 2H), 2,39 (s, 3 Н), 2,28 (s, 3 Н). МС (m/z, MH+) найдено 247,4. По методике, описанной ниже, 3,6-дихлор-4,5-диметилпиридазин (1,00 г, 5,65 ммоля) и 4-пиридилацетонитрилгидрохлорид (1,05 г, 6,79 ммоля) дают искомое соединение в виде белого твердого вещества 3,6-Дихлор-4,5-диметилпиридазин (1,00 г, 5,65 ммоля) в атмосфере N2 добавляют в высушенную в печи круглодонную колбу объемом 250 мл, затем добавляют ТГФ (50 мл) и пиридин-3-илацетонитрил(800 мг, 7,68 ммоля). Реакционную смесь дегазируют потоком N2 в течение 30 мин. Добавляют NaHMDS(14,13 мл, 1,0 М, 14,13 ммоля) и реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч. Затем реакционную смесь переносят в стакан и энергично перемешивают на открытом воздухе в течение нескольких часов. Реакцию останавливают насыщенным раствором бикарбоната натрия и органические вещества экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищают с помощью флэшхроматографии на силикагеле (0-20% метанол в CH2Cl2) и получают искомое соединение (1,3 г, 93%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,97 (s, 1 Н), 8,80 (d, J=4,5 Гц, 1 Н), 8,25 (d, J=8,0 Гц, 1 Н), 7,60-7,64 3,6-Дихлор-4,5-диметилпиридазин (1,00 г, 5,65 ммоля) в атмосфере N2 добавляют в высушенную в печи круглодонную колбу объемом 250 мл, затем добавляют ТГФ (50 мл) и пиридин-2-илацетонитрил(800 мг, 7,68 ммоля). Реакционную смесь дегазируют в течение 30 мин. Добавляют NaHMDS (1,0 М,14,13 мл, 14,13 ммоля) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь переносят в стакан и энергично перемешивают на открытом воздухе в течение нескольких часов. Реакцию останавливают насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органические вещества экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические слои промывают рассолом и сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (0-20% метанол в CH2Cl2) и получают искомое соединение (616 мг, 44%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 8,68 (m, 1 Н), 8,26 (m, 1H), 8,16 (m, 1 Н), 7,76 (m, 1 Н), 2,45 (s, 3 Н),2,21 (s, 3 Н). По методике, описанной ниже, (6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)пиридин-4-илметанон (750 мг,3,03 ммоля) и (R)-2-метилпиперазин (364 мг, 3,63 ммоля) дают искомое соединение в виде бежевого твердого вещества (778 мг, 83%).(485 мг, 4,84 ммоля) добавляют в сосуд для микроволновой печи, затем добавляют NMP (17 мл) и триэтиламин (2,01 мл, 14,49 ммоля). Сосуд герметизируют и облучают в микроволновой печи при 170 С в течение 30 мин. Неочищенное вещество сразу очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле(0-20% метанола в CH2Cl2). Полученное масло выпаривают вместе с CH2Cl2 и гептаном и получают искомое соединение в виде порошкообразного вещества (1350 мг, 90% ). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 9,56 (br s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,84-8,86 (m, 1H), 8,21-8,24 (m, 1 Н), 7,607,63 (m, 1 Н), 3,72 (s, 1 Н), 3,69 (s, 1H), 3,45-3,50 (m, 1 Н), 3,26-3,31 (m, 4 Н), 2,30 (s, 6H), 1,32 (d, J=6,5 Гц, 3 Н).(320 мг, 3,20 ммоля) добавляют в сосуд для микроволновой печи, затем добавляют NMP (6 мл) и триэтиламин (0,92 мл, 6,66 ммоля). Сосуд герметизируют и облучают в микроволновой печи при 180 С в течение 1 ч. Неочищенное вещество сразу очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (2070% метанола в CH2Cl2) и получают искомое соединение (671 мг, 97%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6)= 9,57 (br s, 1 Н), 8,66 (d, J=5,0 Гц, 1 Н), 8,10-8,17 (m, 2 Н), 7,69-7,73 По методике, описанной ниже, [4,5-диметил-6-R)-3-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-ил]пиридин 4-илметанон (550 мг, 1,77 ммоля), гидразинмоногидрат (0,43 мл, 8,84 ммоля) и гранулы KOH (495 мг,8,82 ммоля) дают искомое соединение (372 мг, 71%). 4,5-Диметил-3-R)-3-метилпиперазин-1-ил)-6-пиридин-3-илметилпиридазин (соединение 19).(26 мл) добавляют в круглодонную колбу и реакционную смесь нагревают при 190 С в течение 4 ч. Ре- 29