Тетразамещенные пиридазины в качестве антагонистов пути hedgehog

В изобретении предложены новые тетразамещенные пиридазины Клэй Джулия Мари, Хипскинд Филип Артур, Сэлл Дэниел Джон, Уилсон (Ни Такакува) Такако, Томпсон Мишелль Ли, Бастиан Джоли Энн (US) Медведев В.Н. (RU) где R1 представляет собой водород, фтор или циано и R2 и R3 независимо представляют собой метил или водород; или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения в качестве антагонистов пути Hedgehog, подходящие для лечения рака.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (US) Настоящее изобретение относится к антагонистам пути Hedgehog и, в частности, к новым тетразамещенным пиридазинам и применению указанных соединений в терапии. Сигнальный путь Hedgehog(Hh) играет важную роль в образовании эмбриональной структуры и обеспечении жизнедеятельности зрелой ткани за счет регулирования дифференцировки и пролиферации клеток. Семейство белков Hedgehog (Hh), включающее Sonic Hedgehog (Shh), Indian Hedgehog (Ihh) и Desert Hedgehog (Dhh), представляет собой секретируемые гликопротеины, подвергающиеся посттрансляционным модификациям, включая автокаталитическое отщепление и присоединение холестерина к аминоконцевому пептиду с образованием фрагмента, обладающего активностью в отношении передачи сигналов. Hh связывается с состоящим из 12 доменов трансмембранным белком Ptch (Ptch1 и Ptch2), тем самым способствуя опосредуемомуPtch подавлению белка Smoothened (Smo). Активация Smo запускает ряд внутриклеточных процессов,завершающихся стабилизацией транскрипционных факторов Gli (Gli1, Gli2 и Gli3) и экспрессией Gliзависимых генов, отвечающих за пролиферацию клеток, выживаемость клеток, ангиогенез и инвазию. Сигнальный путь Hh в последнее время привлекает значительный интерес, обусловленный обнаружением того факта, что нарушенная активация сигнального пути Shh приводит к образованию различных опухолей, например вызывает рак поджелудочной железы, медуллобластому, базально-клеточную карциному, мелкоклеточный рак легкого и рак простаты. В данной области техники сообщалось о нескольких антагонистах Hh, таких как стероидное алкалоидное соединение IP-609, аминопролин CUR61414 и 2,4-дизамещенный тиазол JK18. В WO 2005033288 предложены некоторые 1,4-дизамещенные фталазины, которые, как утверждают, являются антагонистами Hedgehog. Аналогично, в документе WO 2008110611 предложены некоторые 1,4-дизамещенные фталазины, связанные с диагностикой и лечением патологий, связанных с путем Hedgehog. По-прежнему существует потребность в мощных ингибиторах сигнального пути Hedgehog, в частности ингибиторах, обладающих желаемыми фармакодинамическими, фармакокинетическими и токсикологическими характеристиками. В настоящем изобретении предложены новые тетразамещенные пиридазины, являющиеся мощными антагонистами указанного пути. Согласно настоящему изобретению предложено соединение следующей формулы: где R1 представляет собой водород, фтор или циано иR2 и R3 независимо представляют собой метил или водород,или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения. Специалисту в данной области техники понятно, что соединения согласно настоящему изобретению содержат фрагмент, представляющий собой третичный амин, и способны взаимодействовать с рядом неорганических и органических кислот, образуя фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот. Такие фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот и общая методика получения указанных солей известны в данной области техники; см., например, P. Stahl, et al., HANDBOOK OFBerge, et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, No. 1, January 1977. Конкретные варианты реализации настоящего изобретения включают соединения формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанных соединений, где:a) R1 представляет собой водород иb) соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что один из R2 и R3 представляет собой водород, а другой представляет собой метил. В настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения в комбинации с фармацевтически приемлемым наполнителем, носителем или разбавителем. Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно входят в состав фармацевтических композиций, подходящих для введения различными путями. Предпочтительно указанные композиции предназначены для перорального или внутривенного введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники; см., например, REMINGTON:THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (A. Gennaro, et al., eds., 19th ed., Mack Publishing Co.,1995). В настоящем изобретении также предложен способ лечения рака головного мозга, базальноклеточной карциномы, рака пищевода, рака желудка, рака поджелудочной железы, рака желчевыводящих путей, рака простаты, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, рака яичников, колоректального рака,рака печени, рака почек или меланомы у пациента, включающий введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. Следует понимать, что фактически вводимое количество соединения будет определять лечащий врач с учетом соответствующих обстоятельств, включая состояние, лечение которого проводят, выбранный путь введения, конкретное вводимое соединение или соединения, возраст, массу тела и ответ конкретного пациента, а также степень тяжести симптомов заболевания у пациента. Суточные дозировки обычно составляют примерно от 0,1 примерно до 5 мг/кг массы тела. В некоторых случаях более чем достаточными могут быть уровни дозировок ниже нижней границы вышеуказанного диапазона, тогда как в других случаях можно применять еще более высокие дозы. Следовательно, вышеуказанный диапазон дозировок никоим образом не ограничивает объем настоящего изобретения. Согласно настоящему изобретению также предложено соединение формулы I или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения в качестве лекарственного средства. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено применение соединения формулы I,или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения рака. В частности, указанный рак выбран из группы, состоящей из рака головного мозга,базально-клеточной карциномы, рака пищевода, рака желудка, рака поджелудочной железы, рака желчевыводящих путей, рака простаты, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака печени, рака почек и меланомы. Далее, в настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения в качестве активного агента для лечения рака головного мозга, базально-клеточной карциномы, рака пищевода, рака желудка,рака поджелудочной железы, рака желчевыводящих путей, рака простаты, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, рака яичников, колоректального рака, рака печени, рака почек или меланомы. Соединения формулы I или соли указанных соединений можно получить при помощи множества методик, известных в данной области техники, а также описанных на схемах и в синтезах и примерах,приведенных ниже. Для получения соединений формулы I или солей указанных соединений можно различными способами комбинировать конкретные стадии синтеза в каждом из описанных путей, или использовать их в сочетании со стадиями из других схем. Если не указано иное, заместители являются такими, как определено ранее. Реагенты и исходные вещества, в общем случае, легко доступны среднему специалисту в данной области техники. Другие реагенты и исходные вещества можно получить при помощи стандартных методик органической и гетероциклической химии, методик, аналогичных синтезу известных похожих по структуре соединений, и методик, описанных в синтезах и примерах, приведенных далее, включая любые новые методики. В настоящем описании следующие термины имеют указанные значения: "boc" или "t-boc" относится к трет-бутоксикарбонилу; "EDCI" относится к 1-3-диметиламинопропил-3-этилкарбодиимида гидрохлориду; "Et2O" относится к диэтиловому эфиру; "НОВТ" относится к 1-гидроксибензотриазола гидрату;"SCX" относится к сильному катиониту и "IC50" относится к концентрации агента, обеспечивающей 50% от максимально возможного для данного агента ингибиторного ответа. Схема 1 Соединение формулы I можно получить в соответствии с реакциями, приведенными на схеме 1. На схеме 1 3,6-дихлор-4,5-диметилпиридазин (1) взаимодействует с моно-boc-защищенным замещенным пиперазином (2) в реакции ароматического нуклеофильного замещения (SNAr) с получением 3 хлор-4,5-диметил-6-(замещенного) пиридазина формулы (3). Например, на стадии 1 хлорид в соединении ном растворителе, таком как ДМСО, в присутствии органического основания, такого как диизопропилэтиламин. На стадии 2 оставшийся хлорид в диметилпиридазине (3) может взаимодействовать с фенилбороновой кислотой (4) в реакции перекрестного сочетания Сузуки-Мияура с получением соответствующего 4,5-диметил-6-замещенного фенилпиридазин-3-замещенного пиперазина (5). Специалисту понятно, что существует множество условий, способствующих протеканию указанных реакций перекрестного сочетания. При проведении реакции применяют подходящий растворитель, такой как диоксан или диоксан/вода, и проводят реакцию в присутствии основания, такого как фторид цезия. Реакция протекает в присутствии палладиевого катализатора,такого как хлорид(1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен)палладий(II), в инертной атмосфере при температуре примерно 80-160C с получением соединения формулы (5). Удалить защиту с аминной группы можно обычными способами удаления защиты. Способы введения и удаления защитных групп при атоме азота хорошо известны в данной области техники (см., например, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wileyand Sons, New York, (1999. Например, удаление защитной группы boc из пиперазина формулы (5) можно проводить в кислой среде, например, при помощи хлористого водорода в подходящем растворителе,таком как метанол или диоксан, с получением соединения формулы (6). Ацилирование амина на стадии 4 можно осуществить при помощи замещенного трихлорэтилкарбамата (7) с использованием органического основания, такого как триэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как ДМСО, при нагревании примерно до 90-110C. Соединения формулы I можно превратить в соль, такую как соль HCl,при помощи способов, известных специалистам в данной области техники, таких как добавление HCl вEt2O, с получением соединений формулы I. Замещенный трихлорэтилкарбамат можно получить, как показано на схеме 2. Схема 2 4,4-Дифторциклогексиламина гидрохлорид (8) ацилировали при помощи 2,2,2-трихлорэтилпроизводное хлорзамещенной карбоновой кислоты (9) с использованием органического основания, такого как триэтиламин, в инертном растворителе, таком как дихлорметан, с получением 2,2,2-трихлорэтил 4,4-дифторциклогексилкарбамата (7), стадия 1. Альтернативно, 3,6-дихлор-4,5-диметилпиридазин можно алкилировать при помощи бензилэтилендиамина, который можно преобразовать в циклизованный пиперазин, как показано на схеме 3. Схема 3 Хлорид в соединении (1) может быть заменен на бензилэтилендиамин (10) при помощи органического основания, такого как диизопропиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как ДМСО,при нагревании до 110-130C, как показано на стадии 1, схемы 3, с получением защищенного этилендиаминпиридазина формулы (11). Второй хлорид может взаимодействовать, как было описано ранее, с бороновой кислотой (4), как показано на стадии 2, с получением соединения формулы (12). Атом азота при бензиле ацилируют при помощи 2-хлорпропионовой кислоты (13) с использованием органического основания, такого как триэтиламин, и подходящего реагента для реакции сочетания, такого как EDCI с НОВТ, с получением соединения формулы (14), как показано на стадии 3. Циклизацию с получением пиридазина проводят при помощи гидрида натрия в инертном растворителе, таком как ТГФ, с получением соединения формулы (15), стадия 4. Восстанавливающий агент, такой как боран-метилсульфид, восстанавливает кетон с получением соединения формулы (16), стадия 5. Например, соединение формулы(15) может быть обработано комплексом боран-метилсульфид в инертном растворителе, таком как ТГФ. Полученную смесь можно нагревать до 40-60C с получением замещенного пиперазина формулы (16). Удаление защиты из пиперазина проводят в условиях гидрирования при давлении газообразного водорода 40-70 psi (276-483 кПа) в присутствии катализатора, такого как 10% Pd/C, с использованием полярного растворителя, такого как этанол, с получением соединения формулы (6), стадия 6. Ацилирование амина на стадии 7 можно осуществить при помощи замещенного трихлорэтилкарбамата (7) с использованием органического основания, такого как триэтиламин, в полярном апротонном растворителе, таком как ДМСО, при нагревании примерно до 90-110C, с получением соединений формулы I, которые можно превратить в соль, такую как соль HCl, способами, известными специалисту в данной области техники,такими как добавление HCl в Et2O. Следующие синтезы и примеры приведены с целью более подробной иллюстрации настоящего изобретения и представляют типичные способы синтеза соединений формулы I. Названия соединений согласно настоящему изобретению в общем случае получены при помощи ChemDraw Ultra 10.0. Синтез 1. (S)-трет-Бутил-4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат(S)-2-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты (6,88 г, 34,4 ммоль) и диизопропилэтиламина (30 мл, 172 ммоль) в ДМСО (30 мл) при 120C в течение 5 дней. Полученную смесь охлаждали, обрабатывали дополнительной порцией трет-бутилового эфира (S)-2-метилпиперазин-1-карбоновой кислоты (3,74 г, 18,7 ммоль) и возобновляли нагревание при 120C в течение еще 2 дней. Реакционную смесь разбавлялиEtOAc и промывали H2O и раствором соли. Сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 20 до 50% EtOAc в гексане) с получением целевого соединения в виде бледно-желтой пены (7,36 г, 63%). ЭР/MS m/z (35Cl) 341.0 (М+1). Синтез 2. (S)-трет-Бутил-4-(4,5-диметил-6-фенилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксилат Дегазированную при помощи N2 смесь (S)-трет-бутил 4-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2 метилпиперазин-1-карбоксилата (3,03 г, 8,87 ммоль), фенилбороновой кислоты (1,62 г, 13,3 ммоль) и CsF(4,09 г, 26,9 ммоль) в 1,4-диоксане (120 мл) обрабатывали хлоридом (1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)палладия(II) (1,08 г, 1,32 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 95C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и распределяли между EtOAc и Н 2 О. Органический слой промывали раствором соли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 15 до 85%EtOAc в гексане) с получением целевого соединения в виде белого твердого вещества (2,93 г, 86%). ЭР/МС m/z 383,0 (М+1). Замещенные диметилпиридазины, представленные в таблице ниже, получали, по существу, в соответствии с методикой, описанной в синтезе 2, с использованием соответствующей фенилбороновой кислоты.(2,93 г, 7,66 ммоль) в MeOH (20 мл) обрабатывали 4 М HCl в 1,4-диоксане (10 мл, 40,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Концентрировали реакционную смесь при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в MeOH и переносили на колонкуSCX (Varian, 10 г). Колонку промывали MeOH. Целевой продукт элюировали 2 М NH3/MeOH. Концентрировали при пониженном давлении с получением целевого соединения (2,07 г, 95%). ЭР/МС m/z 283,0(М+1). Пиперазины с удаленными защитными группами, представленные в таблице ниже, получали, по существу, в соответствии с методикой, описанной в синтезе 5, с использованием соответствующего пиперазина с защитной группой boc, при времени реакции, равном 3 ч, применяя в качестве растворителя 1,4-диоксан вместо MeOH. Смесь 3,6-дихлор-4,5-диметилпиридазина (6,90 г, 39,0 ммоль), N-бензилэтилендиамина (8,78 г, 58,5 ммоль) и диизопропилэтиламина (25,2 г, 195 ммоль) в ДМСО (78 мл) нагревали при 120C в течение 3 дней. Реакционную смесь охлаждали, выливали в Н 2 О и экстрагировали полученную смесь Et2O. Органический слой промывали Н 2 О, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 0 до 5% 2 МNH3/MeOH в CH2Cl2) с получением целевого соединения в виде воскообразного твердого вещества (6,41 г, 57%). ЭР/МС m/z 291,2 (М+1). Синтез 9. N1-Бензил-N2-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил)этан-1,2-диамин Дегазированную при помощи N2 смесь N1-бензил-N2-(6-хлор-4,5-диметилпиридазин-3-ил)этан-1,2 диамина (6,40 г, 22,0 ммоль), 4-фторфенилбороновой кислоты (9,24 г, 66,0 ммоль) и CsF (10,0 г, 66,0 ммоль) в 1,4-диоксане (220 мл) обрабатывали хлоридом (1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен)палладия(II) (2,70 г, 3,30 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 95C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и распределяли между насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и EtOAc. Разделяли слои и экстрагировали водный слой EtOAc. Органические слои объединяли, сушили над Na2SO4,фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле (градиент от 0 до 6% 2 М NH3/MeOH в CH2Cl2) с получением целевого соединения в виде воскообразного твердого вещества (4,91 г, 64%). ЭР/МС m/z 351,2 (М+1).(R)-N-Бензил-2-хлор-N-(2-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-илами Раствор N1-бензил-N2-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил)этан-1,2-диамина (4,90 г, 13,98 ммоль) в CH2Cl2 (70 мл) последовательно обрабатывали (R)-(+)-2-хлорпропионовой кислотой (1,84 мл,20,97 ммоль), триэтиламином (2,92 мл, 20,97 ммоль), НОВТ (3,21 г, 20,97 ммоль) и 1-(3 диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (4,02 г, 20,97 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь промывали насыщенным водным раствором NaHCO3. Водный слой экстрагировали CH2Cl2. Органические слои объединяли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20% EtOAc в гексане) с получением целевого соединения в виде желтой пены (4,59 г, 74%). ЭР/МС m/z 441,2 (М+1). Синтез 11. 1-Бензил-4-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-3-метилпиперазин-2-он(R)-N-бензил-2-хлор-N-(2-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-иламино)этил)пропанамида (4,59 г, 10,4 ммоль) в ТГФ (104 мл) при 0C обрабатывали NaH (60%, 625 мг, 15,6 ммоль). Оставляли реакционную смесь нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0C и обрабатывали дополнительной порцией NaH (60%, 208 мг, 5,20 ммоль). Оставляли реакционную смесь нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 дней. Распределяли реакционную смесь между раствором соли и EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 0 до 2% 2 М NH3/MeOH в CH2Cl2) с получением целевого соединения в виде белой пены (3,64 г, 86%). ЭР/МС m/z 405,2 (М+1). Синтез 12. 3-(4-Бензил-2-метилпиперазин-1-ил)-6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин Раствор 1-бензил-4-(6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-3-метилпиперазин-2-она (2,84 г,7,02 ммоль) в ТГФ (70 мл) обрабатывали комплексом боран-метилсульфид (1,96 мл, 21,1 ммоль). Полученную смесь нагревали при 50C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане, добавляли при помощи капельной воронки MeOH (20 мл), с последующим добавлением 4 М HCl в 1,4 диоксане (20 мл). Полученную смесь нагревали при 65C в течение 1 ч. Концентрировали полученную смесь при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между CH2Cl2 и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.). Разделяли слои и экстрагировали водный слой CH2Cl2. Органические слои объединяли, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 0 до 3% 2 М NH3/MeOH в CH2Cl2) с получением целевого соединения в виде воскообразного твердого вещества (2,45 г, 89%). ЭР/МС m/z 391,2 (М+1). Изомеры 3-(4-бензил-2-метилпиперазин-1-ил)-6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазина разделяли при помощи хиральной хроматографии (Chiralcel OJ-H, расход 30 мл/мин, детектирование 225 нм, 6:4MeOH:ацетонитрил). Первый пик при элюировании, изомер 1: 99% э.и. Второй пик при элюировании,изомер 2: 99% э.и. Раствор 3-(4-бензил-2-метилпиперазин-1-ил)-6-(4-фторфенил)-4,5-диметилпиридазина (200 мг, 3,25 ммоль) в абсолютном EtOH (15 мл) добавляли к 10% Pd/C (46,8 мг), предварительно смоченного EtOH (5 мл). Полученную смесь встряхивали в сосуде Парра, наполненном Н 2 под давлением 60 psi (фунт на кв.дюйм) (414 кПа), в течение 10 ч. Реакционную смесь фильтровали и помещали полученный раствор непосредственно на колонку SCX (Varian, 2 г). Колонку промывали MeOH и CH2Cl2. Продукт элюировали смесью 1:1 2 М NH3/MeOH и CH2Cl2. Элюат концентрировали при пониженном давлении с получением целевого соединения в виде кремовой пены (142 мг, 92%). ЭР/МС m/z 301,2 (М+1). Метилпиперазины с удаленными защитными группами, представленные в таблице ниже, получали,по существу, в соответствии с методикой, описанной в синтезе 15, с использованием соответствующего защищенного амина. К смеси 4,4-дифторциклогексиламина гидрохлорида (3,29 г, 19,2 ммоль) и триэтиламина (5,88 мл,42,2 ммоль) в CH2Cl2 (192 мл) добавляли по каплям при 0C 2,2,2-трихлорэтил - производное хлорзамещенной карбоновой кислоты (2,91 мл, 21,1 ммоль). Через 1 ч оставляли реакционную смесь нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Распределяли реакционную смесь междуH2O и CH2Cl2 и разделяли слои. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением целевого соединения в виде кремового твердого вещества (5,75 г, 97%). GC/MC m/z 35Cl 309 (M+). Пример 1. Смесь (S)-4,5-диметил-3-(3-метилпиперазин-1-ил)-6-фенилпиридазина (199 мг, 0,70 ммоль) и триэтиламина (0,30 мл, 2,15 ммоль) в ДМСО (5 мл) обрабатывали 2,2,2-трихлорэтил 4,4 дифторциклогексилкарбаматом (341 мг, 1,10 ммоль). Нагревали реакционную смесь при 100C в течение 4 дней. Выливали реакционную смесь в H2O, ополаскивали EtOAc. Полученную смесь экстрагировалиEtOAc. Органический слой дважды промывали Н 2 О, затем раствором соли. Сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (градиент от 0 до 10% MeOH в CH2Cl2). Очищенное свободное основание растворяли в MeOH (1 мл) и обрабатывали 1 М HCl в Et2O (1 мл). Полученную смесь концентрировали с получением целевого соединения в виде желтой пены (256 мг, 76%). ЭР/МС m/z 444,2 (М+1). Пиперазинилмочевины, представленные в таблице ниже, получали, по существу, в соответствии с методикой, описанной в синтезе 1, с использованием соответствующего пиперазинилпиридазина. Биология. Было показано, что Hedgehog как фактор выживаемости связан со следующими видами рака: базально-клеточная карцинома; рак верхней части желудочно-кишечного тракта (пищевода, желудка, поджелудочной железы и желчевыводящих путей); рак простаты; рак молочной железы; мелкоклеточный рак легкого; немелкоклеточный рак легкого; В-клеточная лимфома; множественная миелома; рак желудка; рак яичников; колоректальный рак; рак печени; меланома; рак почек и рак головного мозга. Было доказано, что элементы сигнального пути Hedgehog являются потенциальными мишенями лекарственных средств для лечения различных видов рака. Линия клеток Daoy, полученная из опухоли медуллобластомы (АТСС, НТВ-186), чувствительна к лигандам Hh. При воздействии на указанные клетки экзогенно внесенной Shh-кондиционированной среды происходит активация сигнального пути Hh, приводящая к увеличенной экспрессии Gli1. Циклопамин - алкалоид, выделенный из полевого вьюнка Veratrum californicum - является слабым антагонистом Hedgehog и, как показано, подавляет экспрессию Gli1 в ответ на стимуляцию Shh. Последние наблюдения позволяют предположить, что циклопамин ингибирует рост клеток медуллобластомы в культуре и аллотрансплантатов. С использованием модельной системы на клетках Daoy можно идентифицировать мощные ингибиторы сигнального пути Hedgehog. Поскольку соединения согласно настоящему изобретению представляют собой антагонисты Hedgehog, они подходят для лечения указанных выше типов опухолей. Определение биологической активности IC50. Следующий протокол и результаты исследования дополнительно демонстрируют применимость и эффективность соединений и способов согласно настоящему изобретению. Функциональные исследования подтверждают, что соединения согласно настоящему изобретению проявляют способность ингибировать сигнальный путь Shh. Все лиганды, растворители и реактивы, применяемые в следующем исследовании, легко доступны из коммерческих источников или легко могут быть получены специалистом в данной области техники. Биологическую активность определяли при помощи функционального исследования на клетках нейронального рака Daoy и измеряли уровни рибонуклеиновой кислоты Gli1 при помощи системы анализа рДНК (разветвленной дезоксирибонуклеиновой кислоты) (Panomics, Inc., Fremont, CA). Gli первоначально открыт в линии клеток глиобластомы и кодирует белок "цинковый палец" (zinc finger protein),активируемый сигнальным путем Shh. Максимальный отклик получен при включении транскрипцииGli1 в клетках Daoy с кондиционированной средой (клетки мезонефроса человека, HEK-293, стабильно экспрессирующие рекомбинантный Shh) в течение 24 ч и последующем измерении количества стимулированного транскрипта Gli1. Минимальный отклик представляет собой количество транскрипта Gli1,ингибированного контрольным соединением в клетках Daoy, которое было стимулировано кондиционированной средой (клетки мезонефроса человека, HEK-293, стабильно экспрессирующие рекомбинантныйShh) в течение 24 ч. Функциональное исследование для измерения ингибирования Gli1 в клетках Daoy. В системе анализа рДНК используют технологию ДНК с разветвленной цепью, чтобы сделать возможной амплификацию рибонуклеиновой кислоты-мишени (транскрипта). В указанной технологии применяют три типа синтетических гибридных коротких специфических к Gli1 кДНК-зондов, которые опре-8 018372(BL)], которые гибридизируются в виде комплекса с транскриптами-мишенями для усиления сигнала гибридизации. Добавление на стадии амплификации хемолюминогенного субстрата позволяет проводить детектирование при помощи люминесценции. Линия клеток Daoy, полученная из American Type Culture collection (ATCC), представляет собой чувствительную к Shh линию клеток нейрональной опухоли человека, и была получена в 1985 из опухоли десмопластической медуллобластомы мозжечка, физиологически значимой линии опухолевых клеток. Эндогенные уровни транскриптов Gli1 в клетках Daoy низкие, но их можно стимулировать за счет использования кондиционированной среды, взятой из клеток человека со стабильной сверхэкспрессией Shh(линия клеток HEK-293 со стабильно трансфицированным hShh). Клетки Daoy выращивали до монослоя в сосудах для культуры клеток Т 225 в среде для выращивания клеток Daoy, содержащей минимально обогащенную среду (MEM) плюс 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС) с 0,1 нМ неосновных аминокислот и 1 мМ пирувата натрия. Клетки удаляли из сосудов Т 225 при помощи трипсина с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА), центрифугировали, вновь суспендировали в среде, а затем подсчитывали. Затем клетки Daoy высевали по 50000 клеток на ячейку в среде для выращивания в прозрачные 96 луночные планшеты для культуры тканей Costar и оставляли для инкубирования в течение ночи при 37C в атмосфере 5% диоксида углерода (СО 2). Клетки промывали один раз фосфатно-солевым буферным раствором (ФСБ) с последующим добавлением 100 мкл кондиционированной Shh среды (Shh-CM) для стимуляции уровней экспрессирования Gli1. Shh-CM разбавляли для получения максимальной стимуляции контрольной средой для выращивания - 0,1% ФСБ/DMEM (Среда Игла, модифицированная по Дульбекко). На клетки Daoy, обработанные Shh-CM, затем воздействовали различными концентрациями ингибиторов Hedgehog в диапазоне приблизительно от 1 мкМ до 0,1 нМ. Исследуемые соединения оставляли для инкубирования в течение 24 ч при 37C в атмосфере 5% СО 2. Измерение транскрипта Gli1 проводили при помощи теста Quantigene 2.0 Gli1 согласно описанию производителя (Panomics, Inc.). Готовили разбавленную смесь буфера для лизирования (DLM), содержащего Протеиназу K. Через 24 ч инкубирования с соединением клетки однократно промывали ФСБ и добавляли к клеткам 180 мкл DLM. Планшеты с клетками, содержащие буфер для лизирования, запечатывали и выдерживали при 55C от 30 до 45 мин. Полученные лизаты клеток затем растирали 5 раз. Рабочий набор зондов, содержащий зонды Gli1, получали, разбавляя зонды в DLM согласно указаниям производителя, и затем добавляли 20 мкл рабочего набора зондов к планшетам для теста рДНК вместе с 80 мкл лизатов Daoy. Планшеты запечатывали и инкубировали в течение ночи при 55C. Затем планшеты с ДНК обрабатывали согласно указаниям производителя. Проводили количественное измерение сигнала,считывая планшеты на считывающем устройстве Perkin Elmer Envision reader, детектирующем люминесценцию. Сигнал люминесценции прямо пропорционален количеству транскрипта-мишени, присутствующего в образце. Данные о люминесцентном сигнале, полученные в функциональном исследовании, применяли для расчета IC50 при исследовании in vitro. Данные вычисляли на основании максимальных контрольных значений (клетки Daoy, обработанные Shh-CM) и минимального контрольного значения (клетки Daoy,обработанные Shh-CM и ингибирующей концентрацией контрольного соединения, 1 мкМ N-(3-(1 Нбензо[d]имидазол-2-ил)-4-хлорфенил)-3,5-диметоксибензамида). Для получения значений IC50 использовали четырехпараметрический логистический подбор кривой при помощи программного обеспеченияand NIH Chemical Genomics Center). Согласно описанному протоколу для соединений согласно настоящему изобретению, приведенных в качестве примеров в настоящей заявке, было показано, что IC5015 нМ. Например, для соединения из примера 1 IC50 составляет приблизительно 1,26 нМ со стандартной ошибкой 0,139 (n=3) в описанном выше исследовании. Полученные результаты подтверждают тот факт, что соединения согласно настоящему изобретению являются антагонистами Hedgehog и соответственно подходят для использования в качестве противораковых агентов. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение следующей формулы: где R1 представляет собой водород, фтор или циано иR2 и R3 независимо представляют собой метил или водород,или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения. 2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R1 представляет собой водород или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. 3. Соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что один из R2 и R3 представляет собой водород, а другой представляет собой метил или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. 4. Соединение по п.3, представляющее собой (S)-N-(4,4-дифторциклогексил)-4-(4,5-диметил-6 фенилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-карбоксамида гидрохлорид. 5. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-4 или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем,разбавителем или наполнителем. 6. Применение соединения по любому из пп.1-4 или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения в качестве лекарственного средства. 7. Применение соединения по любому из пп.1-4 или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для лечения рака. 8. Применение по п.7, отличающееся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из рака головного мозга, базально-клеточной карциномы, рака пищевода, рака желудка, рака поджелудочной железы, рака желчевыводящих путей, рака простаты, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, В-клеточной лимфомы, множественной миеломы, рака яичников,колоректального рака, рака печени, рака почек и меланомы.