Гидразидсодержащие соединения – ингибиторы cftr и их применение

011074 Состояние, касающееся научного исследования, проведенного при финансовой поддержке государства Данное изобретение было осуществлено при правительственной поддержке по грантамHL73854, ЕВ 00415, EY13574, DK35124, DK43840 и UC1 AI062530-01, присужденным Национальным институтом здравоохранения (National Institutes of Health). Правительство может обладать определенными правами на данное изобретение. Предпосылки создания изобретения Кистозно-фиброзный регулирующий трансмембранную проводимость белок, (CFTR), представляет собой цАМФ-активированный хлоридный (Cl-) канал, экспрессируемый в эпителиальных клетках дыхательных путей, кишечника, поджелудочной железы и яичек млекопитающих. CFTR представляет собой хлоридный канал, ответственный за цАМФ-опосредованное выделение Cl-. Гормоны, такие как адренергический агонист, или токсин, такой как токсин холеры, приводят к повышению уровня цАМФ,активации цАМФ-зависимой протеинкиназы и фосфорилированию CFTR Cl- канала, что вызывает открывание канала. Повышение уровня клеточного Са 2+ также может активировать различные апикальные(верхушечные) мембранные каналы. Фосфорилирование посредством протеинкиназы С может или открывать, или закрывать Cl- каналы в апикальной мембране. CFTR располагается главным образом в эпителии, где он обеспечивает путь для передвижения ионов Cl- через апикальную мембрану и ключевое место для регулирования скорости трансэпителиального транспорта соли и воды. Функция CFTR хлоридного канала связана с широким спектром заболеваний, включая кистозный фиброз (CF) и некоторые формы мужского бесплодия, поликистозное заболевание почек и секреторную диарею. Мутации CFTR вызывают наследственное заболевание со смертельным исходом - кистозный фиброз (CF). Наблюдения, проведенные на людях, страдающих кистозным фиброзом (CF), и мышиных моделях CF, указывают на функциональную важность CFTR в транспорте жидкости в кишечнике и поджелудочной железе, а также в мужской способности к воспроизведению потомства (Grubb et al., 1999,Physiol. Rev. 79: S193-S214; Wong, P. Y., 1997, Mol. Hum. Reprod. 4: 107-110). Однако механизм, по которому дефектный CFTR вызывает заболевание дыхательных путей, которое является основной причиной заболеваемости и смертности при CF, остается неясным (Pilewslci et al., 1999, Physiol. Rev. 79: S215S255). Основные трудности в понимании заболевания дыхательных путей при CF включают неадекватность мышиных моделей CF, в которых проявляется незначительное или совсем не проявляется заболевание дыхательных путей, недостаток животных моделей CF на крупных животных и ограниченная доступность дыхательных путей человека, страдающего от CF, которые бы не были бы повреждены хронической инфекцией и воспалением. Для исследования механизмов CF или для создания фенотипа CF на животных моделях крупных животных CFTR-селективные ингибиторы с высокой аффинностью доступны не были. Высокоаффинные ингибиторы CFTR также находят клиническое применение в терапии секреторных диарей и кистозного заболевания почек и для ингибирования способности мужчин к воспроизведению потомства. Было открыто несколько ингибиторов CFTR, хотя большинство из них обладает слабой эффективностью и недостатком специфичности в отношении CFTR. Пероральный гипогликемический агент глибенкламид ингибирует CFTR Сl проводимость с внутриклеточной стороны путем блокирования механизма открытия канала (SheppardRobinson, 1997 J. Physiol., 503: 333-346; Zhou et al., 2002, J. Gen.Physiol., 120: 647-662) в высоких микромолярных концентрациях, при которых он воздействует на другие Сl- и катионные каналы (EdwardsWeston, 1993; Rabe et al., 1995, Br. J. Pharmacol., 110: 1280-1281;Schultz et al., 1999, Physiol. Rev., 79: S109-S144). Другие неселективные ингибиторы анионного транспорта, включая дифениламин-2-карбоксилат (DPC), 5-нитро-2-(3-фенилпропиламино)бензоат (NPPB) и флуфенаминовую кислоту, также ингибируют CFTR путем закрывания пор во внутриклеточном сайте (Dawson et al., 1999, Physiol.Rev., 79: S47-S75; McCarty, 2000, J. Exp. Biol., 203: 1947-1962). Соответственно, существует необходимость в ингибиторах CFTR, в особенности таких, которые являются растворимыми в воде. Настоящее изобретение адресовано такой необходимости, также как и другим, и преодолевает недостатки, существующие на настоящий момент в предшествующем уровне техники. Литература:Ma et al., 2002, J. Clin. Invest., 110: 1651-1658 описывает тиазолидиноновый класс ингибиторовCFTR Краткое изложение сущности изобретения Изобретение относится к композициям, фармацевтическим препаратам и способам ингибирования белка, регулирующего кистозно-фиброзную трансмембранную проводимость, (CFTR), которые могут использоваться для исследования и лечения CFTR-опосредованных заболеваний и состояний. Композиции и фармацевтические препараты согласно изобретению могут включать одно или несколько гидразидсодержащих соединений и дополнительно могут включать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, эксципиентов и/или адьювантов. Способы по изобретению включают в некоторых вариантах осуществления введение пациенту, страдающему от CFTR-опосредованного заболевания или состояния, эффективного количества гидразидсодержащего соединения. В других вариантах осуществ-1 011074 ления изобретение обеспечивает способы ингибирования CFTR, которые включают контактирование клеток в организме субъекта с эффективным количеством гидразидсодержащего соединения. Кроме того, отличительной особенностью изобретения является животная модель CFTR-опосредованного заболевания, где животное не является человеком, где модель получают путем введения гидразидсодержащего соединения животному, не являющемуся человеком, в количестве, достаточном для ингибированияCFTR. Данные и другие задачи, преимущества и отличительные особенности изобретения будут очевидны специалистам в данной области из подробного описания гидразидсодержащих соединений, как они более полно описаны далее. Краткое описание чертежей Изобретение будет лучше понятно со ссылкой на следующие чертежи, которые предназначены только для иллюстративных целей. На фиг. 1 А показано схематическое представление методики скрининга, использованной для обнаружения ингибиторов CFTR. CFTR стимулировали в максимальной степени с помощью множества агонистов в стабильно трансфицированных эпителиальных клетках соэкспрессирующих CFTR человека и желтый флуоресцентный белок (YFP), обладающий Cl-/I- чувствительной флуоресценцией. После добавления тестируемого соединения приток йода индуцировали с помощью добавления раствора, содержащего I-. На фиг. 1 В показаны химические структуры ингибиторов CFTR, выявленные методом скрининга,показанным на фиг. 1 А. На фиг. 1 С представлен график, полученный с использованием метода скрининга в соответствии с фиг. 1 А, где представлена относительная флуоресценция относительно времени для ингибитора CFTR гидразида N-2-нафталенил-[(3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил)метилен]глицина (упоминаемого в данном описании как GlyH-101) в нескольких концентрациях. На фиг. 1D представлен график ингибирования GlyH-101 тока короткого замыкания в клетках FRT с нарушенной проницаемостью мембраны, экспрессирующих CFTR человека. CFTR стимулировали с использованием 100 мкМ СРТ-цАМФ. На фиг. 2 А представлен график, на котором представлена временная кривая ингибирования, показывающая скорость CFTR-опосредованного транспорта I в различные моменты времени после добавления 10 мкМ GlyH-101. На фиг. 2 В представлен график, на котором представлена временная кривая обратимого ингибирования, показывающая скорость транспорта I- в различные моменты времени после вымывания GlyH-101. На фиг. 2 С представлен график, иллюстрирующий приток йода с использованием GlyH-101 (50 мкМ) после CFTR стимуляции с использованием указанных агонистов (50 мкМ). Закрашенные полосы показывают агонист, а пустые полосы показывают агонист вместе с GlyH-101. На фиг. 3 А представлены химические структуры класса аналогов GlyH-101, где места модификации обозначены в скобках. На фиг. 3 В показана реакционная схема синтеза GlyH-101, гидразида N-(6-хинолинил)-[(3,5 дибром-2,4-дигидроксифенил)метилен]глицина (упоминаемого в данном описании как GlyH-126), гидразида 3,5-дибром-2,4-дигидрокси[2-(2-нафталинамин)ацето]бензойной кислоты (упоминаемого в данном описании как GlyH-201) и гидразида N-2-нафталенил-[(3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил)метил]глицина(упоминаемого в данном описании как GlyH-301). Реагенты и условия: (a) ICH2COOEt, NaOAc, 95C; (b)N2H4, H2O, EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником; (с) 3,5-ди-Br-2,4-ди-OH-Ph-CHO,EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником; (d) 3,5-ди-Br-2,4-ди-ОН-Ph-COCI, пиридин,22 С; (е) N2H4, H2O, Pd/C (10%), ДМФ/нагревание при кипении с обратным холодильником; (f) глиоксалевая кислота, 10 С; (g) Na2BH3CN/CH3CN, 48 ч; сухой HCl, EtOH. На фиг. 3 С показан график, представляющий ингибирование гидразидом N-2-нафталенил-[(3,5 дибром-2,4-дигидроксифенил)метилен]оксаминовой кислоты (упоминаемого в данном описании как ОхаН-110) тока короткого замыкания в клетках FRT с нарушенной проницаемостью мембраны, экспрессирующих CFTR человека (правая полоса), и структура ОхаН-110 (левая полоса). CFTR стимулировали с использованием 100 мкМ СРТ-цАМФ. На фиг. 4 А представлен график, иллюстрирующий ингибирование GlyH-101, измеренное в экспериментах фиксации потенциала с цельными клетками на клетках FRT, экспрессирующих CFTR человека. Мембранные токи цельных клеток вызывали с использованием напряжения от -100 до +100 мВ с шагом в 20 мВ после максимальной стимуляции CFTR с помощью 5 мкМ форсколина. График слева представляет измерения перед добавлением GlyH-101, а график справа представляет измерения, полученные после добавления GlyH-101. На фиг. 4 В представлен график, отображающий взаимоотношение ток-напряжение в отсутствие ингибиторов (контроль, незаштрихованные кружки), после добавления 10 мкМ (закрашенные квадраты) и 30 мкМ GlyH-101 (закрашенные кружки), после вымывания 10 мкМ GlyH-101 (возвращение к исходному состоянию, треугольники) и после добавления 5 мкМ CFTRinh-172 (закрашенные кружки). На фиг. 4 С представлен график, иллюстрирующий взаимоотношение доза-ответная реакция, опре-2 011074 деленный для GlyH-101 при указанных мембранных потенциалах. На фиг. 4D представлен график, иллюстрирующий представительные зарегистрированные показатели фиксации потенциала на закрепленных клетках, показывающие активность отдельного канала CFTR при концентрациях GlyH-101 0, 0,4 и 5 мкМ. Пунктирные линии показывают уровень нулевого тока (закрытые каналы) с преломлением по нисходящей линии, указывающим на открывание каналов (движениеCl-ионов из пипетки в клетку). Потенциал пипетки составлял 60 мВ. На фиг. 5 А представлен график, иллюстрирующий рН-зависимые изменения поглощения (правая полоса) химических соединений (10 мкМ) (соответствующие химические структуры, левая полоса) в растворе NaCl (100 мМ), содержащем MES, HEPES, бороновую кислоту и лимонную кислоту (каждую по 10 мМ), титрованном до различных значений рН с использованием HCl/NaOH. Изменения поглощения измеряли при аналитических длинах волн, составляющих 346, 348, 346 и 236 нм (сверху вниз). На фиг. 5 В представлена иллюстрация выведенного ионного равновесия для GlyH-101, где показаны величины рКа. На фиг. 6 А представлен график, иллюстрирующий ингибирование GlyH-101 при регистрации назальной разницы потенциалов (PD), показывающий ответные реакции на амилорид и растворы с низкой концентрацией Cl- (левая полоса) или усредненные величины PD (правая полоса, среднее значениесредняя ошибка n=5). Там, где это указано, растворы с низкой концентрацией Cl- содержали форсколин в отсутствие или в присутствии GlyH-101. На фиг. 6 В представлен график, иллюстрирующий двухсторонний анализ экспериментов на фиг. 6 А, показывающий изменения PD (APD) для действия форсколина, форсколина и CFTRinh-172, и форсколина и GlyH-101. На фиг. 6 С представлен график, иллюстрирующий изменение PD (среднее значениесредняя ошибка) в серии экспериментов по гиперполяризации, индуцированной низким Cl- (левая полоса), или индуцированной форсколином гиперполяризации (правая полоса), в которых растворы содержали или 4,4'-диизотиоцианостильбен-2,2'-дисульфоновую кислоту (DIDS) или GlyH-101 (P0,005 для пониженного APD для контроля). На фиг. 7 А представлен график, иллюстрирующий ингибирование GlyH-101 тока короткого замыкания после стимуляции CFTR в клетках Т 84 (верхняя полоса), клетках дыхательных путей человека(средняя полоса) и выделенной подвздошной кишке мыши (нижняя полоса). После появления постоянной базовой линии тока добавляли амилорид (10 мкМ, верхний раствор) и СРТ-цАМФ (0,1 мМ, оба раствора) с последующим добавлением указанных концентраций GlyH-101 (оба раствора). На фиг. 7 В представлен график, иллюстрирующий ингибирование посредством GlyH-101 выделения жидкости в модели индуцированного холерным токсином выделения жидкости в закрытой петле кишечника. Жидкость из просвета кишечника, показанную как соотношение веса петли к длине (г/см,средняя ошибка, 6 мышей) измеряли через 4 ч после инъекции физиологического раствора (контроль),холерного токсина (1 мкг) или холерного токсина + GlyH-101 (0,25 мкг). На фиг. 8 приведены химические структуры класса неабсорбируемого дигидразида малоновой кислоты (обозначен как MalH-х) аналогов соединений гидразида глицина по изобретению. На фиг. 9 показана реакционная схема синтеза полярных неабсорбируемых ингибиторов CFTR: дигидразида 2-нафталениламино-бис-[(3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил)метилен]пропандиовой кислоты(MalH-3). Реагенты и условия: (а) диэтилброммалонат, NaOAc, 90 С, 8 ч, 84%; (b) N2H4, H2O,EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником, 10 ч, 92%; (с), (d) 3,5-ди-Br-2,4-ди-ОНбензальдегид (1 эквивалент), EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником, 3 ч, 58%; (е) 2,4 ди-SO3Na-бензальдегид, ДМФ/нагревание при кипении с обратным холодильником, 4 ч, 58%; и (f) 4 натрийсульфофенилизортиоцианат, ДМФ/нагревание при кипении с обратным холодильником, 4 ч, 47%. На фиг. 10 показана реакционная схеме синтеза PEG-илированного ингибитора CFTR, содержащего фрагмент PEG (PEG-илированного соединения) MalH-(PEG)n (полоса А) и MalH-(PBG)nB (полоса В). На фиг. 11 показана реакционная схеме синтеза PEG-илированного ингибитора CFTR GlyH-(PEG)n. Реагенты и условия: (i) Br-бутиролактон, NaOAc, 90C, 8 ч, 89%; (j) N2H4, H2O, EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником, 10 ч, 89%; (k) (ВОС)2 О, ТГФ, комнатная температура, 86%; (l) TsCI,пиридин, -15 С, 8 ч, 73%; (m) NH2-PEG, ДМФ, 80 С, 24 ч, 38%; (n) ТФУК, CH2Cl2, комнатная температура, 30 мин, 73%; и (о) 3,5-ди-Br-2,4-ди-ОН-бензальдегид, EtOH/нагревание при кипении с обратным холодильником, 3 ч, 58%. На фиг. 12 представлена серия графиков, показывающих ингибирование хлоридного тока апикальной мембраны в эпителиальных FRT клетках, экспрессирующих CFTR человека дикого типа. Хлоридный ток измеряли с помощью анализа тока короткого замыкания в клетках, подвергаемых градиентному действию хлорид-иона и после нарушения проницаемости базолатеральной мембраны. CFTR стимулировали с использованием 10 мкМ СРТ-цАМР.-3 011074 Повышающиеся концентрации соединений MalH добавляли, как указано. На фиг. 13 представлена серия графиков, показывающих всасывание в кишечнике и противодиарейную эффективность ингибиторов CFTR. Полоса А представляет собой график всасывания в течение 2 ч указанных соединений MalH в закрытых петлях тощей кишки у живых мышей (SD, n=4-6 мышей). Для сравнения показано всасывание CFTRinh-172, измеренное тем же способом. На полосе В представлен график, показывающий ингибирование индуцированного холерным токсином выделения жидкости в закрытых петлях тощей кишки. В петли вводили инъекции физиологического раствора (PBS) или физиологического раствора, содержащего 1 мкг холерного токсина (XT) с указанными количествами соединений MalH. Соотношения вес-к-длине для петель кишечника измеряли через 6 ч (SD, n=3-5 мышей). Перед тем, как будет описано настоящее изобретение, следует понять, что данное изобретение не ограничено конкретными описанными вариантами осуществления, поскольку таковые могут, конечно,изменяться. Также следует понимать, что использованная в данном описании терминология используется только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения изобретения, поскольку объем настоящего изобретения будет ограничен только прилагаемой формулой изобретения. Когда приведен диапазон величин, следует понимать, что изобретение охватывает каждую промежуточную величину до десятых единиц нижнего предела между верхней и нижней границами диапазона,если контекст четко не указывает обратного, а также любые другие указанные и промежуточные значения в данном указанном диапазоне. Более высокие и более низкие предельные значения данных меньших диапазонов независимо могут быть включены в меньшие диапазоны значений, также охватываемые изобретением, при условии любого конкретно исключенного предела в указанном диапазоне. Когда указанный диапазон включает одно или оба из предельных значений, диапазоны, исключающие любой или оба из данных предельных значений, также включены в изобретение. Если не определено другого, все технические и научные термины, использованные в данном описании, имеют те же значения, которые обычно понимаются обычными специалистами в данной области, к которой принадлежит изобретение. Хотя любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные указанным в данном описании, также могут использоваться для практической реализации или тестирования настоящего изобретения, в данный момент описаны предпочтительные способы и материалы. Все отмеченные в данном описании публикации включены в данное описание путем ссылки для раскрытия и описания способов и/или материалов, в связи с которыми процитированы данные публикации. Следует отметить, что как они использованы в данном описании и прилагаемой формуле изобретения, неопределенная форма единственного числа, союз и и определенная форма единственного числа включают отсылку на множественное число, если контекст четко не указывает другого. Таким образом,ссылка на ингибитор включает ссылку на множество таких ингибиторов, а ссылка на данную клетку включает ссылку на одну или несколько клеток и их эквивалентов, известных специалистам в данной области, и тому подобное. Обсуждавшиеся здесь публикации обеспечены только с целью их раскрытия до даты подачи настоящей заявки. Ничто в данном описании не следует истолковывать как допущение, что настоящее изобретение дает права предвидеть ранним числом такую публикацию на основании предшествующего изобретения. Кроме того, приведенные даты публикации могут отличаться от фактических дат публикации,которые могут требовать независимого подтверждения. Подробное описание изобретения Данное изобретение основано на открытии гидразидсодержащих соединений, которые представляют собой высокоаффинные ингибиторы CFTR. Структура данных соединений, обладающих CFTRингибирующей активностью, раскрытых в данном описании, и их производных, а также фармацевтические препараты и способы применения более подробно описаны далее. Определения Выражение состояние или симптом, опосредованные кистозно-фиброзным регулирующим трансмембранную проводимость белком или CFTR-опосредованное состояние или симптом означает любое состояние, нарушение или заболевание или симптомы такого состояния, нарушения или заболевания,которые являются результатом активности кистозно-фиброзного регулирующего трансмембранную проводимость белка (CFTR), например, активность CFTR в ионном транспорте. Такие состояния, нарушения, заболевания или симптомы поддаются лечению путем ингибирования активности CFTR, например,путем ингибирования ионного транспорта посредством CFTR. Активность CFTR, например, влечет за собой секрецию кишечника в качестве ответной реакции на различные агонисты, включая холерный токсин (см., например, Snyder et al., 1982 Bull. World Health Organ. 60: 605-613; Chao et al., 1994, EMBO J.,13: 1065-1072; Kimberg et al., 1971, J.Clin. Invest. 50:1218-1230). Выражение ингибитор CFTR, как оно использовано в данном описании, относится к соединению,которое снижает продуктивность транспорта ионов посредством CFTR, в частности это относится к транспорту хлоридных ионов посредством CFTR. Предпочтительно ингибиторы CFTR по изобретению представляют собой специфические ингибиторы CFTR, т.е. соединения, которые ингибируют активность CFTR без существенного или неблагоприятного воздействия на активность других-4 011074 переносчиков ионов, например, других переносчиков хлорида, переносчиков калия и тому подобного. Предпочтительно ингибиторы CFTR являются высокоаффинными ингибиторами CFTR, например, обладают аффинностью в отношении CFTR примерно по крайней мере одномикромолярной, обычно примерно от одно- до пятимикромолярной. Термин выделенное соединение означает соединение, которое, по существу, отделено или обогащено по отношению к другим соединениям, вместе с которыми оно существует в природе. Предпочтительно соединение имеет по меньшей мере более чем примерно 80%-ную, более предпочтительно по меньшей мере 90%-ную чистоту, даже более предпочтительно по меньшей мере 98%-ную чистоту, наиболее предпочтительно по меньшей мере 99%-ную чистоту по весу. Подразумевается, что настоящее изобретение охватывает диастереомеры, а также рацемические и разделенные, энантиомерно чистые формы и их фармацевтически приемлемые соли. Термин лечить или лечение, как он использован в данном описании, относится к лечению заболевания, состояния, нарушения или симптома у субъекта, где заболевание, состояние, нарушение или симптом опосредованы активностью CFTR, и включает: (1) предотвращение заболевания, состояния или нарушения, т.е. обеспечение того, чтобы клинические симптомы заболевания не развивались бы у субъекта, который может быть подвержен или предрасположен к заболеванию, состоянию или нарушению,но у которого еще не ощущаются или не проявляются симптомы, (2) приостановку развития заболевания,состояния или нарушения, т.е. остановку или уменьшение развития заболевания, состояния или нарушения или его клинических симптомов, или (3) облегчение заболевания, состояния или нарушения, т.е. обеспечение регрессии заболевания, состояния или нарушения или их клинических симптомов. Выражение терапевтически эффективное количество или эффективное количество означает количество соединения по изобретению, которое, при введении млекопитающему или другому, нуждающемуся в этом субъекту, является достаточным для эффективного лечения, как определено выше,заболеваний, состояний, нарушений или симптомов, опосредованных активностью CFTR. Количество соединения по изобретению, которое составляет терапевтически эффективное количество будет изменяться в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, а также возраста, веса и т.д. субъекта,подвергаемого лечению, но может быть определено обычным образом специалистом в данной области на основании его собственных знаний и данного описания. Термин субъект и пациент означает члена или членов вида млекопитающих или не млекопитающих, которым необходимы описанные здесь фармацевтические способы, композиции и лечение. Таким образом, субъекты и пациенты включают, без ограничения, приматов (включая человека),представителей семейства псовых, представителей семейства кошачьих, копытных животных (например,лошадей, коров, представителей семейства свиньих (например, свиней, представителей семейств птичьих и других субъектов. Люди и животные, не являющиеся человеком, имеющие коммерческую значимость (например, крупный рогатый скот и домашних животные) представляют особый интерес. Термин млекопитающее означает члена или членов вида млекопитающих и включает, в качестве примера, представителей семейства псовых, представителей семейства кошачьих, лошадей, коров, овец,грызунов и т.д. и приматов, в частности, людей. Животные модели, где животное не является человеком,в частности модели млекопитающих, например, примата, мыши, представителя отряда зайцеобразных и т.д. можно использовать для экспериментальных исследований. Термин единичная дозированная форма, как он использован в данном описании, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичной дозировки для людей и животных; где каждая единица содержит определенное количество соединений по настоящему изобретению, рассчитанное в количестве, достаточном для обеспечения желательного эффекта, в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем, носителем или средой-носителем. Детализированная спецификация новых единичных дозированных форм по настоящему изобретению зависит от конкретного используемого соединения и действия, которое должно быть достигнуто, и фармакодинамики, связанной с каждым соединением в организме хозяина. Подразумевается, что термин физиологические состояния охватывает те состояния, которые сочетаются с живыми клетками, например, например, преимущественно водные состояния, относящиеся к температуре, рН,солености и т.д., которые сочетаются с живыми клетками. Выражение фармацевтически приемлемый эксципиент означает эксципиент, который можно использовать для получения фармацевтической композиции, который является, как правило, безопасным,нетоксичным и не является нежелательным ни с биологической, ни с какой-либо другой точки зрения, и включает эксципиент, который является приемлемым для ветеринарного применения, а также для фармацевтического применения у людей. Выражение фармацевтически приемлемый эксципиент, как оно использовано в описании и формуле изобретения, включает как один, так и больше одного такого эксципиента. Как использовано в данном описании, подразумевается, что термин фармацевтическая композиция включает в себя композицию, подходящую для введения субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человеку. Как правило, фармацевтическая композиция является стерильной и предпочтительно не содержит загрязняющих веществ, которые способны вызвать нежелательную ответную реак-5 011074 цию у субъекта. Фармацевтические композиции могут быть разработаны для введения субъектам или пациентам, нуждающимся в этом, посредством различных путей введения, включая пероральный, буккальный, ректальный, парентеральный, внутрибрюшинный, внутрикожный, внутритрахейный и тому подобными. В некоторых вариантах осуществления композиция является подходящей для введения посредством чрезкожного пути с использованием усилителя проницаемости, отличающегося от ДМСО. В других вариантах осуществления фармацевтические композиции являются подходящими для введения путем, отличающимся от чрезкожного введения. Как использовано в данном описании, термин фармацевтически приемлемые производные соединения по изобретению включает его соли, сложные эфиры, простые эфиры енолов, сложные эфиры енолов, ацетали, кетали, ортоэфиры, полуацетали, полукетали, кислоты, основания, сольваты, гидраты или пролекарства. Такие производные легко могут быть получены специалистом в данной области с использованием способов для получения производных. Полученные соединения можно вводить животным или людям, не вызывая существенного токсического действия, и они либо являются фармацевтически активными, либо представляют собой пролекарства. Выражение фармацевтически приемлемая соль соединения по изобретению означает соль, которая является фармацевтически приемлемой и обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают: (1) кислотно-аддитивные соли, образованные неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобные; или соли, образованные органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота,янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 4 толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2,2,2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептановая кислота, 4,4'-метиленбис-(3-гидрокси-2-ен-1-карбоновая кислота), 3 фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота,стеариновая кислота, слизевая кислота и тому подобные; или соли, образованные в том случае, когда кислый протон в исходном соединении либо заменен на ион металла, например, ион щелочного металла,ион щелочно-земельного металла или ион алюминия; либо координирован с органическим основанием,таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглукамин и тому подобные. Выражение фармацевтически приемлемый сложный эфир соединения по изобретению означает сложный эфир, который является фармацевтически приемлемым, обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения и включает, не ограничиваясь указанным, алкиловые, алкениловые,алкиниловые, ариловые, гетероариловые, аралкиловые, гетероаралкиловые, циклоалкиловые и гетероциклические сложные эфиры кислотных групп, включая, но не ограничиваясь указанным, карбоновые кислоты, фосфорные кислоты, фосфиновые кислоты, сульфоновые кислоты, сульфиновые кислоты и бороновые кислоты. Выражение фармацевтически приемлемый простой эфир енола соединения по изобретению означает простой эфир енола, который является фармацевтически приемлемым, обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения, и включает, не ограничиваясь указанным, производные формулы C=C(OR), где R представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил или гетероциклил. Выражение фармацевтически приемлемый сложный эфир енола соединения по изобретению означает сложный эфир енола, который является фармацевтически приемлемым, обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения, и включает, не ограничиваясь указанным, производные формулы C=C(OC(O)R), где R представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил или гетероциклил. Выражение фармацевтически приемлемый сольват или гидрат соединения по изобретению означает сольватный или гидратный комплекс, который является фармацевтически приемлемым, обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения и включает, не ограничиваясь указанным, комплексы соединения по изобретению с одной или несколькими молекулами растворителя или воды, или содержит от 1 до примерно 100, от 1 до примерно 10, или от одной до примерно 2, 3 или 4 молекул растворителя или воды. Термин пролекарство означает любое соединение, которые высвобождает активное исходное соединение формулы (I) in vivo, когда пролекарство вводят субъекту-млекопитающему. Пролекарства соединений формулы (I) содержат функциональные группы, которые в обычных физиологических условиях гидролизуются в соответствующие карбокси, гидрокси или аминогруппы. Примеры таких функциональных групп включают, но не ограничиваются указанным, сложные эфиры (например, ацетатные, формиатные и бензоатные производные) и карбаматы (например, N,N-диметиламинокарбонил) гидроксиль-6 011074 ных групп в соединениях формулы (I) и тому подобные. Дополнительные примеры включают дипептидные или трипептидные сложные эфиры гидроксильных или карбоксильных групп в соединениях формулы (I) и тому подобные. Получение таких функциональных групп хорошо известно в данной области. Например, соединение формулы (I), имеющее присоединенную к нему гидроксильную группу, может быть обработано карбоновой кислотой или дипептидом, имеющим свободный карбоксильный конец в условиях этерификации, хорошо известных в данной области, с получением целевой сложноэфирной функциональной группы. Аналогично, соединение формулы (I), имеющее присоединенную к нему свободную карбоксильную группу, может быть обработано трипептидом, содержащим гидроксильную группу, такую как остаток серина (например, -N(H)-C(H)(CH2OH)-С(О)-) в условиях этерификации, хорошо известных в данной области, с получением целевой сложноэфирной функциональной руппы. Кроме того,соединения формулы (I), содержащие присоединенную карбоксильную сложноэфирную группу, могут быть обработаны различными сложными эфирами карбоновых кислот в стандартных условиях переэтерификации с получением соединений формулы (I) с присоединенной целевой сложноэфирной функциональной группой. Предусматривается, что все такие функциональные группы входят в объем данного изобретения. Термин органическая группа и органический радикал, как они использованы в настоящем описании, означают любую углеродсодержащую группу, включая углеводородные группы, которая классифицирована как алифатическая группа, циклическая группа, ароматическая группа, их функционализированные производные и/или их различные комбинации. Термин алифатическая группа означает насыщенную или ненасыщенную линейную или разветвленную углеводородную группу и охватывает, например, алкильные, алкенильные и алкинильные группы. Термин алкильная группа означает замещенную или незамещенную, насыщенную линейную или разветвленную углеводородную группу или цепь(например, от C1 до C8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, окстадецил, амил, 2-этилгексил и тому подобные. Подходящие заместители включают карбокси,защищенный карбокси, амино, защищенный амино, галоген, гидрокси, защищенный гидрокси, меркапто,низший алкилтио, нитро, циано, монозамещенный амино, защищенный монозамещенный амино, дизамещенный амино, С 1-С 7 алкокси, С 1-С 7 ацил, С 1-С 7 ацилокси и тому подобные. Термин замещенный алкил означает определенную выше алкильную группу, которая от одного до трех раз замещена гидрокси,защищенным гидрокси, амино, защищенным амино, циано, галогеном, трифторметилом, монозамещенным амино, дизамещенным амино, низшим алкокси, меркапто, низшим алкилтио, карбокси, защищенным карбокси, или соли карбоксила, амино и/или гидроксила. Как использовано в отношении к заместителям гетероарильных колец, термины замещенный (циклоалкил)алкил и замещенный циклоалкил являются такими, как определено ниже, замещенными такими же группами, которые перечислены для замещенной алкильной группы. Термин алкенильная группа означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или несколькими углерод-углеродными двойными связями, такую как винильная группа. Термин алкинильная группа означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или несколькими углеродуглеродными тройными связями. Термин циклическая группа означает закрытую кольцевую углеводородную группу, которая классифицирована как алициклическая группа, ароматическая группа или гетероциклическая группа. Термин алициклическая группа означает циклическую углеводородную группу, обладающую свойствами, аналогичными свойствам алифатических групп. Термин ароматичекая группа или арильная группа означает моно- или полициклическую ароматическую углеводородную группу и может включать один или несколько гетероатомов, и которая дополнительно определена ниже. Термин гетероциклическая группа означает закрытый кольцевой углеводород, в котором один или несколько атомов в кольце представляют собой элементы, отличающиеся от углерода (например,азот, кислород, сера и т.д.), и дополнительно определен далее. Органические группы могут быть функционализированными или иным образом могут включать дополнительные функциональные группы, связанные с органической группой, такие как карбоксил, амино, гидроксил и тому подобные, которые могут быть защищеннымми или незащищенными. Например,выражение алкильная группа предназначено не только для того, чтобы включать чистые насыщенные углеводородные алкильные заместители с открытой цепью, такие как метил, этил, пропил, трет-бутил и тому подобные, но также и алкильные заместители, содержащие дополнительные заместители, известные в данной области, такие как гидрокси, алкокси, меркапто, алкилтио, алкилсульфонил, галоген, циано, нитро, амино, карбоксил и т.д. Таким образом, выражение алкильная группа включает простые эфиры, сложные эфиры, галогеналкилы, нитроалкилы, карбоксиалкилы, гидроксиалкилы, сульфоалкилы и т.д. Термины группы галогена или галоген использованы в данном описании взаимозаменяемо и относятся к группам фтора, хлора, брома или иода. Термин галогеналкил относится к алкильной группе, как определено выше, которая является замещенной одним или несколькими атомами галогена. Атомы галогена могут быть одинаковыми или разными. Термин дигалогеналкил относится к алкильной группе, как определено выше, которая является замещенной двумя группами галогена, которые могут быть одинаковые или разные. Термин тригалоге-7 011074 налкил относится к алкильной группе, как определено выше, которая является замещенной тремя группами галогена, которые могут быть одинаковые или разные. Термин пергалогеналкил относится к галогеналкильной группе, как определено выше, в которой каждый атом галогена в алкильной группы заменен на атом галогена. Термин перфторалкил относится к галогеналкильной группе, как определено выше, в которой каждый атом галогена в алкильной группе заменен на атом фтора. Термин циклоалкил означает моно-, би- или трициклическое насыщенное кольцо, которое является полностью насыщенным или частично ненасыщенным. Примеры такой группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, адамантил, циклооктил, цис- или трансдекалин, бицикло[2,2,1]гепт-2-ен, циклогекс-1-енил, циклопент-1-енил, 1,4-циклооктадиенил и тому подобные. Термин (циклоалкил)алкил означает определенную выше алкильную группу, замещенную одним из вышеуказанных циклоалкильных колец. Примеры такой группы включают (циклогексил)метил, 3(циклопропил)-н-пропил, 5-(циклопентил)гексил, 6-(адамантил)гексил и тому подобные. Термин замещенный фенил определяет фенильную группу, замещенную одним или несколькими фрагментами, в некоторых случаях одним, двумя или тремя фрагментами, выбранными из групп, включающих галоген, гидрокси, защищенный гидрокси, циано, нитро, меркапто, алкилтио, трифторметил, С 1 С 7 алкил, C1-С 7 алкокси, С 1-С 7 ацил, С 1-С 7 ацилокси, карбокси, оксикарбокси, защищенный карбокси, карбоксиметил, защищенный карбоксиметил, гидроксиметил, защищенный гидроксиметил, амино, защищенный амино, (монозамещенный) амино, защищенный (монозамещенный) амино, (дизамещенный) амино, карбоксамид, защищенный карбоксамид, N-(C1-C6 алкил)карбоксамид, защищенный N-(C1C6 алкил)карбоксамид,N,N-ди(C1-C6 алкил)карбоксамид,трифторметил,N-C1-C6 алкил)сульфонил)амино, N-(фенилсульфонил)амино или фенил, замещенный или незамещенный, так что образуется, например, бифенил или нафтильная группа. Примеры термина "замещенный фенил" включают моно- или ди(галоген)фенильную группу, такую как 2-, 3- или 4-хлорфенил, 2,6-дихлорфенил, 2,5-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 2-, 3- или 4 бромфенил, 3,4-дибромфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 2-, 3- или 4-фторфенил и тому подобные; моно- или ди(гидрокси)фенильную группу, такую как 2-, 3- или 4-гидроксифенил, 2,4-дигидроксифенил, их гидроксизащищенные производные и тому подобные; нитрофенильную группу, такую как 2-, 3- или 4 нитрофенил; цианофенильную группу, например, 2-, 3- или 4-цианофенил; моно- или ди(алкил)фенильную группу, такую как 2-, 3- или 4-метилфенил, 2,4-диметилфенил, 2-, 3- или 4(изопропил)фенил, 2-, 3- или 4-этилфенил, 2-, 3- или 4-(н-пропил)фенил и тому подобные; моно или ди(алкокси)фенильную группу, например, 2,6-диметоксифенил, 2-, 3- или 4-(изопропокси)фенил, 2-, 3 или 4-(трет-бутокси)фенил, 3-этокси-4-метоксифенил и тому подобные; моно- или ди(галоген)-, моно-,ди- или три-(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром-2,4,6-тригидроксифенил, 3,5-дибром-2,4 дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4-гидроксифенил и тому подобные; моно- или ди(галоген)-моно- или ди-(гидроксил)-моно- или ди-(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4 метоксифенил и тому подобные; 2-, 3- или 4-трифторметилфенил; моно- или дикарбоксифенильную или"замещенный фенил" относится к дизамещенным фенильным группам, где заместители являются разными, например, 3-метил-4-гидроксифенил, 3-хлор-4-гидроксифенил, 2-метокси-4-бромфенил, 4-этил-2 гидроксифенил, 3-гидрокси-4-нитрофенил, 2-гидрокси-4-хлорфенил и тому подобные. Термин (замещенный фенил)алкил относится к одной из вышеуказанных фенильных групп, присоединенных к одной из вышеописанных алкильных групп. Примеры включают такие группы, как 2 фенил-1-хлорэтил,2-(4'-метоксифенил)этил,4-(2,6'-дигидроксифенил)-н-гексил,2-(5'-циано-3'метоксифенил)-н-пентил, 3-(2',6'-диметилфенил)пропил, 4-хлор-3-аминобензил, 6-(4'-метоксифенил)-3 карбоксигексил,5-(4'-аминометилфенил)-3-(аминометил)пентил,5-фенил-3-оксопент-1-ил,(4 гидроксинафт-2-ил)метил и тому подобные. Как отмечено выше, термин ароматический или арил относится к пяти- или шестичленным карбоциклическим кольцам. Также как отмечено выше, термин гетероарил означает необязательно замещенные пятичленные и шестичленные кольца, которые содержат от 1 до 4 гетероатомов, таких как атомы кислорода, серы и/или азота, в особенности азота, или по отдельности или в сочетании с атомами серы или кислорода. Данные пятичленные или шестичленные кольца могут быть полностью ненасыщенными. Кроме того, вышеуказанные необязательно замещенные пятичленные или шестичленные кольца необязательно могут быть конденсированными с ароматической 5-членной или 6-членной кольцевой системой. Например, кольца необязательно могут быть конденсированными с ароматической 5-членной или 6-членной кольцевой системой, такой как пиридиновая или триазольная система, и предпочтительно-8 011074 с бензольным кольцом. Следующие кольцевые системы являются примерами гетероциклических (либо замещенных, либо незамещенных)радикалов, обозначенных термином гетероарил: тиенил, фурил, пирролил, пирролидинил, имидазолил, изоксазолил, триазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тетразолил, тиатриазолил, оксатриазолил, пиридил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, оксазинил, триазинил, тиадиазинил, тетразоло,1,5-[b]пиридазинил и пуринил, а также их бензоконденсированные производные, например, бензоксазолил, бензтиазолил, бензимидазолил и индолил. Заместители для вышеуказанных необязательно замещенных гетероарильных колец представляют собой от одного до трех галогенов, тригалогенметилов, аминогрупп, защищенных аминогрупп, солей аминогрупп, монозамещенных аминогрупп, дизамещенных аминогрупп, карбоксигрупп, защищенных карбоксигрупп, карбоксилатных солей, гидрокси, защищенных гидрокси, солей гидроксильной группы,низших; алкокси, меркапто, низших алкилтио, алкилов, замещенных алкилов, циклоалкилов, замещенных циклоалкилов, (циклоалкил)алкилов, замещенных (циклоалкил)алкилов, фенилов, замещенных фенилов, фенилалкилов, и (замещенный фенил)алкилов. Заместители для гетероарильной группы являются такими, как определено до этого, или в случае тригалогенметила могут представлять собой трифторметил, трихлорметил, трибромметил или трииодметил. Как использовано в сочетании с вышеуказанными заместителями для гетероарильных колец, низший алкокси означает C1-C4 алкоксигруппу, аналогично,низший алкилтио означает C1-C4 алкилтиогруппу. Термин (монозамещенный) амино относится к аминогруппе, содержащей один заместитель, выбранный из группы, включающей фенил, замещенный фенил, алкил, замещенный алкил, C1-C4 ацил, С 2 С 7 алкенил, С 2-С 7 замещенный алкенил, С 2-С 7 алкинил, С 7-С 16 алкиларил, C7-C16 замещенный алкиларил и гетероарильную группу. (Монозамещенный) амино может дополнительно содержать амино-защитную группу, как что охватывается термином защищенный (монозамещенный)амино. Термин (дизамещенный) амино относится к аминогруппам с двумя заместителями, выбранными из группы, включающей фенил, замещенный фенил, алкил, замещенный алкил, C1-C7 ацил, С 2-С 7 алкенил, С 2-С 7 алкинил, С 7 С 16 алкиларил, С 7-С 16 замещенный алкиларил и гетероарил. Два заместителя могут быть одинаковыми или разными. Термин гетероарил(алкил) означает алкильную группу, как определено выше, замещенную в любом положении гетероарильной группой, как определено выше. Термин необязательный или необязательно означает, что описанные впоследствии событие,обстоятельство, отличительная особенность или элемент могут, но не обязательно должны существовать,и что описание включает случаи, где событие или обстоятельство происходят, и случаи, где они не происходят. Например, выражение гетероциклическая группа, необязательно моно- или дизамещенная алкильной группой означает, что алкил может, но не должен присутствовать, и в описании встречаются ситуации, где гетероциклическая группы является моно- или дизамещенной алкильной группой и ситуации, где гетероциклическая группа не является замещенной алкильной группой. Термин электроноакцепторная группа относится к способности функциональной группы молекулы оттягивать электроны в свою сторону в большей степени, чем атом водорода, если бы атом водорода занимал тоже самое положение в молекуле. Примеры электроноакцепторных групп включают, но не ограничиваются указанным, группы галогена, группы -C(O)R (где R представляет собой алкил); группы карбоновой кислоты и сложного эфира карбоновой кислоты; группы -NR3+ (где R представляет собой алкил или водород); азо; нитро; группы -OR и -SR (где R представляет собой водород или алкил); и органические группы (как определено в данном описании), содержащие такие электроноакцепторные группы, такие как галогеналкильные группы (включая пергалогеналкильные группы) и тому подобные. Соединения, которые имеют одну и ту же молекулярную формулу, но различаются по природе и последовательности связывания или расположения атомов в пространстве, определяют термином изомеры. Изомеры, которые различаются взаимным расположением атомов в пространстве, называют термином стереоизомеры. Стереоизомеры, которые не являются зеркальным отображением друг друга,определяют как диастереомеры, а те, которые являются несовместимыми при наложении зеркальными изображениями друг друга, определяют как энантиомеры. Когда соединение имеет асимметрический центр, например, связанный с четырьмя различными группами, возможносуществование пары энантиомеров. Энантиомер может быть охарактеризован абсолютной конфигурацией его асимметрического центра и описывается на основании R- и S-правил последовательности Кана и Прелога, или он может быть охарактеризован способом, в котором молекулы вращают плоскость поляризованного света и определен как правовращающий или левовращающий (т.е. как (+) или (-) изомеры, соответственно). Хиральное соединение может существовать или в виде индивидуального энантиомера, или в виде их смесей. Смесь,содержащую равное соотношение энантиомеров, называют рацемической смесью. Соединения по данному изобретению могут иметь один или несколько асимметрических центров; следовательно, такие соединения могут быть получены в виде индивидуальных (R)- или (S)стереоизомеров или в виде их смеси. Если не указано другого, предполагается, что описание или название конкретного соединения в описании и формуле изобретения включает оба индивидуальных энантиомера и их смеси, рацемические или другие. Способы определения стереохимии и разделения стерео-9 011074 изомеров хорошо известны в данной области (см., например, описание в части 4 "Advanced OrganicChemistry", 4-е издание, J. March, John Wiley и Sons, New York, 1992). Общий обзор Изобретение относится к гидразидсодержащим соединениям, полученным на их основе композициям и способам их применения для ингибирования с высокой степенью аффинности кистозно-фиброзного белка, регулирующего трансмембранную проводимость (CFTR), и для исследования и лечения CFTRопосредованных заболеваний и состояний. Открытие рассматриваемых гидразидсодержащих соединений и их производных является результатом скрининга многочисленных потенциальных соединенийкандидатов с использованием анализа, разработанного для идентификации ингибиторов CFTR, которые непосредственно взаимодействуют с CFTR. He ограничиваясь какой-либо конкретной теорией и способом действия, поскольку такие множественные активаторы CFTR, которые работают на различных путях активации, были включены в исследования, которые привели к выявлению рассматриваемых соединений, ингибирующие соединения по изобретению, вероятно, вызывают ингибирование путем воздействия на CFTRCl- транспортный путь или поблизости от него. Скрининг 100000 различных соединений выявил несколько соединений и производных в качестве эффективных ингибиторов CFTR (фиг. 1B). Данные соединения и производные не являются химически и структурно родственными ранее известным активаторам CFTR или ранее известным ингибиторам CFTR, таким как DPC, NPPB глибенкламид или тиазолидинон. Наиболее эффективный ингибитор CFTR, установленный при скрининге, имел Ki2 мкМ для ингибирования потока Cl- в клетках дыхательных путей человека. Ингибирование было быстрым, обратимым и специфическим в отношении CFTR. Композиции и способы по изобретению далее будут описаны более подробно. Гидразидсодержащие соединения. Описанные здесь гидразидсодержащие соединения включают замещенный ароматическим или гетероароматическим фрагментом азот, гидразид (который может представлять собой гидразид глицина или оксаминовый гидразид) и замещенную или незамещенную арильную группу. В конкретных вариантах осуществления соединения, являющиеся предметом изобретения, как правило, описываются следующей формулой (I): где X независимо выбран из алкильной группы или карбонильной группы; Y независимо выбран из алкильной группы; алкильной группы, имеющей полярные заместители, такие как сульфогруппа или карбонильная группа, или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, таких как полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), дисахариды, замещенная или незамещенная фенильная группа, полиалкилимины, дендримеры 0-10 поколения и тому подобные, где Y может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы); R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как замещенная или незамещенная хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы; или их фармацевтически приемлемое производное в виде индивидуального стереоизомера или их смеси. В одном варианте осуществленияR1 выбран из замещенной фенильной группы, незамещенной хинолинильной группы, незамещенной антраценильной группы, и незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. Иллюстративные заместители для R1, R2 и R3 далее описаны более подробно. В некоторых вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения, как правило, описываются формулой (I), где X представляет собой алкильную группу. Такие соединения в общем описываются следующей формулой (Ia): где Y представляет собой водород или алкильную группу, такую как замещенная или незамещен- 10011074 ная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до С 8),включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2 этилгексил; X1 независимо выбран из водорода и алкильной группы, такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до С 8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил,2-этилгексил; или алкильной группы, включающей полярную молекулу, выбранную из сульфогруппы,карбоксильной группы, карбоксамидной группы, полиоксиалкилового простого полиэфира, дисахарида,замещенной или незамещенной фенильной группы или полиэтиленимина (PEI), или дендримера 0-10 поколения; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В некоторых вариантах осуществления, когда X1 представляет собой водород, R1 представляет собой замещенную или незамещенную антраценильную группу, и гетероароматическую группу. В некоторых других вариантах осуществления, когда X1 представляет собой водород, Y не является водородом. В конкретных вариантах осуществления R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы,такой как 2-, 3- или 4-хлорфенил; моно-(алкил)фенила, такого как 2-, 3- или 4-метилфенил; нафталенильной группы, такой как 1- или 2-нафталенил; моно- или ди(галоген)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-,6-, 7- или 8-хлорнафталенил, 3,4- или 5,6-, или 5,7-, или 5,8-дихлорнафталенил; моно- или ди(гидрокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-гидроксинафталенил, 1,8-, 3,4 дигидроксинафталенил; моно- или ди, или три(алкокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8 метоксинафталенил,5,8-диметоксинафталенил,1,4,8-триметоксинафталенил; моноили ди(алкил)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5- или 6-метилнафталенил, 4,5-, 4,6-диметилнафталенил; моно(гидрокси)моно или ди(сульфо)нафталенила, такого как 4-гидрокси-2-сульфонафталенил, 8-гидрокси 3,6-дисульфонафталенил; моно(алкил)моно- или ди(алкокси)нафталенила, такого как 1-метил-5,6 диметоксинафталенил; или хинолинильной группы, такой как 6-хинолинил; R независимо выбран из группы, включающей замещенные фенильные группы, такие как моно(галоген)фенильная группа, такая как 2-, 3- или 4-бромфенил; моно- или ди(гидроксил)фенильная группа, такая как 2,3,4-гидроксифенил и 2,4-дигидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно-, ди-, или три(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром 2,4,6-тригидроксифенил, 3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4 гидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)моно-, или ди(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4-метоксифенил; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В следующих вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения и производные формулы(Ia) могут включать соединения, где Y представляет собой водород; X представляет собой водород, метильную или этильную группу; R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы, такой как 2-,3-, или 4-хлорфенильная группа, нафталенильной группы, такой как 2-нафталенил или 1-нафталенил; R2 независимо выбран из ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)фенильной группы, такой как 3,5-дибром-2,4 ди-гидроксифенильная группа, 3,5-дибром-4-гидроксифенильная группа; и R3 представляет собой водород или метильную группу. В других вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения, как правило, описываются формулой (I), где X представляет собой СН. Такие соединения в общем описываются следующей формулой (Ib): где Y представляет собой водород или алкильную группу, такую как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до C8),включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2 этилгексил; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой алкильную группу, такую как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь(например, от C1 до С 8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2-этилгексил; и R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фениль- 11011074 ной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В конкретных вариантах осуществления R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы,такой как 2-, 3- или 4- хлорфенил; моно(алкил)фенила, такого как 2-, 3- или 4-метилфенил; нафталенильной группы, такой как 1- или 2-нафталенил; моно- или ди(галоген)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-,6-, 7- или 8-хлорнафталенил, 3,4- или 5,6-, или 5,7-, или 5,8-дихлорнафталенил; моно- или ди(гидрокси) нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-гидроксинафталенил, 1,8-, 3,4-дигидроксинафталенил; моно- или ди, или три(алкокси) нафталенила, такого как 1-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8-метоксинафталенил, 5,8 диметоксинафталенил, 1,4,8-триметоксинафталенил; моно- или ди(алкил)нафталенила, такого как 1-, 3-,4-, 5- или 6-метилнафталенил, 4,5-, 4,6-диметилнафталенил; моно(гидрокси)моно или ди(сульфо)нафталенила,такого как 4-гидрокси-2-сульфонафталенил,8-гидрокси-3,6 дисульфонафталенил; моно(алкил)моно- или ди(алкокси)нафталенила, такого как 1-метил-5,6 диметоксинафталенил; или хинолинильной группы, такой как 6-хинолинил; R2 независимо выбран из группы, включающей замещенные фенильные группы, такие как моно(галоген)фенильная группа, такая как 2-, 3- или 4-бромфенил; моно или ди(гидроксил)фенильная группа, такая как 2,3,4-гидроксифенил и 2,4-дигидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно-, ди-, или три(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром 2,4,6-тригидроксифенил, 3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4 гидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)моно-, или ди(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4-метоксифенил; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. Соединения, описанные формулой (Ib), обычно описаны как гидразиды глицина. В следующих вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения и производные формулы(Ib) могут включать соединения, где Y представляет собой водород; R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы, такой как 2-, 3- или 4-хлорфенильная группа, нафталенильной группы, такой как 2-нафталенил или 1-нафталенил; R2 независимо выбран из ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)фенильной группы, такой как 3,5-дибром-2,4-дигидроксифенильная группа, 3,5-дибром-4 гидроксифенильная группа; и R3 представляет собой водород или метильную группу. Еще в некоторых других вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения, как правило,описываются формулой (I), где X представляет собой карбонил. Такие соединения в общем виде описываются следующей формулой (Ic): где Y представляет собой водород или алкильную группу, такую как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до С 8),включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, окстадецил, амил, 2 этилгексил; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой алкильную группу, такую как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь(например, от C1 до С 8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2-этилгексил; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа,замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В конкретных вариантах осуществленияR1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы, такой как 2-, 3- или 4-хлорфенил; моно(алкил)фенила, такого как 2-,3- или 4-метилфенил; нафталенильной группы, такой как 1- или 2-нафталенил; моно- или ди(галоген)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хлорнафталенил, 3,4- или 5,6-, или 5,7-, или 5,8-дихлорнафталенил; моно- или ди(гидрокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8 гидроксинафталенил, 1,8-, 3,4-дигидроксинафталенил; моно- или ди-, или три(алкокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8-метоксинафталенил, 5,8-диметоксинафталенил, 1,4,8- 12011074 триметоксинафталенил; моно- или ди(алкил)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5- или 6 метилнафталенил, 4,5-, 4,6-диметилнафталенил; моно(гидрокси)моно или ди(сульфо)нафталенила, такого как 4-гидрокси-2-сульфонафталенил, 8-гидрокси-3,6-дисульфонафталенил; моно(алкил)моно- или ди(алкокси)нафталенила, такого как 1-метил-5,6- диметоксинафталенил; или хинолинильной группы,такой как 6-хинолинил; R2 независимо выбран из группы, включающей замещенные фенильные группы такие как моно(галоген)фенильная группа, такая как 2-, 3- или 4-бромфенил; моно или ди(гидроксил)фенильная группа, такая как 2-, 3-, 4-гидроксифенили 2,4-дигидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно-, ди-, или три(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром-2,4,6-тригидроксифенил, 3,5 дибром-2,4-дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4-гидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)моно-, или ди(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4 метоксифенил; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. Соединения, описанные формулой (Ic), обычно описаны как гидразиды оксаминовой кислоты. В следующих вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения и производные формулы(Ic) могут включать соединения, где Y представляет собой водород; R1 представляет собой нафталенильную группу, такую как 2-нафталенил или 1-нафталенил; R2 представляет собой ди(галоген)-моно- или ди(гидроксил)фенильную группу, такую как 3,5-дибром-2,4-дигидроксифенильная группа, 3,5-дибром-4 гидроксифенильная группа; и R3 представляет собой водород или метильную группу. В некоторых вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения могут включать следующие формулы: Описанные здесь гидразидсодержащие соединения могут быть модифицированы, например, для обеспечения желательных характеристик. Предпочтительно, модификация соединений не оказывает существенного или нежелательного неблагоприятного влияния на желаемые характеристики гидразидсодержащих соединений, например, на способность ингибировать функцию CFTR и растворимость соединения в воде. Например, описанные здесь соединения могут быть модифицированы таким образом, чтобы снизить способность соединения проникать черех клеточную мембрану, например клеточную мембрану клеточной линии поверхности слизистой оболочки, например, клетки желудочно-кишечного тракта. Непроницаемость через мембрану для описанных здесь соединений может быть повышена путем,например, увеличения размера или других физических характеристик соединения. В таких вариантах осуществления проницаемость через мембрану соединений, описываемых в общем формулой I, понижают путем добавления полярных групп, таких как сульфо и алкилкарбоксильные группы. Такие соединения описываются в общем следующей формулой (I): где Y независимо выбран из алкильной группы; алкильной группы, имеющей полярные заместители, такие как сульфогруппа или карбонильная группа, или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, таких как полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), дисахариды, полиалкилимины и тому подобные, где Y может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы); X независимо выбран из алкильной группы или карбонильной группы; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В конкретных вариантах осуществления Y независимо выбран из замещенной или незамещенной алкильной группы, такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до C8), включая, например, метил, этил, изопропил,трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2-этилгексил; алкильная группа содержит полярные группы, такие как гидрокси, сульфо, карбоксилат, и замещенные и незамещенные карбоксамидные группы (где иллюстративные группы включают 3-сульфопропил, 4-сульфобутил, карбоксиметил, 2 карбоксипропил, 2-метокси-2-оксоэтил, 3-метокси-3-оксопропил); или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, таких как полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), полиэтиленимины, дисахариды, трисахариды, полиалкилимины, небольшие аминодекстраны и тому подобные, где Y может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы). В некоторых вариантах осуществления азот, участвующий в ненасыщенной амидной связи соединения, может быть замещен, как проиллюстрировано ниже где X независимо выбран из алкильной группы или карбонильной группы; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы; и Y' независимо выбран из замещенной или незамещенной алкильной группы; такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до C8),включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, октадецил, амил, 2 этилгексил; алкильной группы, содержащей полярные группы, такие как гидрокси, сульфо, карбоксилат,и замещенные и незамещенные карбоксамидные группы (где иллюстративные группы включают 3 сульфопропил, 4-сульфобутил, карбоксиметил, 2-карбоксипропил, 2-метокси-2-оксоэтил, 3-метокси-3 оксопропил); или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, таких как полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), полиэтиленимины, дисахариды, трисахариды, полиалкилимины, небольшие аминодекстраны и тому подобные, где Y' может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы). В некоторых вариантах осуществления X независимо выбран из карбонильной группы; алкильной группы, такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, от C1 до C8), включая, метилен, замещенных алкильных групп, таких как пропен; замещенных или незамещенных фенильных групп, таких как фенильная группа, содержащая полярные группы; или линкера, несущего полярные группы; R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы, такой как 2-, 3- или 4-хлорфенил; моно(алкил)фенила, такого как 2-, 3 или 4-метилфенил; нафталенильной группы, такой как 1- или 2-нафталенил; моно- или ди(галоген)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хлорнафталенил, 3,4- или 5,6-, или 5,7-, или- 16011074 5,8-дихлорнафталенил; моно- или ди(гидрокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8 гидроксинафталенил, 1,8-, 3,4-дигидроксинафталенил; моно- или ди-, или три(алкокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8-метоксинафталенил, 5,8-диметоксинафталенил, 1,4,8 триметоксинафталенил; моно- или ди(алкил)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5- или 6 метилнафталенил, 4,5-, 4,6-диметилнафталенил; моно(гидрокси)моно или ди(сульфо)нафталенила, такого как 4-гидрокси-2-сульфонафталенил, 8-гидрокси-3,6-дисульфонафталенил; моно(алкил)моно- или ди(алкокси)нафталенила, такого как 1-метил-5,6-диметоксинафталенил; или хинолинильной группы, такой как 6-хинолинил; R2 независимо выбран из группы, включающей замещенные фенильные группы,такие как моно(галоген)фенильная группа, такая как 2-, 3- или 4-бромфенил; моно или ди(гидроксил)фенильная группа, такая как 2, 3, 4-гидроксифенил и 2,4-дигидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно-, ди-, или три(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром-2,4,6-тригидроксифенил, 3,5 дибром-2,4-дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4-гидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)моно-, или ди(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4 метоксифенил; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы. В некоторых вариантах осуществления X в соединении может быть замещенным, как проиллюстрировано ниже где X представляет собой алкильную группу; R1 независимо выбран из замещенной или незамещенной фенильной группы, замещенной или незамещенной гетероароматической группы, такой как хинолинильная группа, замещенной или незамещенной антраценильной группы и замещенной или незамещенной нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную или незамещенную фенильную группу; R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы; и Y" независимо выбран из замещенной или незамещенной алкильной группы; такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, отC1 до C8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, окстадецил,амил, 2-этилгексил; алкильной группы, содержащей полярные группы, такие как гидрокси, сульфо, карбоксилат, и замещенные и незамещенные карбоксамидные группы (где иллюстративные группы включают 3-сульфопропил, 4-сульфобутил, карбоксиметил, 2-карбоксипропил, 2-метокси-2-оксоэтил, 3 метокси-3-оксопропил); или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, таких как замещенная или незамещенная фенильная группа, полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль(PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), полиэтиленимины, дисахариды, трисахариды, полиалкилимины, небольшие аминодекстраны, дендримеры 0-10 поколения и тому подобные,где Y" может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы). В некоторых вариантах осуществления X представляет собой замещенную алкильную группу, такую как метильная группа, содержащая полярные группы или линкер, связанный с полярными группами; R1 независимо выбран из моно(галоген)фенильной группы, такой как 2-, 3- или 4-хлорфенил; моно(алкил)фенила, такого как 2-,3- или 4-метилфенил; нафталенильной группы, такой как 1- или 2-нафталенил; моно- или ди(галоген)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хлорнафталенил, 3,4- или 5,6-, или 5,7-, или 5,8 дихлорнафталенил; моно- или ди(гидрокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8 гидроксинафталенил, 1,8-, 3,4-дигидроксинафталенил; моно- или ди-, или три(алкокси)нафталенила, такого как 1-, 3-, 5-, 6-, 7- или 8-метоксинафталенил, 5,8-диметоксинафталенил, 1,4,8-триметоксинафталенил; моно- или ди(алкил)нафталенила, такого как 1-, 3-, 4-, 5- или 6-метилнафталенил, 4,5-, 4,6-диметилнафталенил; моно(гидрокси)моно или ди(сульфо)нафталенила, такого как 4-гидрокси-2-сульфонафталенил, 8-гидрокси-3,6 дисульфонафталенил; моно(алкил)моно- или ди(алкокси)нафталенила, такого как 1-метил-5,6 диметоксинафталенил; или хинолинильной группы, такой как 6-хинолинил; R2 независимо выбран из группы, включающей замещенные фенильные группы такие как моно(галоген)фенильная группа, такая как 2-, 3- или 4-бромфенил; моно или ди(гидроксил)фенильная группа, такая как 2, 3, 4-гидроксифенил и 2,4-дигидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно-, ди-, или три(гидроксил)фенил, такой как 3,5-дибром 2,4,6-тригидроксифенил, 3,5-дибром-2,4-дигидроксифенил, 3,5-дибром-4-гидроксифенил и 3-бром-4 гидроксифенил; моно- или ди(галоген)моно- или ди(гидроксил)моно-, или ди(алкокси)фенил, такой как 3,5-дибром-2-гидрокси-4-метоксифенил; и R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы, иY" независимо выбран из алкильной группы; алкильной группы, содержащей полярные заместители,такие как сульфогруппа или карбокисльная группа; или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер,для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, полиоксиалкилового простого полиэфира (такого как полиэтиленгликоль(PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), дисахаридов, полиэтилениминов, замещенной или незамещенной фенильной группы, такой как 2,4-дигидрокси-3,5-дибромфенильная группа, 2,4-динатрийдисульфофенильная группа, и 3-мононатриймоносульфофенильная группа, где Y может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы). В некоторых вариантах осуществления гидразидсодержащее соединение может иметь следующую формулу: В следующих вариантах осуществления гидразидсодержащие соединения димеризованы с исполь- 19011074 зованием бифункционального линкера с варьируемой длиной цепи. Такие соединения не проникают через клетку вследствие большой, объемной природы и стерических затруднений. В конкретных вариантах осуществления соединения, являющиеся предметом изобретения, в общем виде описаны следующей формулой (Id): где Z представляет собой мономерное или полимерное звено, такое как полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин),линейный полиамин или бифункциональный полисахарид; и п находится в диапазоне от 0 до 500, от 1 до 450, от 2 до 400, от 5 до 300, от 10 до 250, от 20 до 200, от 30 до 150, от 40 до 100, от 50 до 90 и тому подобном. В некоторых вариантах осуществления n находится в диапазоне от 0 до 100, от 1 до 95, от 10 до 90, от 20 до 80, от 30 до 70, от 40 до 60, и тому подобном. В конкретных вариантах осуществления X независимо выбран из алкильной группы или карбонильной группы; Y независимо выбран из алкильной группы; алкильной группы, содержащей полярные заместители, такие как сульфогруппа или карбоксильная группа; или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, для обеспечения присоединения одной или нескольких больших полярных молекул, полиоксиалкилового простого полиэфира (такого как полиэтиленгликоль (PEG), полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин),дисахаридов, полиэтилениминов, и тому подобного, где Y может дополнительно включать присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы); R1 независимо выбран из замещенной фенильной группы, хинолинильной группы, антраценильной группы и нафталенильной группы; R2 представляет собой замещенную фенильную группу; R3 независимо выбран из водорода или алкильной группы; или их фармацевтически приемлемое производное, индивидуальный стереоизомер или их смесь. В следующих вариантах осуществления изобретения гидразидсодержащее соединение может иметь следующую формулу: Изобретение также относится к фармацевтическим препаратам, включающим рассматриваемые гидразидсодержащие соединения, описанные выше. Рассматриваемые соединения могут быть введены в состав различных композиций, предназначенных для введения различными путями. Более конкретно,соединения по настоящему изобретению могут быть введены в состав фармацевтической композиции путем объединения с подходящими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями, эксципиентами и/или адъювантами и могут быть введены в препараты, находящиеся в твердом, полутвердом,жидком или газообразном виде, такие как таблетки, капсулы, порошки, гранулы, мази, растворы, суппозитории, инъекционные препараты, ингаляторы и аэрозоли. Предпочтительно композиции не содержат ДМСО (диметилсульфоксид) в обнаруживаемом количестве и получены с использованием усилителя проницаемости, отличающегося от ДМСО. Препараты могут быть разработаны для введения субъектам или пациентам, нуждающимся в этом, с помощью ряда различных путей, которые могут быть парентеральными или энтеральными. Иллюстративные пути введения включают пероральный, буккальный, па- 20011074 рентеральный, внутрибрюшинный, внутрикожный, чрезкожный, внутритрахальный и т.д. пути введения. В фармацевтических дозированных формах рассматриваемые соединения по изобретению можно вводить в виде их фармацевтически приемлемых производных, таких как соль, или их также можно использовать сами по себе или в виде подходящей комбинации, а также комбинации с другими фармацевтически активными соединениями. Следующие способы и эксципиенты являются только иллюстративными и не предназначены для какого-либо ограничения. В одном варианте осуществления представляющего особый интерес соединения согласно изобретению вводят в желудочно-кишечный тракт субъекта таким образом, чтобы обеспечить пониженную секрецию жидкости. Подходящие композиции для данного варианта осуществления изобретения включают любую композицию, которая обеспечивает доставку соединения к поверхности желудочно-кишечного тракта, в частности к поверхности кишечника. Для пероральных композиций рассматриваемые соединения можно использовать сами по себе или в сочетании с подходящими вспомогательными добавками для получения таблеток, порошков, гранул или капсул, например, с использованием обычных вспомогательных добавок, таких как лактоза, маннит,кукурузный крахмал или картофельный крахмал; вместе со связующими веществами, такими как крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски, кристаллическая целлюлоза, производные целлюлозы и аравийская камедь; вместе с дезинтегрирующими веществами, такими как кукурузный крахмал, картофельный крахмал или карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, агар, бентонит или ксантановая камедь; вместе с лубрикантами, такими как тальк, олеат натрия, стеарат магния, стеарат натрия, бензоат натрия, ацетат натрия или хлорид натрия; и, при желании вместе с разбавителями, буферными агентами, увлажняющими агентами, консервантами, красителями и ароматизаторами. Особый интерес представляет композиция рассматриваемых гидразидсодержащих соединений с буферным агентом для обеспечения защиты соединения от низкого рН в желудочной среде. Также может оказаться предпочтительным обеспечение оболочки, растворяющейся в кишечном тракте. В одном варианте осуществления соединения вводят в состав препаратов для пероральной доставки вместе с ароматизатором,например, в виде жидкой, твердой или полутвердой композиции. Пероральные композиции могут быть обеспечены в виде желатиновых капсул, которые могут содержать активное вещество и порошкообразные носители, такие как лактоза, крахмал, производные целлюлозы, стеарат магния, стеариновая кислота и тому подобные. Аналогичные носители и разбавители можно использовать для получения таблеток, изготавливаемых методом прессования. Таблетки и капсулы могут быть получены в виде продуктов с замедленным высвобождением для обеспечения непрерывного высвобождения активных ингредиентов в течение некоторого промежутка времени. Таблетки, полученные прессованием, могут быть покрыты сахарной оболочкой или пленочным покрытием для маскирования какого-либо неприятного вкуса и защиты таблетки от действия атмосферы или покрыты растворяющейся в кишечном тракте оболочкой для селективного разрушения в желудочно-кишечном тракте. Жидкие дозированные формы для перорального введения могут содержать красители и/или ароматизаторы для увеличения одобрения пациентов. Другие подходящие пероральные композиции включают те, которые предназначены для замедленного высвобождения, которое может быть контролируемым высвобождением соединения. Такие композии включают гидрогели, микрочастицы и другие дозированные формы и композиции, известные в данной области. Воду, подходящее масло, физиологический раствор, водный раствор декстрозы и растворы родственных сахаров и гликолей, таких как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, можно использовать в качестве носителей для парентеральных растворов. Такие растворы также могут содержать растворимую в воде соль активного ингредиента, подходящие стабилизирующие агенты и, при необходимости, буферные вещества. Подходящие стабилизирующие агенты включают агенты-антиокислители, такие как бисульфат натрия, сульфит натрия или аскорбиновая кислота, или сами по себе или в виде комбинации,лимонная кислота и ее соли и натрий-ЭДТА (натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты). Парентеральные растворы также могут содержать консерванты, такие как хлорид бензалькония, метил- или пропилпарабены и хлорбутанол. Рассматриваемые соединения согласно изобретению могут быть введены в состав препаратов для инъекций путем растворения, суспендирования или эмульгирования их в водном или неводном растворителе, таком как растительное или другие аналогичные масла, синтетические глицериды алифатических кислот, сложные эфиры высших алифатических кислот или пропиленгликоль; и, при желании, вместе с обычными вспомогательными добавками, такими как солюбилизаторы, изотонические агенты, суспендирующие агенты, эмульгирующие агенты, стабилизаторы и консерванты. При желании, применяемые солюбилизаторы могут включать витамин Е TPGS (dтокоферилполиэтиленгликоль 1000 сукцинат),циклодекстрины и тому подобные. Кроме того, рассматриваемые соединениямогут быть введены в состав суппозиториев путем смешивания их с различными основами, такими как эмульгирующие основы или растворимые в воде осно- 21011074 вы. Соединения по настоящему изобретению можно вводить ректально с помощью суппозитория. Суппозиторий может включать носители, такие как масло какао, карбовоски и полиэтиленгликоли, которые плавятся при температуре тела, оставаясь твердыми при комнатной температуре. Единичные формы дозировки для перорального или ректального введения, такие как сиропы, эликсиры и суспензии, можно обеспечить в каждом случае с помощью единичной дозы, например, чайной ложки, столовой ложки, таблетки или суппозитория, содержащих определенное количество композиции,содержащей один или несколько ингибиторов. Аналогично, единичные формы дозировки для инъекции или внутривенного введения могут включать ингибитор(ы) в композиции в виде раствора в стерильной воде, обычном физиологическом растворе или другом фармацевтически приемлемом носителе. Соединения по изобретению можно использовать в виде аэрозольных препаратов для введения путем ингаляции. Соединения по настоящему изобретению могут быть введены в композиции вместе со способными находиться под давлением приемлемыми пропеллентами, такими как дихлордифторметан,пропан, азот и тому подобные. В одном варианте осуществления представляет интерес местное введение (например, чрескожное введение). Наружные композиции могут иметь вид чрезкожного пластыря, мази, пасты, лосьона, крема,геля и тому подобного. Наружные композиции могут включать один или несколько агентов проницаемости, загустителей, разбавителей, эмульгаторов, диспергирующих вспомогательных добавок или связующих веществ. Когда соединение вводят в состав композиции для чрезкожной доставки, соединение может быть введено в состав препарата вместе или для применения вместе с усилителем проницаемости. Усилители проницаемости, которые включают химические усилители проницаемости и физические усилители проницаемости, облегчают доставку соединения через кожу и могут также упоминаться взаимозаменяемо как усилители всасываемости. Физические усилители проницаемости включают, например,электрофоретические методы, такие как ионофорез, применение ультразвука (или фонофорез) и тому подобные. Химические усилители проницаемости представляют собой агенты, которые вводят или до,вместе или сразу же после введения соединения, что увеличивает проницаемость кожи, в частности stratum corneum (верхнего слоя) для обеспечения повышенной проницаемости лекарственного средства через кожу. Соединения, которые используют для повышения проницаемости через кожу, включают сульфоксиды, диметилсульфоксид (ДМСО) и децилметилсульфоксид (C10 MSO); простые эфиры, такие как моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, декаоксиэтилен-олеиловый простой эфир и монометиловый эфир диэтиленгликоля; поверхностно-активные вещества, такие как лаурат натрия, лаурилсульфат натрия,бромид цетилтриметиламмония, хлорид бензалькония, полоксамер (Poloxamer (231, 182, 184, Tween(20, 40, 60, 80) и лецитин; 1-замещенные азациклогептан-2-оны, в частности, 1-ндодециклазациклогептан-2-он; спирты, такие как этанол, пропанол, октанол, бензиловый спирт и тому подобные; вазелины, такие как вазелин (петролатум), минеральное масло (жидкий вазелин) и тому подобные; жирные кислоты, такие как С 8-С 22 и другие жирные кислоты (например, изостеариновая кислота, октановая кислота, олеиновая кислота, лауриновая кислота, валериановая кислота); С 8-С 22 жирные спирты (например, олеиловый спирт, лауриловый спирт); низшие алкиловые сложные эфиры С 8-С 22 жирных кислот и других жирных кислот (например этилолеат, изопропилмиристат, бутилстеарат, метиллаурат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, метилпропионат, этилолеат); моноглицериды С 8-С 22 жирных кислот (например, монолаурат глицерина); простой эфир полиэтиленгликоля и тетрагидрофурфурилового спирта; 2-(2-этоксиэтокси)этанол; монометиловый простой эфир диэтиленгликоля; алкилариловые простые эфиры полиэтиленоксида; монометиловые эфиры полиэтиленоксида; диметиловые простые эфиры полиэтиленоксида; ди-низшие алкиловые сложные эфиры C6-С 8 дикарбоновых кислот (например,диизопропиладипат); этилацетат; ацетоуксусный эфир; многоатомные спирты и их сложные эфиры, такие как пропиленгликоль, этиленгликоль, глицерин, бутандиол, полиэтиленгликоль и монолаурат полиэтиленгликоля; амиды и другие азотсодержащие соединения, такие как мочевины, диметилацетамид(ДМА), диметилформамид (ДМФ), 2-пирролидон, N-алкилпирролидон, например, 1-метил-2 пирролидон; этаноламин, диэтаноламин и триэтаноламин; терпены; алканоны и органические кислоты, в частности, салициловая кислота и салицилаты, лимонная кислота и янтарная кислота. Дополнительные химические и физические усилители проницаемости описаны, например, в Transdermal Delivery of Drugs,A. F. Kydonieus (ED) 1987 CRL Press; Percutaneous Penetration Enhancers, eds. Smith et al. (CRC Press,1995); Lenneruas et al., J. Pharm. Pharmacol. 2002; 54 (4): 499-508; Karande et al., Pharm. Res. 2002; 19 (5): 655-60; Vaddi et al., J. Pharm. Sci. 2002 July; 91 (7): 1639-51; Ventura et al., J. Drug Target 2001; 9 (5): 37993; Shokri et al., Int. J. Pharm 2001; 228 (1-2): 99-107; Suzuki et al., Biol. Pharm. Bull. 2001; 24 (6): 698-700;et al., Eur. J. Pharm. Sci. 2000; 10 (2): 97-102; и Tenjarla et al., Int. J. Pharm. 1999; 192 (2): 147-58. Когда соединения вводят в состав композиции вместе с химическим усилителем проницаемости,усилитель проницаемости выбирают таким образом, чтобы он был совместим с соединением, и он присутствует в количестве, достаточном для облегчения доставки соединения через кожу субъекта, например, для доставки соединения в систему кровообращения. В одном варианте осуществления соединение вводят в состав композиции вместе с усилителем проницаемости, не являющимся ДМСО.- 22011074 В одном варианте осуществления доставка соединения обеспечена в виде пластыря, например,чрезслизистого или чрезкожного пластыря, и в состав рецептуры может быть введен усилитель проницаемости. Пластырь обычно включает защитный слой, который является непроницаемым для соединения и других компонентов композиции, матрицу, контактирующую с одной стороной защитного слоя,где матрица обеспечивает замедленное высвобождение соединения, которое может быть контролируемым высвобождением, и клейкий слой, который находится на той же стороне защитного слоя, что и матрица. Матрица может быть выбрана так, чтобы она была подходящей для пути введения, и она может представлять собой, например, полимерную матрицу или матрицу на основе гидрогеля. В зависимости от субъекта и состояния, подвергаемого лечению, и пути введения, рассматриваемые соединения можно вводить в дозировке, например, от 0,1 мкг до 10 мг/кг веса тела в сутки. Диапазон является широким, поскольку обычно эффективность терапевтического действия для различных млекопитающих широко меняется и для человека дозировки обычно в 20, 30 или даже 40 раз меньше (на единицу веса тела), чем для крысы. Аналогично способ введения может оказывать большое влияние на дозировку. Типичная дозировка может представлять собой раствор, подходящий для внутривенной инъекции,таблетку, принимаемую от двух до шести раз в день или капсулу или таблетку замедленного высвобождения, принимаемую один раз в день и содержащую пропорционально более высокое содержание активного ингредиента и т.д. Эффект замедленного высвобождения может достигаться за счет использования материала капсулы, который растворяется при различных величинах рН, за счет капсул, содержимое которых медленно высвобождается под действием осмотического давления или с помощью любых других известных способов контролируемого высвобождения. Для применения в рассматриваемых способах обсуждаемые соединения могут быть введены в состав рецептур вместе с другими фармацевтически активными агентами, включая другие ингибирующиеCFTR агенты и агенты, которые блокируют хлоридные каналы кишечника. Фармацевтически приемлемые эксципиенты, используемые в данном изобретении, такие как средыносители, адьюванты, носители и разбавители, легко доступны для общества. Более того, легко доступны для общества фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, такие как агенты, регулирующие рН и буферные агенты, агенты, регулирующие изотоничность растворов, стабилизаторы, смачивающие агенты и тому подобные. Специалистам в данной области будет легко понять, что уровни дозировки могут изменяться как функция конкретного соединения, тяжести симптомов и подверженности субъекта побочным действиям. Предпочтительные дозировки для данного соединения легко могут быть определены специалистами в данной области с помощью множества способов. Разработаны наборы с единичными дозировками рассматриваемых соединений обычно в виде препаративных форм для перорального введения или инъекций. В такие наборы в дополнение к контейнерам, содержащим единичные дозировки, будут вкладываться информационные вкладыши с описанием применения и сопутствующих преимуществ лекарственных средств при лечении представляющего интерес патологического состояния. Предпочтительными соединениями и единичными дозировками являются те, которые описаны выше. Состояния, которые поддаются лечению с использованием ингибиторов CFTR по изобретению Раскрытые в данном описании ингибиторы CFTR можно использовать для лечения CFTRопосредованного состояния. Т.е. любого состояния, нарушения или заболевания или симптомов такого состояния, нарушения или заболевания, которые возникают за счет активности CFTR, например, активности CFTR при транспорте ионов. Такие состояния, нарушения, заболевания или их симптомы поддаются лечению путем ингибирования активности CFTR, например, ингибирования CFTR ионного транспорта. В одном варианте осуществления ингибиторы CFTR по изобретению используют для лечения состояний, связанных с аномально повышенной секрецией кишечника, в частности, с острой аномально повышенной секрецией кишечника. Активность CFTR вовлечена в секрецию кишечника в качестве ответной реакции на различные агонисты, включая холерный токсин (см., например, Snyder et al. 1982 Bull.World Health Organ. 60: 605-613; Chao et al. 1994 EMBO J. 13: 1065-1072; Kimberg et al. 1971 J Clin. Invest. 50: 1218-1230). Таким образом, ингибиторы CFTR по изобретению можно вводить в количестве, эффективном для ингибирования CFTR ионного транспорта, и таким образом уменьшать выделение жидкости из кишечника. В таких вариантах осуществления ингибиторы CFTR в соответствии с изобретением обычно вводят через слизистую поверхность желудочно-кишечного тракта (например, посредством энтерального пути, например, перорально, внутрикишечно, ректально и тому подобными способами) или через слизистую поверхность ротовой или носовой полостей (например, внутриназально, буккально,сублингвально и тому подобными способами). В некоторых вариантах осуществления особый интерес представляет введение ингибитора CFTR по изобретению, который является относительно непроницаемым через мембрану (например, обладает пониженными характеристиками проницаемости через мембрану, например, вследствие модификации путем введения фрагментов PEG (РЕСилирования) и тому- 23011074 подобного, как описано выше). Таким образом, ингибиторы CFTR можно использовать для лечения воспалительных заболеваний кишечника и диареи, в частности секреторной диареи. Секреторная диарея является основной причиной детской смертности в развивающихся странах, насчитывая примерно 5 миллионов смертей ежегодно(Gabriel et al., 1994 Science 266: 107-109). В нескольких исследованиях, включая исследования с использованием CF мышей, показано, что CFTR представляет собой обычный конечный путь для выделения кишечного хлорид-иона (и таким образом жидкости) в качестве ответной реакции на различные агонисты (Snyder et al., 1982, Bull. World Health Organ. 60: 605-613; Chao et al., 1994 EMBO. J. 13: 1065-1072; иKimberg et al., 1971, Clin. Invest. 50: 1218-1230). Диарея, которая поддается лечению с использованием ингибиторов CFTR по данному изобретению,может быть результатом воздействия различных патогенов и агентов, включая, но не ограничиваясь указанным, холерный токсин (Vibrio cholera), E. coli (в частности энтеротоксигенный (ЕТЕС, Shigella, Salmonella, Campylobacter, Clostridium difficile, паразитов (например, Giardia, Entamoeba histolytica, Cryptosporidiosis, Cyclospora), диарейных вирусов (например, ротавирусов), пищевого отравления или действия токсина, возникающего при повышенной кишечной секреции, опосредованной CFTR. Другие виды диареи включают диарею, связанную со СПИДом (например, СПИД-связанная диарея), диареи, вызванные лекарственными средствами против СПИДа, такими как ингибиторы протеазы, и воспалительными желудочно-кишечными нарушениями, такими как язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника(IBD), болезнь Крона и тому подобные. Сообщалось, что кишечные воспаления модулируют экспрессию трех основных медиаторов транспорта солей кишечника и могут вносить свой вклад в диарею при язвенном колите как посредством повышения трансэпителиальной секреции Cll-, так и путем ингибирования эпителиальной абсорбции NaCl (см., например, Lohi et al., 2002, Am. J Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 283 (3): G567-75). Ингибиторы CFTR по изобретению также можно использовать при лечении таких состояний, как поликистозное заболевание почек, и, кроме того, их можно использовать в качестве лекарственных средств при мужском бесплодии, оказывают действие путем ингибирования активности CFTR в яичках. Скрининг ингибиторов CFTR по изобретению может быть в дальнейшем проведен на моделях крупных животных (например, модели кролика, описанной в публикации Spira et al., 1981, Infect. Immun. 32: 739-747). Кроме того, анализ выходящих испражнений с использованием живого вибриона Vibriocholerae также можно исследовать для того, чтобы дополнительно охарактеризовать ингибиторы CFTR по изобретению. Модели животных, не являющихся человеком, и модели тканей человека CFTR-недостаточности Ингибиторы CFTR по изобретению также можно использовать для создания моделей заболеваний на животных, не являющихся человеком, где заболевание связано с пониженной функцией CFTR (например, сниженный транспорт ионов). Имеются растущие подтверждения тому, что недостаточная секреция жидкости и макромолекул подслизистыми железами дыхательных путей приводит к ослабленному мукоцилиарному и бактериальному клиренсу у субъектов с CFTR недостаточностью, в частности у тех,кто поражен кистозным фиброзом (CF); однако функциональные исследования на железах дыхательных путей человека были ограничены тяжелыми заболеваниями дыхательных путей, полученными во время трансплантации легкого (Jayaraman et al. 2001 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98: 8119-8123). Острое ингибирование CFTR дает возможность определения роли CFTR в секреции воды, соли и макромолекул подслизистыми железами. Высокая аффинность ингибиторов CFTR дает возможность фармакологического создания моделей животных, не являющихся человеком, которые имитируют CFTR-недостаточность у людей (например, имитируют CF фенотип человека). В частности, модели крупных животных CFTRнедостаточности (например, CF) находят особое применение для оценки эффективности терапии CF,например, для скрининга агентов-кандидатов для лечения CFTR-недостаточности и ее симптомов. Ингибирование ионного транспорта посредством CFTR может проявляться в виде заболеваний дыхательных путей и поджелудочной железы, а также в виде бесплодия у особей мужского пола. Например,ингибирование CFTR каналов в легких и дыхательных путях оказывает влияние на поверхностную жидкость дыхательных путей, приводя к накоплению слизи, которая в свою очередь закупоривает дыхательные пути и собирается в виде массы на стенках легких, обеспечивая первичную окружающую среду для возникновения инфекции, что, в свою очередь, может привести к хроническому воспалению легких. Такое же явление существует и в поджелудочной железе, где накапливаемая слизь разрушает экзокринную функцию поджелудочной железы и не дает возможности незаменимым ферментам, перерабатывающим пищу, попадать в кишечник. Такие модели животных, не являющихся человеком, можно генерировать путем введения ингибитора CFTR в количестве, эффективном для снижения активности CFTR в транспорте ионов. Особый интерес привлекает применение ингибиторов CFTR по изобретению для индуцирования кистозно-фиброзного (CF) фенотипа у животного, не являющегося человеком. Введение количества ингибитора CFTR, эффективного для ингибирования CFTR, например, в легком, эффективно имитирует дефицит CFTR, выявленный при CF. Пути доставки ингибитора CFTR подробно обсуждаются выше в данном описании. В зависимости от используемого животного, не являющегося человеком, рассматри- 24011074 ваемое соединение можно вводить в дозах, например, от 50 до 500 мкг/кг веса тела от одного до трех раз в день путем внутрибрюшинного, подкожного или другого пути введения для образования модели животного, не являющегося человеком. Дозировки при пероральном введении могут составлять до десятикратной дозы, используемой при внутрибрюшинном или подкожном введении. Животные модели CFTR-связанного заболевания на животных, не являющихся человеком, можно использовать в качестве моделей любого подходящего состояния, связанного с пониженной активностьюCFTR. Такие состояния включают те, которые связаны с мутациями CFTR, где указанные мутации приводят к аномалиям в эпителиальном транспорте ионов и воды. Данные аномалии в свою очередь могут быть связаны с нарушениями в мукоцилиарном клиренсе дыхательных путей, а также другого слизистого эпителия и эпителия протоков. Состояния, которые можно фармакологически моделировать путем индуцирования CFTR-дефицитного фенотипа у животного, не являющегося человеком, включают, но не ограничиваются указанным, кистозный фиброз (включая атипичный CF), идиопатический хронический панкреатит, дефекты семенных протоков, слабое заболевание легких, астму и тому подобные. Для обзора заболеваний, связанных с нарушенной функцией CFTR, см., например, Noone et al. Respir Res 2328-332(2001). Образованные с помощью ингибитора CFTR модели животных, не являющихся человеком, также могут служить моделями микробной инфекции (например, бактериальной, вирусной или грибковой инфекции, в частности респираторных инфекций) у CFTR-дефицитных субъектов. В одном варианте осуществления, представляющем особый интерес, ингибиторы CFTR по изобретению используют для фармакологического индуцирования кистозно-фиброзного фенотипа. Животные, подходящие для применения с целью получения животных моделей по изобретению,включают любое животное, в частности млекопитающее, например, приматов, не являющихся людьми(например, обезьяна, шимпанзе, горилла и тому подобные), грызунов (например, крысы, мыши, песчанки, хомяки, хорьки, тому подобные), представителей отряда зайцеобразных, представителей семейства свиньих (например, свинья, миниатюрная свинья), лошадей, представителей семейства псовых, представителей семейства кошачьих, и тому подобных. Особый интерес представляют крупные животные. Ингибиторы CFTR также могут быть приведены в контакт с выделенной тканью человека для создания моделей заболевания ех vivo. Такие ткани приводят в контакт с количеством ингибитора CFTR,эффективным для уменьшения активности CFTR в ткани, для чего может потребоваться как минимум 15 мин или такое время как два часа или более. Представляющие интерес ткани человека включают, но не ограничиваются указанным, легкое (включая трахею и дыхательные пути), печень, поджелудочную желеу, яички и тому подобные. На обработанных ингибитором тканях можно проводить физиологические,биохимические, геномные и другие исследования для идентификации новых терапевтическких целевых молекул, которые являются важными в патофизиологии заболевания. Например, выделенные ткани людей без CF могут быть подвергнуты действию ингибитора, достаточного для индуцирования CFфенотипа, и такие исследования могут быть проведены для идентификации новых терапевтических целевых молекул, которые являются важными в патофизиологии CF. Синтез соединений согласно изобретению Соединения согласно изобретению могут быть получены способами, известными специалистам в данной области, или способами, аналогичными описанным далее. Следует понимать, что следующее описание, комбинации заместителей и/или переменных в указанных формулах допустимо только в том случае, когда их введение приводит к стабильным соединениям. Специалистам в данной области также следует понимать, что в описанном ниже способе может оказаться необходимой защита подходящими защитными группами для функциональных групп промежуточных соединений. Такие функциональные группы включают гидрокси, амино, меркапто группы и группу карбоновой кислоты. Подходящие защитные группы для гидроксигруппы включают триалкилсилил или диарилалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил, бензил и тому подобные. Подходящие защитные группы для амино, амидино и гуанидино групп включают трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил и тому подобные. Подходящие защитные группы для меркаптогруппы включают -C(O)-R (где R представляет собой алкил,арил или аралкил), р-метоксибензил, тритил и тому подобные. Подходящие защитные группы для группы карбоновой кислоты включают алкиловые, ариловые или аралкиловые сложные эфиры. Защитные группы могут быть введены или удалены в соответствии со стандартными способами,которые хорошо известны специалистам в данной области и как указано в данном описании. Применение защитных групп подробно описано в монографии Theodora W. Greene, Peter Г. М.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (1999), 3rd Ed., Wiley-Interscience. Защитные группы также могут представлять собой полимерную смолу, такую как смола Ванга или смола на основе 2 хлортритилхлорида. Специалистам в данной области также будет понятно, что хотя такие защищенные производные соединений формулы (I), как описано выше (например, в разделе Общий обзор и разделе Гидразидсодержащие соединения и производные), могут не обладать сами по себе фармакологической активностью, их можно вводить млекопитающим, после чего они будут метаболизировать в организме с образо- 25011074 ванием соединений по изобретению, которые являются фармакологически активными. Такие производные следовательно могут быть описаны как пролекарства. Все пролекарства соединений формулы (I) включены в объем настоящего изобретения. Следующие реакционные схемы иллюстрируют способы получения соединений по изобретению. Понятно, что специалист в данной области способен получить соединения по изобретению аналогичными способами или способами, известными специалистам в данной области. Как правило, исходные соединения могут быть получены из таких источников как Aldrich, или синтезированы в соответствии с литературными данными известными обычным специалистам в данной области (см., например, Smith иMarch, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th издание (Wiley Interscience, New York. Кроме того, различные группы заместителей (например, R1, R2, R3 и X, и т.д.) для соединений по изобретению могут быть присоединены к исходным компонентам, промежуточным компонентам и/или конечным продуктам в соответствии со способами, известными специалистам в данной области. Следующая реакционная схема 1 относится к получению соединений формулы (1), которые представляют собой соединения согласно изобретению, как описано выше (например, в разделах Общий обзор или Гидразидсодержащие соединения и производные), где R1, R2 и R3 являются такими, как описано выше (например, в разделах Общий обзор или Гидразидсодержащие соединения и производные). Реакционная схема 1. Обычно соединения формулы (I) получают, объединяя первоначально содержащий группу R1 терминальный амин, имеющий группу Y, с диэтилоксалатом или соединением, содержащим X, таким как Хзамещенный этилиодацетат, где X является таким, как описано выше, используя по 10 ммоль каждого соединения. Полученную реакционную смесь затем перемешивают в течение ночи при повышенной температуре. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы (А). Раствор соединения формулы (А) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 12 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, составляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток реагента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (В). Соединение формулы (В) затем объединяют с соединением с карбонильной группой (например, кетон или альдегид), содержащим группы R2, R3, в этаноле и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (I). Альтернативно, соединения формулы (I), где и X представляет собой алкильную группу, содержащую X1, где X1 представляет собой алкильную группу, такую как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (соединения формулы Ia), могут быть получены в соответствии со следующей реакционной схемой 2, где R1, R2 и R3 являются такими,как описано выше (например, в разделах Общий обзор или Гидразидсодержащие соединения и производные). Обычно, соединения формулы (Ia) получают, объединяя первоначально содержащий группу R1 терминальный амин, имеющий группу Y, и этилиодацетат, содержащий группу Х 1, где X1 является таким,как описано выше, используя по 10 ммоль каждого из них, с 20 ммоль ацетата натрия. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы (С). Раствор соединения формулы (С) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 12 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, составляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток реагента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (D). Соединение формулы (D) затем объединяют с соединением, имеющим карбонильную группу (например, кетон или альдегид), содержащим группы R2, R3, в этаноле и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (Ia). Следующая реакционная схема 3 предназначены для получения соединений формулы (Ib), где X представляет собой СН 2, которые представляют собой соединения согласно изобретению, как описано выше (например, в разделах Общий обзор или Гидразидсодержащие соединения и производные),где R1, R2 и R3 являются такими, как описано выше (например, в разделах Общий обзор или Гидразидсодержащие соединения и производные). Реакционная схема 3. Обычно, соединения формулы (Ib) получают, объединяя первоначально содержащий группу R1 терминальный амин и этилиодацетат, используя по 10 ммоль каждого из них, с 20 ммоль ацетата натрия. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы (Е). Раствор соединения формулы (Е) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 12 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, составляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток реагента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из спирта, получая соединение формулы (F). Соединение формулы (F) затем объединяют в этаноле с соединением, имеющим карбонильную группу(например, кетон или альдегид), содержащим группы R2, R3, и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (Ib). Альтернативно, соединения формулы (I), где X представляет собой карбонильную группу (соединения формулы Ic) могут быть получены в соответствии со следующей реакционной схемой 4, где R1, R2 и R3 являются такими, как описано выше в разделе Общий обзор. Обычно соединения формулы (Ib) получают, объединяя первоначально в толуоле содержащий группу R1 терминальный амин, имеющий группу Y, и диэтилоксалат, используя по 10 ммоль каждого из них. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы (G). Раствор соединения формулы(G) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 12 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, составляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток реагента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы(Н). Соединение формулы (Н) затем объединяют в этаноле с соединением, имеющим карбонильную группу (например, кетон или альдегид), содержащим группы R2, R3, и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (Ic). Альтернативно, соединения формулы (I), где X представляет собой алкильную группу, содержащую Y" (соединения формулы Ie)может быть получено в соответствии со следующими реакционными схемами 5-8, где R1, R2 и R3 являются такими, как описано выше (например, в разделе Общий обзор и разделе Гидразидсодержащие соединения и производные), и где Y" независимо выбирают из замещенной или незамещенной алкильной группы, такой как замещенная или незамещенная, насыщенная линейная или разветвленная углеводородная группа или цепь (например, C1-С 8), включая, например, метил, этил, изопропил, трет-бутил, гептил, н-октил, додецил, окстадецил, амил, 2-этилгексил; алкильной группы, содержащей полярные группы, такие как гидрокси, сульфо, карбоксилат и замещенные или незамещенные карбоксамидные группы (где иллюстративные группы включают такие, как 3 сульфопропил, 4-сульфобутил, карбоксиметил, 2-карбоксипропил, 2-метокси-2-оксоэтил, 3-метокси-3 оксопропил); или линкера, такого как амидная связь или простой эфирный линкер, чтобы обеспечить присоединение одной или нескольких больших полярных молекул, таких как замещенная или незамещенная фенильная группа, полиоксиалкиловый простой полиэфир (такой как полиэтиленгликоль (PEG),полипропиленгликоль, полигидроксиэтиловый глицерин), полиэтиленимины, дисахариды, трисахариды,полиалкилимины, небольшие аминодекстраны и тому подобные, где Y" может дополнительно включать такую(ие) присоединенную(ые) полярную(ые) молекулу(ы). Реакционная схема 5.- 28011074 Обычно, в некоторых вариантах осуществления соединения формулы (Ie) получают, объединяя первоначально содержащий группу R1 терминальный амин, имеющий группу Y, и диэтилброммалонат, используя по 10 ммоль каждого из них. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 8 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы(I). Раствор соединения формулы (I) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 2 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, оставляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток агента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (J). Соединение формулы (J) затем объединяют в этаноле с соединением, имеющим карбонильную группу, содержащим группы R2, R3, и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (К). Соединение формулы (К) затем объединяют с соединением с замещенной или незамещенной фенильной группой, как более подробно описано выше (например, в разделе Общий обзор и разделе Гидразидсодержащие соединения и производные), и нагревают с обратным холодильником в течение некоторого промежутка времени. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (L). Реакционная схема 6. Обычно, в некоторых вариантах осуществления соединения формулы (Ie) получают, объединяя первоначально содержащий группу R1 терминальный амин, имеющий группу Y, и диэтилброммалонат, используя по 10 ммоль каждого из них. Полученную реакционную смесь затем перемешивают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 8 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана, получая соединение формулы(I). Раствор соединения формулы (I) в этаноле затем нагревают при кипении с обратным холодильником с 12 ммоль гидразингидрата в течение промежутка времени, составляющего примерно 10 ч. Растворитель и избыток реагента затем отгоняют в вакууме. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (J). Соединение формулы (J) затем объединяют в этаноле с соединением,имеющим карбонильную группу, содержащим группы R2, R3, и затем нагревают при кипении с обратным холодильником в течение промежутка времени, составляющего примерно 3 ч, получая целевой продукт формулы (K). Соединение формулы (K) затем объединяют с соединением с замещенной тиоцианатом фенильной группой, как более подробно описано выше (например, в разделе Общий обзор и разделе Гидразидсодержащие соединения и производные), и нагревают с обратным холодильником в течение некоторого промежутка времени. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (М). Обычно, в некоторых вариантах осуществления соединения формулы (Ie) получают, объединяя первоначально соединение с тиоцианатсодержащей фенильной группой с амино-PEG в ДМФ и нагревают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 24 ч. ДМФ затем упаривают в вакууме, и остаток растворяют в минимальном количестве EtOAc и добавляют к перемешиваемому раствору Et2O. Полученный осадок затем отфильтровывают и промывают Et2O, получая содержащее PEG соединение. Содержащее PEG соединение затем объединяют с соединением формулы(K) и нагревают в течение некоторого промежутка времени. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (N). Реакционная схема 8. Обычно в некоторых вариантах осуществления соединения формулы (Ie) получают, объединяя первоначально соединение с тиоцианатсодержащей фенильной группой с амино-PEG в ДМФ и нагревают при повышенной температуре в течение промежутка времени, составляющего примерно 24 ч. ДМФ затем упаривают в вакууме, и остаток растворяют в минимальном количестве EtOAc и добавляют к перемешиваемому раствору Et2O. Полученный осадок затем отфильтровывают и промывают Et2O, получая содержащее PEG соединение. Содержащее PEG соединение затем объединяют с соединением формулы(К) и нагревают в течение некоторого промежутка времени. Продукт затем перекристаллизовывают из этанола, получая соединение формулы (О).