S-триазолил-α-меркаптоацетанилиды в качестве ингибитора обратной транскриптазы вич

S-ТРИАЗОЛИЛМЕРКАПТОАЦЕТАНИЛИДЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПТАЗЫ ВИЧ Жирарде Жан-Люк, Кох Юнг-Хио, Де Ла Роза Марта, Гуник Эсмир, Хун Чжи, Лэнг Стенли, Ким Хонг Воо (US) Представитель: Представлены S-триазолилмеркаптоацетанилиды, имеющие общее строение (1), где Q выбран из группы,состоящей из СО 2 Н или его соли, CONR'R" Также представлены соединения следующих формул: где R2 представляет арильный или гетероарильный фрагмент, a Q является С 3-5 циклоалкилом; R4 представляет СООН, -COR' или -S(O)2R', где R' представляет -NH2 или -NH(C1-6 алкил) Данные соединения ингибируют разные виды обратной транскриптазы ВИЧ и пригодны для лечения вызываемых ВИЧ инфекций. Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей указанное соединение. 014737 Данная заявка заявляет приоритет предварительных заявок США 60/604219, поданной 25 августа 2004 г., 60/604220, поданной 25 августа 2004 г., и 60/686351, поданной 31 мая 2005 г., содержание которых включено в настоящую заявку в качестве ссылок в полном объеме. Настоящее изобретение относится к ингибиторам ферментов и использованию ингибиторов ферментов для лечения заболевания. Более конкретно, к подавлению in vitro и in vivo обратной транскриптазы ВИЧ в качестве способа лечения инфекции, вызванной ВИЧ. Специалистам известны многочисленные методы лечения в отношении ВИЧ, и среди других фармацевтически активных соединений ингибиторы обратной транскриптазы давали значительный терапевтический эффект у многих инфицированных ВИЧ пациентов. Например, относительно хорошо переносятся антиретровирусные лекарственные средства ламивудин (3 ТС) или зидовудин (AZT). Однако недавно появились многочисленные вирусные штаммы с заметной устойчивостью к этим соединениям. Чтобы преодолеть резистентность, по меньшей мере, до некоторой степени, можно применить новые ингибиторы нуклеозидного типа (отдельно или в сочетании с другими ингибиторами нуклеозидного типа), и примеры альтернативных лекарственных средств включают ставудин (d4T), диданозин (ddI), Combivir (известная торговая марка для комбинации ламивудина и зидовудина) и Trizivir (известная торговая марка для комбинации из 3 ТС, AZT и абакавира). К сожалению, развитие устойчивости к одному ингибитору нуклеозидного типа часто сопровождается развитием некоторой степени устойчивости к другому ингибитору нуклеозидного типа, часто делая необходимым переключение на другую группу лекарственных средств. В таких случаях пациент может получать ингибитор протеазы (например, саквинарин, индинавир, нелфинавир и т.д.) обычно в сочетании с другими противоретровирусными средствами. Однако относительно сложный режим введения таких комбинаций часто вызывает неудовольствие у многих пациентов вследствие сложности режима приема и финансовых проблем и соблюдение режима часто меньшее, чем желательно. Совсем недавно лечение ВИЧ фокусировалось на комбинированной терапии, которая включала введение нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы с ингибиторами протеаз и с ненуклеозидными ингибиторами обратной транскриптазы, и тройных комбинаций, включающих нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы и ингибиторы протеаз. К сожалению, комбинированная терапия ингибиторами протеаз с нуклеозидными ингибиторами обратной транскриптазы часто плохо переносится и часто приводит к преждевременному окончанию терапии. Поэтому наиболее современные методы лечения включают сочетание нуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы и ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы. Ингибиторы ненуклеозидного типа (например, невирамина, делавирдина и эфавиренз) являются структурно неоднородной группой соединений, которые, как полагают, связываются в ненуклеозидный карман из обратных транскриптаз. Они значительно повышают противовирусную эффективность при совместном введении с ингибиторами нуклеозидного типа. Хотя ингибиторы ненуклеозидного типа, повидимому, представляют перспективную группу противовирусных лекарственных средств, все еще остается несколько недостатков. Стоимость известных в настоящее время ингибиторов ненуклеозидного типа относительно высока, и единственная мутация в вирусных обратных транскриптазах может вызвать перекрестную резистентность к широкой группе ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы. Поэтому существует острая необходимость получения новых ненуклеозидных ингибиторов обратной транскриптазы, которые обладают сильным противовирусным действием, в частности, против мутантных штаммов ВИЧ, которые проявляют устойчивость к известным в настоящее время ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы. Вирус ВИЧ имеет относительно высокую частоту мутации, которая часто приводит к лекарственной резистентности к современным средствам лечения. Были проведены исследования по идентификации спектра мутаций в RT протеинах вирусов, выделенных от пациентов, у которых была безуспешной терапия с применением по меньшей мере одного ННИОТ, и результаты показали, что мутант K103N был наиболее широко распространенным у пациентов, принимающих эфавиренз, тогда как Y181C был преобладающим у пациентов, принимающих невирапин. Другие единичные мутации включали K101 Е,G190S/A/E и Y188L/C. Некоторые из наиболее часто встречающихся двойных мутаций у пациентов, у которых был неэффективен эфавиренз, включают K103N-P225H, K103N-V108I, K103N-K101Q, K103NL100I, K103N-F227L, V106I-Y188L, K103N-Y188L и K103N-G190A. Существует потребность в получении новых композиций и способов подавления этих и других мутантных обратных транскриптаз. Данная заявка относится к работе, раскрытой ранее в находящихся в общей собственности заявкахPCT/US02/26186, поданной 23 августа 2002 г., неопубликованной, и PCT/US03/27433, поданной 22 августа 2003 г., которая опубликована как WO 2004/030611 от 15 апреля 2004 г. В патенте Соединенных Штатов 5939462, Connell et al., описано большое число замещенных гетероциклов, пригодных в качестве антагонистов NPY5, некоторые из которых являются S-триазолилмеркаптоацетанилидами, подобными соединениям с общей структурой 1, приведенной ниже. Simoneau et al. в международной патентной публикации WO 2004/050643 описывают тетразолы и несколько триазолов, имеющих строение, подобное строению соединений данного изобретения, обладающих активностью ингибирования обратной транскриптазы.-1 014737 Краткое описание Было открыто, что обратная транскриптаза (RT, ОТ) ВИЧ может быть ингибирована указанной группой S-триазолилмеркаптоацетанилидов, представляемых общей структурой 1. Неожиданно, что некоторые из этих соединений способны подавлять разные мутантные ОТ, включая K103N, Y181C и В формуле Q выбран из группы, состоящей из CO2H или его соли, CONR'R", где R' и R" независимо выбраны из группы, состоящей из Н, C1-6 алкила, C1-6 алкила, замещенного одним или более из групп OR,CO2R, NHR, NR2 или CF3, где R является Н или C1-6 алкилом, или R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо;SO3H или его соли; и SO2NR'R", где R' и R" независимо выбраны из группы, состоящей из C1-6 алкила, C1-6 алкила, замещенного одним или более из групп OR, CO2R, NHR, NR2 или CF3, где R является Н или C1-6 алкилом, или R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6 членное гетероциклическое кольцо; Р выбран из группы, состоящей из (а), (b), (с) и (d)R4, R5 и R6 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, CH3, CF3, CFH2, CF2H, изопропила, циклопропила, ОСН 3, ОН, OCF3, NH2 и NHCH3;U и U' независимо выбраны из N и СН;R8, R9, R10 и R11 независимо выбраны из Н или CH3. Соответственно, данное изобретение представляет соединения, которые ингибируют обратную транскриптазу ВИЧ in vitro и in vivo. Данное изобретение представляет также фармацевтические композиции, содержащие одно или более из соединений данного изобретения, для лечения ВИЧ. Настоящее изобретение также относится к соединениям, представленным формулойR2 представляет арильный или гетероарильный фрагмент, содержащий циклоалкильную или гетероциклическую группу, которая может быть дополнительно замещена алкильной, циклоалкильной,арильной или гетероарильной группами,Q является C3-5 циклоалкилом,W представляет S;X и Y независимо представляют CH и N, и Z представляет СН 2, NH, NR, О или S, где R представляет необязательно замещенный N-C1-6 алкил, N-ацил или N-C1-6 алкилацил;R4 представляет COOH, -COR' или -S(O)2R', где R' представляет -NH2 или -NH(C1-6 алкил),-2 014737 причем циклоалкил представляет собой циклическую алкильную группу, состоящую из от 3 до 10 атомов углерода; и где заместителями замещенных радикалов являются один или более заместители, выбранные из группы, состоящей из R, Ar, арил-C1-6 алкила, ОН, SH, OR, SR, OAr, SAr, S(=O)R, S(=O)Ar, SO2R, SO2Ar,галогена, CF3, OCF3, SCF3, NH2, NHR, NR2, NR3+, NHCOR, NHCOAr, NHS(=O)R, NHS(=O)Ar, NHSO2R,NHSO2Ar, NO2, CN, CO2R, CONH2, CONHR, CONR2, C(=O)R, гетероарила и гетероарил-C1-6 алкила, где R является C1-6 алкилом, С 2-6 алкенилом, С 2-6 алкинилом, арил-C1-6 алкилом, гетероарил-C1-6 алкилом или гетероциклил-C1-6 алкилом. Предпочтительными соединениями являются 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид или 2-[5-бром-4-(4 циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-карбамоилфенил)ацетамид. А также 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-метил-4 сульфамоилфенил)ацетамид и 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 илсульфанил]-N-(2-метил-4-карбамоилфенил)ацетамид. Кроме того, предлагаются соединения общей формулыR4 представляет СООН, -COR' или -S(O)2R', где R' представляет -NH2 или -NH(С 1-6 алкил). Предпочтительным соединением является 2-[5-бром-4-(4-этилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид и 2-[5-бром-4-(4-этилнафталин-1-ил)-4 Н[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-карбамоилфенил)ацетамид. Настоящее изобретение также относится к соединению следующего строения:R2 и R2' независимо выбирают из группы, состоящей из Н, необязательно замещенного С 1-5 ацила, 1(С 2-4 ацилокси) С 1-4 алкокси-карбонила и ацильной группы -аминокислоты;R4 и R5 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, CH3, CF3, CFH2, CF2H, изопропила, циклопропила, OCH3, ОН, OCF3, NH2 и NHCH3;R6 независимо выбраны из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br, CF3, CFH2, CF2H, изопропила, циклопропила, OCH3, ОН, OCF3, NH2 и NHCH3;U и U' независимо выбраны из N и СН;R8, R9, R10 и R11 независимо представляют Н или CH3; где заместителями замещенных радикалов являются один или более заместители, выбранные из группы, состоящей из R, Ar, арил-C1-6 алкила, ОН, SH, OR, SR, OAr, SAr, S(=O)R, S(=O)Ar, SO2R, SO2Ar,галогена, CF3, OCF3, SCF3, NH2, NHR, NR2, NR3+, NHCOR, NHCOAr, NHS(=O)R, NHS(=O)Ar, NHSO2R,NHSO2Ar, NO2, CN, CO2R, CONH2, CONHR, CONR2, C(=O)R, гетероарила и гетероарил- C1-6 алкила, гдеR является C1-6 алкилом, С 2-6 алкенилом, С 2-6 алкинилом, арил-С 1-6 алкилом, гетероарил-C1-6 алкилом или гетероциклил-C1-6 алкилом. Наиболее предпочтительно, когда Rp является этилом или циклопропилом. Соединения, соединяющие признаки R1=Br, Ro=Cl или СН 3, Р=нафтил или тетрагидронафтил, и Q=SO2NR'R", проявляют неожиданно сильную активность в отношении ОТ из ряда изолятов ВИЧ в сочетании с неожиданно хорошей фармакокинетикой in vivo. Подробное описание Термин алкил в соответствии с описанием относится к циклическому, разветвленному или линейному углеводородному радикалу, у которого все углерод-углеродные связи являются одинарными связями, и этот термин относится к алкильным группам из от одного до десяти атома(ов) углерода. Термин циклоалкил в соответствии с описанием относится к циклической или полициклической алкильной группе, состоящей из от 3 до 15 атомов углерода. Циклоалкильная группа может состоять из нескольких конденсированных колец, из которых одно из дистальных колец может быть ароматическим (например,индан-2-ил, тетрагидронафт-1-ил и т.д.). Подобным же образом, термин алкенил в соответствии с описанием относится к циклическому,разветвленному или линейному углеводородному радикалу, у которого одна или более из углеродуглеродных связей является двойной связью, и относится к алкенильным группам из от двух до десяти атома(ов) углерода. Термин циклоалкенил в соответствии с описанием относится к циклической или полициклической алкильной группе, содержащей от 3 до 15 атомов углерода, в которой одна или более из углерод-углеродных связей является двойной связью. Циклоалкенильная группа может содержать несколько конденсированных колец, из которых одно из дистальных колец может быть ароматическим(например, инден-2-ил, 1,2-дигидронафт-1-ил и т.д.). Подобным же образом, термин алкинил в соответствии с описанием относится к алкильной или алкенильной группе, которым дано определение выше, у которых по меньшей мере одна углеродуглеродная связь заменена тройной связью. В соответствии с описанием термин алкокси относится к OR группе, где R является C1-6 алкилом,C2-6 алкенилом, C2-6 алкинилом, арил-C1-6 алкилом, гетероарил-C1-6 алкилом или гетероцикло C1-6 алкилом. Подобным же образом, термин арилокси относится к -O-Ar группе, где Ar является арильной или гетероарильной группой. Термины арил и Ar, используемые в описании, взаимозаменяемы и относятся к моноциклической или полициклической углеводородной группе из от 6 до 14 атомов углерода, имеющей по меньшей мере один ароматический цикл, который обеспечивает место присоединения данной группы. Полициклические арильные группы могут иметь изолированные кольца (например, бифенильное) или конденсированные кольца, в которых по меньшей мере одно кольцо является ароматическим (например, 1,2,3,4 тетрагидронафт-6-ил, нафтил, антрил или фенантрил). Термины гетероцикл или гетероциклическое кольцо используемые в описании, взаимозаменяемы и относятся к насыщенной, частично насыщенной или ароматической циклоалкильной или арильной группе, имеющей одно кольцо (например, морфолино, пиридил или фурил) или несколько конденсированных колец (например, нафтиридил, хиноксалинил, хинолинил или индолизинил), в которых по меньшей мере один атом углерода в кольце был заменен гетероатомом. Термин гетероатом в соответствии с описанием относится к атому, отличному от углерода (обычно S, O, Р или N). Термины гетероарил и гетероароматический относятся к гетероциклам, в которых по меньшей мере одно гетероциклическое кольцо является ароматическим. К тому же еще термин необязательно замещенный в соответствии с описанием означает, что один или более из атомов водорода, которые ковалентно связаны с группой или заместителем, определенными выше, или свободной электронной парой у атома азота или фосфора, может быть заменен ковалентно связанным неводородным заместителем, выбранным из группы, состоящей из R, Ar, арил-С 1-6 алкила,ОН, SH, OR, SR, OAr, SAr, S(=O)R, S(=O)Ar, SO2R, SO2Ar, галогена, CF3, OCF3, SCF3, NH2, NHR, NR2,NR3+, NHCOR, NHCOAr, NHS(=O)R, NHS(=O)Ar, NHSO2R, NHSO2Ar, NO2, CN, CO2R, CONH2, CONHR,CONR2, C(=O)R, гетероарила и гетероарил-C1-6 алкила. В представленных выше заместителях R являетсяC1-6 алкилом, С 2-6 алкенилом, С 2-6 алкинилом, арил-C1-6 алкилом, гетероарил-C1-6 алкилом или гетероциклилC1-6 алкилом. Термин ингибирование обратной транскриптазы относится к прямому или непрямому снижению образования ДНК по матричной РНК или ДНК с помощью обратной транскриптазы. Прямое ингибирование включает самоуничтожение, конкурентное и неконкурентное ингибирование, аллостерическое-4 014737 ингибирование или связывание ингибитора в ненуклеозидном кармане. Примеры непрямого ингибирования включают истощение нуклеозидов для синтеза ДНК, индукцию или содействие конформационным изменениям и т.д. В соответствии с описанием термин снижение вирусного воспроизводства означает, что титр вируса в образце снижается. Снижение может осуществляться разными способами, включая частичное или полное ингибирование репликации вируса, частичное или полное ингибирование процессинга или вирусных протеинов или сборки, ингибирование проникновения в клетки или выхода вируса из инфицированной клетки и/или выведение вируса из системы путем иммунного ответа на вирус. Синтез соединений Синтез соединений данного изобретения может быть выполнен в сответствии со следующими методиками, которые по существу описаны в WO 2004/030611, WO 2004/050643 и US 5939462. Должно быть признано, однако, что возможны многие альтернативные пути синтеза для соединений данного изобретения. Следующие характерные пути представлены в качестве примера в качестве руководства для специалистов-практиков в области химии органического синтеза. По одному из путей синтеза соответственно замещенный анилин амидируют активированным соединением карбоновой кислоты (предпочтительно карбонилгалогенидом), причем активированное соединение карбоновой кислоты дополнительно включает удаляемую группу L2 (предпочтительно бром). После образования анилида продукт реакции приводят во взаимодействие с меркаптотриазолом (HetSH), заменяя удаляемую группу с образованием желаемого соединения, которое представлено на схеме 1 а, ниже. Схема 1 а Эта схема является благоприятной, когда меркаптотриазол Het-SH является важным в отношении анилина, так как триазол не используют до последней стадии, и он не подвергается неизбежным потерям,которые происходят во время манипуляций с промежуточными соединениями при синтезе. Выбор удаляемых групп L1 и L2 будет зависеть до некоторой степени от конкретного выбора амина и в меньшей степени от конкретного меркаптотриазола. Особенно предпочтительно, когда L1 и L2 являются галогенидом, наиболее предпочтительно, хлоридом или бромидом. Подходящие растворители для реакции амидирования включают эфиры, спирты и углеводороды (предпочтительно галогенированные), и выбор подходящих растворителей будет, по меньшей мере, частично зависеть от химической природы реагентов. Что касается растворителей, катализаторов и/или оснований, используемых в приведенной выше реакции, в основном нужно следовать соображениям, описанным Connell et al. (патент США 5939462). Альтернативная общая стратегия показана на схеме 1b ниже. Этот подход включает ацилирование анилинов с помощью S-триазолилмеркаптоуксусных кислот, которые легко приготовить путем алкилирования меркаптотриазолов с помощью -галогенуксусной кислоты или сложного эфира. Схема 1b Подходящие реагенты включают, но не ограничиваются этим, йодуксусную кислоту и метилбромацетат, и этилбромпропионат, когда желательно, чтобы R3 являлся метилом. Если используют сложный эфир, его гидролизуют после S-алкилирования для получения свободной карбоновой кислоты. Эти кислота и анилин могут быть связаны с помощью любого из обычных активирующих карбоксил реагентов или смесей реагентов, например, карбодиимида в присутствии основания третичного амина, необязательно, с N-гидроксибензотриазолом в качестве катализатора, или тионил- или оксалилхлорида с диметиламинопиридином в качестве катализатора. Эта схема является выгодной, когда анилин является важным относительно триазола. Пример схемы 1 а представляет синтез, описанный на схеме 2, по которой соединение данного изо-5 014737 бретения получают из двух отдельно полученных предшественников. Первый предшественник, состоящий из замещенного триазина, и второй предшественник, состоящий из замещенного анилина, могут быть получены по методикам, представленным ниже в разделе, озаглавленном Примеры. Реакция предшественников обычно проводится в полярном апротонном растворителе, таком как ДМФ, в присутствии такого основания, как карбонат калия. Схема 2 Когда триазин замещен фторированной алкильной группой, может применяться метод синтеза, который показан на схеме 3. Подобная процедура представлена ниже в разделе, озаглавленном Примеры. Схема 3 Замещенный галогеном триазол может быть получен дигалогенированием триазола с последующим удалением одного галогена, как показано на схеме 4, которой следует методика, представленная ниже в разделе, озаглавленном Примеры. Другой путь создания замещенного триазола с галогеном представлен диазотированием аминотриазола, как показано на схеме 5, ниже, которой следует методика, представленная ниже в разделе, озаглавленном Примеры. Схема 5 Альтернативно, когда триазол замещен CF3, может быть выполнена методика синтеза, показанная на схеме 6, по подобным методикам, представленным ниже в разделе, озаглавленном Примеры. Схема 6 Пример альтернативного подхода к синтезу, описанному на схеме 1 а, показан на схеме 7, ниже, при котором анилин ацилируется с помощью предварительно полученной S-триазолилмеркаптоуксусной кислоты. Фармацевтические композиции Когда соединения данного изобретения применяют в составе фармацевтической композиции, предполагается, что соответствующие соединения могут быть смешаны с фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями и другими добавками. Особенно предпочтительно, когда соединения данного изобретения включены в фармацевтическую композицию, которую изготавливают со смешением с одним или более нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями. Фармацевтические композиции могут быть изготовлены по рецептуре для перорального приема в твердой или жидкой форме, для парентеральных инъекций или для ректального введения. Фармацевтические композиции данного изобретения можно применять людям и другим животным перорально, ректально, парентерально, интравагинально, внутрибрюшинно, местно, защечно или в виде жидкости для орального или назального впрыскивания. Термин парентеральное введение в соответствии с данным описанием относится к способам введения, которые включают, но не ограничиваются этим, внутривенные, внутримышечные, подкожные и внутрисуставные инъекции и вливание. Фармацевтические композиции для парентеральных инъекций и вливания предпочтительно включают фармацевтически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии, а также стерильные порошки для получения из них стерильных инъекционных растворов или дисперсий непосредственно перед использованием. Примеры подходящих водных и неводных носителей, разбавителей, растворителей и жидких сред включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин,пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.) и их подходящие смеси, растительные масла (такие как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Надлежащая текучесть может поддерживаться, например, путем использования покрывающих материалов, таких как лецитин, путем сохранения необходимого размера частиц в случае дисперсий или путем использования поверхностно-активных веществ. Композиции могут также содержать такие добавки, как консерванты, улучшающие смачивание вещества, эмульгирующие вещества и диспергирующие вещества. Профилактика действия микроорганизмов может быть обеспечена путем включения разных антибактериальных и противогрибковых средств,например парабена, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и т.п. Может быть также желательно включать создающие изотоничность вещества, такие как сахара, хлорид натрия и т.п. Пролонгированное всасывание инъекционной фармацевтической форме можно придать путем включения веществ, которые замедляют всасывание, таких как моностеарат алюминия и желатин. Чтобы продлить действие соединения данного изобретения, может быть желательно замедлить всасывание лекарственного средства после подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть выполнено путем использования жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества с плохой растворимостью в воде. Скорость всасывания соединения тогда зависит от степени его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно,замедленное всасывание вводимого парентерально соединения данного изобретения может достигаться путем растворения или суспендирования лекарственного средства в масляном носителе. Инъекционные депо-формы изготавливают путем формирования унитарных или состоящих из микрочастиц матриц соединения данного изобретения в биоразрушаемых полимерах, включая, но не ограничиваясь этим, полилактид-полигликолид, поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Скорость высвобождения лекарственного средства можно регулировать путем изменения отношения лекарственного средства к полимеру и природы конкретного применяемого полимера. Инъекционные депо-препараты можно также получать путем заключения данного соединения в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма. Твердые дозированные формы для перорального приема включают, но не ограничиваются этим,капсулы, таблетки, пилюли, порошки, драже и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешано по меньшей мере с одним инертным фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом или носителем, таким как цитрат натрия или двухзамещенный фосфат кальция и/или (а)-8 014737 наполнители или разбавители, такие как разные виды крахмала, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, (Ь) связывающие вещества, такие как карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и аравийская камедь, (с) гигроскопические вещества, такие как глицерин, (d) дезинтеграторы, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал из тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, (е) раствор замедляющих веществ,таких как парафин, (f) ускорители всасывания, такие как соединения четвертичного аммония, (g) улучшающие смачивание вещества, такие как цетиловый спирт и моностеарат глицерина, (h) абсорбенты,такие как каолин и бентонитовая глина, и (i) улучшающие скольжение вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси. Твердые дозированные формы могут также включать буферные вещества. Твердые композиции можно также использовать в качестве заполнителей мягких и твердых желатиновых капсул с использованием таких наполнителей, как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли с высоким молекулярным весом и т.п. Твердые дозированные формы могут быть изготовлены с покрытиями или оболочками, такими как энтеральные покрытия и другие покрытия, хорошо известные специалистам в области фармацевтической технологии. Они могут, необязательно, содержать замутняющие вещества и могут также состоять из композиции, такой что они высвобождают активный(е) ингредиент(ы) только, или преимущественно, в определенной части кишечного тракта, по желанию замедленным образом. Данные активные соединения могут быть представлены также в микроинкапсулированной форме. Жидкие дозированные формы для перорального приема включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как вода и другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое масло, арахисовое,кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана и их смеси. Пероральные жидкие композиции могут также включать вспомогательные вещества, такие как улучшающие смачивание вещества, эмульгирующие и суспендирующие вещества, подкрашивающие вещества, подсластители,вкусовые добавки и отдушки. Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют суппозитории, которые можно изготовить путем смешивания соединений данного изобретения с подходящими нераздражающими наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или другие суппозиторные воски, которые являются твердыми при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела, и поэтому плавятся в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождают активное соединение. Соединения данного изобретения можно вводить также в форме липосом. Как известно специалистам, липосомы обычно получают из фосфолипидов или других липидных веществ. Липосомы обычно образованы моно- или многослойными гидратированными жидкими кристаллами, которые диспергируют в водной среде. Можно использовать любой нетоксичный физиологически приемлемый липид, способный к образованию липосом. Композиции в липосомной форме могут содержать, в дополнение к соединению данного изобретения, стабилизаторы мембраны, консерванты, наполнители и т.п. Предпочтительными липидами являются фосфолипиды и фосфатидилхолины (лецитины), как природные, так и синтетические. Способы формирования липосом известны специалистам. См., например, Prescott, Ed.,Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p. 33 et seq. Соединения данного изобретения можно использовать в форме фармацевтически приемлемых солей, получаемых с неорганическими или органическими кислотами. Под фармацевтически приемлемыми солями подразумеваются те соли, которые являются пригодными для использования при контакте с тканями людей и более низших животных без неприемлемой токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п. и соответствуют рациональному соотношению пользы/риска. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны специалистам. Например, S.M. Berge, et al. описывают фармацевтически приемлемые соли подробно в J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66:1 et seq. Данные соли могут быть полученыin situ при окончательном выделении и очистке соединений данного изобретения или отдельно путем взаимодействия формы свободного основания с соответствующей кислотой. Типичные соли с присоединением кислоты включают, но не ограничиваются этим, ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, глюконат, глютамат,глицерофосфат, гемисульфат, гелтаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2 гидроксиэтансульфонат (изотионат), лактат, малеат, метансульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат,оксалат, памоат, пектинат, 3-фенилпропионат, фосфат, пивалат, пропионат, сукцинат, сульфат, тартрат,бикарбонат, п-толуолсульфонат и ундеканоат. Основные содержащие азот группы могут быть также четвертичными с такими реагентами, как галогениды низших алкилов, таких как метил-, этил-, пропил- и-йодиды; арилалкилгалогениды, подобные бензил- и фенетилбромидам, и другие. Таким образом получают растворимые в воде или масле или диспергируемые продукты. Аддитивные соли оснований можно получить при конечном выделении и очистке соединений данного изобретения, или позже, путем реакции содержащего группу карбоновой кислоты соединения с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат с фармацевтически приемлемым катионом металла или аммония, или органического первичного, вторичного или третичного амина. Фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются этим, соли щелочных и щелочноземельных металлов, таких как литий, натрий, калий, кальций, магний и алюминий, и т.п., и нетоксичные соли четвертичного аммония и аминов, включающих аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний,метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, диэтиламин, этиламин и т.п. Другие типичные органические амины, пригодные для образования солей с присоединением основания, включают этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперидин, пиперазин, глюкозамин, лейцин и т.п. Фактические дозы активных ингредиентов в фармацевтических композициях данного изобретения могут изменяться так, чтобы получить количество активного(ых) соединения(ий), которое эффективно для достижения желаемой терапевтической реакции у конкретного пациента, для конкретных композиции и способа введения. Выбранный уровень дозы будет зависеть от активности конкретного соединения, пути введения, режима дозировки, тяжести патологического состояния, которое нужно лечить, и состояния здоровья и предыдущей истории заболеваний пациента, которого нужно лечить. Исследования по выбору доз стандартны, и специалист имеет возможность начать с доз данного соединения на уровнях ниже необходимого для достижения желаемого терапевтического эффекта и постепенно повысить дозировку до тех пор, пока не будет достигнут желаемый эффект. Обычно перорально пациентумлекопитающему назначают уровни дозы от примерно 0,1 до примерно 100, более предпочтительно от примерно 5 до примерно 50 мг активного соединения на килограмм веса тела в сутки. Если желательно,эффективная суточная доза может быть разделена на несколько доз, например от двух до четырех отдельных доз в сутки. Соединения данного изобретения можно вводить отдельно или в сочетании с другими средствами для лечения ВИЧ. Конкретно, предполагаемые дополнительные соединения включают ингибиторы обратной транскриптазы нуклеозидного типа (например, ламивудин, зидовудин, ставудин, абакавир, тенофовир или диданозин), ингибиторы обратной транскриптазы ненуклеозидного типа (например, невирапин, делавирдин, эфавиренз), ингибиторы протеазы (например, ритонавир, саквинавир, индинавир, нелфинавир), ингибиторы слияния (например, энфувиртид), антагонисты CCR5, иммунотерапевтические средства (например, рибавирин, IL-2) и активные, пассивные и/или терапевтические вакцины. Комбинированная терапия по данному изобретению включает введение по меньшей мере одного соединения данного изобретения или его функционального производного и по меньшей мере одного другого фармацевтически активного ингредиента. Активный(е) ингредиент(ы) и фармацевтически активные вещества можно вводить отдельно или вместе, и когда их вводят отдельно, это может происходить одновременно или отдельно в любом порядке. Количество активного(ых) ингредиента(ов) и фармацевтически активного(ых) соединения(й) и относительные сроки введения нужно выбирать так, чтобы достичь желаемого сочетанного терапевтического эффекта. Поэтому данное изобретение представляет фармацевтические композиции, содержащие одно или более из соединений изобретения, как определено выше, причем данное соединение или соединения присутствуют в концентрации, эффективной для ингибирования обратной транскриптазы и/или репликации ВИЧ в клетке пациента, при введении композиции пациенту. В частности, предполагается, что ряд соединений может быть включен в одну фармацевтическую композицию, чтобы получить широкомасштабное ингибирование множества мутантных ферментов ОТ. Что касается соответствующих концентраций рассматриваемых соединений в фармацевтических композициях, должно быть понятно, что специалист в данной области может легко подобрать количество данного соединения для достижения ингибирования обратной транскриптазы и/или репликации ВИЧ. Например, ингибирование репликации ВИЧ в клетке (обычно Т-клетке, инфицированной вирусом ВИЧ),можно регулироватьin vitro, используя гемокультуру и систему анализа на основе люциферазы, как описано ниже. Альтернативно, ингибирование обратной транскриптазы можно регулировать in vivo, используя ОТ-ПЦР для определения количества копий вирусной ДНК и/или РНК в крови или лимфатических узлах (содержащих инфицированные ВИЧ клетки). В общем предполагается, что подходящие концентрации будут достигаться при концентрации в сыворотке между 1 нМ и 100 мкМ и в некоторых случаях между 0,01 и 1 нМ. Примеры Следующие эксперименты представлены только в качестве примера и не должны истолковываться как ограничивающие объем данного изобретения.- 10014737 Соединения данного изобретения 2-[5-Бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид (Метод А) 1-Циклопропилнафталин Циклопропилмагнийбромид (150 мл, 0,5 М в тетрагидрофуране) медленно добавляли к раствору 1 бромнафталина (10 г, 50 ммоль) и [1,3-бис(дифенилфосфино)пропан]дихлорникеля(II) в тетрагидрофуране (10 мл), перемешиваемому при 0 С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Добавляли EtOAc и раствор хлорида аммония в воде. После экстрагирования органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 1-циклопропилнафталина (6,4 г, 76%). 1-Циклопропил-4-нитронафталин Нитрит натрия (30 мл) медленно добавляли (в течение 2 ч) к 1-циклопропилнафталину (6,4 г, 38 ммоль), перемешиваемому при 0 С. Реакционную смесь перемешивали при 0 С в течение более 30 мин и затем медленно выливали на лед. Добавляли воду с последующим добавлением EtOAc. После экстрагирования органический слой промывали 1% водным раствором NaOH, затем промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 1-циклопропил-4-нитронафталина (5,2 г, 64%). 1-Амино-4-циклопропил-1-нафталин Раствор 1-циклопропил-4-нитронафталина (5 г, 23 ммоль) в этаноле (200 мл) перемешивали в атмосфере водорода в присутствии Pd/C (10% нетто, 1,8 г). Реакционную смесь взбалтывали в течение ночи,затем фильтровали через целит. Растворитель выпаривали и остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 1-амино-4-циклопропилнафталина (3,1 г, 73%). 1-Циклопропил-4-изотиоцианонафталин Тиофосген (1,1 г, 9,7 ммоль) добавляли к раствору 1-амино-4-циклопропилнафталина (1,8 г, 9,7 ммоль) и диизопропилэтиламина (2 экв.) в дихлорметане (50 мл), перемешиваемому при 0 С. Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин при этой температуре, затем добавляли 1% раствор HCl в воде и органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия,фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Добавляли гексан и полученный осадок отфильтровывали. Растворитель выпаривали с получением 1-циклопропил-4 изотиоцианатонафталина (1,88 г, 86%). 5-Амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиол Смесь гидрохлорида аминогуанидина (3,18 г, 29 ммоль), 1-циклопропил-4-изотиоцианатонафталина(3,24 г, 14 ммоль) и диизопропилэтиламина (3 экв.) в ДМФ (20 мл) перемешивали при 50 С в течение 15 ч. Растворитель выпаривали, добавляли толуол и растворитель снова выпаривали. Добавляли 2,0 М водный раствор гидроксида натрия (30 мл) и реакционную смесь нагревали при 50 С в течение 60 ч. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат нейтрализовывали 2,0 М водным раствором HCl. Снова фильтровали, затем выпаривали растворитель и остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 5 амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиола (2,0 г, 49%). 2-[5-Амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид К раствору 5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиола (708 мг, 2,5 ммоль), K2CO3 (380 мг, 2,5 ммоль) в ДМФ (20 мл) добавляли 2-хлор-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид (710 мг, 2,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. По завершении реакции растворитель выпаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 2-[5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамида (1,26 г, 95%). 2-[5-Бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид Дихлоруксусную кислоту (180 мкл, 2,2 ммоль) добавляли к суспензии 2-[5-амино-4-(4 циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамида (0,59 г, 1,1 ммоль), нитрита натрия (1,5 г, 22 ммоль) и BTEABr (0,91 г, 3,3 ммоль) в дихлорметане(30 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем экстрагировали дихлорметаном и раствором бикарбоната натрия в воде. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией 2-[5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 Методика: К суспензии тиотриазола и карбоната калия в ДМФ добавляли каплями метилхлорацетат при комнатной температуре в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч и медленно выливали в перемешиваемый ледяной водный раствор. Желто-коричневый осадок собирали вакуумфильтрованием и сушили в высоком вакууме при 50 С в течение 16 ч в присутствии Методика: К раствору метилового эфира 2-[5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 илсульфанил]уксусной кислоты и бензилтриэтиламмония хлорида в бромоформе добавляли нитрит натрия. К смеси добавляли дихлоруксусную кислоту и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь непосредственно загружали на 7-дюймовую колонку силикагеля, которая была упакована с помощью CH2Cl2. Колонку сначала элюировали CH2Cl2 до тех пор, пока не элюировался весь CHBr3, и затем элюировали ацетоном/CH2Cl2 (5:95) с получением 713 мг (85%) названного в заголовке соединения. Методика: К раствору метилового эфира 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3 илсульфанил]уксусной кислоты в смеси ТГФ и EtOH при 0 С каплями добавляли раствор LiOH в H2O в течение 5 мин. Реакция завершалась после перемешивания при 0 С в течение еще 45 мин. Реакционную смесь нейтрализовали до рН 7 добавлением 0,5 N раствора HCl при 0 С и полученную смесь концентрировали in vacuo до 1/5 ее первоначального объема. Смесь разбавляли H2O (20 мл) и подкисляли до рН 23 добавлением 0,5 N HCl с получением липкого твердого вещества. (Если продукт выходит в виде масла во время подкисления, рекомендуется экстрагирование CH2Cl2). Желто-коричневое твердое вещество собирали вакуумфильтрованием и сушили в высоком вакууме при 50 С в течение 16 ч в присутствии Р 2 О 5 с получением 1,02 г (93%) названного в заголовке соединения. 2-[5-Бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид Методика: К раствору карбоновой кислоты и анилина, представленных выше, в пиридине при 0 С каплями добавляли POCl3 в течение 5 мин. Реакция завершалась после перемешивания при 0 С в течение еще 50 мин. Реакционную смесь гасили добавлением Н 2 О (1 мл), затем концентрировали in vacuo до светлокоричневого масла, которое разбавляли CH2Cl2 (200 мл). Органический слой промывали Н 2 О (150 мл),насыщенным раствором NaHCO3 (150 мл), затем насыщенным раствором соли (150 мл). Органический слой сушили над Na2SO4 и концентрировали досуха. Полученное масло растирали с EtOH с получением светло-желтого твердого вещества. К смеси добавляли H2O, чтобы собрать больше твердого вещества. Светло-желтое твердое вещество собирали вакуумфильтрованием и сушили в высоком вакууме в течение 16 ч с получением 930 мг (72%) продукта. Дополнительно продукт (132 мг, 10%) выделяли экстрагированием фильтрата CH2Cl2 с последующей колоночной хроматографией с помощью ацетона/CH2Cl2 1-амино-4-циклопропил-7-метоксинафталин К перемешиваемому раствору 8-амино-2-нафтол (5 г, 31,4 ммоль) в смеси тетрагидрофурана (50 мл) и дихлорметана (100 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (6,86 г, 31,4 ммоль). Смесь перемешивали при 70 С в течение 18 ч. После того как смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли насыщенный водный раствор карбоната натрия и продукт экстрагировали дихлорметаном. Органический слой промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:этилацетат, 9:1) с получением N-BOC производного а (4,85 г, 60% выход). К смеси N-BOC производного а (4,85 г, 18,7 ммоль) и триэтиламина (3,91 г, 28,1 ммоль) в дихлорметане (170 мл) добавляли ангидрид метансульфоновой кислоты (3,58 г, 20,6 ммоль) при 0 С. Данную смесь перемешивали в течение 30 мин и выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Органический слой экстрагировали дихлорметаном, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением метансульфонатного сложного эфира b (6,22 г,количественный выход). К раствору метансульфоната b (6,12 г, 18,1 ммоль) в 150 мл уксусной кислоты добавляли Nбромсукцинимид (3,39 г, 19 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и добавляли воду и дихлорметан. Водный слой доводили до рН 7 добавлением 10 N водным раствором гидроксида натрия. Органический слой экстрагировали дихлорметаном, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 5-бромпроизводного с (7,6 г, количественный выход). Смесь с (7,72 г, 18,5 ммоль) и 10% водный раствор гидроксида натрия (370 мл) в тетрагидрофуране(220 мл) перемешивали при 50 С в течение 5 дней. Смесь охлаждали до 0 С и нейтрализовали концентрированной соляной кислотой. Смесь концентрировали при пониженном давлении и продукт экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением нафтола d (5,87 г, 94% выход). Смесь нафтола d (3,53 г, 10,4 ммоль), метилйодида (0,65 мл, 10,4 ммоль) и гидроксида натрия (417 мг, 10,4 ммоль) в ацетоне (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Полученную смесь концентрировали и остаток очищали колоночной хроматографией (85% гексана/15% этилацетата) с получением 2,39 г, 65% выход метилового эфира е. Смесь метилового эфира е (3,25 г, 9,22 ммоль) в 4 N HCl в 1,4-диоксане (92 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и добавляли этилацетат и насыщенный раствор бикарбоната натрия. Экстрагированный органический слой промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-метокси-5-бром-8-аминонафталина f (2,14 г, 92% выход). К раствору аминонафталина f (1 г, 4,0 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (438 мг, 5,1 ммоль),фосфата калия (2,97 г, 14 ммоль) и трициклогексилфосфина (112 мг, 0,4 ммоль) в толуоле (21 мл) и воде(0,8 мл) в атмосфере азота добавляли ацетат палладия (45 мг, 0,2 ммоль) при энергичном перемешивании. Смесь нагревали до 100 С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом, сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Очистка колоночной хроматографией (50% гексан/50% этилацетат) давала названное в заголовке соединение g(9 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,25 мл, 3,28 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 819 мг, 98% выход, соединения h, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение h (819 мг, 3,21 ммоль) растворяли в 6 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (532 мг, 4,8 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,84 мл, 4,8 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Затем смесь концентрировали и к остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь затем нейтрализовали водным 1 N раствором HCl и остаток собирали с получением соединения i (200 мг, 25% выход). Соединения i (63 мг, 0,2 ммоль) и j (57 мг, 0,2 ммоль) растворяли в ДМФ (2 мл) и добавляли карбонат калия (30 мг, 0,2 ммоль). Данную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем к смеси добавляли воду и образовавшийся осадок собирали с получением 70 мг (57%) соединения k. К смеси соединения к (63 мг, 0,113 ммоль), бензилтриэтиламмония бромида (93 мг, 0,34 ммоль) и нитрита натрия (0,156 мг, 2,26 ммоль) в дибромметане (5 мл) добавляли дихлоруксусную кислоту (0,05 мл, 0,226 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Затем реакционную смесь концентрировали и полученный остаток очищали препаративной ТСХ (95% дихлорметан/5% метанол) с получением 13,8 мг сульфоновой кислоты и 2 мг названного в заголовке соединения 1. 2-[5-Бром-4-(4-циклопропил-2-метилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид(225 мл) добавляли N-бромсукцинимид (10 г, 56,2 ммоль) при 0 С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. К смеси добавляли воду и продукт экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой и насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (75% гексан/25% этилацетат) с получением 4,73 г, 42% выход, соединения b.(3,14 г, 14,8 ммоль) и трициклогексилфосфина (118 мг, 0,42 ммоль) в толуоле (22 мл) и воде (0,85 мл) в атмосфере азота добавляли ацетат палладия (47 мг, 0,21 ммоль). Смесь нагревали до 100 С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом,сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Очистка колоночной хроматографией (90% гексана/10% этилацетата) давала соединение с (728 мг, 87% выход). Соединение с (728 мг, 3,7 ммоль) растворяли в 18 мл дихлорметана. Добавляли бикарбонат натрия(9 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,28 мл, 3,7 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 877 мг, 99% выход, соединения d, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение d (8 77 мг, 3,7 ммоль) растворяли в 6 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (608,5 мг, 5,5 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,0 мл, 5,5 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Смесь концентрировали и к полученному остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (15 мл). Смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь нейтрализовали водным 1 N раствором HCl и осадок собирали с получением соединения е (472 мг, 50% выход). Соединения е (100 мг, 0,34 ммоль) и f (96 мг, 0,34 ммоль) растворяли в ДМФ (2 мл) и добавляли карбонат калия (51 мг, 0,37 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем к смеси добавляли воду и образованный осадок собирали и очищали препаративной ТСХ (90% дихлорметана/10% метанола) с получением 83 мг, 45% выход, соединения g. К смеси соединения g (83 мг, 0,15 ммоль), бромида бензилтриэтиламмония (125 мг, 0,46 ммоль) и нитрита натрия (211 мг, 3,06 ммоль) в дибромметане (5 мл) добавляли дихлоруксусную кислоту (0,03 мл,0,31 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Затем реакционную смесь концентрировали и полученный остаток очищали препаративной ТСХ (95% дихлорметан/5% метанол) с получением 55,7 мг сульфоновой кислоты и 7 мг названного в заголовке соединения h. 2-[5-Бром-4-(2-хлор-4-циклопропилфенил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид Соединение а (1 г, 4,8 ммоль) растворяли в 10 мл безводного метиленхлорида. К этой смеси добавляли триэтиламин (0,68 мл, 4,8 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Затем добавляли ацетилхлорид (0,5 мл, 7,2 ммоль) при 0 С и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли воду и дихлорметан и слои разделяли. Затем органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 1,11 г, 92% выход, соединения b. К раствору b (500 мг, 2,01 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (225 мг, 2,62 ммоль), фосфата- 16014737 калия (1,49 г, 7,04 ммоль) и трициклогексилфосфина (56 мг, 0,2 ммоль) в толуоле (10 мл) и воде (0,4 мл) добавляли ацетат палладия (23 мг, 0,1 ммоль) в атмосфере азота. Смесь нагревали до 100 С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом,сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 550 мг неочищенного продукта с, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение с (500 мг, 2,4 ммоль) растворяли в 4 мл этанола. Добавляли водный 1 N раствор HCl (4 мл) и смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 8 ч. Растворитель удаляли in vacuo с получением 440 мг соединения d, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение d (440 мг, 2,6 ммоль) растворяли в 14 мл дихлорметана. Добавляли бикарбонат натрия(7 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,2 мл, 2,6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 877 мг, 99% выход, соединения е, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение е (447 мг, 2,1 ммоль) растворяли в 3 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (355 мг, 3,2 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,56 мл, 3,2 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 час. Смесь затем концентрировали и к полученному остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь затем нейтрализовали 1 N водным растворомHCl и осадок (продукт) собирали с получением соединения f (240 мг, 44% выход). Соединения f (89 мг, 0,33 ммоль) и g (94 мг, 0,33 ммоль) растворяли в ДМФ (1,5 мл) и добавляли карбонат калия (51 мг, 0,37 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем к смеси добавляли воду и образовавшийся осадок собирали и очищали препаративной ТСХ (90% дихлорметан/10% метанол) с получением 116 мг, 68% выход, соединения h. К смеси соединения h (116 мг, 0,23 ммоль), бензилтриэтиламмония бромида (183 мг, 0,68 ммоль) и нитрита натрия (304 мг, 4,6 ммоль) в дибромметане (5 мл) добавляли дихлоруксусную кислоту (0,04 мл,0,46 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Реакционную смесь затем концентрировали и полученный остаток очищали препаративной ТСХ (95% дихлорметана/5% метанола) с получением 99,10 мг сульфоновой кислоты и 17,90 мг названного в заголовке соединения i. 4-(2-(5-Бром-4-(2-хлор-4-циклопропил-6-метилфенил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илтио)ацетамидо)-3 хлорбензойная кислота(3,34 г, 15,8 ммоль) и трициклогексилфосфина (126 мг, 0,45 ммоль) в толуоле (20 мл) и воде (0,76 мл) в атмосфере азота добавляли ацетат палладия (51 мг, 0,23 ммоль). Смесь нагревали до 100 С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом,сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 775 мг неочищенного 2-хлор-4 циклопропил-6-метилбензоламина (2), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение 2 (775 мг, 4,3 ммоль) растворяли в 9 мл дихлорметана. Добавляли бикарбонат натрия(4,5 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,33 мл, 4,3 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концен- 17014737 трировали с получением 935 мг 1-хлор-5-циклопропил-2-изотиоцианато-3-метилбензола (3), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение 3 (935 мг, 4,2 ммоль) растворяли в 5 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (695 мг, 6,3 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,1 мл, 6,3 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Затем смесь концентрировали и к полученному остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (20 мл). Смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь затем нейтрализовали 1 N водным растворомHCl и осадок (продукт) собирали с получением 5-амино-4-(2-хлор-4-циклопропил-6-метилфенил)-4 Н 1,2,4-триазол-3-тиола (4) (780 мг, 66% выход). Соединение 4 (100 мг, 0,36 ммоль) и 3-хлор-4-(2-хлорацетамидо)бензойную кислоту (5) (88 мг, 0,36 ммоль) растворяли в ДМФ (2 мл) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Затем добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 192 мг неочищенной 4-(2-(5-амино-4-(2-хлор-4-циклопропил-6 метилфенил)-4 Н-1,2,4-триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (6), которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. К смеси соединения 6 (192 мг, 0,39 ммоль), бензилтриэтиламмония бромида (318 мг, 1,17 ммоль) и нитрита натрия (538 мг, 7,8 ммоль) в дибромметане (10 мл) добавляли дихлоруксусную кислоту (0,065 мл, 0,78 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Реакционную смесь затем концентрировали и полученный остаток очищали препаративной ТСХ (95% дихлорметана/5% метанола) с получением 88 мг, 42% выход, 4-(2-(5-бром-4-(2-хлор-4-циклопропил-6 метилфенил)-4 Н-1,2,4-триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (7). 4-[2-(5-Бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойная кислота К раствору 1 (500 мг, 2,01 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (225 мг, 2,62 ммоль), фосфата калия (1,49 г, 7,04 ммоль) и трициклогексилфосфина (56 мг, 0,2 ммоль) в толуоле (10 мл) и воде (0,4 мл) в атмосфере азота добавляли ацетат палладия (23 мг, 0,1 ммоль). Смесь нагревали до 100 С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом,сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 550 мг неочищенного 4 циклопропилнафталин-1-амина (2), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение 2 (440 мг, 2,6 ммоль) растворяли в 14 мл дихлорметана. Добавляли бикарбонат натрия(7 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,2 мл, 2,6 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 877 мг, 99% выход, 1-циклопропил-4-изотиоцианатонафталина (3), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение 3 (447 мг, 2,1 ммоль) растворяли в 3 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (355 мг, 3,2 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,56 мл, 3,2 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Смесь затем концентрировали и к полученному остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь затем нейтрализовали 1 N водным растворомHCl и осадок (продукт) собирали с получением 5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-1,2,4 триазол-3-тиола (4) (240 мг, 44% выход). Соединение 4 (789 мг, 2,79 ммоль) и 3-хлор-4-(2-хлорацетамидо)бензойную кислоту (5) (693 мг,2,79 ммоль) растворяли в ДМФ (6 мл) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Затем добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 1,04 г, 75% выход, 4-(2-(5-амино-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н 1,2,4-триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (6). Дихлоруксусную кислоту (0,35 мл, 4,2 ммоль) добавляли к смеси соединения 6 (1,04 г, 2,1 ммоль),бензилтриэтиламмония бромида (1,65 г, 6,1 ммоль) и нитрита натрия (2,9 г, 42,1 ммоль) в дибромметане(44 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Реакционную смесь затем концентрировали и полученный остаток очищали колоночной хроматографией (95% дихлорметана/5% метанола) с получением 393 мг, 34% выход 4-(2-(5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н 1,2,4-триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (7). 4-[2-(5-Бром-4-(7-метокси-4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-1,2,4-триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойная кислота(41,3 г, 291 ммоль) в ТГФ (100 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. Смесь перемешивали при комнатной температуре, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией(бензилиденамино)нафталин-2-ола (2), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Смесь 2 (12,65 г, 51,2 ммоль), MeI (6,4 мл, 102 ммоль) и NaOH (6,14 г, 153 ммоль) в ацетоне (125 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную смесь концентрировали и остаток растворяли в эфире, промывали водой и насыщенным раствором соли и концентрировали. Полученный остаток растворяли в 2 N HCl-ТГФ (780 мл, 2:1) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Полученный раствор промывали эфиром, водный слой подщелачивали Na2CO3 и экстрагировали эфиром. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (Hex/EtOAc 3:1) с получением 6,94 г, 78% выход, 7-метоксинафталин-1-анилина (3). К перемешиваемой смеси 3 (6,94 г, 40 ммоль) и карбоната калия (16,6 г, 120 ммоль) в ацетоне (100 мл) добавляли бензилбромид (19,0 мл, 160 ммоль) при 0 С. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 дней и охлаждали до комнатной температуры. Осадок удаляли и фильтрат концентрировали.- 19014737 Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (Hex 100%) для удаления непрореагировавшего бензилбромида, а затем этилацетатом (100%) с получением 11,75 г, 83% выход, N,N-дибензил-7 метоксинафталин-1-амина (4). К перемешиваемому раствору ДМФ (30 мл) добавляли POCl3 (10,65 мл, 116 ммоль) в течение 30 мин при 0 С. Затем смесь перемешивали при 0 С в течение 30 мин и добавляли 4 (11,75 г, 33,2 ммоль) в ДМФ (120 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение шести дней и выливали в воду со льдом. Продукт в виде смеси экстрагировали дихлорметаном и органический слой промывали водой, водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 13,58 г 4-(дибензиламино)-6-метокси-1-нафтальдегида (5), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Смесь 5 (5,0 г, 13,1 ммоль) и Pd/уголь (812 мг) в метаноле (150 мл) перемешивали в атмосфере водорода (40 фунт/дюйм 2) в течение 18 ч. Смесь пропускали через целит и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (Hex/EtOAc 3:1) с получением 826 мг, 35% выход, 7 метокси-4-метилнафталин-1-амина (6). Соединение 6 (826 мг, 4,4 ммоль) растворяли в 25 мл дихлорметана. Добавляли бикарбонат натрия(15 мл, насыщенный раствор) и тиофосген (0,34 мл, 4,4 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 1,9 г, 99% выход, 4-изотиоцианато-6-метокси-1-метилнафталина (7), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Соединение 7 (1,0 г, 4,4 ммоль) растворяли в 10 мл диметилформамида, добавляли гидрохлоридную соль аминогуанидина (723 мг, 6,5 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,14 мл, 6,5 ммоль) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Смесь затем концентрировали и к полученному остатку добавляли 2 М водный раствор гидроксида натрия (10 мл). Данную смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь затем нейтрализовали водным 1 N растворомHCl и осадок (продукт) собирали с получением 5-амино-4-(7-метокси-4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-1,2,4 триазол-3-тиола (8) (1, 14 мг, 91% выход). Соединение 8 (200 мг, 0,7 ммоль) и 3-хлор-4-(2-хлорацетамидо)бензойную кислоту (9) (17 4 мг, 0,7 ммоль) растворяли в ДМФ (3 мл) и смесь перемешивали при 50 С в течение 18 ч. Добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 304 мг 4-(2-(5-амино-4-(7-метокси-4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-1,2,4-триазол 3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (10), которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. К смеси соединения 10 (304 мг, 0,6 ммоль), бензилтриэтиламмония бромида (492 мг, 1,8 ммоль) и нитрита натрия (828 мг, 12 ммоль) в дибромметане (10 мл) добавляли дихлоруксусную кислоту (0,1 мл,1,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч в темноте. Затем смесь концентрировали и полученный остаток очищали колоночной хроматографией (95% дихлорметана/5% метанола) с получением 80 мг, 24% выход, 4-(2-(5-бром-4-(7-метокси-4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-1,2,4 триазол-3-илтио)ацетамидо)-3-хлорбензойной кислоты (11). 2-[5-Бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-Nпропионилсульфамоилфенил)ацетамид В 50-мл круглодонную колбу загружали 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид (45 мг, 0,076 ммоль), ЭДХ (29 мг, 0,15 ммоль) и пропионовую кислоту (6,7 мкл, 0,09 ммоль) в смесь 5 мл ТГФ и 5 мл метиленхлорида. К данной смеси добавляли DMAP (18,3 мг, 0,15 ммоль) одной порцией. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 14 ч. Растворители выпаривали при пониженном давлении, получая плотный маслянистый остаток. Остаток снова растворяли в 20 мл метиленхлорида, затем раствор промывали 20 мл 2,0 М водным раствором HCl. Органический слой сушили над Na2SO4. Растворитель удаляли с помощью роторного испарителя, получая маслянистый остаток. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с помощью смеси метанола и метиленхлорида (1:9) и получали 18,5 мг (38%) желаемого продукта в виде белых твердых веществ. В 25-мл круглодонную колбу загружали 2-[5-бром-4-(4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид (50 мг, 0,085 ммоль), ЭДХ (35 мг, 0,18 ммоль), Boc-Lys(Boc)-ОН ДЦГА (47 мг, 0,09 ммоль) в смеси 5 мл ТГФ и 5 мл метиленхлорида. К смеси добавляли DMAP (16 мг, 0,13 ммоль) одной порцией. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 14 ч. Растворители выпаривали при пониженном давлении, получая плотный маслянистый остаток. Остаток растворяли в 5 мл 4,0 М HCl в диоксане. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 14 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, получая густой маслянистый остаток. Остаток последовательно промывали 10 мл метиленхлорида и 10 мл эфира, получая названное в заголовке соединение в виде светло-желтого твердого вещества (44 мг, 65%). Реагенты 1-Метил-4-нитронафталин К 1-метилнафталину (8,0 г, 56 ммоль) в круглодонной колбе при 0 С каплями добавляли азотную кислоту (26 мл). (Примечание: Медленное добавление азотной кислоты является наиболее важным для устранения образования других пространственных изомеров). После того как реакционную смесь перемешивали в течение еще 15 мин при 0 С, ее выливали в 65 мл Н 2 О. Водный раствор дважды экстрагировали бензолом и объединенный бензольный раствор промывали 10% раствором NaOH, сушили Na2SO4 и концентрировали. Хроматография на силикагеле (EtOAc:гексаны = 5:95) давала продукт, еще содержащий некоторое количество другого пространственного изомера. Его перекристаллизовывали с К раствору 1-метил-4-нитронафтиламина (4,0 г, 21 ммоль) в этаноле (300 мл) добавляли никель Ренея (4 ложечки). Смесь перемешивали в атмосфере Н 2 (1 атм.) в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и концентрировали. Очистка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле Методика была, по существу, идентична пути синтеза для 4-метилнафталин-1-иламина, как описано выше, однако исходили из раствора 5-этил-8-нитро-1,2,3,4-тетрагидронафталина (795 мг, 3,95 ммоль). 4-Метилнафталин-1-илтиосемикарбазид К раствору тиофосгена (0,33 мл, 4,3 ммоль) в безводном метиленхлориде (5 мл) при 0 С каплями добавляли раствор 4-метилнафтиламина (671 мг, 4,3 ммоль) и диизопропилэтиламин (1,5 мл, 8,6 ммоль)- 21014737 в безводном метиленхлориде (5 мл). После того как реакционную смесь перемешивали в течение еще 10 мин при 0 С, ее промывали 1% раствором HCl, а затем H2O, сушили Na2SO4 и концентрировали с получением темно-коричневого масла. Масло растворяли в гексанах (15 мл) и полученную коричневую густую суспензию фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением чистого тиоизоцианата. К раствору тиоизоцианата в безводном ацетонитриле (20 мл) добавляли гидразин (0,13 мл, 4,3 ммоль) при КТ. После перемешивания при КТ в течение 20 мин смесь концентрировали. Полученное желтое масло растирали с EtOAc:гексаном (1:1) с получением (701 мг, 71% выход) продукта в виде не совсем белого твердого вещества. 5-Дифторметил-4-(4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиол Раствор 4-метилнафтилтиосемикарбазида (180 мг, 0,78 ммоль) в дифторуксусной кислоте (2 мл) нагревали при 100 С в течение 4 ч. Когда смесь охлаждали до комнатной температуры, из реакционной смеси выкристаллизовывалось белое твердое вещество. Чтобы собрать больше продукта, к смеси добавляли 2 мл гексана. Фильтрование давало (17 9 мг, 7 9% выход) продукт в виде белого твердого вещества. 5-Фторметил-4-(4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиол(0,23 мл, 1,02 ммоль) добавляли этилфторацетат (0,13 мл, 1,37 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали, добавляли воду и промывали диэтиловым эфиром. В водном слое рН доводили HCl и отфильтровывали продукт в виде белого твердого вещества (0,78 мг, 42% выход). 1 Н-ЯМР (ДМСО, 300 МГц)14,26 (с, 1 Н), 8,14 (д, J=8,4 Гц, 1 Н), 7,67-7,52 (м, 4 Н), 7,26 (д, J=8,4 Гц,1 Н), 5,20 (дд, J=12,0, 21,0 Гц, 1 Н), 5,03 (дд, J=12,0, 20,4 Гц, 1 Н), 2,74 (с, 3H). 2-[5-Дифторметил-4-(4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-метил-4 сульфамоилфенил)ацетамид В раствор 5-дифторметил-4-(4-метилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиола (53 мг, 0,18 ммоль),K2CO3 (27,0 мг, 0,20 ммоль) в ДМФ (1,5 мл) добавляли 2-метил-N-(2-метил-4 сульфамоилфенил)ацетамид (47 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли Н 2 О (4,0 мл) и перемешивали, пока происходило осаждение, и продукт отфильтровывали (77,0 мг, 83% выход). 1 Н-ЯМР (ДМСО, 300 МГц)9,84 (ушир.с, 1 Н), 8,18 (д, J=8,0 Гц, 1 Н), 7,70-7,53 (м, 7 Н), 7,18 (т,J=51,5 Гц, 1 Н), 7,11 (д, J=8,0 Гц, 1 Н), 4,26 (с, 2 Н), 2,82 (с, 3H), 2,27 (с, 3H). В раствор 5-дифторметил-4-(4-этил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиола (85 мг, 0,28 ммоль), K2CO3 (41,8 мг, 0,30 ммоль) в ДМФ (2,0 мл) добавляли 2-хлор-N-(2-метил-4 сульфамоилфенил)ацетамид (77,8 мг, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли МеОН и переме- 22014737 шивали, пока происходило выпадение осадка, и продукт отфильтровывали (71,0 мг, 46% выход). 1(57 мг, 0,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли Н 2 О (4 мл) и перемешивали, пока происходило выпадение осадка, и продукт отфильтровывали (77,0 мг, 71% выход). 1 Н-ЯМР (ДМСО, 300 МГц)10,11 (ушир.с, 1 Н), 8,18 (д, J=10,0 Гц, 1 Н), 8,01 (д, J=10,0 Гц, 1 Н), 7,87(87 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли Н 2 О (2,0 мл) и перемешивали, пока происходило выпадение осадка, и фильтровали. Очистка ВЭЖХ с обращенной фазой давала продукт в виде твердого вещества (53,3 мг, 50% выход). 1 Н-ЯМР (ДМСО, 300 МГц)9,84 (ушир.с, 1 Н), 8,18 (д, J=8,4 Гц, 1 Н), 7,71-7,53 (м, 7 Н), 7,26 (с, 2 Н),7,10 (д, J=8,7 Гц, 1 Н), 5,34 (дд, J=12,0, 27,3 Гц, 1 Н), 5,18 (дд, J=12,3, 26,4 Гц, 1 Н), 4,22 (с, 2 Н), 2,75 (с, 3H),2,25 (с, 3H).(93 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли H2O (2,0 мл) и перемешивали, пока происходило выпадение осадка, и фильтровали с получением твердого вещества (126,8 мг, 74% выход). 1 К раствору 4 -(4-этил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-ил)-5-фторметил-4 Н-[1,2,4]триазол-3-тиола (85 мг, 0,29 ммоль), K2CO3 (44,4 мг, 0,32 ммоль) в ДМФ (2,0 мл) добавляли 2-хлор-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид (82,6 мг, 0,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. По завершении реакции к реакционной смеси добавляли Н 2 О (42,0 мл) и перемешивали, пока происходило выпадение осадка, и фильтровали с получением твердого вещества (73,0 мг, 47% выход). 1 Н-ЯМР (ДМСО, 300 МГц)10,15 (с, 1 Н), 8,05 (д, J=8,4 Гц, 1 Н), 7,87 (с, 1 Н), 7,74 (д, J=8,4 Гц, 1 Н),7,46 (с, 2 Н), 7,21-7,06 (м, 2 Н), 5,26 (д, J=48,0 Гц, 2 Н), 4,29 (кажущийся кв., J=15,6 Гц, 2 Н), 2,71-2,58 (м,3H), 2,25 (с, 1 Н), 2,25-2,09 (м, 2 Н), 1,72-1,59 (м, 4 Н), 1,19 (т, J=7,5 Гц, 3H). Используя соответствующие исходные вещества, получают следующие соединения по методикам,аналогичным методам, описанным выше: 2-[5-бром-4-(2-хлор-4-(циклопропилметил)фенил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(2-хлор-4-(циклобутилфенил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(2-хлор-4-(циклопропилметил)нафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2 хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(2-хлор-4-циклопропилфенил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-трифторметил-4-(2-хлор-4-циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(4-циклопропил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(4-этилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(4-этил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор 4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(5-циклопропилхинолин-8-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(5-циклопропилизохинолин-8-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(5-циклопропилциннолин-8-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4 сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(1-метилаценафтен-5-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(2-метилаценафтен-5-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид,2-[5-бром-4-(1,1-диметилаценафтен-5-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид. Ингибирование обратной транскриптазы ВИЧ-1 Соединения подвергают скринингу на ингибирующую активность в отношении вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1), используя высокопроизводительное исследование на основе клеток с использованием экспрессии люциферазы светлячков ВИЧ-1 в качестве репортерного гена, и псевдотипируют с помощью оболочечного гликопротеина вируса везикулярного стоматита (VSV-G, ВВС-Г). Процедуры эксперимента по существу были такими, которые описаны Connor et al. в Journal of Virology (1996),70: 5306-5311 (Характеристика функциональных свойств env генов от долгожителей, инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1), и Popik et al. в Journal of Virology (2002), 76: 4709-4722 (Вирус иммунодефицита человека типа 1 использует совместно локализованные на липидных скопленияхCD4 и хемокиновые рецепторы для продуктивного проникновения в Т-клетки CD4+). В частности, должно быть понятно, что данный вирус содержит две мутации, вызванные в гене ОТ (K103N и Y181C, созданные мутагенезом с помощью ПЦР), которые делают вирус высокорезистентным к современным ненуклеозидным лекарственным препаратам против ВИЧ-1. Материал линий вирусов готовили путем сотрансфицирования плазмидной ДНК, кодирующей ВВС-Г, с вектором pNL4-3Env(-)Luc(+) в клетки 293 Т. Через 64 час после трансфицирования содержащую вирус среду собирали центрифугированием и- 24014737 хранили замороженной при -80 С. Клетки HeLa инфицировали псевдотипированным вирусом ВВС-Г в присутствии проходящих отбор веществ в 384-луночном формате микротитровальной платы. Через 48 ч после первоначального инфицирования к клеткам добавляли буфер для лизиса и люциферазный реагент для исследования(Promega) и люциферазную активность определяли путем измерения полученной люминесценции с использованием люминометра LJL. Так как люциферазный ген находится в вирусном геноме, уровень его экспрессии непосредственно отражает уровень репликации вируса в присутствии соединения. Чтобы оценить активность соединений в отношении ВИЧ-1 дикого типа, использовали линию клеток HeLa-JC53, которая экспрессирует высокие уровни CD4 и CCR5 (Platt et al., Journal of Virology(1998), 72: 2855-2864: Влияние концентраций на поверхности клеток CCR5 и CD4 на инфицирование макрофаготропных изолятов вируса иммунодефицита человека типа 1). Данную линию клеток модифицировали выделением стабильной линии клеток, которая экспрессирует люциферазу под контролем промотора ВИЧ-1 (длинный концевой повтор, т.е. LTR). Инфицирование ВИЧ-1 данной клеточной линии стимулирует транскрипцию люциферазы из промотора ВИЧ-1 и уровень экспрессии люциферазного гена пропорционален уровню репликации вируса (Harrington et al. в Journal of virology Methods (2000), 88: 111-115: Прямое обнаружение инфицирования ВИЧ-1 в крови с использованием исследования клеток центрифугированием с индикатором; и Roos et al. в Virology (2000), 273: 307-315: Клетки LuSIV: репортерная линия клеток для определения и количественного определения одного цикла репликации ВИЧ иSIV). Методики испытания вирусных инфекций соединений и определения люциферазной активности были такими же, что и для ВВС-Г псевдотипа ВИЧ-1. Для оценки цитотоксичности положительных соединений, выявленных при исследованиях с вирусом ВИЧ-1, использовали два подхода. При первом подходе использовали другую линию модифицированных клеток HeLa-JC53, которая конститутивно экспрессирует люциферазу на высоком уровне без инфицирования вирусом. Уровень экспрессии люциферазы в этих клетках служил в качестве показателя клеточной репликации в присутствии данных соединений. Методики испытания соединений и определения люциферазной активности были такими же, что и при испытаниях на инфицирование вирусом. Другое исследование токсичности с использованием клеток HeLa-JC53 и коммерчески доступного для приобретения набора для MTS исследования (Promega), с помощью которого количественно определяют функцию митохондрий в клетках. Используя методы,подобные описанным выше,синтезировали 2-[5-бром-4-(4 циклопропилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-метил-4 сульфамоилфенил)ацетамид и 2-[5-бром-4-(4-этилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N(2-хлор-4-сульфамоилфенил)ацетамид, которые были N-4-карбамильным аналогом, 2-[5-бром-4-(4 этилнафталин-1-ил)-4 Н-[1,2,4]триазол-3-илсульфанил]-N-(2-хлор-4-карбамоилфенил)ацетамидом, и N-4 карбоксильным аналогом. Каждое из данных соединений испытывали в отношении набора мутантных обратных транскриптаз ВИЧ, включающего 20 из 22 мутантов, которые обнаружены в примерно 2% или более из образцов от пациентов, которые устойчивы к наиболее широко используемому ненуклеозидному ингибитору ОТ ВИЧ, эфавиренз 4S)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-4-(трифторметил)2 Н-3,1-бензоксазин-2-он). Для каждого из 20 широко распространенных испытанных мутантов по меньшей мере одно из этих соединений было более чем в 20 раз более активным, чем эфавиренз, или показана ЭК 50 (ЕС 50) менее 1 нМ. В большинстве случаев соединения удовлетворяли обоим критериям. В большинстве случаев все три соединения были более активны, чем эфавиренз. Соединения сравнивали по активности по обратным транскриптазам дикого типа и мутантным Y181C и Y188L. Оба амида значительно превосходили карбоновую кислоту в отношении всех трех ферментов. Результаты Соединения данного изобретения испытывали в отношении обратных транскриптаз дикого типа и четырех мутантных обратных транскриптаз ВИЧ. Результаты представлены в таблице 1 в виде ЭК 50 (нМ) И ПК 50 (IC50) (НМ). В таблице А составляет 50 нМ, В находится между 50 и 100 нМ и С составляет 100 нМ. НО (ND) означает не определено. Предпочтительными соединениями данного изобретения являются те, которые проявляют активность в отношении вирусов дикого типа (WT; ДТ) и устойчивых мутантов в концентрации ниже 50 нМ как по ЭК 50, так и ПК 50.