Производные индола в качестве эстрогенных агентов

1 Настоящее изобретение касается новых соединений 3-[4-(2-фенил-индол-1-илметил)-фенил]акриламида и новых соединений 2-фенил-1[4-(амино-1-ил-алк-1-инил)бензил]-1H-индол-5 ола, которые применимы в качестве эстрогенных агентов, а также фармацевтических композиций и способов лечения, в которых используются эти соединения. Предпосылки создания изобретения Использование гормонозамещающей терапии для предотвращения разрежения костей(остеопороза) у женщин в постклимактерический период хорошо обосновано. Обычный порядок лечения требует введения в организм добавочного эстрогена с использованием подобных составов, содержащих эстрон, эстриол, этинилэстрадиол или сопряженные эстрогены, выделенные из источников природного происхождения (Premarin производства Wyeth-Ayerst). Для некоторых пациентов терапия может быть противопоказана из-за пролиферационного воздействия, которое несбалансированные эстрогены (эстрогены, взятые не в сочетании с прогестинами) оказывают на ткань матки. Эта пролиферация связана с повышенным риском эндометриоза и/или рака внутренней поверхности матки. Воздействие несбалансированных эстрогенов на ткань молочной железы менее очевидно, но оно имеет какое-то значение. Необходимость в эстрогенах, которые поддерживают сохранение костей, при минимизации в то же время пролиферативного влияния на матку и молочную железу, является очевидной. Показано,что некоторые антиэстрогены нестероидного характера поддерживают массу костей в исследованиях на модели крыс, подвергнутых овариэктомии, а также в клинических испытаниях на людях. Например, тамоксифен (tamoxifen) является полезным паллиативным средством для лечения рака молочной железы. Было продемонстрировано, что у людей он оказывает влияние на кости подобно агонистам эстрогена. Однако, он также является частичным агонистом в отношении матки и это служит причиной определенного беспокойства. Показано, что ралоксифен (raloxifen), антиэстроген на основе бензотиофена, стимулирует рост матки у подвергнутых овариэктомии крыс в меньшей степени, чем тамоксифен,сохраняя в то же время способность сберегать кости. Подходящим обзором избирательных к тканям эстрогенов является следующий: Tissue-Selective Actions Of Estroqen Analoqs, Bone Vol. 17, N 4, October 1995, 181S-190S. Об использовании индолов в качестве антагонистов эстрогена сообщается в Von Anqerer,Chemical abstracts, Vol.99, N.7 (1983), Abstract N. 53886u. См. также J. Med. Chem. 1990, 33, 26352640; J.Med.Chem. 1987, 30, 131-136. См.также(Otsuka Pharmaceutical Factory, Inc.). Работа Фон Ангерера (Von Anqerer) ограничена алифатиче 000815(или амидом), или бензильными группами, не имеющими основных аминов. Мировой патент,принадлежащий Otsuka (Япония) состоит из соединений, относящихся к настоящему изобретению, за исключением того, что группа R3 (показанная в формуле 1) определяется как -SR, гдеR представляет алкил. Кроме того в соединениях патента отсутствуют идущие от азота индола цепи той же структуры, что представлены в настоящем изобретении, как в формуле изобретения, так и в примерах. Родственный патент WOA 93 10741 описывает 5-гидроксииндолы. WO A 95 17383 (Kar Bio AB) описывает соединения с алифатической цепью. В WO А 95 17383 (Kar Bio AB) описываются антиэстрогены на основе индола с длинными неразветвленными цепями. В другом родственном патенте WО A 93 10741 описываются 5-гидроксииндолы с широким набором различных побочных цепей. В WO 93/23374 (OtsukaPharmaceutical, Japan) описываются соединения,сохраняющие структурное подобие с таковыми согласно настоящему изобретению, за исключением того, что элемент их структуры, обозначаемый в представленных ниже формулах I и II как R3 определяется как тиоалкил, и указанный источник не описывает таких соединений,имеющих цепи, соединенные с атомом азота в индоле, имеющих такую же структуру, как соединения, разработанные в настоящем изобретении. Описание изобретения Соединения общего структурного типа,изображаемого формулой (1), являются агонистами/антагонистами к эстрогену, пригодными для лечения заболеваний, связанных с недостатком эстрогена. У соединений согласно настоящему изобретению проявляется сильное связывание с рецептором эстрогена. Доказано, что эти соединения являются антиэстрогенами с малой собственной эстрогенностью. В исследованиях на модели крыс, подвергнутых за три дня до этого овариэктомии, соединения формулы (1) способны противодействовать эффектам, вызываемым 17-эстрадиолом, проявляя в то же время слабое раздражающее влияние на матку в том случае, когда они введены сами по себе. Настоящее изобретение включает соединения формулы (1) данной ниже:R2, R3, R4, R5 и R6 независимо выбраны из Н, ОН, -ОС(=O) (C1-С 4 алкил), -О(С 1-С 4 алкил),галогена или C1-С 6 алкила, при условии, что в случае, когда R1 представляет собой Н, R2 не является группой ОН; Х выбран из Н, C1-С 6 алкила, нитро или галогена; где R7 и R8 независимо друг от друга выбраны из группы, включающей Н, C1-С 6 алкил, фенил,или объединены группой -(СН 2)p-, где р является целым числом от 2 до 6, таким образом, что образуется кольцо, причем кольцо может быть необязательно замещенным заместителями числом вплоть до трех, выбранными из группы,включающей гидроксил, галоген, С 1-С 4 алкил,тригалогенметил, С 1-С 4 алкокси, тригалогенметокси, С 1-С 4 алкилтио, С 1-С 4 алкилсульфинил,гидрокси(С 1-С 4)алкил,С 1-С 4 алкилсульфонил,-СO2 Н, -CN, -CONH (C1-C4)алкил, -NH2, С 1-С 4 алкиламино, ди (C1-C4 алкил)амино, -NHSO2(C1C4)алкил, -NHCO(C1-C4)алкил и -NO2;b) пяти-, шести- или семичленного насыщенного, ненасыщенного или частично ненасыщенного гетероцикла, содержащего до двух гетероатомов или замещенных гетероатомов,выбранных из группы, включающей -О-, -NH-,-N(C1-C4)алкил и -N=, необязательно, замещенного 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей гидроксил, галоген,С 1-С 4 алкил, тригалогенметил, С 1-С 4 алкокси,тригалогенметокси, С 1-С 4 ацилокси, С 1-С 4 алкилтио, С 1-С 4 алкилсульфинил, С 1-С 4 алкилсульфонил, гидрокси(С 1-С 4)алкил, -CO2H, -CN,-CONHR1, -NH2, С 1-С 4 алкиламино, ди(С 1 С 4 алкил)амино, -NHSO2R1, -NHCOR1, -NO2 и фенил,необязательно замещенный С 1 С 4 алкильными группами в количестве от 1 до 3; и их фармацевтически приемлемые соли. Кольца, образованные совместно R7 и R8,как упомянуто выше, могут включать, не будучи, однако, ограниченными этим, азиридиновые,азетидиновые, пирролидиновые, пиперидиновые или гексаметиленаминовые кольца. Кроме того, является предпочтительным,чтобы, когда R7 и R8 объединены вместе в виде группы -(СН 2)p-, образованное таким образом кольцо было необязательно замещенным 1-3 заместителями, выбранными из группы, содер 000815 4 жащей C1-С 3 алкил, трифторметил, галоген, фенил, нитро и -CN. Наиболее предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения, имеющие структурную формулу (I), указанную выше, в которой R1 представляет собой ОН; R2-R6 определены, как указано выше; Х выбран из Сl, NO2 или СН 3; a Y представляет собой группу-(CH2)p-, где р является целым числом от 4 до 6,с образованием кольца, необязательно замещенного заместителями числом до трех, выбранными из группы, содержащей водород, гидроксил,галоген, С 1-С 4 алкил, тригалогенметил, С 1 С 4 алкокси, тригалогенметокси, С 1-С 4 алкилтио,С 1-С 4 алкилсульфинил,С 1-С 4 алкилсульфонил,гидрокси(C1-C4)алкил, -СO2 Н, -CN, -CONH(C1C4)алкил, -NH2, С 1-С 4-алкиламино, ди-(С 1-С 4 алкил)амино, -NНSО 2 (С 1-С 4) алкил, -NHСО(С 1 С 4)алкила и -NО 2; и их фармацевтически приемлемые соли. Изобретение включает формы приемлемых солей, образуемые путем реакции присоединения, либо неорганических, либо органических кислот. Применимы неорганические кислоты,такие как соляная кислота, бромоводородная кислота, иодоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, азотная кислота, а также применимыми являются органические кислоты,такие как уксусная кислота, пропионовая кислота, лимонная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, винная кислота, фталевая кислота, янтарная кислота, метансульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, нафталинсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота. Известно,что соединения, в которых имеется основной азот, могут образовывать комплексы со многими различными кислотами (как протонными,так и непротонными), и обычно является предпочтительным ввести соединение согласно настоящему изобретению в форме кислотноаддитивной соли. Соединения согласно изобретению являются частичными агонистами эстрогена и проявляют высокое сродство к рецептору эстрогена. Однако, в отличие от многих эстрогенов, эти соединения не вызывают возрастания массы сырой ткани матки. При нахождении в матке эти соединения являются антиэстрогенами и могут полностью противодействовать трофическим воздействиям агонистов эстрогена в ткани матки. Эти соединения применимы при лечении или предотвращении состояний или синдромов заболеваний у млекопитающих, которые вызываются или связаны с недостатком эстрогена. Представленные соединения обладают способностью вести себя подобно агонистам 5 эстрогена, снижая уровень холестерина и предотвращая разрежение кости. Следовательно,эти соединения применимы для лечения многих заболеваний, включая остеопороз, гипертрофию простаты, бесплодие, рак молочной железы, рак внутренней поверхности матки, сердечнососудистые заболевания, контрацепцию, болезнь Альцгеймера и меланому. Кроме того, эти соединения могут использоваться для гормонозамещающей терапии в случаях женщин, находящихся в постклимактерическом периоде, или в случае других состояний, связанных с недостатком эстрогена, когда может быть полезной добавка эстрогена в организм. Соединения согласно настоящему изобретению могут также применяться в методах лечения разрежения кости, являющегося результатом дисбаланса у данного индивида между образованием новых костных тканей и рассасыванием более старых тканей, что ведет к сеточному разрежению кости. Такое истощение кости наступает у ряда индивидуумов, в частности, у женщин в постклимактерическом периоде,женщин, подвергшихся гистерэктомии, пациентов, которые подвергаются, или которые были подвергнуты различным видам расширенной кортикостероидной терапии, пациентов, испытывающих гонадную дисгенезию, и пациентов,страдающих от синдрома Кушинга. Использование этих соединений может также относиться к случаях специальной необходимости в восстановлении костей у пациентов с переломами костей, нарушенной структурой костей, и пациентов, подвергшихся хирургическому лечению,относящемуся к костям, и/или имплантации протезов. В дополнение к тем проблемам, которые описаны выше, эти соединения могут использоваться при лечении остеоартрита, болезни Педжета, остеомаляции (размягчения костей), рака внутренней поверхности матки, множественной миеломы и других форм рака, оказывающих разрушительное влияние на ткани кости. Понятно, что способы лечения перечисленных здесь заболеваний включают введение пациенту, который требует такого лечения,фармацевтически эффективного количества одного или более соединений согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Настоящее изобретение включает также фармацевтические композиции, в которых используется одно или несколько из представленных соединений и/или их фармацевтически приемлемых солей, наряду с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами и т.п. Понятно, что дозировка, режим и способ введения этих соединений будут изменяться в соответствии с заболеванием и с индивидуумом,который подвергается лечению, и будут устанавливаться занимающимся этим вопросом практикующим врачом. Предпочтительным является, чтобы введение одного или нескольких 6 из приведенных здесь соединений начиналось с низкой дозы и повышалось до тех пор, пока не будут достигнуты желаемые эффекты. Эффективное введение этих соединений может быть осуществлено в дозе, составляющей от около 0,1 мг/день до около 1000 мг/день. Предпочтительно, введение будет составлять от около 50 мг/день до около 600 мг/день, в разовой дозе или разделенное на две или большее число доз. Такие дозы могут вводиться любым способом, пригодным для того, чтобы направить описываемые здесь активные соединения в кровоток реципиента, включая пероральное,парентеральное (включая внутривенные, внутрибрюшинные и подкожные инъекции) и чрескожное введение. Следует понимать, что для целей настоящего описания понятие "чрескожное введение" включает любые способы введения через поверхность тела и внутренние покровы, включая эпителиальные и слизистые ткани. Введение такими способами можно проводить с использованием настоящих соединений или их фармацевтически приемлемых солей, находящихся в лосьонах, кремах, пенах,пластырях, суспензиях, растворах и суппозиториях (ректальных и вагинальных). Составы для перорального введения, содержащие активные соединения согласно настоящему изобретению, могут содержать любые традиционно используемые пероральные формы, включая таблетки, капсулы, трансбуккальные формы, пастилки, лепешки и пероральные жидкости, суспензии или растворы. Капсулы могут содержать смеси активного соединения(соединений) с инертными наполнителями и/или разбавителями, такими как фармацевтически приемлемые крахмалы (например, кукурузный, картофельный крахмал, или тапиока),сахара, искусственные подсластители, порошкообразные целлюлозы, такие как кристаллические и микрокристаллические целлюлозы, различные виды муки, желатина, камеди и т.п. Пригодные составы в виде таблеток могут быть изготовлены стандартными способами спрессовывания, влажного гранулирования или сухого гранулирования, и в них могут использоваться фармацевтически приемлемые разбавители, связующие агенты, смазывающие вещества, измельчители, суспендирующие агенты или стабилизаторы,включая стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, лаурилсульфат натрия,микрокристаллическую целлюлозу, кальциевую соль карбоксиметилцеллюлозы, поливинилпирролидон, желатин, альгиновую кислоту, аравийскую камедь, ксантановую камедь, цитрат натрия, сложные силикаты, карбонат кальция,глицин, декстрин, сахарозу, сорбит, дикальцийфосфат, сульфат кальция, лактозу, каолин, маннит, хлорид натрия, тальк, безводные крахмалы и порошкообразный сахар, но не ограничиваясь указанными веществами. В описываемых здесь пероральных составах могут использоваться 7 стандартные технологии, обеспечивающие задержку высвобождения или высвобождение в определенное время, чтобы изменить поглощение активного соединения (соединений). Составы для введения в виде суппозиториев могут быть изготовлены из традиционных веществ,включая масло какао, с добавлением или без добавления восков, чтобы изменить температуру плавления суппозиториев, и глицерина. Могут также использоваться растворимые в воде основы для суппозиториев, такие как полиэтиленгликоли различной молекулярной массы. Настоящее изобретение предусматривает также способ получения соединения формулы 1,который включает один из следующих методов: а) взаимодействие соединения формулы 8 Первоначальный синтез индола согласно схеме 1 выполняется путем нагревания соответствующим образом замещенного анилина (1) с соответствующим образом замещенным альфабромфенилпропиофеноном (2) в растворителе с достаточно высокой температурой кипения,таком как ДМФА (диметилформамид). Продукт реакции затем алкилируют 4-бромбензилбромидом с получением замещенного индола(3). На этом этапе производится снятие защиты фенолов (если она присутствует). Обычно фенолы защищаются путем использования их в виде бензиловых эфиров и могут быть удобным образом расщеплены при помощи иодтриметилсилана (TMS1). Получение акриламидов проводят в условиях реакции Хека (Heck reaction) либо в чистом Et3N, либо в Et3N/ CH3CN. Схема 2 где R1-R6 и X определены как указано выше, с акриламидом формулы где Y определен как указано выше, с получением соединения формулы 1, где Z представляет собой -СН=СН-СОУ; или в) взаимодействие соединения формулы где R1-R6 и Х определены как указано выше, с соединением формулы где n и Y определены как указано выше, с получением соответствующего соединения формулы 1, где Z представляет собой Соединения согласно настоящему изобретению могут быть удобным образом синтезированы в соответствии с общим направлением согласно схемам 1 и 2, данным ниже. Схема 1 Первоначальный синтез индола согласно схеме 2 может быть выполнен путем нагревания соответствующим образом замещенного анилина (1) с соответствующим образом замещенным альфа-бромфенилалкилфеноном (2) в растворителе с достаточно высокой температурой кипения, таком как ДМФА. Продукт реакции затем алкилируют 4-иодбензилбромидом с получением замещенного индола (3). На этом этапе производится снятие защиты фенолов (если она присутствует). Обычно фенолы защищаются путем использования их в виде бензиловых эфиров и могут быть удобным образом расщеплены при помощи TMS1. Пропаргиламины обычно получают из алкинилбромида или алкинилтозилата путем замещения соответствующих амином. Реакция замещения выполняется in situ без выделения пропаргиламина. Соединения,замещенные в 3-положении иными, чем алкил,группами, могут быть получены путем получения в начале индола, замещенного в 3 положении группой -Н. Затем индол может быть подвергнут электрофильной реакции галогенирования, формилирования и т.п. с получением других 3-замещенных соединений. Растворители,использовавшиеся в описываемых здесь реакциях, представляли собой безводные растворители фирмы Aldrich SureSealTM, использовавшиеся без дальнейшей очистки. 9 Применялись обычно реагенты производства фирмы Aldrich, которые использовались без дальнейшей очистки. Все реакции проводились в атмосфере азота. Хроматографию проводили с использованием силикагеля с размером зерна 230-400 меш (Merck Grade 60, AldrichChemical Company). Тонкослойную хроматографию выполняли на пластинках Silica Gel 60F254 производства ЕМ Science. Спектры 1 Н ЯМР получали на приборе Bruker AM-400 в ДМСО (диметилсульфоксиде), и химические сдвиги даны в мин. Температуры плавления определяли на приборе Томаса-Хувера (ThomasHoover apparatus ), и они являются нескорректированными. ИК-спектры записывали на спектрофотометре Perkin-Elmer с дифракционной решеткой или на спектрофотометре PerkinElmer 784. Масс-спектры записывали на массспектрометре Kratos MS 50 или на массспектрометре Finniqan 8230. Элементные анализы выполняли на элементном анализатореPerkin-Elmer 2400. Полученные значения элементного анализа находятся в пределах отклонения в 0,4% от теоретического. Настоящее изобретение иллюстрируется далее следующими примерами, не являющимися ограничивающими. Примеры 1. 5-Бензилокси-2-(4-бензилоксифенил)-3-метил-1 Н-индол. Колбу заполняли 4-бензилоксианилином(45 г, 0,23 ммоль), 4'-бензилокси-2-бромфенилпропиофеноном (21 г, 0,066 ммоль) и диметилформамидом (ДМФА) (50 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 30 мин, после чего охлаждали до комнатной температуры, а затем проводили распределение между этилацетатом (EtOAc) (250 мл) и 1 н. НСl (водн.) (100 мл). EtOAc промывали NaHCO3 (водн.) и рассолом, сушили над MqSO4. Раствор упаривали и остаток поглощали СН 2 Сl2 и добавляли гексан с выпадением в осадок 25 г неочищенного продукта в виде твердой фазы. Твердую фазу растворяли в СН 2 Сl2 и выпаривали на силикагеле и хроматографировали с использованием смеси СН 2 Сl2/гексан (1:5) с получением 9,2 г светло-коричневой твердой фазы(КВr) 3470, 2880, 2820, 1620 см-1; MS eI (массспектрометрия с электронной ионизацией) m/z 419. Ппример 2. 5-Бензилокси-2-(4-фторфенил)-3-метил-1H-индол. Указанное в заголовке соединение было получено аналогично соединению по примеру 1 взаимодействием 4-бензилоксианилина с 4 фтор-2-бромфенилпропиофеноном.Т.пл.=132 С;eI m/z 331; CHN (элементный состав) рассчитан для C22H18FNO. Пример 3. 5-Бензилокси-2-(4-бензилоксифенил)-3-метил)-1-илметил-(4-фенилбромид)индол. Раствор 60% NaH (0,17 г, 7,1 ммоль) в ДМФА (20 мл) охлаждали до 0 С и обрабатывали путем добавления по каплям бензилоксииндола из примера 1 (2,5 г, 5,94 ммоль) в ДМФА(10 мл). Через 15 мин добавляли по каплям 4'бромбензилбромид (1,63 г, 6,53 ммоль) в ДМФА(10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин при 0 С и затем дополнительно 20 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли эфиром (300 мл) и промывали NH4Cl (2 х 25 мл), затем NаНСО 3 (1 х 25 мл) и рассолом (25 мл). Органические экстракты сушили над MgSO4 и упаривали. Остаток кристаллизовали из смеси тетра-гидрофуран/гексан с получением 2,7 г (77%) соединения, указанного в заголовке примера: Т.пл.=144-146 С; 1(с, 2 Н), 5,09 (с, 2 Н), 2,25 (с, 3 Н); ИК (КВr) 3400,3020, 1600 см-1; MS eI m/z 587. Пример 4. 5-Бензилокси-2-(4-фторфенил)3-метил)-1-илметил-(4-фенилбромид)индол. Указанное в заголовке соединение было получено подобно соединению примера 3: Т.пл.=139-139,5 С; 1eI m/z (499/501, присутствует Вr); СНN рассчитан для С 29 Н 23 ВrFNО. Пример 5. 2-(4-Гидроксифенил)-3-метил)1-илметил-(4-фенилбромид)индол-5-ол. Раствор, состоящий из указанного в заголовке примера 3 соединения (0,5 г, 0,85 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) обрабатывали путем добавления по каплям 3,5 эквивалента TMSI (0,47 мл,3,0 ммоль) при комнатной температуре. Через пару часов реакцию останавливали, добавляли 2,2 эквивалента TMSI и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0 С и медленно добавляли метанол, чтобы загасить реакцию. Реакционную смесь разбавляли эфиром (25 мл) и промывали NаНСО 3 (25 мл), 10% Na2SO3(25 мл) и рассолом. Эфирный слой сушили над(с, 1 Н), 2,21 (с, 3 Н); MS eI m/z 407/409, содержит Вr; ИК 3390, 2900, 1600 см-1; CHN рассчитан для C22H18BrNO2 + 0,25 EtOAc. Пример 6. 2-(4-Фторфенил)-3-метил)-1 илметил-(4-фенилбромид)индол-5-ол. Указанное в заголовке соединение было получено подобно соединению примера 5 путем взаимодействия соединения, указанного в заголовке примера 4, с TMSI и выделено в виде пены. 1 Н ЯМР (ДМСО) 8,79 (с, 1 Н), 7,39-7,34 (м,4 Н), 7,32-7,30 (м, 3 Н), 7,11 (д, 1 Н, J=8,8 Гц), 6,85(КВr) 3400, 2900, 1630 см-1; MS eI m/z 409/411 содержит Br. Общая методика получения индолсодержащих акриламидов Раствор соединения из примера 5 в Et3N обрабатывали три-о-толилфосфином (10% мольн.), проводили глубокую продувку акриламида (1,25 эквивалента) N2 и добавляли Pd(OAc)2 (2,5 мольн.%). Реакционную смесь нагревали при 100-110 С в герметизированной трубке до завершения реакции в соответствии с данными анализа методом тонкослойной хроматографии. Неочищенный продукт реакции упаривали и либо непосредственно кристаллизовали, либо хроматографировали на силикагеле. Пример 7.(т, 3 Н); ИК (КВr) 3300, 2950, 2860, 1645, 1580 см-1; MS m/z 470; CHN рассчитан для С 30 Н 31FN2O2. Пример 18. 5-Бензилокси-2-(4-бензилоксифенил)-3-метил)-1-илметил-(4-фенилиодид) индол. Раствор соединения примера 1 (3,0 г, 7,4 ммоль) в ДМФА (25 мл) обрабатывали NaH(60% дисперсия, 0,21 г, 8,9 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавляли 4-иодбромбензилбромид (2,2 г,7,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc, сушили надMgSO4 и упаривали. Растирание неочищенного продукта с эфиром давало 2,2 г продукта в виде белого твердого вещества: Т.пл.=153-156 С; 1H ЯМР (ДМСО) (д, 2 Н, J=8,6 Гц), 7,527,45 (м, 4 Н), 7,37-7,29 (м, 6 Н), 7,27 (д, 2 Н, J=8,8 Гц), 7,17 (д, 1 Н, J=9,0 Гц), 7,13 (д, 1 Н, J=2,2 Гц),7,10 (д, 2 Н, J=8,8 Гц), 6,81 (дд, 1 Н, J=8,8, 2,4 Гц), 6,60 (д, 2 Н, J=8,3 Гц), 5,18 (с, 2 Н), 5,12 (с,2 Н), 5,11 (с, 2 Н), 2,15 (с, 3 Н); MS eI m/z 635. Пример 19. 2-(4-Гидроксифенил)-3-метил)1-илметил-(4-фенилиодид)индол-5-ол. Раствор продукта примера 18 (2,2 г, 3,5 ммоль) в СНСl3 обрабатывали иодтриметилсиланом (1,04 мл, 7,0 ммоль) и реакционную смесь 15 нагревали с обратным холодильником. Через 2 ч добавляли дополнительно 3 эквивалента иодтриметилсилана и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакцию гасили добавлением МеОН (5 мл). Органический слой промывали водным 10% раствором Na2SO3, HCl (1 М) и сушили надMgSO4. Раствор упаривали и хроматографировали на силикагеле смесью EtOAc/гексан (3:7) с получением указанного в заголовке соединения в виде пены (1,2 г): 1 Н ЯМР 9,65 (с, 1 Н), 8,71 (с, 1 Н), 7,54 (д,2 Н, J=8,3 Гц), 7,12 (д, 2 Н, J=8,3 Гц), 7,02 (д, 1 Н,J=8,6 Гц), 6,84-6,80 (м, 3 Н), 6,61 (д, 2 Н, J=8,3 Гц), 6,57 (дд, 1 Н, J=6,4 Гц), 5,12 (с, 2 Н), 2,09 (с,3 Н); MS eI m/z 455. Общая методика получения индолсодержащих пропаргиламинов Указанные в заголовках примеров 20-22 соединения получали с использованием раствора, содержащего 10-кратный мольный избыток вторичного амина в ДМФА, охлажденного до 0 С и обработанного пропаргилбромидом (3 эквивалента, 80% раствор в толуоле). Через 1 ч выдерживания при 0 С реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры в течение 1 ч. Добавляли индолиодид из примера 19 (1 эквивалент), после чего добавляли Сu (I)(0,1 эквивалента), Рd(РРh3)2 Сl2 (0,035 эквивалента). Реакционную смесь затем перемешивали 16-48 ч и обрабатывали путем выливания в воду и экстракции в EtOAc. EtOAc упаривали и хроматографировали на силикагеле, используя в качестве элюирующей системы смесьEtOAc/гексан. Пример 20. 2-(4-Гидроксифенил)-3-метил 1-[4-(3-N,N-диметил-1-илпроп-1-инил)бензил]1 Н-индол-5-ол. Используя общую методику получения пропаргиламина, описанную выше, пропаргилбромид подвергали взаимодействию с диметиламином и затем с соединением примера 19 с получением указанного в заголовке соединения: Т.пл.=173-176 С; 1esI 411 (М+Н 1). Пример 21. 2-(4-Гидроксифенил)-3-метил 1-[4-(3-пиперидин-1-илпроп-1-инил)бензил]-1 Ниндол-5-ол. Используя общую методику получения пропаргиламина, описанную выше, пропаргилбромид подвергали взаимодействию с пиперидином и затем с соединением примера 19 с получением указанного в заголовке соединения: Т.пл.=118-123 С; 1 Н ЯМР (ДМСО) 9,65 (с, 1 Н), 8,71 (с, 1H),7,24 (д, 2 Н, J=8,1 Гц), 7,12 (д, 2 Н, J=8,6 Гц), 7,02MS eI m/z 450; CHN рассчитан для С 30 Н 30N2 О 2 + 0,25 H2O. Пример 22. 2-(4-Гидроксифенил)-3-метил 1-[4-(3-пирролидин-1-илпроп-1-инил)бензил]1 Н-индол-5-ол. Используя общую методику получения пропаргиламина, описанную выше, пропаргилбромид подвергали взаимодействию с пирролидином, а затем с соединением примера 19 с получением указанного в заголовке соединения: Т.пл.=174-176 С; 1(м, 4 Н), 2,09 (с, 3 Н), 1,69-1,66 (м, 4 Н); ИК (КВr) 3400, 2920, 2900, 1620 см-1; MS eI m/z 436; CHN рассчитан для С 29 Н 28N2 О 2 + 0,7 H2O. Биологические методы Испытание на связывание рецептора эстрогена in vitro Приготовление рецептора Клетки яичника китайского хомячка, дающие сверхэкспрессию рецептора эстрогена, выращивали в чашках площадью 150 мм 2 в составе из модифицированной по способу Дульбекко среды Игла F12 + 10% очищенной покрытым декстраном древесным углем фетальной коровьей сыворотки. Чашки дважды промывали физиологическим раствором с фосфатным буфером и один раз - 10 мМ Tris-НСl, рН 7,4, 1 мМ этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТК). Клетки собирали из культуры путем соскоба с поверхности и затем суспензию клеток помещали на лед. Клетки разрушали при помощи портативной механизированной дробилки, применяя обработку в два захода по 10 с. Сырой (неочищенный) препарат центрифугировали при 12000 g в течение 20 мин, после чего проводили вращение в течение 60 мин при 100000 g с получением свободного от рибосом цитозоля. Затем цитозоль замораживали и хранили при-80 С. Концентрацию белка в цитозоле оценивали с использованием испытания ВСА со стандартным белком сравнения. Условия испытания на связывание Конкурентный анализ выполняли на 96 луночном планшете (полистирол), который связывает (иммобилизует)2% общего количества исходного [3H]-17-эстрадиола, и для каждого значения данных измерения проводили трижды. Брали аликвоту 100 мкг/100 мкл препарата рецептора в расчете на лунку. Добавляли насыщающую дозу состава 2,5 нМ [3H]-17 эстрадиол + конкурент (или буфер в объеме 50 мкл; в случае предварительной конкуренции,когда проводили оценки при 100 и 500-кратном количестве конкурента, использовали только 0,8 17 нМ [3H]-17-эстрадиол. Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 2,5 ч. По окончании этого инкубационного периода в каждую лунку добавляли 150 мкл охлажденного льдом древесного угля, покрытого декстраном(5% активированный древесный уголь, покрытый 0,05% декстраном 69 К) и планшет немедленно центрифугировали при 99g в течение 5 мин при 4 С.Затем отбирали 200 мкл надосадочного раствора для подсчета числа сцинтилляций. Подсчет для образцов вели до достижения значения 2% или до истечения 10 мин, в зависимости от того, какой из этих случаев происходил первым. Поскольку полистирол абсорбирует малое количество [3H]-17-эстрадиола,лунки, содержащие радиоактивность и цитозоль, но не обработанные активированным углем, включались в количественное определение имеющегося в наличии изотопа. Кроме того,лунки, содержащие радиоактивность, но не содержащие цитозоля, обрабатывали древесным углем, чтобы оценить число не удаляемых распадов [3H]-17-эстрадиола в минуту. Использовались 96-луночные планшеты Corninq 2588096, поскольку для них было показано, что они связывают малое количество эстрадиола. Анализ результатов Число отсчетов в минуту (СРМ) по радиоактивности автоматически пересчитывалось в число распадов в минуту (DPM) при помощи сцинтилляционного счетчика Beckman LS 7500 с использованием набора потушенных эталонов,чтобы генерировать Н для каждого образца. Чтобы рассчитать % связывания эстрадиола в присутствии 100-кратного или 500-кратного избытка конкурента, применяли следующую формулу:DPM образца - DPM не удаленного древесным углем остатка) /(DPM эстрадиола - DPM не удаленного древесным углем остатках 100%= % связывания эстрадиола. Для получения кривых тормозящей (подавляющей) концентрации 1 С 50 строят график зависимости % связывания от соединения. Значения 1 С 50 получают для соединений, у которых проявляется конкуренция 30% при 500 кратной концентрации конкурента. Описание этих методов см. в Hulme, E.C., ed. 1992. Receptor-Liqand Interactions: A Practical Approach.IRL Press, New York. (см. в особенности главу 8). Щелочно-фосфатазный анализ клеток Ишикавы Сохранение и обработка клеток Клетки Ишикавы сохраняли в составе из модифицированной по способу Дульбекко среды Игла F12 (50%:50%), содержащей феноловый красный, +10% фетальной коровьей сыворотки, и среду дополняли 2 мМ Глутамаксом(Glutamax), 1% Pen/Strap и 1 мМ пируватом натрия. За пять дней перед началом каждого экс 000815 18 перимента (обработки клеток) среду заменяли на состав из не содержащей феноловый красный модифицированной по способу Дульбекко среды Игла F12+10% очищенной покрытым декстраном древесным углем сыворотки. В день перед обработкой клетки собирали из культуры,используя 0,5% трипсин/ЭДТК, и помещали с плотностью 5 х 104 клеток на ячейку в 96 луночный планшет для культивирования тканей. Испытуемые соединения дозировали в концентрации 10-6, 10-7 и 10-8 м в дополнение к комбинации 10-6 М (соединение) + 10-9 М 17 эстрадиол, чтобы оценить способность соединений к выполнению функции антиэстрогенов. Клетки обрабатывали в течение 48 ч перед испытанием. Каждый 96-луночный планшет содержал контрольный образец 17-эстрадиола. Число популяций для образца при каждой дозе составляло n=8. Щелочно-фосфатазный анализ По окончании 48 ч среду отсасывали и клетки промывали три раза физиологическим раствором с фосфатным буфером. К каждой лунке добавляли 50 мкл лизисного буфера (0,1 М Tris-НСl, рН 9,8, 0,2% Triton X-100). Планшеты выдерживали при -80 С в течение, как минимум, 15 мин. Планшеты размораживали при 37 С, после чего добавляли 150 мл 0,1 М Tris-HCl,рН 9,8, содержащего 4 мМ паранитрофенилфосфат (рNРР),к каждой лунке (конечная концентрация пара-нитрофенилфосфата 3 мМ). Расчеты спектральной поглощательной способности и наклонов кривых проводили с использованием программы KineticCalc Application (Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT). Результаты выражены в виде среднее значение+/- стандартное отклонение скорости ферментативной реакции (наклон), усредненной по линейной части кинетической кривой реакции(считывание показаний оптической плотности каждые 5 мин в течение 30-минутного периода считывания показаний спектральной поглощательной способности). Результаты для соединений суммированы в виде значения отклика, выраженного в процентах по отношению к 1 нМ 17-эстрадиолу. Различные соединения испытывали на эстрогенную активность методом щелочной фосфатазы, и рассчитывали соответствующие значения эффективной дозы ED50 (95% C.I.). В следующем списке перечислены соединения, использовавшиеся в качестве эталонов: 0,03 нМ 1-Эстрадиол 1,42 нМ 17-Эстрадиол Эстриол 0,13 нМ Эстрон 0,36 нМ Описание таких методов представлено в работах Holinka, C.F., Hata, H., Kuramoto, H. andHochberq, R.B. (1990). A simple and sensitive microtiter plate estroqen bioassay based on stimulation alkaline phosphatase in Ishikawa cells; Estroqen action of D5 adrenal steroids. Endocrinoloqy,6:2757-2762. Испытание на трансфекцию 2 Х VIT ERE Сохранение и обработка клеток Клетки яичника китайского хомячка, которые были подвергнуты устойчивой трансфекции рецептора эстрогена человека, сохраняли состав из в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла + 10% фетальной коровьей сыворотки. За 48 ч до обработки питательную среду заменяли на состав из не содержащей феноловый красный модифицированной по способу Дульбекко среды Игла F12 + 10% очищенной покрытым декстраном древесным углем фетальной коровьей сыворотки (среда для обработки). Клетки помещали с плотностью 5000 клеток на лунку в 96-луночный планшет, содержащий 200 мкл среды на лунку. Трансфекция с фосфатом кальция Репортер-ДНК, т.е., перемещаемую ДНК(плазмида Promega pGL2, содержащая две парных копии вителлогенина ERE в присутствии минимального промотора типа тимидинкиназы,управляющего геном люциферин-монооксигеназы) объединяли с экспрессирующей Вгалактозидазу плазмидой pCH110 (Pharmacia) и носителем ДНК (pTZ18U) в следующем соотношении: 10 мкг - репортер-ДНК; 5 мкг - ДНК pCH110; 5 мкг - pTZ18U; 20 мкг - ДНК на 1 мл трансфекционного раствора. ДНК (20 мкг) растворяли в 500 мкл 250 мМ стерильного СаСl2 и по каплям добавляли 500 мкл 2 Х HeBS (0,28 М NaCl, 50 мМ N-2 гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновая кислота, 1,5 мМ Na2HPO4, pH 7,05) и инкубировали при комнатной температуре в течение 20 мин. 20 мкл этой смеси добавляли к каждой лунке с клетками и оставляли для воздействия на клетки в течение 16 ч. По окончании этой инкубации осадок удаляли, клетки промывали средой, производили замену на свежую среду для обработки и обрабатывали клетки либо носителем, 1 нМ 17-эстрадиолом, 1 мкМ соединением, либо комбинацией 1 мкМ соединения + 1 нМ 17-эстрадиола (испытания на антагонизм к эстрогену). Обработку при каждом варианте условий выполняли в 8 лунках (n=8), которые инкубировали в течение 24 ч перед испытанием на люциферин-монооксигеназу. Испытание на люциферин-монооксигеназу По прошествии 24 ч воздействия на соединения среду удаляли и каждую лунку промыва 000815 20 ли 2-кратно 125 мкл физиологического раствора с фосфатным буфером, не содержащего Mg и Са. После удаления физиологического раствора с фосфатным буфером в каждую лунку добавляли 25 мкл лизисного буфера Promeqa и оставляли на 15 мин при комнатной температуре, а затем на 15 мин при -80 С и на 15 мин при 37 С. 20 мкл лизата перемещали в непрозрачный 96-луночный планшет для оценки активности люциферин-монооксигеназы, а остальной лизат (5 мкл) использовали для оценки активности В-галактозидазы (нормализации трансфекции). Субстрат люциферана (Promegа) автоматически добавляли к каждой лунке в виде аликвоты в 100 мкл при помощи люминометра и в течение 10 с после добавления считывали полученный световой поток (в относительных световых единицах). Испытание на В-галактозидазу К оставшимся 5 мкл лизата добавляли 45 мкл физиологического раствора с фосфатным буфером. Затем добавляли 50 мкл буфераPromeqa для испытания 2 Х на В-галактозидазу,хорошо перемешивали и инкубировали при 37 С в течение 1 ч. Для каждого отдельного эксперимента подготавливали планшет, содержащий калибровочную кривую (значения от 0,1 до 1,5 миллиединиц, взятые троекратно каждое). Планшеты анализировали на спектрофотометрическом планшет-ридере Molecular Devices при 410 нм. Оптические плотности в качестве неизвестных величин преобразовывали в миллиединицы активности путем математической экстраполяции калибровочной кривой. Анализ результатов Данные испытания на люциферинмонооксигеназу получали в виде относительных световых единиц, которые накапливались в течение 10 с измерений и автоматически преобразовывались в файл JMP (SAS Inc), где производилось вычитание значений фона в относительных световых единицах. Данные пробы на Вгалактозидазу автоматически импортировались в файл, и эти значения делились на значения относительных световых единиц, чтобы провести нормализацию данных. Средние значения и стандартные отклонения определяли из n=8 для каждого варианта обработки, активность соединений сравнивали с 17-эстрадиолом для каждого планшета. Величину активности в процентах по отношению к 17-эстрадиолу рассчитывали с использованием формулы % = контрольное значение для эстрадиола)/ (значение для соединения х 100. Эти методики описаны в работе Tzukerman, М.Т., Esty, A., Santiso-Mere,D., Danielian, Р., Parker, M.G. , Stein, R.B., Pike,J.W. and McDonnel, D.P. (1994). Трансактивационная способность рецептора эстрогена человека определялась как в клеточном окружении,так и в окружении промотора, и была опосредована двумя функционально различными внут 21Endocrinology, 8:21-30). Утеротрофическое/антиутеротрофическое биологическое испытание на крысах Эстрогенные и антиэстрогенные свойства соединений определяли в утеротрофическом испытании (4 дня) на незрелых крысах (как описано ранее в работе L. J. Black and R. L. Goode,Life Sciences,26, 1453 (1980). Незрелые крысы линии Spraque Dawley) (самки, возраст 18 дней) подвергались испытаниям группами по шесть особей. Животные подвергались обработке путем ежедневной внутрибрюшинной инъекции 10 мкг соединения, 100 мкг соединения, (100 мкг соединения + 1 мкг 17-эстрадиола) для проверки на антиэстрогенность, и 1 мкг 17 эстрадиола, совместно с 50% ДМСО/50% физиологического раствора в качестве носителя инъекции. На 4-й день животных умерщвляли путем асфиксии СО 2 и их матки удаляли и снимали избыток липида, удаляли все виды жидкости и определяли вес сырой ткани. Небольшую часть одного рога подвергали гистологическим исследованиям, а остаток использовали для выделения всей РНК для того, чтобы оценить экспрессию гена 3 компонента хромосомного набора. Результаты биологических испытаний Сродство к рецептору эстрогена (обозначено как РВА: для 17-эстрадиола = 100) Соединение: РВА Ралоксифен 200 Тамоксифен 1,8 Пример 10 20 Пример 7 42 Пример 8 40 Пример 9 40 Пример 12 114 Пример 11 80 Пример 13 27 Пример 14 32 Пример 15 53 Пример 20 53 Пример 21 23 Испытание на инфекционную люциферинмонооксигеназу Соединение% Акти% Активировавирования ния с 1 нМ 17 эстрадиолом Не обнаружено 17-Эстрадиол 100% Эстриол 38% Не обнаружено Тамоксифен 0% 10% Ралоксифен 0% 0% Пример 10 1% 2% Пример 7 4% 8% Пример 8 6% 78% Пример 9 6% 8% Пример 12 13% 24% Пример 11 8% 12% Пример 13 8% 17% Испытание со щелочной фосфатазой клеток Ишикавы Соединение(соединение + 1 нМ 17-эстрадиол) Не обнаружено 17-Эстрадиол 100% Тамоксифен 0% 45% Ралоксифен 5% 5% Пример 10 6% 19% Пример 7 1% 9% Пример 8 10% 22% Пример 9 3% 11% Пример 12 7% 16% Пример 11 6% 11% Пример 13 7% 9% Пример 14 2% 14% Пример 15 0% 5% Пример 20 34% 34% Пример 21 27% 23% Модель крыс, подвергнутых овариэктомии за 3 дня до испытания Соединение 10 мкг 100 мкг Тамоксифен 69,6 мг 71,4 мг Ралоксифен 47,5 мг 43,2 мг Контроль = 42,7 мг 1 мкг 17-эстрадиола =98,2 мг Соединение 10 мкг 100 мкг 100 мкг + 1 мкг 17-эстрадиола Пример 7 47,8 мг 64,8 мг 75,4 Контроль=20,2 мг 1 мкг 17-эстрадиола=80,2 мг Соединение 10 мкг 100 мкг 100 мкг + 1 мкг 17-эстрадиола Пример 12 36,9 мг 49,5 мг 63,1 Контроль=31,4 мг 1 мкг 17-эстрадиола=89,0 мг Соединение 10 мкг 100 мкг 100 мкг + 1 мкг 17-эстрадиола Пример 11 39,3 мг 59,8 мг 81,0 мг Контроль=24,5 мг 1 мкг 17-эстрадиола=90,8 мг Соединение 10 мкг 100 мкг 100 мкг + 1 мкг 17-эстрадиола Пример 14 32,5 мг 56,4 мг 79,8 мг Пример 15 40,4 мг 56,3 мг 69,3 мг Контроль=29,1 мг 1 мкг 17-эстрадиола=95,5 мг Соединение 10 мкг 100 мкг 100 мкг+ 1 мкг 17-эстрадиола Пример 20 56,0 мг 84,0 77,6 мг Контроль=32,1 мг 1 мкг 17-эстрадиола=90,2 мг Пример 21 55,6 мг 71,3 мг 66,8 мг Контроль=21,7 мг 1 мкг 17-эстрадиола=82,8 мгR2, R3, R4, R5 и R6 независимо выбраны из Н, ОН, -ОС(=O)(C1-С 4 алкил), -О(С 1-C4 алкил),галогена или C1-С 6 алкила, при условии, что в случае, когда R1 представляет собой Н, R2 не является группой ОН; Х выбран из Н, C1-С 6 алкила, нитро или галогена;Z выбран из где n равно 1, 2 или 3; где R7 и R8 независимо друг от друга выбраны из группы, включающей Н, C1-С 6 алкил, фенил,или объединены группой -(CH2)p-, где р является целым числом от 2 до 6, таким образом, что образуется кольцо, причем кольцо может быть необязательно замещено заместителями числом вплоть до трех, выбранными из группы, включающей гидроксил, галоген, C1-С 4 алкил, тригалогенметил, С 1-С 4 алкокси, тригалогенметокси,C1-С 4 алкилтио, С 1-С 4 алкилсульфинил, С 1-С 4 алкилсульфонил, гидрокси (C1-C4)алкил, -СO2 Н,-CN, -CONH(C1-C4)алкил, -NH2, C1-С 4 алкиламино, ди(С 1-С 4 алкил)амино, -NHSO2(C1-C4) алкил, -NHCO(C1-C4)алкил и -NO2;b) пяти-, шести- или семичленного насыщенного, ненасыщенного или частично ненасыщенного гетероцикла, содержащего до двух гетероатомов или замещенных гетероатомов,выбранных из группы, включающей -О-, -NH-, N(C1-C4)алкил и -N=, необязательно замещенного 1-3 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей гидроксил, галоген, C1 С 4 алкил, тригалогенметил, С 1-С 4 алкокси, тригалогенметокси, C1-С 4 ацилокси, С 1-С 4 алкилтио,С 1-С 4 алкилсульфинил,C1-С 4 алкилсульфонил,гидрокси (C1-C4)алкил, -СО 2 Н, -CN, -CONHR1,-NH2, С 1-С 4 алкиламино, ди(С 1-С 4 алкил)амино,-NHSO2R1, -NHCOR1, -NO2 и фенил, необязательно замещенный С 1-С 4 алкильными группами в количестве от 1 до 3; или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п.1, в котором где R7 и R8 независимо друг от друга выбраны из Н, C1-С 6 алкила или объединены группой-(СН 2)p-, где р является целым числом от 2 до 6,таким образом, что образуется кольцо, причем кольцо является необязательно замещенным заместителями числом вплоть до трех, выбранными из группы, включающей гидроксил, галоген, С 1-С 4 алкил, тригалогенметил, С 1-С 4 алкокси,тригалогенметокси, С 1-С 4 алкилтио, С 1-С 4 алкилсульфинил, C1-С 4 алкилсульфонил, гидрокси(С 1 С 4)алкил, -СО 2 Н, -CN, -CONH(C1-C4)алкил,-NH2, С 1-С 4 алкиламино, ди(С 1-С 4 алкил)амино,-NHSO2(C1-C4) алкил, -NHCO(C1-C4)алкил и-NО 2. 3. Соединение по п.2, в котором R7 и R8 соединены вместе в виде группы -(СН 2)p- с образованием кольца, где р является целым числом от 2 до 6, причем кольцо является необязательно замещенным 1-3 заместителями, выбранными из группы, содержащей C1-С 3 алкил,трифторметил, галоген, водород, фенил, нитро или -CN. 4. Соединение по п.1, представляющее собой одно из следующих:(Е)-N-бутил,N'-метил-3-[4-[5-гидрокси-2(4-фторфенил)-3-метилиндол-1-илметил]фенил] акриламид; 2-(4-гидроксифенил)-3-метил-1-[4-(3-N,Nдиметил-1-илпроп-1-инил)бензил]-1 Н-индол-5 ол; 2-(4-гидроксифенил)-3-метил-1-[4-(3 пиперидин-1-илпроп-1-инил)бензил]-1 Н-индол 5-ол или 2-(4-гидроксифенил)-3-метил-1-[4-(3 пирролидин-1-илпроп-1-инил)бензил]-1 Ниндол-5-ол; или его фармацевтически приемлемая соль. 5. Способ лечения или предотвращения разрежения кости у млекопитающих, включающий введение млекопитающему, которое в этом нуждается, эффективного количества соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли. 6. Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из пп.1-4 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. 7. Способ получения соединения формулыI, включающий взаимодействие соединения формулы где Y определен, как указано в п.1, с получением соединения формулы I, где Z представляет собой -CH=CH-COY. 8. Способ получения соединения формулыI, включающий взаимодействие соединения формулы где R1-R6 и Х определены, как указано в п.1, с соединением формулы где n и Y определены, как указано в п.1, с получением соответствующего соединения формулы 1, где Z представляет собой -СС-(CH2)n-Y.