Ингибиторы фосфатидилинозитол-3-киназы дельта человека

008241 Перекрестная ссылка на родственные заявки Данная заявка заявляет приоритет предварительной заявки США с регистрационным номером 60/199 655, поданной 25 апреля 2000 года, и предварительной заявки США с регистрационным номером 60/238 057, поданной 25 октября 2000 года. Область изобретения Данное изобретение относится, в общем, к фосфатидилинозитол-3-киназным (PI3K) ферментам, и более конкретно к селективным ингибиторам активности PI3K и к способам применения таких веществ. Предпосылки изобретения Предполагалось, что передача сигналов клетками через 3'-фосфорилированные фосфоинозитиды участвует в многочисленных клеточных процессах, например в злокачественном превращении, передаче сигналов факторов роста, воспалении и иммунитете (см. Rameh et al., J. Biol. Chem. 274:8347-8350 (1999) в отношении обзора). Фермент, ответственный за генерирование этих фосфорилированных продуктов передачи сигналов, фосфатидилинозитол-3-киназа (PI-3-киназа; PI3K), был первоначально идентифицирован в виде активности, связанной с вирусными онкобелками и рецепторными тирозинкиназами факторов роста, которые фосфорилируют фосфатидилинозит (PI) и его фосфорилированные производные на 3'-гидроксиле циклической структуры инозита (Panayotou et al., Trends Cell. Biol. 2:358-60 (1992. Уровни фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата (PIP3), первичного продукта активации PI-3-киназы, увеличиваются при обработке клеток различными агонистами. Таким образом, считается, что активация PI-3-киназы участвует в диапазоне клеточных реакций, включающих в себя рост, дифференцировку клеток и апоптоз (Parker et al., Current Biology, 5:577-99 (1995); Yao et al., Science, 267:2003-05 (1995. Хотя стоящие ниже по ходу процесса мишени фосфорилированных липидов, генерируемых после активации PI-3-киназы, не были хорошо охарактеризованы, появляющиеся доказательства предполагают, что белки, содержащие домен гомологии плекстрина и FYVE-фингер-домен, активируются при связывании с различными фосфатидилинозитлипидами (Sternmark et al., J. Cell. Sci., 112:4175-83 (1999); Lemmon et al.,Trends Cell. Biol., 7:237-42 (1997. In vitro некоторые изоформы протеинкиназы С (РКС) непосредственно активируются PIP3, и было показано, что РКС-родственная протеинкиназа, РКВ, активируется PI-3 киназой (Burgering et al., Nature, 376:599-602 (1995. В настоящее время семейство PI-3-киназных ферментов было разделено на три класса на основе их субстратных специфичностей. PI3K класса I могут фосфорилировать фосфатидилинозит (PI), фосфатидилинозитол-4-фосфат и фосфатидилинозитол-4,5-бифосфат (PIP2) с образованием фосфатидилинозитол-3 фосфата (PIP), фосфатидилинозитол-3,4-бифосфата и фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата, соответственно. PI3K класса II фосфорилируют PI и фосфатидилинозитол-4-фосфат, тогда как PI3K класса III могут фосфорилировать только PI. Первоначальная очистка и молекулярное клонирование PI-3-киназы выявило, что она является гетеродимером, состоящим из субъединиц р 85 и р 110 (Otsu et al., Cell, 65:91-104 (1991); Hiles et al., Cell,70:419-29 (1992. С тех пор были идентифицированы четыре различных PI3K класса I, названных PI3Kи , каждая из которых состоит из отличающихся каталитической субъединицы 110 кДа и регуляторной субъединицы. Более конкретно, каждая из трех каталитических субъединиц, т.е. р 110, р 110 и р 110, взаимодействует с одной и той же регуляторной субъединицей, р 85; тогда как р 110 взаимодействует с отличающейся регуляторной субъединицей, р 101. Как описано ниже, распределения экспрессии каждой из этих PI3K в клетках и тканях человека также являются различными. Хотя в последнее время было накоплено изобилие информации о клеточных функциях PI-3-киназ в целом, роли, выполняемые индивидуальными изоформами, являются в значительной степени неизвестными. Было описано клонирование бычьей р 110. Этот белок был идентифицирован как белок, родственный белку Saccharomyces cerevisiae, Vps34p, белку, участвующему в процессинге вакуолярного белка. Было показано, что рекомбинантный продукт р 110 также связывается с р 85 с образованием Р 13Kактивности в трансфицированных клетках COS-1. См. Hiles et al., Cell, 70, 419-29 (1992). Клонирование второй изоформы р 110 человека, названной р 110, описано в Нu et al., Mol. Cell.Biol., 13:7677-88 (1993). Сообщается, что эта изоформа связывается с р 85 в клетках и является экспрессируемой повсеместно, так как мРНК р 110 была обнаружена в многочисленных тканях человека и мыши, а также в эндотелиальных клетках пупочной вены человека, Т-клетках лейкоза человека Jurkat, клетках 293 почек эмбриона человека, фибробластах 3 Т 3 мышей, клетках HeLa и клетках карциномы мочевого пузыря крысы. Такая широкая экспрессия предполагает, что эта изоформа является важной в широком диапазоне в путях передачи сигналов. Идентификация изоформы р 110 PI-3-киназы описано в Chantry et al., J. Biol. Chem., 272:19236-41(1997). Наблюдали, что изоформа р 110 экспрессируется тканеограниченным образом. Она экспрессируется на высоком уровне в лимфоцитах и лимфоидных тканях, что предполагает, что этот белок может играть роль в опосредуемой PI-3-киназой передаче сигнала в иммунной системе. Подробности, касающиеся изоформы р 110, можно найти также в патентах США 5 858 753; 5 822 910 и 5 985 589. См. также Vanhaesebroeck et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94:4330-5 (1997) и международную публикацию-1 008241 В каждом из подтипов PI3K,исубъединица р 85 функционирует для локализации PI-3-киназы в плазматической мембране посредством взаимодействия ее домена SH2 с фосфорилированными остатками тирозина (присутствующими в контексте подходящей последовательности) в белках-мишенях(Rameh et al., Cell, 83:821-30 (1995. Были идентифицированы две изоформы р 85, р 85, которая экспрессируется повсеместно, и р 85, которая обнаруживается, прежде всего, в головном мозгу и лимфоидных тканях (Volinia et al., Oncogene, 7:789-93 (1992. Связь субъединицы р 85 с каталитическими субъединицами PI-3-киназы р 110,или , является по-видимому, необходимой для каталитической активности и стабильности этих ферментов. Кроме того, связывание Ras-белков также отрицательно регулирует активность PI-3-киназы. Клонирование р 110 выявило дополнительную сложность в семействе PI3K ферментов (Stoyanov etal., Science, 269:690-93 (1995. Изоформа р 110 является близкородственной р 110 и р 110 (45-48% идентичность в каталитическом домене), но, как отмечалось, не использует р 85 в качестве нацеливающей субъединицы. Вместо этого, р 110 содержит дополнительный домен, называемый "доменом гомологии плекстрина" вблизи его амино-конца. Этот домен делает возможным взаимодействие р 110 с субъединицами гетеротримерных G-белков, и это взаимодействие, по-видимому, регулирует ее активность. Регуляторная субъединица р 101 для РI3K была первоначально клонирована в свинье, а затем был идентифицирован ортолог человека (Krugmann et al., J. Biol. Chem., 274:17152-8 (1999. ВзаимодействиеN-концевого района р 101 с N-концевым районом р 110 является, по-видимому, критическим для активации PI3K через G, упомянутой выше. Конститутивно активный полипептид PI3K описан в международной публикации WO 96/25488. Эта публикация описывает получение химерного слитого белка, в котором фрагмент р 85 из 102 остатков,известный как район интеp-SH2 (iSH2), слит через линкерный район с N-концом мышиной р 110. iSH2 домен p85, по-видимому, способен активировать РI3K-активность способом, сравнимым с интактным р 85 (Klippel et al., Mol. Cell. Biol., 14:2675-85 (1994. Таким образом, PI-3-киназы могут быть определены по их аминокислотной идентичности или их активности. Дополнительные члены этого растущего семейства генов включают в себя более отдаленно родственные липид- и протеинкиназы, в том числе TOR1 Vps34 и TOR2 Saccharomyces cerevisiae (и их гомологи млекопитающих, такие как FRAP и mTOR), продукт гена атаксии телангиэктазии (ataxiatelangiectasia) (ATR) и каталитическую субъединицу ДНК-зависимой протеинкиназы (ДНК-ПК). См., в общем, Hunter, Cell, 83:1-4 (1995). По-видимому, PI-3-киназа участвует также в ряде аспектов активации лейкоцитов. Было показано,что р 85-ассоциированная PI-3-киназная активность физически ассоциирована с цитоплазматическим доменом CD28, который является важной костимуляторной молекулой для активации Т-клеток в ответ на антиген (Pages et al., Nature, 369:327-29 (1994); Rudd, Immunity, 4:527-34 (1996. Активация Т-клеток посредством CD28 снижает порог для активации антигеном и увеличивает величину и продолжительность пролиферативной реакции. Эти эффекты связаны с увеличением транскрипции ряда генов, в том числе интерлейкина-2 (IL2), важного фактора роста Т-клеток (Fraser et al., Science, 251:313-16 (1991. Мутация CD28, в результате которой он уже не может взаимодействовать с PI-3-киназой, приводит к неуспеху инициации продуцирования IL2, что предполагает критическую роль PI-3-киназы в активации Т-клеток. Специфические ингибиторы против индивидуальных членов семейства ферментов обеспечивают неоценимые инструменты для расшифровки функций каждого фермента. Два соединения, LY294002 и вортманнин, были широко использованы в качестве ингибиторов PI-3-киназ. Однако эти соединения являются неспецифическими ингибиторами PI3K, так как они не различают среди четырех членов PI-3 киназ класса I. Например, величины IC50 вортманнина против каждого из различных PI-3-киназ класса I находятся в диапазоне 1-10 нМ. Подобным образом, величины IC50 для LY294002 против этих PI-3-киназ равны приблизительно 1 мкМ (Fruman et al., Ann. Rev. Biochem., 67:481-507 (1998. Таким образом,применимость этих соединений в исследовании функций индивидуальных PI-3-киназ класса I является ограниченной. На основании исследований с использованием вортманнина существует доказательство, что функция PI-3-киназ является необходимой также для некоторых аспектов передачи сигналов лейкоцитов через связанные с G-белком рецепторы (Thelen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:4960-64 (1994. Кроме того, было показано, что вортманнин и LY294002 блокируют миграцию нейтрофилов и высвобождение супероксида. Однако, ввиду того, что эти соединения не различают среди различных изоформ PI3K, остается неясным, какие конкретные изоформа или изоформы PI3K участвуют в этих феноменах. Ввиду приведенных выше соображений, ясно, что не существует знаний, касающихся структурных и функциональных признаков PI-3-киназных ферментов, включающих в себя субклеточную локализацию, состояния активации, субстратные аффинности и т.п. Кроме того, остаются невыясненными функции, которые выполняют эти ферменты как в нормальных, так и в пораженных болезнью тканях. В частности, функция PI3K в лейкоцитах ранее не была охаратеризована, и знания, касающиеся ее функции в физиологии человека, остаются ограниченными. Коэкспрессия в этих тканях других изоформ PI3K до сих пор мешала попыткам разделения активностей каждого фермента. Кроме того, разделение активностей различных изозимов PI3K не может быть возможным без идентификации ингибиторов, которые демонстрируют свойства селективного ингибирования. В самом деле, авторам заявки в настоящее время неизвестно о том, чтобы были продемонстрированы такие селективные, или лучше, специфические ингибиторы изозимов PI3K. Таким образом, в данной области существует потребность в дополнительной структурной характеристике полипептида PI3K. Существует также потребность в функциональной характеристике PI3K. Далее, понимание PI3K авторами заявки требует дополнительного уточнения структурных взаимодействий р 110, как с его регуляторной субъединицей, так и с другими белками в клетке. Остается также потребность в селективных или специфических ингибиторах изозимов PI3K, чтобы можно было лучше охарактеризовать функции каждого изозима. В частности, селективные или специфические ингибиторыPI3K являются желательными для выяснения роли этого изозима и для развития фармацевтических средств для модуляции активности данного изозима. Одним аспектом данного изобретения является обеспечение соединений, которые могут ингибировать биологическую активность PI3K человека. Другим аспектом данного изобретения является обеспечение соединений, которые ингибируют PI3K селективно, проявляя относительно низкую ингибиторную активность против других изоформ PI3K. Другим аспектом данного изобретения является обеспечение способов характеристики функции PI3K человека. Другим аспектом изобретения является обеспечение способов селективной модуляции активности PI3K человека и тем самым активации лекарственного лечения заболеваниий, опосредованных дисфункцией PI3K. Другие аспекты и преимущества данного изобретения будут вполне очевидными специалисту с обычной квалификацией в данной области. Сущность изобретения Данное изобретение относится к соединениям, которые ингибируют активность PI3K, включая соединения, которые селективно ингибируют активность PI3K, и к способам применения таких соединений. В одном варианте данное изобретение обеспечивает соединения, имеющие общую структурную формулу (I): где А обозначает необязательно замещенную моноциклическую или бициклическую циклическую систему, содержащую по меньшей мере два атома азота, и по меньшей мере одно кольцо этой системы является ароматическим;NRaC(=O)C1-3aлкиленC(=O)ORa, арилОС 1-3aлкилeнN(Ra)2, apилOC(=O)Ra, С 1-4 алкиленС(=О)ORa, ОС 1-4 алкиленС(=О)ORa, C1-4aлкиленOC1-4aлкиленC(=O)ORa, C(=O)NRaSO2Ra, С 1-4 алкиленN(Ra)2, C2-6 алкениленN(Rа)2,C(=O)NRaC1-4aлкиленORa, С(=О)NRaC1-4 алкиленНеt, OC2-4 алкиленN(Rа)2, ОС 1-4 алкиленСН(ORb)СН 2N(Ra)2,ОС 1-4 алкиленНеt, OC2-4 алкиленORa, OC2-4 алкиленNRaC(=O)ORa, NRaC1-4 алкиленN(Ra)2, NRaC(=O)Ra,NRaC(=O)N(Ra)2, N(SO2C1-4aлкил)2, NRa(SО 2 С 1-4 алкила), SO2N(Ra)2, OSO2CF3, С 1-3 алкиленарила, C1-4 алкиленНеt,C1-6aлкиленORb, C1-3aлкиленN(Ra)2, C(=O)N(Ra)2, NHC(=O)C1-С 3 алкиленарила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, арилОС 1-3 алкиленN(Ra)b, apилOC(=O)Rb, NНС(=O)С 1-3 алкилен-С 3-8 гетероциклоалкила,NНС(=O)С 1-3 алкиленНеt, ОС 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленС(=O)ОRb, С(=O)С 1-4 алкиленНеt и NНС(=O)галогенС 1-6 алкила; или R1 и R2 взяты вместе с образованием 3- или 4-членного компонента алкиленовой или алкениленовой цепи 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;R3 выбран из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного С 1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила,С 3-8 гетероциклоалкила, С 1-4 алкиленциклоалкила, С 2-6 алкенила, С 1-3 алкиленарила, арилС 1-3 алкила, C(=O)Ra,арила, гетероарила, C(=O)ORa, C(=O)N(Ra)2, C(=S)N(Ra)2, SO2Ra, SO2N(Ra)2, S(=O)Ra, S(=O)N(Ra)2,C(=O)NRaC1-4 алкиленORа, С(=O)NRaC1-4 алкиленНеt, С(=O)С 1-4 алкиленарила, C(=O)C1-4 алкиленгетероарила,С 1-4 алкиленарила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена, SO2N(Ra)2, N(Ra)2,C(=O)ORa, NRaSO2CF3, CN, NO2, C(=O)Ra, ORa, C1-4aлкиленN(Ra)2, и ОС 1-4 алкиленN(Ra)2, С 1-4 алкиленгетероарила, С 1-4aлкиленHet, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленгетероарила,С 1-4 алкиленС(=O)Неt, C1-4aлкиленC(=O)N(Ra)2, С 1-4 алкиленORa, C1-4aлкиленNRaC(=O)Ra, С 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленORa, С 1-4 алкиленN(Ra)2, C1-4 алкиленС(=O)ORа и С 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленС(=O)OR3;Ra выбран из группы, состоящей из водорода, С 1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, C1-3 алкиленN(Ra)2, арила, арилС 1-3 алкила, С 1-3 алкиленарила, гетероарила, гетероарилС 1-3 алкила и C1-3 алкиленгетероарила; или две группы Ra взяты вместе с образованием 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;Het обозначает 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, насыщенное или частично или полностью ненасыщенное, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из кислорода, азота и серы, и необязательно замещенное С 1-4 алкилом или C(=O)ORa; и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты,при условии, что если X-Y представляет собой CH2S, то R3 является отличающимся от-4 008241 и если X-Y представляет собой CH2S, то R3 является отличающимся от -СН 2 СН(ОН)СН 2 ОН-замещенного фенила, и где циклическая система А может быть необязательно замещена одним-тремя, предпочтительно однимдвумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из N(Ra)2, галогена, С 1-3 алкила, S(С 1-3 алкила), ORa и группа R3 может быть замещена одним-тремя заместителями, например галогеном, ORa, С 1-6 алкилом, арилом, гетероарилом, NO2, N(Ra)2, NRaSO2CF3, NRaC(=O)Ra, C(=O)ORa, NRaC1-4 алкилен(Ra)2,SO2N(Ra)2, CN, C(=O)Ra, С 1-4 алкиленN(Ra)2 и ОС 1-4 алкиленN(Ra)2,термин "арил", один или в комбинации, определяется здесь как моноциклическая или полициклическая ароматическая группа, незамещенная или замещенная одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, алкила, фенила, гидроксиалкила, алкокси, алкоксиалкила, галогеналкила, нитро,амино, алкиламино, ациламино, алкилтио, алкилсульфинила и алкилсульфонила,термин "гетероарил" определяется здесь как моноциклическая или бициклическая циклическая система, содержащая одно или два ароматических кольца и содержащая по меньшей мере один атом азота,кислорода или серы в ароматическом кольце, которая может быть незамещенной или замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, алкила, гидрокси, гидроксиалкила, алкокси,алкоксиалкила, галогеналкила, нитро, амино, алкиламино, ациламино, алкилтио, алкилсульфинила и алкилсульфонила, и термин "циклоалкил" определяется как циклическая С 3-С 8-углеводородная группа. В предпочтительных вариантах X выбран из группы, состоящей из СН 2, СН 2 СН 2, СН=СН, СН(СН 3),СН 2 СН(СН 3) и С(СН 3)2. В дополнительных предпочтительных вариантах Y выбран из группы, состоящей из О, S и NH. Примеры циклических систем А включают в себя, но не ограничиваются ими, имидазолил, пиразолил,1,2,3-триазолил, пиридизинил, пиримидинил, пиразинил, 1,3,5-триазинил, пуринил, циннолинил, фталазинил, хиназолинил, хиноксалинил, 1,8-нафтиридинил, птеридинил, 1 Н-индазолил и бензимидазолил. В предпочтительной группе соединений формулы (I) циклическая система А выбрана из группы,состоящей из-5 008241 Циклическая система А может быть необязательно замещена одним-тремя заместителями, выбранными из группы, состоящей из N(Ra)2, галогена, С 1-3 алкила, S(С 1-3 алкила), ORa, галогена и Конкретные заместители включают в себя, но не ограничиваются ими, NH2, NH(CH3), N(CH3)2,NHCH2C6H5, NH(C2H5), Cl, F, CH3, SCH3, ОН и В другой предпочтительной группе соединений формулы (I) R1 и R2, независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, ORa, галогена, С 1-6 алкила, CF3, NO2, N(Ra)2, NRaC1-4 алкиленN(Ra)2 и ОС 1-3 алкиленORa. Конкретные заместители включают в себя, но не ограничиваются ими, Н, ОСН 3, Cl, Br, F,CH3, CF3, NO2, ОН, N(CH3)2 и O(СН 2)2 ОСН 2 С 6 Н 5. R1 и R2 могут быть также взяты вместе с образованием 5- или 6-членного кольца. В предпочтительных вариантах R3 выбран из группы, состоящей из С 1-6 алкила, арила, гетероарила,С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, C(=O)ORa, C1-4 алкиленНеt, С 1-4 алкиленциклоалкила, С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)ОRа, С 1-4 алкиленС(=O)N(Rа)2, С 1-4 алкиленС(=O)Неt, C1-4 алкиленN(Rа)2 и С 1-4 алкиленNRаС(=O)Rа. Конкретные группы R3 включают в себя, но не ограничиваются ими,Группа R3 может быть замещена заместителем, выбранным из группы, состоящей из галогена, ORa,С 1-6 алкила, арила, гетероарила, NO2, N(Ra)2, NRaSO2CF3, NRaC(=O)Ra, C(=O)ORa, SO2N(Ra)2, CN, C(=O)Ra,C1-4aлкиленN(Ra)2) ОС 1-4 алкиленN(Ra)2 и NRaC1-4aлкиленN(Ra)2. Конкретные заместители для группы R3 включают в себя, но не ограничиваются ими, Cl, F, CH3, CH(CH3)2, OCH3, C6H5, NO2, NH2, NHC(=O)CH3,СO2 Н и N(CH3)CH2CH2N(CH3)2. В другом варианте данное изобретение относится к классу соединений, которые, как наблюдалось,ингибируют активность PI3K в биохимических анализах и анализах на основе клеток и, как ожидается,проявляют терапевтическое преимущество в медицинских состояниях, в которых активность PI3K является избыточной или нежелательной. Таким образом, данное изобретение обеспечивает класс соединений, имеющих структуру (II)R5 выбран из группы, состоящей из Н, ОСН 3 и галогена; или R4 и R5 вместе с С-6 и С-7 циклической системы хиназолина определяют 5- или 6-членное ароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько атомов О, N или S;q равно 1 или 2, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты,при условии, что по меньшей мере один из R4 и R5 является иным, чем Н, когда R6 является фенилом или 2-хлорфенилом. Примерами предпочтительных соединений, имеющих структуру II, являются соединения, перечисленные в п.16 формулы изобретения. Предпочтительно эти соединения имеют общую структуру (IV)R11 выбран из группы, состоящей из Н, ОСН 3 и галогена; или R10 и R11 вместе с С-6 и С-7 циклической системы хиназолина определяют 5- или 6-членное ароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько атомов О, N или S;(a) по меньшей мере один из R10 и R11 является отличающимся от 6-галоген- или 6,7-диметоксигрупп;(с) по меньшей мере один из R10 и R11 отличается от Н, когда R12 обозначает фенил или 2-хлорфенил и X обозначает S. Примерами предпочтительных соединений, имеющих структуру (IV), являются соединения, перечисленные в п.18 формулы изобретения. В другом варианте данное изобретение относится к способу ингибирования киназной активности полипептида фосфатидилинозитол-3-киназы дельта, предусматривающему контактирование этого полипептида с соединением, имеющим структуру (I). Предпочтительные соединения, применимые в соответствии с данным способом, включают в себя соединения, выбранные из группы, состоящей изR8 выбран из группы, состоящей из Н, ОСН 3 и галогена; или R7 и R8 вместе с С-6 и С-7 циклической системы хиназолина определяют 5- или 6-членное ароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько атомов О, N или S;q равно 1 или 2,при условии, что по меньшей мере один из R7 и R8 является отличающимся от 6-галоген или 6,7 диметоксигрупп и что R9 отличается от 4-хлорфенила. Еще в одном варианте данное изобретение относится к способу нарушения функции лейкоцитов,предусматривающему контактирование лейкоцитов с соединением, которое селективно ингибирует активность фосфатидилинозитол-3-киназы дельта (PI3K) в указанных лейкоцитах относительно других изоформ фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) типа I в анализе на основе клеток, где указанное соединение имеет структуру (III). Например, этот способ может практиковаться с использованием таких конкретных соединений, которые перечислены в п.24 формулы изобретения. Согласно этому способу лейкоциты могут включать в себя клетки, выбранные из группы, состоящей из нейтрофилов, В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов и базофилов. Например, в случаях, в которых лейкоциты содержат нейтрофилы, этот способ может предусматривать нарушение по меньшей мере одной функции нейтрофилов, выбранной из группы, состоящей из стимулированного высвобождения супероксида, стимулированного экзоцитоза и хемотаксической миграции. Предпочтительно данный способ, по существу, не нарушает бактериальный фагоцитоз или бактериальное убивание нейтрофилами. В случаях, когда лейкоциты содержат В-лимфоциты, данный способ может предусматривать нарушение пролиферации В-лимфоцитов или продуцирование антител Влимфоцитами. В случаях, когда лейкоциты содержат Т-лимфоциты, данный способ предусматривает нарушение пролиферации Т-лимфоцитов. В случаях, когда лейкоциты содержат базофилы, данный способ может предусматривать нарушение высвобождения гистамина базофилами. В способах нарушения функции лейкоцитов, в которых используют селективный ингибитор PI3K,предпочтительно, чтобы данное соединение было по меньшей мере в приблизительно 10 раз более селективным в отношении ингибирования PI3K в сравнении с другими изоформами PI3K типа I в анализе на основе клеток. Более предпочтительно данное соединение является, по меньшей мере, приблизительно в 20 раз более селективным в отношении ингибирования PI3K в сравнении с другими изоформами PI3K типа I в анализе на основе клеток. Еще более предпочтительно данное соединение является, по меньшей-8 008241 мере, приблизительно в 50 раз более селективным в отношении ингибирования PI3K в сравнении с другими изоформами PI3K типа I в анализе на основе клеток. В другом варианте способ нарушения функции лейкоцитов предусматривает контактирование лейкоцитов с соединением, имеющим структуру (I). Например, способ данного варианта изобретения может использовать такие конкретные соединения, которые перечислены в п.22 формулы изобретения. Еще в одном варианте данное изобретение относится к способу ослабления медицинского состояния, опосредованного активностью PI3K в лейкоцитах, предусматривающему введение животному терапевтически эффективного количества соединения, которое селективно ингибирует активность фосфатидилинозитол-3-киназы дельта в указанных лейкоцитах относительно других изоформ PI3K типа I в анализе на основе клеток, где соединение имеет структуру (I) или (III). Примеры медицинских состояний, которые могут лечиться в соответствии с этим способом, включают в себя состояния, характеризующиеся нежелательной функцией нейтрофилов, выбранной из группы, состоящей из стимулированного высвобождения супероксида, стимулированного экзоцитоза и хемотаксической миграции. Предпочтительно в соответствии с этим способом, по существу, отсутствует влияние на фагоцитарную активность указанных нейтрофилов или убивание бактерий указанными нейтрофилами. В другом варианте данное изобретение относится к способу нарушения функции остеокластов, предусматривающему контактирование остеокластов с соединением, которое селективно ингибирует активность фосфатидилинозитол-3 киназы дельта в остеокластах относительно других изоформ PI3K типа I в анализе на основе клеток, где указанное соединение имеет структуру (III). В соответствии с этим способом соединение, имеющее структуре (III), или часть молекулы такого соединения обладает высоким сродством к костной ткани. Еще в одном варианте данное изобретение относится к способу ослабления связанного с резорбцией кости нарушения в животном, предусматривающему введение этому животному терапевтически эффективного количества соединения, которое ингибирует активность фосфатидилинозитол-3-киназы дельта (PI3K) в остеокластах этого животного относительно других изоформ PI3K типа I в анализе на основе клеток, где указанное соединение имеет структуру (III). Предпочтительным связанным с резорбцией кости нарушением является остеопороз. В другом варианте данное изобретение относится к способу ингибирования роста или пролиферации клеток хронического миелогенного лейкоза, предусматривающему контактирование этих клеток с соединением, которое селективно ингибирует активность фосфатидилинозитол-3-киназы дельта в раковых клетках относительно других изоформ PI3K типа I в анализе на основе клеток, где указанное соединение имеет структуруR8 выбран из группы, состоящей из Н, ОСН 3 и галогена; или R7 и R8 вместе с С-6 и С-7 циклической системы хиназолина определяют 5- или 6-членное ароматическое кольцо, необязательно содержащее один или несколько атомов О, N или S;R9 выбран из группы, состоящей из С 1-6 алкила, фенила, галогенфенила, алкилфенила, бифенила,бензила, пиридинила, 4-метилпиперазинила, этилового эфира уксусной кислоты и морфолинила;X обозначает NH или S; и является фармацевтически приемлемыми солями и сольватами этого соединения,при условии, что по меньшей мере один из R7 и R8 является отличающимся от 6-галогена или 6,7 диметоксигрупп, a R9 отличается от 4-хлорфенила. Эти и другие признаки и преимущества данного изобретения будут понятными из подробного описания и примеров, которые приводятся здесь. Подробное описание и примеры обеспечены для облегчения понимания изобретения, но не предназначены для ограничения объема данного изобретения. Краткое описание графического материала Фиг. 1 показывает действие селективного ингибитора PI3K согласно изобретению на активность трех изоформ PI3K. Фиг. 2 показывает действие селективного ингибитора PI3K на генерирование супероксида нейтрофилами человека в присутствии TNF или IgG. Фиг. 3 показывает действие селективного ингибитора PI3K на генерирование супероксида нейтрофилами человека в присутствии TNF или fMLP. Фиг. 4 показывает действие селективного ингибитора PI3K на экзоцитоз эластазы в присутствииfMLP нейтрофилами человека. Фиг. 5 показывает действие селективного ингибитора PI3K на fMLP-индуцированный хемотаксис-9 008241 нейтрофилов человека. Фиг. 6 показывает, что селективный ингибитор PI3K не влияет на фагоцитоз и убивание S. aureus нейтрофилами. Фиг. 7 показывает действие селективного ингибитора PI3K на пролиферацию и продуцирование антител В-лимфоцитами человека. Фиг. 8 показывает действие селективного ингибитора PI3K на стимулируемую анти-IgM пролиферацию В-лимфоцитов мышиной селезенки. Фиг. 9 показывает действие селективного ингибитора PI3K на экзоцитоз эластазы в модели животного. Подробное описание предпочтительных вариантов Данное изобретение обеспечивает соединения, которые селективно ингибируют активность PI3K. Далее данное изобретение обеспечивает способы ингибирования активности PI3K, в том числе способы селективной модуляции активности изозима PI3K в клетках, в частности лейкоцитах, остеокластах и раковых клетках. Эти способы включают в себя применения in vitro, in vivo и ex vivo. Особенно выгодны способы селективной модуляции активности PI3K в клинической обстановке для облегчения заболевания или нарушений, опосредованных активностью PI3K. Таким образом, лечение заболеваний и нарушений, отличающихся избыточной или неприемлемой активностью PI3K, может проводиться посредством применения селективных модуляторов PI3K в соответствии с данным изобретением. Другие способы данного изобретения включают в себя возможность дополнительной характеристики физиологической роли данного изозима. Кроме того, данное изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, содержащие селективные ингибиторы PI3K. Обеспечены также промышленные изделия, содержащие селективное ингибирующее PI3K соединение (или фармацевтическая композиция,содержащая это соединение) и инструкции для применения данного соединения. Теперь будут описаны подробности этих и других полезных вариантов данного изобретения. Способы, описанные здесь, используют преимущество применения соединений, которые селективно ингибируют и предпочтительно специфически ингибируют активность PI3K в клетках, в том числе клетках in vitro, in vivo или ex vivo. Клетки, применимые в этих способах, включают в себя клетки, которые экспрессируют эндогенную PI3K, причем термин "эндогенная" указывает на то, что эти клетки экспрессируют PI3K в отсутствие рекомбинантного введения в эти клетки одного или нескольких полинуклеотидов, кодирующих полипептид PI3K или его биологически активный фрагмент. Способы включают в себя также применение клеток, которые экспрессируют экзогенный PI3K, когда один или несколько полинуклеотидов, кодирующих PI3K или его биологически активный фрагмент, были введены в данную клетку при помощи рекомбинантных процедур. Особенно выгодно то, что эти клетки могут находиться in vivo, т.е. в живом субъекте, например животном или человеке, причем ингибитор PI3K может быть использован в качестве терапевтического вещества для ингибирования активности PI3K в субъекте. Альтернативно, эти клетки могут быть выделены в виде отдельных клеток или в виде ткани для способов ex vivo или in vitro. Способы in vitro, также включенные в данное изобретение, могут содержать стадию контактирования фермента PI3K или его биологического активного фрагмента с ингибиторным соединением данного изобретения. ФерментPI3K может включать в себя очищенный и выделенный фермент, причем этот фермент выделяют из природного источника (например, клеток или тканей, которые в норме экспрессируют полипептид PI3K в отсутствие модификации посредством рекомбинантной технологии) или выделяют из клеток, модифицированных рекомбинантными способами для экспрессии экзогенного фермента. Термин "селективный ингибитор PI3K" в применении здесь относится к соединению, которое ингибирует изозим PI3K более эффективно, чем другие изозимы семейства PI3K. Подразумевается, что соединение, являющееся "селективным ингибитором PI3K", является более селективным в отношенииPI3K, чем соединения, общепринятым образом и в общем виде обозначаемые как ингибиторы PI3K,например вортманнин или LY294002. Одновременно вортманнин и LY294002 рассматриваются как "неселективные ингибиторы PI3K". Соединения любого типа, которые селективно негативно регулируют экспрессию или активность PI3K, могут быть использованы в качестве селективных ингибиторов PI3K в способах данного изобретения. Кроме того, соединения любого типа, которые селективно негативно регулируют экспрессию или активность PI3K и которые обладают приемлемыми фармакологическими свойствами, могут быть использованы в качестве селективных ингибиторов PI3K в терапевтических способах данного изобретения. Относительные эффективности соединений в качестве ингибиторов активности фермента (или другой биологической активности) могут быть установлены определением концентраций, в которых каждое соединение ингибирует активность до заранее заданной степени, с последующим сравнением этих результатов. Обычно предпочтительным определением является концентрация, которая ингибирует 50% активности в биохимическом анализе, т.е. 50% ингибиторная концентрация, или "IС 50". Определение IC50 может выполняться при помощи общепринятых способов, известных в данной области. Обычно IC50 мо- 10008241 жет быть определена измерением активности конкретного фермента в присутствии диапазона концентраций исследуемого ингибитора. Затем экспериментально полученные величины активности фермента наносят на график в зависимости от используемых концентраций ингибитора. Концентрация ингибитора,которая показывает 50% активность фермента (в сравнении с активностью в отсутствие какого-либо ингибитора), принимается за величину IС 50. Аналогично, другие ингибиторные концентрации могут быть определены посредством подходящих определений активности. Например, в некоторых постановках экспериментов может быть желательным определение 90% ингибиторной концентрации, т.е. IС 90, и т.д. Таким образом, "селективный ингибитор PI3K" альтернативно может рассматриваться как ссылка на соединение, которое проявляет 50% ингибиторную концентрацию (IC50) в отношении PI3K, которая является по меньшей мере в 10 раз, предпочтительно по меньшей мере в 100 раз, более предпочтительно по меньшей мере в 20 раз и более предпочтительно по меньшей мере в 30 раз более низкой, чем величинаIC50 в отношении любого или всех других членов семейства PI3K класса I. Термин "специфический ингибитор PI3K" может пониматься как ссылка на селективный ингибитор PI3K, который обнаруживаетIC50 в отношении PI3K, которая является по меньшей мере в 50 раз, предпочтительно по меньшей мере в 200 раз и еще более предпочтительно по меньшей мере в 500 раз более низкой, чем IC50 в отношении любого или всех других членов семейства PI3K класса I. Среди других задач, данное изобретение обеспечивает способы ингибирования функции лейкоцитов. Более конкретно, данное изобретение обеспечивает способы ингибирования или супрессии функций нейтрофилов и Т- и В-лимфоцитов. Что касается нейтрофилов, неожиданно было обнаружено, что ингибирование активности PI3K ингибирует функции нейтрофилов. Например, наблюдали, что соединения данного изобретения вызывают ингибирование классических функций нейтрофилов, таких как стимулированное высвобождение супероксида, стимулированный экзоцитоз и хемотаксическая миграция. Однако дополнительно наблюдали, что способ данного изобретения делает возможной супрессию определенных функций нейтрофилов, по существу, не влияя на другие функции этих клеток. Например, наблюдали, что фагоцитоз бактерий нейтрофилами, по существу, не ингибируется соединениями, являющимися селективными ингибиторами PI3K данного изобретения. Таким образом, данное изобретение включает в себя способы ингибирования функций нейтрофилов, по существу, без ингибирования фагоцитоза бактерий. Функции нейтрофилов, пригодные для ингибирования в соответствии с данным способом, включают в себя любую функцию, которая опосредована активностью или экспрессией PI3K. Такие функции включают в себя, без ограничения, стимулированное высвобождение супероксида, стимулированный экзоцитоз или дегрануляцию, хемотаксическую миграцию, адгезию с эндотелием сосудов (например, прикрепление/перекатывание нейтрофилов, запуск активности нейтрофилов и/или прилипание нейтрофилов к эндотелию), трансмуральный диапедез или эмиграцию через эндотелий в периферические ткани. Обычно эти функции могут вместе называться"воспалительными функциями", так как они обычно относятся к реакции нейтрофилов на воспаление. Воспалительные функции нейтрофилов можно отличить от функций убивания бактерий, например от фагоцитоза и убивания бактерий. Таким образом, данное изобретение дополнительно включает в себя способы лечения патологических состояний, в которых одна или несколько воспалительных функций нейтрофилов отклоняются от нормы или являются нежелательными. Посредством данного изобретения дополнительно установлено, что P3K играет роль в стимулированной пролиферации лимфоцитов, в том числе В-клеток и Т-клеток. Кроме того, PI3K, по-видимому,играет роль в стимулированной секреции антител В-клетками. Селективные ингибиторные соединенияPI3K данного изобретения применяли для установления, что эти явления могут аннулироваться ингибированием PI3K. Таким образом, данное изобретение включает в себя способы ингибирования пролиферации лимфоцитов и способы ингибирования продуцирования антител В-лимфоцитами. Другие способы данного изобретения включают в себя способы лечения патологических состояний, в которых одна или несколько этих функций лимфоцитов являются отклоняющимися от нормы или нежелательными. В настоящее время было установлено, что активность PI3K можно ингибировать селективно или специфически для облегчения лечения опосредованного PI3K заболевания при уменьшении или элиминации осложнений, которые обычно связаны с сопутствующим ингибированием активности других PI-3 киназ класса I. Для иллюстрации этого варианта способы данного изобретения могут использоваться на практике с применением членов соединений этого класса, которые, как было обнаружено, проявляют селективное ингибирование PI3K в сравнении с другими изоформами PI3K. Способы данного варианта могут практиковаться с использованием соединений, имеющих общую структуру (III). Предпочтительные способы используют соединения, которые, как было определено эмпирически, проявляют по меньшей мере 10-кратное селективное ингибирование PI3K относительно других изоформ PI3K. Например, эти способы могут практиковаться с использованием таких соединений, как следующие соединения: 3-(2-изопропилфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-фторфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он;- 11008241 3-(2-фторфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-метоксифенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2,6-дихлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(3-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бутил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-7-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-морфолин-4-ил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 8-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6,7-дифтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 6-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(3-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-пиридин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)трифторметил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 3-(2-хлорфенил)-6-гидрокси-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; этиловый эфир [5-фтор-4-оксо-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-4 Н-хиназолин-3-ил]уксусной кислоты; 3-(2,4-диметоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бифенил-2-ил-5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-изопропилфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-метил-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бифенил-2-ил-5-хлор-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-фторфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-фторфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-8-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бензил-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бутил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-морфолин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-7-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-фенил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-изопропилфенил)-3 Н-хиназолин-4-он и 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он. Далее, было определено, что способы данного изобретения могут быть выгодно использованы с применением членов класса соединений, которые проявляют ингибиторную в отношении PI3K активность, облегчая посредством этого ингибирование активности PI3K в опосредованных им заболеваниях. Например, в этом варианте способы данного изобретения могут практиковаться с использованием соединений, имеющих общую структуру (I) где А обозначает необязательно замещенную моноциклическую или бициклическую циклическую систему, содержащую по меньшей мере два атома азота, и по меньшей мере одно кольцо этой системы является ароматическим;R1 и R2, независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, C1-6 алкила, арила, гетероарила, галогена, NHC(=O)C1-3aлкиленN(Ra)2, NO2, ORa, OCF3, N(Ra)2, CN, OC(=O)Ra, C(=O)Ra, C(=O)ORa, apилORb, Het,NRaC(=O)C1-3aлкиленC(=O)ORa, apилOC1-3 алкиленN(Rа)2, apилOC(=O)Ra, C1-4aлкиленC(=O)ORa, ОС 1-4 алки- 12008241 ленС(=O)ORа, C1-4 алкиленOC1-4 алкиленС(=O)ORа, C(=O)NRaSO2Ra, C1-4aлкиленN(Ra)2, C2-6 алкениленN(Rа)2,C(=O)NRaC1-4aлкиленORa, C(=O)NRaC1-4aлкилeнHet, OC2-4aлкиленN(Ra)2, OC1-4aлкиленCH(ORb)CH2N(Ra)2,ОС 1-4 алкиленНеt, OC2-4 алкиленORа, OC2-4aлкиленNRaC(=O)ORa, NRaC1-4aлкиленN(Ra)2, NRaC(=O)Ra,NRaC(=O)N(Ra)2, N(SO2C1-4aлкил)2, NRa(SO2C1-4aлкилa), SO2N(Ra)2, OSO2CF3, С 1-3 алкиленарила, C1-4 алкиленНеt,С 1-6 алкиленORb, C1-3aлкиленN(Ra)2, C(=O)N(Ra)2, NHC(=O)C1-3 алкиленарила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, apилOC1-3aлкиленN(Ra)2, apилOC(=O)Rb, NНС(=O)С 1-3 алкилен-С 3-8 гетероциклоалкила,NHC(=O)C1-3aлкиленHet, OC1-4aлкиленOC1-4aлкиленC(=O)ORb, C(=O)C1-4aлкиленHet и NHC(=O)галогенС 1-6 алкила; или R1 и R2 взяты вместе с образованием 3- или 4-членного компонента алкиленовой или алкениленовой цепи 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;R3 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного водорода, C1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, С 1-4 алкиленциклоалкила, С 2-6 алкенила, C1-3 алкениларила, арилС 1-3 алкила,C(=O)Ra, арила, гетероарила, C(=O)ORa, C(=O)N(Ra)2, C(=S)N(Ra)2, SO2Ra, SO2N(Ra)2, S(=O)Ra, S(=O)N(Ra)2,C(=O)NRaC1-4aлкилeнORa, C(=O)NRaC1-4aлкилeнHet, С(=O)С 1-4 алкиленарила, C(=O)C1-4 алкиленгетероарила,С 1-4aлкиленарила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена, SO2N(Ra)2,N(Ra)2, C(=O)ORa, NRaSO2CF3, CN, NO2, C(=O)Ra, ORa, C1-4aлкиленN(Ra)2, и OС 1-4 алкиленN(Ra)2, С 1-4 алкиленгетероарила, C1-4 алкиленНеt, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленгетероарила, С 1-4 алкиленС(=O)Неt, C1-4aлкиленC(=O)N(Ra)2, C1-4aлкиленORa, C1-4aлкиленNRaC(=O)Ra, С 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленORa, С 1-4 алкиленN(Ra)2, C1-4 алкиленС(=O)ORа и С 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленС(=O)ОRа;Ra выбран из группы, состоящей из водорода, С 1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила,С 1-3 алкиленN(Ra)2, арила, арилС 1-3 алкила, C1-3 алкиленарила, гетероарила, гетероарилС 1-3 алкила и С 1-3 алкиленгетероарила; или две группы Ra взяты вместе с образованием 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;Het обозначает 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, насыщенное или частично или полностью ненасыщенное, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из кислорода, азота и серы, и необязательно замещенное С 1-4 алкилом или C(=O)ORa; и их фармацевтически приемлемых солей и сольватов (например, гидратов). Например, способы данного изобретения могут использовать соединения, которые обладают ингибиторной в отношении PI3K активностью, например следующие соединения: 3-(2-изопропилфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-фторфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-фторфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-метоксифенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2,6-дихлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бутил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-7-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-морфолин-4-ил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 8-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6,7-дифтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 6-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(3-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-пиридин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-трифторметил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 3-(2-хлорфенил)-6-гидрокси-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; этиловый эфир [5-фтор-4-оксо-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-4 Н-хиназолин-3-ил]уксусной кислоты; 3-бифенил-2-ил-5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-метоксифенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-изопропилфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-метил-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он;- 13008241 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бифенил-2-ил-5-хлор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-фторфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-фторфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-8-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бензил-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бутил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-морфолин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-7-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-фенил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(4-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6,7-диметокси-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-7-нитро-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-6-бром-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-6,7-диметокси-3 Н-хиназолин-4-он; 6-бром-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-о-толил-3 Н-бензо[g]хиназолин-4-он и 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-метоксифенил)-3 Н-хиназолин-4-он. Далее, данное изобретение обеспечивает соединения, которые являются селективными ингибиторами активности PI3K. Эти соединения проявляют ингибирование PI3K в биохимических анализах и селективно нарушают функцию РI3K-экспрессирующих клеток в анализах на основе клеток. Как описано здесь в другом месте, было продемонстрировано, что соединения данного изобретения ингибируют определенные функции в нейтрофилах и других лейкоцитах, а также функции остеокластов. Обычно соединения, обеспеченные данным изобретением, имеют общую структуру (I), являются их фармацевтически приемлемой солью или их пролекарством: где А обозначает необязательно замещенную моноциклическую или бициклическую циклическую систему, содержащую по меньшей мере два атома азота, и по меньшей мере одно кольцо этой системы является ароматическим;R1 и R2, независимо, выбраны из группы, состоящей из водорода, С 1-6 алкила, арила, гетероарила, галогена, NHC(=O)C1-3aлкиленN(Ra)2, NO2, ORa, OCF3, N(Ra)2, CN, OC(=O)Ra, C(=O)Ra, C(=O)ORa, арилORb, Het,NRaC(=O)C1-3aлкиленC(=O)ORa, арилОС 1-3 алкиленN(Rа)2, apилOC(=O)Ra, C1-4aлкиленC(=O)ORa, OC1-4aлкиленC(=O)ORa, C1-4 алкиленОС 1-4 алкиленС(=O)ORа, C(=O)NRaSO2Ra, C1-4aлкилeнN(Ra)2, C2-6aлкилeнN(Ra)2,С(=O)NRaС 1-4 алкиленORa, С(=O)NRаС 1-4 алкиленНеt, ОС 2-4 алкиленN(Rа)2, OC1-4aлкиленCH(ORb)CH2N(Ra)2,ОС 1-4 алкиленНеt, ОС 2-4 алкиленОRа, ОС 2-4 алкиленNRаС(=O)ORа, NRaC1-4aлкиленN(Ra)2, NRaC(=O)Ra,NRaC(=O)N(Ra)2, N(SO2C1-4 алкил)2, NRa(SO2C1-4aлкилa), SO2N(Ra)2, OSO2CF3, С 1-3 алкиленарила, С 1-4 алкиленНеt,C1-6aлкилeнORb, С 1-3 алкиленN(Ra)2, C(=O)N(Ra)2, NНС(=O)С 1-3 алкиленарила, C3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, арилОС 1-3 алкиленN(Ra)2, apилOC(=O)Rb, NНС(=O)С 1-3 алкилен-С 3-8 гетероциклоалкила,NНС(=O)С 1-3 алкиленНеt, ОС 1-4 алкиленОС 1-4 алкиленС(=O)ORb, C(=O)C1-4aлкилeнHet и NНС(=O)галогенС 1-6 алкила; или R1 и R2 взяты вместе с образованием 3- или 4-членного компонента алкиленовой или алкениленовой цепи 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;R3 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного водорода, C1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, С 1-4 алкиленциклоалкила, С 2-6 алкенила, С 1-3 алкениларила, арилС 1-3 алкила,C(=O)Ra, арила, гетероарила, C(=O)ORa, C(=O)N(Ra)2, C(=S)N(Ra)2, SO2Ra, SO2N(Ra)2, S(=O)Ra, S(=O)N(Ra)2,C(=O)NRaC1-4 алкиленORа, C(=O)NRaC1-4aлкиленHet, С(=O)С 1-4 алкиленарила, C(=O)C1-4 алкиленгетероарила,С 1-4 алкиленарила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена, SO2N(Ra)2,N(Ra)2, C(=O)ORa, NRaSO2CF3, CN, NO2, C(=O)Ra, ORa, С 1-4 алкиленN(Rа)2, и OC1-4aлкиленN(Ra)2, С 1-4 алкиленгетероарила, С 1-4 алкиленНеt, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленгетероарила, С 1-4 алкиленС(=O)Неt, C1-4aлкиленC(=O)N(Ra)2, C1-4aлкиленORa, C1-4aлкиленNRaC(=O)Ra, C1-4aлки- 14008241 ленOC1-4aлкиленORa, C1-4aлкиленN(Ra)2, C1-4 алкиленС(=O)ORа и C1-4aлкиленOC1-4aлкиленC(=O)ORa;Ra выбран из группы, состоящей из водорода, C1-6 алкила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила,C1-3aлкиленN(Ra)2, арила, арилС 1-3 алкила, C1-3 алкиленарила, гетероарила, гетероарилС 1-3 алкила и C1-3 алкиленгетероарила; или две группы Ra взяты вместе с образованием 5- или 6-членного кольца, необязательно содержащего по меньшей мере один гетероатом;Het обозначает 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, насыщенное или частично или полностью ненасыщенное, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из кислорода, азота и серы, и необязательно замещенное С 1-4 алкилом или C(=O)ORa; и их фармацевтически приемлемыми солями и сольватами (например, гидратами). В применении здесь термин "алкил" включает в себя имеющие прямую цепь или разветвленные углеводородные группы, содержащие указанное число атомов углерода, обычно метил, этил, и имеющие прямую цепь или разветвленные пропильную и бутильную группы. Углеводородная группа может содержать до 16 атомов углерода, предпочтительно 1-8 атомов углерода. Термин "алкил" включает в себя"соединенный мостиковой связью алкил", т.е. С 6-С 16-бициклическую или полициклическую углеводородную группу, например норборнил, адамантил, бицикло[2,2,2]октил, бицикло[2,2,1]гептил, бицикло[3,2,1]октил или декагидронафтил. Термин "циклоалкил" определяется как циклическая С 3-С 8 углеводородная группа, например циклопропил, циклобутил, циклогексил и циклопентил. Термин "алкенил" определяется идентично "алкилу", за исключением того, что он содержит двойную связь углерод-углерод. "Циклоалкенил" определяется сходно с циклоалкилом, за исключением того,что в кольце присутствует двойная связь углерод-углерод. Термин "алкилен" относится к алкильной группе, имеющей заместитель. Например, термин "C1-3 алкиленарил" относится к алкильной группе, содержащей 1-3 атома углерода и замещенной арильной группой. Термин "гало" или "галоген" определяется здесь как включающий в себя фтор, бром, хлор и иод. Термин "галогеналкил" определяется здесь как алкильная группа, замещенная одним или несколькими галогеновыми заместителями, фтором, хлором, бромом, иодом или их комбинациями. Подобным образом, термин "галогенциклоалкил" определяется как циклоалкильная группа, имеющая один или несколько галогеновых заместителей. Термин "арил", один или в комбинации, определяется здесь как моноциклическая или полициклическая ароматическая группа, предпочтительно моноциклическая или бициклическая ароматическая группа,например фенил или нафтил. Если нет других указаний, арильная группа может быть незамещенной или замещена, например, одним или несколькими, и в частности одним-тремя, заместителями, такими как галоген, алкил, фенил, гидроксиалкил, алкокси, алкоксиалкил, галогеналкил, нитро, амино, алкиламино,ациламино, алкилтио, алкилсульфинил и алкилсульфонил. Примеры арильных групп включают в себя фенил, нафтил, бифенил, тетрагидронафтил, хлорфенил, фторфенил, аминофенил, метилфенил, метоксифенил, трифторметилфенил, нитрофенил, карбоксифенил и т.п. Термины "арилС 1-3 алкил" и "гетероарил С 1-3 алкил" определяются как арильная или гетероарильная группа, имеющая С 1-3 алкильный заместитель. Термин "гетероарил" определяется здесь как моноциклическая или бициклическая циклическая система, содержащая одно или два ароматических кольца и содержащая по меньшей мере один атом азота, кислорода или серы в ароматическом кольце, которая может быть незамещенной или замещена, например, одним или несколькими, и в частности одним-тремя, заместителями, такими как галоген, алкил,гидрокси, гидроксиалкил, алкокси, алкоксиалкил, галогеналкил, нитро, амино, алкиламино, ациламино,алкилтио, алкилсульфинил и алкилсульфонил. Примеры гетероарильных групп включают в себя тиенил,фурил, пиридил, оксазолил, хинолил, изохинолил, индолил, триазолил, изотиазолил, изоксазолил, имидазолил, бензотиазолил, пиразинил, пиримидинил, тиазолил и тиадиазолил. Термин "Het" определяется как моноциклическая, бициклическая и трициклическая группы, содержащие один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из кислорода, азота и серы. Группа "Het" может также содержать оксогруппу (=O), присоединенную к кольцу. Неограничивающие примеры групп Het включают в себя 1,3-диоксолан, 2-пиразолин, пиразолидин, пирролидин, пиперазин,пирролин, 2 Н-пиран, 4 Н-пиран, морфолин, тиаморфолин, пиперидин, 1,4-дитиан и 1,4-диоксан. Термин "гидрокси" определяется как -ОН. Термин "алкокси" определяется как -OR, где R обозначает алкил. Термин "алкоксиалкил" определяется как алкильная группа, где водород заменен алкоксигруппой. Термин "(алкилтио)алкил" определяется подобно алкоксиалкилу, за исключением того, что присутствует атом серы, а не атом кислорода. Термин "гидроксиалкил" определяется как гидроксигруппа, присоединенная к алкильной группе. Термин "ациламино" определяется как RC(=O)N, где R обозначает алкил или арил. Термин "алкилтио" определяется как -SR, где R обозначает алкил. Термин "алкилсульфинил" определяется как R-SO2, где R обозначает алкил.- 15008241 Термин "амино" определяется как -NH2, а термин "алкиламино" определяется как -NR2, где по меньшей мере один R обозначает алкил, а второй R обозначает алкил или водород. Термин "ациламино" определяется как RC(=O)N, где R обозначает алкил или арил. Термин "алкилтио" определяется как -SR, где R обозначает алкил. Термин "алкилсульфинил" определяется как R-SO2, где R обозначает алкил. Термин "алкилсульфонил" определяется как R-SO3, где R обозначает алкил. Термин "нитро" определяется как -NO2. Термин "трифторметил" определяется как -CF3. Термин "трифторметокси" определяется как -OCF3. Термин "циано" определяется как -CN. В предпочтительных вариантах X выбран из группы, состоящей из СН 2, СН 2 СН 2, СН=СН, СН(СН 2),СН 2 СН(СН 3) и С(СН 3)2. В дополнительных предпочтительных вариантах Y выбран из группы, состоящей из О, S и NH. Циклическая система А может быть моноциклической или бициклической. Моноциклические циклические системы А являются ароматическими. Бициклические циклические системы А содержат по меньшей мере одно ароматическое кольцо, но оба кольца не могут быть ароматическими. Примеры циклических систем А включают в себя, но не ограничиваются ими, имидазолил, пиразолил, 1,2,3 триазолил, пиридизинил, пиримидинил, пиразинил, 1,3,5-триазинил, пуринил, циннолинил, фталазинил,хиназолинил, хиноксалинил, 1,8-нафтиридинил, птеридинил, 1 Н-индазолил и бензимидазолил. В предпочтительной группе соединений формулы (I) А представляет необязательно замещенную циклическую систему, выбранную из группы, состоящей из Циклическая система А может быть необязательно замещена одним-тремя, предпочтительно одним-двумя заместителями, выбранными из группы, состоящей из N(Ra)2, галогена, C1-3 алкила, S(C1-3 алкила), ORa и Конкретные заместители включают в себя, но не ограничиваются ими, NH2, NH(CH3), N(CH3)2,NHCH2C6H5, NH(C2H5), Cl, F, CH3, SCH3, ОН и В другой предпочтительной группе соединений формулы (I) R1 и R2, независимо, представлены водородом, ORa, галогеном, С 1-6 алкилом, CF3, NO2, N(Ra)2, NRaC1-4 алкиленN(Rа)2 и OC1-3aлкиленORa. Конкретные заместители включают в себя, но не ограничиваются ими, Н, ОСН 3, Cl, Br, F, CH3, CF3, NO2, ОН,N(CH3)2,и O(СН 2)2 ОСН 2 С 6 Н 5. R1 и R2 могут быть также взяты вместе с образованием кольца, например фенильного кольца. В предпочтительных вариантах R3 выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного С 1-6 алкила, арила, гетероарила, С 3-8 циклоалкила, С 3-8 гетероциклоалкила, C(=O)ORa, С 1-4 алкиленНеt, С 1-4 алкиленциклоалкила, С 1-4 алкиленарила, С 1-4 алкиленС(=O)С 1-4 алкиленарила, C1-4aлкиленC(=O)ORa, C1-4aлкиленC(=O)N(Ra)2, С 1-4 алкиленС(=O)Неt, C1-4aлкиленN(Ra)2 и C1-4aлкилeнNRaC(=O)Ra. Конкретные группыR3 включают в себя, но не ограничиваются ими,Группа R3 может быть замещена одним-тремя заместителями, например галогеном, ORa, С 1-6 алкилом, арилом, гетероарилом, NO2, N(Ra)2, NRaSO2CF3, NRaC(=O)Ra, C(=O)ORa, NRaC1-4aлкиленN(Ra)2,SO2N(Ra)2, CN, C(=O)Ra, C1-4 алкиленN(Rа)2 и ОС 1-4 алкиленN(Ra)2. Конкретные заместители для группы R3 включают в себя, но не ограничиваются ими, Cl, F, CH3, CH(CH3)2, OCH3, C6H5, NO2, NH2, NHC(=O)CH3,СO2 Н и N(CH3)CH2CH2N(CH3)2. В применении здесь циклическая структура хиназолина и нумерация этой циклической структуры являются следующими: Циклическая структура пурина и нумерация этой циклической структуры являются следующими:- 18008241 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бензил-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бутил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-морфолин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-7-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-6-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(4-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6,7-диметокси-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-7-нитро-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-6-бром-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-6,7-диметокси-3 Н-хиназолин-4-он; 6-бром-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-бензо[g]хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он и 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-метоксифенил)-3 Н-хиназолин-4-он. Предпочтительные соединения, обеспеченные данным изобретением, имеют структуру (IV), примерами их являются следующие соединения: 3-(2-изопропилфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-фторфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-фторфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2,6-дихлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 5-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-метил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бутил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-7-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-морфолин-4-ил-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 8-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-6,7-дифтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 6-хлор-3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(3-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3-пиридин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-(2-хлорфенил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-трифторметил-3 Н-хиназолин-4-он; 3-бензил-5-фтор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; ацетатная соль 3-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-она; 3-(2-хлорфенил)-6-гидрокси-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; этиловый эфир [5-фтор-4-оксо-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-4 Н-хиназолин-3-ил]уксусной кислоты; 3-бифенил-2-ил-5-хлор-2-(9 Н-пурин-6-илсульфанилметил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-изопропилфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-метил-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бифенил-2-ил-5-хлор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-фторфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-фторфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-8-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-(2-хлорфенил)-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-метил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бензил-5-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-бутил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-морфолин-4-ил-3 Н-хиназолин-4-он; 2-(6-аминопурин-9-илметил)-3-(2-хлорфенил)-7-фтор-3 Н-хиназолин-4-он; и 2-(6-аминопурин-9-илметил)-5-хлор-3-о-толил-3 Н-хиназолин-4-он. Термин "пролекарство" в применении здесь относится к соединениям, которые быстро превращаются in vivo в соединение, имеющее структурную формулу (I), приведенную здесь выше, например, посредством гидролиза. Образование пролекарств обсуждается в общих чертах в Hardma et al. (Eds.),Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th ed., pp. 11-16 (1996). Подробное обсуждение обеспечено в Higuchi et al., Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ASCD Symposium Series и в Roche (ed.), Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and PergamonPress (1987). Вкратце, введение лекарственного средства сопровождается выведением из тела или тем- 19008241 или иным биопревращением, посредством чего биологическая активность лекарственного средства уменьшается или элиминируется. Альтернативно, процесс биопревращения может приводить к метаболическому побочному продукту, который сам является более активным или таким же активным в сравнении с лекарственным средством, введенным первоначально. Увеличивающееся понимание этих процессов биопревращения позволяет конструировать так называемые "пролекарства", которые после биопревращения становятся более физиологически активными в их измененном состоянии. Таким образом,пролекарства включают в себя фармакологически неактивные соединения, которые превращаются в биологически активные метаболиты. Для иллюстрации, пролекарства могут быть превращены в фармакологически активную форму посредством гидролиза, например эфирной или амидной связи, введением или экспонированием таким образом функциональной группы на полученном продукте. Пролекарства могут быть "сконструированы" для реакции с эндогенным соединением для образования водорастворимого конъюгата, который дополнительно усиливает фармакологические свойства данного соединения, например увеличивает полупериод существования в кровотоке. Альтернативно, пролекарства могут быть "сконструированы" таким образом, что они подвергаются ковалентной модификации на функциональной группе, например, глюкуроновой кислотой, сульфатом, глутатионом, аминокислотами или ацетатом. Полученный конъюгат может инактивироваться и экскретироваться в моче или сделан более активным, чем исходное соединение. Высокомолекулярные конъюгаты также могут экскретироваться в желчь, подвергаться ферментативному расщеплению и высвобождаться обратно в кровоток, что эффективно увеличивает полупериод существования в организме введенного первоначально соединения. Способы идентификации негативных регуляторов активности PI3K Белок PI3K, а также его фрагменты, обладающие биологической активностью, могут быть использованы для скрининга предполагаемых негативных регуляторных соединений любым из разнообразных способов скрининга лекарственных средств. Негативный регулятор PI3K является соединением, которое уменьшает или устраняет способность PI3K выполнять любую из его биологических функций. Примером подобных соединений является агент, который снижает способность полипептида PI3K фосфорилировать фосфатидилинозит или нацеливать на подходящие структуры в клетке. Селективность соединения, которое негативно регулирует активность PI3K, может быть оценена сравнением его активности на PI3K с его активностью на других белках. Селективные негативные регуляторы включают в себя, например, антитела и другие белки или пептиды, которые специфически связываются с полипептидом PI3K, олигонуклеотиды, которые специфически связываются с полипептидами PI3K, и другие непептидные соединения (например, выделенные или синтетические органические молекулы), которые специфически взаимодействуют с полипептидами PI3K. Негативные регуляторы включают в себя также соединения, описанные выше, но которые взаимодействуют с партнером специфического связывания полипептидов PI3K. Предпочтительные в настоящее время мишени для разработки селективных негативных регуляторов PI3K включают в себя, например:(1) цитоплазматические районы полипептидов PI3K, которые контактируют другие белки и/или локализуют PI3K в клетке;(2) районы полипептидов PI3K, которые связывают партнеры специфического связывания;(4) аллостерические регуляторные сайты полипептидов PI3K, которые могут или не могут взаимодействовать непосредственно с активным сайтом при регуляторном сигнале;(5) районы полипептидов PI3K, которые опосредуют мультимеризацию. Например, одной мишенью для разработки модуляторов является идентифицированное регуляторное взаимодействие р 85 с р 110, которое может участвовать в активации и/или субклеточной локализации компонента р 110. Другие селективные модуляторы включают в себя модуляторы, которые узнают специфические регуляторные или РI3K-кодирующие нуклеотидные последовательности. Модуляторы активности PI3K могут быть терапевтически применимыми в лечении широкого диапазона заболеваний и физиологических состояний, в которых участвует отклоняющаяся от нормы активность PI3K. Таким образом, данное изобретение обеспечивает способы характеристики эффективности тестируемого соединения в качестве ингибитора полипептида PI3K, причем указанный способ предусматривает стадии (а) измерения активности полипептида PI3K в присутствии тестируемого соединения; (b) сравнения активности полипептида PI3K в присутствии тестируемого соединения с активностью полипептида PI3K в присутствии эквивалентного количества ссылочного соединения (например, ингибиторного соединения PI3K данного изобретения, описанного здесь), причем более низкая активность полипептида PI3K в присутствии тестируемого соединения, чем в присутствии ссылочного соединения, указывает на то, что тестируемое соединение является более эффективным ингибитором, чем ссылочное соединение, а более высокая активность полипептида PI3K в присутствии тестируемого соединения, чем в присутствии ссылочного соединения, указывает на то, что тестируемое соединение является менее эффек- 20008241 тивным ингибитором, чем ссылочное соединение. Далее, данное изобретение обеспечивает способы характеристики эффективности тестируемого соединения в качестве ингибитора полипептида PI3K, предусматривающие стадии (а) определения количества контрольного соединения (например, ингибиторного соединения PI3K данного изобретения,описанного здесь), которое ингибирует активность полипептида PI3K, в виде ссылочного процента ингибирования, для определения посредством этого ссылочного ингибиторного количества для контрольного соединения; (b) определения количества тестируемого соединения, которое ингибирует активность полипептида PI3K, в виде ссылочного процента ингибирования, для определения посредством этого ссылочного ингибиторного количества для тестируемого соединения; (с) сравнения ссылочного ингибиторного количества для тестируемого соединения с ссылочным ингибиторным количеством для контрольного соединения, причем более низкое ссылочное ингибиторное количество для тестируемого соединения, чем для контрольного соединения, указывает на то, что тестируемое соединение является более эффективным ингибитором, чем контрольное соединение, а более высокое ссылочное ингибиторное количество для тестируемого соединения, чем для контрольного соединения, указывает на то, что тестируемое соединение является менее эффективным ингибитором, чем контрольное соединение. В одном аспекте данный способ использует ссылочное ингибиторное количество, которое является количеством соединения, которое ингибирует активность полипептида PI3K на 50, 60, 70 или 80%. В другом аспекте данный способ использует ссылочное ингибиторное количество, которое является количеством соединения, которое ингибирует активность полипептида PI3K на 90, 95 или 99%. Эти способы предусматривают определение ссылочного ингибиторного количества соединений в биохимическом анализе in vitro,в анализе на основе клеток in vitro или в анализе in vivo. Далее, данное изобретение обеспечивает способы идентификации негативного регулятора активности PI3K, предусматривающие стадии (i) измерения активности полипептида PI3K в присутствии и в отсутствие тестируемого соединения или (ii) идентификации в качестве негативного регулятора тестируемого соединения, которое снижает активность PI3K и которое конкурирует с соединением данного изобретения за связывание с PI3K. Кроме того, данное изобретение обеспечивает способы идентификации соединений, которые ингибируют активность PI3K, предусматривающие стадии (i) контактирования полипептида PI3K с соединением данного изобретения в присутствии и в отсутствие тестируемого соединения и (ii) идентификации тестируемого соединения в качестве негативного регулятора активности PI3K, когда это соединение конкурирует с соединением данного изобретения за связывание с PI3K. Таким образом, данное изобретение обеспечивает способ для скрининга на кандидатные негативные регуляторы активности PI3K и/или для подтверждения способа действия кандидата таких негативных регуляторов. Такие способы могут быть использованы против других изоформ PI3K параллельно для установления сравнительной активности тестируемого соединения на этих изоформах и/или относительно соединения данного изобретения. В этих способах полипептидом PI3K может быть фрагмент р 110, который проявляет киназную активность, т.е. фрагмент, содержащий каталитический сайт р 110. Альтернативно, полипептидом PI3K может быть фрагмент из р 110-связывающего домена р 85, и это обеспечивает способ идентификации аллостерических модуляторов PI3K. Эти способы могут быть использованы в клетках, экспрессирующих PI3K или его субъединицы, либо эндогенно, либо экзогенно. Таким образом, полипептид, применяемый в таких способах, может быть свободным в растворе, прикрепленным к твердому носителю, модифицированным для проявления на клеточной поверхности или локализованным внутриклеточно. Затем могут быть измерены модуляция активности или образование комплексов связывания между полипептидом PI3K и тестируемым агентом. Полипептиды PI3K человека поддаются высокопроизводительному биохимическому скринингу или скринингу с использованием анализа на основе клеток (HTS) в соответствии со способами, известными и практикуемыми в данной области, в том числе систем анализа меланофоров для исследования взаимодействий рецептор-лиганд, систем анализа на основе дрожжей и систем экспрессии клеток млекопитающих. В отношении обзора, см. Jayawickreme and Kost, Curr. Opin. Biotechnol., 8:629-34 (1997). Автоматизированные и минианализы HTS (высокопроизводительного скрининга) также рассматриваются, как описано, например, в Houston and Banks, Curr. Opin. Biotechnol., 8:734-40 (1997). Такие HTS-анализы используются для скрининга библиотек соединений для идентификации конкретных соединений, проявляющих желаемое свойство. Может использоваться любая библиотека соединений, в том числе химические библиотеки, библиотеки природных продуктов и комбинаторные библиотеки, содержащие случайные или сконструированные олигопептиды, олигонуклеотиды или другие органические соединения. Химические библиотеки могут содержать известные соединения, патентованные структурные аналоги известных соединений или соединения, которые идентифицированы из скрининга природных продуктов. Библиотеки природных продуктов являются коллекциями веществ, выделенных из природных ис- 21008241 точников, обычно микроорганизмов, животных, растений или морских организмов. Природные продукты выделяют из их источников ферментацией микроорганизмов с последующими выделением и экстракцией из ферментационных бульонов или прямой экстракцией из самих микроорганизмов или тканей(растений или животного). Библиотеки природных продуктов включают в себя поликетиды, нерибосомные пептиды и их варианты (в том числе не встречающиеся в природе варианты). В отношении обзора,см. Cane et al., Science, 282:63-68 (1998). Комбинаторные библиотеки состоят из больших количеств родственных соединений, таких как пептиды, олигонуклеотиды или другие органические соединения, в виде смеси. Такие соединения являются относительно простыми для конструирования и получения при помощи протоколов традиционного автоматизированного синтеза, ПЦР, клонирования или патентованных синтетических способов. Особый интерес представляют пептидные и олигонуклеотидные комбинаторные библиотеки. Другие представляющие интерес библиотеки включают в себя библиотеки пептидов, белков, пептидомиметиков, мультипаралельную синтетическую коллекцию, рекомбинаторные и полипептидные библиотеки. В отношении обзора комбинаторных химических способов и библиотек, созданных с их применением, см. Myers, Curr. Opin. Biotechnol., 8:701-07 (1997). После идентификации соединений, которые обнаруживают активность в качестве негативных регуляторов функции PI3K, может быть предпринята программа оптимизации в попытке улучшения эффективности и/или селективности этой активности. Этот анализ связи структуры и активности (SAR) обычно включает в себя повторяющиеся серии селективных модификаций структур соединений и их корреляции с биохимической или биологической активностью. Могут быть сконструированы семейства родственных соединений, все из которых проявляют желаемую активность, причем определенные члены этого семейства, а именно те, которые обладают подходящими фармакологическими характеристиками, потенциально квалифицируются как кандидаты на терапевтические вещества. Терапевтические применения ингибиторов активности PI3K Данное изобретение обеспечивает способ селективного или специфического ингибирования активности PI3K терапевтически или профилактически. Этот способ предусматривает введение селективного или специфического ингибитора активности PI3K в эффективном для этого количестве. Данный способ может быть использован в лечении человека или животных, которые имеют или могут иметь какое-либо состояние, симптомы или патология которого опосредованы экспрессией или активностью PI3K."Лечение" в применении здесь относится к предупреждению появления нарушения в животном, которое может быть предрасположенным к данному нарушению, но еще не было диагностировано как имеющее это нарушение; ингибированию данного нарушения, т.е. остановке его развития; ослаблению данного нарушения, т.е. индукции его регресса; или ослаблению данного нарушения, т.е. уменьшению тяжести симптомов, связанных с этим нарушением. Подразумевается, что "нарушение" включает в себя медицинские нарушения, заболевания, состояния, синдромы и т.п. без ограничения. Способы данного изобретения включают в себя различные режимы лечения субъекта-животного,предпочтительно млекопитающего, более предпочтительно примата и еще более предпочтительно человека. Среди млекопитающих животных, которые могут быть подвергнуты лечению, находятся, например, домашние животные (любимые животные), в том числе собаки и кошки; сельскохозяйственные животные, в том числе крупный рогатый скот, лошади, овцы, свиньи и козы; лабораторные животные, в том числе крысы, мыши, кролики, морские свинки и приматы (не человек); и обитатели зоопарков. Не относящиеся к млекопитающим животные включают в себя, например, птиц, рыбу, пресмыкающихся и земноводных. В одном аспекте способ данного изобретения может быть использован для лечения терапевтически или профилактически субъектов, которые имеют или могут иметь воспалительное нарушение. Один аспект данного изобретения происходит из участия PI3K в опосредовании аспектов воспалительного процесса. Не претендуя на какую-либо теорию, авторы полагают, что, поскольку воспаление включает в себя процессы, обычно опосредуемые активацией и хемотаксической трансмиграцией лейкоцитов (например, нейтрофилов, лимфоцитов и т.д.), и поскольку PI3K может опосредовать такие феномены, антагонисты PI3K могут быть использованы для супрессии повреждения, ассоциированного с воспалением."Воспалительное нарушение" в применении здесь может относиться к любому заболеванию, нарушению или синдрому, в которых избыточная или нерегулируемая воспалительная реакция приводит к избыточным воспалительным симптомам, повреждению ткани хозяина или утрате функции ткани. "Воспалительное нарушение" обозначает также патологическое состояние, опосредованное притоком лейкоцитов и/или хемотаксисом нейтрофилов."Воспаление" в применении здесь обозначает локализованную, защитную реакцию, индуцируемую повреждением или деструкцией тканей, которая служит для разрушения, разбавления или ограждения(изоляции) как вредного агента, так и поврежденной ткани. Воспаление заметно связано с притоком лейкоцитов и/или хемотаксисом нейтрофилов. Воспаление может происходить из инфекции патогенными организмами и вирусами и из неинфекционных причин, таких как травма или реперфузия после инфаркта миокарда или удара, иммунной реакции на чужеродный антиген и аутоиммунных реакций. Таким об- 22008241 разом, воспалительные нарушения, поддающиеся лечению в соответствии с данным изобретением,включают в себя нарушения, связанные с реакциями специфической защитной системы, а также с реакциями неспецифической защитной системы. В применении здесь термин "специфическая защитная система" относится к компоненту иммунной системы, который реагирует на присутствие специфических антигенов. Примеры воспаления, происходящего из реакции этой специфической защитной системы, включают в себя классическую реакцию на чужеродные антигены, аутоиммунные заболевания и аллергическую реакцию замедленного типа, опосредованную Т-клетками. Хронические воспалительные заболевания, отторжение твердых трансплантированных тканей и органов, например почки и трансплантатов костного мозга, и реакция "трансплантат против хозяина" (GVHD) являются дополнительными примерами воспалительных реакций специфической защитной системы. Термин "неспецифическая защитная система" в применении здесь относится к воспалительным нарушениям, которые опосредованы лейкоцитами, которые не способны к иммунологической памяти (например, гранулоцитами и макрофагами). Примеры воспаления, которые происходят, по меньшей мере частично, из реакции неспецифической защитной системы, включают в себя воспаление, связанное с такими состояниями, как респираторный дистресс-синдром взрослых (ARDS) или синдромы повреждения множественных органов; реперфузионное повреждение; острый гломерулонефрит; реактивный артрит; дерматозы с острыми воспалительными компонентами; острый гнойный менингит или другие воспалительные нарушения центральной нервной системы, такие как удар; термическое повреждение; воспалительная болезнь пищеварительного тракта; синдромы, связанные с трансфузией гранулоцитов, и индуцированная цитокинами токсичность."Аутоиммунное заболевание" в применении здесь относится к любой группе нарушений, в которых повреждение ткани связано с гуморальной или клеточно-опосредованной реакциями на собственные компоненты тела. "Аллергическое заболевание" в применении здесь относится к любым симптомам, повреждению ткани или утрате функции ткани, происходящим из аллергии. "Артритное заболевание" в применении здесь относится к любому заболеванию, которое характеризуется воспалительными повреждениями суставов, приписываемыми разнообразным этиологиям. "Дерматит" в применении здесь относится к любому из большого семейства заболеваний кожи, которое характеризуется воспалительными повреждениями кожи, приписываемыми разнообразным этиологиям. "Отторжение трансплантат" в применении здесь относится к любой иммунной реакции, направленной против трансплантируемой ткани,такой как органы или клетки (например, костный мозг), характеризующейся потерей функции трансплантированной ткани и окружающих тканей, болью, опуханием, лейкоцитозом и тромбоцитопенией. Терапевтические способы данного изобретения включают в себя способы для лечения нарушений,связанных с активацией воспалительных клеток. "Активация воспалительных клеток" обозначает индукцию стимулом (в том числе, но не только, цитокинами, антигенами или аутоантителами) пролиферативной клеточной реакции, продуцирования растворимых медиаторов (в том числе, но не только, цитокинов, радикалов кислорода, ферментов, простаноидов или вазоактивных аминов) или экспрессии клеточной поверхностью новых медиаторов или увеличенных количеств медиаторов (в том числе, но не только,антигенов главного комплекса гистосовместимости или молекул клеточной адгезии) в воспалительных клетках (в том числе, но не только, моноцитах, макрофагах, Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах, гранулоцитах(т.е. полиморфонуклеарных лейкоцитах, таких как нейтрофилы, базофилы и эозинофилы), мастоцитах,дендритных клетках, клетках Лангерганса и эндотелиальных клетках). Лицам с квалификацией в данной области будет понятно, что активация одного или комбинации из этих фенотипов в этих клетках может способствовать инициации, сохранению или обострению воспалительного нарушения. Было обнаружено, что соединения данного изобретения ингибируют высвобождение супероксида нейтрофилами. Супероксид высвобождается нейтрофилами в ответ на любой из множества стимулов, в том числе сигналы инфекции, в качестве механизма убивания клеток. Например, известно, что высвобождение супероксида индуцируется фактором альфа некроза опухолей (TNF), который высвобождается макрофагами, мастоцитами и лимфоцитами при контакте с компонентами бактериальной клеточной стенки, такими как липополисахарид (LPS). TNF является чрезвычайно сильным и "неразборчивым" активатором воспалительных процессов, участвуя в активации нейтрофилов и различных других типов клеток, индукции адгезии лейкоцитов/эндотелиальных клеток, гипертермии, усиленном продуцировании МНС класса I и стимуляции ангиогенеза. Альтернативно, высвобождение супероксида может стимулироваться пептидом формил-Met-Leu-Phe (fMLP) или другими пептидами, блокированными на N-конце формилированным метионином. Такие пептиды в норме не обнаруживаются в эукариотах, а являются фундаментальным свойством бактерий и сигналом присутствия бактерий для иммунной системы. Лейкоциты, экспрессирующие рецептор fMLP, например нейтрофилы и макрофаги, стимулируются к миграции по направлению градиентов этих пептидов (т.е. хемотаксически) в направлении очагов инфекции. Как показано здесь, соединения данного изобретения ингибируют стимулированное высвобождение супероксида нейтрофилами в ответ на TNF или fMLP. Было также показано, что другие функции нейтрофилов, в том числе стимулированный экзоцитоз и направленная хемотаксическая миграция, ингибиру- 23008241 ются ингибиторами PI3K данного изобретения. Таким образом, можно ожидать, что соединения данного изобретения полезны в лечении нарушений, таких как воспалительные нарушения, которые опосредуются любым или всеми из этих функций нейтрофилов. Данное изобретение делает возможными способы лечения таких заболеваний, как артритные заболевания, такие как ревматоидный артрит, моносуставный артрит, остеоартрит, подагрический артрит,спондилит; заболевание Бехчета; сепсис; септический шок, эндотоксический шок, грамотрицательный сепсис, грамположительный сепсис и синдром токсического шока; синдром повреждения множественных органов, являющийся вторичным относительно септицемии, травмы или кровотечения; глазные нарушения, такие как аллергический конъюнктивит, весенний конъюнктивит, увеит и связанная с щитовидной железой офтальмопатия; эозинофильная гранулема; легочные или респираторные нарушения,такие как астма, хронический бронхит, аллергический ринит, ARDS, хроническое воспалительное заболевание легких (например, хроническая обструктивная болезнь легких), силикоз, легочный саркоидоз,плеврит, альвеолит, васкулит, эмфизема, пневмония, бронхоэктаз и легочная кислородная токсичность; реперфузионное повреждение миокарда, мозга или конечностей; фиброз, например муковисцидоз; келоидное образование или образование рубцовой ткани; атеросклероз; аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (SLE), аутоиммунный тиреоидит, множественный склероз, некоторые формы диабета и синдром Рейно; и нарушения отторжения трансплантата, такие как GVHD и отторжение аллотрансплантата; хронический гломерулонефрит; воспалительные заболевания пищеварительного тракта, такие как хроническая воспалительная болезнь пищеварительного тракта (CIBD), болезнь Крона,язвенный колит и некротический энтероколит; воспалительные дерматозы, такие как контактный дерматит, атопический дерматит, псориаз или крапивница; лихорадка и миалгии, обусловленные инфекцией; воспалительные нарушения центральной и периферической нервной системы, такие как менингит, энцефалит и повреждение головного или спинного мозга, вызываемые необширной травмой; синдром Шегрена; заболевания, включающие в себя диапедез лейкоцитов; алкогольный гепатит; бактериальная пневмония; заболевания, опосредованные комплексом антиген-антитело; гиповолемический шок; сахарный диабет типа I; острая аллергия и аллергия с замедленным действием; патологические состояния, вызываемые дискразией и метастазированием лейкоцитов; термическое нарушение; синдромы, связанные с трансфузией гранулоцитов; и индуцированная цитокинами токсичность. Данный способ может быть применим в лечении субъектов, которые имеют или могут иметь реперфузионное повреждение, т.е. повреждение, происходящее из ситуаций, в которых ткань или орган испытывает период ишемии с последующей реперфузией. Термин "ишемия" обозначает локализованную анемию ткани, вызываемую обструкцией притока артериальной крови. Временная ишемия с последующей реперфузией характерным образом приводит к активации и трансмиграции нейтрофилов через эндотелий кровеносных сосудов в пораженную зону. Накопление активированных нейтрофилов, в свою очередь, приводит к генерированию метаболитов реактивного кислорода, которые повреждают компоненты вовлеченных в процесс ткани или органа. Этот феномен "реперфузионного повреждения" обычно связан с такими состояниями, как васкулярный шок (в том числе глобальная или очаговая ишемия), геморрагический шок, ишемия или инфаркт миокарда, трансплантация органов и церебральный вазоспазм. Для иллюстрации, реперфузионное повреждение имеет место при окончании процедур искусственного кровообращения или во время остановки сердца, когда сердце, которое не могло получать кровь, начинает снова получать кровь посредством реперфузии. Ожидается, что ингибирование активности PI3K будет приводить к уменьшенным количествам реперфузионных повреждений в таких ситуациях. Что касается нервной системы, глобальная ишемия имеет место, когда кровоток ко всему головному мозгу прекращается на определенный период. Глобальная ишемия может происходить из сердечного приступа. Очаговая ишемия имеет место, когда часть головного мозга лишается нормального кровоснабжения. Очаговая ишемия может происходить из тромбоэмболической закупорки сосуда мозга, травматического повреждения головы, отека или опухоли головного мозга. Даже если они являются временными, как глобальная, так и очаговая ишемия могут вызывать обширное повреждение нейронов. Хотя повреждение нервной ткани имеет место на протяжении часов или даже дней после возникновения ишемии, некоторое перманентное повреждение нервной ткани может развиваться в начальные минуты после прекращения кровотока к головному мозгу. Ишемия может также иметь место в сердце при инфаркте миокарда и других сердечно-сосудистых заболеваниях, в которых коронарные артерии были закупорены в результате атеросклероза, тромба или спазма. Таким образом, авторы считают, что данное изобретение применимо для лечения повреждения ткани сердца, в частности повреждения, происходящего из ишемии сердца или вызываемого реперфузионным повреждением у млекопитающих. В другом аспекте селективные ингибиторы активности PI3K, такие как соединения данного изобретения, могут использоваться в способах лечения заболеваний костей, в частности заболеваний, в которых функция остеокластов является отклоняющейся от нормы или нежелательной. Как показано в примере 6 ниже, соединения данного изобретения ингибируют функцию остеокластов in vitro. Таким- 24008241 образом, применение таких соединений и других селективных ингибиторов PI3K может быть ценным в лечении остеопороза, болезни Педжета и родственных нарушений, связанных с резорбцией кости. В следующем аспекте данное изобретение включает в себя способы применения ингибиторных соединений PI3K для ингибирования роста или пролиферации раковых клеток гемопоэтического происхождения, предпочтительно раковых клеток лимфоидного происхождения, и более предпочтительно раковых клеток, родственных В-лимфоцитам или предшественникам В-лимфоцитов или происходящих из них. Раки, поддающиеся лечению с использованием способа данного изобретения, включают в себя, без ограничения, лимфомы, например злокачественные неоплазмы лимфоидной и ретикулоэндотелиальной тканей, такие как лимфома Беркитта, лимфома Ходжкина, не-Ходжкинские лимфомы, лимфоцитарные лимфомы и т.п.; множественные миеломы; а также лейкозы, такие как лимфоцитарные лейкозы, хронические миелоидные (миелогенные) лейкозы и т.п. В предпочтительном варианте ингибиторные соединения PI3K могут быть использованы для ингибирования или контроля роста или пролиферации клеток хронического миелоидного (миелогенного) лейкоза. В другом аспекте данное изобретение включает в себя способ для супрессии функции базофилов и/или мастоцитов и посредством этого делает возможным лечение заболеваний или нарушений, характеризующихся избыточной или нежелательной активностью базофилов и/или мастоцитов. В соответствии с этим способом может использоваться соединение данного изобретения, которое селективно ингибирует экспрессию или активность фосфатидилинозитол-3-киназы дельта (PI3K) в базофилах и/или мастоцитах. Предпочтительно этот способ использует ингибитор PI3K в количестве, достаточном для ингибирования стимулированного высвобождения гистамина базофилами и/или мастоцитами. Таким образом,применение подобных соединений и других селективных ингибиторов PI3K может быть полезным в лечении заболеваний, характеризующихся высвобождением гистамина, т.е. аллергических нарушений, в том числе таких нарушений, как хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), астма, ARDS, эмфизема и родственные нарушения. Фармацевтические композиции ингибиторов активности PI3K Соединение данного изобретения может вводиться в виде чистого химикалия, но обычно предпочтительно введение этого соединения в форме фармацевтической композиции или препарата. Таким образом,данное изобретение обеспечивает также фармацевтические композиции, которые содержат химическое или биологическое соединение ("агент"), которое является активным в качестве модулятора активностиPI3K, и биосовместимый фармацевтический носитель, адъювант или наполнитель. Композиция может включать в себя агент в виде единственного активного компонента или в комбинации с другими агентами,такими как олиго- или полинуклеотиды, олиго- или полипептиды, лекарственные средства или гормоны,смешанные с наполнителем (наполнителями) или другими фармацевтически приемлемыми носителями. Носители и другие ингредиенты могут считаться фармацевтически приемлемыми, пока они являются совместимыми с другими ингредиентами композиции и не являются вредными для их реципиента. Способы для приготовления и введения фармацевтических композиций могут быть найдены вRemington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co, Easton, PA, 1990. Фармацевтические композиции данного изобретения могут изготавливаться любым общепринятым способом, например с использованием процессов смешивания, растворения, гранулирования, изготовления драже, растирания в порошок, эмульгирования, инкапсулирования, заключения в оболочку, формования из расплава, распылительной сушки или лиофилизации. Однако оптимальный фармацевтический препарат будет определяться специалистом в данной области в зависимости от способа введения и желаемой дозы. Такие препараты могут влиять на физическое состояние, стабильность, скорость высвобождения in vivo и скорость клиренса in vivo введенного агента. В зависимости от состояния, подлежащего лечению, эти фармацевтические композиции могут готовиться и вводиться системно или локально. Фармацевтические композиции готовят таким образом, что они содержат подходящие приемлемые носители и могут необязательно содержать наполнители и добавки, которые способствуют приготовлению из активных соединений препаратов, которые могут быть использованы фармацевтически. Обычно способ введения будет определять характер носителя. Например, композиции для парентерального введения могут содержать водные растворы активных соединений в водорастворимой форме. Носители,пригодные для парентерального введения, могут быть выбраны из солевого раствора, забуференного солевого раствора, декстрозы, воды и других физиологически совместимых растворов. Предпочтительными носителями для парентерального введения являются физиологически совместимые буферы, такие как раствор Хенкса, раствор Рингера или физиологически забуференный солевой раствор. Для тканевого или клеточного введения в композиции используют пенетранты, подходящие для конкретного барьера,через который должен проникнуть активный агент. Такие пенетранты обычно известны в данной области. Для препаратов, содержащих белки, композиция может включать в себя стабилизирующие вещества,такие как полиолы (например, сахароза) и/или поверхностно-активные вещества (например, неионогенные поверхностно-активные вещества) и т.п. Альтернативно, композиции для парентерального применения могут содержать дисперсии или суспензии активных соединений, приготовленные в виде подходящих масляных инъекционных суспензий.- 25008241 Подходящие липофильные растворители или носители включают в себя жирные (нелетучие) масла, такие как кунжутное масло, и синтетические эфиры жирных кислот, такие как этилолеат или триглицериды, или липосомы. Водные инъекционные суспензии могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Необязательно,суспензия может также содержать подходящие стабилизаторы или агенты, которые увеличивают растворимость этих соединений, чтобы иметь возможность приготовления высококонцентрированных растворов. Водные полимеры, которые обеспечивают рН-чувствительную солюбилизацию и/или пролонгированное высвобождение активного агента, могут также использоваться в виде покрытий или структур матрикса, например метакриловые полимеры, такие как семейство EUDRAGIT, доступное из RohmAmerica Inc. (Piscataway, NJ). Могут быть также использованы эмульсии, например дисперсии типа масло-в-воде и вода-в-масле, необязательно стабилизированные эмульгирующим агентом или диспергирующим веществом (поверхностно-активными веществами; сурфактантами). Суспензии могут содержать суспендирующие агенты, такие как этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и эфиры сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар, трагакантовая камедь и их смеси. Липосомы, содержащие активный агент, также могут использоваться для парентерального введения. Липосомы обычно готовят из фосфолипидов или других липидных веществ. Композиции в форме липосом могут также содержать другие ингредиенты, такие как стабилизаторы, консерванты, наполнители и т.п. Предпочтительные липиды включают в себя фосфолипиды и фосфатидилхолины (лецитины),как природные, так и синтетические. Способы образования липосом известны в данной области. См.,например, Prescott (Ed.), Methods in Cell Biology, Vol. XIV, p. 33, Academic Press, New York (1976). Фармацевтические композиции, содержащие агент в дозах, пригодных для перорального введения,могут быть приготовлены с использованием фармацевтически приемлемых носителей, хорошо известных в данной области. Препараты, приготовленные для перорального введения, могут быть в форме таблеток, пилюль, капсул, крахмальных облаток, драже, пастилок, жидкостей, гелей, сиропов, взвесей, эликсиров, суспензий или порошков. Для иллюстрации, фармацевтические препараты для перорального применения могут быть приготовлены комбинированием активных соединений с твердым наполнителем,необязательным измельчением полученной смеси и гранулированием этой смеси после добавления подходящих добавок, если желательно, с получением центральных частей таблеток или драже. Пероральные композиции могут использовать жидкие носители, сходные по их типу с носителями, описанными для парентерального применения, например забуференные водные растворы, суспензии и т.п. Предпочтительные пероральные композиции включают в себя таблетки, драже и желатиновые капсулы. Эти препараты могут содержать один или несколько наполнителей, которые включают в себя, без ограничения:b) связывающие вещества, такие как силикат магния-алюминия, крахмал из кукурузы, пшеницы,риса, картофеля и т.д.;c) целлюлозный материал, такой как метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза и натрийкарбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, камеди, например аравийскую камедь и трагакантовую камедь, и белки, такие как желатин и коллаген;d) дезинтегрирующие или солюбилизирующие агенты, такие как сшитый поливинилпирролидон,крахмалы, агар, альгиновая кислота или ее соль, например альгинат натрия, или пенообразующие композиции;e) смягчающие агенты, такие как диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота или ее соли магния или кальция и полиэтиленгликоль;g) красители или пигменты, например, для идентификации продукта или для характеристики количества (дозы) активного вещества; иh) другие ингредиенты, такие как консерванты, стабилизаторы, компоненты, способствующие набуханию, эмульгаторы, ускорители растворения, соли для регуляции осмотического давления и буферы. Желатиновые капсулы включают в себя капсулы с плотной подгонкой двух половинок, изготовленные из желатина, а также мягкие, "запаянные" капсулы, изготовленные из желатина и покрытия, например глицерина или сорбита. Капсулы с плотной подгонкой двух половинок могут содержать активный ингредиент (ингредиенты), смешанные с наполнителями, связывающими веществами, смягчителями и/или стабилизаторами и т.д. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные (нелетучие) масла, жидкий парафин или жидкий полиэтиленгликоль, со стабилизаторами или без стабилизаторов. Центральные части драже могут быть обеспечены подходящими покрытиями, такими как концентрированные растворы cахаров, которые могут также содержать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, гель из карбопола, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лаков и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в виде соли активного агента. Соли име- 26008241 ют тенденцию быть более растворимыми в водных или других протонных растворителях, чем соответствующая форма свободной кислоты или свободного основания. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области. Соединения, которые содержат кислотные части молекул, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с подходящими катионами. Подходящие фармацевтически приемлемые катионы включают в себя, например, катионы щелочных металлов (например, натрия или калия) и щелочно-земельных металлов (например, кальция или магния). Соединения структурной формулы (I), которые содержат основные части молекул, могут образовывать фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли с подходящими кислотами. Например,Berge et al. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharm. Sci., 66:1 (1977). Эти соли могут быть получены in situ во время конечного выделения и очистки соединений данного изобретения или отдельно реакцией функциональной группы свободного основания с подходящей кислотой. Репрезентативные кислотно-аддитивные соли включают в себя, но не ограничиваются ими, ацетат,адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, диглюконат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат (изотионат), лактат, малеат, метансульфонат или сульфат,никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, фосфат или гидрофосфат, глутамат, бикарбонат, п-толуолсульфонат и ундеканоат. Примеры кислот, которые могут быть использованы для образования кислотно-аддитивных солей, включают в себя, без ограничения, такие неорганические кислоты, как хлористоводородная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота и фосфорная кислота, и такие органические кислоты, как щавелевая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота и лимонная кислота. В свете предыдущего описания, подразумевается, что любая ссылка на соединения данного изобретения, появляющаяся здесь, включает в себя соединения структурной формулы (I)-(V), а также их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, а также пролекарства. Основно-аддитивные соли могут быть получены in situ во время конечного выделения и очистки соединений данного изобретения или отдельно реакцией содержащей карбоновую кислоту части молекулы с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого катиона металла, или с аммиаком, или органическим первичным, вторичным или третичным амином. Фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли включают в себя, но не ограничиваются ими, катионы на основе щелочных металлов или щелочно-земельных металлов, например соли лития,натрия, калия, кальция, магния и алюминия и т.п. и нетоксичные катионы четвертичного аммония и амина, в том числе аммония, тетраметиламмония, тетраэтиламмония, метиламмония, диметиламмония, триметиламмония, этиламмония, диэтиламмония, триэтиламмония и т.п. Другие репрезентативные органические амины, применимые для образования основно-аддитивных солей, включают в себя этилендиамин,этаноламин, диэтаноламин, пиперидин, пиперазин и т.п. Основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами, как (низший)алкилгалогениды, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, бромиды и иодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты; длинноцепочечные алкилгалогениды, такие как децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, бромиды и иодиды; арилалкилгалогениды,такие как бензил- и фенетилбромиды; и другие. Посредством этого получают продукты, имеющие модифицированные растворимость и диспергируемость. Композиции, содержащие соединение данного изобретения, приготовленные включением в фармацевтически приемлемый носитель, могут быть приготовлены, помещены в подходящий контейнер и снабжены этикеткой для лечения указанного состояния. Таким образом, рассматривается также промышленное изделие, такое как контейнер, содержащий дозированную лекарственную форму соединения данного изобретения и этикетку, содержащую инструкции для применения этого соединения. В изобретении рассматриваются также наборы. Например, такой набор может содержать дозированную форму фармацевтической композиции и вкладыш упаковки, содержащий инструкции для применения данной композиции в лечении медицинского состояния. В любом случае, состояния, указанные на этикетке, могут включать лечение воспалительных нарушений, рака и т.д. Способы введения ингибиторов активности PI3K Фармацевтические композиции, содержащие ингибитор активности PI3K, могут вводиться субъекту любым общепринятым способом, в том числе парентеральными и энтеральными способами. Парентеральные способы введения включают в себя способы, в которых композицию вводят иным путем, чем через желудочно-кишечный тракт, например внутривенной, внутриартериальной, внутрибрюшинной,интрамедуллярной, внутримышечной, внутрисуставной, внутриоболочечной и внутрижелудочковой инъекциями. Способы энтерального введения включают в себя, например, пероральное (в том числе буккальное и подъязычное) и ректальное введение. Трансэпителиальные способы введения включают в себя,например, трансмукозное введение и трансдермальное введение. Трансмукозное введение включает в себя, например, энтеральное введение, а также назальное введение, ингаляцию и глубокое легочное введение; влагалищное введение и ректальное введение. Трансдермальное введение включает в себя пас- 27008241 сивный или активный чрескожный способы, в том числе, например, пластыри и ион(т)офорезные устройства, а также локальное нанесение паст или мазей. Парентеральное введение может также выполняться с использованием способа с высоким давлением, например POWDERJECT. Хирургические способы включают в себя имплантацию депо(резервуар)-композиции, осмотических насосов и т.п. Предпочтительным способом введения для лечения воспаления может быть локальная или местная доставка для локализованных нарушений, таких как артрит, или системная доставка для распределенных нарушений, например внутривенная доставка для реперфузионного повреждения или для системных состояний, таких как септицемия. Для других заболеваний, в том числе заболеваний, включающих в себя дыхательные пути, например хронической обструктивной болезни легких, астмы и эмфиземы,введение может выполняться ингаляцией или глубоким легочным введением спреев, аэрозолей, порошков и т.п. Для лечения неопластических заболеваний, в частности лейкозов и других распространенных раков, обычно является предпочтительным парентеральное введение. Желательными являются композиции соединений, оптимизированные для их биораспределения после парентерального введения. Ингибиторные соединения PI3K могут вводиться до, во время или после применения химиотерапии, лучевой терапии и/или хирургии. Кроме того, терапевтический индекс ингибирующих PI3K соединений может быть усилен модификацией или дериватизацией этих соединений для нацеленной доставки к раковым клеткам, экспрессирующим маркер, который идентифицирует эти клетки как раковые клетки. Например, эти соединения могут быть связаны с антителом, которое узнает маркер, которое является селективным или специфическим в отношении раковых клеток, так что эти соединения приносятся в участок по соседству с этими клетками для проявления их действий локально, как описано ранее (см., например, Pietersz et al.,Immunol. Rev., 129:57 (1992); Trail et al., Science, 261:212 (1993) и Rowlinson-Busza et al., Curr. Opin.Oncol., 4:1142 (1992. Нацеленная на опухоль доставка этих соединений усиливает терапевтическую пользу, inter alia, минимизацией потенциальных неспецифических токсичностей, которые могут происходить из лучевой обработки или химиотерапии. В другом аспекте, ингибирующие PI3K соединения и радиоактивные изотопы или химиотерапевтические агенты могут быть конъюгированы с одним и тем же противоопухолевым антителом. Для лечения нарушений с резорбцией кости или опосредованных остеокластами нарушений ингибиторы PI3K могут доставляться любым подходящим способом. Может быть желательным очаговое введение, например внутрисуставная инъекция. В некторых случаях может быть желательным связывание этих соединений с компонентом, который может нацеливать эти соединения на кость. Например,ингибитор PI3K может быть связан с соединениями с высокой аффинностью в отношении гидроксиапатита, который является основным компонентом кости. Это может быть выполнено, например, адаптацией способа связывания тетрациклина, разработанного для нацеленной доставки эстрогена к кости (Ormeet al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 4(11):1375-80 (1994. Для того, чтобы быть терапевтически эффективными в модуляции мишеней центральной нервной системы, агенты, используемые в способах данного изобретения, должны легко преодолевать гематоэнцефалический барьер при периферическом введении. Однако соединения, которые не могут проникать через гематоэнцефалический барьер, могут все-таки эффективно вводиться внутривенным способом. Как отмечалось выше, характеристики самого агента и композиции данного агента могут влиять на физическое состояние, стабильность, скорость высвобождения in vivo и скорость клиренса in vivo данного введенного агента. Такая фармакокинетическая и фармакодинамическая информация может быть собрана посредством преклинических исследований in vitro и in vivo, позднее проверяемых на людях во время хода клинических испытаний. Таким образом, для любого соединения, используемого в способе данного изобретения, терапевтически эффективная доза может быть приближенно определена первоначально из биохимического анализа и/или анализа на основе клеток. Затем, может быть приготовлена с использованием моделей животных для достижения желаемого диапазона концентраций в кровотоке доза, которая модулирует экспрессию или активность PI3K. При проведении исследований на человеке возникает дополнительная информация в отношении подходящих уровней доз и продолжительности лечения различных заболеваний и состояний. Токсичность и терапевтическая эффективность таких соединений могут быть определены стандартными фармацевтическими процедурами в культурах клеток или экспериментальных животных, например, для определения LD50 (дозы, летальной для 50% популяции) и ED50 (дозы, терапевтически эффективной в 50% популяции). Соотношение доз между токсическим и терапевтическим эффектами представляет собой "терапевтический индекс", который обычно выражается как отношение LD50/ED50. Соединения, которые проявляют большие терапевтические индексы, т.е. токсичная доза является, по существу, более высокой, чем эффективная доза, являются предпочтительными. Данные, полученные из таких анализов на клеточных культурах, и дополнительные исследования на животных могут быть использованы для приготовления диапазона доз для применения для человека. Доза таких соединений предпочтительно находится в диапазоне концентраций в кровотоке, которые включают в себя ED50 с малой токсич- 28008241 ностью или с отсутствием токсичности. Для способов данного изобретения может быть использована любая эффективная схема введения,регулирующая тайминг и последовательность доз. Дозы этого агента предпочтительно включают в себя фармацевтические дозированные единицы, содержащие эффективное количество данного агента. В применении здесь "эффективное количество" обозначает количество, достаточное для модуляции экспрессии или активности PI3K и/или получения измеримого изменения в физиологическом параметре субъекта посредством введения одной или нескольких фармацевтических дозированных единиц. Примеры уровней доз для субъекта-человека имеют порядок от приблизительно 0,001 миллиграма активного агента на килограмм веса тела (мг/кг) до приблизительно 100 мг/кг. Обычно дозированные единицы активного агента содержат от приблизительно 0,01 до приблизительно 10000 мг, предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 1000 мг, в зависимости от показания, способа введения и т.д. В зависимости от способа введения подходящая доза может быть рассчитана в соответствии с весом тела, площадью поверхности тела или размером органа. Конечная схема введения доз будет определяться лечащим врачом ввиду хорошей медицинской практики, с учетом различных факторов, которые модифицируют действие лекарственных средств, например удельной активности агента, идентифицированного болезненного состояния и его тяжести, отвечаемости пациента, возраста, состояния, веса тела,пола и пищевого рациона пациента и тяжести любой инфекции. Дополнительные факторы, которые могут быть приняты во внимание, включают в себя время и частоту введения, комбинации лекарственных средств, чувствительность реакции и переносимость реакции/ответную реакцию на терапию. Дополнительное уточнение дозы, подходящей для лечения, выполняется рутинным образом квалифицированным специалистом без чрезмерного эксперментирования, в частности, в свете информации о дозах и описанных анализах, а также фармакокинетических данных, наблюдаемых в клинических испытаниях на человеке. Подходящие дозы могут быть определены посредством применения установленных анализов для определения концентрации данного агента в жидкости тела или другой пробе вместе с данными зависимости реакции от дозы. Частота введения доз будет зависеть от фармакокинетических параметров данного агента и способа введения. Дозу и введение корректируют для обеспечения достаточных уровней активного компонента или для поддержания желаемого эффекта. Таким образом, фармацевтические композиции могут вводиться в однократной дозе, множественных отдельных дозах, при непрерывном вливании, с использованием депо пролонгированного действия или их комбинаций, необходимых для поддержания желательного минимального уровня данного агента. Кратковременно действующие фармацевтические композиции(т.е. с коротким полупериодом существования в организме) могут вводиться 1 раз в день или более чем 1 раз в день (например, 2, 3 или 4 раза в день). Продолжительно действующие фармацевтические композиции должны вводиться каждые 3-4 недели, каждую неделю или 1 раз каждые 2 недели. Насосы, например подкожные, внутрибрюшинные или субдуральные насосы, могут быть предпочтительными для непрерывной инфузии. Следующие далее примеры обеспечены для дополнительного облегчения понимания данного изобретения и с предположением, что читающий понимает общепринятые способы, хорошо известные лицам,имеющим обычную квалификацию в данной области, к которым обращены эти примеры, например конструирование векторов и плазмид, встраивание генов, кодирующих полипептиды, в такие векторы и плазмиды или введение векторов и плазмид в клетки-хозяева. Такие способы описаны подробно в многочисленных публикациях, в том числе, например, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989), Ausubel et al. (Eds.), Current Proticols in Molecular Biology, JohnSons, Inc. (1999). Конкретные материалы и условия, описанные ниже, предназначены в качестве примеров конкретных аспектов данного изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие его разумный объем. Пример 1. Получение и очистка рекомбинантных PI3K,и . Рекомбинантные гетеродимерные комплексы РI3K, состоящие из каталитической субъединицы р 110 и регуляторной субъединицы р 85, сверхэкспрессировали с использованием системы экспрессии бакуловируса ВАС-ТО-ВАС НТ (GIBCO/-BRL) и затем очищали для применения в биохимических анализах. Четыре PI-3-киназы класса I клонировали в бакуловирусные векторы следующим образом: р 110: FLAG-мeчeнyю версию р 110 человека (SEQ ID NO: 1) (см. Chantry et al., J. Biol. Chem.,272:19236-41 (1997 субклонировали с использованием стандартных способов рекомбинантых ДНК в сайт BamH1-Xba1 экспрессирующего вектора клеток насекомых pFastbac HTb (Life Technologies,Gaithersburg, MD) таким образом, что этот клон находился в рамке считывания с меткой His вектора.FLAG-cистемa описана в патентах США 4 703 004; 4 782 137; 4 851 341 и 5 011 912, и реагенты доступны из Eastman Kodak Co. р 110: аналогично способу, использованному для р 110, описанному выше, FLAG-мeчeнyю версию р 110 (см. Volinia et al., Genomics, 24(3):427-477 (1994 субклонировали в сайты BamH1-HindIIIpFastbac HTb (Life Technologies) таким образом, что этот клон находился в рамке считывания с меткойHis вектора. р 110: клон р 110 (см. Нu et al., Mol. Cell. Biol., 13:7677-88 (1993 амплифицировали из библиотеки кДНК MARATHON Ready селезенки человека (Clontech, Palo Alto CA) в соответствии с протоколом изготовителя с использованием следующих праймеров: 5' праймер 5'-GATCGAATTCGGCGCCACCATGGACTACAAGGACGACGATGACAAGTGCTTCAGTTTCATAATGCCTCC-3'(SEQ ID NO: 3) 3' праймер 5'-GATCGCGGCCGCTTAAGATCTGTAGTCTTTCCGAACTGTGTG-3' (SEQ ID NO: 4) 5' праймер был построен таким образом, что он содержал FLAG-меткy в рамке считывания с последовательностью р 110. После амплификации последовательность FLAG-p110 субклонировали с использованием стандартных рекомбинантых способов в сайты EcoR1-Not1 pFastbac HTb (Life Technologies) таким образом, что этот клон находился в рамке считывания с меткой His вектора. р 110: кДНК р 110 (см. Stoyanov et al., Science, 269:690-93 (1995 амплифицировали из библиотеки кДНК MARATHON Ready селезенки человека (Clontech) в соответствии с протоколом изготовителя с использованием следующих праймеров: 5' праймер 5'-AGAATGCGGCCGCATGGAGCTGGAGAACTATAAACAGCCC-3' (SEQ ID NO: 5) 3' праймер 5'-CGCGGATCCTTAGGCTGAATGTTTCTCTCCTTGTTTG-3' (SEQ ID NO: 6)FLAG-меткy последовательно присоединяли к 5'-концу последовательности р 110 и клонировали в сайты BamH1-Spe1 pFastbac HTb (Life Technologies) с использованием стандартных способов рекомбинантных ДНК с последовательностью FLAG-110, находящейся в рамке считывания с меткой His вектора. р 85: BamH1-EcoR1-фрагмент FLАG-меченой кДНК р 85 (см. Skolnik et al., Cell, 65:83-89 (1991 субклонировали в сайты BamH1-EcoR1 вектора pFastbac dual (Life Technologies). Рекомбинантные бакуловирусы, содержащие описанные выше клоны, генерировали с использованием рекомендуемого изготовителем протокола (Life Technologies). Бакуловирусы, экспрессирующиеHis-меченые р 110, р 110 или каталитическую субъединицу р 110 и субъединицу р 85, коинфицировали в клетки насекомого Sf21. Для обогащения гетеродимерного ферментного комплекса инфицировали избыточное количество бакуловируса, экспрессирующего субъединицу р 85, и His-меченую каталитическую субъедницу р 110, находящуюся в комплексе с р 85, очищали на аффинной колонке с никелем. Поскольку р 110 не связывается с р 85, клетки Sf21 инфицировали рекомбинантыми бакуловирусами, экспрессирующими только His-меченый р 110. В другом подходе р 101 мог быть клонирован в бакуловирус,делая возможной коэкспрессию с его предпочтительным партнером связывания р 110. 72-часовые послеинфекционные клетки Sf21 (3 л) собирали и гомогенизировали в гипотоническом буфере (20 мМHEPES-KOH, рН 7,8, 5 мМ KCl, полный коктейль (смесь) протеазных ингибиторов (Roche Biochemicals,Indianapolis, IN), с использованием гомогенизатора Даунса. Гомогенаты центрифугировали при 1000 х g в течение 15 мин. Супернатанты дополнительно центрифугировали при 10000 х g в течение 20 мин с последующим ультрацентрифугированием при 100 000 х g в течение 60 мин. Растворимую фракцию немедленно наносили на 10 мл-аффинную колонку с никелем HITRAP (Pharmacia, Piscataway, NJ), уравновешенную 50 мл буфера А (50 мл HEPES-KCl, рН 7,8, 0,5 М NaCl, 10 мМ имидазол). Колонку промывали интенсивно буфером А и элюировали линейным градиентом 10-500 мМ имидазола. Свободная субъединица р 85 удалялась из колонки во время стадии промывки, и только гетеродимерный ферментный комплекс элюировался при 250 мМ имидазола. Аликвоты фракций никеля анализировали при помощи электрофореза в 10% ДСН-полиакриламидном геле (электрофореза в ДСН-ПААГ), окрашивалиSYPRO красным (Molecular Probes, Inc., Eugene, OR) и количественно определяли с использованием прибора для анализа изображения STORM Phospholmager (Molecular Dynamics, Sunnyvale, CA). Активные фракции объединяли и сразу же наносили на 5 мл-гепариновую колонку Hi-trap, предварительно уравновешенную буфером В, содержащим 50 мМ HEPES-KOH, рН 7,5, 50 мМ NaCl, 2 мМ дитиотреитол(ДТТ). Колонку промывали 50 мл буфера В и элюировали линейным градиентом 0,05-2 М NaCl. Единственный пик, содержащий ферментный комплекс РI3K, элюировался при 0,8 М NaCl. Анализ при помощи электрофореза в ДСН-полиакриламидном геле показал, что очищенные фракции фермента PI3K содержали 1:1 стехиометрический комплекс субъединиц р 110 и р 85. Профиль белка этого ферментного комплекса во время хроматографии на гепариновой колонке соответствовал профилю липидкиназной активности. Активные фракции объединяли и замораживали под жидким азотом. Пример 2. Высокопроизводительный скрининг (HTS) PI3K и анализ селективности. Высокопроизводительный скрининг запатентованной химической библиотеки выполняли для идентификации кандидатов ингибиторов активности PI3K. PI3K катализирует перенос фосфора от -[32 Р]АТФ