Способ получения стабильного экстракта из грецких орехов, экстракт, полученный данным способом, и его применение

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАБИЛЬНОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ГРЕЦКИХ ОРЕХОВ, ЭКСТРАКТ, ПОЛУЧЕННЫЙ ДАННЫМ СПОСОБОМ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Настоящее изобретение относится к выделенному экстракту грецкого ореха, обладающему высокой эффективностью и стабильностью во времени, подходящему для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. Указанный экстракт характеризуется тем, что его получают по способу, включающему: i) сбор незрелых плодов грецкого ореха в качестве исходного сырья; ii) подготовку указанного исходного сырья к экстракции;iii) замораживание исходного сырья, полученного на предыдущей стадии; iv) сушку; v) экстракцию в течение периода времени менее 10 мин; vi) фильтрование и vii) конечное упаковывание. Настоящее изобретение также относится к применению указанного экстракта для получения лекарственного препарата для лечения бактериальных, грибковых и вирусных заболеваний, а также к содержащей указанный экстракт композиции. 015255 Область техники Настоящее изобретение относится к выделенному экстракту грецкого ореха, обладающему высокой эффективностью и стабильностью во времени, который подходит для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. Настоящее изобретение также относится к способу получения указанного выделенного экстракта грецкого ореха. Уровень техники Экстракты и припарки на основе грецкого ореха применялись на протяжении многих лет в составе широко распространенных диетических лекарственных средств. В коре, листьях и плодах орехового дерева содержатся таннины на основе галловой и катехиновой кислот, юглон, югландин, каротин, инозит, пирогаллол, витамин С и другие вещества. Было показано, что кора орехового дерева (Manchurian) содержит, главным образом, 5-гидрокси 1,4-нафтохиноны (юглон), 1,4,5-тригидроксинафталины (гидроюглон), гликозиды гидроюглона, гликозиды гидрокситетралона и галловые производные указанных гликозидов. Также известно, что скорлупа грецкого ореха очень богата витамином С, а в листьях орехового дерева был найден бета-каротин и витамины B1, B2 и В 6. Юглон представляет собой натуральный продукт, который, как полагают, обладает противомикробным, противоопухолевым и противопаразитарным действием, а также противогрибковыми и антисептическими свойствами. Поэтому юглон входит в состав различных представленных на рынке продуктов, в том числе композиций для окрашивания волос и масла амбрового дерева. Юглон, полученный из скорлупы грецкого ореха, является активным ингредиентом диетических добавок. Имеются данные, позволяющие предположить, что юглон является сильным химиотерапевтическим или хемопревентивным агентом. В рамках исследований согласно программе терапевтических разработок Национального института рака (NCI) юглон рассматривался в качестве одного из возможных агентов для лечения ВИЧ-1. В патенте США 6296838, выданном в октябре 2001 г., предложена противогрибковая композиция для топического применения для лечения и предупреждения грибковых заболеваний ногтей человека. В частности, в патенте США 6296838 предложен экстракт, обладающий синергическим действием, содержащий смесь, включающую 10-15% экстракта юглона из скорлупы грецкого ореха и 20-30% измельченных корней Nardostachys jatamansi о Vetiveria zizanioides о Catharanthus roseus, поскольку экстракт юглона, взятый в отдельности, проявлял очень низкую эффективность даже при длительном лечении и наличии фунгитоксического эффекта. Для получения указанного экстракта скорлупу грецких орехов отделяли, промывали водой и сушили на воздухе. Затем скорлупу измельчали и проводили экстракцию юглона с помощью растворителей,выбранных из ацетона, спирта и бутанола. Растворитель удаляли из экстракта, и экстракт охлаждали для удаления восков, при этом обеспечивалось частичное фракционирование юглона. Выделенные экстракты грецкого ореха, известные из уровня техники, получают путем экстракции определенных активных ингредиентов, обладающих противогрибковым, противомикробным или противовирусным действием, из части дерева, содержащей активный ингредиент в больших количествах. В число некоторых наиболее известных композиций входят противогрибковые композиции, содержащие экстракт юглона из скорлупы грецкого ореха, или композиции с высоким содержанием витамина С, полученные из древесины и листьев орехового дерева, в которых содержится большое количество витамина С. Композиции, содержащие выделенные экстракты грецкого ореха, имеют тот недостаток, что такие композиции должны быть введены сразу же после их получения, при этом указанные композиции имеют малый срок годности вследствие уменьшения их эффективности со временем. Соответственно, вследствие низкой стабильности выделенных экстрактов грецкого ореха композиции, содержащие указанные экстракты, должны быть получены и введены пациенту в течение нескольких дней для обеспечения надлежащей эффективности лечения. Таким образом, применение указанных композиций на основе выделенных экстрактов грецкого ореха имеют ограничение по времени вследствие низкой стабильности юглона вэкстракте, при этом указанные композиции обладают лишь противогрибковой, противомикробной или противовирусной активностью. Таким образом, до настоящего времени не был получен выделенный экстракт из одних лишь грецких орехов, который является стабильным во времени и свойства которого не зависят от времени, прошедшего с момента получения экстракта. Кроме того, до настоящего времени не была получена композиция, содержащая указанный экстракт, обладающая одновременно противогрибковым, противомикробным и противовирусным действием, свойства которой не изменяются с течением времени. Описание настоящего изобретения Таким образом, первый аспект настоящего изобретения заключается в обеспечении выделенного экстракта на основе грецкого ореха, который стабилен во времени и свойства которого не зависят от времени, прошедшего с момента получения экстракта.-1 015255 Второй аспект настоящего изобретения заключается в обеспечении выделенного экстракта на основе грецкого ореха, который является эффективным одновременно для лечения грибковых, бактериальных или вирусных заболеваний. Третий аспект изобретения заключается в обеспечении способа, позволяющего получить выделенный экстракт грецкого ореха согласно первому и второму аспектам изобретения. Четвертый аспект настоящего изобретения заключается в применении экстракта согласно первому аспекту настоящего изобретения для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. Пятый аспект настоящего изобретения заключается в обеспечении композиции, содержащей экстракт согласно первому аспекту изобретения, подходящей для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. Определения Согласно настоящему изобретению термин "незрелые плоды грецких орехов" означает, что указанные грецкие орехи находятся в состоянии молочно-восковой зрелости. В общем случае, указанное состояние зрелости наступает между 10 июня и 15 сентября, более точно - между 10 июля и 10 августа,хотя указанные даты могут немного изменяться в зависимости от погоды в той местности, где происходит созревание плода. Фигуры На Фиг. 1 представлена схема технологического процесса для способа согласно настоящему изобретению, где получение экстракта грецкого ореха осуществляют путем экстракции, проводимой в течение периода времени менее 10 мин. Фиг. 2 представляет собой графическое отображение содержания юглона в (%) в экстракте грецкого ореха в зависимости от времени, прошедшего с момента получения указанного экстракта, при этом указанное содержание является функцией времени проведения стадии экстракции. Из указанной фиг. 2 видно, что содержание юглона остается неизменным во времени лишь в случае, когда время проведения экстракции составляет менее 10 мин ( ). Подробное описание изобретения Авторы настоящего изобретения обнаружили, что время проведения экстракции при получении экстракта грецкого ореха оказывает решающее влияние на конечные свойства полученного экстракта. Преимущество выделенного экстракта грецкого ореха согласно первому аспекту настоящего изобретения заключается в том, что благодаря своим свойствам указанный экстракт обладает одновременно противогрибковым, противомикробным и противовирусным действием, которое остается неизменным с течением времени. Согласно первым трем аспектам в настоящем изобретении предложен выделенный экстракт грецкого ореха, характеризующийся тем, что указанный экстракт получен по способу, включающему:i) сбор незрелых плодов грецкого ореха в качестве исходного сырья;ii) подготовку исходного сырья к экстракции;iii) заморозку исходного сырья, приготовленного на предыдущей стадии;v) экстракцию в течение периода времени менее 10 мин, при этом указанная стадия экстракции включает измельчение высушенной массы, полученной на стадии сушки, на куски, добавление спирта в соотношении от 1/2 до 1/5 по массе/объему и проведение экстракции в течение периода времени менее 10 мин;vii) конечную стадию упаковки. В частности, подготовка исходного сырья к экстракции (ii) предпочтительно включает механическую очистку, промывание проточной водой, промывание дистиллированной водой и сушку на воздухе. Предпочтительно стадия заморозки (iii) включает выдерживание плодов грецкого ореха в морозильной камере при температуре от -18 до -20 С в течение от 70 до 170 ч, более предпочтительно в течение примерно 1205 ч. В частности, стадия сушки (iv) включает первоначально снятие скорлупы замороженного грецкого ореха в виде тонких слоев толщиной от 2 до 3 мм и последующее размещение орехов на подносах для проведения сушки, предпочтительно на солнце, а затем в сушильной камере при температуре 382 С до достижения влажности менее 10%. Стадия экстракции (v) включает дробление высушенной массы, полученной на стадии сушки, на мелкие куски, добавление этилового спирта (96%) в соотношении от 1/2 до 1/5 по массе/объему, предпочтительно 1/3, и проведение экстракции в течение периода времени менее 10 мин, предпочтительно менее 5 мин, более предпочтительно менее 2 мин. Стадию фильтрования экстракта предпочтительно проводят с применением фильтре первичной очистки, а затем бактерицидного тонкопористого фильтра под давлением 0,25 + 0,005 МПа. Настоящее изобретение также включает модификации стадий с i) по iv), vi) и vii), которые могут-2 015255 быть выполнены специалистом в данной области техники, при условии, что указанные модификации не выходят за рамки общей концепции настоящего изобретения. Неограничивающий пример схемы проведения процесса согласно настоящему изобретению представлен на фиг. 1. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что время проведения экстракции оказывает решающее влияние на конечные свойства выделенного экстракта грецкого ореха. Полагают, что с увеличением времени экстракции происходит извлечение из грецкого ореха других компонентов, которые могут оказывать влияние на стабильность и эффективность полученного экстракта с течением времени. Авторами настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что свойства выделенного экстракта грецкого ореха, полученного согласно первому аспекту настоящего изобретения, которые обеспечивают возможность одновременного противогрибкового, противомикробного и противовирусного применения указанного экстракта, остаются неизменными с течением времени. Соответственно, в настоящем изобретении также предложен способ получения выделенного экстракта грецкого ореха, описанный выше, согласно первому аспекту изобретения. Авторами настоящего изобретения была проведена оценка стабильности юглона как функции времени проведения экстракции на стадии (v). Из приведенной ниже табл. 1 видно, что чем большим является время проведения экстракции на стадии (v), тем ниже стабильность во времени активного ингредиента, представляющего собой юглон. Таблица 1 Из результатов, представленных в табл. 1, видно, что содержание юглона в конечном экстракте уменьшалось по мере увеличения времени проведения экстракции на стадии v), при этом также понижалась стабильность экстракта юглона по мере увеличения времени с момента его получения. Неожиданно оказалось, что экстракт юглона, полученный путем проведения экстракции в течение периода времени менее 10 мин, оставался стабилен в течение вплоть до 24 месяцев с момента его получения и, таким образом, эффективность указанного экстракта не зависела от времени, прошедшего с момента его получения, но зависела от времени проведения экстракции, см. опыт 1 и фиг. 2. Преимуществом является то, что выделенный экстракт юглона согласно первому аспекту настоящего изобретения является стабильным в течение более двух лет, при этом стабильность указанного экстракта значительно превышает стабильность известных из уровня техники экстрактов грецкого ореха,которые стабильны в течение примерно нескольких дней. Выделенный экстракт грецкого ореха согласно настоящему изобретению подходит для применения для лечения герпеса, ветряной оспы, грибковых заболеваний кожи, ногтей и т.п. и, в общем случае, для лечения кожных заболеваний. Введение экстракта согласно настоящему изобретению можно осуществлять топическим, внутрибрюшинным или пероральным способом, например в виде жидкости, кремов или таблеток, хотя другие способы применения экстракта согласно настоящему изобретению также находятся в рамках настоящего изобретения. Авторами настоящего изобретения также было проведено исследование эффективности выделенного экстракта согласно первому аспекту изобретения в отношении бактерий, грибов и вирусов в ходе опытов 1-5 (табл. 1). См. табл. 2 ниже.(+) Подавление репродукции вируса ВПГ-1 в DR клеточных культурах (саркомы кости) и фибробластах кожно-мышечной ткани человека;(-) Отсутствие подавления репродукции вируса ВПГ-1 в DR клеточных культурах (саркомы кости) и фибробластах кожно-мышечной ткани человека; Из данных предыдущей таблицы видно, что при увеличении времени проведения экстракции экстракт терял эффективность с течением времени с момента его получения. Представленные результаты подтверждают, что выделенный из грецкого ореха экстракт согласно первому аспекту настоящего изобретения сохраняет свою эффективность с течением времени против бактерий, грибов и вирусов вплоть до 24 месяцев с момента его получения и что указанная эффективность зависит от продолжительности стадии экстракции (опыт 1). Соответственно, согласно четвертому аспекту в настоящем изобретении также предложен выделен-4 015255 ный экстракт грецкого ореха, который подходит для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. В настоящем изобретении также предложена композиция, содержащая экстракт согласно первому аспекту изобретения, и применение указанной композиции для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых и бактериальных заболеваний. Далее приведены некоторые исследования цитоксичности, подтверждающие, что экстракт согласно первому аспекту настоящего изобретения подходит для применения для лечения человека. Исследования общей токсичности Токсикологическая оценка выделенного экстракта грецкого ореха согласно первому аспекту изобретения (далее - экстракта) проводилась на крысах и мышах, которым внутрижелудочным способом вводили различные концентрации экстракта. Внутрижелудочное введение было предложено для достижения системного воздействия на вирус герпеса, как в случаях острой инфекции, так и в случае вирусоносителей. Таким образом, предложенный экстракт можно рассматривать в качестве натурального противовирусного химиотерапевтического лекарственного средства. Однако можно было ожидать, что указанный экстракт будет проявлять токсические свойства, поскольку введение экстракта осуществлялось путем системной абсорбции, что также подтверждалось в ходе исследования подострого состояния у крыс и мышей. Однако следует отметить, что частота летальных исходов даже при введении максимальных доз внутрижелудочным способом является настолько низкой, что невозможно установить средние летальные дозы (LD50 и т.п.). Предложенный экстракт не обладает ни способностью аккумулироваться,ни мутагенным действием на клетки костного мозга. Говоря об общих токсических свойствах, необходимо отметить воздействие на центральную нервную систему и ингибирующее действие на рост массы тела у детенышей животных. Токсичность, связанная с паренхиматозными органами, заключается, в частности, в негативном воздействии на паренхиматозные клетки печени и изменении экскреторной функции почек. Уменьшение массы селезенки и надпочечников, по всей видимости, отражает стрессовое состояние в результате продолжительных манипуляций в течение 30 дней (см. табл. 1.1, этанол 5%). Аналогичным образом, были установлены дозы экстракта, вызывающие минимальные отклонения от нормальных показателей у крыс, при этом указанные дозы были приняты в качестве обычной максимально переносимой дозы при введении 0,5 мл 0.5% раствора в течение 30 дней. Для человека эта доза эквивалентна от 250 до 500 мл раствора указанной концентрации. Фактически, как хорошо известно, в клинических условиях исследования проводят с применением от 1/100 до 1/10 от минимальной токсичной дозы или "неактивной" дозы, составляющей от 2,5 до 5,0 мл 0,5% раствора в день. Наконец, результаты токсикологической оценки растворов экстракта при различных концентрациях, которые наносили на кожу несколько раз, показывают, что указанный лекарственный препарат при дозе, равной 0,2 мл 5% раствора, не вызывает выраженных проявлений интоксикации. Однако в ходе гистологических исследований отмечалась некоторая интенсификация процесса кератинизации в эпидермисе без какого-либо увеличения слоев клеток эпидермиса и без оказания воспалительного действия на саму кожу (дермис). 50% раствор экстракта вызывает выраженный гиперкератоз, сухость и отвердевание складок кожи. С помощью гистологических исследований было установлено, что наряду с интенсификацией процесса кератинизации также происходит увеличение клеточных слоев в эпидермисе, хотя воспалительные эффекты при этом не наблюдались. При применении указанной дозы не наблюдали признаков системной токсичности (за счет абсорбции). В ходе проведения двухнедельного эксперимента на мышах животным вводили объемы растворов,примерно в 4 раза превышающие указанные выше объемы, при этом концентрации растворов оставались теми же (5 и 50% растворы). Визуальная кожная реакция в виде шелушения и утолщения кожных складок, подтвержденная гистологическим методом, при отсутствии воспалительных эффектов, проявлялась уже при применении 5% экстракта. Также наблюдалась гранулоцитопоэтическая реакция, проявлявшаяся в трансформации "лимфоцитарного" типа гемопоэза, характерного для грызунов, в "гранулоцитарный" тип. Препарат при концентрации 5% не вызывал каких-либо негативных или воспалительных изменений в слизистой оболочке дистального сегмента прямой кишки. При применении указанной дозы не наблюдали каких-либо симптомов общего системного токсического действия. Нанесение на кожу экстракта при чрезвычайно высокой концентрации (50%) сопровождалось появлением системного токсического действия. Также наблюдали проявления характерных свойств препарата, в частности, стимулирование кератинизации и гранулоцитопоэз (гранулоцитоз) при отсутствии воспалительного воздействия на кожу и слизистую оболочку. При имитировании интенсивной трансдермальной абсорбции препарата путем подкожного введения наиболее характерным признаком системного действия является нейротоксичность с преобладанием угнетающего действия на центральную нервную систему. На основании определения средних токсичных и других доз у мышей (TD50 - 0,4 мл раствора при 173,8%, TD16 - 0,4 мл раствора при 10%, TD84 - 0,4 мл раствора при 35% у животных) в качестве пример-5 015255 ной нетоксичной дозы для крыс при местном нанесении на кожу была принята доза от 1,0 до 1,.5 мл/кг 5% раствора. Растворы экстракта при концентрации от 5 до 50% при нанесении на кожу не обладают ни местным раздражающим действием, ни сенсибилизирующими (аллергенными) свойствами. Исследования противовирусной активности Задача настоящего исследования заключалась в изучении выделенного экстракта грецкого ореха согласно первому аспекту, применяемого для получения препарата (далее - экстракта), с целью подтверждения наличия противовирусной активности (противогерпесной) в клеточных культурах. В качестве экспериментальной модели применяли следующие клетки: непрерывную линию клеток DR саркомы кости (полученную из лаборатории вирусологии Национального центра особо опасных инфекций Грузии) и первичную культуру человеческих фибробластов, полученных из кожно-мышечной ткани (абортивный материал из Института акушерства, гинекологии и перинатологии Министерства здравоохранения Грузии). Вирусный материал - вирус простого герпеса I типа, полученный из музея лаборатории вирусологии Института вирусных препаратов Министерства здравоохранения Российской Федерации (Москва). При проведении эксперимента применяли способ перекрестной оценки, который включает одновременный анализ различных концентраций экстракта (от 1:5 до 1:80) и различных степеней разбавления вируса (от 1:10 до 1:10000000; традиционно разбавление обозначают следующим образом: от -1,0 lg до-7,0 lg). Указанный способ позволяет выявить большее количество мелких нюансов взаимосвязи между указанными препаратами и дозами, а также оптимальный вариант обеспечения максимальной защиты клеток от вирусной инфекции (Zdrodovski P.F., Sokolov M.I. - Rukovodstvo po laboratornoy diagnostike virusnikh i rikketsioznikh bolezney. [Manual of analytical diagnostic of viral и rickettsian diseases//M.,"Meditsina", 1965, c. 396). Анализ полученных результатов позволил сделать однозначный вывод, что растительный экстракт,применяемый для получения лекарственного препарата, способен обеспечивать ингибирование репродуцирования вируса простого герпеса в DR клеточных культурах (саркомы кости) и человеческих фибробластах из кожно-мышечной ткани. Этот эффект был более интенсивным, когда экстракт применяли при разбавлении 1:5 (чистый экстракт не анализировали намеренно, принимая во внимание возможность цитотоксического воздействия на клетки). Способ перекрестной оценки экстракта и вируса в клеточных культурах позволил продемонстрировать защитный противогерпесный эффект экстракта и выяснить некоторые закономерности протекания инфекционных процессов в клетках. Исследование антигерпесной активности В ходе исследований in-vitro было продемонстрировано, что выделенный экстракт грецкого ореха согласно первому аспекту изобретения (далее - экстракт) обладает защитными свойствами против вируса простого герпеса (ВПГ) в клеточных культурах человеческих фибробластов и DR саркомы кости. Поэтому сочли необходимым изучение противовирусного действия экстракта на белых мышах. Для проведения данного исследования применяли модель герпесной инфекции у белых мышей с целью изучения смертности среди животных и индекса репродукции вируса. Состояние иммунной системы организма оценивали с точки зрения продуцирования антител, фагоцитоза и активности интерферона. Также анализировали эмбриотоксическое и мутагенное действие вируса герпеса и степень антиоксидантной защиты у беременных самок мышей. Все эти параметры исследовали на инфицированных мышах, подвергаемых лечению экстрактом. В результате проведенных исследований было убедительно продемонстрировано, что предложенный экстракт можно успешно применять для селективной нейтрализации иммунодепрессивного действия вируса герпеса. Несмотря на то что предложено несколько различных механизмов действия, обеспечивающих указанные выше свойства экстракта, наиболее подходящими из них являются следующие: в присутствии вируса герпеса в организме возникает гормональный дисбаланс, развивается общая и клеточная гипоксия и деструктивные процессы приводят к интоксикации. Все эти явления либо обусловлены существующей патологией иммунной системы, либо возникают сами по себе. Другими словами, в присутствии вируса герпеса появляются по меньшей мере все четыре указанных фактора: гормональный дисбаланс, гипоксия, интоксикация и патология иммунной системы, при этом указанные факторы являются взаимно усугубляющими. Одним из механизмов защитного действия экстракта являются его антиоксидантные свойства, которые способствуют восстановлению дыхания на внутриклеточном уровне (включая иммуноциты). Полагают, что указанное действие экстракта обусловлено содержащимися в нем физиологически активными веществами (антибиотиками, юглоном и флавоноидами; микроэлементами; комплексом витаминов С,Е, РР), которые оказывают положительное воздействие на интенсификацию функциональной активности иммунокомпетентных клеток. Таким образом, предложенный экстракт можно, без всякого сомнения, отнести к активным природным лекарственным средствам, которые можно эффективно применять для предотвращения и лечения вирусных и бактериальных инфекций, пиогенных и воспалительных заболеваний, а также других патологических состояний, при которых требуется усиление метаболических и адаптационных процессов.-6 015255 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения стабильного экстракта из грецких орехов, включающий: а) сбор незрелых плодов грецких орехов в качестве исходного сырья; б) подготовку указанного исходного сырья к экстракции; в) заморозку исходного сырья, полученного на предыдущей стадии, включающую выдерживание грецких орехов в морозильной камере при температуре от -18 до -20 С в течение от 70 до 170 ч; г) снятие скорлупы замороженного грецкого ореха и последующую сушку в сушильной камере до достижения влажности менее 10%; д) измельчение высушенной массы, полученной на стадии сушки, на куски; е) добавление спирта в соотношении от 1/2 до 1/5 по массе/объему и ж) проведение экстракции в течение периода времени менее 10 мин; з) фильтрование и и) конечное упаковывание. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что подготовка (б) исходного сырья к экстракции включает механическую очистку, промывание водой и сушку на воздухе. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на стадии (г) снимают скорлупу замороженного грецкого ореха в виде тонких слоев толщиной от 2 до 3 мм. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный спирт представляет собой этиловый спирт(96%). 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный спирт добавляют в соотношении 1/3 по массе/объему. 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что время проведения экстракции составляет менее 5 мин. 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что время проведения экстракции составляет менее 2 мин. 8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что стадию фильтрования экстракта проводят с применением фильтра первичной очистки и затем бактерицидного тонкопористого фильтра. 9. Экстракт из грецких орехов, полученный способом по любому из пп.1-8. 10. Композиция, содержащая экстракт из грецких орехов по п.9, для получения лекарственного препарата для лечения вирусных, грибковых или бактериальных заболеваний. 11. Применение экстракта из грецких орехов по п.9 для получения лекарственного препарата для лечения грибковых, бактериальных или вирусных заболеваний.