Противовирусные соединения

Описаны соединения, эффективные для ингибирования репликации вируса гепатита С ("HCV"). Это изобретение относится к способам получения таких соединений, к композициям, содержащим такие соединения, и к способам применения таких соединений для лечения инфекции HCV. По настоящей заявке испрашивается приоритет по предварительной заявке США с серийным номером No. 61/186291, поданной 11 июня 2009 г., условной заявке США с серийным номером No. 61/242836,поданной 16 сентября 2009 г., и условной заявке США с серийным номером No. 61/24 3596, поданной 18 сентября 2009 г., содержание которых включено в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме. Область техники Настоящее изобретение относится к соединениям, эффективным для ингибирования репликации вируса гепатита С ("HCV"). Также настоящее изобретение относится к композициям, содержащим эти соединения, и к способам применения этих соединений для лечения инфекции HCV. Уровень техникиHCV представляет собой РНК-вирус, относящийся к роду Hepacivirus семейства Flaviviridae. Оболочечный вирион HCV содержит геном в виде положительной цепи РНК, кодирующий все известные вирусспецифические белки в одной непрерывной открытой рамке считывания. Открытая рамка считывания содержит приблизительно 9500 нуклеотидов и кодирует один крупный полибелок приблизительно из 3000 аминокислот. Полибелок содержит коровый белок, белки оболочки Е 1 и Е 2, связанный с мембраной белок р 7 и неструктурные белки NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. Инфекция HCV ассоциирована с прогрессирующей патологией печени, включая цирроз и печеночно-клеточную карциному. Хронический гепатит С можно лечить пегинтерфероном- в комбинации с рибавирином. Остаются существенные ограничения с точки зрения эффективности и переносимости, поскольку многие потребители страдают от побочных эффектов, и устранение вируса из организма часто является недостаточным. Таким образом,существует необходимость в новых лекарственных средствах для лечения инфекции HCV. Сущность изобретения Настоящее изобретение относится к соединениям, выбранным из группы, состоящей из диметил(2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамата, диметил (2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-l-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5 диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамата и к их фармацевтически приемлемым солям. Эти соединения и соли могут ингибировать репликацию HCV и, таким образом, они пригодны для лечения инфекции HCV. Настоящее изобретение также относится к композициям, содержащим соединения или соли по настоящему изобретению. Композиции также могут включать дополнительные лекарственные средства, такие как ингибиторы хеликазы HCV, ингибиторы полимеразы HCV, ингибиторы протеазы HCV, ингибиторы NS5AHCV, ингибиторы CD81, ингибиторы циклофилина или ингибиторы участка внутренней посадки рибосомы (IRES). Другие признаки, задачи и преимущества настоящего изобретения представлены в подробном описании, которое следует далее. Однако следует понимать, что подробное описание, хотя и указывает на предпочтительные варианты осуществления изобретения, приведено только в качестве иллюстрации, а не для ограничения. Различные изменения и модификации в объеме изобретения станут понятными специалистам в данной области из подробного описания. Подробное описание Настоящее изобретение относится к соединениям диметил (2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин 2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат,диметил(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен) бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат, диметил (2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат и к их фармацевтически приемлемым солям. Соединения по изобретению могут содержать асимметрично замещенные атомы углерода, известные в качестве хиральных центров. Под "по существу не содержит" подразумевают, что по меньшей мере 80% соединения в композиции представляет собой указанный стереоизомер; предпочтительно по меньшей мере 90% соединения в композиции представляет собой указанный стереоизомер; и более предпочтительно по меньшей мере 95, 96, 97, 98 или 99% соединения в композиции представляет собой указанный стереоизомер. Когда стереохимия хирального атома углерода не указана в химической структуре соединения, подразумевают, что химическая структура охватывает соединения, содержащие любой стереоизомер хирального центра. Индивидуальные стереоизомеры соединений по изобретению можно получать с использованием множества способов, известных в данной области. Эти способы включают, но не ограничиваются ими,стереоспецифический синтез, хроматографическое разделение диастереомеров, хроматографическое раз-1 020031 деление энантиомеров, преобразование энантиомеров в энантиомерной смеси в диастереомеры с последующим хроматографическим разделением диастереомеров и регенерацией отдельных энантиомеров и ферментативным разделением. Стереоспецифический синтез, как правило, вовлекает применение соответствующих оптически чистых (энантиомерно чистых) или по существу оптически чистых материалов и реакций синтеза, которые не вызывают рацемизации или инверсии стереохимии хиральных центров. Смеси стереоизомеров соединений, включая рацемические смеси, образовавшиеся в реакции синтеза, можно разделять, например,способами хроматографии, как понятно специалистам в данной области. Хроматографическое разделение энантиомеров можно проводить с использованием хиральных хроматографических смол, многие из которых являются коммерчески доступными. В неограничивающем примере, рацемат помещают в раствор и загружают в колонку, содержащую хиральную стационарную фазу. Затем энантиомеры можно разделять способом ВЭЖХ. Разделение энантиомеров также можно проводить путем преобразования энантиомеров в смеси в диастереомеры путем реакции с хиральными вспомогательными реагентами. Полученные диастереомеры можно разделять колоночной хроматографией или кристаллизацией/перекристаллизацией. Этот способ пригоден, когда соединения, подлежащие разделению, содержат карбоксильную, амино или гидроксильную группы, которые образуют соль или ковалентную связь с хиральным вспомогательным реагентом. Неограничивающие примеры пригодных хиральных вспомогательных реагентов включают хирально чистые аминокислоты, органические карбоновые кислоты или органосульфоновые кислоты. После разделения диастереомеров хроматографией отдельные энантиомеры можно получать повторно. Часто хиральный вспомогательный реагент можно извлекать и использовать снова. Для разделения производных энантиомеров в энантиомерной смеси могут быть пригодны ферменты, такие как эстеразы, фосфатазы или липазы. Например, сложноэфирное производное карбоксильной группы в соединениях, подлежащих разделению, можно обрабатывать ферментом, который селективно гидролизует один из энантиомеров в смеси. Затем полученную энантиомерно чистую кислоту можно отделять от негидролизованного сложного эфира. Альтернативно соли энантиомеров в смеси можно получать с использованием любого пригодного способа, известного в данной области, включая обработку карбоновой кислоты пригодным оптически чистым основанием, таким как алкалоиды или фенэтиламин, с последующим осаждением или кристаллизацией/перекристаллизацией энантиомерно чистых солей. Способы, пригодные для разрешения/разделения смесей стереоизомеров, включая рацемические смеси, могут быть найдены в ENANTIOMERS, RACEMATES, AND RESOLUTIONS (Jacques et al., 1981, John Wiley and Sons, New York, NY). Соединение по этому изобретению может обладать одной или несколькими ненасыщенными углерод-углеродными двойными связями. Подразумевают, что в объем указанного соединения, если нет иных указаний, входят все изомеры по двойной связи, такие как цис-(Z) и транс-(Е)-изомеры, и их смеси. Кроме того, когда соединение существует в различных таутомерных формах, указанное соединение не ограничивается каким-либо конкретным таутомером, а скорее предполагается, что оно охватывает все таутомерные формы. Определенные соединения по изобретению могут существовать в различных стабильных конформационных формах, которые могут быть разделены. Торсионная асимметрия вследствие ограниченного вращения вокруг асимметричной одинарной связи, например, вследствие пространственного препятствия или напряжения кольца, может позволить разделение различных конформеров. Изобретение относится к каждому конформационному изомеру этих соединений и их смесей. Соединения по настоящему изобретению описаны в настоящем документе с использованием стандартной номенклатуры. Для приведенного соединения, имеющего асимметричный центр, следует понимать, что настоящее изобретение охватывает все стереоизомеры соединения и их смеси, если нет иных указаний. Неограничивающие примеры стереоизомеров включают энантиомеры, диастереомеры и цистранс-изомеры. Когда приведенное соединение существует в различных таутомерных формах, подразумевают, что соединение охватывает все таутомерные формы. Термин "фармацевтически приемлемый" используют в качестве прилагательного для обозначения того, что существительное, к которому оно относится, пригодно для применения в качестве фармацевтического продукта или в качестве части фармацевтического продукта. Соединения по настоящему изобретению можно получить согласно следующим ниже примерам. Соединения в примерах были названы с использованием либо ChemDraw версии 9.0. Промежуточные соединения были названы с использованием ChemDraw, если нет иных указаний на то, что они были названы с использованием ACD v12. Определенные соединения в примерах ниже очищали с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой. Очистку проводили с использованием обращенно-фазовой колонки либо С 18, либо С 8. Соединения элюировали с использованием градиента приблизительно 10-100% ацетонитрила в 0,1% водном растворе ТХУ; приблизительно 60-100% метанола в 10 мМ водном растворе ацетата аммония; или приблизительно 10-95% метанола в 10 мМ водном растворе ацетата аммония. Для очистки, проводимой с помощью ТХУ, продукт, полученный таким образом, может быть в форме соли ТХУ. Соединения могут быть оха-2 020031 рактеризованы как соль ТХУ или как свободное основание после нейтрализации, экстракции и выделения. Определенные соединения в примерах ниже очищали с использованием нормально-фазовой хроматографии на силикагеле, включая традиционную флэш-хроматографию или автоматизированную систему очистки (например, Isco Combi-Flash, Analogix Intelliflash) с использованием предварительно упакованных колонок с силикагелем (силикагель 55 или 35 мкм, колонки Isco gold). Типичные растворители для хроматографии с силикагелем включают: этилацетат в гексане, диэтиловый эфир в гексане, THF в гексане, этилацетат в метиленхлориде, метанол в метиленхлориде, метанол в метиленхлориде с NH4OH, ацетон в гексане и метиленхлорид в гексане. Пример 1. Диметил-(2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат и диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5 диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат Пример 1 А. 1,4-бис(4-Нитрофенил)бутан-1,4-дион Безводный хлорид цинка(II) (2,73 г, 20,00 ммоль) перемешивали в сухом бензоле (15 мл) при одновременном добавлении диэтиламина (1,558 мл, 15,00 ммоль) и трет-бутанола (1,435 мл, 15,00 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин с получением мутного раствора. К этой смеси добавляли 2-бром-1-(4-нитрофенил)этанон (2,44 г, 10,00 ммоль) и 1-(4 нитрофенил)этанон (2,477 г, 15,00 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (350 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Полученный осадок растирали с дихлорметаном с получением оранжевого твердого вещества, которое собирали фильтрацией и сушили с получением указанного в заголовке соединения (2,0 г, выход 61%). Пример 1 В. 1,4-бис(4-Нитрофенил)бутан-1,4-диол К раствору продукта примера 1 А (1,0 г, 3,05 ммоль) в безводном THF (30 мл) при 0 С добавляли боргидрид натрия (0,357 г, 9,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50 С в течение ночи. Охлажденную смесь выливали в воду, экстрагировали этилацетатом, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученное твердое вещество растирали с дихлорметаном с получением желтовато-коричневого твердого вещества, которое собирали фильтрацией и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,82 г, выход 81%). Пример 1 С. 1,4-бис(4-Нитрофенил)бутан-1,4-диилдиметансульфонат К раствору продукта примера 1 В (0,80 г, 2,407 ммоль) в сухом CH2Cl2 (25 мл) при 0 С добавляли триэтиламин (1,007 мл, 7,22 ммоль) с последующим капельным добавлением метансульфонилхлорида(0,469 мл, 6,02 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0 С в течение 30 мин, и в течение этого времени исходный материал медленно переходил в раствор. После дополнительного перемешивания в течение 1 ч при 0 С начинал образовываться осадок. Добавляли насыщенный водный NH4Cl (4 мл) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 20 мин. Смесь промывали водой (210 мл) и органический слой обрабатывали гексаном (10 мл) с получением оранжевого твердого вещества,которое собирали фильтрацией с получением указанного в заголовке соединения (0,75 г, выход 64%). Пример 1D. 1-(4-Фторфенил)-2,5-бис(4-нитрофенил)пирролидин Продукт примера 1 С (0,6 г, 1,228 ммоль) и 4-фторанилин (2,0 мл, 20,82 ммоль) объединяли и перемешивали при 50 С в течение ночи. Полученную смесь распределяли между 0,2 н. HCl (50 мл) и этилацетатом (350 мл) и объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием градиента растворителей, состоящего из 0-40% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соедине-3 020031 ния в качестве цис- и транс-изомеров (0,5 г, выход 100%). Пример 1E. 4,4'-(1-(4-Фторфенил)пирролидин-2,5-диил)дианилин К раствору продукта примера 1D (0,501 г, 1,23 ммоль) в этаноле (5 мл) и THF (5,00 мл) добавляли железный порошок (0,412 г, 7,38 ммоль) и раствор хлорида аммония (0,197 г, 3,69 ммоль) в воде (1,0 мл). Полученную смесь перемешивали при 80 С в течение 45 мин. Смесь охлаждали, фильтровали через целит, промывали этанолом и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием градиента растворителей, состоящего из 0-100% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения в качестве цис- и транс-изомеров (0,135 г, 32%). Пример 1F.(2S,2'S)-трет-Бутил-2,2'-(4,4'-(1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)дипирролидин-1-карбоксилат К смеси продукта примера 1E (0,13 г, 0,374 ммоль), (S)-l-(трет-бутоксикарбонил)пирролидин-2 карбоновой кислоты (0,201 г, 0,935 ммоль) и HATU (0,356 г, 0,935 ммоль) в DMSO (3 мл) добавляли основание Хунига (0,196 мл, 1,123 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь выливали в воду и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта,который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом растворителей, состоящим из 5-100% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения (0,28 г,100%). Пример 1G.(2S,2'S)-N,N'-(4,4'-(l-(4-Фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фенилендипирролидин-2-карбоксамид К продукту примера 1F (0,28 г, 0,377 ммоль) в CH2Cl2 (2,0 мл) добавляли ТХУ (2,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин и концентрировали в вакууме. Осадок распределяли между 3:1 CH2Cl2:2-PrOH и насыщенным водным раствором NaHCO3. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (0,195 г, выход 95%). Пример 1 Н. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат и диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5 диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат К смеси продукта примера 1G (0,03 г, 0,055 ммоль), (S)-2-(метоксикарбониламино)-3,3 диметилбутановой кислоты (0,0262 г, 0,138 ммоль) и HATU (0,0526 г, 0,138 ммоль) в DMSO (0,5 мл) добавляли основание Хунига (0,029 мл, 0,166 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь выливали в воду (2 мл) и экстрагировали этилацетатом (22 мл) и объединенные органические слои концентрировали и подвергали очистке посредством ВЭЖХ на полупрепаративной обращенно-фазовой колонке С 18 с использованием градиента из 10-100% ацетонитрила в 0,1% водной ТХУ. Транс-замещенный изомер пирролидина был первым элюируемым из 2 стереоизомеров, давая указанное в заголовке соединение в качестве смеси диастереомеров 1:1 (0,014 г, выход 29%). 1 Н ЯМР (соль ТХУ) (400 МГц, DMSO-D6)м.д. 0,93-1,01 (м, J=4,99 Гц, 18 Н), 1,62-1,68 (м, 2 Н),1,81-1,93 (м, 6 Н), 1,94-2,04 (м, 2 Н), 2,09-2,20 (м, 2 Н), 3,54 (с, 6 Н), 3,59-3,69 (м, 2 Н), 3,73-3,81 (м, 2 Н),4,18-4,24 (м, 2 Н), 4,43 (дд, J=7,81, 5,42 Гц, 2 Н), 5,16 (д, 2 Н), 6,20 (дд, J=9,05, 4,39 Гц, 2 Н), 6,78 (т, J=8,89 Гц, 2 Н) , 7,09 (д, J=8,89 Гц, 2 Н), 7,12 (д, 4 Н), 7,50 (д, J=8,02 Гц, 4 Н), 9,99 (с, 2 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Анализ с репликоном 1b-Con1 описан ниже. Пример 10. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат и диметил-(2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5 диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат К смеси продукта примера 1G (0,030 г, 0,055 ммоль), (S)-2-(метоксикарбониламино)-3 метилбутановой кислоты (0,024 г, 0,14 ммоль) и HATU (0,052 г, 0,14 ммоль) в DMSO (0,3 мл) добавляли основание Хунига (0,024 мл, 0,166 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь распределяли между водой и этилацетатом и органический слой концентрировали и подвергали очистке посредством ВЭЖХ на полупрепаративной обращенно-фазовой колонке С 18 с использованием градиента из 10-100% ацетонитрила в 0,1% водной ТХУ. Транс-замещенный изомер пирролидина был первым элюируемым из 2 стереоизомеров, давая указанное в заголовке соединение в качестве 1:1 смеси диастереомеров (9 мг, 16%). 1 Н ЯМР (соль ТХУ) (400 МГц, DMSO-D6)м.д. 0,85-0,96 (м, 12 Н), 1,64 (д, J=5,75 Гц, 2 Н), 1,82-1,92, 6,77 (т, J=8,89 Гц, 2 Н), 7,12 (дд, J=8,51, 1,68 Гц, 4 Н), 7,31 (дд, J=8,24, 3,36 Гц, 2 Н), 7,50 (д, J=7,26 Гц,4 Н), 9,99 (с, 2 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Пример 11. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1-диил)дикарбамат К смеси продукта примера 1G (0,030 г, 0,055 ммоль), (S)-2-(метоксикарбониламино)-3 метилбутановой кислоты (0,024 г, 0,14 ммоль) и HATU (0,052 г, 0,14 ммоль) в DMSO (0,3 мл) добавляли основание Хунига (0,024 мл, 0,166 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь распределяли между водой и этилацетатом и органический слой концентрировали и подвергали очистке посредством ВЭЖХ на полупрепаративной обращенно-фазовой колонке С 18 с использованием градиента из 10-100% ацетонитрила в 0,1% водной ТХУ. Цис-замещенный изомер пирролидина было вторым из 2 элюируемых стереоизомеров, давая указанное в заголовке соединение(дд, J=6,72, 2,06 Гц, 6 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Пример 12. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-l-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат Продукт примера 10 разделяли хиральной хроматографией на полупрепаративной колонке Chiralpak AD-H, элюируя смесью 1:1 гексан:(2:1 2-PrOH:EtOH). Указанное в заголовке соединение элюировали в качестве первого из 2 стереоизомеров. 1(м, 2 Н), 2,08-2,19 (м, 2 Н), 3,52 (с, 6 Н), 3,58-3,66 (м, 2 Н), 3,76-3,85 (м, 2 Н), 4,02 (т, J=8,51 Гц, 2H), 4,42 (дд,J=8,02, 4,88 Гц, 2 Н), 5,15 (д, J=6,51 Гц, 2 Н), 6,20 (дд, J=9,16, 4,39 Гц, 2 Н), 6,78 (т, J=8,89 Гц, 2 Н), 7,13 (д,J=8,46 Гц, 4 Н), 7,31 (д, J=8,35 Гц, 2 Н), 7,50 (д, J=8,46 Гц, 4 Н), 9,99 (с, 2 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном Пример 34 А. 1-(4-трет-Бутилфенил)-2,5-бис(4-нитрофенил)пирролидин Продукт примера 1 С (3,67 г, 7,51 ммоль) и 4-трет-бутиланилин (11,86 мл, 75 ммоль) в DMF (40 мл) перемешивали в атмосфере азота при 50 С в течение 4 ч. Полученную смесь разбавляли этилацетатом,обрабатывали 1 M HCl, перемешивали в течение 10 мин и фильтровали для удаления твердых веществ. Органический слой фильтрата промывали два раза рассолом, сушили сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле, элюируя этилацетатом в гексане (5-30%) с получением твердого вещества. Твердое вещество растирали в минимальном объеме смеси 1:9 этилацетат/гексан с получением светло-желтого твердого вещества в качестве смеси транс- и цис-изомеров (1,21 г, 36%). Пример 34 В. 4,4'-2S,5S)-l-(4-трет-Бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)дианилин и 4,4'-2R,5R)-1-(4-третбутилфенил)пирролидин-2,5-диил)дианилин К раствору продукта примера 34 А (1,1 г, 2,47 ммоль) в этаноле (20 мл) и THF (20 мл) добавлялиPtO2 (0,22 г, 0,97 ммоль) в 50-мл колбе высокого давления и перемешивали при давлении водорода 30 фунт/кв. дюйм (207 кПа) при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь фильтровали через нейлоновую мембрану и упаривали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле, элюируя этилацетатом в гексане (20-60%). Указанное в заголовке соединение элюировали в качестве первого из 2 стереоизомеров(2S,2'S)-трет-бутил-2,2'-(4,4'2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)дипирролидин-1-карбоксилат К смеси продукта примера 34 В (250 мг, 0,648 ммоль), (S)-1-(трет-бутоксикарбонил)пирролидин-2 карбоновой кислоты (307 мг, 1,427 ммоль) и HATU (542 мг, 1,427 ммоль) в DMSO (10 мл) добавляли основание Хунига (0,453 мл, 2,59 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали рассолом,сушили сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле,элюируя этилацетатом в гексане (10-50%) с получением указанного в заголовке соединения (500 мг,99%). Пример 34D.(2S,2'S)-N,N'-(4,4'-2S,5S)-l-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фенилендипирролидин-2-карбоксамид и (2S,2'S)-N,N'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фенилендипирролидин-2-карбоксамид К продукту примера 34C (498 мг, 0,638 ммоль) в дихлорметане (4 мл) добавляли ТХУ (6 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и концентрировали в вакууме. Осадок распределяли между смесью 3:1 CHCl3:изопропиловый спирт и насыщенным водным растворомNaHCO3. Водный слой вновь экстрагировали смесью 3:1 CHCl3:изопропиловый спирт. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (345 мг, 93%). Пример 34 Е. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат и диметил-(2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин 2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-6 020031 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат Продукт примера 34D (29,0 мг, 0,050 ммоль), (S)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановую кислоту (19,27 мг, 0,110 ммоль), EDAC (21,09 мг, 0,110 ммоль), НОВТ (16,85 мг, 0,110 ммоль) и Nметилморфолин (0,027 мл, 0,250 ммоль) объединяли в DMF (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой дважды промывали рассолом, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле, элюируя этилацетатом в гексане (50-80%), с получением твердого вещества. Твердое вещество растирали со смесью этилацетат/гексан с получением указанного в заголовке соединения (13 мг, 29%). 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-D6)м.д. 0,85-0,95 (м, 12 Н), 1,11 (с, 9 Н), 1,59-1,65 (м, 2 Н), 1,79-2,04 (м,8 Н), 2,10-2,18 (м, 2 Н), 2,41-2,46 (м, 2 Н), 3,52 (с, 6 Н), 3,57-3,67 (м, 2 Н), 3,76-3,86 (м, 2 Н), 4,00 (т, J=7,56 Гц, 2 Н), 4,39-4,46 (м, 2 Н), 5,15 (д, J=7,00 Гц, 2 Н), 6,17 (д, J=7,70 Гц, 2 Н), 6,94 (д, J=8,78 Гц, 2 Н), 7,13 (д,J=7,37 Гц, 4 Н), 7,30 (д, J=8,20 Гц, 2 Н), 7,50 (д, J=8,24 Гц, 4 Н), 9,98 (с, 2 Н); (ESI + ) m/z 895 (М+Н)+. Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Пример 35. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат Продукт примера 34 Е очищали хиральной хроматографией на полупрепаративной колонке Chiralpak AD-H, элюируя смесью 2:1 гексан:(2:1 изопропиловый спирт: EtOH). Указанное в заголовке соединение было первым из двух элюируемых 2 диастереомеров. 1(д, J=5,42 Гц, 2 Н), 1,80-2,04 (м, 8 Н), 2,09-2,19 (м, 2H), 2,44-2,47 (м, 2 Н), 3,52 (с, 6 Н), 3,59-3,66 (м, 2 Н),3,77-3,84 (м, 2 Н), 4,02 (т, J=8,40 Гц, 2 Н), 4,42 (дд, J=7,86, 4,83 Гц, 2 Н), 5,14 (д, J=6, 18 Гц, 2 Н), 6,17 (д,J=8,67 Гц, 2 Н), 6,94 (д, J=8,78 Гц, 2 Н), 7,13 (д, J=8,46 Гц, 4 Н), 7,31 (д, J=8,35 Гц, 2 Н), 7,50 (д, J=8,35 Гц,4 Н), 9,98 (с, 2 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах репликона HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Пример 36. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат Продукт примера 34 Е очищали хиральной хроматографией на полупрепаративной колонке Chiralpak AD-H, элюируя смесью 2:1 гексан:(2:1 изопропиловый спирт: EtOH). Указанное в заголовке соединение было из двух элюируемых диастереомеров. 1(д, J=5,53 Гц, 2H), 1,82-2,04 (м, 8 Н), 2,09-2,18 (м, 2 Н), 2,41-2,47 (м, 2H), 3,52 (с, 6 Н), 3,58-3,67 (м, 2 Н),3,75-3,84 (м, 2 Н), 4,02 (т, J=7,26 Гц, 2 Н), 4,43 (дд, J=7,92, 4,88 Гц, 2 Н), 5,14 (д, J=6, 18 Гц, 2 Н), 6,17 (д,J=8,78 Гц, 2 Н), 6,94 (д, J=8,67 Гц, 2 Н), 7,12 (д, J=8,46 Гц, 4 Н), 7,31 (д, J=8,35 Гц, 2 Н), 7,49 (д, J=8,46 Гц,4 Н), 9,98 (с, 2H). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Пример 37. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат(S)-2,5-диоксопирролидин-1-ил-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутаноат К смеси (S)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутановой кислоты (19,66 г, 112 ммоль) и Nгидроксисукцинимида (13,29 г, 116 ммоль) добавляли этилацетат (250 мл) и смесь охлаждали до 0-5 С. Добавляли диизопропилкарбодиимид (13,88 г, 110 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 05 С в течение приблизительно 1 ч. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Твердые вещества (побочный продукт диизопропилмочевины) фильтровали и промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением масла. К маслу добавляли изопропиловый спирт (200 мл) и смесь нагревали до приблизительно 50 С с получением гомогенного раствора. При охлаждении образовывались кристаллические твердые вещества. Твердые вещества фильтровали и промывали изопропиловым спиртом (320 мл) и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (23,2 г, выход 77%). Пример 37 В.(S)-1-S)-2-(метоксикарбониламино)-3-метилбутаноил)пирролидин-2-карбоновая кислота К смеси L-пролина (4,44 г, 38,6 ммоль), воды (20 мл), ацетонитрила (20 мл) и DIEA (9,5 г, 73,5 ммоль) добавляли раствор продукта примера 37 А (10 г, 36,7 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор концентрировали в вакууме для удаления ацетонитрила. К полученному прозрачному водному раствору добавляли 6 н. HCl (9 мл) до рН 2. Раствор переносили в делительную воронку и добавляли 25% NaCl (10 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (75 мл), а затем вновь этилацетатом (620 мл), и объединенные экстракты промывали 25% NaCl (210 мл). Растворитель выпаривали с получением густого масла. Добавляли гептан и растворитель выпаривали с получением пены, которую сушили в высоком вакууме. Добавляли диэтиловый эфир и растворитель выпаривали с получением пены, которую сушили в высоком вакууме с получением указанного в заголовке соединения (10,67 г) в виде белого твердого вещества. Соединение примера 37 В также можно получать следующим способом. Во флакон помещали L-валин (35 г, 299 ммоль), 1 н. раствор гидроксида натрия (526 мл, 526 ммоль) и карбонат натрия (17,42 г, 164 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 мин для растворения твердых веществ, а затем охлаждали до 15 С. К реакционной смеси медленно добавляли метилхлорформиат (29,6 г, 314 ммоль). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь охлаждали до 15 С и рН доводили до 5,0 раствором концентрированной HCl. Добавляли 100 мл 2 метилтетрагидрофурана (2-MeTHF) и доведение рН продолжали до достижения рН 2,0. Добавляли 150 мл 2-MeTHF и смесь перемешивали в течение 15 мин. Слои разделяли и водный слой экстрагировали 100 мл 2-MeTHF. Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4 и фильтровали, и осадок с Na2SO4 промывали 50 мл 2-MeTHF. Раствор продукта концентрировали до 100 мл, дважды очищали 120 мл IPAc. Медленно добавляли 250 мл гептана, а затем объем смеси концентрировали до 300 мл. Смесь нагревали до 45 С и добавляли 160 мл гептана. Смесь охлаждали до комнатной температуры в течение 2 ч, перемешивали в течение 30 мин, фильтровали и промывали смесью 2-MeTHF/гептан (1:7, 80 мл). Влажный осадок сушили при 55 С в течение 24 ч с получением 47,1 г продукта Moc-L-Val-OH в виде белого твердого вещества (90%).Moc-L-Val-OH (150 г, 856 ммоль), гидрат HOBt (138 г, 899 ммоль) и DMF (1500 мл) помещали в колбу. Смесь перемешивали в течение 15 мин с получением прозрачного раствора. Добавляли гидрохлорид EDC (172 г, 899 ммоль) и перемешивали в течение 20 мин. Смесь охлаждали до 13 С и добавляли гидрохлорид бензилового эфира (L)-пролина (207 г, 856 ммоль). Затем добавляли триэтиламин (109 г,1079 ммоль) в течение 30 мин. Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до 15 С и добавляли 1500 мл 6,7% NaHCO3 в течение 1,5 ч, с последующим добавлением 1200 мл воды в течение 60 мин. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин,фильтровали и промывали смесью вода/DMF (1:2, 250 мл) и затем водой (1500 мл). Влажный осадок сушили при 55 С в течение 24 ч с получением 282 г продукта в виде белого твердого вещества (90%). Полученные твердые вещества (40 г) и 5% Pd/оксид алюминия помещали в реактор Parr, а затем добавляли THF (160 мл). Реактор закрывали и продували азотом (620 фунт/кв. дюйм (138 кПа, а затем продували водородом (630 фунтов на кв. дюйм (207 кПа. Давление в реакторе повышали до 30 фунт/кв. дюйм с помощью водорода и его встряхивали при комнатной температуре в течение приблизительно 15 мин. Полученную взвесь фильтровали через фильтр GF/F и концентрировали до приблизительно 135 г раствора. Добавляли гептан (120 мл), и раствор перемешивали до образования твердых веществ. После дополнительных 2-3 ч по каплям добавляли дополнительный гептан (240 мл), взвесь перемешивали в течение приблизительно 1 ч, затем фильтровали. Твердые вещества сушили с получением указанного в заголовке соединения. Пример 37 С. ждали до -5 С, и добавляли N,N-диизопропилэтиламин (6,81 г, 52,7 ммоль) в течение 30 с. Отдельно приготавливали раствор метансульфонового ангидрида (6,01 г, 34,5 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране (30 мл) и добавляли к взвеси диола в течение 3 мин, поддерживая внутреннюю температуру от -15 С до 25 С. После перемешивания в течение 5 мин при -15 С, охлаждающую баню удаляли и реакционной смеси позволяли медленно нагреться до 23 С, и ее перемешивали в течение 30 мин. После завершения реакции неочищенную взвесь переносили непосредственно на следующую стадию. Пример 37D.(2S,5S)-1-(4-трет-Бутилфенил)-2,5-бис(4-нитрофенил)пирролидин К раствору неочищенного продукта примера 37 С (7,35 г, 13,39 ммоль) добавляли 4-третбутиланилин (13,4 г, 90 ммоль) при 23 С в течение 1 мин. Реакционную смесь нагревали до 65 С в течение 2 ч. После завершения нагревания реакционную смесь охлаждали до 23 С и разбавляли 2 метилтетрагидрофураном (100 мл) и 1 М HCl (150 мл). После разделения фаз органическую фазу обрабатывали 1 M HCl (140 мл), 2-метилтетрагидрофураном (50 мл) и 25 мас.% водной NaCl (100 мл) и фазы разделяли. Органическую фазу промывали 25 мас.% водным раствором NaCl (50 мл), сушили надMgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме до приблизительно 20 мл. Для индукции кристаллизации добавляли гептан (30 мл) и дополнительный 2-метилтетрагидрофуран. Взвесь далее концентрировали и медленно добавляли дополнительный гептан (40 мл), и взвесь фильтровали, промывая смесью 2 метилтетрагидрофуран:гептан (1:4, 20 мл). Твердые вещества суспендировали в MeOH (46 мл) в течение 3 ч, фильтровали и влажное твердое вещество промывали дополнительным МеОН (18 мл). Твердое вещество сушили при 45 С в вакуумной печи в течение 16 ч с получением указанного в заголовке соединения (3,08 г, 51% 2-стадийный выход). Пример 37 Е. 4,4'-2S,5S)-l-(4-трет-Бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)дианилин В 160-мл сосуд Parr для гидрогенизации с мешалкой добавляли продукт примера 37D (2 г, 4,49 ммоль), а затем 60 мл THF и никель Ренея Grace 2800 (1 г, 50 мас.% (сухая масса в потоке азота. Реактор собирали и продували азотом (820 фунт/кв. дюйм (138 кПа, а затем продували водородом (830 фунт/кв. дюйм (207 кПа. Затем реактор помещали под давление водорода 30 фунт/кв. дюйм (207 кПа) и начинали встряхивание (700 об./мин) и продолжали в течение всего 16 ч при комнатной температуре. Взвесь фильтровали вакуумной фильтрацией с использованием стекловолоконного фильтра GF/F Whatman. Упаривание фильтрата с получением взвеси с последующим добавлением гептана и фильтрацией дали неочищенное указанное в заголовке соединение, которое сушили и использовали непосредственно на следующей стадии. Пример 37F. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фенилен)бис(азандиил)бис(оксометиленбис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат К раствору продукта примера 37E (1,64 г, 4,25 ммоль) в DMF (20 мл), продукта примера 37 В (2,89 г,10,63 ммоль) и HATU (4,04 г, 10,63 ммоль) в DMF (150 мл) добавляли триэтиламин (1,07 г, 10,63 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. В реакционную смесь добавляли 20 мл воды и полученный белый осадок фильтровали, и твердое вещество промывали водой (35 мл). Твердое вещество сушили продуванием в течение 1 ч. Неочищенный материал наносили на колонку с силикагелем и элюировали градиентом, начиная со смеси этилацетат/гептан (3/7) и заканчивая чистым этилацетатом. Желаемые фракции объединяли и растворитель отгоняли с получением очень светлого желтого твердого вещества, которое сушили при 45 С в вакуумной печи с продуванием азотом в течение 15 ч с получением указанного в заголовке соединения (2,3 г, выход 61%). 1 Н ЯМР (400 МГц, DMSO-D6)м.д. 0,88 (д, J=6,61 Гц, 6 Н), 0,93 (д, J=6,72 Гц, 6 Н), 1,11 (с, 9 Н), 1,63(д, J=5,42 Гц, 2 Н), 1,80-2,04 (м, 8 Н), 2,09-2,19 (м, 2 Н), 2,44-2,47 (м, 2 Н), 3,52 (с, 6 Н), 3,59-3,66 (м, 2 Н),3,77-3,84 (м, 2 Н), 4,02 (т, J=8,40 Гц, 2 Н), 4,42 (дд, J=7,86, 4,83 Гц, 2 Н), 5,14 (д, J=6,18 Гц, 2 Н), 6,17 (д,J=8,67 Гц, 2 Н), 6,94 (д, J=8,78 Гц, 2 Н), 7,13 (д, J=8,46 Гц, 4 Н), 7,31 (д, J=8,35 Гц, 2 Н), 7,50 (д, J=8,35 Гц,4 Н), 9,98 (с, 2 Н). Альтернативно продукт примера 37E (11,7 г, 85 мас.%, 25,8 ммоль) и продукт примера 37 В (15,45 г,56,7 ммоль) суспендировали в EtOAc (117 мл), добавляли диизопропилэтиламин (18,67 г, 144 ммоль) и раствор охлаждали до 0 С. В отдельной колбе циклический ангидрид 1-пропанфосфоновой кислоты(Т 3 Р) (46,0 г, 50 мас.% в EtOAc, 72,2 ммоль) растворяли в EtOAc (58,5 мл) и помещали в капельную воронку. В реакционную смесь по каплям добавляли раствор Т 3 Р в течение 3-4 ч и перемешивали до завершения реакции. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и промывали 1 M HCl/7,5 мас.% NaCl (100 мл), затем промывали 5% NaHCO3 (100 мл), затем промывали 5% раствором NaCl (100 мл). Раствор концентрировали до приблизительно 60 мл, добавляли EtOH (300 мл) и раствор концентрировали до 84 г раствора. Часть раствора продукта (29 г) в EtOH нагревали до 40 С и добавляли 134 г 40 мас.% EtOH в H2O. Добавляли взвесь затравки в 58 мас./мас.% EtOH/H2O, позволяли ей перемешиваться при 40 С в течение нескольких часов, затем охлаждали до 0 С. Затем суспензию фильтровали и промывали 58 мас./мас.%EtOH/H2O. Продукт сушили при 40-60 С в вакууме, а затем регидратировали, помещая в вакуумную печь лоток с водой с получением указанного в заголовке соединения. Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1bCon1 в присутствии 5% FBS. Пример 38. Диметил-(2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат(1S,4S)-1,4-бис (4-нитрофенил)бутан-1,4-диилдиметансульфонат Указанное в заголовке соединение получали с использованием способов примера 37 С, заменив продукт примера 32 продуктом примера 33. Пример 38 В.(2R,5R)-1-(4-Фторфенил)-2,5-бис(4-нитрофенил)пирролидин Указанное в заголовке соединение получали с использованием способов примера 37D, заменив 4 трет-бутиланилин 4-фторанилином. Пример 38 С. 4,4'-2R,5R)-l-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)дианилин К раствору продукта примера 38 В (2,34 г, 5,74 ммоль) в смеси 1:1 этанол:THF (60 мл) в 250-мл колбе высокого давления из нержавеющей стали добавляли PtO2 (0,47 г, 2,06 ммоль) и полученную смесь помещали под давление H2 (30 фунт./кв. дюйм (207 кПа и перемешивали при комнатной температуре в течение 90 мин. Смесь фильтровали через нейлоновую мембрану и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле с использованием градиента растворителей, состоящего из 0-65% этилацетата в гексане, с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества (0,736 г, 37%). Пример 38D.(2S,2'S)-трет-бутил-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)дипирролидин-1-карбоксилат К раствору продукта примера 38 С (3,54 г, 10,19 ммоль), (S)-1-(трет-бутоксикарбонил)пирролидин 2-карбоновой кислоты (5,48 г, 25,5 ммоль) и HATU (9,69 г, 25,5 ммоль) в безводном NMP (50 мл) добавляли N,N-диизопропилэтиламин (5,29 мл, 30,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30-45 мин. Реакционную смесь разбавляли водой (500 мл). Осажденный продукт фильтровали и промывали водой (3100 мл), раствором бикарбоната натрия (50 мл) и водой (50 мл). Продукт сушили при 40 С в течение 15 ч. Этот материал (8,5 г) пропускали через слой силикагеля и элюировали этилацетатом с получением белого твердого продукта (7,9 г, 99%). Пример 38E.(2S,2'S)-N,N'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1-фенилендипирролидин 2-карбоксамид К раствору продукта примера 38D (7,9 г, 10,65 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавляли 5 M раствор HCl в изопропиловом спирте (50 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель выпаривали с помощью rotavap в вакууме, и неочищенный материал отбирали в дихлорметан, содержащий 20% метанол (200 мл). Раствор промывали 5% раствором гидроксида аммония (90 мл), рассолом (50 мл) и сушили над MgSO4. Раствор фильтровали и концентрировали с получением 6,5 г неочищенного продукта. Этот материал перекристаллизовывали из смеси этилацетат/гептан (8/2) с получением указанного в заголовке соединения (5,0 г, выход 87%). Пример 38F. Диметил-(2S,2'S)-l,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5-диил)бис(4,1 фениленбис(азандиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3,3-диметил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамат К раствору продукта примера 38 Е (4,14 г, 7,64 ммоль), (S)-2-метоксикарбониламино-3,3-диметилмасляной кислоты (3,62 г, 19,11 ммоль) и EDAC (3,66 г, 19,11 ммоль) в безводном DMF (80 мл) добавляли N,N-диизопропилэтиламин (2,96 г, 22,93 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь переливали в 400 мл воды, и полученный белый осадок фильтровали и промывали водой (350 мл), бикарбонатом натрия (50 мл), водой (50 мл), и сушили при 45 С в вакуумной печи при продувании азотом в течение 15 ч с получением 7,0 г неочищенного продукта. Неочищен- 10020031 ный материал наносили на колонку с силикагелем (150 г диоксида кремния) и элюировали градиентом,начиная со смеси этилацетат/гептан (7/3) и заканчивая этилацетатом. Желаемые фракции объединяли, и растворитель отгоняли с получением очень светлого желтого масла, которое растирали с МТВЕ/гептаном(1:9) в течение 1 ч. Полученное таким образом белое твердое вещество фильтровали и сушили в вакуумной печи при продувании азотом с получением 6,1 г продукта. 5,5 г твердого вещества растворяли в 16 мл метанола, и этот раствор добавляли в воду (220 мл) в 500-мл колбе. Взвесь перемешивали в течение 30 мин, и твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при 45 С при продувании азотом в течение 15 ч с получением указанного в заголовке соединения (5,4 г). 1 Н ЯМР (400 МГц, DMSO-D6)м.д. 0,96 (с, 18 Н), 1,64 (д, J=5,53 Гц, 2 Н), 1,78-1,93 (м, 6 Н), 1,94-2,06(м, 2 Н), 2,09-2,21 (м, 2 Н), 3,54 (с, 6 Н), 3,59-3,69 (м, 2 Н), 3,72-3,83 (м, 2 Н), 4,20 (д, J=8,89 Гц, 2 Н), 4,43 (дд,J=7,92, 5,42 Гц, 2 Н), 5,16 (д, J=6,29 Гц, 2H), 6,20 (дд, J=9,16, 4,39 Гц, 2 Н), 6,77 (т, J=8,95 Гц, 2H), 7,12 (д,J=8,57 Гц, 4 Н), 7,50 (д, J=8,57 Гц, 4 Н), 9,99 (с, 2 Н). Указанное в заголовке соединение продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем приблизительно 0,1 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям каждого соединения в примерах. При тестировании с использованием HCV анализа с репликоном 1b-Con1 в присутствии 5% FBS каждое из указанных выше соединений продемонстрировало значение ЕС 50 менее чем 1 нМ. При тестировании с использованием анализа с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS каждая из указанных выше смесей показала значение ЕС 50 менее чем 1 нМ. Смесь 12 продемонстрировала значение ЕС 50 приблизительно от 1 до 10 нМ в анализах с репликоном HCV 1b-Con1 в присутствии 5% FBS. Активность каждого соединения против HCV можно определять путем измерения активности репортерного гена люциферазы в репликоне в присутствии 5% FBS. Репортерный ген люциферазы помещен под транскрипционный контроль полиовируса IRES вместо HCV IRES, и для поддержания репликации репликона используют клетки HuH-7. Ингибиторную активность соединений по настоящему изобретению можно оценивать с использованием множества анализов, известных в данной области. Например, для охарактеризации соединения в клеточной культуре можно использовать две стабильных клеточных линии с субгеномным репликоном: одна из которых происходит из генотипа 1 а-Н 77, а другая происходит из генотипа 1b-Con1, полученные от University of Texas Medical Branch, Galveston, TX or Apath, LLC, St. Louis, МО, соответственно. Конструкции репликона могут представлять собой бицистронные субгеномные репликоны. Конструкция репликона генотипа 1 а содержит кодирующую область NS3-NS5B, происходящую из штамма Н 77 HCV (1 аН 77). Также репликон имеет репортер люциферазы светляка и селективный маркер неомицинфосфотрансферазы (Neo). Эти две кодирующих области, разделенные протеазой FMDV2a, содержат первый цистрон бицистронной конструкции репликона и второй цистрон, содержащий кодирующую областьNS3-NS5B с дополнительными адаптационными мутациями E1202G, K1691R, K2040R и S2204I. Конструкция репликона 1b-Con1 идентична репликону 1 а-Н 77, за исключением того, что 5'-UTR HCV, 3'-UTR и кодирующая область NS3-NS5B происходят из штамма 1b-Con1 и адаптивные мутации представляют собой K1609 Е, K1846 Т и Y3005C. Кроме того, конструкция репликона 1b-Con1 содержит IRES полиовируса между IRES HCV и геном люциферазы. Клеточные линии репликона можно поддерживать в модифицированной способом Дульбекко среде Игла (DMEM), содержащей 10% (об./об.) эмбриональную телячью сыворотку (FBS), 100 МЕ/мл пенициллина, 100 мг/мл стрептомицина (Invitrogen) и 200 мг/млG418 (Invitrogen). Ингибиторные эффекты соединений по изобретению на репликацию HCV можно определять путем измерения активности репортерного гена люциферазы. Например, содержащие репликон клетки можно высевать в 96-луночные планшеты с плотностью 5000 клеток на лунку в 100 мкл DMEM, содержащей 5% FBS. На следующие сутки соединения можно разбавлять в диметилсульфоксиде (DMSO) с получением 200 маточного раствора в серии разведений в восемь с половиной раз. Затем серии разведений можно далее разбавлять в 100 раз в среде, содержащей 5% FBS. В планшеты с культивированной в течение ночи клеточной культурой, уже содержащие 100 мкл DMEM с 5% FBS, добавляют среду с ингибитором. В анализах по измерению ингибиторной активности в присутствии плазмы человека, среду из планшетов с культивированной в течение ночи клеточной культурой можно заменять DMEM, содержащей 40% плазму человека и 5% FBS. Клетки можно инкубировать в течение трех суток в инкубаторах для культивирования тканей, после чего в каждую лунку можно добавлять 30 мкл буфера для пассивного лизиса(Promega), a затем планшеты инкубируют в течение 15 мин при качании для лизиса клеток. В каждую лунку можно добавлять раствор люциферина (100 мкл, Promega) и можно измерять активность люциферазы с помощью люминометра Victor II (Perkin-Elmer). Процентное ингибирование репликации РНКHCV можно вычислять для каждой концентрации соединения и величину ЕС 50 можно вычислять с использованием нелинейной регрессионной кривой, аппроксимированной к 4-параметрическому логистическому уравнению и программному обеспечению GraphPad Prism 4. С использованием описанных выше анализов или сходных клеточных анализов с репликоном типичные соединения по настоящему изобретению продемонстрировали значительную ингибиторную активность против репликации HCV. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединения по изобретению. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать одно или несколько соединений по изобретению. Кроме того, настоящее изобретение относится кфармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемые соли. В качестве неограничивающих примеров, фармацевтически приемлемые соли могут представлять собой цвиттерионы или они могут быть получены из фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот или оснований. Предпочтительно фармацевтически приемлемая соль сохраняет биологическую эффективность свободной кислоты или основания соединения без излишней токсичности, раздражений или аллергического ответа, имеет приемлемое соотношение польза/риск, является эффективной для предполагаемого применения и не является биологически или иным образом нежелательной. Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению, как правило, включает фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. Неограничивающие примеры пригодных фармацевтически приемлемых носителей/эксципиентов включают сахара (например, лактозу, глюкозу или сахарозу),крахмалы (например, кукурузный крахмал или картофельный крахмал), целлюлозу или ее производные(например, карбоксиметилцеллюлозу натрия, этилцеллюлозу или ацетат целлюлозы), масла (например,арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло или соевое масло), гликоли (например, пропиленгликоль), буферные средства (например, гидроксид магния или гидроксид алюминия), агар, альгиновую кислоту, порошковый трагакант, солод, желатин, тальк, масло какао, не содержащую пирогенов воду, изотонический физиологический раствор, раствор Рингера, этанол или фосфатно-буферные растворы. Также в фармацевтическую композицию по настоящему изобретению могут быть включены смазывающие вещества, красители, обеспечивающие высвобождение средства, покрывающие средства, подсластители, вкусовые добавки или отдушки, консерванты или антиоксиданты. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно изготавливать, исходя из их путей введения, с использованием способов, хорошо известных в данной области. Например, стерильный инъецируемый препарат можно получать в качестве стерильной инъецируемой водной или масляной суспензии с использованием пригодных диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих веществ. Суппозитории для ректального введения можно получать смешиванием лекарственных средств с пригодным не вызывающим раздражение эксципиентом, таким как масло какао или полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при обычных температурах, но жидких при ректальной температуре, и,таким образом, они плавятся в прямой кишке и высвобождают лекарственные средства. Твердые дозированные формы для перорального введения могут представлять собой капсулы, таблетки, пилюли, порошки или гранулы. В таких твердых дозированных формах активные соединения можно смешивать по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. В дополнение к инертным разбавителям твердые дозированные формы также могут содержать другие вещества, такие как смазывающие вещества. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированные формы также могут содержать буферные средства. Кроме того, таблетки и пилюли можно получать с желудочнорезистентными покрытиями. Жидкие дозированные формы для перорального введения могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы или эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области. Жидкие дозированные формы также могут содержать смачивающие, эмульгирующие, суспендирующие средства, подсластители, вкусовые добавки или отдушки. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению также можно вводить в форме липосом, как описано в патенте США No. 6703403. Изготовление лекарственных средств, которые применимы для настоящего изобретения, главным образом, рассмотрено, например, в Hoover, JohnE., REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES (Mack Publishing Co., Easton, PA: 1975), и Lachman,L., eds., PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS (Marcel Decker, New York, N.Y., 1980). Любое соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль можно использовать для изготовления фармацевтических композиций по настоящему изобретению. В предпочтительном варианте осуществления соединение по изобретению изготавливают в твердой дисперсии, где соединение по изобретению может быть молекулярно диспергировано в аморфной матрице, которая содержит фармацевтически приемлемый гидрофильный полимер. Матрица также может содержать фармацевтически приемлемое поверхностно-активное вещество. Пригодная технология диспергирования твердого вещества для изготовления соединения по изобретению включает, но не ограничивается ими, экструзию из расплава, распылительную сушку, соосаждение, лиофилизацию или другие способы выпаривания растворителя, причем предпочтительными являются экструзия из расплава и распылительная сушка. В одном примере соединение по изобретению изготавливают в виде твердой дисперсии, содержащей коповидон и витамин Е TPGS. В другом примере соединение по изобретению изготавливают в твердой дисперии, содержащей коповидон и Span 20. Твердая дисперсия, описанная в настоящем документе, может содержать по меньшей мере 30% по массе фармацевтически приемлемого гидрофильного полимера или комбинации таких гидрофильных полимеров. Предпочтительно твердая дисперсия содержит по меньшей мере 40% по массе фармацевтически приемлемого гидрофильного полимера или комбинации таких гидрофильных полимеров. Более предпочтительно твердая дисперсия содержит по меньшей мере 50% (включая, например, по меньшей мере 60, 70, 80 или 90%) по массе фармацевтически приемлемого гидрофильного полимера или комбинации таких полимеров. Твердая дисперсия, описанная в настоящем документе, также может содержать по меньшей мере 1% по массе фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества или комбинации таких поверхностно-активных веществ. Предпочтительно твердая дисперсия содержит по меньшей мере 2% по массе фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества или комбинации таких поверхностно-активных веществ. Более предпочтительно твердая дисперсия содержит от 4 до 20% по массе поверхностно-активного вещества (веществ), например, от 5 до 10% по массе поверхностно-активного вещества (веществ). Кроме того, твердая дисперсия, описанная в настоящем документе, может содержать по меньшей мере 1% по массе соединения по изобретению, предпочтительно по меньшей мере 5%, включая, например, по меньшей мере 10%. В одном примере твердая дисперсия содержит 5% соединения по изобретению, выбранного из соединений примеров или его соли, которое молекулярно диспергировано в аморфной матрице, содержащей 7% витамина Е-TPGS и 88% коповидона; твердую дисперсию также можно смешивать с другими эксципиентами, такими как маннит/аэросил(99:1), и весовое соотношение твердой дисперсии относительно других эксципиентов может находиться в диапазоне от 5:1 до 1:5, причем 1:1 является предпочтительным. В другом примере твердая дисперсия содержит 5% соединения по изобретению или его соли, которое молекулярно диспергировано в аморфной матрице, содержащей 5% Span 20 и 90% коповидон; твердую дисперсию также можно смешивать с другими эксципиентами, такими как маннит/аэросил (99:1), и весовое соотношение твердой дисперсии относительно других эксципиентов может находиться в диапазоне от 5:1 до 1:5, причем 1:1 является предпочтительным. Также в твердую дисперсию могут быть включены или примешаны различные добавки. Например,при прессовании твердой дисперсии в таблетки можно использовать по меньшей мере одну добавку, выбранную из регуляторов текучести, связующих веществ, смазывающих веществ, наполнителей, дезинтегрирующих средств, пластификаторов, красителей или стабилизаторов. Эти добавки можно смешивать с растертой или измельченной твердой дисперсией перед прессованием. Дезинтегрирующие средства обеспечивают быструю дезинтеграцию прессованного средства в желудке и поддерживают высвободившиеся гранулы отдельно друг от друга. Неограничивающими примерами пригодных дезинтегрирующих средств являются поперечно-сшитые полимеры, такие как поперечно-сшитый поливинилпирролидон,поперечно-сшитая карбоксиметилцеллюлоза натрия или кроскармеллоза натрия. Неограничивающими примерами пригодных наполнителей (также называемых заполнителями) являются моногидрат лактозы,гидрофосфат кальция, микрокристаллическая целлюлоза (например, Avicell), силикаты, в частности диоксид кремния, оксид магния, тальк, картофельный или кукурузный крахмал, изомальт или поливиниловый спирт. Неограничивающие примеры пригодных регуляторов текучести включают в высокой степени диспергированный диоксид кремния (например, коллоидный диоксид кремния, такой как Aerosil) и животные или растительные жиры или воски. Неограничивающие примеры пригодных смазывающих веществ включают полиэтиленгликоль (например, имеющий молекулярную массу от 1000 до 6000), стеарат магния и кальция, стеарилфумарат натрия и т.п. Неограничивающие примеры стабилизаторов включают антиоксиданты, светостабилизаторы, акцепторы радикалов или стабилизатор против микробной атаки. Кроме того, настоящее изобретение относится к способам применения соединений по настоящему изобретению (или их солей) для ингибирования репликации HCV. Способы включают контактирование клеток, инфицированных вирусом HCV, с эффективным количеством соединения по настоящему изобретению (или его соли, сольвата или пролекарства), тем самым ингибируя репликацию вируса HCV в клетках. Как используют в настоящем документе, "ингибирование" означает значительное снижение или устранение активности, подвергаемой ингибированию (например, репликации вируса). Во многих случаях типичные соединения по настоящему изобретению могут снижать репликацию вируса HCV (например, в анализе с репликоном HCV, как описано выше) по меньшей мере на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95% или более. Соединения по настоящему изобретению могут ингибировать один или несколько подтипов HCV. Примеры подтипов HCV, для которых пригодно настоящее изобретение, включают, но не ограничиваются ими, генотипы 1, 2, 3, 4, 5 и 6, HCV, включая генотипы 1 а, 1b, 2 а, 2b, 2 с, 3 а или 4 а HCV. В одном варианте осуществления соединение или соединения по настоящему изобретению (или их соли, сольваты или пролекарства) используют для ингибирования репликации HCV генотипа 1 а. В другом варианте осуществления соединение или соединения по настоящему изобретению (или их соли, сольваты или пролекарства) используют для ингибирования репликации HCV генотипа 1b. В другом варианте осуществления соединение или соединения по настоящему изобретению (или их соли, сольваты или пролекарства) используют для ингибирования репликации как генотипа 1 а, так и генотипа 1b HCV. Соединение по настоящему изобретению (или его соль, сольват или пролекарство) можно вводить в качестве единственного активного фармацевтического средства или в комбинации с другим желательным лекарственным средством, таким как другие средства против HCV, средства против ВИЧ, средства против HBV, средства против гепатита А, средства против гепатита D, средства против гепатита Е, средства против гепатита G или другие противовирусные лекарственные средства. Соединение по настоящему изобретению (или его соль) можно вводить пациенту в одной дозе или в разделенных дозах. Типичная суточная дозировка может находиться в диапазоне, но не ограничиваясь этим, от 0,1 до 200 мг/кг массы тела, например, от 0,25 до 100 мг/кг массы тела. Композиции с однократной дозой могут содержать эти количества или их доли для обеспечения суточной дозы. Предпочтительно каждая дозировка содержит достаточное количество соединения по настоящему изобретению, которое является эффективным в отношении снижения вирусной нагрузки HCV в крови или печени пациента. Количество активного ингредиента для получения единичной дозированной формы может варьировать в зависимости от подвергаемого лечению хозяина и конкретного способа введения. Понятно, что конкретный уровень дозы для любого конкретного пациента зависит от различных факторов, включая активность конкретного используемого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, режим питания, время введения,путь введения, скорость экскреции, комбинацию лекарственных средств и тяжесть конкретного заболевания, подвергаемого лечению. Соединения по настоящему изобретению также могут быть изотопно заменены. Предпочтительные изотопные замены включают замены стабильными или нерадиоактивными изотопами, такими как дейтерий, 13 С, 15N или 18 О. Включение тяжелого атома, такого как замена водорода дейтерием, может привести к изотопному эффекту, который может изменить фармакокинетику лекарственного средства. В одном примере по меньшей мере 5 мол.% (например, по меньшей мере 10 мол.%) водорода в соединении по настоящему изобретению заменено дейтерием. В другом примере по меньшей мере 25 мол.% водорода в соединении по настоящему изобретению заменено дейтерием. В следующем примере по меньшей мере 50, 60, 70, 80 или 90 мол.% водорода в соединении по настоящему изобретению заменено дейтерием. Распространенность дейтерия в природе составляет приблизительно 0,015%. Замены или обогащения дейтерием можно достигать, не ограничиваясь ими, либо путем обмены протонами с дейтерием, либо путем синтеза молекулы с обогащенными исходными материалами или с исходными материалами с заменой. Также для изотопной замены можно использовать другие способы, известные в данной области. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из диметил(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1-оксобутан-2,1 диил)дикарбамата. 2. Соединение диметил (2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-фторфенил)пирролидин-2,5 диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат. 3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемую соль. 4. Соединение диметил (2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2S,5S)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин 2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат. 5. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.4 или его фармацевтически приемлемую соль. 6. Соединение диметил (2S,2'S)-1,1'-2S,2'S)-2,2'-(4,4'-2R,5R)-1-(4-трет-бутилфенил)пирролидин 2,5-диил)бис(4,1-фениленбис(азанедиил)бис(оксометилен)бис(пирролидин-2,1-диилбис(3-метил-1 оксобутан-2,1-диил)дикарбамат. 7. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п.6 или его фармацевтически приемлемую соль.