Консорциум бифидобактерий bifidobacterium bifidum 791,b.longum b379m,b.breve 79-119, b.infantis 73-15, b.adolescentis г7513 для приготовления кисломолочных продуктов лечебно-диетического питания, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов

(54) КОНСОРЦИУМ БИФИДОБАКТЕРИЙ ВПЧПОВАСТЕВТПМ ВТПЭПМ 791, В.ЬОЫОПМ В 379 М, В.ВНЕ(Е 79-119, ВДЫАЫТТЗ 73-15,В.АПО 1.ЕСЕЫТ 1 Г 7513 ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КИСЛОМОЛОЧНЬТХ ПРОДУКТОВ ЛЕЧЕБНО-ДИЕТИЧЕСКОГО ПИТАНИЯ, НЕ- г ФЕРМЕНТИРОВАННЬТХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И БАКТЕРИЙ- НЬТХ ПРЕПАРАТОВ в ОО Приоритетныеданные: (56) 5 НА 11817285 99(43) 1998-06-25 Методы для производства Мороженого.Изобретение относится к медицинской микробиологии и представляет собой консорциум штаммов бифидобактерий пяти видов, который может быть использован для приготовления кисломолочных, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов.Препараты и продукты, содержащие в своем составе бифидобактерии, предназначены для нормализации микробиоценоза кишечника людей, страдающих дисбактериозом, возникшим в результате неблагоприятных экологических условий, стрессовых влияний, перенесенных кишечных заболеваний, длительной антибиотикотерапии, лучевой терапии и химиотерапии.Известны зарубежные моно- и комплексные препараты-эубиотики и кисломолочные продукты, включающие в свой состав бифидобактерии видов Выйбпш, В.1 оп 111 п 1,В.а 1 о 1 есеп 115, В.Ьге/е (патент 2336886, патент 2411008, Франция; патент 637297, Швейцария; патент 2134179, патент 2421066, ФРГ; патент 05227946, патент 0430642, Япония; патент 4645667, США).В России для приготовления бактерийных препаратов и продуктов лечебно-диетического питания пршиенэпот отечественные штаммы бифидобактерий видов Выйаиш Мг 1,791,В.1 опс 1 пш В 379 М, В.а 1 о 1 е 5 сеп[15 МС-42 (авторское свидетельство Мг 343588, патент 1347221,патент 849779, патент 863639).В кишечнике человека встречаются 5 видов бифидобактерий - Въййапш, В.1 оп 3 иш,В.а 1 о 1 есеп 115, В.Ьге/е и Вдгйапйз. С наибольшей частотой обнаруживаются виды Выпаиш,В.1 оп 3 пш и В.а 1 о 1 е 5 сеп[1 (39%-75%), причем два последних преобладают у взрослых людей. У детей грудного возраста в 30% случаев встречаются и бифидобактерии видов В.Ьгеуе и Вяпгапйз.Задачей настоящего изобретения является получение консорциума штаммов бифидобактерий, обладающих комплексом свойств, присущих отдельным штаммам, способного более быстро приживляться в кишечнике, обладающего повышенной специфической активностью и способствующего нормализации микрофлоры кишечника в более ранние сроки.Консорциум получен путем сочетания штаммов пяти видов бифидобактерий ВЬШбиш 791, В.1 оп 3 иш В 379 М, В.Ьге/е 79-119,Вяпгапйз 73-15, В.а 1 о 1 есеп 11 Г 7513, имеющихблизкие культуральные и физиологобиохимические свойства, а также обладающих сквашивающей активностью.Штамм выйацш 791 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка,депонирован в ЦМПМ ВШ/Шгенетика под Мг В 3300.Штамм В.1 оп 3 иш В 379 М выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован в ЦЬАПМ ВЪП/Шгенетика под Мг В-2000.Штамм В.Ьге/е 79-119 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка,депонирован под Мг 153 в Государственной коллекции микроорганизмов-представителей нормальной микрофлоры человека (ГКШИ) МЪП/ШЭМ им.Г.Н. Габричевского.Штамм Вяпйпйз 73-15 выделен из содержимого кишечника здорового грудного ребенка,депонирован под Мг 155 в ГКЪПИ МЪШИЭМ ши.Г.Н.Габричевского.Штамм В.ас 1 о 1 е 5 сеп[15 Г 7513 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека, депонирован под Мг 158 в ГКНМ МЪП/ШЭМ им.Г.Н.Габричевского.Клетки штаммов бифидобактерий представляют собой грам+ полиморфные палочки с бифуркацией или утолщением на 1-2-х концах,склонные к образованию скоплений. В жидких питательных средах растут по всей высоте объема, кроме зоны аэробиоза. Логарифмическая фаза роста заканчивается к 24 ч.Неподвижные, бесспоровые анаэробы. Оптимальная температура выращивания - (37,538)С, рН питательных сред 7,2-7,4. Каталазу не образуют, желатину не разжижают. Сбраживают глюкозу с образованием уксусной и 1+ молочной кислоты без образования газа, закисляя среду выращивания до рН 4,1-3,9. Видовая принадлежность каждого из штаммов определена в соответствии с их ферментативной активностью. Штаммы сквашивают молоко к 24 ч культивирования.Штаммы активно наращивают микробную массу на средах разного состава и сквашивают молоко к 24 ч культивирования, накапливая определенное количество кислот (табл. 1).Таблица 1. Накопление мшсробной биомассы и активность кислотообразования консорциума штаммов на средах разного состава к 24 часам культивированияКонсорциум штаммов активно размножается на средах разного состава, к 24 ч культивирования количество микробных клеток в 1 мл среды составляет 8,9-9,3 по логарифмической шкале; сквашиваег молоко с высокой концентрацией бифидобактерий, что является основПитательные Количество микробных Количество продуцируемой кислоты среды клеток бифидобактерий (в градусах Тернера) в 1 мл (13) Кукурузно- лактозная 8,9 190 Гидролизатно- молочная 9,3 192 Молоко 3% 9,69 160 Молоко 5% 9,9 164ным показателем возможности использования штаммов в технологическом процессе.Продуцируя кислоты, консорциум штаммов пяти видов бифидобактерий ингибирует рост патогенных и условно-патогенных мшсроорганизмов (табл.2).Таблица 2 Продукт Зоны задержки роста тесг- льтур (мм) 511.5 ош 1 е 1 Зпйехпегй Е.со 11 Эапгеиз Рг./1113 аг 15штаммов бифи добактерий 36,0 37,5 34,2 33,7 35,0Способность консорциума штаммов пяти видов бифидобактерий наращивать микробную МЗССУ В ПИТЗТСЛЬНЪ 1 Х средах, СКВЗШИВЗТЬ МОЛОКО в короткие сроки и проявлять специфическую активность обеспечивает возможность его использования для приготовления кисломолочных, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов.Примеры использования консорциума штаммов бифидобактерий в составе закваски для приготовления кисломолочных продуктов лечебно-диетического питания.1-ый пассаж. Лиофилизированные штаммы ВЬШаиш 791, В.10 п 3 ип 1 В 379 М, ВлпГапгйз 73-15,В.Ьге/е 79-119, В.ас 1 о 1 е 5 сеп[15 Г 7513 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят по отдельности в среду выращивания (печеночную,тиогликолевую, кукурузно-лактозную) и титруют методом десятикратных разведений до 10. Выращивают 48-72 ч при г (37,5-38)С.2-ой пассаж. Выросшую культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в среду накопления и культивируют 16-24 ч при 1 (37,538)С.4-ый пассаж. Производствеьшая закваска. Лабораторную закваску в объеме 5% вносят в больший объем стерильного молока и культивируют 12-16 ч при г (37,5-38)С.Получение продукта. Полученную производствештую закваску в объеме 5% вносят впастеризованное молоко и культивируют 4-5 ч,после чего продукт охлаждают и сливают. В результате получают готовый продукт с нежным кисломолочным вкусом густой однородной консистенции с содержанием в 1 мл 108 живых бифидобактерий.1-ый пассаж. Лиофилизированные штаммы ВЬШбпш 791, В.1 оп 3 иш В 379 М, Вяпгапйз 73-15,В.Ьгеуе 79-119, В.ас 1 о 1 е 5 сеп[15 Г 75 13 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят по отдельности в среду выращивания (печеночную,тиогликолевую, кукурузно-лактозную) и титруют методом десятикратных разведений до 10. Выращивают 48-72 ч при г (37,5-38)С.2-ой пассаж. Выросшую культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в среду накопления и культивируют 16-24 ч при г (37,538)С.4-ый пассаж. Производственная закваска. Лабораторную закваску в объеме 5% вносят в больший объем стерильного молока и культивируют 12-16 ч при г (37,5-38)С.Получение продукта. Полученную производственную закваску в объеме 5% вносят в пастеризованное молоко и культивируют 4-5 ч,после чего продукт охлаждают и перед разливом в продукт вносят пищевой ароматизатор и(или) фруктово-ягодный наполнитель по вкусу. В результате получают готовый продукт с содержанием в 1 м 108 живых бифидобактерий.Кисломолочные продукты, приготовленные на основе консорциума штаммов бифидобактерий (см. примеры М], 2), прошли клинические испьттания. Они были использованы при лечении 57 больных с различными хроническими заболеваниями желудочно-кишечного тракта и вирусными гепатитами. Во всех случаях после проведенного лечения было отмечено купироВЗНИС диспептических явлений, нормализация стула, улучшение состояния кишечной микрофлоры при исходном выраженном дисбактериозе.Полученные данные позволяют считать кисломолочные продукты, приготовленные на основе заявляемого консорциума штаммов бифидобактерий эффективными продуктами лечебно-диетического питания и рекомендовать их для лечения больных с хроническими забоЛСВЗНИЯМИ ЖСЛуДОЧНО-КИШСЧНОГО тракта, ВИрусными гепатитами, сопровождающимися вЬ 1 рЭЖСЪП-[ЫМИ ЯВЛСНИЯМИ дисбактериоза КИШСЧНИка.Пример использования консорциума штаммов бифидобактерий в составе закваски для приготовления неферментированных пищевых продуктов.1-ый пассаж. Лиофилизированные штаммы В.Ь 1 й 1 ип 1 791, Вдопиш В 379 М, Вдпгапйз 73-15, В.Ьге/е 79-119, В.а 1 о 1 есеп[1 Г 7513 в количестве 0,1 г сухой биомассы (1 доза) вносят по отдельности в среду выращивания (печеночную, тиогликолевую, кукурузно-лактозную) и тит уют методом десятшсратных разведений до2-ой пассаж. Выросшую культуру каждого из штаммов в объеме 5-10% вносят в среду накопления и культивируют 16-24 ч при 1 (37,538)С.3-ий пассаж. Получештую биомассу (консорциум) в количестве 5% вносят в среду накопления большего объема и культивируют 16-24 ч при г (37,5-38)С.Получение продукта. Полученную закваску вносят в пищевое сырье (молоко, соки, пиво и пр.), перемешивают и разливают в емкости. В результате получают продукт с общей концентрацией синантропной бифидофлоры не менееПример использования консорциума штаммов бифидобактерий для получения бактерийного препарата.Штаммы В.Ь 1 йс 1111 п 791, В.1 оп 3 ип 1 В 379 М,Вдпгапйз 73-15, В.Ьгеуе 79-119, В.а 1 о 1 е 5 сеп[15 Г 7513 1-2-3 - его пассажей культивируют при г(37,5-38)С и при рН 7,2-7,4 в течение 16-24 ч. К выращенной биомассе консорциума добавляют защитные среды высушивания (сахароза - 80% и желатина - 8% в объеме 10-12%, обезжиренное молоко до 20%). Полученную суспензию разливают по 2 мл (2 дозы) в ампулы или по 5 мл (5 доз) в пенициллиновые флаконы, замораживают при г (40-45)С и лиофилизируют из замороженного состояния в вакуум-сушильных агШаратах. Полученный препарат в 1 дозе содержит 108 живых клеток бифидобактерий. Согласно НТД на сухой бифидумбактерин (ФС 42-1.32 ВС 94) допускается содержание в 1 дозе препарата не менее 107 живых клеток бифидобактерий.Таким образом, предлагаемый консорциум штаммов пяти видов бифидобактерий активно размножается в питательных средах с накоплеНИСМ производственной биомассы в короткие сроки культивирования; сквашивает молоко с образованием сгустка с хорошими вкусовыми и органолептическими свойствами; обладает специфической активностью.Полученный консорциум можно рекомендовать для использования в составе заквасок для приготовления кисломолочных лечебнодиетических продуктов, неферментированных гШщевых продуктов и бактерийных препаратов.Консорциум штаммов бифидобактерий В 1 йбоЬасгегшш Ыйаиш ЦМГПИ В 1-П/П/1 генетика В 3300, ВШаоЬасгетшш ЦМГПИ В 1-П/1 Игенетика В 2000, ВтйбоЬасгейиш Ьгеуе ГК 1-П/1 МЪШИЭМ ши.Г.Н.Габричевского Мг 153, ВШаоЬасгегшш шгашйз в ГК 1-П/1 МЪШИЭМ Ши.Г.Н.Габричевского Мг 155, В 1 ЙС 1 ОЬаССГ 1 ЦШ або 1 есеп 115 ГКЪПИ МЪП/ШЭМ им.Г.Н.Габричевского Не 158 для приготовления кисломолочных продуктов лечебно-диетического питания, неферментированных пищевых продуктов и бактерийных препаратов.