Применение ингибиторов ферментов с активностью аминопептидазы n и/или дипептидилпептидазы iv и фармацевтические композиции на их основе для лечения и профилактики дерматологических заболеваний с себоцитарной гиперпролиферацией и измененными дифференцированными состояниями

008745 Изобретение описывает подавление ДНК-синтеза себоцитов, необходимого для пролиферации, путем действия ингибиторов аминопептидазы N (APN, ЕС 3.4.11.2, CD13) или/и дипептидилпептидазы IV(DP IV, ЕС 3.4.14.5, CD26) в результате отдельного, совместного или разделенного по времени, следующего друг за другом введения, смотря по обстоятельствам, специфических ингибиторов этого фермента или ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (APN- или/и DP IV-аналогичной ферментативной активностью) на основе производных аминокислот, пептидов или производных пептидов, посредством которых подавляется пролиферация (синтез ДНК) себоцитов. Ряд дерматологических заболеваний проходит с себоцитарной пролиферацией и измененными дифференцированными состояниями. К ним относятся как доброкачественные фолликулярные гиперпролиферативные состояния (угревая сыпь, фолликулярные реакции в форме угрей, множественная стеатоцистома, невус сальных желез, старческая гипертрофия сальных желез, себорея кожи и волос), так и злокачественные фолликулярные гиперпролиферативные состояния (смешанные опухоли, себациома,опухоли сальных желез, карцинома сальных желез (СА. Пептидазы, такие как дипептидилпептидаза IV и аминопептидаза N, или аналогично действующие ферменты являются особенно интересными для регуляции или модуляции взаимодействия между клетками, так как они, среди прочего, локализованы в клеточной мембране в виде эктоферментов, вступают во взаимодействие с другими внеклеточными структурами, активируют или инактивируют пептидергические транспортные вещества посредством катализируемого ферментами гидролиза и, вследствие этого,важны для взаимодействия клетка/клетка [Yaron A. et al.: Proline-dependent structural and biological properties of peptides and proteins. Crit Rev Biochem Mol Biol 1993; 28: 31-81; Vanhoof G. et al.: Proline motifs inpeptides and their biological processing. FASEB J 1995; 9: 736-744]. Было показано, что в процессе активации и клональной экспансии иммунных клеток, в особенности Т-лимфоцитов, находящиеся в мембране пептидазы как DP IV или APN играют ключевую роль [Fleischer В.: CD26 a surface protease involved in T-cell activation. Immunology Today 1994; 15: 180-184; Lendeckel U.et al.: Role of alanyl aminopeptidase in growth and function of human T-cells. International Journal of Molecular Medicine 1999; 4: 17-27; Riemann D. et al.: CD13 - not just a marker in leukemia typing. Immunology Today 1999; 20: 83-88]. Различные функции митогенно-стимулированных одноядерных клеток MNZ или обогащенных Т-лимфоцитов как синтез ДНК, производство и секреция иммуностимулирующих цитокинов (IL-2, IL-6, IL-12, IFN-) и функции помощника для В-клеток (синтез lgG и lgM) могут подавляться в присутствии специфических ингибиторов DP IV или APN [Schn E. et al.: The dipeptidyl peptidase IV, aRole of alanil aminopeptidase in growth and function of human T cells (Review). Int. J. Mol. Med. 1999; 4: 1727]. Уже известно, что лечение аутоиммунных заболеваний и отторжения трансплантата возможно посредством подавления дипептидилпептидазы IV, локализованной в иммунных клетках, с помощью синтетических ингибиторов (см., например, ЕР 764151 А 1, WO 09529691, ЕР 731789 А 1, ЕР 528858). Изобретение основано на неожиданно обнаруженном факте, что отдельное или одновременное действие ингибиторов дипептидилпептидазы IV/CD26 и аминопептидазы N/CD13 или ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (APN- или/и DP IV-аналогичной ферментативной активностью), экспрессированных на себоцитах или в себоцитах, подавляет пролиферацию (синтез ДНК) этих клеток. Данное изобретение показывает, что для лечения и профилактики дерматологических заболеваний с себоцитарной гиперпролиферацией и измененными дифференцированными состояниями (доброкачественные фолликулярные гиперпролиферативные состояния, такие как угревая сыпь, фолликулярные реакции в форме угрей, множественная стеатоцистома, невус сальных желез, старческая гипертрофия сальных желез, себорея кожи и волос, а также злокачественные фолликулярные гиперпролиферативные состояния, такие как смешанные опухоли, себациома, опухоли сальных желез, карцинома сальных желез),для возникновения которых основное значение имеет пролиферация себоцитов, пригодно применение ингибиторов DP IV и APN, или ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (APN- и/или DP IVаналогичной ферментативной активностью), по отдельности или одновременно, или соответствующих композиций и препаративных готовых форм на их основе. В основном сущность изобретения заключается в том, что синтез ДНК себоцитов существенно ингибируется посредством введения ингибиторов дипептидилпептидазы IV или/и аминопептидазы N. В случае вышеназванных заболеваний до сих пор используются локально или системно антибиотики и/или антипролиферативные и дифференцирующие вещества (антиандрогены, 13-цис-ретиновая кислота и др.). В особенности при системном применении часто проявляются нежелательные побочные-1 008745 эффекты. К ним относятся, среди прочего, тератогения, нарушения липоидного обмена, психореактивные явления, желудочно-кишечные жалобы, а также реакции кожно-слизистого раздражения. Использование ингибиторов DP IV или/и APN при названных заболеваниях было бы совершенно новой, очень эффективной, наиболее экономически выгодной формой лечения и ценной альтернативной составной частью имеющейся терапевтической концепции. Ингибиторы дипептидилпептидазы IV или/и аминопептидазы N, или ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (APN- и/или DP IV-аналогичной ферментативной активностью), используемые согласно изобретению, могут употребляться в фармацевтически используемых комплексных препаративных готовых формах в качестве ингибиторов, субстратов, псевдосубстратов, пептидов и производных пептидов, действующих как ингибиторы, а также в качестве антител этих ферментов. Предпочтительными эффекторами являются, например, для DP IV Xaa-Pro-дипептиды, соответствующие производные, предпочтительно диариловый эфир дипептидфосфоновой кислоты и его соли, дипептидбороновые кислоты (например, Pro-boro-Pro) и их соли, Хаа-Хаа-(Trp)-Pro-(Хаа)n-пептиды (n=010), соответствующие производные и их соли или (Хаа)-амиды аминокислот, соответствующие производные и их соли, причем Хаа обозначает -аминокислоту/иминокислоту или производное аминокислоты/иминокислоты, предпочтительно N-4-нитробензилоксикарбонил-L-лизин, L-пролин, Lтриптофан, L-изолейцин, L-валин, и в качестве амидной структуры выступают циклические амины, например пирролидин, пиперидин, тиазолидин и их производные, производные триптофан-1,2,3,4 тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты (TSL) и/или (2S,2S',2S")-2-[2'-[2"-амино-3"-(индол-3"'-ил)1"-оксопролил]-1',2',3',4'-тетрагидро-6',8'-дигидрокси-7-метоксиизохинол-3-ил-карбониламино]-4-гидрометил-5-гидропентановая кислота (ТМС-2 А). Соединения такого рода и их получение было описано в более раннем патенте (K. Neubert et al. DD 296075 A5). Предпочтительными ингибиторами для аланиламинопептидазы являются бестатин (убенимекс), актинонин, пробестин, фебестин, RB3014 или лейгистин, анастатин, -аминотиолы, -аминофосфиновые кислоты, производные -аминофосфиновых кислот, предпочтительно D-Phe-[PО(ОН)-СН 2]-Phe-Phe и их соли. Ингибиторы или содержащие их фармацевтические композиции используются совместно с известными носителями. Введение осуществляют, с одной стороны, в виде локального нанесения в форме, например, кремов, мазей, паст, гелей, растворов, спреев, липосом и наносом, микстур-болтушек, гидроколлоидных повязок, пластырей и подобных новых субстратов носителей, инъекций в виде струи или других дерматологических основ/индифферентных основ лекарственного препарата, включая применение в форме инстилляции, с другой стороны, системное введение для орального, чрескожного, внутривенного, подкожного, внутрикожного, внутримышечного применения в пригодных рецептурах или в пригодных галеновых средствах. Пример выполнения. Ингибирование синтеза ДНК иммортализированных клеток-себоцитов человека линии SZ95 посредством инкубации с синтетическими ингибиторами DP IV или/и APN. Данное исследование показало, что синтез ДНК иммортализированных клеток-себоцитов человека линии SZ95 (Zouboulis С.С. et al.: Establishment and characterization of an immortalized human sebaceousgland cell line (SZ95). J. Invest. Dermatol. 1999, 113: 1011-1020) посредством введения ингибиторов DP IV(Lys[Z(NO2)]тиазолидида) или/и APN (актинонина) подавляется в зависимости от дозы. Клетки-себоциты человека линии SZ95, используемые в качестве модели клеток при угревой сыпи,сильно проявляли экспрессию DP IV и APN (фиг. 1). Ферментативная активность DP IV живых клеток составляет 3818 pkat/106 клеток, ферментативная активность APN составляет 26258 pkat/106 клеток(n=3). Соответственно этими клетками подтверждается м-РНК-ферментов APN и DP IV (фиг. 2). Клетки SZ95 инкубировали в течение 48 ч с вышеназванными ингибиторами и затем посредством измерения включения 3[Н]-тимидина определяли синтез ДНК, как описано у Райнхольда и др. (ReinholdHa фиг. 2 показано подавление синтеза ДНК в зависимости от дозы. Клетки инкубировали в течение 48 ч с ингибиторами в заданной концентрации. Затем добавляли в питательную среду 3[Н]-метилтимидин и через 6 ч измеряли количество 3[Н]-тимидина, встроенное в ДНК.-2 008745 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение ингибиторов дипептидилпептидазы IV (DP IV) или ингибиторов ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (DP IV-аналогичной ферментативной активностью) в комбинации с ингибиторами аланиламинопептидазы (аминопептидазы N, APN) или ингибиторами ферментов с одинаковой специфичностью субстрата (APN-аналогичной ферментативной активностью) для получения фармацевтических композиций для подавления пролиферации (синтеза ДНК) себоцитов человека. 2. Применение по п.1, где ингибиторами DP IV являются Xaa-Pro-дипептиды (Хаа=-аминокислота или защищенное боковой цепью производное), соответствующие производные, предпочтительно диариловый эфир дипептидфосфоновой кислоты и их соли, дипептидбороновые кислоты (например, Pro-boroPro) и их соли, Хаа-Хаа-(Trp)-Pro-(Хаа)n-пептиды (Хаа=-аминокислота, n=0 до 10), соответствующие производные и их соли, (Хаа)-амиды аминокислот, соответствующие производные и их соли, причем Хаа обозначает -аминокислоту или защищенное боковой цепью производное, предпочтительно N-4 нитробензилоксикарбонил-L-лизин, L-пролин, L-триптофан, L-изолейцин, L-валин, и в качестве амидной структуры выступают циклические амины, например пирролидин, пиперидин, тиазолидин и их производные, производные триптофан-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновой кислоты (TSL) и/или(2S,2S',2S")-2-[2'-[2"-амино-3"-(индол-3"'-ил)-1"-оксопролил]-1',2',3',4'-тетрагидро-6',8'-дигидрокси-7 метоксиизохинол-3-ил-карбониламино]-4-гидрометил-5-гидропентановая кислота (ТМС-2 А). 3. Применение по п.1, где амиды аминокислот, например N-4-нитробензилоксикарбонил-L-лизинтиазолидид, -пирролидид и -пиперидид, а также соответствующее производное 2-цианотиазолидида, 2 цианопирролидида и 2-цианопиперидида используются в качестве ингибиторов DP IV. 4. Применение по одному из пп.1-3, где в качестве ингибиторов APN используются актинонин, лейгистин, фебестин, амастатин, бестатин, RB3014, пробестин, -аминотиолы, -аминофосфиновые кислоты, производные -аминофосфиновых кислот, предпочтительно D-Phe-[PO(ОН)-СН 2]-Phe-Phe и их соли. 5. Применение по одному из пп.1-4 для получения фармацевтических композиций для профилактики и лечения доброкачественных фолликулярных гиперпролиферативных состояний. 6. Применение по одному из пп.1-4 для получения фармацевтических композиций для профилактики и лечения злокачественных фолликулярных гиперпролиферативных состояний. 7. Применение по п.5 для получения фармацевтических композиций для профилактики и лечения угревой сыпи, фолликулярных реакций в форме угрей, множественной стеатоцистомы, невуса сальных желез, старческой гипертрофии сальных желез, себореи кожи и волос, синдрома SAHA [себорея, угревая сыпь, гирсутизм, алопеция]. 8. Применение по п.6 для получения фармацевтических композиций для профилактики и лечения смешанных опухолей, себациомы, сального невуса со злокачественным развитием, опухолей сальных желез, карциномы сальных желез. 9. Применение по одному из пп.1-8, где два или более ингибиторов DP IV, или ингибиторов ферментов с DP IV-аналогичной ферментативной активностью и ингибиторов APN, или ингибиторов ферментов с APN-аналогичной ферментативной активностью применяют в пространственно разделенных препаративных формах в комбинации с известными носителями, вспомогательными веществами и/или добавками для одновременного или по времени следующего непосредственно друг за другом введения с целью совместного действия. 10. Применение по одному из пп.1-9 для системного орального, чрескожного, внутривенного, подкожного, внутрикожного, внутримышечного, ректального, вагинального, подъязычного введения вместе с известными носителями, вспомогательными веществами и/или добавками. 11. Применение по одному из пп.1-9 для локального введения в форме, например, кремов, мазей,паст, гелей, растворов, спреев, липосом и наносом, микстур-болтушек, гидроколлоидных повязок или других дерматологических основ/индифферентных основ лекарственного препарата, включая введение в форме инстилляции.-3 008745 Цитометрическое подтверждение экспрессии DP IV (CD26) и APN (CD13) на клетках SZ95 Фиг. 2 Эффективность ингибиторов DP IV (Lys[Z(NO2)]тиазолидида) и аминопептидазы N (актинонина) на синтез ДНК себоцитов SZ95 человека в зависимости от дозы