Улучшение роста бифидобактерий в кисломолочных продуктах
Формула / Реферат
1. Способ приготовления кисломолочного продукта, включающий:
i) инокуляцию молока композицией, содержащей:
a) бактерии, принадлежащие штамму Bifidobacterium animalis подвида lactis, и
b) бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штаммов Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407), CHCC3912 (DSM21406) и штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408); и
ii) ферментацию молока.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий инокуляцию молока бактериями, принадлежащими к виду, выбранному из группы, состоящей из Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactococcus lactis и Lactobacillus acidophilus.
3. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий упаковку кисломолочного продукта.
4. Способ по п.2, в котором стадия i) включает инокуляцию молока композицией, содержащей:
a) штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis;
b) штамм Lactobacillus bulgaricus;
c) штамм Lactococcus lactis, выбранный из группы, состоящей из CHCC4462 (DSM21407), CHCC3912 (DSM21406), и штамм Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408).
5. Способ по п.4, в котором штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis выбран из группы, состоящей из CHCC5445 (ВВ-12®, DSM15954), CHCC7158 (DSM17280) и ВВ-46Ô (DSM15955).
6. Способ по любому из пп.1-5, в котором кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6°C.
7. Способ по любому из пп.1-6, в котором молоко на стадии i) инокулируют с использованием от 105 до 3´107 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis и/или с использованием от 104 до 3,5´106 КОЕ/г бактерий Streptococcus thermophilus или Lactococcus lactis.
8. Способ по п.3, в котором кисломолочный продукт помещают в герметичную упаковку, которая содержит от 10 до 5000 мл, или от 25 до 3000 мл, или от 50 до 1000 мл продукта.
9. Кисломолочный продукт, получаемый способом по любому из пп.1-8, содержащий Bifidobacterium animalis подвида lactis и бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штаммов Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407), CHCC3912 (DSM21406) и штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408).
10. Кисломолочный продукт по п.9, где продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6°C.
11. Кисломолочный продукт по любому одному из пп.9, 10, который содержит 103, предпочтительно по меньшей мере 105, КОЕ/г штамма Streptococcus thermophilus.
12. Композиция, используемая в способе по пп.1-8, содержащая:
a) бактерии, принадлежащие штамму Bifidobacterium animalis подвида lactis; и
b) бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407), CHCC3912 (DSM21406) и штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408).
13. Штамм Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408), используемый в способе по пп.1-8.
14. Штамм Lactococcus lactis CHCC3912 (DSM21406), используемый в способе по пп.1-8.
Текст
УЛУЧШЕНИЕ РОСТА БИФИДОБАКТЕРИЙ В КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТАХ Изобретение относится к способу приготовления кисломолочного продукта, содержащего бифидобактерии в сочетании с молочнокислыми бактериями вида Lactococcus lactis, Sterptococcusthermophilus и/или Lactobacillus bulgaricus. Проблема, которую необходимо решить, состоит в том, чтобы предложить способ улучшения роста популяции бифидобактерии в молоке во время ферментации для приготовления кисломолочных продуктов (например, йогурта) для того, чтобы получить большое количество клеток бифидобактерии в готовом продукте. Фолькенберг Дитте Мари (DK),Семанди Сесиль (FR) Медведев В.Н. (RU) Область изобретения Настоящее изобретение относится к улучшению роста Bifidobacterium animalis подвида lactis при помощи выбранных бактериальных штаммов в кисломолочных продуктах. Уровень техники изобретения Молочные продукты, в особенности подобные йогурту продукты, формируют, вне всяких сомнений, самый большой сегмент рынка пробиотических продуктов. Молочные продукты являются превосходными носителями для доставки полезных пробиотических бактерий, таких как бифидобактерии, и для введения их в желудочно-кишечный тракт.Bifidobacterium animalis подвида lactis BB-12 представляет собой хорошо известную бактерию,доступную от Chr. Hansen A/S, Хоршолм, Дания. В случае ВВ-12 имеющиеся клинические доказательства указывают на то, что необходима ежедневная доза, по меньшей мере 109-1010 КОЕ жизнеспособных пробиотических бактерий (кое/КОЕ является сокращением для клеткообразующих единиц). Таким образом, желательно достигать высокий уровень, например 108 КОЕ жизнеспособных клеток пробиотических бактерий на 1 г кисломолочного продукта (например, кисломолочного йогуртного продукта). В документе EP 1989942/WO 2008/099543, рассматриваемом относительно новизны, раскрыты пять определенных штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis, используемых для стимуляции ростаBifidobacterium longum. В данном документе не раскрывается повышение роста Bifidobacterium animalis подвида lactis. В AU 2007333619 раскрыто ферментационное исследование путем совместного культивированияBifidobacterium longum с целью выявления молочнокислых бактериальных штаммов, которые могут стимулировать рост Bifidobacterium longum, и пять определенных штаммов Lactococcus lactis subsp. lactis. В данном документе не раскрывается повышение роста Bifidobacterium animalis подвида lactis. В документе WO 2008/148561, рассматриваемом относительно новизны, не раскрыты штаммыStreptococcus thermophilus. В данном документе не раскрывается повышение роста Bifidobacteriumanimalis подвида lactis и штаммов Lactococcus lactis. В документе ЕР 0974268 раскрыто культивирование в смеси определенных штаммов Lactococcuslactis subsp. lactis с определенным Bifidobacterium breve. В данном документе не раскрывается повышение роста Bifidobacterium animalis подвида lactis. В статье Saxelin et al., 1999 раскрыты принципы получения пробиотических стартовых культур и их показатели стабильности при хранении. Пробиотические штаммы использовались в качестве единой стартовой культуры или совместно с поддерживающей культурой. Одна поддерживающая культура состояла только из Streptococcus thermophilus (St-20), две другие были йогуртными заквасками сS.thermophilus и Lactobacillus delbrueckii spp. bulgaricus (YC280 и YC380). Также на с. 391, параграф 1,строки 11-14 данного документа указано, что число клеток пробиотического штамма В.lactis BB12 было постоянно во всех комбинациях с двумя йогуртными заквасками (фиг. 2). Таким образом, в данном документе не раскрыт штамм S.thermophilus, который повышает рост Bifidobacterium animalis подвидаlactis, и не раскрывается повышение роста Bifidobacterium animalis подвида lactis со штаммомLactococcus lactis. В документе WO 2006/133718 не раскрыты комбинации CHCC4462 и Bifidobacterium animalis подвида lactis. Сущность изобретения Проблема, которую необходимо решить при помощи настоящего изобретения, состоит в том, чтобы предложить способ для улучшения роста популяции Bifidobacterium animalis подвида lactis в молоке во время процесса ферментации при производстве кисломолочных продуктов (например, йогурта) для того,чтобы получить большое количество клеток Bifidobacterium animalis подвида lactis в готовом продукте. Решение основано на неожиданном открытии авторов настоящего изобретения, что определенные штаммы Lactococcus lactis в значительной степени улучшают рост Bifidobacterium animalis подвида lactis при ферментации молока. При использовании одного из данных штаммов получающийся в результате кисломолочный продукт содержит более чем 108 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis (непосредственно после ферментации). Таким образом, нет необходимости добавлять дополнительныеBifidobacterium animalis подвида lactis после окончания ферментации для того, чтобы получить продукт,например, с 108 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis. Авторы изобретения проверили ряд различных штаммов Lactococcus lactis и обнаружили, что штаммы, обозначаемые как Lactococcus lactisCHCC3912 и CHCC4462 и депонируемые как DSM21406 и DSM21408 соответственно, в значительной степени улучшают рост Bifidobacterium animalis подвида lactis во время ферментации молока. В действительности, некоторые другие штаммы Lactococcus lactis отрицательно влияют на рост Bifidobacterium Кроме того, авторы изобретения заметили, что штамм Streptococcus thermophilus (CHCC7018) обладает уникальным свойством в том смысле, что штамм также улучшает рост Bifidobacterium animalis подвида lactis. Таким образом, один из аспектов изобретения относится к способу приготовления кисломолочного продукта, такого как продукт, содержащий по меньшей мере 108 КОЕ Bifidobacterium animalis подвидаi) инокуляцию молока культурой (такой как йогуртовая культура) , содержащей по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis, по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus, по меньшей мере один штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis и, необязательно, по меньшей мере один штаммLactobacillus bulgaricus, где один из указанных штаммов Lactococcus lactis предпочтительно выбран из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis CHCC3912 (DSM21406), мутанта CHCC3912, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, и варианта CHCC3912, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis; или CHCC4462 (DSM21407), мутанта CHCC4462,который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, и варианта CHCC4462, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis;ii) ферментацию молока при подходящих условиях;iii) необязательно, размещение подходящего количества кисломолочного продукта в подходящей упаковке. Представляющий интерес вариант осуществления относится к способу приготовления кисломолочного продукта, содержащего по меньшей мере 108 КОЕ Bifidobacterium animalis подвида lactis на 1 г кисломолочного продукта, где способ включает:i) инокуляцию молока йогуртовой культурой, содержащей по меньшей мере один штаммLactobacillus bulgaricus, по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus, по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis и по меньшей мере один штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis, где один из указанных штаммов Lactococcus lactis представляет собой один из штаммов Lactococcus lactisii) ферментацию молока при подходящих условиях для того, чтобы получить кисломолочный продукт по меньшей мере с 108 КОЕ Bifidobacterium animalis подвида lactis на 1 г ферментированного молока; иiii) размещение подходящего количества кисломолочного продукта в подходящей упаковке. Также изобретение относится к штамму Streptococcus thermophilus CHCC7018 с номером доступаDSM21408 и его мутантам/вариантам, которые усиливают рост штамма Bifidobacterium animalis подвидаlactis и к культуре (такой как заквасочная культура), содержащей штамм по изобретению, необязательно,совместно с другим штаммом, таким как штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis (например,ВВ-12). Представляющая интерес композиция содержит i) от 105 до 1012 КОЕ/г ВВ-12 и ii) от 105 до 1012 КОЕ/г CHCC7018. Подробное описание Настоящее изобретение в первом аспекте относится к способу приготовления кисломолочного продукта, который включает:b) бактериями, принадлежащими штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штаммов Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407),CHCC3912 (DSM21406), мутанта или варианта любых из этих штаммов, которые усиливают рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, штамма Streptococcus thermophilus, CHCC7018 (DSM21408), и мутанта или варианта штамма, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis;iii) необязательно, добавление дополнительных микроорганизмов и/или добавок к ферментированному молоку;iv) необязательно, упаковку кисломолочного продукта. В предпочтительном в настоящий момент варианте осуществления стадия i) дополнительно включает инокуляцию молока бактериями, принадлежащими к виду, выбранному из группы, состоящей изLactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactococcus lactis и Lactobacillus acidophilus. Вариант осуществления способа по изобретению представляет собой способ, в котором стадия i) включает в себя инокуляцию молока культурой, содержащей:CHCC4462 (DSM21407), который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, варианта CHCC4462 (DSM21407), который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis,CHCC3912 (DSM21406), мутанта CHCC3912 (DSM21406), который усиливает рост штамма штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis; и/или штамм Streptococcus thermophilus, выбранный из группы, состоящей из CHCC7018 (DSM21408), мутанта CHCC7018 (DSM21408), который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, и варианта CHCC7018 (DSM21408), который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis. Другой вариант осуществления относится к способу приготовления кисломолочного продукта, такого как продукт, содержащий по меньшей мере 108 КОЕ Bifidobacterium animalis подвида lactis на 1 г кисломолочного продукта, где способ включает в себя:i) инокуляцию молока культурой (такой как йогуртовая культура), содержащей по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis, по меньшей мере один штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis, необязательно, по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus и по меньшей мере один штаммLactobacillus bulgaricus, где один из указанных штаммов Lactococcus lactis выбран из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis CHCC3912 с номером доступа DSM21406, мутанта CHCC3912, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, и варианта CHCC3912, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, или CHCC4462 с номером доступа DSM21407,мутанта CHCC4462, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, и вариантаCHCC4462, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis;ii) ферментацию молока при подходящих условиях;iii) необязательно, размещение подходящего количества кисломолочного продукта в подходящей упаковке. Еще один вариант осуществления относится к способу приготовления кисломолочного продукта,содержащего по меньшей мере 108 КОЕ Bifidobacterium animalis подвида lactis на 1 г кисломолочного продукта, где способ включает:i) инокуляцию молока йогуртовой культурой, содержащей по меньшей мере один штаммLactobacillus bulgaricus, по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus, по меньшей мере один штамм Lactococcus lactis и по меньшей мере один штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis, где один из указанный штаммов Lactococcus lactis представляет собой штамм Lactococcus lactis CHCC3912 с номером доступа DSM21406 или CHCC4462 с номером доступа DSM214077;ii) ферментацию молока при подходящих условиях для получения кисломолочного продукта по меньшей мере с 108 КОЕ бифидобактерий на 1 г ферментированного молока;iii) размещение подходящего количества кисломолочного продукта в подходящей упаковке. В варианте осуществления способ по изобретению дополнительно включает инокуляцию молока дополнительным штаммом Streptococcus thermophilus, предпочтительно штаммом, улучшающим текстуру, таким как штамм, выбранный из группы, состоящей из ST-BODY-3 (Chr. Hansen A/S, Хоршолм, Дания) и ST8833 (DSM17876). В настоящий момент предпочтительно, чтобы штамм Bifidobacterium представлял собой штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis. Примерами штаммов являются штаммы, выбранные из группы, состоящей из CHCC5445 (ВВ-12) с номером доступа DSM15954, CHCC7158 (HN019, депозитарный номер DSM17280), штамм Bifidobacterium, депонированный как АТСС 27536, штамм Bifidobacterium infantis Bbi99 (DSM 13692), BB-420, BI-04, CHCC2037, LAFTI B-94, DN 173010, STB-2938, R0071, R0175 и ВВ-46 (DSM15955) и мутанты/варианты любого из данных штаммов. В пригодном варианте осуществления получаемый кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ бифидобактерий на 1 г кисломолочного продукта в конце ферментации и/или кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6C. Согласно важному варианту осуществления настоящего способа молоко на стадии i) инокулируют при помощи от 105 до 3107 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis и/или при помощи от 104 до 3,5106 КОЕ/г бактерий Streptococcus thermophilus или Lactococcus lactis. Молоко можно инокулировать бактериальными видами одновременно. Это удобнее выполнить, инокулируя молоко заквасочной культурой, содержащей оба бактериальных вида. В еще одном варианте осуществления молоко дополнительно инокулируют по меньшей мере одним бактериальным штаммом, таким как штамм Lactococcus lactis subs. lactis (например, выбранным из группы, состоящей из Lactococcus lactis subs. lactis DN224; Lactococcus lactis subs, lactis DN223 и штамма мутанта или варианта любого из данных штаммов). В настоящий момент предпочтительно, чтобы данный дополнительный организм-помощник представлял собой штамм Lactococcus lactis subs, lactis, выбранный из группы, состоящей из Lactococcus lactis subs, lactis DN224, Lactococcus lactis subs, lactis DN223. Следует понимать, что молоко можно инокулировать раздельно/последовательно каждым бактериальным видом или одновременно двумя или более бактериальными видами. В настоящий момент предпочтительно, чтобы молоко инокулировали всеми бактериальными видами в одно и то же время. Это удобнее выполнить, инокулируя молоко заквасочной культурой, содержащей бактериальные виды. Продукт, получаемый при помощи настоящего способа по изобретению можно определить как "йогурт", т.е. когда молоко инокулируют и штаммом Lactobacillus bulgaricus, и штаммом Streptococcus Кисломолочный продукт (такой как йогурт) удобно размещать в герметичной упаковке, которая содержит 10-5000 мл продукта, такой как от 25 до 3000 мл или от 50 до 1000 10 мл. Примерные упаковки могут содержать 10-300 мл, 20-2 00 мл или 30-100 мл. Во втором аспекте изобретение относится к культуре, содержащей:b) бактерии, принадлежащие к штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407),CHCC3912 (DSM21406), мутанта или варианта любого из этих штаммов, которые усиливают рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408), и мутанта или варианта этого штамма, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвидаlactis. Изобретение также относится к культуре (такой как заквасочная культура), содержащей от 105 до 12 10 КОЕ/г ВВ-12 и от 105 до 1012 КОЕ/г CHCC7018 и/или от 108 до 1012 КОЕ/г Lactococcus lactisCHCC3912 или CHCC4462. Культура может дополнительно содержать от 105 до 1012 КОЕ/г DN224 илиDN223. Дополнительный аспект настоящего изобретения относится к кисломолочному продукту, получаемому посредством способа по изобретению, особенно к кисломолочному продукту, содержащему штаммCHCC7018, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis; и вариантаCHCC7018, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis. В настоящий момент предпочтительно, чтобы кисломолочный продукт по изобретению содержал от 103 до 1010 КОЕ/г штаммаStreptococcus thermophilus. Изобретение также относится к кисломолочному продукту, содержащему Bifidobacterium animalis подвида lactis и бактерии, принадлежащие к штамму, выбранному из группы, состоящей из CHCC4462 иCHCC3912 и мутанта или варианта любого из данных штаммов, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis. Кисломолочный продукт предпочтительно содержит 103, предпочтительно по меньшей мере 105 КОЕ/г бактериального штамма. Кисломолочный продукт по настоящему изобретению может дополнительно содержать от 103 до 10 10 КОЕ/г бифидобактерий и/или от 103 до 1010 КОЕ/г штамма Lactococcus lactis (такого как CHCC3912,CHCC4462, DN224 или DN223). В предпочтительном в настоящий момент варианте осуществления кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 105, предпочтительно по меньшей мере 107, КОЕ/г бифидобактерий и/или по меньшей мере 105, предпочтительно по меньшей мере 107, КОЕ/г штаммаLactococcus lactis subs, lactis. В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к бактериальному штамму, выбранному из группы, состоящей из CHCC7018, мутанта CHCC7018, варианта CHCC7018, мутанта CHCC4462,варианта CHCC4462, CHCC3912, мутанта CHCC3912 и варианта CHCC3912, где мутант/вариант является штаммом, который обладает одним или несколькими (предпочтительно всеми) свойствами первоначального штамма, например штамм мутанта/варианта способен усиливать рост штамма Bifidobacteriumanimalis подвида lactis (например, ВВ-12). Штамм может представлять собой изолированную форму,например, по существу, не содержащую другие бактериальные штаммы. В предпочтительном варианте осуществления Bifidobacterium является по меньшей мере одним Bifidobacterium animalis подвида lactis. Смесь, содержащая два или более из данных перечисленных штамма, может также быть использована, где другой штамм выбран из группы, состоящей изBifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium asteroids, Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium breve, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium pseudocatenulatum. В предпочтительном варианте осуществления способа штамм Bifidobacterium представляет собой штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis, в особенности, где штамм представляет собой штамм ВВ-12 (CHCC5445) Bifidobacterium animalis подвида lactis, помещенный в банк под номером доступаDSM15954. Другой предпочтительный штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis представляет собой штаммHN019 (также известный как DR-10 или HOWARD). Штамм выделен из коммерчески доступного продукта молочной детской смеси, под названием Fernleaf DR-10 bifidus, который продавался в Тайване в течение 2000 г. Он имеет номер доступа CHCC7158 в коллекции культур Hansen и депонирован вDSMZ под номером доступа DSM17280. Измерение количества клеток бифидобактерий КОЕ/г выполняют, рассчитывая количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в серийных разведениях ферментированного продукта посредством подсчета колоний на плашках с агаром, согласно стандартным способам в данной области. Подходящая среда и инкубация приведены ниже: среда: MRS (de Man et al., 1960. J. Appl. Bacteriol. 23: 130) без кислот + 1% диклоксациллинCHCC7018) обеспечивает возможность получения более чем 108 КОЕ/г бифидобактерий непосредственно при росте бифидобактерий во время ферментации. Таким образом, по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий на стадии ii) первого аспекта относится к КОЕ/г бифидобактерий, получаемых непосредственно после ферментации. Как показано в демонстрационных примерах, Bifidobacterium animalis подвида lactis BB-12 обладает хорошей выживаемостью, когда растут совместно со штаммом Lactococcus lactis CHCC3912 илиCHCC4462 и/или штаммом Streptococcus thermophilus CHCC7018. Таким образом, в предпочтительном варианте осуществления кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий после 1 дня хранения при 6C, более предпочтительно по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 7 дней хранения при 6C, еще более предпочтительнее по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 14 дней хранения при 6C, еще более предпочтительнее по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 21 день хранения при 6C и наиболее предпочтительно по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6C. Специалистам известны подходящие условия ферментации для ферментации молока при помощи относящихся к данному документу бактерий. Подходящими условиями, например, являются условия, где молоко инокулируют бактериями и ферментируют при 38-43C при оптимальной величине 40C, до тех пор пока не достигнут величины pH от 4,4 до 4,6 (ориентировочно приблизительно через 8 ч). Охлаждение молока до 6C останавливает ферментацию и рост относящихся к данному документу бактерий, таких как бифидобактерии. В предпочтительном варианте осуществления описанный в настоящем документе улучшенный рост получают, инокулируя от 105 до 3107 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis и инокулируя одновременно штамм Lactococcus lactis CHCC3912 или CHCC4462 и/или штамм Streptococcus thermophilusCHCC7018 в концентрации от 104 до 3,5106 КОЕ/г. При желании, можно добавить дополнительные бактерии (например, дополнительнуюBifidobacterium) в некий интересующий момент времени (например, после завершения ферментации). Как известно специалисту, всевозможные различные кисломолочные продукты можно получать,ферментируя молоко, и их можно получать в жидком или твердом виде. В предпочтительном варианте осуществления кисломолочный продукт представляет собой продукт, выбранный из группы, состоящей из йогурта, питьевого йогурта, йогурта с нарушенным сгустком, неперемешиваемого натурального йогурта и подобного йогурту напитка, горького молока, кефира, сметаны, невызревшего сыра и сыра. Ферментированное молоко, содержащее по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерии, как описано в настоящем документе, также можно использовать в качестве добавки к продуктам, например добавлять к другим годным к употреблению в пищу продуктам, таким как творожный сыр, шоколад, соки, мясные продукты и порошкообразное сухое молоко для маленьких детей. В настоящем контексте Lactobacillus bulgaricus может представлять собой любой подходящий (например, коммерчески доступный) штамм Lactobacillus bulgaricus. Как известно специалисту, можно инокулировать подходящие количества для того, чтобы получить соответствующее количествоLactobacillus bulgaricus в готовом кисломолочном продукте. В способе по изобретению можно добавлять другие представляющие интерес бактерии, такие как бактерия-помощник. Такие бактерии можно добавлять во время ферментации или после того, как ферментирование как таковое закончилось. Примеры таких дополнительных бактерий включают в себя бактерию, выбранную из перечня, состоящего из Lactococcus и Lactobacillus. ПредпочтительнымA/S, Дания). Как описано в WO 98/54337 (Chr. Hansen, выданный охранный документ EP 0985043 B1),молочнокислую бактерию-помощник, в которой нарушен ее метаболизм пирувата, можно добавить во время ферментации для того, чтобы получить множество усовершенствований, включая увеличение срока хранения бактерий. Штаммы DN224 (депонированный как DSM 11037) и DN223 (депонированный какDSM 11036), в которых нарушен их метаболизм пирувата, описаны как примеры подходящих бактериальных организмов-помощников. Таким образом, в варианте осуществления настоящего изобретения,молочнокислый бактериальный организм-помощник, в котором нарушен его метаболизм пирувата, также добавляют в молоко для того, чтобы произошло ферментирование, как описано в настоящем документе. В предпочтительном варианте осуществления молочнокислый бактериальный организм-5 025108 помощник представляет собой бактерию, выбранную из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis подвида lactis DN223, депонированного в коллекцию под номером доступа DSM 11036 и штаммаLactococcus lactis подвида lactis DN224 (депонированного под номером DSM 11037). Наиболее предпочтительно молочнокислый бактериальный организм-помощник представляет собой DN224. Вариант осуществления относится к композиции, такой как культура, содержащей:DSM21406, DSM21407, DSM21421 и DSM 21408 соответственно, с датой размещения 23 апреля 2008 г. Депонирование осуществили в соответствии с Будапештским договором о международном признании депонирования микроорганизмов. Автор заявки требует, чтобы депонированные микроорганизмы были бы доступны только экспертам, утвержденным автором заявки. Определения. В контексте настоящего документа йогуртная заквасочная культура представляет собой бактериальную культуру, которая содержит по меньшей мере один штамм Lactobacillus bulgarlcus и по меньшей мере один штамм Streptococcus thermophilus. В соответствии с этим йогурт представляет собой кисломолочный продукт, получаемый при инокуляции и ферментации молока с использованием штаммаLactobacillus bulgaricus и штамма Streptococcus thermophilus. В контексте настоящего документа термин "молоко" включает в себя молоко млекопитащих или растения. Примерами молока являются молоко коровы (коровье молоко), верблюжье молоко, буйволиное молоко, козье молоко, овечье молоко и соевое молоко. Необязательно, молоко подкисляют, например добавляя кислоту (такую как лимонную, уксусную или молочную кислоту) или смешивают, например, с водой. Молоко может быть сырым или обработанным, например, фильтрацией, стерилизацией, пастеризацией, гомогенизацией и т.д. или его можно восстановить из сухого молока. Важный пример "коровьего молока" по настоящему изобретению представляет собой пастеризованное молоко коровы. Понятно, что молоко может быть подкисленным, смешанным или обработанным до, во время и/или после инокуляции бактериями. В контексте настоящего документа термин "размещение" (подходящего количества) ферментированного молока в подходящей упаковке относится к конечной упаковке ферментированного молока для получения продукта, который можно употреблять в пищу, например, человеком или группой людей. Подходящая упаковка может, таким образом, представлять собой бутылку или т.п., и подходящее количество может составлять, например, от 10 до 5000 мл, но предпочтительно в настоящий момент, что количество в упаковке составляет от 50 до 1000 мл. В контексте настоящего документа термин "мутант" следует понимать как штамм, полученный из штамма по изобретению (или используемого в изобретении) посредством, например, генетической инженерии, радиационного облучения и/или химической обработки. Предпочтительно, что мутант представляет собой функционально эквивалентный мутант. Предпочтительный мутант штамма по изобретению представляет собой мутант, который усиливает рост клеток Bifidobacterium в молочной среде, например, мутант, который обладает, по существу, такими же или улучшенными свойствами, стимулирующими рост Bifidobacterium, как и родительский штамм. Такой мутант является частью настоящего изобретения. Главным образом, термин "мутант" относится к штамму, полученному при воздействии на штамм (таковой как штамм по изобретению) любой общепринятой процедурой, вызывающей мутации,включая обработку химическим мутагеном, таким как этанметансульфонат (EMS) или N-метил-N'-нитроN-нитрогуанидин (NTG), УФ-излучение, или к спонтанно получившемуся мутанту. Мутант может подвергаться воздействию нескольких обработок, вызывающих мутации, (под единичной процедурой следует понимать одну стадию, вызывающую мутацию, за которой следует стадия скрининга/отбора), но в настоящий момент предпочтительно, чтобы проводилось не более чем 20, или не более чем 10, или не более чем 5 обработок. У предпочтительного в настоящий момент мутанта менее чем 5%, или менее чем 1%, или даже менее чем 0,1% нуклеотидов в бактериальном геноме заменен на другой нуклеотид или удален по сравнению с родительским штаммом. В контексте настоящего документа термин "вариант" следует понимать как штамм, который функционально эквивалентен родительскому штамму, такому как штамм, который усиливает рост клеток Bifidobacterium в молочной среде. Вариант должен принадлежать одному и тому же виду, что и родительский штамм. Например, вариант CHCC7018 следует понимать как штамм Streptococcus thermophilus, который функционально эквивалентен CHCC7018, такой как штамм, который усиливает рост клеток Bifidobacterium в молочной среде, например обладает такими же или по существу такими же или улучшенными свойствами, усиливающими рост Bifidobacterium, как и родительский штамм, и вариант CHCC3912 следует понимать как штамм Lactococcus lactis, который функционально эквивалентен CHCC3912, например, обладает такими же или по существу такими же или улучшенными свойствами, усиливающими рост Bifidobacterium, как и родительский штамм. Такие варианты, которые можно определить, используя соответствующие методики скрининга, являются частью настоящего изобретения. Использование терминов в единственном числе и подобных символов в контексте описания изобретения (особенно, в контексте следующей ниже формулы изобретения) следует рассматривать как охватывающее как единственное, так и множественное число, если в настоящем документе не указано иначе или они явно не противоречат контексту. Термины "включающий", "обладающий", "включающий в себя" и "содержащий" необходимо рассматривать как допускающие изменения термины (т.е. обозначающие"включая в качестве неограничивающих примеров"), если не указано иначе. Перечисление диапазонов значений в настоящем документе предназначено просто для того, чтобы служить в качестве способа условного обозначения, индивидуально обозначающего каждое отдельное значение, попадающее в диапазон, если в настоящем документе не указано иначе, и каждое отдельное значение включено в описание,как будто оно индивидуально перечислено в настоящем документе. Все способы, описываемые в настоящем документе, можно осуществить в любом подходящем порядке, если в настоящем документе не указано иначе или иным образом явно не противоречат контексту. Использование любого и всех примеров или типичной формулировки (например, "такой как"), предлагаемых в настоящем документе, предназначено просто для того, чтобы лучше объяснить изобретение и не представляет собой ограничение объема изобретения, если не заявлено иначе. Никакой язык в описании не следует рассматривать как указание на какой-либо незаявленный элемент в качестве важного для практики изобретения. Примеры Пример 1. Улучшение роста ВВ-12 с использованием различных штаммов Lactococcus lactis. Молочную среду (9,5% восстановленное сухое обезжиренное молоко, нагреваемое до 99C в течение 30 с) инокулировали культурой 0,01% ВВ-12 F-DVS и культурой 0,01% Lactococcus F-DVS, приводя к получению исходной концентрации ВВ-12 1107 КОЕ. После этого молоко ферментировали в течение 16 ч при 40C и хранили при 8C. Анализ количества клеток ВВ-12 проводили соответственно через 1, 14, 28 и 45 дней хранения. Таблица 1 Пример 2. Улучшение роста ВВ-12 с использованием различных штаммов Streptococcusthermophilus. Молочную среду (9,5% восстановленное сухое обезжиренное молоко, нагреваемое до 99C в течение 30 с) инокулировали культурой F-DVS 0,01% ВВ-12 и культурой F-DVS 0,01% Streptococcusthermophilus, приводя к получению исходной концентрации ВВ-12 1107 КОЕ. После этого молоко ферментировали в течение 16 ч при 40C и хранили при 8C. Анализ количества клеток ВВ-12 проводили соответственно через 1, 14, 28 и 45 дней хранения. Таблица 2Lactococcus lactis. Производство йогурта проводили согласно стандартной процедуре получения 3 л йогурта. Свежее молоко (жирность 0,5%), добавленное к 2% сухому обезжиренному молоку, 20 мин подвергали термообработке при 92C. Молоко охлаждали до 43C, инокулировали культурой (0,016-0,023%, в зависимости от культуры) и ферментировали до величины pH 4,55. После этого йогурт перемешивали, охлаждали до 25C и хранили при 5C. Результаты. Таблица 3 Вычислено согласно техническим характеристикам продукта.Рост во время ферментации вычисляют как КОЕ в 1 день/КОЕ инокуляции. Данные представляют собой средние значения от трех повторов производства йогурта в масштабе 3 л (68 "низкая инокуляция" только два повтора). Культуры сравнения ABY-10 и BY-700 (Chr. Hansen A/S, Хоршолм, Дания), которые, как известно,являются наилучшими культурами осуществления в отношении количества клеток ВВ-12 в кисломолочном продукте. Состав культуры.CHCC7 018, CHCC4 4 62 и CHCC3912 улучшают рост Bifidobacterium ВВ-12 во время ферментации по меньшей мере до 108 КОЕ/г в кисломолочных продуктах как при использовании по отдельности,так и в комбинации. В настоящем документе описаны предпочтительные варианты осуществления по данному изобретению, включая наилучший способ, известный авторам изобретения для выполнения изобретения. Изменения данных предпочтительных вариантов осуществления могут быть очевидными для специалистов в данной области при прочтении предшествующего описания. Авторы изобретения ожидают, что специалисты в данных областях будут, при необходимости, использовать такие изменения, и авторы изобретения предполагают, что изобретение можно осуществить иначе, чем определенным образом описано в настоящем документе. Таким образом, данное изобретение включает в себя все модификации и эквиваленты объекта, приведенного в формуле изобретения, приложенной к настоящему документу, как разрешено действующим законом. Более того, любая комбинация описанных выше элементов во всех их возможных вариантах охвачена изобретением, если в настоящем документе не указано иначе или иным образом явно не противоречит контексту. Ссылки 1. EP 111392 В 1. 2. WO 98/54337 (Chr. Hansen). 3. Saxelin M. et al.: The technology of probiotics. Trends in food science и technology, vol. 10, 1991,pages 387-392. 4. Martin-Diana A.B. et al.: Development of a fermented goat's milk containing probiotics bacterium. Int. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ приготовления кисломолочного продукта, включающий:b) бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штаммов Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407),CHCC3912 (DSM21406) и штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408); иii) ферментацию молока. 2. Способ по п.1, дополнительно включающий инокуляцию молока бактериями, принадлежащими к виду, выбранному из группы, состоящей из Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Lactococcus lactis и Lactobacillus acidophilus. 3. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий упаковку кисломолочного продукта. 4. Способ по п.2, в котором стадия i) включает инокуляцию молока композицией, содержащей:c) штамм Lactococcus lactis, выбранный из группы, состоящей из CHCC4462 (DSM21407),CHCC3912 (DSM21406), и штамм Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408). 5. Способ по п.4, в котором штамм Bifidobacterium animalis подвида lactis выбран из группы, состоящей из CHCC5445 (ВВ-12, DSM15954), CHCC7158 (DSM17280) и ВВ-46 (DSM15955). 6. Способ по любому из пп.1-5, в котором кисломолочный продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6C. 7. Способ по любому из пп.1-6, в котором молоко на стадии i) инокулируют с использованием от 105 до 3107 КОЕ/г Bifidobacterium animalis подвида lactis и/или с использованием от 104 до 3,5106 КОЕ/г бактерий Streptococcus thermophilus или Lactococcus lactis. 8. Способ по п.3, в котором кисломолочный продукт помещают в герметичную упаковку, которая содержит от 10 до 5000 мл, или от 25 до 3000 мл, или от 50 до 1000 мл продукта. 9. Кисломолочный продукт, получаемый способом по любому из пп.1-8, содержащийBifidobacterium animalis подвида lactis и бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штаммовCHCC7018 (DSM21408). 10. Кисломолочный продукт по п.9, где продукт содержит по меньшей мере 108 КОЕ/г бифидобактерий через 28 дней хранения при 6C. 11. Кисломолочный продукт по любому одному из пп.9, 10, который содержит 103, предпочтительно по меньшей мере 105, КОЕ/г штамма Streptococcus thermophilus. 12. Композиция, используемая в способе по пп.1-8, содержащая:b) бактерии, принадлежащие штамму, который усиливает рост штамма Bifidobacterium animalis подвида lactis, выбранному из группы, состоящей из штамма Lactococcus lactis CHCC4462 (DSM21407),CHCC3912 (DSM21406) и штамма Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408). 13. Штамм Streptococcus thermophilus CHCC7018 (DSM21408), используемый в способе по пп.1-8. 14. Штамм Lactococcus lactis CHCC3912 (DSM21406), используемый в способе по пп.1-8.
МПК / Метки
МПК: A23C 9/123
Метки: роста, продуктах, улучшение, бифидобактерий, кисломолочных
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/10-25108-uluchshenie-rosta-bifidobakterijj-v-kislomolochnyh-produktah.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Улучшение роста бифидобактерий в кисломолочных продуктах</a>
Предыдущий патент: Способ диагностирования болезни альцгеймера, нейродегенерации при синдроме дауна или легкого когнитивного нарушения у субъекта (варианты) и набор для осуществления способа
Следующий патент: Способ окисления летучих органических соединений и катализатор
Случайный патент: Способ извлечения металлов