Селективные модуляторы рецептора сфингозин-1-фосфата

СЕЛЕКТИВНЫЕ МОДУЛЯТОРЫ РЕЦЕПТОРА СФИНГОЗИН-1-ФОСФАТА Хуанг Лиминг, Брэнчмэри Ингурути,Мурджани Маниша, Тимони Грэгг Алан, Брукс Джэнифер Эл, Пич Роберт, Скот Фиона Лоррэйн, Хансон Майкл Ален (US) Описаны соединения структурной формулы I-R или I-S Мартинборуг Эстер, Боэм Маркус Эф,Йегер Адам Ричард, Тамийя Юнко, или их фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой NH2, NHC(=O)CH3 илиNHCH2COOH и Y представляет собой CN. Указанные композиции являются агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включая соединение по любому из пп.1-4, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. Также описан способ лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD), включая неспецифический язвенный колит и болезнь Крона у пациента, включающий введение пациенту в эффективном количестве соединений структурной формулы I-R или I-S или их фармацевтически приемлемой соли с частотой и длительностью,достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента. Перекрестные ссылки на родственные заявки Заявка на данный патент является продолжением заявки US 61/261301, поданной 13.11.2009, и заявки US 61/262474, поданной 18.11.2009, описание которых сюда полностью включено. Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются агонистами рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1. Уровень техники Рецептор S1P1/EDG1 представляет собой G-белоксвязанный рецептор (GPCR) и является членом семейства рецепторов гена дифференциации эндотелиальных клеток (ЭДГ). Эндогенные лиганды рецепторов ЭДГ включают лизофосфолипиды, такие как сфингозин-1-фосфат (S1P). Как и все GPCR, лигирование рецептора вызывает сигналы вторичного мессенджера через активацию G-белков (альфа, бета и гамма). Разработка низкомолекулярных агонистов и антагонистов S1P1 дала представление о некоторых физиологических ролях системы передачи сигнала рецептора S1P1/S1P. Агонизм рецептора S1P1 нарушает движение лимфоцитов, изолируя их в лимфатических узлах и других вторичных лимфоидных тканях. Это приводит к быстрой и обратимой лимфопении, и, вероятно, обусловлено лигированием рецептора как в лимфатических эндотелиальных клетках, так и в самих лимфоцитах (Rosen и др., Immunol. Rev.,2003, 195, c. 160-177). Клинически ценным следствием секвестрирования лимфоцитов является исключение их из проявлений воспалительных и/или аутоиммунных реакций в периферических тканях. Сообщалось также, что агонизм S1P1 способствует выживанию предшественников олигодендроцитов (Miron и др., Ann. Neurol., 2008, 63, c. 61-71). Эта активность, в сочетании с секвестрированием лимфоцитов, может быть полезна при лечении воспалительных и аутоиммунных заболеваний центральной нервной системы. Сущность изобретения Настоящее изобретение относится к гетероциклическим соединениям, подходящим для воздействия в качестве агонистов S1P рецептора подтипа 1, S1P1; способам получения и способам применения, таким как лечение злокачественностей, опосредованных активацией S1P1, или при медицинском показании активации S1P1. Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают соединение структурной формулы I-R или I-S или его фармацевтически приемлемую сольY представляет собой CN. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH. В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любое упомянутое выше соединение, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. Некоторые варианты осуществления изобретения представляют собой выделенный оптический изомер структурной формулы I-R или его фармацевтически приемлемую сольY представляет собой CN. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH. В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любой упомянутый выше изомер, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. Некоторые варианты осуществления изобретения представляют собой выделенный оптический изомер структурной формулы I-R или его фармацевтически приемлемая сольY представляет собой CN. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH. В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой композицию, являющуюся агонистом рецептора сфингозин-1-фосфата, включающую любой упомянутый выше изомер, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или растворителем. В некоторых вариантах осуществления изобретение представляет собой способ лечения воспалительного заболевания кишечника (IBD) у пациента, включающий введение пациенту в эффективном количестве соединений структурной формулы I-R или I-S или их фармацевтически приемлемой соли с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациентаY представляет собой CN. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NH2. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2CH2OH. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHC(=O)CH3. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой NHCH2COOH. В некоторых вариантах осуществления способа IBD представляет собой неспецифический язвенный колит. В некоторых вариантах осуществленияспособа IBD представляет собой болезнь Крона. Подробное описание изобретения В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфопении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения по крайней мере в пять раз больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфопении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения составляет по крайней мере 150% терапевтического индекса энантиомера такого соединения. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению, выбранному из соединений 49, 50, 85, 86, 90, 91, 138, 139, 163, 164, 186, 187, 211, 234, 235 и 241 или любой его фармацевтически приемлемой соли. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 50, 86 или 139 или любой его фармацевтически приемлемой соли. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 163 или 186 или любой его фармацевтически приемлемой соли. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 211, 234 или 241 или любой фармацевтически приемлемой соли. В некоторых вариантах осуществления описаны способы применения соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства, подходящего для лечения нарушения или злокачественности,в которых медицински показана активация или ингибирование рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1. Как используется в описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают множественные формы, если из контекста ясно не предполагается иное. Как используется здесь, "пациент" (в отношении лечения) означает млекопитающих и немлекопитающих. Млекопитающие включают, например, людей; нечеловекообразных приматов, например приматов и обезьян; крупный рогатый скот; лошадей; овец и коз. Немлекопитающие включают, например, рыб и птиц. Используемый здесь термин "S1P1" относится к подтипу 1 рецептора сфингозин-1-фосфата, в то время как другие подтипы рецептора сфингозин-1-фосфата обозначены соответствующим образом, например, рецептор сфингозин-1-фосфата подтипа 3 обозначен как "S1P3"."Рецептор", как хорошо известно в данной области, представляет собой биомолекулярную группу,обычно содержащую белок, который специфически связывает структурный класс лигандов или единичный нативный лиганд в живом организме, связывание с которыми заставляет рецептор преобразовывать связывающий сигнал в другой вид биологического действия, такой как сигнализация клетки, в которой произошло связывание, которой заставляет клетки изменять свою функцию в некоторой степени. Примером трансдукции является рецепторное связывание лиганда, вызывающее изменение активности "Gбелка" в цитоплазме живой клетки. Любая молекула, естественным или нет, что связывает рецептор и активирует его для передачи сигнала, называется "состязания" или "активатор". Любая молекула, природная или нет, которая связывается с рецептором, но не вызывает передачи сигнала, и которая может блокировать связывание агонистов и их последующую передачу сигнала, называется "антагонистом"."Соединение S1P1", или "агонист S1P1", или "активатор S1P1", или "ингибитор S1P1", или "антагонист S1P1" являются терминами, используемыми здесь для описанных соединений, которые взаимодействуют в некотором роде с рецептором S1P подтипа 1. Они могут быть агонистами или активаторами,или они могут быть антагонистами или ингибиторами. "Соединение S1P1" по изобретению может обладать селективным действием на подтип 1 S1P рецепторного семейства, например соединение по изобретению может работать при более низкой концентрации в отношении подтипа 1 S1P рецепторного семейства по сравнению с другими подтипами S1P рецепторного семейства, в частности, "соединение S1P1" по изобретению может селективно воздействовать на подтип 1 рецепторов по сравнению с их действием на подтип 3 или рецепторы "S1P3". В некоторых вариантах осуществления соединения по изобретению являются ортостатическими агонистами. В некоторых других вариантах осуществления соединения по изобретению являются аллостерическими агонистами. Агонисты рецептора могут быть классифицированы как ортостерические или аллостерические. Ортостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что существенно перекрывается со связыванием природного лиганда и повторяет ключевые взаимодействия рецептора с природным лигандом. Ортостерические агонисты активируют рецептор с помощью молекулярного механизма, похожего на природный лиганд, и будут конкурировать с природным лигандом, и будут конкурентно антагонизироваться фармакологическими средствами, которые являются конкурентными антагонистами для природного лиганда. Аллостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что вызывает некоторые существенные взаимодействия, которые не перекрываются частично или полностью естественным лигандом. Аллостерические агонисты являются истинными агонистами и не являются аллостерическими усилителями. Следовательно, они активируют сигнализацию рецептора отдельно и без необходимости субмаксимальной концентрации природного лиганда. Аллостерические агонисты могут быть идентифицированы, когда известно, что антагонист является конкурентоспособными относительно ортостерического лиганда, показывающего неконкурентный антагонизм. Сайт аллостерического агониста может отражаться на рецепторном мутагенезе. Введение точечных мутаций в рецепторы, которые сохраняют рецепторную активацию аллостерическим агонистом, тогда как ослабление или отмена передачи сигнала, индуцированного ортостерическим агонистом или наоборот, обеспечивает формальные доказательства различия во взаимодействиях связывания. Ортостерические агонисты могут дестабилизировать структуры и конформации GPCR, в то время как аллостерические агонистов могут стабилизировать или дестабилизировать структуры и конформации GPCR. Аллостерические агонисты, в силу их различных взаимодействий с рецептором, могут быть фармацевтически полезны, поскольку аллостерический сайт может предоставлять дополнительные возможности для активности агониста и селективности в соответствующем семействе подтипов рецептора, которые разделяют аналогичный ортостерический лиганд. Кроме того, аллостерический сайт может потребовать различные физико-химические свойства агонистов по сравнению с ортостерическим лигандом. Эти химико-физические свойства, в том числе гидрофобность, ароматичность, распределение заряда и растворимость, могут также обеспечивать преимущества при производстве агонистов различных профилей фармакокинетики, биодоступности, распределения и метаболизма, которые способствуют разработке эффективных фармацевтических веществ. Термин "по существу", как здесь используется, означает полностью или почти полностью, например, композиция, которая является "по существу, свободной" от компонента, не содержит ни одного компонента или содержит такое следовое количество, что любое соответствующее функциональное свойство композиции не зависит от присутствия следового количества, или если соединение является "по существу, чистым", то присутствуют лишь незначительные следы примесей."Лечение" или "лечить" здесь относится к облегчению симптомов, связанных с расстройствами или заболеваниями, или ингибирование дальнейшего прогрессирования или ухудшения этих симптомов, или предупреждение или профилактику заболевания или расстройства. Выражение "эффективное количество", когда используется для описания применения соединения по изобретению для обеспечения лечения пациентов, страдающих расстройствами или злокачественностями, опосредованными рецептором сфингозин-1-фосфата подтипа 1, относится к количеству соединения по изобретению, которое является эффективным для связывания в качестве агонистов или антагонистов рецептора S1P1 в тканях человека, где S1P1 участвует в нарушении, при котором такое связывание происходит на уровне, необходимом для обеспечения полезного терапевтического воздействия на пациента. Аналогично, как здесь используется, "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" соединения по изобретению относится к количеству соединения, которое облегчает, в целом или в части, симптомы, связанные с нарушением или состоянием, или останавливает или замедляет дальнейшее прогрессирование или ухудшение этих симптомов, или препятствует или обеспечивает профилактику нарушения или состояния. В частности, "терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному, при дозах и в течение определенного необходимого времени, для достижения желаемого терапевтического результата, действуя как агонист активности рецептора сфингозин-1 фосфата подтипа 1 (S1P1). Терапевтически эффективное количество является также тем, при котором токсичные или вредные эффекты соединения по изобретению превышают терапевтически благоприятные эффекты. Например, в контексте лечения злокачественности, опосредованной активацией S1P1, терапевтически эффективное количество агониста S1P1 по изобретению представляет собой количество,достаточное для контроля злокачественностью, чтобы смягчить ход злокачественности, или для облегчения симптомов злокачественности. Примеры злокачественностей, которые могут быть излечены, включают рассеянный склероз, отторжение трансплантата, взрослый респираторный дистресс-синдром. Подразумеваются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы структур, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения, используемые в настоящем изобретении, могут включать обогащенные или разделенные оптические изомеры при любых или всех асимметричных атомах, как указано в изображении, в любой степени обогащения. Рацемическая и диастереомерная смеси, а также индивидуальные оптические изомеры могут быть синтезированы так, чтобы быть, по существу, свободными от их энантиомерных или диастереомерных партнеров, и все это включено в объем конкретных вариантов осуществления изобретения. Изомеры, полученные при наличии хирального центра, включают пары неналагаемых изомеров,которые называют "энантиомеры". Отдельные энантиомеры чистого соединения являются оптически активными, то есть они способны вращать плоскость поляризованного света. Отдельные энантиомеры обозначены в соответствии с системой Кана-Ингольда-Прелога. После определения приоритета в четырех группах, молекулы ориентируют так, что группа с самой низкой степенью важности отворачивается от зрителя. Затем, если убывание степени важности других групп происходит по часовой стрелке, то молекулу обозначают (R), и если убывание степени важности других групп происходит против часовой стрелки, то молекулу обозначают (S). В примерах степень важности Кана-Ингольда-Прелога представлена как ABCD. Атом с самой низкой степенью важности D ориентирован от зрителя."Выделенный оптический изомер" обозначает соединение, которое было, по существу, очищено от соответствующего оптического изомера (изомеров) той же формулы. Предпочтительно выделенные изомеры имеют чистоту по крайней мере около 80%, более предпочтительно по крайней мере 90%, еще более предпочтительно по крайней мере 98%, наиболее предпочтительно по крайней мере около 99%, по весу. Поворотная изомерия. Понятно, что вследствие химических свойств (например, резонансное придание некоторого характера двойной связи C-N) ограниченного вращения вокруг амидной связи (как показано ниже), можно наблюдать отдельные виды ротамера, и даже, при определенных обстоятельствах, выделить такие виды,пример показан ниже. Далее ясно, что определенные структурные элементы, включая пространственные или объемные заместители на атоме азота амида, могут повысить стабильность ротамера до такой степени, что соединение может быть выделено, и существовать независимо, как отдельный стабильный ротамер. Настоящее изобретение, следовательно, включает любые возможные стабильные ротамеры соединений по изобретению, которые являются биологически активными при лечении заболевания, нарушения или состояния, при котором соединение по изобретению может быть эффективно, как здесь описано. Региоизомерия. Предпочтительные соединения настоящего изобретения имеют особое пространственное расположение заместителей в ароматических кольцах, что связано с взаимосвязью структуры и активности, демонстрируемой классом соединения. Часто такой механизм замещения обозначается системой нумерации, однако система нумерации часто не согласуется с различными циклическими системами. В шестичленных ароматических системах пространственные расположения определяются общей номенклатурой Все структуры, входящие в объем формулы изобретения, являются "химически осуществимыми",это подразумевает, что структуры, приведенные в любых комбинациях или субкомбинациях необязательных заместителей, перечисленных в формуле изобретения, физически способны существовать по крайней мере с некоторой стабильностью, что может быть определено законами структурной химии и экспериментами. Структуры, которые являются химически неприемлемыми, не входят в объем заявляемых соединений. Термины "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" являются открытыми терминами,используемыми в настоящем документе, и не исключают наличия дополнительных элементов или компонентов. В заявленном элементе использование формы "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" означает, что из какого бы элемента ни был он составлен, имеет, включает или состоит, он необязательно представляет собой единственный элемент, охватываемый заявленным термином, который содержит это слово."Соль", как хорошо известно в данной области техники, включает органическое соединение, такое как карбоновая кислота, сульфокислота, или амин, в ионной форме, в комбинации с противоионом. Например, кислоты в анионной форме могут образовывать соли с катионами, такими как катионы металла,например натрия, калия и им подобных; с солями аммония, такими как NH4+ или катионы различных аминов, в том числе тетраалкильные соли аммония, такие как тетраметиламмониевые и алкиламмониевые соли, такие как соли трометамина, или другие катионы, такие как триметилсульфоний и им подобные. "Фармацевтически приемлемая" или "фармакологически приемлемая" соль представляет собой соль, полученную из иона, который был одобрен для использования человеком, и, как правило, нетоксичную, такую как хлорид или натриевая соль. "Цвиттерион" является внутренней солью, такой, которая может быть получена в молекуле, которая имеет по крайней мере две ионизируемых группы, одну - образующую анион, а другую - катион, которые служат для уравновешивают друг друга. Например, аминокислоты, такие как глицин, могут существовать в цвиттерионной форме. "Цвиттерион" является солью в приведенном значении. Соединения настоящего изобретения могут присутствовать в форме солей. Термин "соли" включает дополнительные соли свободных кислот или свободных оснований, которые являются соединениями по изобретению. Соли могут быть "фармацевтически приемлемыми солями". Термин"фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые обладают токсичностью в пределах,которые обеспечивают применимость для фармацевтического применения. Фармацевтически неприемлемые соли тем не менее могут обладать такими свойствами, как высокая кристалличность, которые находят применение при осуществлении настоящего изобретения, таких как, например удобство в процессе синтеза, очистки или получения состава из соединений по изобретению. Подходящие фармацевтически приемлемые соли кислот могут быть получены из неорганических кислот или из органических кислот. Примерами неорганических кислот являются соляная, бромистоводородная, иодисто-водородная, азотная, угольная, серная и фосфорная кислоты. Соответствующие органические кислоты могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических,аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, глюкуроновая, малеиновая, фумаровая, пировиноградная, аспарагиновая, глутаминовая, бензойная, антраниловая, 4-гидроксибензойная, фенилуксусная, миндальная, эмбоновая (памовая), метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, пантотеновая,трифторметансульфокислота, 2-гидроксиэтансульфоновая, п-толуолсульфокислота, сульфаниловая, циклогексиламиносульфоновая, стеариновая, альгиновая, -гидроксибутановая, салициловая, галактаровая и галактуроновая кислота. Примеры фармацевтически неприемлемых кислотных аддитивных солей включают, например перхлораты и тетрафторбораты. Подходящие фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли соединений по изобретению включают, например, соли с металлом, в том числе щелочным металлом, щелочноземельным металлом и соли переходных металлов, такие как, например, соли кальция, магния, калия, натрия и цинка. Фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли также включают органические соли, полученные из основных аминов, таких как, например, N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин) и новокаин. Примеры фармацевтически неприемлемых основных аддитивных солей включают соли лития и цианаты. Хотя фармацевтически неприемлемые соли обычно не являются полезными в качестве лекарственных средств, такие соли могут быть полезны, например, в качестве промежуточных соединении в синтезе соединении, например для их очистки перекристаллизацией. Все эти соли могут быть получены с помощью традиционных средств из соответствующего соединения реакцией, например, соответствующей кислоты или основания с соединением. Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к нетоксичным неорганическим или органическим кислотным и/или основным солям, см., например, статью Lit и др., Salt Selection for Basic Drugs,1986, Int J. Pharm., 33, c. 201-217, приведенную в качестве ссылки. Неограничивающие примеры возможных солей по изобретению включают, но не ограничиваются ими, гидрохлорид, цитрат, гликолат, фумарат, малат, тартрат, мезилат, эзилат, циннамат, изетионат,сульфат, фосфат, дифосфат, нитрат, гидробромид, гидроиодид, сукцинат, формиат, ацетат, дихлорацетат,лактат, п-толуолсульфонат, памитат, пидолат, памоат, салицилат, 4-аминосалицилат, бензоат, 4 ацетамидобензоат, глутамат, аспартат, гликолат, адипат, альгинат, аскорбат, безилат, камфорат, камфорсульфонат, камсилат, капрат, капроат, цикламат, лаурилсульфат, эдисилат, гентисат, галактарат, глуцептат, глюконат, глюкуронат, оксоглутарат, гиппурат, лактобионат, малонат, малеат, миндалат, напсилат,нападисилат, оксалат, олеат, себакат, стеарат, сукцинат, тиоцианат, ундециленат и ксинафоат. Некоторые соединения по изобретению и их соли могут существовать в более чем одной кристаллической форме, и настоящее изобретение включает каждую кристаллическую форму и их смеси. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированной, а также сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, образуя гидраты или аддукты со спиртами, такими как C1-4 спирты и им подобные. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть выделены в смеси с молекулами растворителя путем кристаллизации при выпаривании соответствующего растворителя. Такие растворители включают, но не ограничиваются ими,толуол, тетрагидрофуран, диоксан, диметилформамид, ацетонитрил, ацетат, такой как метилацетат, этил-6 024801 ацетат, бутилацетат, изобутилацетат, пропил- и изопропилацетат, простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и этиловый эфир, спирты, такие как метанол, этанол, 1- или 2-бутанол, 1- или 2-пропанол, пентанол, диметилсульфоксид. Обычно, изображение соединения структурой или наименованием подразумевает включение соединения в любой форме (например, само по себе, в виде гидрата, сольвата или в иной смеси). Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах групп Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается терминами отдельных членов или подгрупп членов группы Маркуша. Например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора и йода, притязания распространяются на X, представляющий собой бром, и наX, представляющий собой хлор и бром. Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах группы Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается в терминах любой комбинации отдельных членов или подгруппы членов группы Маркуша. Таким образом, например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора и йода, Y выбран из группы, состоящей из метила, этила и пропила, подробно описаны притязания, где X представляет собой бром и Y представляет собой метил. Композиции и комбинации для лечения. Соединения S1P1, их фармацевтически приемлемые соли или гидролизуемые сложные эфиры настоящего изобретения могут объединяться с фармацевтически приемлемым носителем для получения фармацевтических композиций, полезных для лечения описанных здесь биологических состояний или нарушений у млекопитающего, и более предпочтительно, человека. Конкретный носитель, используемый в этих фармацевтических композициях, может изменяться в зависимости от типа нужного введения (например, внутривенного, перорального, местного, суппозиторного или парентерального). При получении композиций в пероральных жидких лекарственных формам (например, суспензии,эликсиры и растворы) могут использоваться обычные фармацевтические средства, такие как вода, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и им подобное. Кроме того, при получении пероральных твердых лекарственных форм (например, порошки, таблетки и капсулы), могут использоваться носители, такие как крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и им подобные. Другой аспект варианта осуществления по изобретению относится к композициям соединений по изобретению, отдельно или в комбинации с другим ингибитором S1P1 или терапевтическим агентом другого типа, или ими обоими. Как указано в настоящем документе, соединения по изобретению включают стереоизомеры, таутомеры, сольваты, гидраты, соли, в том числе фармацевтически приемлемые соли, и их смеси. Композиции, содержащие соединение по изобретению, могут быть получены обычными методами, например, как описано в книге The Science and Practice of Pharmacy, 19-oe издание, 1995, включенной в качестве ссылки. Композиции могут присутствовать в обычных формах, например капсулах, таблетках, аэрозолях, растворах, суспензиях или составах местного применения. Типичные композиции включают соединение по изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент, которым может быть носитель или разбавитель. Например, активное соединение, как правило,смешивают с носителем, или разбавляют носителем, или заключают в носитель, который может присутствовать в виде ампул, капсул, саше, бумаги или других контейнеров. Когда активное соединение смешивают с носителем, или когда носитель выступает разбавителем, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который выступает в качестве носителя, эксципиента или среды для активного соединения. Активное соединение может быть адсорбировано на гранулированном твердом носителе,например, содержащемся в саше. Некоторыми примерами подходящих носителей являются вода, растворы солей, спирты, полиэтиленгликоль, полигидроксиэтоксилированное касторовое масло, арахисовое масло, оливковое масло, желатин, лактоза, терра альба, сахароза, декстрин, карбонат магния, сахар, циклодекстрин, амилоза, стеарат магния, тальк, желатин, агар, пектин, камедь, стеариновая кислота или низшие алкильные эфиры целлюлозы, кремниевая кислота, жирные кислоты, амины жирных кислот, моноглицериды и диглицериды жирных кислот, пентаэритритовые эфиры жирных кислот, полиоксиэтилен,гидроксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон. Кроме того, носитель или разбавитель может включать любой материал замедленного высвобождения, известный в данной области, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, отдельно или в смеси с воском. Составы могут быть смешаны с добавками, которые не реагируют с активными соединениями. Такие добавки могут включать увлажняющие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, соль для регулирования осмотического давления, буферы и/или красители, консерванты, подсластители или ароматизаторы. При желании композиции можно стерилизовать. Способом введения может быть любой способ, который эффективно транспортирует активное соединение по изобретению, которое ингибирует активность фермента киназы фокальной адгезии, в соответствующий нужный сайт действия, такой как пероральный, назальный, легочный, буккальный, подкожный, внутрикожный, трансдермальный или парентеральный, например, ректальный, жировой, подкожный, внутривенный, внутриуретральный, внутримышечный, интраназальный, глазной раствор или мазь, причем пероральный путь является предпочтительным. Для парентерального введения носитель, как правило, включает стерильную воду, хотя также могут быть включены другие ингредиенты, которые облегчают растворимость или выступают в качестве консервантов. Кроме того, также могут быть получены инъекционные суспензии, и в этом случае могут использоваться соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобные. Для местного введения соединения настоящего изобретения могут быть составлены с помощью мягких увлажняющих основ, таких как мази или кремы. Если для перорального введения используется твердый носитель, препарат может быть таблетирован, помещен в твердую желатиновую капсулу в виде порошка или гранул, или он может присутствовать в форме пастилок или таблеток. Если используется жидкий носитель, препарат может присутствовать в виде сиропа, эмульсии, мягких желатиновых капсул или стерильной инъекционной жидкости, такой как водная или неводная жидкая суспензия или раствор. Инъекционные дозированные формы, как правило, включают водные суспензии или масляные суспензии, которые могут быть получены с использованием подходящего диспергирующего или увлажняющего агента и суспендирующего агента. Инъекционные формы могут присутствовать в растворенной фазе или в форме суспензии, которую получают с растворителем или разбавителем. Приемлемые растворители или носители включают стерилизованную воду, раствор Рингера или изотонический водный солевой раствор. Альтернативно, стерильные масла могут использоваться в качестве растворителей или суспендирующих агентов. Предпочтительно масло или жирная кислота является нелетучей, включая природные или синтетические масла, жирные кислоты, моно-, ди- или триглицериды. Для инъекций состав также может представлять собой порошок, подходящий для восстановления соответствующим раствором, как описано выше. Примеры их включают, но не ограничиваются ими, порошки, высушенные замораживанием-сушкой, роторной сушкой или сушкой спреем, аморфные порошки, гранулы, осадки или твердые частицы. Для инъекций составы необязательно могут содержать стабилизаторы, модификаторы pH, поверхностно-активные вещества, модификаторы биодоступности и их комбинации. Соединения могут быть составлены для парентерального введения путем инъекции, такой как болюсная инъекция или инфузия. Единичной дозированной формой для инъекций могут быть ампулы или многодозовые контейнеры. Составы по изобретению могут быть разработаны с получением быстрого, длительного или отсроченного высвобождения активного ингредиента после введения пациенту, используя методики, хорошо известные в данной области техники. Таким образом, составы можно получать для контролируемого высвобождения или для медленного высвобождения. Композиции, предусмотренные настоящим изобретением, могут включать, например, мицеллы или липосомы или другие инкапсулированные формы, или могут вводиться в форме длительного высвобождения для обеспечения длительного хранения и/или эффективной доставки. Следовательно, составы могут быть спрессованы в шарики или цилиндры и имплантированы подкожно или внутримышечно в качестве депонируемых инъекций. Такие имплантаты могут включать известные инертные материалы, такие как силиконы и биоразлагаемые полимеры, например, полилактид-полигликолиды. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Для назального введения препарат может содержать соединение по изобретению, который ингибирует активность киназы фокальной адгезии, растворенный или суспендированный в жидком носителе,предпочтительно водном носителе, для аэрозольного применения. Носитель может содержать добавки,такие как солюбилизирующие агенты, например пропиленгликоль, поверхностно-активные вещества,усилители абсорбции, такие как лецитин (фосфатидилхолин) или циклодекстрин, или консерванты, такие как парабены. Для парентерального применения особенно подходят инъекционные растворы или суспензии,предпочтительно водные растворы с активным соединением, растворенным в полигидроксилированном касторовом масле. Дозированные формы могут вводиться один раз в день или более одного раза в день, например дважды или трижды в день. Альтернативно, лекарственныеформы могут вводиться реже, чем один раз в день, например на любой другой день или один раз в неделю, если установлено, что это целесообразно по назначению врача. Соединения по изобретению могут использоваться терапевтически в комбинации с i) одним или несколькими другими ингибиторами S1P1 и/или ii) одним или несколькими другими типами ингибиторов протеинкиназы и/или одним или несколькими другими типами терапевтических агентов, которые могут вводиться перорально в той же дозированной форме, в отдельной пероральной лекарственной форме(например, последовательно или непоследовательно) или в виде инъекции вместе или раздельно (например, последовательно или непоследовательно). Соответственно, в другом варианте осуществления изобретение относится к комбинациям, включающим:b) одно или несколько соединений, включающих:i) другие соединения настоящего изобретения,-8 024801ii) другие лекарственные средства, пригодные для лечения злокачественности, для которых медицински показана активация S1P1, например рассеянного склероза, отторжения трансплантата или зрелого респираторного дистресс-синдрома. Дозы и составы для других используемых агентов, где возможно, приведены в последнем выпускеPhysicians' Desk Reference, включенном в качестве ссылки. Способы лечения. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает перорально биодоступные соединения, которые специфично агонизируют S1P1 без связывания (S1P2, S1P3 и S1P4), или имеют существенную специфичность по отношению к (S1P5), другим рецепторам EDG. Селективный агонист S1P1 может использоваться для лечения заболеваний с аутоиммунным компонентом, компонентом гиперактивного иммунного ответа, ангиогенеза или воспалительного компонента, но не ограничиваются такими состояниями. Селективные агонисты S1P1 имеют преимущества по сравнению с обычными терапиями благодаря повышенному терапевтическому окну благодаря пониженной токсичности вследствие привлечения других рецепторов EDG. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает соединения, которые связываются с высоким сродством и специфичностью с рецептором S1P1 в качестве агониста. После лигирования рецептора S1P1 агонистом, передача сигнала происходит через Gi, ингибируя выработку цАМФ аденилатциклазой. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу активации или агонизма (то есть проявления агонизирующего действия, действию в качестве агонистов) подтипа рецептора сфингозин-1-фосфата, такого как S1P1, соединением по изобретению. Способ включает контактирование рецептора с соединением по изобретению в соответствующей концентрации, чтобы вызвать активацию рецептора. Контактирование может происходить in vitro, например при проведении анализа, чтобы определить активность в отношении активации рецептора S1P соединением по изобретению, проходящим эксперименты, связанные с представлением официального одобрения. В некоторых вариантах осуществления способ активации рецептора S1P, такого как S1P1, может также осуществляться in vivo, то есть в живом организме млекопитающего, такого как человек или тестируемое животное. Соединение по изобретению может вводиться в живой организм одним из способов,описанных выше, например, перорально, или может вводиться локально в ткань организма, например в виде инъекции в опухоль организма. В присутствии соединения по изобретению имеет место активация рецептора, и может быть изучена его эффективность. Вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения злокачественности у пациентов, для которых медицински показана активация рецептора S1P, такого как S1P1, в котором пациенту вводят соединение по изобретению в дозе, с частотой и длительностью, достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента. Соединение по изобретению может вводиться любыми подходящими средствами, примеры которых описаны выше. Осуществление некоторых вариантов. Схема 1(S)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 1, используя (R)-(+)-2-метилCBS-оксазаборолидин на стадии (ii). Рацемический материал может быть получен аналогично методике,приведенной на схеме 1, используя NaBH4 на стадии (ii).(S)-энантиомер и рацемический материал может быть получен аналогично методике, приведенной на схеме 2, используя соответствующие исходные материалы. Схема 3 Реагенты: (i) (a) MsCl, пиридин; (b) TsCl, пиридин; (с) NsCl, пиридин; (d) SOCl2, ДХМ; (е) SOCl2,пиридин, ДХМ; (f) NaN3, PPh3, CBr4; (ii) (a) DIEA, DMA, HNR'R"; (b) DIEA, NaBr или NaI, DMA,HNR'R". Энантиомерно обогащенный материал может быть получен аналогично методике, приведенной на схеме 3, используя (R)- или (S)-инданолы. Схема 4R"-LG, где LG представляет собой уходящую группу, K2CO3, CH3CN; (b) R1-CO2H или R2-CO2H, HOBt,EDC, DMF или R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ; (c) R1-SO2Cl или R3-SO2Cl, ТЭА, ДХМ; (d) R2-CHO,HOAc, NaBH4 или NaCNBH3 или Na(OAc)3BH, MeOH; (e) R1-OCOCl или R2-OCOCl, DIEA, DMF;(f) HN(R5R5), CDI, ТЭА, ДХМ; (g) H2NSO2NH2, , диоксан; (h) диметилоксиран, , EtOH; (x) (а) если R' или R"=H, затем могут осуществляться реакции (ix)(a-d); (b) если R' или R" содержит сложный эфир, затем может осуществляться (i) гидролиз NaOH, EtOH или (ii) восстановление NaBH4, MeOH; (с) если R' или R" содержит кислоту, затем могут осуществляться конденсации HN(R5R5), HOBt, EDC, DMF; (d) если R' или R" содержит подходящий активированный алкен, затем могут осуществляться реакции Михаэлиса HN(R5R5), DMF.(S)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 4, используя (S)-2 метилпропан-2-сульфинамид на стадии (ii). Схема 5 Реагенты: (i) NaH, DMF и R-галогенид; (ii) NH2OHHCl или Na2CO3, ТЭА, EtOH; (iii) HOBt, EDC,замещенная бензойная кислота, DMF; (iv) 4 M HCl в диоксане; (v) (a) R'-LG, ТЭА, ДХМ; (b) R1-SO2Cl или R3-SO2Cl, ТЭА, ДХМ; (c) R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ или R1-CO2H или R2-CO2H, HOBt, EDC,DMF или R1-COCl или R2-COCl, ТЭА, ДХМ; (d) R2-CHO, HOAc, NaBH4 или NaCNBH3 или Na(OAc)3BH,MeOH; (а) если R' или R" содержит сложный эфир, затем может осуществляться (i) гидролиз NaOH,EtOH или (ii) восстановление NaBH4, MeOH; (b) если R' или R" содержит кислоту, затем могут осуществляться конденсации H(R5R5), HOBt, EDC, DMF; (с) если R' или R" содержит подходящим образом активированный алкен, затем может осуществляться реакция Михаэлиса HN(R5R5)DMF.(S)-энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 5, из (S)-трет-бутил 4-циано 2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат. Примеры Общие способы. 1Mestrec 5,3,0 и 6,0,1. Пики 13C ЯМР, которые помещены в скобки, представляют собой два ротамера одного углерода. Масс-спектры (LCMS) получали с помощью Agilent 1100/6110 ВЭЖХ системы, оснащенной Thompson ODS-A, 100A, 5 мкм (504,6 мм) колонка, используя воду с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 20-100% подвижной фазы В в течение 2,5 мин, затем при 100% в течение 2,5 мин. Скорость потока составляла 1 мл/мин. Если не указано иное, данные LCMS приведены с помощью этого способа. Для более гидрофобных соединений использовали следующий градиент, обозначенный как способ 1: 40-95% в течение 0,5 мин, выдерживали при 95% в течение 8,5 мин, затем возвращали до 40% в течение 2 мин, со скоростью потока 1 мл/мин. Конечные соединения проверяли на чистоту с помощью способа 2: 5% в течение 1 мин, 5-95% в течение 9 мин, затем выдерживали при 95% в течение 5 мин, со скоростью потока 1 мл/мин. Энантиомерный избыток определяли объединением пиков, которые разделяли на колонке Chiralpak AD-H, 2504,6 мм, размер частиц 5 мкм. Скорость потока 1 мл/мин и изократная подвижная фаза. Если не указано иное, хиральные данные приведены с помощью этого способа. Альтернативно, хиральные разделения осуществляли в следующих условиях, обозначенных как хиральный способ 1: колонка Chiralpak AY-H, 2504,6 мм, размер частиц 5 мкм. Скорость потока 1 мл/мин и изократная подвижная фаза. Хиральный способ 2: колонка Chiralcel OZ-3, 1504,6 мм, размер частиц 3 мкм, со скоростью потока 0,75 мл/мин. Пиридин, дихлорметан (ДХМ), тетрагидрофуран (ТГФ) и толуол использовали в методиках от Aldrich в надежно закрытых бутылках, хранящихся в атмосфере азота (N2). Все реакционные смеси перемешивали магнитной мешалкой, и температурами являются внешние температуры реакции. Хроматографии осуществляли с помощью Combiflash Rf ускоренной системы очистки(Teledyne Isco), оснащенной Redisep (Teledyne Isco), на колонках с силикагелем (SiO2). Препаративные ВЭЖХ очистки осуществляли в системе Varian Pro Star/Prep Star, используя воду, содержащую 0,05% трифторуксусной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 10-80% с подвижной фазой В в течение 12 мин, выдерживали при 80% в течение 2 мин, и затем восстанавливали до 10% в течение 2 мин, со скоростью потока 22 мл/мин. Могут использоваться другие методы, аналогичные описанному. Фракции собирали с помощью коллектора фракций Varian Prostar, и упаривали с помощью вакуумного насоса SavantSpeedVac Plus. Соединения с солеобразующими центрами являлись солями с трифторуксусной кислотой(ТФУК). Микроволновое облучение осуществляли с помощью микроволнового реактора Biotage Initiator,оснащенного сосудами для микроволнового излучения Biotage. Использовали следующие сокращения: этилацетат (EA), триэтиламин (ТЭА), диэтиламин (DEA), гидроксибензотриазол (HOBt), гидрохлорид 1 этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC), изопропанол (IPA), диметилформамид (DMF), диметилацетамид (DMA). Норит представляет собой активированный уголь. Экспериментальные методики. 1-Оксо-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрил (INT-1) К перемешиваемому раствору 4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-она (100,0 г, 0,48 моль) в 150 мл 1 метил-2-пирролидин (NMP) добавляли цианид цинка (111,8 г, 0,95 моль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий [Pd(PPh3)4] (2,75 г, 0,024 моль). Раствор дегазировали N2 и реакционную смесь нагревали при 95C в течение 7 ч. После охлаждения реакционную смесь выливали в ледяную воду(3,5 л). Соединение и неорганические соли Zn осаждались. Твердое вещество собирали и разделяли между ДХМ (3100 мл) и водой. Органические слои отфильтровывали для удаления солей Zn и фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из смеси 4:1 EtOH и МеОН (400 мл) с получением 45,5 г В 3-горлую колбу, оснащенную внутренним термометром и капельной воронкой, добавляли раствор (R)-(+)-2-метил-CBS-оксазаборолидина в толуоле (3,0 мл) и боран-диметилсульфид (300 мкл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем разбавляли ДХМ (25 мл). Добавляли боран-диметилсульфид (6,0 мл) и после перемешивания в течение 5 мин реакционную смесь охлаждали до -20C. Добавляли по каплям 1-оксо-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрил INT-1 (4,7 г, 30 ммоль) в ДХМ (25 мл) через капельную воронку в течение 20 мин, поддерживая температуру реакции при -205C. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем гасили добавлением по каплям МеОН (20 мл). После прекращения выделения водорода добавляли МеОН (30 мл) и удаляли нагреванием при атмосферном давлении. Добавляли МеОН (50 мл) два раза, и дважды удаляли нагреванием. Весь растворитель упаривали с получением твердого вещества, которое перекристаллизовывали из EA (9 мл) и гексана (22 мл). Соединение отфильтровывали и промывали смесью 5:1 гексан/EA (30 мл) с получением 3,73 г (78%) (S)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила INT-2 в виде белого порошка. К перемешиваемой суспензии 1-оксо-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила (1,2 г, 7,64 ммоль) и силикагеля (каталитическое количество) в EtOH при 0C добавляли NaBH4 (237,2 мг, 7,64 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и продукт очищали хроматографией (50% EA/гексан) с получением 1,02 г (82,3%) 1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H9NO; 159,18; обнаруж. 160,1 [M+H]+, tR=2,39 мин.EtOH (20 мл) добавляли (S)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрил INT-2 (1,59 г, 10 ммоль) одной порцией и раствор нагревали при кипении с обратным холодильником. Через 16 ч реакционную смесь охлаждали и отфильтровывали для удаления твердых веществ. EtOH удаляли и соединение очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 1,74 г (90%) (S)-N,1-дигидрокси-2,3-дигидро-1H-инден 4-карбоксимидамида INT-3 в виде белой пены. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H12N2O2: 192,1; обнаруж.: 193,1 [M+H]+, tR=0,56 мин. 1(R)-N,1-Дигидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбоксимидамид получали аналогичным образом из(R)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила. Общая методика 1. Получение инданолов. К бензойной кислоте (1 экв.) в DMF (0,15 М) добавляли HOBt (1,5 экв.) и EDC (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2-16 ч до полной активации кислоты.(R)- или (S)-N,1-дигидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбоксимидамид добавляли одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до полного образования предварительно циклизованного промежуточного соединения. Реакционную смесь затем нагревали при 85C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду, смесь оставляли выдерживаться. Полученный осадок отфильтровывали. Материал очищали хроматографией(EA/гексан) или перекристаллизовывали с получением 5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)бензолов в виде белого твердого вещества. Соединения 1-12 получали, используя общую методику 1. Получали, используя общую методику 1. К 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоте (93,2 мг, 0,45 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли HOBt (104,3 мг, 0,68 ммоль) и EDC (130,6 мг, 0,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч до полной активации кислоты. (S)-N,1 дигидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбоксимидамид INT-2 (97 мг, 0,5 ммоль) добавляли одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Сырой материал нагревали при 85C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (15 мл), смесь оставляли выдерживаться и темно-коричневый осадок отфильтровывали. Осадок очищали хроматографией на силикагеле (EA/гексан) с получением 73 мг (40%) (S)-5-(3-(1-гидрокси-2,3 дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 6 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H19N3O3: 361,1; обнаруж. 362,1 [M+H]+, tR=3,63 мин. 1(S)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил элюировали 20% IPA в гексане: 99,9% ее, tR=25,07 мин. (R)-5-(3-(1-гидрокси 2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 5 и рацемический материал получали аналогичным образом из (R)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила и рацемического 1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрила соответственно, используя общую методику 1. tR для (R)-энантиомера=17,60 мин. В колбу, содержащую (R)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил 5 (36 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (1 мл), добавляли пиридин (24 мкл, 0,3 ммоль) и ацетилхлорид (21 мкл, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Сырую реакционную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушили сульфатом магния и очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 37 мг (92%) (R)-4-(5-(3 циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил ацетата 13 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H21N3O4: 403,2; обнаруж. 426,1 [M+Na]+, tR=4,19 мин. 1 В колбу, содержащую (R)-5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил 5 (36 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (1 мл), добавляли пиридин (24 мкл, 0,3 ммоль) и пивалоилхлорид (37 мкл, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 суток. Сырую реакционную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия,сушили сульфатом магния и очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 23 мг (52%) (R)-4-(5-(3 циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илпивалата 14 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H27N3O4: 445,2, tR=4,7 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3)8,37 (d, J=2,2, 1H), 8,28 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,12-8,05 (m, 1H), 7,46 (d,J=7,4, 1H), 7,34 (t, J=7,6, 1H), 7,06 (d, J=9,0, 1H), 6,19 (dd, J=7,3, 4,6, 1H), 4,73 (hept, J=6,1, 1H), 3,44 (ddd,J=17,5, 8,7, 5,4, 1H), 3,24 (ddd, J=17,5, 8,6, 5,7, 1H), 2,56 (tdd, J=8,6, 7,4, 5,4, 1H), 2,12-1,99 (m, 1H), 1,41 (d,J=6,1, 6H), 1,14 (s, 9H). Общая методика 2. Получение инданаминов из инданолов. В колбу, содержащую рацемический 5-(3-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4 оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил (1 экв.) в ДХМ (0,14 М), при 0C добавляли SOCl2 (2 экв.). После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрировали в вакууме и помещали в высокий вакуум на 2 ч. Полученный сырой хлорид растворяли в DMA (0,02 М). Добавляли амин (3 экв.),DIEA (3 экв.), в некоторых случаях NaBr (3 экв.), и полученные реакционные смеси перемешивали при 55-60C в течение ночи и очищали препаративной ВЭЖХ или колоночной хроматографией. Если амин содержал простой эфир, материал может далее подвергаться гидролизу NaOH с получением кислоты. Диамины, защищенные Boc группами, могут быть разблокированы с помощью ТФУК. Соединения 15-48 получали, используя общую методику 2. Получали, используя общую методику 2, из 2-амино-2-метилпропан-1-ола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H28N4O3: 432,5; обнаруж. 433,2 [M+H]+, tR=6,58 мин (способ 2). 5-(3-(1-(4-Гидроксипиперидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил (соединение 16) Получали, используя общую методику 2, из пиперидин-4-ола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для Получали, используя общую методику 2, из 2-аминопропан-1,3-диола. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для Получали, используя общую методику 2, из метилазетидин-3-карбоксилата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H26N4O4: 458,4; обнаруж. 459,2 [M+H]+, tR=2,64 мин. 1-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)азетидин-3-карбоновая кислота (соединение 18) К раствору метил 1-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-ил)азетидин-3-карбоксилата (6,8 мг, 0,02 ммоль) добавляли 5N NaOH (20 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, растворяли в 250 мкл смеси 1:1 ДМСО:МеОН и очищали препаративной ВЭЖХ. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H24N4O4: 444,5; обнаруж. 445,1 [M+H]+,tR=6,52 мин (способ 2). Получали, используя общую методику 2, из трет-бутил 4-аминопиперидин-1-карбоксилата. LCMSESI (m/z) рассчит. для C31H37N5O4: 543,7; обнаруж. 544,3 [M+H]+, tR=2,82 мин. 2-Изопропокси-5-(3-(1-(пиперидин-4-иламино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5 ил)бензонитрил (соединение 19) Получали, используя общую методику 2. 5-(3-(1-Хлор-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4 оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил (152 мг, 0,4 ммоль) растворяли в DMA (2 мл) и обрабатывали гидрохлоридом 2-амино-N-метилэтансульфамида (209 мг, 1,2 ммоль), бромидом натрия (123 мг, 1,2 ммоль) и диизопропилэтиламином (210 мкл, 1,2 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60C в течение 24 ч. Сырую реакционную смесь выливали в воду (30 мл) и полученный осадок собирали и очищали хроматографией (EA/гексан, затем МеОН/ДХМ) с получением 30 мг (16%) 2-4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)-Nметилэтансульфонамида 45 в виде коричневого масла. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H27N5O4S: 481,2; обнаруж. 482,1 [M+H]+, tR=2,56 мин. 1 К 1-оксо-2,3-дигидро-1H-инден-4-карбонитрилу INT-1 (42,5 г, 0,27 моль) и (R)-2-метилпропан-2 сульфинамиду (36,0 г, 0,30 моль) в толуоле (530 мл) добавляли тетраэтоксид титана (84,1 мл, 92,5 г, 0,40 моль) и реакционную смесь нагревали при 60C в течение 12 ч в атмосфере N2. Сырой (R)-N-(4-циано 2,3-дигидро-1H-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид INT-4 использовали непосредственно на В колбу, содержащую сырую суспензию (R)-N-(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1-илиден)-2 метилпропан-2-сульфинамида INT-4 в атмосфере N2, добавляли ТГФ (1,0 л) и реакционную смесь охлаждали до -78C. Добавляли боргидрид натрия (40,9 г, 1,08 моль) порциями в течение 30 мин. (Внутренняя температура не повышалась в ходе добавления). Реакционную смесь перемешивали при-78C в течение 30 мин, наполовину вынув из бани в течение 30 мин, затем нагревали при 0C в течение 1 ч. Реакционную смесь 0C помещали в ледяную баню и гасили насыщенным раствором хлорида натрия(100 мл), затем насыщенным раствором тартрата натрия калия (420 мл), соли Ti осаждались. Реакционную смесь разбавляли EA (1,5 л) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Органические слои декантировали и промывали последовательно насыщенным раствором NH4Cl, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и отфильтровывали через слойMgSO4. Фильтрат концентрировали с получением 52,9 г сырого (R)-N-R)-4-циано-2,3-дигидро-1Hинден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида INT-5 в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H18N2OS: 262,3; обнаруж. 263,1(52,9 г, 0,20 моль) в МеОН (200 мл) добавляли 4N HCl в диоксане (152,0 мл, 0,60 моль), полученную желтую суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Сырую реакционную смесь разбавляли МеОН (500 мл) и отфильтровывали для удаления некоторого количества Ti-побочных продуктов. Фильтрат концентрировали и полученное твердое вещество кипятили с обратным холодильником в ацетонитриле (500 мл). Полученное белое твердое вещество собирали с получением 13,0 г (31% с 3 стадий) соли HCl (R)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-4-карбонитрила INT-6. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H10N2: 158,2; обнаруж. 142,0 [M-NH2]+, tR=0,84 мин. 1C ЯМР (101 МГц, ДМСО)148,09, 141,15, 132,48, 130,32, 127,89, 117,27, 108,05, 54,36, 39,08,29,64. Свободное основание может быть получено экстракцией 1N NaHCO3 и ДХМ. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H10N2: 158,2; обнаруж. 142,0 [M-NH2]+, tR=0,83 мин. 1(100 мл) при 0C добавляли ТЭА (12,0 мл, 131,0 ммоль). К полученному раствору добавляли раствор Вос-ангидрида (14,3 г, 65,6 ммоль) в ДХМ (30 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь промывали насыщенным раствором хлорида натрия, и органические слои сушили MgSO4 и отфильтровывали. Дополнительно добавляли ДХМ до общего объема 250 мл и добавляли норит (4,5 г). Продукт кипятили с обратным холодильником в течение 15 мин, и горячую смесь отфильтровывали через слой целита/силикагеля. Фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали из EA (50 мл) и гексана (150 мл) с получением 12,93 г (84%) (R)-трет-бутил 4-циано-2,3 дигидро-1H-инден-1-илкарбамата INT-8 в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C15H18N2O2: 258,3; обнаруж. 281,1 [M+Na]+, tR=3,45 мин. Элементный анализ для C15H18N2O2; С рассчит.=69,74%; обнаруж.=69,98%. Н рассчит.=7,02%; обнаруж.=7,14%. N рассчит.=10,84%; обнаруж.=10,89%. 1C ЯМР (101 МГц, ДМСО)155,52, 146,68, 146,32, 130,89, 128,70, 127,63, 117,51, 107,76, 77,98,55,09, 31,88, 29,11, 28,19. Хиральная ВЭЖХ. (R)-трет-бутил-4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат элюировали, используя 2,5% EtOH в гексане: 99,9% ее, tR=19,36 мин. (S)-Энантиомер INT-9 получали аналогичным образом, используя (S)-1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-4-карбонитрил HCl. tR для (S)энантиомера=28,98 мин. Общая методика 3. Получение инданамидоксимов. К (R)- или (S)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамату (1 экв.) в EtOH (0,56 М) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (3 экв.) и ТЭА (3 экв.), и реакционную смесь нагревали при 85C в течение 1-2 ч. Органические растворенные амидоксимы выделяли удалением растворителя и разделением между водой и ДХМ. Водорастворимые амидоксимы хроматографировали или использовали непосредственно в циклизации. Чистые амидоксимы могут быть получены перекристаллизацией из спиртовых растворителей. Получали, используя общую методику 3. К (R)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1 илкарбамату INT-8 (15,0 г, 58,2 ммоль) в EtOH (100 мл) добавляли гидрохлорид гидроксиламина (12,1 г,174,2 ммоль) и ТЭА (17,6 мл, 174,2 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 85C в течение 2 ч. Растворители удаляли и полученное белое твердое вещество разделяли между водой и ДХМ. Органические слои сушили Na2SO4, концентрировали и перекристаллизовывали из изопропанола (50 мл) с получением 14,4 г (85%) (R)-трет-бутил 4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата INT-10 в виде белого кристаллического твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C15H21N3O3: 291,4; обнаруж. 292,1 [M+H]+, tR=2,04 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО)9,53 (s, 1H), 7,38-7,32 (m, 1H), 7,32-7,12 (m, 3H), 5,68 (s, 2H), 4,97 (q,J=8,5, 1H), 3,07 (ddd, J=16,6, 8,7, 2,6, 1H), 2,86 (dt, J=16,8, 8,4, 1H), 2,30 (ddd, J=12,6, 7,6, 3,6, 1H), 1,75 (dq,J=12,3, 9,0, 1H), 1,44 (s, 9H). Общая методика 4. Циклизация с инданоксадиазоламинами. Раствор подходящей кислоты (1 экв.), HOBt (1,3 экв.) и EDC (1,3 экв.) в DMF (0,08 М в кислоте) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2. После окончания образования комплексаHOBt-кислота (1-3 ч) к смеси добавляли (R)- или (S)-амидоксим (1,1 экв.). После окончания образования конденсированного промежуточного соединения (около 0,5-2 ч) смесь нагревали при 75-95C до окончания циклизации (8-12 ч). Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагировали EA. Объединенные органические экстракты сушили, концентрировали и очищали хроматографией(EA/гексан) или использовали непосредственно. Оксадиазол обрабатывали HCl (5N в диоксане, 5 экв.) при 50-60C в течение 0,5-6 ч. Реакционную смесь можно экстрагировать (ДХМ/NaHCO3), или полученную соль HCl концентрировали, суспендировали в Et2O и собирали. Чистые инданамины могут быть получены перекристаллизацией из спиртовых растворителей или хроматографией. Получали, используя общую методику 4. К раствору 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоты(7,74 г, 37,7 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли HOBt (6,02 г, 44,6 ммоль) и EDC (8,53 г, 44,6 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч до окончания образования комплекса HOBt-кислота. Добавляли (R)-трет-бутил 4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-илкарбамат INT-10 (10,0 г, 34,3 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до образования INT-11, (R)-трет-бутил 4-(N-(3-циано-4 изопропоксибензоилокси)карбамимидоил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата. Смесь разделяли между EA и NaHCO3, органический слой собирали и сушили MgSO4. Соединение INT-11 (16,3 г, 34,0 ммоль) повторно растворяли в DMF (50 мл) и смесь нагревали при 95C в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли NaHCO3 (200 мл) и экстрагировали EA (350 мл). Органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении с получением 12,8 г (81%) (R)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата INT-12 в виде светлокоричневого твердого вещества, и использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.C ЯМР (101 МГц, CDCl3)173,00, 168,82, 162,70, 155,68, 145,31, 142,96, 134,05, 133,83, 128,25,127,21, 126,79, 123,09, 116,78, 115,24, 113,52, 103,87, 79,52, 72,70, 55,72, 33,86, 31,47, 28,39, 21,70. Хиральная ВЭЖХ. (R)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3 дигидро-1H-инден-1-илкарбамат элюировали, используя 20% изо-PrOH в гексане: 99,9% ее, tR=13,33 мин. (S)-энантиомер INT-13 получали аналогичным образом, используя (S)-трет-бутил 4-циано-2,3 дигидро-1H-инден-1-илкарбамат, используя общие методики 3 и 4 (tR для (S)-энантиомера=16,31 мин). Гидрохлорид К (R)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден 1-илкарбамату (12,8 г, 27,8 ммоль) в диоксане (200 мл) добавляли 4N HCl в диоксане (69 мл). Раствор нагревали при 55C в течение 1 ч и продукт осаждался. Диоксан удаляли и полученное твердое вещество суспендировали в диэтиловом эфире и собирали. Материал перекристаллизовывали из МеОН (200 мл) с получением 8,11 г (81%) (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрила 49 в виде соли HCl. LCMS-ESI (m/z): рассчит. для: C21H20N4O2: 360,4; обнаруж. 383,2 [M+Na]+, tR=2,49 мин. Элементный анализ и ЯМР спектр определены для C21H21N4O2Cl0,5C ЯМР (101 МГц, CDCl3)173,28, 167,98, 162,53, 143,69, 141,29, 134,59, 133,80, 128,93, 128,11,127,55, 122,72, 115,87, 115,24, 114,91, 102,46, 72,54, 54,38, 31,51, 29,91, 21,47. Хиральная ВЭЖХ свободного основания: (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4 оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил элюировали, используя 15% изо-PrOH в гексане плюс 0,3%DEA:99,9% ее, tR=30,80 мин. (S)-5-(3-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил 50 получали аналогичным образом из (S)-трет-бутил 4-циано-2,3-дигидро-1Hинден-1-илкарбамата: 99,9% ее, tR для (S)-энантиомера=28,58 мин. Общая методика 5. Алкилирование инданаминов. К 0,2 М раствору (R)- или (S)-инданамина в CH3CN (0,15 М) добавляли K2CO3 (2 экв.) и подходящий алкилгалогенид или мезилат (1,1 экв.). В некоторых случаях также добавляли ТЭА (1,1 экв.). Смесь нагревали при конвекции или микроволновом излучении при 80-160C с 30-минутными интервалами до исчезновения исходного материала или протекания диалкилирования амина. При необходимости, добавляли дополнительный алкилгалогенид или мезилат для управления реакцией. Реакционную смесь концентрировали, повторно суспендировали в EA и промывали водой. Органический слой сушили и концентрировали, затем очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением целевого продукта. Соединения 51-56, 58, 118, 124, 140-142 и 144 получали, используя общую методику 5. Перемешиваемый раствор (R)-метил 2-гидроксипропаноата (1,0 г, 9,61 ммоль) в толуоле (15 мл) охлаждали до 0C. По каплям добавляли метансульфонилхлорид (0,82 мл, 10,6 ммоль). Через 2 ч раствор нагревали до комнатной температуры и далее перемешивали в течение 45 мин. Полученный тяжелый белый осадок удаляли вакуумной фильтрацией и прозрачный раствор концентрировали с получением 1,75 г (99%) (R)-метил 2-метилсульфонил)окси)пропаноата в виде бесцветного масла. 1 Получали, используя общую методику 5. К раствору (S)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (75,0 мг, 0,21 моль) в CH3CN (290 мл) добавляли(R)-метил 2-метилсульфонил)окси)пропаноат (75,8 мг, 0,42 ммоль) и K2CO3 (57 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 150C, используя микроволновое излучение, в течение 1,5 ч. Дополнительно добавляли (R)-метил 2-метилсульфонил)окси)пропаноат (36 мг, 0,21 ммоль) и смесь нагревали в течение дополнительно 0,5 ч при 150C. Реакционную смесь концентрировали, повторно растворяли в ДХМ и хроматографировали (EA/гексан) с получением 33 мг (35%) (S)-метил 2-S)-4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)пропаноата в виде белого порошка. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин. 1 Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин. Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,1 [M+H]+, tR=2,61 мин. 1 Получали, используя общую методику 5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,1 [M+H]+, tR=2,65 мин. 1(14 мг, 0,4 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры через 1 ч. Добавляли дополнительное количество NaBH4 (10-15 мг каждого) с интервалами 1 ч до того, как LC/MS покажет 80% превращение в продукт. Реакционную смесь разбавляли 1N HCl и экстрагировали ДХМ(2). Объединенные органические слои сушили Na2SO4 и концентрировали. Полученное сырое твердое вещество растворяли в ДХМ и хроматографировали (МеОН/ДХМ) с получением 12,1 мг (40%) 5-(3-S)1-S)-1-гидроксипропан-2-ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрила 53. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,1 [M+H]+,tR=2,56 мин. 1 Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-R)-1-S)-1-гидроксипропан-2 ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 54. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин. 1 Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-S)-1-R)-1-гидроксипропан-2 ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 55. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин. 1 Получали аналогично соединению 53 с получением 5-(3-R)-1-R)-1-гидроксипропан-2 ил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 56. LCMSESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 418,5; обнаруж. 419,2 [M+H]+, tR=2,52 мин. 1 Получали, используя общую методику 5, из (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4 оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49, 2-фторэтилметансульфоната, K2CO3 и ТЭА при микроволновом излучении при 140C в течение 2 ч. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H23FN4O2: 406,4; обнаруж. 407,1 [M+H]+, tR=6,89 мин (способ 2). 1H ЯМР (400 МГц, MeOD)8,41-8,38 (m, 2H), 8,28-8,23 (m, 1H), 7,79 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,56 (t, J=7,7,1H), 7,46-7,37 (m, 1H), 5,00-4,90 (m, 2H), 4,83 (t, J=4,0 Гц, 1H), 4,71 (t, J=4,0 Гц, 1H), 3,56-3,33 (m, 4H),2,71-2,66 (m, 1H), 2,41-2,34 (m, 1H), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 6H). Общая методика 6. Получение индановых кислот. К раствору (R)- или (S)-инданамина (1 экв.) в CH3CN (0,1 М) добавляли K2CO3 (3 экв.) и бромметиловые эфиры (1 экв.) или мезилатметиловые эфиры (1 экв.). Реакционную смесь нагревали при 80C в течение 30 мин или до окончания реакции. Растворитель упаривали, и остатки разделяли между EA и водой. Органический слой собирали, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ с 0,025% ТЭА) с получением инданметилового эфира в виде белого твердого вещества. Инданметиловый эфир растворяли в EtOH (0,03 М), и добавляли водный растворNaOH (11,8 М). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при 40C. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ. Соединения 61-64 и 145-148 получали, используя общую методику 6. Получали, используя общую методику 6. К раствору (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49 (90,0 мг, 0,25 ммоль) и K2CO3 (103,5 мг, 0,75 ммоль) добавляли метил 3-бромпропаноат (41,8 мг, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80C в течение 30 мин и повторяли четыре раза при 80C в течение 30 мин с дополнительным количеством метил 3-бромпропаноата (41,8 мг, 0,25 ммоль), которое добавляли каждый раз. Растворитель упаривали и остаток разделяли между EA и водой. Органический слой собирали, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ с 0,025% ТЭА) с получением 71 мг (63%) (R)-метил 3-4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)пропаноата в виде твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O4: 446,5; обнаруж. 447,2 [M+H]+, tR=2,61 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3)8,40 (d, J=2,1, 1H), 8,31 (dd, J=8,9, 2,2, 1H), 8,04 (d, J=7,6, 1H), 7,49 (d,J=7,5, 1H), 7,35 (t, J=7,6, 1H), 7,09 (d, J=9,0, 1H), 4,77 (dt, J=12,2, 6,1, 1H), 4,31 (t, J=6,8, 1H), 3,73-3,58 (m,3H), 3,43 (ddd, J=17,4, 8,7, 4,6, 1H), 3,24-3,08 (m, 1H), 3,04-2,85 (m, 2H), 2,56 (t, J=6,5, 2H), 2,47 (dtd,J=12,8, 8,4, 4,7, 1H), 1,99-1,82 (m, 1H), 1,54-1,32 (m, 6H). К (R)-метил 3-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 иламино)пропаноату (71,0 мг, 0,16 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли водный раствор NaOH (1,9 мл, 1 М). Раствор перемешивали при 40C в течение 4 ч. Реакционную смесь выливали в лед (10 мл) и нейтрализовали до pH 7 с 1 М HCl. Раствор разделяли между ДХМ и H2O. Органические слой собирали, сушили в вакууме и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 29,7 мг (31%) (R)-3-4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)пропановой кислоты 62.H ЯМР (400 МГц, MeOD)8,46 (d, J=2,1, 1H), 8,45-8,40 (m, 1H), 8,29-8,23 (m, 1H), 7,82-7,73 (m,1H), 7,60-7,52 (m, 1H), 7,45 (d, J=9,0, 1H), 5,06-4,92 (m, 2H), 3,69-3,52 (m, 1H), 3,51-3,37 (m, 1H), 3,26 (s,2H), 2,75-2,58 (m, 1H), 2,56-2,46 (m, 2H), 2,44-2,29 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,0, 6H). Общая методика 7. Получение инданамидов конденсацией кислоты. К подходящей кислоте (1,1 экв.) в DMF (0,04 М) добавляли HOBt (1,3 экв.) и EDC (1,3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч или до полной активации кислоты. (R)- или (S)-инданамин (1 экв.) добавляли одной порцией, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Полученные объединенные органические слои сушили Na2SO4, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ или хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением инданамидов. Соединения 65-68, 136 и 137 получали, используя общую методику 7. Получали, используя общую методику 7. К 2-гидроксиуксусной кислоте (7 мг, 0,08 ммоль) в DMF(2 мл) добавляли HOBt (12 мг, 0,09 ммоль) и EDC (17 мг, 0,09 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч до полной активации кислоты. Добавляли (R)-5-(3-(1-амино 2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 49 (25,0 мг, 0,07 ммоль) одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли EA и промывали NaHCO3. Объединенные водные слои снова экстрагировалиEA. Полученные объединенные органические слои сушили Na2SO4 и концентрировали с получением коричневого масла, которое очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 14 мг (48%) (R)-N-(4(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2 гидроксиацетамида 65 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O4: 418,5; обнаруж. 419,0 [M+H]+, tR=2,47 мин. 1C ЯМР (101 МГц, CDCl3)173,11, 171,21, 168,78, 162,78, 144,48, 143,21, 134,11, 133,88, 128,56,127,42, 126,83, 123,29, 116,76, 115,26, 113,55, 103,90, 72,77, 62,25, 54,00, 33,52, 31,71, 21,72. Общая методика 8 А. Получение индансульфонамидов через сульфонилхлориды. К перемешиваемому раствору (R)- или (S)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,05 М) добавляли ТЭА (2 экв.) и подходящий сульфонилхлорид (2 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли после очистки препаративной ВЭЖХ. Соединения 69, 70, 73, 76, 79-82 и 163-167 получали, используя общую методику 8 А. Получали, используя общую методику 8 А. К перемешиваемому раствору (S)-5-(3-(1-амино-2,3 дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (18 мг, 0,05 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли ТЭА (13,9 мкл, 0,1 ммоль) и метансульфонилхлорид (19 мг, 0,1 ммоль). Через 1 ч добавляли дополнительно ТЭА (13,9 мкл, 0,1 ммоль) и метансульфонилхлорид (19 мг, 0,1 ммоль). Через дополнительный 1 ч перемешивания растворитель упаривали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 9,8 мг (45%) (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1Hинден-1-ил)метансульфонамида 69. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O4S: 438,1; обнаруж. 439,1 К перемешиваемому раствору (S)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5 ил)-2-изопропоксибензонитрила 50 (180 мг, 0,5 ммоль) в ДХМ (2 мл) при 0C добавляли ТЭА (348 мкл,2,5 ммоль) и 2-хлорэтансульфонилхлорид (245 мг, 1,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуре и перемешивали в течение 30 мин. Добавляли дополнительное количество ТЭА (348 мкл, 2,5 ммоль) и 2-хлорэтансульфонилхлорид (245 мг, 1,5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Растворитель удаляли, и продукт очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 144 мг (64%) (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)этенсульфонамида INT-14 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)этансульфонамид получали аналогично из (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4 оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 49. Общая методика 8 В. Получение индансульфонамидов реакцией Михаэлиса. К перемешиваемому раствору (R)- или (S)-инданвинилсульфонамида (1 экв.) в DMF (0,1 М) добавляли подходящий амин (10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 80C в течение 18 ч. Продукты очищали препаративной ВЭЖХ. Соединения 74, 75, 77, 78 и 168-181 получали, используя общую методику 8 В. Получали, используя общую методику 8 В. К раствору (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфонамида INT-14 (22,50 мг, 0,05 ммоль) вDMF (0,5 мл) добавляли 2N метиламин в ТГФ (0,25 мл, 0,50 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 80C в течение 18 ч. Сырой продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 17,6 мг (58%) соли ТФУК (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2(диметиламино)этансульфонамида 78 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для В колбу, содержащую (R)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил 49 (84 мг, 0,23 ммоль), добавляли 2 мл IPA. Мутную белую смесь охлаждали до 0C и добавляли эпихлоргидрин (20,7 мкл, 0,26 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. IPA удаляли концентрированием в вакууме и добавляли воду (500 мкл) и аликвоты эпихлоргидрина (20,7 мкл, 0,26 ммоль) каждый час (всего 4 раза) при комнатной температуре до окончания превращения. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в ДХМ и очищали хроматографиейINT-15 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H25ClN4O3: 452,9; обнаруж. 453,1 [M+H]+, tR=2,62 мин. Получение (R)-5-(3-(1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5 ил)-2-изопропоксибензонитрила (соединение 83) В колбу, содержащую 5-(3-1R)-1-(3-хлор-2-гидроксипропиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил INT-15 (77,0 мг, 0,17 ммоль) в CH3CN (4 мл), добавляли ТЭА (44,5 мкл, 0,32 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 75C в течение ночи, затем концентрировали в вакууме, растворяли в ДХМ и очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) с получением 19 мг(R)-5-(3-(1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрила 83 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H24N4O3: 416,5; обнаруж. 417,1 [M+H]+, tR=6,19 мин (способ 2). 1(S)-5-(3-(1-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрил 84 получали аналогично из (S)-5-(3-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 50. Общая методика 9. Алкилирование цианоинданаминов. В высушенную в печи колбу в атмосфере N2 добавляли (R)- или (S)-цианоинданамин (1 экв.) в безводном DMF (0,14 М). Реакционную смесь охлаждали до 0C, и порциями добавляли гидрид натрия (5 экв., 60% в масле, 160,6 ммоль). После перемешивания при 0C в течение 2,75 ч добавляли алкилгалогенид. Ледяную баню удаляли через 5 мин, и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили медленным добавлением насыщ. раствора NaHCO3 при 0C. После прекращения выделения газа реакционную смесь экстрагировали EA. Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Продукт очищали хроматографией (EA/гексан) или препаративной ВЭЖХ. Соединения 85-91, 105, 107 и 143 получали, используя последовательно общие методики 9, 3 и 4. Получали, используя общую методику 9. В высушенную в печи колбу в атмосфере N2 добавляли(240 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0C, и порциями добавляли гидрид натрия (3,8 г, 60% в масле, 160,6 ммоль). После перемешивания при 0C в течение 2,75 ч добавляли (2-бромэтокси)(третбутил)диметилсилан (16,9 мл, 70,7 ммоль). Ледяную баню удаляли через 5 мин и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили медленным добавлением насыщ. раствора NaHCO3 при 0C. После прекращения выделения газа реакционную смесь экстрагировали EA. Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Продукт очищали хроматографией (EA/гексан) с получением 10,76 г(R)-трет-бутил 2-(третбутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-16 (12,0 г, 28,9 ммоль) в EtOH (120 мл) в атмосфере N2 добавляли гидроксиламин-HCl (6,0 г, 86,5 ммоль) и триэтиламин (13,4 мл, 9,7 г, 86,5 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 80C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали досуха и затем разбавляли ДХМ (500 мл). Органический слой промывали NaHCO3, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Объединенные органические слои сушили MgSO4 и концентрировали с получением 11,8 г (R)-третбутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)карбамата INT-18 в виде белого пенного твердого вещества, которое использовали без очистки на Получали, используя общую методику 4. К раствору 3-циано-4-изопропоксибензойной кислоты (4,5 г, 21,9 ммоль) в безводном DMF (100 мл) добавляли HOBt (5,4 г, 40,0 ммоль) и EDC (5,6 г, 29,6 ммоль). Через 1 ч добавляли(4-(Nгидроксикарбамимидоил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат INT-18 (11,8 г, 26,3 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. LCMS анализ показал окончание превращения в промежуточное соединение, (R)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил (4-(N(3-циано-4-изопропоксибензоилокси)карбамимидоил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат INT-20. Реакционную смесь затем нагревали при 80C в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EA (250 мл). Добавляли NaHCO3 (250 мл) и воду (350 мл) до растворения всех твердых веществ. Смесь экстрагировали EA и органические слои промывали последовательно водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и концентрировали с получением 15,3 г смеси(R)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-21 и соответствующего материала без TBS-защитной группы, (R)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4 оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(2-гидроксиэтил)карбамат INT-22. Смесь получали в виде коричневого масла, которое можно использовать непосредственно без дополнительной очистки или очищали хроматографией (EA/гексан). INT-21: LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C34H46N4O5Si: 618,8; обнаруж. 519,2 [М-Вос]+ и 641,3 [M+Na]+, tR=7,30 мин (способ 1). 1(R)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4 изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-21 и (R)-третбутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(2 гидроксиэтил)карбамата INT-22 (13,9 г, 27,5 ммоль) в диоксане (70 мл) при 0C добавляли 4N HCl в диоксане (68,8 г, 275,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, и затем нагревали при 50C в течение 1 ч. Полученную суспензию охлаждали до комнатной температуры и добавлялиEt2O (75 мл). Осадок собирали фильтрацией, промывали Et2O и сушили с получением 10,5 г беловатого твердого вещества. Соль HCl перекристаллизовывали из МеОН (165 мл) с получением 5,98 г (56% общий выход из(R)-трет-бутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-циано-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)карбамата) (R)-5-(3-(1-(2-гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2 изопропоксибензонитрила 85 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H24N4O3: 404,5; обнаруж. 405,4 [M+H]+, tR=2,44 мин. 1C ЯМР (101 МГц, ДМСО)173,25, 167,86, 162,47, 144,56, 139,13, 134,53, 133,77, 129,30, 128,93,127,45, 122,83, 115,79, 115,15, 114,84, 102,40, 72,46, 61,04, 56,51, 46,38, 31,53, 27,74, 21,37. Элементный анализ C23H25N4O3Cl: С рассчит. для=62,65%; обнаруж.=62,73%; Н рассчит. для=5,71%; обнаруж.=5,60%; N рассчит. для=12,71%; обнаруж.=12,64%; Cl рассчит. для=8,04%; обнаруж.=8,16%. Хиральная ВЭЖХ свободного основания: (R)-5-(3-(1-(2-гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро 1H-инден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил элюировали, используя 10% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: 99,9% ее, tR=37,72 мин. (S)-5-(3-(1-(2-Гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-1Hинден-4-ил)-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрил 86 получали аналогично из (S)-третбутил 2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата INT-23 и (S)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4 оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)(2-гидроксиэтил)карбамата INT-24: 99,9% ее, tR для (S)энантиомера=35,86 мин.(R)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 ил)(2-гидроксиэтил)карбамат INT-22 (4,8 г, 9,5 ммоль) растворяли в CH3CN (48 мл) и 0,67 М буфере с фосфатом натрия с pH 6,7 (38 мл). К реакционной смеси добавляли TEMPO (0,10 г, 0,67 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 35C. Одновременно по каплям добавляли хлорит натрия (1,72 г, 19 ммоль) в воде (9,5 мл) и гипохлорит натрия (0,28 мл, 0,19 ммоль) в воде (5,70 мл) из отдельных капельных воронок в течение 1 ч. После добавления реакционную смесь нагревали при 35C в течение дополнительного часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли воду (80 мл), и значение pH реакционной смеси доводили до 8,5 с помощью 2,0N NaOH (12 мл). Реакцию гасили выливанием в охлажденный льдом раствор сульфита натрия (2,9 г в 50 мл воды), и температуру поддерживали ниже 20C. После перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре добавляли Et2O (50 мл),органический слой отделяли и выгружали. Водный слой подкисляли 1,0N HCl (55 мл) до значения pH 3,0 и экстрагировали EA (3100 мл). Органический слой сушили MgSO4 и отфильтровывали с получением 4,9 г (99%) (R)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты INT-25 в виде белой пены. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N4O6: 518,2; обнаруж. 541,2 [M+Na]+, tR=3,97 мин. 1EDC (3 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли амин (3 экв.), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч до окончания. Вос-защищенный продукт осаждали водой или экстрагировали (ДХМ/5% МеОН) и сушилиMgSO4. Твердое вещество растворяли в 4 М HCl в диоксане, и смесь нагревали при 50C. Через 1 ч растворитель удаляли при пониженном давлении, и твердый остаток очищали перекристаллизацией или препаративной ВЭЖХ. Соединения 59, 60, 90, 127-135 получали, используя общую методику 10. Гидрохлорид Получали, используя общую методику 10. К 4,9 г (9,5 ммоль) (R)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5-(3 циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислотыINT-25 в DMF (20 мл) добавляли HOBt (4,4 г, 28,5 ммоль) и EDC (5,5 г, 28,5 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли диметиламин (2,0N в ТГФ,14,25 мл, 28,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливали в воду (300 мл) и осадок отфильтровывали. Твердое вещество тщательно промывали водой (200 мл). Твердое вещество растворяли в ДХМ с 5% МеОН, сушили MgSO4 и отфильтровывали. Добавляли 4 М HCl в диоксане и смесь нагревали при 50C. Через 1 ч растворитель удаляли при пониженном давлении и твердый остаток перекристаллизовывали из смеси 120 мл МеОН/120 млC ЯМР (101 МГц, ДМСО)173,33, 167,95, 164,97, 162,56, 144,68, 139,16, 134,61, 133,85, 129,43,128,70, 127,63, 122,90, 115,87, 115,24, 114,92, 102,48, 72,54, 61,28, 44,84, 35,77, 34,98, 31,52, 27,68, 21,45. Хиральная ВЭЖХ свободного основания: (R)-2-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4 оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-иламино)-N,N-диметилацетамид элюировали, используя 15% изо-PrOH в гексане плюс 0,3% DEA: 98,5% ее, tR=41,19 мин. (S)-2-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)1,2,4-оксадиазол-3-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-иламино)-N,N-диметилацетамид 91 может быть получен аналогично из (S)-2-(трет-бутоксикарбонил(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты, tR для (S)-энантиомера=34,35 мин. Альтернативный способ описан ниже. Соединение 91 получали из INT-9, используя последовательно общие методики 9, 3 и 4.