Новые бициклические соединения аминопиразинона, способ их получения и содержащие их фармацевтические композиции

1 Настоящее изобретение относится к новым бициклическим соединениям аминопиразинона,способу их получения, содержащим их фармацевтическим композициям и их применению в качестве ингибиторов связанных с трипсином протеаз серина. Одна из этих протеаз серина, тромбин, является ключевым энзимом при коагуляции и играет центральную роль в венозных и артериальных патологиях тромбоза, принимая во внимание, в частности, его отмеченную способность вызывать автоусиление коагуляционного каскада (F. Тоti и др. Sang, Thrombose, Vaisseaux 1992, 4, 483-494 и Т.М. Reilly и др. Blood Coagulation and Fibrinolysis 1992, 3, 513-517). Специфическое и прямое ингибирование тромбина является более эффективным и представляет меньше риска кровоизлияния, чем лечение гепарином. Прямые ингибиторы тромбина в настоящее время существуют, но недостатком таких пептидных веществ является то, что они не активны при оральном способе приема. Пептидомиметические соединения, имеющие оральную антитромботическую активность были ранее описаны в литературе. Они включают в себя, в частности, соединения борной кислоты, описанные в описаниях патентов ЕР 293881, ЕР 471651, ЕР 615978 и ЕР 792883 и соединения, описанные в описаниях патентовWO 94 29336 и WO 95 23609. Синтез новых ингибиторов протеазы серина с целью повышения эффективности и селективности соединений, ранее описанных в литературе, таким образом, представляет особенно большой интерес. Активность новых соединений продемонстрирована возрастанием различных промежутков времени коагуляции. Более того, соединения активны при оральном способе приема. Данное изобретение более конкретно относится к соединениям формулы (I) где R1 обозначает линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу, замещенную одной или более одинаковыми или различными группами,выбранными из фенила или пиридила,обозначает тетрагидропиррол,n обозначает целое число, такое как 1n6,R2 обозначает любую из следующих групп: где Х обозначает СН-группу или атом азота,R4 обозначает атом водорода или атом галогена,R5 обозначает любую из групп:RaNHCOHN-, где Ra обозначает атом водорода или линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу,RbSO2NHCO(NH)p-, где Rb, обозначает линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу и р обозначает 0 или 1,HON=C(NH2)-, HN-C(NHOH)-,Rc-(СН 2)m-Y-, где Y обозначает СН 2, O, S или RaN, m обозначает целое число, такое как 0m3, Rc обозначает насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, имеющий 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит одну или несколько карбонильных функций и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями,выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкильных групп, линейных или разветвленных C1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными С 1 С 6 алкильными группами), или с: бициклическую систему формулы в которой Х имеет указанные выше значения и В вместе с атомами углерода, к которым он присоединен, образует арил или насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, имеющий 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит по меньшей мере одну карбонильную функцию и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкильных групп, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами),к их изомерам, их N-оксидам и их фармацевтически приемлемым аддитивным солям с кислотой или основанием. Среди фармацевтически приемлемых кислот могут быть упомянуты, не подразумевая ограничения, соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, фосфоно 3 вая кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота,глутаровая кислота, фумаровая кислота, виннокаменная кислота, малеиновая кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, оксалиловая кислота, метансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, камфорная кислота, др Среди фармацевтически приемлемых оснований можно упомянуть, не подразумевая каких-либо ограничений, гидроксид натрия,гидроксид калия, триэтиламин, трет-бутиламин,др. Арильную группу следует понимать как обозначающую фенил, бифенилил или нафтил,каждая из этих групп необязательно замещена одной или более одинаковыми или различными группами, выбираемыми из галогена, линейного или разветвленного (С 1-С 6)алкила (необязательно замещенного гидроксигруппой, карбоксигруппой, аминогруппой (которая замещена одной или двумя линейными или разветвленными(C1-С 6)алкильными группами) или карбомоильной группой (которая сама замещена одной или двумя линейными или разветвленными (С 1 С 6)алкильными группами, линейной или разветвленной (С 1-С 6)алкокси, гидрокси, линейной или разветвленной (С 1-С 6)тригалоалкил, линейной или разветвленной (С 1-С 6)тригалоалкокси,амино (необязательно замещенной одной или двумя линейными или разветвленными (С 1 С 6)алкильными группами), линейной или разветвленной (С 1-С 6)алкилкарбонилокси, карбоксиметокси и карбамоилметокси (необязательноN-замещенной одной или двумя линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами). Гетероарильную группу следует понимать как обозначающую ароматическую моно- или бициклическую группу, имеющую от 5 до 12 членов, которая содержит два или три гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы,в которой гетероарил может необязательно быть замещен одной или более одинаковыми или различными группами, выбираемыми из галогена, линейного или разветвленного (С 1-С 6)алкила(необязательно замещенного гидроксигруппой,карбоксигруппой, аминогруппой (которая замещена одной или двумя линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами) или карбамоильной группой (которая необязательно замещена одной или двумя линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами,гидрокси, линейной или разветвленной (С 1 С 6)алкокси, линейного или разветвленного (С 1 С 6)тригалоалкила, фенила, амино (необязательно N-замещенной одной или более линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами), карбоксиметокси и карбамоилметокси(необязательно замещенной одной или двумя линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами). Из гетероарильных групп можно упомянуть следующие, не подразумевая 4 какие-либо ограничения: тиенил, придил, фурил, пирролил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, пиримидинил,пиразинил, придазинил. Циклоалкильную группу следует понимать как обозначающую насыщенную или ненасыщенную моно- или бициклическую углеводородную группу, имеющую от 3 до 12 членов, в которой кольцо может необязательно быть замещено одной или более одинаковыми или различными группами, выбираемыми из галогена,линейного или разветвленного (С 1-С 6)алкила,линейной или разветвленной (C1-С 6)алкокси,гидрокси, линейного или разветвленного (С 1 С 6)тригалоалкила, амино (необязательно замещенного одной или более линейными или разветвленными (С 1-С 6)алкильными группами) и арила. Из циклоалкильных групп можно упомянуть следующие, не подразумевающие какиелибо ограничения: циклопентил, циклогексил,инданил, тетрагидронафтил. Гетероциклоалкильную группа следует понимать как обозначающую насыщенную или ненасыщенную, моно- или бициклическую группу, имеющую от 4 до 12 членов, которая содержит два или три гетероатома, выбираемых из кислорода, азота и серы, в которой гетероцикл может необязательно быть замещен одной или более одинаковыми или различными группами, выбираемыми из галогена, линейного или разветвленного (С 1-С 6)алкила, линейной или разветвленной (С 1-С 6)алкокси, гидрокси, линейного или разветвленного (С 1-С 6)тригало-алкила,амино (необязательно замещенной одной более линейными или разветвленньми (C1-С 6) алкильными группами), арила и диарилметила. Среди гетероалкильных групп можно упомянуть следующие, не подразумевающие каких-либо ограничений: азетидинил, пирролидинил, пиперидил, дигидроциклопента[b]придил. Предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых n представляет собой 1. как указано для формулы (I) Кольцо предпочтительно представляет собой пирролипредставляет собой динильную группу. Если пирролидиновое кольцо, кольцо предпочтительно в S конфигурации. Предпочтительными R1 группами являются линейные или разветвленные (C1-С 6)алкильные группы, замещенные одной или более арильными или гетероарильными группами. Особенно предпочтительными R1 группами являются линейные или разветвленные (С 1 С 6)алкильные группы, замещенные одной или более фенильными или придильными группами. Предпочтительно R1 группы представляют собой (2,2-дифенил)этильную или (2-придил) этильную группу. 5 Если R2 представляет собой группу b, X предпочтительно представляет собой группу СН и R5 предпочтительно представляет собой группу HN=C(NHOH)- или Rc-(CH2)m-Y. В этом случае Rc более конкретно представляет собой придиновую, пирролидиноновую, имидазольную или имидазолиновую группу. Если R2 представляет собой бициклическую систему, эта система будет предпочтительно представлять собой либо группу, в которой Х представляет собой группу СН, и в этом случае В будет представлять собой морфолиноновое, изоксазольное или пиррольное кольцо,либо группу, в которой Х представляет собой атом азота, в этом случае В будет представлять собой фенильное кольцо. Следующие соединения являются предпочтительными по изобретению:(6S)-N-4-[амино(гидроксиимино)метил] бензил-3-[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо 4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6 карбоксамид,(6S)-N-4-[амино(гидроксиимино)метил] бензил-4-оксо-3-(2-(2-придил)этил]амино 4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6 карбоксамид,(6S)-N-[2-([aминo(иминo)мeтил]aминooкcи)этил]-3-[(2,2-дифeнилэтил)aминo]-4 оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин 6-карбоксамид,(6S)-4-oкco-N-(3-oкco-3,4-дигидpo-2H-бeнзoкcaзин-8-ил)мeтил]-3-[2-(2-придил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6 карбоксамид,(6S)-4-оксо-3-[2-(2-придил)этил]аминоN-[2-(2-придилметокси)бензил]-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид,(6S)-4-оксо-N-2-[(2-оксо-3-пирролидинил)окси]бензил-3-[2-(2-придил)этил]амино 4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид,(6S)-N-[2-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2-придил)-этил] амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид,(6S)-N-[2-(1H-имидазол-2-илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2-придил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид,(6S)-N-[1H-индoл-6-илмeтил)-4-оксо-3-[2(2-придил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид,Изобретение также относится к способу получения соединений формулы (I), который отличается тем, что соединение формулы (II) в которой А имеет значения, указанные для формулы (I), P1 представляет собой защитную 6 группу аминофункции и Вn представляет собой бензильную группу,восстанавливают, используя подходящий восстанавливающий агент, получая соединение формулы (III) в которой A, P1 и Вn имеют значения, указанные здесь ранее,гидрокси функцию этого соединения формулы (III) переводят в метокси и затем в циано функцию обычными для органической химии реакциями, получая после удаления защитных групп аминофункции, соединение формулы (IV) в которой А и Вn имеют значения, указанные здесь ранее,это соединение формулы (IV) подвергают реакции с оксалилхлоридом, получая соединение формулы (V)R1-NH2 в которой R1 имеет значения, указанные для формулы (I), получая соединение формулы (VII) в которой А, Вn и R1 имеют значения, указанные здесь ранее,это соединение формулы (VII) затем каталитической гидрогенацией переводят в соединение формулы (VIII) в которой А и R1 имеют значения, указанные здесь ранее,это соединение формулы (VIII) затем каталитической гидрогенацией в щелочной среде переводят в соединение формулы (IX) 7 в которой А и R1 имеют значения, указанные здесь ранее, это соединение формулы (IX) подвергают реакции с соединением формулы (X) в которой n и R2 имеют значения, указанные для формулы (I), получая, после возможной депротекции, соединение формулы (I),это соединение формулы (I) необязательно переводят в соответствующий N-оксид, очищают, при желании, согласно обычной методике очистки, разделяют, при желании, по обычной методике на его изомеры и переводят, при желании, в аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием. Соединения формулы (II) получают бензилированием соответствующих кислот. Кроме того факта, что соединения по изобретению являются новыми, они имеют особенно ценные фармакологические свойства. Они являются сильными ингибиторами связанных с трипсином протеаз серина, проявляя существенную селективность по отношению к тромбину по сравнению с другими коагуляционными и фибринолизными протеазами серина. Эти свойства, таким образом, делают их полезными при лечении стабильной или нестабильной ангины, расстройств тромботического происхождения и/или дающих тромботические осложнения, при лечении или профилактике инфаркта миокарда и венозных или артериальных тромбозов, а также при лечении усложнений сосудистых и сердечно-сосудистых заболеваний, таких как атеросклероз, артериит, венозное заболевание, и при лечении всех расстройств, которые связаны с образованием и/или активностью тромбина. Их равноценно можно применять в терапевтической связи с тромболитиком. Изобретение также распространяется на фармацевтические композиции, включающие в качестве активного ингредиента соединение формулы (I) совместно с одним или более инертными, нетоксичными эксципиентами. Среди фармацевтических композиций по изобретению можно упомянуть более конкретно композиции, пригодные для орального, парентерального (внутривенного или подкожного) или назального применения, таблетки или драже, подъязычные таблетки, желатиновые капсулы, лепешки, суппозитории, кремы, мази, кожные гели, инъекционные препараты, питьевые суспензии, др. Полезную дозу можно адаптировать согласно природе и сложности расстройства, графику приема, а также возрасту и весу пациента. Эта доза варьируется от 1 до 500 мг за один или более приемов. Нижеследующие примеры иллюстрируют изобретение, но никоим образом его не ограничивают. 8 Исходные материалы представляют собой известные продукты, или их получают по известным способам. Структуры соединений, описанных в примерах, определяли по обычным спектрофотометрическим методам (инфракрасный, ЯМР,масс-спектрометрия). Пример 1. (6S)-N-4-[Амино(гидроксиимино)метил]бензил-3-(2,2-дифенилэтил)амино]4-оксо-4,6,7,8-тетрагидротетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид. К 2,5 ммоль (6S)-3-[(2,2-дифенилэтил) амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-] пиразин-6-карбоновой кислоты, полученной согласно способу, описанному в заявке FR 99 07538, в 50 мл безводного диметилформамида прибавляют 0,9 г гидрохлорида 4-(аминометил)-N'-гидроксибензолкарбоксимидамида, полученного согласно способу, описанному вSynth. Comm. (28(23), 4419-4429, 1998), 1,3 мл диизопропилэтиламина и 0,4 г гидроксибензотриазола. После растворения добавляют 0,9 г тетрафтороборатаO-бензотриазолилтетраметилизоурония и все перемешивают на протяжении одной ночи. После фильтрации и выпаривания остаток отбирают в этилацетат. Органическую фазу промывают, сушат, фильтруют и выпаривают. Ожидаемый продукт получают в твердой форме после очистки остатка хроматографией на силикагеле, применяя в качестве элюанта смесь дихлорометана/метанола 95/5. Масс-спектр: [МН]+ m/z = 522 Пример 2. (6S)-N-4-[Амино(гидроксиимино)метил]бензил-4-оксо-3-[2-(2-придил) этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-] пиразин-6-карбоксамид. Ожидаемый продукт получают согласно способу, описанному в примере 1, заменив (6S)3-[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоновую кислоту (6S)-3-[2-(2-придил)этил]-амино-4 оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин 6-карбоновой кислотой. Элементный микроанализ,%: С НN Расчетный 61,73 5,63 21,91 Полученный 62,03 5,50 21,78 Пример 3. Дигидрохлорид (6S)-N-[2([амино(имино)метил]аминоокси)этил]-3[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамида. Стадия A. (6S)-N-[2-([(Трет-бутилоксикарбониламино)(трет-бутилоксикарбонилимино)метил]аминоокси)этил]-3-[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид. Ожидаемый продукт получают согласно способу, описанному в примере 1, заменив гидрохлорид 4-(аминометил)-N'-гидроксибензол 9 карбоксимидамидаN-(2-аминоэтокси)-N',N"(ди-трет-бутилоксикарбонил)гуанидином. Стадия В. Дигидрохлорид (6S)-N-[2([амино(имино)метил]аминоокси)этил]-3[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид. 10 мл 4 М раствора соляной кислоты в диоксане добавляют к 1,8 ммоль соединения, описанного в предыдущей стадии, в 20 мл безводного дихлорометана. Все перемешивают на протяжении одной ночи при температуре окружающей среды. После выпаривания растворителей остаток отбирают в воду. Раствор фильтруют и лиофилизируют, получая ожидаемый продукт. Масс-спектр : [М+Н+] m/z=475. Последующие примеры получали согласно методу, описанному в примере 1, используя соответствующие исходные материалы. Пример 4. (6S)-4-Оксо-N-[(2-оксо-2,3-дигидро-1H-пирроло[2,3-с]пирид-5-ил)метил]-3[2-(2-пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид. Пример 5. (6S)-4-Оксо-N-[(2-оксо-2,3-дигидро-1H-имидазо[4,5-с]пирид-6-ил)метил]-3[2-(2-придил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-]пиразин-6-карбоксамид. Пример 6. (6S)-4-Оксо-N-[(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-4-ил)метил]-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло [1,2-] пиразин-6-карбоксамид. Пример 7. (6S)-4-Оксо-N-[(2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-5-ил)метил]-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-] пиразин-6-карбоксамид. Пример 8. (6S)-4-Оксо-N-[(3-оксо-3,4-дигидро-2H-бензоксазин-8-ил)метил]-3-[2-(2-придил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2]пиразин-6-карбоксамид. Пример 9. (6S)-4-Оксо-N-[(4-оксо-3,4-дигидро-2 Н-1,3-бензоксазин-8-ил)метил]-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. Пример 10. (6S)-4-Оксо-3-[2-(2-пиридил) этил]амино-N-[2-(2-пиридилметокси)бензил]-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. Пример 11. (6S)-N-[2-[(2,4-Диоксо-1,3-тиазолидин-5-ил)метил]бензил]-4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло 10 этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид. Пример 15. (6S)-N-[2-(4,5-дигидро-1 Нимидазол-2-илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. Пример 16. (6S)-N-[2-(1 Н-имидазол-2-илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил] амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. Пример 17. (6S)-N-[(3-Амино-1,2-бензизоксазол-6-ил)метил]-4-оксо-3-[2-(2-пиридил) этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид. Пример 18. (6S)-N-(1 Н-индол-6-илметил)4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. Пример. 19. (6S)-N-(3-Изохинолинилметил)4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ПО ИЗОБРЕТЕНИЮ Пример А. Ингибирование тромбина и протеаз фибринолиза серина. Для оценки in vitro ингибирующей активности продуктов по изобретению в отношении человеческого тромбина (фирма Sigma, удельная активность 3230 NIH-единиц/мг) очищенный человеческий фибриноген (Фг) (4 мМ, фирма Stago) добавляют к данному количеству тромбина (0,7 нМ), который предварительно инкубируют с подлежащим тестированию ингибитором или без него (20 С, 10 мин). Для оценки in vitro избирательного действия продуктов в отношении плазмина в аналогичном анализе используют очищенный человеческий плазмин (2 нМ, фирма Stago), применяя в качестве субстрата содержащий паранитроанилид пептид: Glu-Phe-Lys-п-HA (0,50 мМ, S 2403, фирма Каbi). Ингибиторы, ферменты и субстраты разбавляют в одном и том же буфере (0,01 мМ фосфатный буфер, рН 7,4, содержащий 0,12 М хлорид натрия и 0,05%-ный бычий сывороточный альбумин) и затем вносят в объеме 50 мкл в полистироловый титрационный микропланшет. Фибрин, образованный под действием тромбина, или паранитроанилид, выделившийся под действием серинпротеазы, оценивают спектрофотометрически при длине волны 405 нм после проведения реакции в течении 15-30 мин. В этом опыте в частности установлено, что концентрация (в нМ), необходимая для 50%ного (IС 50) ингибирования ферментативной активности тромбина по сравнению с контролем без добавления соединения по изобретению составляет 141 нМ для соединения из примера 1,313 нМ для соединения из примера 2, 4 нМ для соединения по примеру 3, 136 нМ для соединения по примеру 10, 12 нМ для соединения по примеру 15, 140 нМ для соединения по примеру 17 и 22 нМ для соединения по примеру 18. Соединения по изобретению, более того,очень селективны по отношению к тромбину по сравнению с фибринолитическими протеазами серина (плазмин, tPa и uРа). Пример В. Антикоагулянтное действие,измерение времени тромбина и времени активированного цефалина у человека. С целью оценки антикоагулянтной активности соединений по изобретению, время тромбина (ТТ) и время активированного цефалина(ACT) определяли в образцах человеческой плазмы. Применяли коагулометр ST4. Плазму с недостатком тромбоцитов лиофилизировали и отбирали в дистиллированную воду. ТТ получали, используя реагент Thrombine Prest, a ACT получали, используя реагент Cephaline РТТAutomate. К плазме (90 мл) прибавляли ингибитор или растворитель (10 л), затем инкубировали 2 мин при 37 С. Добавляли 100 ил Thrombine Prest (ТТ) или Cephaline PTT Automate(ACT) и одновременно запускали таймер. При этих условиях ТТ составляло порядка 18 с, a ACT - порядка 12 с. Активность антагониста оценивали по его способности продлевать ТТ и ACT по отношению к контролю. Эффект ингибиторов выражали в виде концентрации в М, которая продлевает время коагуляции в два раза (Сtt2). Соединения по изобретению вызывали очень существенное продление времени коагуляции, и некоторые Ctt2 показаны в виде примера в таблице, приведенной здесь ниже. Пример 2 3 15 18 Пример фармацевтической композиции. Формула для получения 1000 таблеток,каждая из которых содержит 10 мг активного ингредиента: Соединение по примеру 1 10 г Гидроксипропилцеллюлоза 2 г Пшеничный крахмал где R1 обозначает линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу, замещенную одним 12 или более одинаковыми или различными группами, выбранными из фенила или пиридила,обозначает тетрагидропиррол,n обозначает целое число такое как 1n6,R2 обозначает любую из следующих групп: где X обозначает СН-группу или атом азота,R4 обозначает атом водорода или атом галогена,R5 обозначает любую из групп:RaNHCOHN-, где Ra обозначает атом водорода или линейную или разветвленную С 1 С 6 алкильную группу,RbSO2NHCO(NH)p-, где Rb обозначает линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу и р обозначает 0 или 1, HON=C(NH2)-,HN-C(NHOH)-,Rc-(CH2)m-Y-, где Y обозначает СН 2, O, S или RaN, m обозначает целое число, такое как 0m3, Rc обозначает насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, имеющий 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит одну или несколько карбонильных функций и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями,выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкильных групп, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными C1 С 6 алкильными группами),или с: бициклическую систему формулы где Х имеет указанные выше значения и В вместе с атомами углерода, к которым он присоединен, образует арил или насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, имеющий 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит по меньшей мере одну карбонильную функцию и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкильных групп,линейных или разветвленных С 1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами),их изомеры, их N-оксиды и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием, 13 при этом под понятием "арильная группа" подразумевают фенильную, бифенильную или нафтильную группу, каждая из этих групп необязательно замещена одной или несколькими одинаковыми или различными группами, выбранными из ряда, включающего галоген, линейный или разветвленный С 1-С 6 алкил (необязательно замещенный гидрокси-, карбокси-,аминогруппой (которая сама необязательно замещена одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами) или карбамоильную группу (которая сама необязательно замещена одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами), линейную или разветвленную С 1-С 6 алкокси-, гидроксигруппу, линейный или разветвленный С 1-С 6 тригалоалкил, линейную или разветвленную C1-С 6 тригалоалкокси-, аминогруппу(необязательно замещенную одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами), линейную или разветвленную С 1-С 6 алкилкарбонилокси-, карбоксиметокси- и карбамоилметоксигруппу (необязательно Nзамещенную одной или двумя линейными или разветвленными C1-C6 алкильными группами),под понятием "гетероарильная группа" подразумевают ароматическую моно- или бициклическую группу, имеющую от 5 до 12 кольцевых членов, которые включают 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, при этом гетероарил необязательно может быть замещен одной или несколькими одинаковыми или различными группами, выбранными из ряда, включающего галоген, линейный или разветвленный С 1-С 6 алкил (необязательно замещенный гидрокси-, карбокси-, аминогруппой(которая сама необязательно замещена одной или двумя линейными или разветвленными С 1 С 6 алкильными группами) или карбамоильную группу (которая сама необязательно замещена одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами), гидрокси-,линейную или разветвленную С 1-С 6 алкоксигруппу, линейный или разветвленный C1-С 6 тригалоалкил, фенил, аминогруппу (необязательноN-замещенную одной или несколькими линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами), карбоксиметокси- и карбамоилметоксигруппу (необязательно замещенную одной или двумя линейными или разветвленными C1 С 6 алкильными группами),под понятием "циклоалкильная группа" подразумевают насыщенную или ненасыщенную моно- или бициклическую углеводородную группу, содержащую от 3 до 12 кольцевых членов, при этом кольцо необязательно может быть замещено одной или несколькими идентичными или различными группами, выбранными из ряда, включающего галоген, линейный или разветвленный С 1-С 6 алкил, линейную или разветвленную С 1-С 6 алкокси-, гидроксигруппу, линейный или разветвленный С 1-С 6 тригалоалкил, 004678 14 аминогруппу (необязательно замещенную одной или несколькими линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами) и арил,под понятием"гетероциклоалкильная группа" подразумевают насыщенную или ненасыщенную моно- или бициклическую группу,содержащую от 4 до 12 кольцевых членов, которые включают 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, при этом гетероцикл необязательно может быть замещен одной или несколькими идентичными или различными группами, выбранными из ряда, включающего галоген, линейный или разветвленный С 1-С 6 алкил, линейную или разветвленную С 1 С 6 алкокси-, гидроксигруппу, линейный или разветвленный С 1-С 6 тригалоалкил, аминогруппу(необязательно замещенную одной или несколькими линейными или разветвленными С 1 С 6 алкильными группами), арил и диарилметил. 2. Соединения формулы (I) по п.1, в которых n равно 1. 3. Соединения формулы (I) по п.1, в которых R2 обозначает группу формулы где Х обозначает СН-группу или атом азота,R4 обозначает атом водорода или атом галогена,R5 обозначает любую из группRaNHCOHN-, где Ra обозначает атом водорода или линейную или разветвленную С 1 С 6 алкильную группу,RbSO2NHCO(NH)p-, где Rb, обозначает линейную или разветвленную С 1-С 6 алкильную группу и р обозначает 0 или 1, HON=C(NH2)-,HN-C(NHOH)-,Rc-(СН 2)m-Y-, где Y обозначает CH2, O, S или RaN, m обозначает целое число, такое как 0m3, Rc обозначает насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, имеющий 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит одну или несколько карбонильных функций и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями,выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкильных групп, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными С 1 С 6 алкильными группами). 5. Соединения формулы (I) по п.1, в которых R2 обозначает бициклическую систему формулы где Х обозначает СН-группу или атом азота и В вместе с атомами углерода, к которым он присоединен, образует арил или насыщенное или ненасыщенное гетероциклическое кольцо,имеющее 5 или 7 кольцевых членов, которые включают от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы, этот гетероцикл необязательно содержит по меньшей мере одну карбонильную функцию и необязательно замещен одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из атомов галогена, линейных или разветвленных C1 С 6 алкильных групп, линейных или разветвленных С 1-С 6 алкоксигрупп и аминогрупп (необязательно замещенных одной или двумя линейными или разветвленными С 1-С 6 алкильными группами). 6. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-4-[амино(гидроксиимино)метил]бензил-3-[(2,2-дифенилэтил)амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его Nоксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 7. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-4-[амино(гидроксиимино)метил]бензил-4-оксо-3-[2-(2-пиридил) этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его Nоксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 8. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-[2-([амино(имино) метил]аминоокси)этил]-3-[(2,2-дифенилэтил) амино]-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его Nоксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 9. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-4-oкco-N-[(3-оксо-3,4 дигидро-2 Н-бензоксазин-8-ил)метил]-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид, его изомеры,его N-оксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 10. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил]амино-N-[2-(2-пиридилметокси)бензил]-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6 карбоксамид, его изомеры, его N-оксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 11. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-4-оксо-N-2-[(2-оксо-3 пирролидинил)окси]бензил-3-[2-(2-пиридил) этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его N 004678 16 оксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 12. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-[2-(4,5-дигидро-1 Нимидазол-2-илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2 пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид, его изомеры,его N-оксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 13. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-[2-(1H-имидазол-2 илметокси)бензил]-4-оксо-3-[2-(2-пиридил) этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а] пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его Nоксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 14. Соединение формулы (I) по п.1, представляющее собой (6S)-N-[1H-индол-6-илметил]-4-оксо-3-[2-(2-пиридил)этил]амино-4,6,7,8-тетрагидропирроло[1,2-а]пиразин-6-карбоксамид, его изомеры, его N-оксиды и его фармацевтически приемлемые аддитивные соли с кислотой или основанием. 15. Способ получения соединений формулы (I) по п.1, отличающийся тем, что соединение формулы (II)(I), P1 обозначает защитную группу аминофункции и Вn обозначает бензильную группу,восстанавливают с помощью соответствующего восстановителя, получая соединение формулы (III) где А, Р 1 и Вn имеют указанные выше значения,гидроксильную функцию соединения формулы (III) превращают в метоксигруппу и затем в цианогруппу путем общепринятых реакций органической химии, получая после удаления защитной группы аминофункции соединение формулы (IV) где А и Вn имеют указанные выше значения,соединение формулы (IV) подвергают взаимодействию с оксалилхлоридом, получая соединение формулы (V) где А и Вn имеют указанные выше значения, 17(I), получая соединение формулы (VII) где А, Вn и R1 имеют указанные выше значения,соединение формулы (VII) затем превращают путем каталитического гидрирования в соединение формулы (VIII) где А и R1 имеют указанные выше значения,соединение формулы (VIII) затем превращают путем каталитического гидрирования в щелочной среде в соединение формулы (IX) 18 соединение формулы (IX) подвергают взаимодействию с соединением формулы (X) где n и R2 имеют значения, указанные для формулы (I),получая после возможного удаления защитных групп соединение формулы (I), соединение формулы (I) необязательно превращают в соответствующий N-оксид, при необходимости,очищают с помощью обычных методов очистки,при необходимости, разделяют на изомеры с помощью обычных методов разделения и, при необходимости, превращают в аддитивные соли с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием. 16. Фармацевтическая композиция, предназначенная для использования в качестве ингибитора связанных с трипсином протеаз серина,включающая в качестве действующего вещества соединение по любому из пп.1-14 в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми инертными нетоксичными носителями. 17. Фармацевтическая композиция по п.16,предназначенная в качестве ингибитора тромбина. где А и R1 имеют указанные выше значения, Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2/6