Винилиндазолильные соединения

Согласно настоящему изобретению предложены винилиндазолильные соединения, подходящие для применения для лечения рака.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (US) 018149 Фактор роста фибробластов (FGF) считается важным медиатором многих физиологических процессов, таких как морфогенез в ходе развития и ангиогенез. Семейство рецепторов фактора роста фибробластов (FGFR) состоит из четырех рецепторов (FGFR1-FGFR4), которые представляют собой гликопротеины, состоящие из внеклеточных иммуноглобулин (Ig)-подобных доменов, гидрофобного трансмембранного участка и цитоплазматической части, содержащей тирозинкиназный домен. Связывание FGF приводит к димеризации FGFR с последующим аутофосфорилированием рецептора и активацией нисходящих сигнальных путей. Активация рецептора является достаточной для привлечения и активации участников специфических нисходящих сигнальных путей, которые принимают участие в регуляции целого ряда различных процессов, таких как клеточный рост, клеточный метаболизм и выживаемость клеток. Таким образом, путь передачи сигнала FGF/FGFR оказывает плеотропное действие на многие биологические процессы, имеющие важное значение для пролиферации, миграции и инвазии опухолевых клеток и ангиогенеза. Винилиндазолы известны в данной области техники как подходящие для применения в лечении рака. См., например, публикацию международной заявки WO 0210137 и публикацию международной заявки WO 2003101968. Ингибиторы FGFR также известны в данной области техники. См., например, публикацию международной заявки WO 2002022598. Согласно настоящему изобретению предложены новые винилиндазолильные соединения, которые,как полагают, имеют клиническое применение для лечения пролиферативных нарушений, таких как рак,и, в частности, заболеваний, опосредованных нарушением регуляции FGF и/или FGFR. Кроме того, определенные соединения согласно настоящему изобретению имеют повышенную активность по отношению к FGFR1 и FGFR3 по сравнению с некоторыми ранее известными ингибиторамиFGFR. Согласно настоящему изобретению предложено соединение, которое представляет собой (Е)-2-(4(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения. Согласно настоящему изобретению также предложено соединение, которое представляет собой (R)(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол, или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения. Согласно настоящему изобретению предложен способ лечения рака у млекопитающего, где указанный рак выбран из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких (НМРЛ),рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек, включающий введение нуждающемуся в указанном лечении млекопитающему эффективного количества соединения или соли согласно настоящему изобретению. Согласно настоящему изобретению также предложены фармацевтические композиции, содержащие соединение или соль согласно настоящему изобретению в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или наполнителями. Согласно конкретному варианту реализации композиция дополнительно содержит один или более других терапевтических агентов. Согласно настоящему изобретению также предложено соединение или соль согласно настоящему изобретению для применения в терапии. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено применение соединения или соли согласно настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения рака. В частности, указанный рак выбран из группы, включающей рак молочной железы, рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), рак печени,меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. В частности, раковые заболевания выбраны из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. В частности, рак представляет собой немелкоклеточный рак легких. В частности, рак представляет собой рак желудка. В частности, рак представляет собой множественную миелому. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для лечения рака, выбранного из группы, включающей рак молочной железы, немелкоклеточный рак легких, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак поджелудочной железы,рак предстательной железы, рак толстой кишки, множественную миелому, рак печени, меланому, рак головы и шеи, рак щитовидной железы, почечно-клеточный рак, глиобластому и рак яичек, содержащая соединение или соль согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Специалисту в данной области техники ясно, что рацемический (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5 дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол может быть получен, по существу, согласно способу получения, описанному для (R)-(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4 ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанола из рацемического 1-(3,5-дихлорпиридин-4 ил)этанола вместо (S)-l-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этанола. Кроме того, специалисту в данной области-1 018149 техники ясно, что (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Нпиразол-1-ил)этанол содержит один хиральный центр. Предпочтительно, чтобы (Е)-2-(4-(2-(5-(-(3,5 дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол существовал в виде отдельного энантиомера. Отдельный энантиомер может быть получен из хиральных реагентов или с помощью способов стереоселективного или стереоспецифического синтеза. Альтернативно, отдельный энантиомер может быть выделен из смесей с помощью стандартных способов хиральной хроматографии или кристаллизации. Для специалиста будет понятно, что все соединения согласно настоящему изобретению способны образовывать соли. Соединения согласно настоящему изобретению представляют собой амины и, соответственно, могут вступать в реакцию с любыми из многочисленных неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты. Указанные фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и общие способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, P. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS:Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 66, No. 1, January 1977. Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены согласно приведенным ниже примерам получения и примерам. Названия в следующих примерах получения и примерах получены путем присвоения названия веществу по его структуре, Struct=Name, с помощью программы ChemDrawUltra 10,0. Пример получения 1. 1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этанол В трехгорлую круглодонную колбу на 12 л добавляли тетрагидрофуран (ТГФ, 3 л) и диизопропиламин (ДИПА, 315 мл, 2,24 моль) и смесь охлаждали до -78 С. Медленно добавляли н-бутиллитий (1,6 М в гексанах, 1400 мл, 2,24 моль). После завершения добавления и установления температуры при -78 С медленно добавляли раствор 3,5-дихлорпиридина (296,7 г, 2,00 моль), что сразу приводило к получению желтого раствора, который превращался в суспензию ржавого цвета. После завершения добавления и установления температуры при -78 С медленно добавляли ацетальдегид (230 мл, 4,05 моль) в ТГФ (600 мл), продолжали перемешивание при -78 С. Через 3 ч баню на основе сухого льда убирали и начинали гасить реакцию путем добавления по каплям насыщенного водного раствора хлорида аммония (1 л). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры (КТ) в течение ночи при перемешивании. Смесь разбавляли метил-трет-бутилэфиром (МТБЭ, 2 л), насыщенным водным раствором хлорида аммония (1 л) и водой (2 л). После разделения органическую часть промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (солевым раствором). Экстрагировали водную фазу с помощью МТБЭ (1,5 л). Объединяли органические слои, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Очищали остаток с помощью хроматографии на силикагеле [25% этилацетата (ЭА) в гексанах] с получением названного соединения в виде красного масла. Выход: 352 г (90%). МС (ИЭР) m/z 192CHIRALPAK AD-H при использовании в качестве элюента смеси 90% гептаны/10% этанол. Пик 2 соответствовал целевому энантиомеру. Для получения абсолютной конфигурации продукт растворяли вCDCl3 (конечная концентрация 100 мг/мл). Получали спектры колебательного кругового дихроизмаVCD (BioTools Inc) с приемником инфракрасного излучения, снабженного окнами BaF2, с длиной оптического пути 100 мм. Получали спектры VCD и IR в течение 6 ч для 150 мкл образца. Полученные данные представляли без округления или дополнительной обработки. Получали данные колебательных частот и абсорбции и интенсивности VCD путем поиска низкоэнергетического конформера с помощью программы Gaussian в приближении B3PW91/6-31G на Линукс-кластере и моделировали соответствующие спектры колебательного кругового дихроизма с разрешением 6 см-1 с помощью диапазона частот Лоренца. Данные вышеуказанного анализа демонстрируют, что продукт представляет собой S-изомер. Выход: 84,37 г (27%). МС (ИЭР) m/z 192 [М+1]+. Пример получения 3. (S)-1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этилметансульфонат Растворяли (S)-1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этанол (5,02 г, 26,14 ммоль) в дихлорметане (ДХМ, 100 мл) и охлаждали колбу на ледяной бане. Добавляли триэтиламин (ТЭА, 3,5 мл, 25,11 ммоль) с последующим добавлением по каплям метансульфонилхлорида (2,2 мл, 28,42 ммоль). Убирали ледяную баню и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Через 4 ч гасили реакцию водой(100 мл) и разделяли слои. Экстрагировали водный слой ДХМ (50 мл) с последующей экстракцией смесью 20% изопропиловый спирт (ИПС)/хлороформ (50 мл). Объединяли органические экстракты, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Выход: 7,15 г, (100%). МС(ИЭР) m/z 270 [М+1]+. Пример получения 4. 4-Йод-1-(2-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-илокси)этил)-1 Н-пиразол В трехгорлой колбе, снабженной магнитной мешалкой, вводом для азота и внутренним температур-2 018149 ным датчиком, растворяли 2-(2-бромэтокси)тетрагидро-2 Н-пиран (34 г, 156 ммоль) в ацетонитриле(АЦН, 400 мл). Добавляли 4-йодпиразол (29,34 г, 149,74 ммоль) с последующим добавлением карбоната цезия (73,4 г, 223,02 ммоль). Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 18 ч. Фильтровали реакционную смесь через фильтр CELITE, фильтрат промывали АЦН и концентрировали до получения масла золотистого цвета. Использовали без дополнительной очистки. Выход: 47,819 г (99%). МС(ИЭР) m/z 323 [М+1]+. Пример получения 5. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-1 Н-индазол Наполняли реакционный сосуд на 10 л раствором N,N-диметилформамида (ДМФ, 2,50 л), 5 гидроксииндазола (150,20 г, 1,12 моль) и 1 Н-имидазола (114,35 г, 1,68 моль). Охлаждали смесь до 0 С и добавляли трет-бутилдиметилхлорсилан (253,16 г, 1,68 моль) в течение 0,5 ч. Перемешивали смесь при 18 С в течение 3 ч. К реакционной смеси медленно добавляли воду (2,5 л) на ледяной бане при температуре 5 С для поддержания внутренней температуры примерно при 20 С. Переносили смесь в разделительную воронку и экстрагировали ЭА (22,5 л), Экстракты объединяли и промывали водой (32,5 л) и солевым раствором. Сушили органические растворы над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали до получения красного масла. Пропускали масло через пластину с силикагелем при использовании в качестве элюента 0-30% ЭА в гексане с получением титульного соединения в виде кристаллизующегося оранжевого масла. Выход: 300 г (100%). МС (ИЭР) m/z 249 [М+1]+. Пример получения 6. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1 Н-индазол Охлаждали раствор 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1 Н-индазола (300,00 г, 1,21 моль) в ДХМ(4,00 л) до 10 С в реакционном сосуде на 10 л с рубашкой. К полученному в результате раствору порциями добавляли N-йодсукцинимид (298,89 г, 1,33 моль) в течение 0,5 ч. Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 3 ч с достижением полного превращения по результатам жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (ЖХ-МС) и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Охлаждали смесь до 10 С и гасили реакцию водой (2,5 л), Смесь переносили в разделительную воронку и экстрагировали водный слой ДХМ (2,5 л). Промывали объединенные органические экстракты 10% водным раствором тиосульфата натрия (5 л) и солевым раствором. Сушили органический раствор над сульфатом магния,фильтровали и концентрировали в вакууме с получением названного соединения в виде твердого вещества оранжевого цвета. Выход: 388 г (90%). МС (ИЭР) m/z 375 [М+1]+. Пример получения 7. 5-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-ил)-1 Ниндазол Охлаждали раствор 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1 Н-индазола (387,00 г, 1,08 моль) в ДХМ (2,50 л) и ТГФ (1,00 л) до 10 С в реакционном сосуде на 10 л с рубашкой. К полученной в результате смеси добавляли метансульфоновую кислоту (14,0 мл, 216,02 ммоль) с последующим добавлением 3,4-дигидро-2 Н-пирана (296 мл, 3,24 моль) в течение 0,5 ч, при этом наблюдали слабый экзотермический эффект. Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 3 ч. Охлаждали реакционную смесь до 10 С и гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 л). Разбавляли смесь водой (2 л) и экстрагировали водный слой с помощью ДХМ (2 л), Промывали объединенные органические экстракты водой (2 л) и солевым раствором. Сушили органическую смесь над безводным сульфатом натрия,фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографировали на пластине с силикагелем при использовании в качестве элюента смеси 0-10% ЭА/гексаны с получением названного соединения. Выход: 150 г (31%). МС (ИЭР) m/z 459 [М+1]+. Пример получения 8.(Е)-1-(Тетрагидро-2 Н-пиран-2-ил)-3-(2-(1-(2-(тетрагидро-2 Н-пиран-2 илокси)этил)-1 Н-пиразол-4-ил)винил)-1 Н-индазол-5-ол Барботировали азот через смесь 5-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-йод-1-(тетрагидро-2 Н-пиран-2 ил)-1 Н-индазола (14 г, 30,54 ммоль) в ДМФ (150 мл) в трехгорлой круглодонной колбе на 500 мл, снабженной магнитной мешалкой, температурным датчиком и холодильником с перегородкой, в течение 10 мин. К полученному раствору добавляли трибутиламин (ТБА, 6,7 г, 36,1 ммоль) и 4,4,5,5-тетраметил-2 винил-1,3,2-диоксаборолан (7,0 г, 43,18 ммоль) и продолжали барботировать в течение 10 мин. К полученной в результате смеси добавляли хлорид бис(трифенилфосфин)палладия (II) (0,45 г, 0,63 ммоль) и продолжали барботировать в течение дополнительных 0,5 ч. Нагревали смесь при 95-100 С в течение 18 ч. Охлаждали реакционную смесь до температуры ниже 40 С и добавляли 4-йод-1-(2-(тетрагидро-2 Нпиран-2-илокси)этил)-1 Н-пиразол (9,8 г, 30,42 ммоль). К полученной в результате смеси добавляли бария гидроксид октагидрат (19,3 г, 60,3 ммоль) и воду (13 мл) и продолжали барботировать в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли смесь хлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (II) и ДХМ(1,3 г, 1,56 ммоль) и продолжали барботировать в течение 0,5 ч. Смесь нагревали при 95 С в атмосфере азота в течение 3 ч. Смесь разбавляли ЭА и фильтровали через пластину Celite. Пластину промывали солевым раствором (400 мл) и слои фильтрата разделяли. Промывали органический слой солевым раствором и экстрагировали объединенные водные слои ЭА. Объединяли органические растворы и концентрировали до получения коричневого масла. Масло растворяли в ДХМ (100 мл) и переносили на пластину с силикагелем. В качестве элюента использовали 50% ЭА в гексанах с последующим использованием 70% ЭА в гексанах с получением светло-коричневого масла. Растирали с МТБЭ (100 мл) с получением-3 018149 названного соединения в виде твердого вещества. Выход: 5 г (37%). МС (ИЭР) m/z 439 [М+1]+. Пример получения 9. 5-R)-1-(3,5-Дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-ил)-3 Е)-2-(1-(2-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-илокси)этил)-1 Н-пиразол-4-ил)винил)-1 Н-индазол В трехгорлую круглодонную колбу на 250 мл, снабженную внутренним температурным датчиком,дефлегматором, вводом азота и магнитной мешалкой, добавляли суспензию (Е)-1-(тетрагидро-2 Н-пиран 2-ил)-3-(2-(1-(2-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-илокси)этил)-1 Н-пиразол-4-ил)винил)-1 Н-индазол-5-ола (10,0 г,22,83 ммоль) и карбоната цезия (7,88 г, 23,94 ммоль) в АЦН (92 мл) и нагревали до 60 С. К суспензии добавляли (S)-1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этилметансульфонат (7,03 г, 26,02 ммоль) и перемешивали в течение ночи. Охлаждали реакционную смесь до комнатной температуры, фильтровали и промывали твердый остаток АЦН. Концентрировали фильтрат и очищали остаток с помощью хроматографии на силикагеле (2-4% 2 М аммоний в метаноле/ДХМ). Объединяли фракции продукта и концентрировали в вакууме до получения белой пены. Выход: 12,5 г (86%). МС (ИЭР) m/z 612 [М+1]+. Пример 1. Наполняли метанолом (57 мл) трехгорлую круглодонную колбу на 250 мл, снабженную капельной воронкой, вводом для азота, внутренним температурным датчиком и магнитной мешалкой, и охлаждали на ледяной бане. К полученному в результате раствору медленно добавляли ацетилхлорид (20 мл, 281,03 ммоль) через капельную воронку. К раствору через капельную воронку добавляли 5-R)-1-(3,5 дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1-(тетрагидро-2 Н-пиран-2-ил)-3-Е)-2-(1-(2-(тетрагидро-2 Н-пиран-2 илокси)этил)-1 Н-пиразол-4-ил)винил)-1 Н-индазол (7,1 г, 11,59 ммоль), растворенный в метаноле (40 мл). После завершения добавления убирали ледяную баню, нагревали смесь до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Концентрировали реакционную смесь в вакууме до получения желтой пены. Растворяли желтую пену в метаноле (10 мл) и медленно добавляли к насыщенному водному раствору бикарбоната натрия (120 мл). Перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 30 мин. Фильтровали смесь, промывали твердый остаток водой (100 мл) и сушили в вакууме. Перекристаллизовывали твердый остаток из горячей смеси ЭА/метанол/гексаны с получением названного соединения в виде твердого вещества белого цвета. Выход:2,1 г (41%). МС (ИЭР) m/z 444 [М+1]+. Нарушенная регуляция пути FGF/FGFR наблюдается при разных типах злокачественных образований у человека. При многих видах рака часто наблюдается повышенная экспрессия FGFR и FGF, которая, как правило, коррелирует с неблагоприятным прогнозом. Активирующие мутации в киназном домене FGFR были обнаружены при различных типах опухолей, включая опухоли молочной железы, НМРЛ,мочевого пузыря, желудка, простаты, толстой кишки и множественную миелому. Геномная амплификация локуса FGFR была также обнаружена у многих пациентов, страдающих раком молочной железы,раком желудка и множественной миеломой. Повышенная экспрессия FGFR и FGF также наблюдалась при многих различных типах опухолей, таких как рак мочевого пузыря, множественная миелома, рак простаты и рак легких. Другие виды рака, при лечении которых подавление сигнального пути рецепторов семейства FGFR может оказывать благоприятное действие, включают ОМЛ, рак печени, меланому,рак головы и шеи, рак щитовидной железы, рак поджелудочной железы, почечноклеточный рак, глиобластому и рак яичек. Помимо участия в возникновении и прогрессировании рака, FGF и FGFR также являются ключевыми регуляторами ангиогенеза, в частности во время опухолевого роста. Путь FGF/FGFR также играет важную роль в стимуляции других опухолевых клеток стромального происхождения, таких как фибробласты, связанных с раком. Положительная регуляция FGF также ведет к возникновению устойчивости к антиангиогенной терапии и другим видам химиотерапии. Наконец, низкомолекулярные ингибиторы FGFR демонстрировали противоопухолевую активность в некоторых доклинических моделях опухолей и исследуются в клинических анализах. Таким образом, путь FGF/FGFR является существенным для некоторых важных клеточных процессов в раковых клетках. В связи с этим терапевтическое лечение, направленное на передачу сигнала FGFR и/или FGF, может влиять непосредственно как на опухолевые клетки, так и на опухолевый ангиогенез. Все приведенные в качестве примера соединения тестировали, по существу, в соответствии с приведенным ниже описанием согласно по меньшей мере одному из следующих анализов: анализ ферментативной активности FGFR1 (метод связывания на фильтрах), анализ ферментативной активности FGFR3(метод связывания на фильтрах), клеточный анализ вызванного FGF9 фосфорилирования ERK в линии клеток RT-112 (в присутствии БСА), клеточные анализы выявления фосфорилирования ERK(Thr202/Tyr204) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC) с помощью системы AlphaScreen SureFire, анализ in vivo направленного подавления FGFR и модели ксенотрансплантатов клеток RT112 рака мочевого пузыря человека и других типов рака. Данные приведенных анализов указыва-4 018149 ют на то, что тестируемые соединения являются ингибиторами пути передачи сигнала семейства рецепторов FGFR и имеют противораковую активность. Анализ ферментативной активности FGFR1 и FGFR3 (связывание на фильтрах) Киназу FGFR1 или FGFR3 (0,15 нг/мкл FGFR1 человека или 0,32 нг/мкл FGFR3 человека) инкубировали в 50 мкл буфера, содержащего 10 мМ 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту(HEPES), рН 7,5, 8 мМ трис(гидроксиметил)аминометан (Трис-HCl), рН 7,5, 5,0 мМ дитиотреитол (ДТТ),10,0 мкМ аденозинтрифосфат (АТФ), 10 мМ MnCl2, 150 мМ NaCl, 0,01% TRITON X-100, 0,5 мкКи 33 РАТФ и 0,05 мкг/мкл поли(Glu-Tyr). Реакцию проводили в объеме 50 мкл при комнатной температуре в течение 30 мин и затем гасили путем добавления 130 мкл 10% Н 3 РО 4. Реакционную смесь (120 мкл) переносили в 96-луночный планшет со стекловолоконными фильтрами (1,0 мкм), инкубировали при комнатной температуре в течение 20-30 мин и затем трижды промывали 0,5% Н 3 РО 4 на аппаратеTITERTEK Zoom. Лунки сушили на воздухе перед добавлением 40 мкл MicroScintTM20 (Packard) и затем анализировали с использованием счетчика Micobeta (Wallac). Для исследования подавляющей способности соединений готовили исходные растворы соединений (10 мМ) в диметилсульфоксиде (ДМСО). Готовили серийные разведения 1:3 соединений в 20% ДМСО для получения 10 точек кривой зависимости эффекта от концентрации и разведения 1:5 (конечная концентрация от 20 до 0,001 мкМ в конечной концентрации ДМСО, составляющей 4%) в реакционном планшете до добавления реакционной смеси в планшет с фильтрами для определения активности соединения. Контрольные лунки содержали только 4% ДМСО, тогда как фоновый сигнал определялся контрольными лунками, содержащими 0,1 М этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА). Значения в процентах подавления для каждой из 10 концентраций рассчитывали по сравнению с контрольными лунками на каждом планшете и данные зависимости эффекта от концентрации для 10 точек последовательно анализировали с помощью программного обеспечения ActivityBase (IDBS) с построением четырехпараметрической логистической кривой и определяли значения IC50 на основании полученной в результате кривой. Для анализов ферментативной активности FGFR1 и FGFR3 минимальные значимые отношения (MSR) для оценки IC50 составляли 1,38 и 1,47 соответственно. IC50 в примере 1 в указанных анализах FGFR1 и FGFR3 составляла 0,0077 и 0,0064 мкМ соответственно. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами ферментной активности FGFR1 и FGFR3. Вызванное FGF9 фосфорилирование ERK в присутствии БСА Клетки рака мочевого пузыря человека RT112 высевали с плотностью 5000 клеток на лунку в 100 мкл среды RPMI 1640 (Gibco 11875-085) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (ЭБС,Gibco 10082-147) и 1% раствора пенициллина/стрептомицина (Gibco 15140-122) в 96-луночные планшеты CELLBIND (Corning 3340) и инкубировали в течение ночи при 37 С. На следующее утро ростовую среду удаляли и замещали на 100 мкл среды RPMI 1640 с добавлением 20 мг/мл бычьего сывороточного альбумина (БСА). Через 3 ч инкубации при 37 С в каждую лунку добавляли по 20 мкл соединений в серийных трехкратных разведениях в RPMI 1640 с добавлением 20 мг/мл БСА в 6% ДМСО. В результате получали кривую зависимости эффекта от дозы соединения в диапазоне от 10 до 0,005 мкМ в 1% ДМСО,построенную по 10 точкам. Продолжали инкубировать в течение 1 ч при 37 С. Клетки стимулировали 50 мкл раствора, содержащего 50 мкг/мл FGF9 (RD Systems 273-F9) в бессывороточной среде RPMI, с получением конечной концентрации FGF9 500 нг/мл. Клетки фиксировали путем добавления 30 мкл 25% раствора формальдегида в фосфатном солевом буфере (ФСБ) (конечная концентрация формальдегида составляла 3,7%) и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре. Клетки трижды промывали ФСБ с последующим добавлением 100 мкл холодного метанола и инкубировали в течение 30 мин при -20 С. Метанол удаляли и клетки обрабатывали ФСБ, содержащим 0,1% ТритонХ 100 (TRITON X100), ФСБТ, трижды промывали ФСБ и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Затем клетки инкубировали при слабом помешивании в течение ночи при 4 С в 50 мкл первых антител рр 44/42 МАРК (Cell Signaling 9101S) в разведении 1:400 на ФСБ с добавлением 2% БСА, 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 1 (Sigma P2850), 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 2 (Sigma P5726) и 0,01% коктейля ингибиторов протеаз (Sigma P8340). На следующее утро планшеты промывали двумя порциями ФСБТ и двумя порциями ФСБ с последующей инкубацией в течение 1 ч при комнатной температуре в темноте в 80 мкл вторичных козьих антикроличьих антител IgG (H+L) (Invitrogen A11034), конъюгированных с Alexa Fluor 488, в разведении 1:1000 на ФСБ с добавлением 1% БСА и 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 1, 0,01% коктейля ингибиторов фосфатаз 2 и 0,01% коктейля ингибиторов протеаз. Клетки трижды промывали ФСБ с последующим добавлением 100 мкл пропидиум иодида (PI) (MolecularProbe P-3566) в разведении 1:200 на ФСБ и затем инкубировали в темноте в течение 1 ч. P-ERKположительные клетки и общее число клеток на лунку определяли с помощью сканера ACUMEN EXPLORER (TTP LabTech Ltd) с использованием оптического фильтра с длиной волны 500-530 нм и длиной волны 575-640 нм для Alexa 488 и PI соответственно. Общую среднюю интенсивность фосфорилирования ERK на лунку, определенную с использованием значений интенсивности сигнала Alexa 488, затем выражали в виде процентного подавления с использованием значений, полученных по сравнению с контролями MIN (10 мкМ соединения в ДМСО, положительный контроль) и МАХ (только ДМСО) на-5 018149 том же планшете. Значения процентного подавления и данные зависимости эффекта от концентрации(для 10 точек) последовательно анализировали путем построения четырехпараметрической сигмоидальной кривой зависимости эффекта от дозы, и относительные значения IC50 определяли на основании полученной в результате кривой. Минимальное значимое отношение (MSR) для определенной IC50 в анализе вызванного FGF9 образования p-ERK в присутствии БСА составляло 2,7. IC50 для примера 1 в данном анализе составляла 0,0004 мкМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванного FGF9 фосфорилирования ERK на раковых клетках человека. Определение интенсивности фосфорилирования ERK (Thr202/Tyr204) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC) с помощью тест-системы AlphaScreen SureFire Подавляющее действие соединения на рецептор FGF 1 измеряли путем наблюдения фосфорилирования ERK (pERK) в ответ на стимуляцию основным фактором роста фибробластов (b-FGF) на эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC). Количество pERK измеряли с использованием системы ALPHASCREEN SUREFIRE (TGR Biosciences, TGRES50K), которая представляет собой аналитическую систему для равномерного иммунного захвата по сэндвич-методу фосфорилированного анализируемого вещества с последующим выявлением с помощью покрытых антителами ядер ALPHASCREEN (Perkin Elmer) для генерации усиленного сигнала. Клетки HUVEC отмывали и культивировали до 7 пассажа в ростовой среде, состоящей из минимальной среды для эндотелиальных клеток (Clonetics, CC-3132) с добавлением 10% ЭБС, 0,4% экстракта бычьего мозга, 0,1% гидрокортизона, 0,1% сульфата гентамицина-амфотерицина-В и 0,1% рекомбинантного эпидермального фактора роста человека. Для анализа клетки собирали с помощью стандартных процедур и затем подсчитывали. Клетки (20000/лунку) сажали в 100 мкл ростовой среды в 96-луночные планшеты с покрытием поли-D-лизином (BD, 354640). Планшеты инкубировали в течение ночи при 37 С, 5% СО 2. В день проведения анализа клетки инкубировали в отсутствие сыворотки в 100 мкл среды ЕВМ(минимальной среды для эндотелиальных клеток), содержащей 1,5% ЭБС и 20 мг/мл БСА, в течение 3 ч при 37 С, 5% СО 2, затем обрабатывали 20 мкл серийных трехкратных разведений соединений в бессывороточной среде в течение 1 ч при 37 С. В результате получали кривую зависимости эффекта от концентрации в диапазоне от 10-0,005 мкМ в 1% ДМСО, построенную по 10 точкам. Через 1 ч после обработки соединением клетки стимулировали 50 мкл b-FGF (Sigma, F0291, конечная концентрация b-FGF 50 нг/мл) при температуре 37 С в течение 15 мин. В лунках, содержащих клетки и 50 мкл стимулятора bFGF, наблюдали МАХ сигнал, а в лунках положительного контроля, содержащих клетки, 10 мкМ соединения и 50 мкл стимулятора b-FGF, наблюдали MIN сигнал. Среду затем удаляли и добавляли 50 мкл на лунку 1 лизирующего буфера SUREFIRE (компонента набора SUREFIRE, TGR Biosciences) и продолжали инкубировать при комнатной температуре в течение 10 мин при слабом помешивании. Для выявления pERK 6 мкл лизата и 10 мкл реакционной смеси (60 частей реакционного буфера/10 частей активирующего буфера/0,6 частей ядер донора и ядер акцептора, Perkin Elmer, 6760617R) переносили в 384 луночный планшет ProxiPlate (Perkin Elmer, 6006280). Планшет запечатывали и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч при слабом помешивании и затем анализировали на планшетном анализаторе Perkin Elmer Envision, снабженном системой TurboModule с использованием стандартных параметров ALPHASCREEN (Ех 680 нм и Em520-620 нм). Данные интенсивности излучения выражали в виде значения процентного подавления, определяемого по сравнению с контролями МАХ (только ДМСО) и MIN(10 мкМ соединения в ДМСО, положительный контроль) на каждом планшете. Затем на основании данных для 10 концентраций соединения строили четырехпараметрическую логистическую кривую с использованием программы ACTIVITYBASE 4,0 и определяли значения IC50. Минимальное значимое отношение (MSR) для IC50 в анализе определения интенсивности фосфорилирования ERK Thr202/Tyr204) с помощью системы ALPHASCREEN SUREFIRE составляло 2,1. Рассчитанная IC50 для примера 1 в указанном анализе составляла 0,0006 мкМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванногоbFGF фосфорилирования ERK в эндотелиальных клетках пупочной вены человека. Исследование направленного подавления FGFR in vivo Самок бестимусных мышей (CD1/nu/nu) акклиматизировали в течение 1 недели до проведения лечения. Животных распределяли в группу положительного контроля, группу отрицательного контроля и группу, получающую лечение соединением. Соединение (приготовленное в 10% камеди), положительный контроль (10% камедь) и отрицательный контроль (10% камедь) вводили путем принудительного кормления через рот. Дозы соединения находились в пределах от 0,15 до 25 мг/кг. Через 2 ч животным из группы, получающей лечение соединением, и группы положительного контроля вводили внутривенно свежеприготовленный раствор мышиного bFGF (6 мкг/животное, Biosource PMG0033) в физиологическом растворе. Группа отрицательного контроля получала лечение физиологическим раствором путем внутривенного введения. Мышей умерщвляли через 10 мин после внутривенного введения дозы. Сердца животных собирали и гомогенизировали в течение 10 с в 300 мкл ледяного лизирующего буфера (RIPA;Boston BioProduct BP-115), содержащего ингибиторы в разведении 1:100 (коктейль ингибиторов фосфатаз I, Sigma P2850; коктейль ингибиторов фосфатаз II, Sigma P5726, и коктейль ингибиторов протеаз,Sigma P8340). Гомогенаты центрифугировали при 14000 об./мин в течение 15 мин и супернатанты переносили в 96-луночный планшет. Количество белка определяли с помощью набора для белкового анализаCOOMASSIE PLUS (Pierce1856210). Анализ проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию, прилагаемую к набору для проведения анализа). Гомогенаты ткани сердца анализировали с использованием MSD phospho-Erk ELISA (Meso ScaleDiscovery, номер по каталогу N41CB-1) для определения уровня фосфо-Erk в ткани. Процедуры ИФА проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию по эксплуатации, прилагаемую к набору для проведения анализа; единственная модификация заключалась в добавлении 0,2% додецилсульфата натрия к лизирующему буферу). Положительный контроль соответствовал минимальному подавлению фосфо-Erk (0%), а отрицательный контроль соответствовал максимальному подавлению фосфо-Erk (100%). Процентное подавление в группах, получающих лечение соединением, рассчитывали по отношению к значениям для групп с максимальным и минимальным подавлением. Значение ТЕС 90 рассчитывали на основании данных зависимости эффекта от дозы; оно представляло собой концентрацию, необходимую для достижения подавления на 90% в данный момент времени. Рассчитанная ТЕС 90 для соединения примера 1 составляла 28 нМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются высокоактивными ингибиторами вызванного bFGF фосфорилирования ERK in vivo. Для оценки активности указанного соединения по отношению к Kdr самок бестимусных мышей(CD1/nu/nu) акклиматизировали и лечили согласно приведенному выше описанию за исключением использования VEGF для стимуляции аутофосфорилирования Kdr (VEGF, 6 мкг/животное, RD Systems 493-MV/CF). Ткани сердца собирали и гомогенизировали, как описано выше. Полученные в результате гомогенаты анализировали с использованием набора для ИФА MSD phospho-Kdr ELISA (Meso ScaleDiscovery, каталожный номер N41ZA-1) для определения уровня в ткани фосфорилированного Kdr. Процедуры ИФА проводили в соответствии с рекомендациями производителя (см. инструкцию, прилагаемую к набору для проведения анализа; единственная модификация заключалась в добавлении 0,2% додецилсульфата натрия к лизирующему буферу). Группа положительного контроля получала лечение VEGF(96 мкг/животное) в физиологическом растворе путем внутривенного введения (соответствовала минимальному подавлению фосфорилирования KDR, 0%). Группа отрицательного контроля получала лечение физиологическим раствором путем внутривенного введения (соответствовала максимальному подавлению фосфорилирования KDR, 100%). Процентное подавление в группах, получающих лечение соединением, рассчитывали по отношению к группами максимального и минимального подавления. ЗначенияTED50 рассчитывали на основании данных зависимости эффекта от дозы, оно представляло собой дозу,необходимую для достижения подавления на 50% в данный момент времени. Рассчитанная TED50 для соединения примера 1 составляла 1,34 мг/кг. Значение ТЕС 90 рассчитывается на основании данных зависимости эффекта от дозы и представляет собой концентрацию, необходимую для достижения подавления на 90% в этой точке времени. Рассчитанная ТЕС 90 для соединения примера 1 составляет 252 нМ. Приведенные данные указывают на то, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются менее активными ингибиторами вызванного VEGF фосфорилирования Kdr in vivo по сравнению с конкретными ранее известными ингибиторами FGFR. Модели ксенотрансплантатов опухоли Клетки рака мочевого пузыря человека RT112 (Европейская коллекция клеточных культур), клетки множественной миеломы человека ОРМ-2 (Германская коллекция микроорганизмов и культур клеток),клетки немелкоклеточного рака легких (НМРЛ) человека NCI-H460 (Американская коллекция типовых культур), клетки рака поджелудочной железы человека ВхРС-3 (Американская коллекция типовых культур) или клетки рака желудка человека SNU-16 (Американская коллекция типовых культур) наращивали в культуре согласно рекомендациям Корейского банка клеточных линий (KCLB), собирали и вводили подкожно в область спины бестимусным мышам. После формирования опухоли (через 7-21 день после имплантации) животных рандомизировали и распределяли в контрольные группы и экспериментальные группы. Тестируемые соединения готовили в соответствующем плацебо (т.е. готовили в 10% камеди). И тестируемое соединение, и контроль плацебо вводили путем принудительного кормления через рот. Ответ опухоли на лечение определяли путем измерения объема опухоли, которое проводили дважды в неделю во время периода проведения лечения, и описывали как процентное подавление объема опухоли по сравнению с контрольной группой, получающей плацебо. Для соединения примера 1 была показана дозозависимая противоопухолевая активность на некоторых моделях ксенотрансплантатов опухоли. Например, на модели опухоли мочевого пузыря (RT-112) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 41,3%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 85,9%. На модели опухоли желудка (SNU-16) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 62%; при введении дозы 3 мг/кг(два раза в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 83%. На модели множественной миеломы(ОРМ-2) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 68%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 84%. На модели опухоли НМРЛ (NCI-H460) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 46%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 17 дней) наблюдалось подавление на 69%. На модели опухоли поджелудочной железы (ВхРС-3) при введении дозы 3 мг/кг (один раз в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 1%; при введении дозы 3 мг/кг (два раза в день в течение 21 дня) наблюдалось подавление на 55%. Указанные данные демонстрируют, что определенные соединения согласно настоящему изобретению являются ингибиторами опухолевого роста человеческих ксенотрансплантатов на различных животных моделях. Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно входят в состав фармацевтических композиций, вводимых различными способами. Наиболее предпочтительно указанные композиции представляют собой композиции для перорального или внутривенного введения. Указанные фармацевтические композиции и способы их приготовления хорошо известны в данной области техники. См., например, REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (D. Troy, et al., eds., 21st ed.,Lippincott WilliaMCWilkins, 2005). Соединения согласно настоящему изобретению в общем случае эффективны в широком диапазоне дозировок. Например, дневная доза в норме составляет от примерно 0,5 до примерно 100 мг/кг массы тела. В некоторых примерах меньшая нижней границы вышеуказанного диапазона доза может являться более чем достаточной, тогда как в других случаях могут применяться дозы, превышающие верхнюю границу диапазона, не имеющие при этом какого-либо неблагоприятного побочного действия. Следовательно, вышеприведенный диапазон доз никоим образом не ограничивает объем изобретения. Необходимо понимать, что конкретное количество вводимого соединения определяется врачом с учетом значимых факторов, включая заболевание, которое необходимо лечить, выбранный способ введения, конкретное вводимое соединение или соединения, возраст, массу тела и ответ на лечение конкретного пациента,а также выраженность симптомов заболевания у вышеуказанного пациента. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, представляющее собой (Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)-1 Ниндазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. 2. Соединение по п.1, представляющее собой (R)-(Е)-2-(4-(2-(5-(1-(3,5-дихлорпиридин-4-ил)этокси)1 Н-индазол-3-ил)винил)-1 Н-пиразол-1-ил)этанол или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. 3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение или соль по п.1 или 2 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем. 4. Применение соединения или соли по п.1 или 2 для лечения рака. 5. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой немелкоклеточный рак легких. 6. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой рак желудка. 7. Применение по п.4, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой множественную миелому.