Промежуточное соединение для получения макроциклических ингибиторов репликации вируса гепатита с и способ его синтеза

ПРОМЕЖУТОЧНОЕ СОЕДИНЕНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ МАКРОЦИКЛИЧЕСКИХ ИНГИБИТОРОВ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСА ГЕПАТИТА С И СПОСОБ ЕГО СИНТЕЗА Настоящее изобретение предлагает соединение формулы (1) и способ его получения Предпосылки создания настоящего изобретения Область техники изобретения Настоящее изобретение относится к соединению формулы (1) и способу его синтеза. Описание уровня техники Вирус гепатита С (ВГС) в США является самой распространенной хронической инфекцией, передаваемой через кровь. Хотя число новых заражений снизилось, количество хронических больных является значительным, и по данным Центров по контролю за заболеваниями в США насчитывает приблизительно 3,9 млн (1,8%) инфицированных человек. Хроническое заболевание печени является десятой в списке лидирующих причин смертности среди взрослых в США, и насчитывает приблизительно 25000 смертей ежегодно или приблизительно 1% от всех смертей. Исследования показывают, что 40% хронических заболеваний печени связаны с вирусом гепатита С, в результате это оценивается приблизительно в 800010000 смертей каждый год. Связанная с вирусом гепатита С конечная стадия заболевания печени является самой частой причиной пересадки печени среди взрослых. За последнюю декаду антивирусная терапия хронического гепатита С динамично развивалась, показывая значительные улучшения в эффективности лечения. Тем не менее, даже при комбинированном лечении, используя интерферон-, конъюгированный с ПЭГ, в сочетании с рибавирином, у 40-50% пациентов лечение не оказывало действия, т.е. у пациентов отмечалось отсутствие лечебного эффекта или рецидив заболевания. Обычно для таких пациентов отсутствовала эффективная альтернатива лечения. В частности, пациенты с запущенным фиброзом или циррозом печени, выявляемые при биопсии, имеют значительный риск развития осложнений запущенных заболеваний печени, включая асцит, желтуху, варикозное кровотечение, энцефалопатию и прогрессирующее нарушение функции печени, также заметно возрастает риск гепатоцеллюлярной карциномы. Широкая распространенность хронической формы вирусной инфекции гепатита С несет серьезные последствия для общественного здравоохранения как отягощение хроническими заболеваниями печени в США в будущем. Данные, полученные в ходе Национального обзора по здоровью и исследованию питания (NHANES III), указывают, что значительное увеличение числа заражений пришлось на конец 60 начало 80 годов, в частности, среди людей в возрасте от 20 до 40 лет. Подсчитано, что количество людей с застарелой формой вирусной инфекции ГС 20 лет и более может увеличиться в четыре раза за промежуток времени с 1990 по 2015 годы с 750000 до свыше 3 млн. Пропорциональное увеличение числа людей, инфицированных в течение 30 или 40 лет, могло быть даже больше. Поскольку риск хронических заболеваний печени, связанных с ВГС, имеет отношение к продолжительности заражения, риск цирроза постепенно увеличивается для людей, инфицированных более чем 20 лет, это приведет в результате к значительному увеличению заболеваний, связанных с циррозом, и смертности среди пациентов, инфицированных между 1965-1985 г. ВГС представляет собой вирус семейства флавивирусов с линейной молекулой РНК положительной полярности. Геном ВГС представлен одноцепочечной молекулой РНК протяженностью около 9500 нуклеотидов и содержит единственную открытую рамку считывания (ORF), несущую информацию о единственном большом полипротеине размером около 3000 аминокислотных остатков. В зараженных клетках этот полипротеин расщепляется на многочисленные участки клеточными и вирусными протеазами с образованием структурных и неструктурных (NS) протеинов вируса. В случае ВГС образование зрелых неструктурных протеинов (NS2, NS3, NS4, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B) осуществляется двумя вирусными протеазами. Первая вирусная протеаза расщепляет связь NS2-NS3 полипротеина. Вторая вирусная протеаза представляет собой сериновую протеазу, содержащую N-концевой участок NS3 (далее именуемую как "NS3 протеаза"). NS3 протеаза опосредует все последующие реакции расщепления на участках ниже положения NS3 в полипротеине (т.е. участках, расположенных между С-окончанием NS3 и Сокончанием полипротеина). NS3 протеаза проявляет активность как в цис-положении при расщеплении участка NS3-NS4, так и в транс-положении для остальных NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, и NS5A-NS5B участков. Считается, что белок NS4A является многофункциональным полипротеином, способствует активности NS3 протеазы и возможно участвует в мембранной локализации NS3 и других вирусных репликазных компонентов. Очевидно,образование комплекса между NS3 и NS4A необходимо для процессов,опосредуемых NS3, и улучшает протеолитическую эффективность на всех участках, распознаваемых(1996), J. Hepatol. 24: 555-563; US Patent No. 5082659; Европейская патентная заявка ЕР 294160; патент США 4806347; Balish et al. (1992), J. Infect. Diseases 166: 1401-1403; Katayama et al. (2001), J. Viralal. (1992), Br. J. Haematol. 81:516-519; Европейская патентная заявка 294160; патент Канады 1321348; Европейская патентная заявка 276120; Wandl et al. (1992), Sem. Oncol. 19: 88-94; Balish etal. (1992), J. Infectious Diseases 166: 1401-1403; Van Dijk et al. (1994), Int. J. Cancer 56: 262-268; Sundmacher et al. (1987) Current Eye Res. 6: 273-276; патенты США 6172046; 6245740; 5824784; 5372808; 5980884; опубликованные международные патентные заявки WO 96/21468; WO 96/11953;Therap. 303: 540-548; Sheppard et al. (2003), Nat. Immunol. 4: 63-68; Chang et al. (1999), Nat. Biotechnol. 17: 793-797; Adolf (1995), Multiple Sclerosis 1 Suppl. 1: S44-S47; Chu et al., Tet. Lett. (1996), 7229-7232; Девятая Конференция по антивирусным исследованиям (Ninth Conference on Antiviral Research), Урабандай,Фукишима, Япония (1996) (Antiviral Research (1996), 30: 1, A23 (реферат 19; Steinkuhler et al., Biochem.,37: 8899-8905; Ingallinella et al., Biochem., 37: 8906-8914. Краткое описание изобретения Настоящее изобретение предлагает соединение формулы (1) Предпочтительный вариант реализации изобретения предлагает способ получения соединения формулы (1), включающий перемешивание соединения (1 а) с О-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'тетраметилурониум тетрафторборатом (TBTU) и N,N-диизопропилэтиламином (DIEA) Подробное описание предпочтительных вариантов реализации Техническая задача, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в обеспечении улучшенного с экономической точки зрения способа синтеза соединений, подходящих для лечения вирусной инфекции гепатита С (HCV), и соединений, полученных согласно такому способу. Вышеуказанная задача была решена авторами настоящего изобретения путем обеспечения соединения формулы (1) и способа его получения. Соединение формулы (1) представляет собой стабильное промежуточное соединение в процессе синтеза лекарственного препарата данопревир, являющегося эффективным против вируса гепатита С. Данопревир представляет собой соединение формулы (2). Авторами настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что приведение соединения формулы (1 а) в контакт, например, с N,N,N',N'-тетраметил-O-(бензотриазол-1-ил)урония тетрафторборатом (TBTU) неожиданным образом приводит к образованию стабильного соединения, содержащего оксазольный фрагмент, т.е. соединения фомулы (1). При этом дальнейшее взаимодействие соединения формулы (1) с циклопропилсульфонамидом, сопровождающееся раскрытием кольца оксазольного фрагмента, приводит к получению соединения формулы (2) - данопревира. Преимуществом данного способа является возможность мониторинга процесса получения соединения формулы (2), что достигается за счет применения соединения формулы (1). Таким образом, используя в качестве интермедиата соединение формулы (1), можно контролировать способ синтеза соединения формулы (2) и реализовать данный способ более эффективно и соответственно с меньшими затратами. Действительно, применение соединения формулы (1) для получения соединения формулы (2) имеет значительные преимущества, поскольку, с одной стороны, позволяет остановить процесс синтеза как только соединение формулы (1) полностью превратилось в конечный продукт реакции и, с другой стороны, препятствует преждевременному завершению процесса, т.е. прекращению протекания указанной реакции, когда остаточные количества соединения формулы (1) все еще присутствуют в реакционной системе, что впоследствии обычно требует дорогостоящих операций по завершению процесса синтеза целевого соединения (в частности, выделения и очистки). Соединение и способ, заявленные в формуле изобретения, позволяют контролировать процесс синтеза ингибиторов протеазы HCV более эффективно,тем самым обеспечивая улучшение указанного процесса с экономической точки зрения. Получение соединения в соответствии с настоящим изобретением Пример 1 (получение азалактона) Способ получения соединения (1). К соединению (1 а) (2.000 г, 3.181 ммоль) (проверен с помощью анализа Карла-Фишера в 20 мл диметилацетамида ДМА после концентрирования в 100 мл толуола) добавили TBTU (1.124 г, 3.499 ммоль) в 250-мл колбе. Затем добавили ДИЭА (плотность 0.742) (1.164 мл, 6.681 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакцию периодически анализировали методом ЖХВД, используя установку с ацетатным способом L35:95. Спустя 1 ч реакция завершилась. После завершения реакции соединение (1) осадили водой, выделили и высушили для аналитической реакции. После высушивания в течение ночи выделили 1.72 г (выход 88.54%) (m/е 610.28 (100.0%),611.28 (36.4%), 612.29 (6.1%), 612.28 (2.0%), 613.29 (1.2%); С, 62.94, Н, 6.44, F, 3.11, N, 9.17, О, 18.34). Дополнительная ссылка относится к Burk, M.J.; Allen, J.G. J. Org. Chem. 1997, 62, 7054, которая приведена в настоящем описании посредством ссылки во всей полноте. Пример 2 (получение и кристаллизация форм в виде солей) Аморфное соединение (2) (49.90 г, 63.92 ммоль) растворили в 700 мл 95:5 EtOAc:MeOH. Полученный раствор отфильтровали через фильтр тонкой очистки (GFF) в 2-литровую 3-горлую круглодонную колбу, снабженную температурным датчиком, верхней мешалкой, нагревающим устройством и боковым горлышком для концентрирования, и затем разбавили 200 мл 95:5 MeOH:EtOAc. Все используемые объемы были основаны на содержании соединения в неочищенном виде, 45 г 20 объемов = всего 900 мл. Добавили метанолят натрия (15.35 мл, 67.12 ммоль). Содержание для эквивалента основания определили сложением содержания измеренной порции с примесью кислоты (соединение (2 = 93.75. Реакционная масса стала из желтой оранжевой после того, как добавили последнее количество NaOMe. Содержание воды определили анализом Карла-Фишера (KF), KF=615 мд. Раствор сконцентрировали дистилляцией. Примерно 315 мл растворителя удалили при внутренней температуре смеси примерно 30 С под вакуумом. KF после концентрирования стал равен 425 м.д. Пока еще раствор оставался теплым, добавили воду (13.82 мл, 767.1 ммоль) и смесь оставили охлаждаться до комнатной температуры. Добавили воду при 43 С. Температура упала до 40 С. После примерно 15 мин перемешивания выпал осадок, сначала выпадение происходило медленно, а потом смесь становилась все более вязкой, что затрудняло перемешивание, но при ускорении перемешивания образовывались тонкие белые пластинки, смесь оставили на всю ночь. Отобрали образец для центрифугирования, фильтрат имел плотность 7 мг/мл, потеря составила все-4 019888 го 4 г. Твердый осадок промыли этилацетатом EtOAc, высушили и проанализировали методом ЖХВД. Содержание кислоты было равно 0.97. Твердое вещество отфильтровали через полипропиленовый фильтр, промыли двумя объемами этилацетата EtOAc (90 мл). После высушивания на воздухе в течение 10 мин осадок перенесли на сушильную пластину и поместили в вакуумную печь на выходные дни при температуре 57 С. Дистиллят проанализировали, потери составили 4.02 г. Вещество было 98.8% чистоты с содержанием кислоты 0.83% (чистота диапазоном %). 4 дня спустя вещество (41.9 грамм) удалили из печи, теоретический выход составил 46.65 г (в пересчете на исходное вещество), выход по массе был равен 90%. Дополнительное количество 2-3% было потеряно при дистилляции из-за встряхивания. Анализ методом ЯМР-спектроскопии показал, что вещество содержало следы этилацетата EtOAc, остаточный анализ растворителя газовой хроматографией выявил этилацетат EtOAc на 3742 мд и этилового спирта EtOH на 1279 мд. Поскольку настоящее изобретение описано со ссылкой на конкретные варианты осуществления изобретения, специалисту в данной области техники будет очевидно, что могут быть выполнены различные изменения и могут быть использованы эквиваленты без отступления от истинной сущности и объема данного изобретения. Кроме того, многие модификации могут быть выполнены для того, чтобы применить данное изобретение к конкретной ситуации, материалу, смеси химически связанных веществ, процессу, стадии или стадиям процесса в целях, сущности и объеме настоящего изобретения. Подразумевается, что все такие модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение формулы (1) 2. Способ получения соединения по п.1, включающий смешивание соединения (1 а) c TBTU и DIEA