Энтеральные соли кетокислот и аминокислот

007010 Настоящее изобретение относится к устойчивым к желудочному соку солям кетокислот и аминокислот и их применению в получении фармацевтических композиций для лечения плохо питающихся субъектов или тех, кто находится в состоянии гиперкатаболизма, а также лечения патологических состояний, вовлекающих молчащие нейроны, таких как описаны в патенте WO 99/47134. В патенте WO 99/47134 описано, что соли кетокислот и аминокислот являются активными в модели растяжения ободочной кишки, предварительно раздраженной 1%-ной уксусной кислотой у крысы в дозировке 1 мг/кг. Соединения в этом испытании вводили перорально, растворенными в воде. Диорнитина -кетоглутарат также применяют в терапевтическом лечении под название CETORNAN (патент Франции 3533 М) для улучшения белкового обмена у плохо питающихся субъектов. Он также известен как гормональный стимулятор (гормон роста и инсулин) и стимулятор роста клеток. Дозировка, в которой применяют это соединение, является, в частности, завышенной, так как в обычной врачебной практике его вводят перорально 2 раза в сутки 5-граммовыми дозами, растворенными в стакане воды, и при больничном лечении 2 раза в сутки 10-граммовыми дозами, путем перорального и энтерального введения. Недостатком высокой дозировки соединения данного типа является то, что его высокая осмолярность вызывает диарею (Prof. L.CYNOBER, Dr. P. CRENN, prof. В. MESSINE., La Revue duPraticien, no. 50, 2000, pp. 1593-1599). Другим недостатком этого продукта является то, что в растворе он имеет плохой вкус. Настоящее изобретение возникло в результате совершенно неожиданного открытия авторами данного изобретения, что указанные выше соли кетокислот и аминокислот являются активными только в такой модели растяжения ободочной кишки и в модели питания, где рН является нейтральным. Те же самые соли в большинстве случаев неактивны при испытаниях с рН 1, независимо от испытываемой дозы. В качестве иллюстрации в табл. 1 ниже ясно показано, что диорнитина -кетоглутарат активен в дозе 1, 10 и 20 мг/кг перорально при рН 6 и совершенно неактивен при рН 1 (табл. 1(1,моноорнитина -кетоглутарат активен при рН 6 и неактивен при рН 1 (табл. 1(2,аргинина -кетобутират активен при рН 6 и неактивен при рН 1 (табл. 1(3. В табл. 2 ниже показано, что смесь составляющих - -кетоглутаровой кислоты и орнитина - при рН 1, затем доведенная до рН 6, является неактивной (табл. 2(1. Аналогично, диорнитина -кетоглутарат, растворенный при рН 1, обеспечивающем полную диссоциацию соли, затем доведенный до рН 6, является неактивным. Однажды диссоциировав, диорнитина кетоглутарат не восстанавливается. Только составляющие, совместно образовавшие соль, являются активными (табл. 2(2. В табл. 6 показано, что диорнитина -кетоглутарат, испытанный с дозами 1 и 3 мг/кг в модели питания, является активным при рН 6 и неактивным при рН 1 (смотри также фиг. 3). Таким образом, всякий раз когда соль кетокислот и аминопроизводных вводят перорально, она проходит через пустой желудок, где рН составляет приблизительно 1. Следовательно, соль диссоциирует на неактивные компоненты, и дозировку необходимо увеличивать так, чтобы часть недиссоциировавшего продукта прошла через желудочный барьер и достигла мишени данного лекарственного средства. В отношении влияния рН очень показательной является табл. 5. Таким образом можно заметить,что при интрадуоденальном введении (нейтральное рН), которое позволяет избежать кислотности желудочного сока, диорнитина а-кетоглутарат активен начиная от дозы 0,1 мг/кг, что представляет собой дозу в 10 раз меньшую минимальной вводимой перорально активной дозы (табл. 5(2) и фиг. 2). Настоящее изобретение относится к композициям, устойчивым к желудочному соку, содержащим соединения следующей общей формулы (I):(I) где Х и Z представляют собой одинаковые или разные аминокислоты, природные или неприродные,Y является неразветвленной линейной кетокислотой,n1 и n2, независимо друг от друга, представляют собой 0 и 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1, причем указанное соединение находится в форме соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z. Указанные выше соединения в указанных выше композициях стабильны в нейтральной среде и при рН ниже 6. Преимущественно соединения в указанных выше композициях являются стабильными до рН приблизительно 1. Очевидно, что указанные выше соединения формулы (I) появляются, главным образом, в результате образования ионных связей, и никогда в результате образования ковалентных связей, между разными составляющими X, Y или Z. Следовательно, не имеет существенного значения порядок, в котором разные составляющие появляются в формуле (I), и следует понимать, что эта формула (I) включает в себя соединения формулы (X)n1, Y,(Z)n2, а также соединения формулы (Z)n2,Y,(X)n1, (X)n1,(Z)n2,Y; (Z)n2,(X)n1,Y;-1 007010 Устойчивость к кислой среде позволяет сохранять активность при пероральном введении. В качестве примера в табл. 3 ясно показано, что устойчивая к желудочному соку форма диорнитина кетоглутарата активна в дозе 1 мг/кг. Эта активность эквивалента дозировке 0,1 мг/кг при интрадуоденальном введении, и значительно выше активности неустойчивых к желудочному соку микрогранул или солей, вводимых в растворе. В табл. 6 показано преимущество устойчивой к желудочному соку формы,так как в модели висцеральной боли она активна в дозе от 0,25 мг/кг. Табл. 7 завершает иллюстрацию влияния рН. В ней показана активность диорнитина кетоглутарата в устойчивой к желудочном соке композиции по сравнению с неустойчивой к желудочному соку композиции в изучении биоэквивалентности с дозой 1,2 мг/кг в модели питания (также смотри фиг. 4). Второе преимущество настоящего изобретения относится к уменьшению диареи, вызываемой соединениями, благодаря устойчивости к желудочному соку, уменьшенной дозе и, следовательно, уменьшенной осмолярности. В табл. 8 показано, что устойчивая к желудочному соку композиция по сравнению с неустойчивой к желудочному соку композицией диорнитина -кетоглутарата приводит к значительному уменьшению диареи в модели питания. Другое преимущество заключается в маскировке плохого вкуса путем нанесения оболочки на композицию. Преимущественно устойчивые к желудочному соку композиции по изобретению таковы, что образующие соли соединения, содержащиеся в этих композициях, не диссоциируют на продукты диссоциации в желудке, или диссоциируют на продукты диссоциации с долей менее чем приблизительно 20% и предпочтительно менее чем приблизительно 10%, или даже менее 20% при рН 1. В более частном случае указанные выше соединения устойчивых к желудочному соку композиций по изобретению не расщепляются на продукты диссоциации при рН от приблизительно 7 до приблизительно 1. Указанные выше продукты диссоциации относятся к молекулам, остающимся после разрыва одной или более чем одной связи в указанных выше соединениях, а именно к: продуктам, соответствующим, с одной стороны, соли, образованной кетокислотой Y и только одной из двух аминокислот Х и Z, и, с другой стороны, другой аминокислотой Х или Z, которая не включена в указанную выше соль,или продуктам, соответствующим, с одной стороны, кетокислоте Y, и, с другой стороны, аминокислотам Х и/или Z, которые не включены в соль с Y. В качестве примера, продукты диссоциации диорнитина -кетоглутарата представляют собой орнитина -кетоглутарат и/или -кетоглутаровую кислоту и орнитин. Настоящее изобретение в более частном случае относится к устойчивым к желудочному соку композициям, таким как описанные выше, включающим в себя соединения общей формулы (I), гдеn1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1,Х представляет собой природную аминокислоту, при условии что, когда n2=0, Х представляет собой основную аминокислоту, такую как орнитин,аргинин,лизин или гистидин,Y представляет собой кетокислоту следующей формулы (II):(II) где R представляет собой алкил или линейную алкановую кислотную группу, имеющую от приблизительно 1 до приблизительно 10 атомов углерода, в частности кетокислоту формулы (II), где, когда R представляет собой-СН 3, указанная кетокислота представляет собой пировиноградную кислоту,-СН 2-СН 3, указанная кетокислота представляет собой -кетомасляную кислоту,-(СН 2)2-СООН, указанная кетокислота представляет собой -кетоглутаровую кислоту,-(СН 2)3-СООН, указанная кетокислота представляет собой -кетоадипиновую кислоту,Z представляет собой природную аминокислоту, в частности аминокислоту, выбранную из орнитина, аргинина, лизина, гистидина, пролина или глутамина. Данное изобретение в более частном случае относится к устойчивым к желудочному соку композициям, содержащим соединения формулы (I), такие как определены выше, где Y представляет собой кетокислоту, выбранную из -кетоглутаровой кислоты или -кетомасляной кислоты. Данное изобретение в более частном случае относится к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, отличающимся тем, что соединения выбирают из соединений формулы (I), где:n1=1, и n2=0 или 1,-2 007010 Х представляет собой аминокислоту, выбранную из орнитина, лизина или аргинина,Y представляет собой кетокислоту, выбранную из -кетоглутаровой кислоты или -кетомасляной кислоты,и, когда n2=1, Z представляет собой природную аминокислоту, в частности орнитин, аргинин, пролин или глутамин. Данное изобретение в более частном случае относится к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, отличающимся тем, что соединения выбирают из соединений формулы (I), гдеn1=1 и n2=0,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту, то есть моноорнитина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть моноорнитина -кетобутирата,Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть аргинина-кетобутирата,Х представляет собой лизин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть лизина кетобутирата,Х представляет собой гистидин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть гистидина-кетобутирата. Данное изобретение относится в еще более частном случае к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, отличающимся тем, что соединения выбирают из соединений формулы (I),гдеn1=1 и n2=1,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой орнитин, то есть диорнитина -кетоглутарата,Х представляет собой аргинин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой аргинин, то есть диаргинина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой глутамин, то есть орнитина и глутамина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой пролин, то есть орнитина и пролина -кетоглутарата. Предпочтительно, соединение формулы (I), входящее в указанные выше устойчивые к желудочному соку композиции, представляет собой диорнитина -кетоглутарат. Данное изобретение также относится к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, которые содержат, в качестве предпочтительных соединений формулы (I), соединения, выбранные из группы, состоящей из аргинина -кетобутирата, лизина -кетобутирата, гистидина -кетобутирата. Настоящее изобретение в более частном случае относится к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, содержащим соединения формулы (I), гдеn1=0 или 1, и n2=1,где n1=1, Х представляет собой природную аминокислоту, такую как орнитин или аргинин,Y представляет собой кетокислоту, выбранную из -кетоглутаровой кислоты или -кетомасляной кислоты. Предпочтительно, такие соединения, как описаны выше, находятся в форме солей между двумя составляющими Х и Y, Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z. Массовая доля разных составляющих X, Y и/или Z предпочтительно находится между 0,8 и 1,2, так что сумма долей каждого составляющего равна 2 в соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z,или равна 3 в соли между тремя составляющими X, Y и Z. Предпочтительно указанная выше доля разных компонентов находится между 0,9 до 1,1. Особенно предпочтительными являются соединения, в которых разные составляющие Х и Y, или Y и Z, или X, Y и Z находятся в эквимолярном соотношении, то есть каждый из составляющих находится в массовой доле 1, так что сумма долей каждого составляющего равна 2 в соли между двумя составляющими X и Y, или Y и Z, или равна 3 в соли между тремя составляющими X, Y и Z. Данное изобретение также относится к указанным выше устойчивым к желудочному соку композициям, отличающимся тем, что физиологически стабильную устойчивую к желудочному соку основу выбирают из устойчивых к желудочному соку галеновых форм, выбранных, в качестве примера, из следующих: устойчивых к желудочному соку микрогранул, и в более частном случае тех, которые выбраны среди нейтральных носителей на основе сахарозы и кукурузного крахмала или других,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку микрогранул, и в более частном случае тех,которые выбраны среди охарактеризованных выше микрогранул, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента,-3 007010 устойчивых к желудочному соку наночастиц, и в более частном случае тех, которые выбраны среди капсул, образованных полимеризованным материалом, способным удерживать активные ингредиенты путем депонирования или адсорбции, размером в интервале от 50 до 300 нм, или устойчивых к желудочному соку наносфер, и в более частном случае тех, которые выбраны из указанных выше наночастиц сферической формы,устойчивых к желудочному соку микросфер, и в более частном случае тех, которые выбраны среди цельных и сферических твердых продуктов,устойчивых к желудочному соку микрокапсул, и в более частном случае тех, которые выбраны среди твердых продуктов, образованных оболочкой, которая сама по себе является твердым материалом,содержащим жидкое, твердое или тестообразное вещество,устойчивых к желудочному соку сфероидов и шариков из цельных твердых продуктов с наличием или без наличия эксципиентов,устойчивых к желудочному соку гранул, и в более частном случае тех, которые выбраны среди твердых продуктов, полученных, например, с использованием сахарозы и/или лактозы,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку сфероидов и шариков из твердых цельных продуктов с наличием или без наличия эксципиентов, полученных путем экструзии и/или сферонизации,например на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку гранул, и в более частном случае тех, которые выбраны среди охарактеризованных выше гранул, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки,устойчивых к желудочному соку липосом, и в более частном случае тех, которые выбраны среди сферических везикул с водяной полостью в центре и оболочкой, образованной слоями на основе фосфолипидов, размер которых предпочтительно составляет 1 мкм и менее,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку липосом, и в более частном случае тех, которые выбраны среди охарактеризованных выше липосом, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки,устойчивых к желудочному соку форм Lyoc (формы, полученные путем сублимационной сушки,или быстро растворимые во рту формы), и в более частном случае тех, которые выбраны среди продуктов, полученных путем лиофилизации дисперсий везикул размером 1 мкм или менее,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку форм Lyoc, и в более частном случае тех, которые выбраны среди охарактеризованных выше форм Lyoc, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки,осмотических насосов с устойчивым к желудочному соку покрытием, и в более частном случае тех,которые выбраны среди традиционных покрытых оболочкой таблеток, образованных осмотически действующим ядром, полупроницаемой мембраной и калиброванным отверстием в мембране,камедей, таких как камедь стеркулии, адрагантовая, ксантановая, аравийская ,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку таблеток из цельных твердых продуктов с эксципиентом или без него, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку капсул из цельных твердых продуктов с эксципиентом или без него, на которые напылен раствор пленкообразующего и/или пластифицирующего агента и другого эксципиента, сохраняющего качество пленки. Преимущественно, указанные выше композиции могут находиться в форме устойчивых к желудочному соку таблеток, капсул, саше или гранул, таких как описаны выше, или в других подходящих формах или упаковке. Такие разные формы можно получить способами, описанными в "Coated Pharmaceutical Dosage"Pharmacotechnic Industrielle" Yves Rossetto. Данное изобретение, в более частном случае, относится к применению питательного адъюванта, отличающегося тем, что, если необходимо, он содержит устойчивую к желудочному соку композицию,такую как описана выше, при необходимости объединенную с подходящей пищевой основой. Преимущественно, указанные выше питательные адъюванты находятся в форме, которую можно разбавить или диспергировать в водном растворителе. Предпочтительно, указанные выше адъюванты находятся в однодозовой форме, содержащей от приблизительно 10 или 25 мг до приблизительно 20 или 50 г по меньшей мере одного соединения формулы (I), как определено выше. Данное изобретение в более частном случае относится к применению питательного адъюванта, как определено выше, для лечения субъектов в условиях плохого питания, в частности плохо питающихся субъектов,субъектов, страдающих анорексией,пациентов с парезом желудка,-4 007010 субъектов с медленным прохождением содержимого через желудок,субъектов, страдающих нарушением всасывания в пищеварительном тракте,субъектов, подвергающихся диализу,пациентов с болезнью Альцгеймера,лиц в состоянии гиперкатаболизма, например лиц с дыхательной недостаточностью,лиц, страдающих от пролежней,ожоговых пациентов,раковых пациентов,пациентов со СПИДом,пациентов после операции,лиц, у которых проводится заживление слизистой оболочки кишечника,лиц, страдающих от множественных травм,пациентов с сердечной недостаточностью, или для заживления и для стимуляции гормона роста или инсулина. Данное изобретение в более частном случае относится к применению питательного адъюванта, как определено выше, в суточной дозе от приблизительно 50 мг до приблизительно 40 г. Данное изобретение также относится к любой фармацевтической композиции, отличающейся тем,что она содержит устойчивую к желудочному соку композицию, как определено выше, если необходимо объединенную с фармацевтически приемлемой основой. Преимущественно указанные выше композиции находятся в форме, которую можно вводить перорально или энтерально, в частности в сухой форме для разбавления или диспергирования в водном растворителе, если она находится в форме, вводимой перорально. В зависимости от пациента, и вида, и тяжести заболевания, которое лечат, стандартная доза лекарственного средства может изменяться от приблизительно 10 мг до приблизительно 40 г активного ингредиента. Предпочтительно, указанные выше фармацевтические композиции можно вводить перорально и энтерально, в единых дозах от 25 мг до 10 г активного ингредиента на дозу (соединение формулы (I, и предпочтительно от 100 мг до 5 г, по 1 или 2 дозы в сутки. Данное изобретение также относится к применению устойчивых к желудочному соку композиций,таких как определены выше, для приготовления лекарства, предназначенного для лечения указанных выше плохо питающихся субъектов или животных. Данное изобретение также относится к применению устойчивой к желудочному соку композиции,такой как определена выше, для приготовления лекарства, предназначенного для лечения указанных выше состояний плохого питания, или патологий людей и животных, вовлекающих молчащие нейроны,таких как патологии пищеварительного тракта, мочевого пузыря или желчных путей, и в более частном случае симптоматического лечения болей, связанных с этими патологиями, таких как боли, возникающие из-за нарушений прохождения кишечника или кишечных недомоганий, происходящих от нарушений функции кишечника (диспепсия, синдром раздраженного кишечника, раздраженной ободочной кишки ),желчных путей,геморрагического проктоколита,болезни Крона,язв желудка и двенадцатиперстной кишки,хронического гастрита,рака прямой кишки или желудка,гастроэнтерита и желудочного гриппа,ложной непроходимости кишечника или колики,радиационного илеита,операции на пищеварительный тракт или внутренние органы,диареи, спазмов, запора, расширения ободочной кишки, расширения прямой кишки,спазмов мочевого пузыря,пареза мочевого пузыря. Данное изобретение в более частном случае относится к указанному выше применению устойчивых к желудочному соку композиций, как определено выше, для получения лекарства, которое можно вводить в суточной дозе по активному ингредиенту в пределах от приблизительно 1 мг/кг/сутки до 1 г/кг/сутки, предпочтительно от 20 до 200 мг/кг/сутки путем перорального или энтерального введения. Данное изобретение также относится к применению устойчивых к желудочному соку композиций,содержащих по меньшей мере одно соединение следующей общей формулы (Iбис):(Iбис),где Х и Z представляют собой одинаковые или разные аминокислоты, природные или неприродные,Y представляет собой разветвленную кетокислоту,-5 007010n1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1, причем указанное соединение находится в форме соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z,для получения питательного адъюванта, или лекарства, предназначенного для лечения состояний плохого питания, или патологий человека или животных, вовлекающих молчащие нейроны. В более частном случае данное изобретение относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис) для получения питательного адъюванта или лекарства, предназначенного для лечения состояний плохого питания, в частности указанных выше субъектов, или для восстановления и стимуляции гормона роста или инсулина. Данное изобретение также относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис) для получения лекарства, предназначенного для симптоматического лечения болей, связанных с патологиями, вовлекающими молчащие нейроны. Данное изобретение в более частном случае относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис) для получения лекарства, предназначенного для симптоматического лечения болей, связанных с патологиями пищеварительного тракта, мочевого пузыря и желчных путей. Данное изобретение в более частном случае относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис) для получения лекарства, предназначенного для симптоматического лечения болей, таких как перечисленные выше. Данное изобретение в более частном случае относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис), гдеn1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1,Х представляет собой природную аминокислоту, при условии что, когда n2=0, Х представляет собой основную аминокислоту, такую как орнитин,аргинин,лизин,или гистидин,Y представляет собой кетокислоту следующей формулы (II):(II) где R представляет собой алкильную группу или разветвленную алкановую кислоту, содержащую от приблизительно 1 до приблизительно 10 атомов углерода, в частности кетокислоту формулы (II), где-СН(СН 3)2, указанная кетокислота является -кетоизовалерьяновой кислотой,-СН(СН 3)-СН 2-СН 3, указанная кетокислота является -кетометилвалерьяновой кислотой,-СН 2-СН(СН 3)2, указанная кетокислота является -кетоизокапроновой кислотой. Данное изобретение в более частном случае относится к применению указанных выше устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение общей формулы (Iбис),где Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетоизокапроновую кислоту, то есть аргинина -кетоизокапроат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетоизокапроновую кислоту, то есть орнитина -кетоизокапроат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетометилвалериановую кислоту, то есть орнитина -кетометилвалерат, или Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетометилвалериановую кислоту, то есть аргинина -кетометилвалерат,Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кето-изовалериановую кислоту, то есть аргинина -кето-изовалерат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кето-изовалериановую кислоту, то есть орнитина -кето-изовалерат. Данное изобретение далее проиллюстрировано следующим подробным описанием получения устойчивых к желудочному соку композиций по изобретению и их анальгетических свойств, оцениваемых на модели растяжения ободочной кишки, а также их свойств как питательных адъювантов, оцениваемых на модели гиперкатаболизма белка.I. Способ получения. 1. Используемое оборудование. Кипящий воздушный слой Aeromatic типа STREA 1. Перистальтический насос типа Bioblock . Автоклав Mernmert. Форсунка с отверстием 0,8 мм. 2. Используемые материалы. 3. Изготовление препарата. Водный раствор (92,4 мл), содержащий диорнитина -кетоглутарат (4,80 г) и PVP К-30 (2,89 г) напыляли в течение приблизительно 113 мин на микрогранулы (300,1 г), предварительно нагретые в течение 10 мин при температуре от приблизительно 30 до 35 С, со скоростью потока 1 мл/мин при давлении 1 бар (105 Па). Аэрацию доводили сначала до 4, затем увеличивали до 5, температура на входе составляла 43 С, и температура на выходе составляла 37 С, получали 303,37 г микрогранул. 4. Нанесение оболочки. Нанесение оболочки осуществляли в 3 этапа. а) Первый этап. Водный раствор (115 мл), содержащий 268,6 г Eudragit и 8 г триэтилцитрата наносили на 200 г предварительно полученных микрогранул в течение 189 мин со скоростью потока 1,6 мл/мин, при давлении 1,1 бар (1,1 х 105 Па). Начальную аэрацию устанавливали на 4,5, затем увеличивали до 5, при температуре на входе 35 С, и температуре на выходе 30 С. Получали 220 г микрогранул. б) Вторая фаза. Водный раствор (247,8 мл), содержащий 462,9 г Eudragit и 14,5 г триэтилцитрата наносили на 200 г микрогранул, полученных на первом этапе в течение 168 мин при скорости потока между 1,8 и 2,6 мл/мин, при давлении 0,8 бар (0,8 х 105 Па). Аэрацию устанавливали на 3,5 при температуре на входе 36 С и температуре на выходе 28 С. Получали 236 г микрогранул. в) Третья фаза. Водный раствор, аналогичный использованному во второй фазе, напыляли на 200 г микрогранул,полученных во второй фазе, в течение 148 мин в тех же условиях, что и выше, но при скорости потока 2,6 мл/мин. Получали 238 г покрытых оболочкой микрогранул, каждая из которых содержала 6,4 мкг диорнитина -кетоглутарата, 3,86 мкг PVP, 469,81 мкг Eudragit и 48,62 мкг триэтилцитрата.II. Фармакология. Растяжение ободочной кишки. Анальгетическое действие изучали на модели боли пищеварительного тракта у бодрствующих крыс. Боль провоцировали растяжением ободочной кишки, используя баллон. Протокол. Использовали самцов крыс линии Sprague-Dawley массой приблизительно 180 г, которых держали без еды с предыдущего дня. Под легкой анестезией флюотаном вводили ректальный зонд на 5 см от ануса и впрыскивали 1,5 мл 1%-ной уксусной кислоты. Через 1 ч 30 мин после раздражения в ободочную кишку на месте раздражения вводили латексный баллон (диаметром 2 мм, 1 см длиной в ненаполненном состоянии), закрепленный на полиэтиленовом катетере. Продукт, который следовало испытывать, или основу (дистиллированную воду) вводили перорально в объеме 1 мл, и крысу помещали под наблюдение в кристаллизатор. Растяжение ободочной кишки осуществляли через 2 ч 30 мин после раздражения. Его осуществляли фиксированным объемом 1,5 мл. Растяжение ободочной кишки вызывало боль в пищеварительном тракте, выраженную в виде спазмов в животе, число которых отражало интенсивность боли. Растяжение ободочной кишки сохраняли в течение 10 мин, во время которых подсчитывали спазмы в животе. Статистический анализ осуществляли, используя критерий Дуннетта, при котором сравнивают одну контрольную группу животных, получавших основу (40), с несколькими группами крыс (6 на группу),которые получали рассматриваемые лекарственные средства. Порог значимости ограничивают 5%.-7 007010 Данные молекулы испытывают путем перорального введения с дозой 1-10-20 мг/кг, их растворяют в дистиллированной воде, или в сухой форме в устойчивой к желудочному соку композиции по сравнению с неустойчивой к желудочному соку композицией. Основу, используемую в качестве плацебо, получают из дистиллированной воды. Результаты - табл. 1, 2, 3, 4 и 5 и фиг. 1-2. Таблица 1(1) Модель висцеральной боли у крысы Действия диорнитина -кетоглутарата в дозах 1, 10 и 20 мг/кг перорально, испытанные при рН 6 и рН 1 р 0,05 по сравнению с основой Таблица 1(2) Модель висцеральной боли у крысы Действия моноорнитина -кетоглутарата в дозировке 10 мг/кг перорально, испытанные при рН 6 и рН 1 р 0,05 по сравнению с основой Таблица 1(3) Модель висцеральной боли у крысы Действия аргинина -кетоглутарата в дозировке 10 мг/кг перорально, испытанные при рН 6 и рН 1 р 0,05 по сравнению с основой Таблица 2(1) Модель висцеральной боли у крысы Действия смеси -кетоглутаровая кислота-орнитин (соотношение 1:2) в дозировках 1-10 и 20 мг/кг перорально, подкисленной до рН 1, затем нейтрализованной до рН 6-8 007010 Таблица 2(2) Модель висцеральной боли у крысы Действия диорнитина -кетоглутарата, испытанного при пероральном введении в дозировках 1-10 и 20 мг/кг перорально, подкисленного до рН 1, затем нейтрализованного до рН 6 Таблица 3 Модель висцеральной боли у крысы Действия диорнитина -кетоглутарата в дозировке 1 мг/кг перорально,вводимого в устойчивых к желудочному соку микрогранулах р 0,05 по сравнению с основой Таблица 4 Действие устойчивых к желудочному соку микрогранул диорнитина -кетоглутарата в разных дозировках, вводимых перорально р 0,05 по сравнению с основой Таблица 5(1) Модель висцеральной боли у крысы Действия диорнитина -кетоглутарата, испытанного при пероральном введении в дозировках 0,1-1-10 и 20 мг/кг перорально-9 007010 Таблица 5(2) Модель висцеральной боли у крысы Действия диорнитина -кетоглутарата, испытанного при дуоденальном введении р 0,05 по сравнению с основой Гиперкатаболизм белка, изменения массы и побочные действия. Раздражение ободочной кишки 4%-ной уксусной кислотой вызывает у крысы потерю массы от приблизительно 10 до 15%. Этот химический стресс создает хорошую модель гиперкатаболизма для определения питательных действий изучаемых лекарственных средств. Протокол. Изменения массы записывали в течение 12-суточного периода у самок крыс Уистара, ободочную кишку которых раздражали 4%-ной уксусной кислотой. Самок крыс Уистара (Wistar) около 250 г, некормленных в течение 48 ч, подвергали анестезии галотаном. Ободочную кишку раздражали разведенной уксусной кислотой (1,5 мл 4%-ного раствора, вводимого ректально, 5 см от края ануса). При пробуждении животных, которых помещали по 5 особей на клетку, кормили и поили водой по их желанию. Через 2 суток животных разделяли на 3 группы из крыс одинаковой массы (крыс с потерей массы менее 5 г или более 30 г исключали из исследования). Испытываемое лекарственное средство или основу (дистиллированную воду) вводили перорально 2 раза в сутки, между 8:00 и 10:00 до полудня и между 3:00 и 4:00 после полудня. Изменения массы записывали в течение 12 суток, массы животных измеряли в граммах, используя весы. Статистический анализ выполняли, используя критерий Дуннетта (Dunnett), при котором сравнивают одну группу крыс (50), которым вводили основу, с несколькими группами крыс (количество меняется от 9 до 19, в зависимости от группы), получавшими одно из испытываемых лекарственных средств. Порог значимости устанавливали 5%. Статистический анализ побочного действия в виде диареи, осуществляли, используя 2 критерий,при котором сравнивают группу крыс, получивших устойчивую к желудочному соку композицию с группой, получивших неустойчивую к желудочному соку композицию, на основе критерия диарея/отсутствие диареи. Порог значимости устанавливали 1%. Лекарственные средства испытывали при помощи перорального введения: в растворе при контролируемом рН с дозировкой 1 и 3 мг/кг перорально; продукты растворяли в дистиллированной воде, для растворов с рН 6, и в присутствии 1 н. соляной кислоты для растворов с рН 1. Для контроля за рН использовали рН-метр. Дистиллированную воду использовали в качестве плацебоосновы. в сухой форме в устойчивой к желудочному соку композиции по сравнению с неустойчивой к желудочному соку, в дозировке 1,2 мг/кг перорально. Результаты. Изучение в растворе. В группе крыс, получавших основу, исходная масса на 1 сутки составляла 20411 г. Крысы достигали 24820 г на 12 сутки (N=50). На 12 сутки масса крыс была значительно (р 0,05) выше в группах,получавших диорнитина -кетоглутарат в дозировке 1 и 3 мг/кг перорально при рН 6. Результаты: табл. 6 и фиг. 3.- 10007010 Таблица 6 Модель плохого питания крысы Изменения массы (г) крысы Действия диорнитина -кетоглутарата рН 6 по сравнению с рН 1,испытанного в дозировках 1 и 3 мг/кг перорально Средняя масса выражена в граммахстандартное отклонение (SD). р 0,05 по сравнению с основой Изучение сухой формы. В группе крыс, получавших неустойчивую к желудочному соку композицию, исходная масса на 1 сутки составляла 1977 г. Крысы достигали 23028 г на 12 сутки (N=10). В группе крыс, которых лечили устойчивой к желудочному соку композицией, масса животных была значительно выше, как например на 5 сутки (р 0,05). Результаты описаны в табл. 7 и на фиг. 4. Побочное действие в виде диареи было значительно снижено в группе, которую лечили устойчивой к желудочному соку формой, по сравнению с группой, которую лечили неустойчивой к желудочному соку формой, с риском =1% (результаты в табл. 8). Таблица 7 Модель плохого питания крысы Изменения массы (г) крыс Действия устойчивой к желудочному соку композиции диорнитина -кетоглутарата по сравнению с неустойчивой к желудочному соку композицией Испытаны в дозировке 1,2 мг/кг перорально Средняя масса выражена в граммахстандартное отклонение (SD). р 0,05 по сравнению с основой- 11007010 Таблица 8 Модель плохого питания у крыс (побочное действие в виде диареи) р 0,01 Описание графических материалов Фиг. 1: влияние устойчивых к желудочному соку микрогранул, содержащих диорнитина кетоглутарат, на количество сокращений в животе. Фиг. 2: влияние диорнитина -кетоглутарата на количество сокращений в животе. Фиг. 3: влияние диорнитина -кетоглутарата в растворе на изменения массы крысы. Фиг. 4: влияние диорнитина -кетоглутарата в устойчивой к желудочному соку композиции на изменения массы крысы. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Устойчивая к желудочному соку композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение следующей общей формулы (I):(X)n1,Y,(Z)n2,(I),где Х и Z представляют собой одинаковые или разные аминокислоты, природные или неприродные,Y является неразветвленной линейной кетокислотой,n1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1, причем указанное соединение находится в форме соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z, причем указанное соединение помещено в физиологически стабильную, устойчивую к желудочному соку основу, высвобождающую это соединение в кишечнике. 2. Устойчивая к желудочному соку композиция по п.1, отличающаяся тем, что указанное соединение в композиции стабильно в нейтральной среде и при рН ниже 6, до рН приблизительно 1. 3. Устойчивая к желудочному соку композиция по п.1 или 2, содержащая по меньшей мере одно соединение общей формулы (I),где n1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1,Х представляет собой природную аминокислоту, при условии что, когда n2=0, тогда Х представляет собой основную аминокислоту, такую как орнитин,аргинин,лизин или гистидин,Y представляет собой кетокислоту следующей формулы (II):R-CO-COOH,(II),где R представляет собой алкил или линейную алкановую кислотную группу с приблизительно от 1 до приблизительно 10 атомами углерода, в частности кетокислоту формулы (II), где, когда R представляет собой-СН 3, указанная кетокислота представляет собой пировиноградную кислоту,-СН 2-СН 3, указанная кетокислота представляет собой -кетомасляную кислоту,-(СН 2)2-СООН, указанная кетокислота представляет собой -кетоглутаровую кислоту,-(СН 2)3-СООН, указанная кетокислота представляет собой -кетоадипиновую кислоту,Z представляет собой природную аминокислоту, в частности аминокислоту, выбранную из орнитина, аргинина, лизина, гистидина, пролина или глутамина. 4. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-3, отличающаяся тем, что она содержит по меньшей мере одно соединение, выбранное из соединений формулы (I),где n1=1 и n2=0 или 1,Х представляет собой аминокислоту, выбранную из орнитина, лизина или аргинина,Y представляет собой кетокислоту, выбранную из -кетоглутаровой кислоты или -кетомасляной кислоты,и, когда n2=1, Z представляет собой природную аминокислоту, в частности орнитин, аргинин, пролин или глутамин.- 12007010 5. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-4, отличающаяся тем, что соединения выбирают из соединений формулы (I),где n1=1 и n2=0,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту, то есть моноорнитина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть моноорнитина -кетобутирата,Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть аргинина-кетобутирата,Х представляет собой лизин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть лизина кетобутирата,Х представляет собой гистидин и Y представляет собой -кетомасляную кислоту, то есть гистидина-кетобутирата. 6. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-4, отличающаяся тем, что соединения выбирают из соединений формулы (I),где n1=1 и n2=1,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой орнитин, то есть диорнитина -кетоглутарата,Х представляет собой аргинин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой аргинин, то есть диаргинина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой глутамин, то есть орнитина и глутамина -кетоглутарата,Х представляет собой орнитин, Y представляет собой -кетоглутаровую кислоту и Z представляет собой пролин, то есть орнитина и пролина -кетоглутарата. 7. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-4, отличающаяся тем, что соединение представляет собой диорнитина -кетоглутарат. 8. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-7, отличающаяся тем, что соединения формулы (I) являются такими, что массовая доля разных составляющих, X, Y и/или Z, предпочтительно находится между 0,8 и 1,2, так что сумма долей каждого составляющего равна 2 в соли между двумя составляющими, или равна 3 в соли между тремя составляющими. 9. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-8, отличающаяся тем, что соединения формулы (I) являются такими, что разные составляющие X и Y, или Y и Z, или X, Y и Z находятся в эквимолярном соотношении, то есть каждый из составляющих находится в массовой доле 1, таким образом, что сумма долей каждого составляющего равна 2 в соли между двумя составляющими Х и Y, илиY и Z, или равна 3 в соли между тремя составляющими X, Y и Z. 10. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-9, отличающаяся тем, что физиологически стабильную устойчивую к желудочному соку основу выбирают из устойчивых к желудочному соку микрогранул,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку микрогранул,устойчивых к желудочному соку наночастиц или наносфер,устойчивых к желудочному соку микросфер,устойчивых к желудочному соку микрокапсул,устойчивых к желудочному соку гранул,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку гранул,устойчивых к желудочному соку липосом,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку липосом,устойчивых к желудочному соку форм Lyoc,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку форм Lyoc,осмотических насосов с устойчивым к желудочному соку покрытием,камедей,устойчивых к желудочному соку сфероидов,устойчивых к желудочному соку шариков,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку сфероидов,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку шариков,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку таблеток,покрытых оболочкой устойчивых к желудочному соку капсул. 11. Устойчивая к желудочному соку композиция по любому из пп.1-10, отличающаяся тем, что она находится в форме устойчивых к желудочному соку таблеток, капсул, саше или гранул. 12. Питательный адъювант, отличающийся тем, что он содержит устойчивую к желудочному соку композицию по любому из пп.1-11, при необходимости, объединенную с подходящей пищевой основой.- 13007010 13. Питательный адъювант по п.12, отличающийся тем, что он находится в форме, которую можно разбавлять или диспергировать в водном растворителе. 14. Питательный адъювант по п.12 или 13, отличающийся тем, что он находится в однодозовой форме, содержащей от приблизительно 25 мг до приблизительно 20 г по меньшей мере одного соединения композиции для суточной дозировки в пределах от приблизительно 25 мг до приблизительно 40 г. 15. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она содержит устойчивую к желудочному соку композицию по любому из пп.1-11, при необходимости, объединенную с фармацевтически приемлемой основой. 16. Фармацевтическая композиция по п.15, отличающаяся тем, что она находится в форме, которую можно вводить перорально или энтерально, в частности в сухой форме для разведения или диспергирования в водном растворителе, когда она находится в форме пригодной для перорального введения. 17. Фармацевтическая композиция по п.15 или 16, отличающаяся тем, что она пригодна для перорального введения в однодозовой форме, содержащей от приблизительно 25 мг до приблизительно 20 г соединений композиции, для суточной дозировки активного ингредиента в интервале от приблизительно 1 мг/кг/сутки до 1 г/кг/сутки. 18. Применение устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение следующей общей формулы (Iбис):(X)n1,Y,(Z)n2,(Iбис),где Х и Z представляют собой одинаковые или разные аминокислоты, природные или неприродные,Y представляет собой разветвленную кетокислоту,n1 и n2 независимо друг от друга, представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1, причем указанное соединение находится в форме соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z,для приготовления питательного адъюванта, предназначенного для лечения состояний плохого питания или патологий человека или животных, вовлекающих молчащие нейроны. 19. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по п.18 для получения питательного адъюванта, предназначенного для лечения состояний плохого питания у плохо питающихся субъектов,субъектов страдающих анорексией,пациентов с парезом желудка,субъектов с медленным прохождением содержимого через желудок,субъектов, страдающих нарушением всасывания в пищеварительном тракте,пациентов с болезнью Альцгеймера,лиц в состоянии гиперкатаболизма, например лиц с дыхательной недостаточностью,лиц, страдающих от пролежней,oжoговых пациентов,раковых пациентов,пациентов со СПИДом,пациентов после операции,лиц, у которых проводится заживление слизистой оболочки кишечника,лиц, страдающих от множественных травм,пациентов с сердечной недостаточностью, или для заживления и для стимуляции гормона роста или инсулина. 20. Применение устойчивых к желудочному соку композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение следующей общей формулы (Iбис):(X)n1,Y,(Z)n2,(Iбис),где Х и Z представляют собой одинаковые или разные аминокислоты, природные или неприродные,Y представляет собой разветвленную кетокислоту,n1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1, причем указанное соединение находится в форме соли между двумя составляющими Х и Y, или Y и Z, или между тремя составляющими X, Y и Z,для приготовления лекарства, предназначенного для лечения состояний плохого питания или патологий человека или животных, вовлекающих молчащие нейроны. 21. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по п.20 для получения лекарства,предназначенного для лечения состояний плохого питания у плохо питающихся субъектов,субъектов страдающих анорексией,пациентов с парезом желудка,субъектов с медленным прохождением содержимого через желудок,субъектов, страдающих нарушением всасывания в пищеварительном тракте,пациентов с болезнью Альцгеймера,- 14007010 лиц в состоянии гиперкатаболизма, например лиц с дыхательной недостаточностью,лиц, страдающих от пролежней,ожоговых пациентов,раковых пациентов,пациентов со СПИДом,пациентов после операции,лиц, у которых проводится заживление слизистой оболочки кишечника,лиц, страдающих от множественных травм,пациентов с сердечной недостаточностью, или для заживления и для стимуляции гормона роста или инсулина. 22. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по п.20 для приготовления лекарства,предназначенного для симптоматического лечения болей, связанных с патологиями, вовлекающими молчащие нейроны. 23. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по п.22 для приготовления лекарства,предназначенного для симптоматического лечения болей, связанных с патологиями пищеварительного тракта, мочевого пузыря и желчных путей. 24. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по п.22 или 23 для изготовления лекарства, предназначенного для симптоматического лечения болей, вызванных нарушениями прохождения кишечника или кишечным недомоганием, происходящими от нарушений функции кишечника (диспепсия, синдром раздраженного кишечника, раздраженной ободочной кишки),желчными путями,геморрагическим проктоколитом,болезнью Крона,язвами желудка и двенадцатиперстной кишки,хроническим гастритом,раком прямой кишки или желудка,гастроэнтеритом и желудочным гриппом,ложной непроходимостью кишечника или коликой радиационным илеитом,операциями на пищеварительном тракте и внутренних органах,диареей, спазмами, запором, расширением ободочной кишки, расширением прямой кишки,спазмами мочевого пузыря,парезом мочевого пузыря. 25. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по любому из пп.18-24, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис),где n1 и n2 независимо друг от друга представляют собой 0 или 1, по меньшей мере один из n1 и n2 представляет собой 1,Х представляет собой природную аминокислоту, при условии что, когда n2=0, тогда Х представляет собой основную аминокислоту, такую как орнитин,аргинин,лизин или гистидин,Y представляет собой кетокислоту следующей формулы (II):R-CO-COOH,(II),где R представляет собой алкильную группу или разветвленную алкановую кислоту, содержащую от приблизительно 1 до приблизительно 10 атомов углерода, в частности кетокислоту формулы (II), где,когда R представляет собой-СН(СН 3)2, указанная кетокислота является -кетоизовалерьяновой кислотой,-СН(СН 3)-СН 2-СН 3, указанная кетокислота является -кетометилвалерьяновой кислотой,-СН 2-СН(СН 3)2, указанная кетокислота является -кетоизокапроновой кислотой. 26. Применение устойчивых к желудочному соку композиций по любому из пп.18-25, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы (Iбис),где Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетоизокапроновую кислоту, то есть аргинина -кетоизокапроат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетоизокапроновую кислоту, то есть орнитина -кетоизокапроат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кетометилвалериановую кислоту, то есть орнитина -кетометилвалерат, или- 15007010 Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кетометилвалериановую кислоту, то есть аргинина -кетометилвалерат,Х представляет собой аргинин и Y представляет собой -кето-изовалериановую кислоту, то есть аргинина -кето-изовалерат,Х представляет собой орнитин и Y представляет собой -кето-изовалериановую кислоту, то есть орнитина -кето-изовалерат.