Комбинация соединений-ингибиторов меланогенеза и их применение в косметике и дерматологии

Дата публикации и выдачи патента Номер заявки Комбинация, содержащая, по меньшей мере, антагонист рецептора MC1-R (нонапептид-1),ингибитор тирозиназы, производный витамина C, ингибитор переноса меланосом к кератиноцитам и их применение в косметике и дерматологии для получения отбеливающих и/или осветляющих депигментирующих композиций. 016034 Объектом изобретения является новая комбинация соединений-ингибиторов меланогенеза и их применение в косметике и депигментирующей дерматологии для получения отбеливающих и/или осветляющих композиций. Получившие признание в азиатских странах, где белизна кожи является истинным эстетическим критерием, а также у населения западных стран, где однородность цвета лица является признаком телесного здоровья, осветляющие продукты являются настоящим явлением в обществе. Сферы дерматологии и косметики ответили на эту потребность, предлагая осветляющие или отбеливающие депигментирующие продукты, предназначенные для облегчения удаления пигментных пятен (солнечные пятна, веснушки, старческие пятна) или для осветления цвета лица. Кожная и фолликулярная пигментация является результатом выхода меланина к поверхности кожи и волосяных фолликул. Меланогенез специфически обеспечивается меланоцитами - дендритными клетками, находящимися в базальном слое эпидермиса, которые образуют разветвления при контакте с кератиноцитами. Вновь синтезированный меланин переносит меланоцитарные дендриты к кератиноцитам,которые окончательно приносят меланин к поверхности эпидермиса, обеспечивая таким образом однородную окраску эпидермиса. Синтез меланинов (феомеланинов, обогащенных серой, придающих оранжевый цвет; эвмеланинов,придающих коричневый цвет) происходит внутри меланосом - органелл, относящихся к специфичным лизосомам меланоцитов, путем сложного ферментативного процесса. В меланогенезе последовательно участвуют три фермента, локализованные на внутренней стороне меланосомальной мембраны: тирозиназа TRP-2 (родственный тирозиназе белок 2) и TRP-I (родственный тирозиназе белок 1). Предшественник синтеза меланина - тирозин гидроксилируется в допу (дигидроксифенилаланин), затем окисляется до допахинона, причем эти два превращения вызваны действием тирозиназы. С этой стадии синтез меланина может быть ориентирован к феомеланину (желто-оранжевый меланин), встречающийся у блондинов или рыжих, или к эвмеланину (темно-коричневый меланин), встречающийся у людей с темной пигментацией. Эвмеланин получается в результате полимеризации допохинона, приводя к лейкодопахрому, а затем к допахрому. Этот последний, в свою очередь, превращается в 5,6-дигидроксииндол (DHI) или в 5,6-дигидроксииндол-2-карбоновую кислоты (DHICA) под действиемTRP-2. На этом уровне синтез эвмеланина может идти двумя путями. DHI окисляется под действием тирозиназы или пероксидазы в индол-5,6-хинон, тогда как DHICA под действием TRP-I приводит к 5,6 дигидроиндол-2-карбоновой кислоте. Индол-5,6-хинон и 5,6-дигидроиндол-2-карбоновая кислота полимеризуются с образованием меланохромов, а затем эвмеланина. Синтез феомеланина проходит через образование соединений серы (цистеинил-допа) с последующим действием на допахинон глютатиона и цистеина. Цистеин-допа превращается в аланилгидроксибензотиазин, а затем в феомеланин. Молекулярные механизмы, регулирующие меланоциты и образование меланина, относительно мало изучены. Работы Y. Yada показали, что под действием солнечного излучения типа УФ-В, кератиноциты человека производят и секретируют пептидный гормон эндотелии, который оказывает паракринный эффект на меланоциты (Imokawa G et al., J. Invest. Dermatol., 105:32-37, 1995). Эндотелии активирует мембранный рецептор (ETR), связанный с белком G, вызывая пролиферацию меланоцитов, транскрипцию кодирующих генов для тирозиназы и ETR. Таким же образом, в ответ на УФ-облучение кератиноциты и меланоциты секретируют пептид MSH (гормон, стимулирующий меланокортин), который регулирует активность пигментации меланоцитов. Для этого MSH соединяется с MC-R (рецептором меланокортина), вызывая активацию канала трансдукции AMPc/PKA, и даже ser/thr киназы PKC, приводя к новому синтезу тирозиназы и к синтезу эвмеланина. PKC активировал бы тирозиназу напрямую путем фосфорилирования ее цитоплазмического домена (Park et al., J. Biol. Chem., 268: 11742-11749, 1993).MSH также способствовал бы переносу меланина к кератиноцитам, стимулируя дендритность меланоцитов (Hunt et al., J. Cell. ScL, 107: 205-211, 1994). Помимо желания некоторых отдельных людей или населения получить и сохранить светлую окраску во многом стоит также задача профилактики и лечения локализованной гиперпигментации, в форме пятен. Локализованная гиперпигментация кожи может иметь эндогенную природу, как в случае веснушек, частых у людей со светлой кожей. Она может быть также результатом воздействия УФ. Под действием УФ наблюдается усиление веснушек, в том числе темного цвета. Отмечается также появление гиперпигментированных пятен на коже, в зонах, подвергшихся раздражению (укус насекомых, медленно заживающие раны, экзема и т.д.). Гормональный фактор является основой регионарных гиперпигментаций, вызванных меланоцитарной гиперактивностью, таких как идиопатические меланодермии, появляющиеся во время беременности (маточная меланодермия), или в результате эстрогеннопрогестиногенной контрацепции. Также у людей в возрасте часто появляются пигментные пятна, вызванные гиперактивностью и доброкачественной меланоцитарной пролиферацией (старческое лентиго). Вещества, известные своей депигментирующей способностью, действуют по одному из следующих механизмов: на жизнеспособность эпидермических и/или фолликулярных меланоцитов, где протекает меланоге-1 016034 нез, препятствуя одному из этапов биосинтеза меланина, или ингибируя один из ферментов, вовлеченных в меланогенез, или внедряясь как структурный аналог одного из химических соединений цепи синтеза меланина, препятствуя переносу меланина меланоцитов к кератиноцитам. Чаше всего используемыми веществами являются большей частью ингибиторы активности тирозиназы. Можно назвать фенольные производные. Эти производные имеют химическую структуру, сравнимую со структурой тирозина или допа и служат субстратом тирозиназе (конкурентное ингибирование). К этому семейству относится гидрохинон и его производные. Однако эти продукты имеют высокую цитотоксичность, способную вызвать необратимую депигментацию, и использование гидрохинона в косметических продуктах было запрещено европейским законодательством (указ 2000/6/BC). В качестве депигментирующих средств предлагаются различные другие субстанции. Некоторые имеют хорошую местную переносимость, но имеют также пониженную эффективность: витамин C, арбутин (гидрохинон -D-глюкопиранозид), ниацинамид, который действует на перенос меланосом меланоцитов к кератиноцитам (Hakozaki T. et al., British Journal of Dermatology, 147: 20-31, 2002), растительные экстракты, в частности, экстракты сои (Paine C. et al., Journal of Investigative Dermatology, 116, 4: 587595 2001,) которые ингибируют активность рецептора PAR-2 (активируемый протеазой рецептор 2), экспрессируемого кератиноцитами. Сложность механизмов, вовлеченных в синтез меланина, усложняют контроль за пигментацией кожи в условиях, удовлетворительных для здоровья потребителей (Briganti S. et al., Pigment Cell Res., 16: 101-110, 2003). Поэтому существует потребность в композициях, способных предупреждать и/или лечить явление гиперпигментации кожи и/или защитного кожного покрова, идет ли речь о гиперпигментации эндогенной природы или экзогенной (УФ, раздражение кожи, гормональная). Также существует потребность в композициях, которые не были бы токсичными и действие которых было бы обратимым. В частности, требуется хорошая эффективность для профилактики или лечения регионарных гиперпигментаций, вызванных меланоцитарной гиперактивностью, таких как: идиопатические меланодермии, возникающие во время беременности, называемые также маточной меланодермией или хлоазмой беременных, или являющиеся следствием эстрогенно-прогестиногенной контрацепции; гиперпигментация, локализованная гиперактивностью и доброкачественной меланоцитарной пролиферацией, такая как веснушки, солнечные пятна или старческие пигментные пятна, называемые актиничным лентиго; случайная гиперпигментация или депигментация, в известных случаях вызванная фотосенсибилизацией или заживлением после болезни, как, например, в зонах, подвергшихся раздражению (укус насекомых, медленно заживающие раны, экзема и т.д.), а также некоторые лейкодермы, такие как витилиго. Существует потребность в композициях, имеющих свойства отбеливания кожи и/или осветления цвета лица, и/или выравнивание окраски, и/или сглаживания различий цвета лица. Настоящее изобретение относится к комбинации, содержащей по меньшей мере три соединения: антагонист рецептора MC1-R,ингибитор тирозиназы, производный витамина C,ингибитор переноса меланосом к кератиноцитам. Неожиданно обнаружено, что комбинация трех соединений, какие определены выше, приводит к ингибированию, превышающему результат действия каждого из этих 3-х активных веществ по отдельности. Кроме того, она не имеет токсичного эффекта, а комбинированное действие трех активных веществ является обратимым. Под антагонистом рецептора MC1-R в контексте настоящего изобретения понимается соединение,способное закрепляться на клеточных рецепторах мелатропинов (MC1-R), находящихся на мембране меланоцитов, блокировать связывание MSH (Melanocortin Stimulating Hormone, или меланокортинстимулирующие гормоны), специфичного лиганда MC1-R, и ингибировать активацию MC1-R посредством MSH. Существует два эндогенных антагониста MCR, один из них белок агути, который обладает сильным сродством к MC1-R и участвует в регулировании кожной пигментации (Suzuki I. et al., J. InvestDermatol, 108: 838-842, 1997). Из известных специалисту антагонистов рецептора MC1-R можно назвать,в частности, олигопептид, открытый Европейским институтом биологии клеток (IEB), меланостатин 5(название по INCI: нонапептид-1), выпускаемый фирмой UNIPEX. Этот олигопептид обладает сродством к рецепторам MC1-R и специфично и обратимо ингибирует меланогенез, снижая синтез и избыточную продукцию пигментов меланина. Кроме того, это активное вещество не оказывает токсичного действия. Можно назвать также жирную аминокислоту ундециленомил фенилаланин, выпускаемую компаниейSEPPIC под названием SEPIWHITE MSH. Под ингибитором тирозиназы, производным от витамина C, в контексте настоящего изобретения понимается соединение, выбранное из сложных эфиров аскорбиновой кислоты, как, например, 2 глюкозидаскорбиновая кислота (название по INCI: аскорбил глюкозид), 2-O-альфа-D-глюкопираносил-6O-гексадеканоил-L-аскорбиновая кислота, аскорбил 6-пальмитат, магниевая или натриевая соль 2-2 016034 фосфатаскорбиновой кислоты. Предпочтительно используется 2-глюкозидаскорбиновой кислота, которая производится, в частности, фирмой DKSH под маркой AA-2G. Под ингибитором переноса меланосом в контексте настоящего изобретения понимается соединение, способное ингибировать перенос меланосом к кератиноцитам (Greatens A. et al. Exp Dermatol, 14: 498-508, 2005; Hakozaki Т. et al Br. J. Dermatol, 147: 20-31, 2002). В частности, под этим определением понимается такое соединение, как никотинамид (название по INCI: ниацинамид), или витамин PP, который представляет собой одну из двух форм витамина B3 и который выпускается в продажу фирмойMERCK. Таким образом, настоящее изобретение относится к комбинации, состоящей из по меньшей мере трех активных веществ, не оказывающих токсического эффекта и действующих на меланогенез по трем разным механизмам. Учитывая сложность механизмов меланогенеза, ожидалось, что комбинация этих трех активных веществ будет иметь эффект, ненамного превышающий лучший эффект их трех. Неожиданно было установлено, что комбинация этих трех активных веществ приводит к ингибированию меланогенеза, намного превышающему ожидаемый результат, идет ли речь об эндогенном меланогенезе или о меленогенезе,вызванном внешним фактором, таким как УФ, и кроме того, это ингибирование было полностью обратимым. Объектом настоящего изобретения являются также косметические и/или дерматологические композиции, содержащие эту комбинацию в косметически или дерматологически приемлемом носителе, совместимом с нанесением на кожу, волоски на теле или на волосы. Его объектом является также применение этой комбинации в косметической композиции или для получения дерматологической композиции в целях профилактики или лечения регионарной гиперпигментации, и/или для отбеливания кожи, и/или осветления цвета лица, и/или для выравнивания, и/или для сглаживании различий. В композициях по изобретению эти три соединения присутствуют в количестве, предпочтительно находящемся в диапазоне: от 0,01 до 5% для ингибитора переноса меланосом, в частности, никотинамида,от 0,01 до 5% для ингибитора тирозиназы, эфира аскорбиновой кислоты, в частности, для 2 глюкозидаскорбиновой кислоты,от 0,1 до 40 ч/млн для антагониста рецептора MC1-R, в частности, нанопептида-1, предпочтительно от 2 до 4 ч/млн. Композиции по изобретению предпочтительно подходят для топического нанесения на кожу. Косметические и/или дерматологические композиции по изобретению могут применяться в профилактических или лечебных целях. Композиции по изобретению могут, кроме того, содержать УФ-А или УФ-В фильтры, классически использующиеся в рецептурах по уходу или для дневного макияжа в косметике или в дерматологии. Они могут также содержать дополнительные активные вещества, такие как отшелушивающие активные вещества, которые также оказывают осветляющее влияние на кожу, например, можно назвать альфа- и бета-оксикислоты. Композиции по изобретению могут находиться во всех галеновых формах, обычно используемых для топического нанесения, в частности, в виде водного раствора, водно-спиртового раствора или масляного раствора. Они могут находиться в виде эмульсии "вода-в-масле", "масло-в-воде", множественной эмульсии, дисперсии наночастиц или липидных везикул типа липосом, водного геля, масляного геля,безводного жидкого продукта, пасты или твердого продукта. Эти косметические и/или дерматологические композиции могут иметь консистенцию типа: лосьон, гель, крем, пенка, мазь, пластырь, маска, карандаш, шампунь, ополаскиватель, продукт для макияжа. Разумеется, композиция по изобретению может содержать также обычные вспомогательные средства в области косметики или дерматологии, такие, например, как гидрофильные или липофильные гелеобразователи, эмульгаторы, консерванты, антиоксиданты, наполнители, растворители, отдушки, пигменты, красители. Кроме того, она может содержать одно или несколько других активных веществ, которые могут находиться в той же фазе, что и комбинация по изобретению, или, если речь идет о композиции,содержащей несколько фаз, в другой фазе композиции. Из других активных веществ, подходящих для композиций по изобретению, можно назвать гидратанты, такие как глицерин, средства от старения, такие как средства для устранения морщин, например альфа-оксикислоты, 7-гидрокси-DHEA, ретинол. В качестве масел, подходящих для композиций по изобретению, можно назвать минеральные масла (вазелиновое масло, парафиновое масло), растительные масла (масло авокадо, соевое масло), животные масла (ланолин), силиконовые масла (циклометикон), синтетические масла. Композиция может также содержать другие жировые вещества, такие как жирные спирты, воски (карнаубский воск, пчелиный воск). В качестве эмульгаторов можно назвать, как известно, сложные эфиры жирной кислоты и полиэтиленгликоля, сложные эфиры жирной кислоты и глицерина. Биологическая оценка Оценка на меланогенез проводилась in vitro на реконструированном эпидермисе, содержащем ме-3 016034 ланин, подвергавшемся или нет УФ-облучению. Наряду с этим авторы показали, что использование этой комбинации не приводит к полной блокаде механизмов, позволяющих меланоцитам производить меланин, например, в ответ или нет на солнечное облучение. Так, авторы продемонстрировали обратимость ингибирующего действия этой композиции с помощью эксперимента, осуществленного на моделях меланоцитов человека, выращенных в монослое. Фигуры Фиг. 1: Обратимость ингибирующей меланогенез активности комплекса активных веществ, содержащего продукты MS-A, MS-N и MS-Mel в модели меланоцитов человека в монослойной культуре, подвергавшихся облучению УФ-В.I - Исследование обратимости ингибирующего меланогенез действия комбинации в модели нормальных меланоцитов человека, выращенных в монослое. Целью этого исследования было оценить обратимость ингибирующего меланогенез действия комплекса, содержащего продукты MS-A, MS-N и MS-Mel в модели нормальных меланоцитов человека в монослойной культуре. 1.1 - Испытуемые продукты. Продукты AA-2G , никотинамид и меланостатин 5 обозначены соответственно MS-A, MS-N иMS-Mel. 1.2 - Экспериментальная система Нормальные меланоциты человека были получены из крайней плоти субъекта возрастом 4 года. Для проведения опытов эти клетки культивировали до получения слившихся монослоев. 1.3 - Эталонный ингибитор. Эталонным ингибитором, использованном с этом исследовании, была койевая кислота в концентрации 250 мкМ. 1.4 - Инкубация клеток с исследуемыми продуктами. Меланоциты инкубировали 72 ч при 37C во влажной атмосфере и с 5% CO2, в отсутствие (контроль) или в присутствии койевой кислоты или исследуемого комплекса активных веществ, содержащего 2,5-10-4 М MS-A, 2,5-10-4 М MS-N и 10-4 MMS-Mel. В конце этого первого периода инкубации, эталонный продукт и исследуемый комплекс активных веществ удаляли из инкубационных сред и клетки дополнительно инкубировали 72 ч в присутствии только культурной среды. Каждые 24 ч клетки не облучали или облучали УФ-В из расчета 0,05 Дж/см 2. 1.5 - Оценка результатов. 1.5.1 - Количественный анализ меланина. В конце периода инкубации определяли количество внутриклеточного содержания меланина в клеточных лизатах путем спектрофотометрических измерений на 405 нм. 1.5.2 - Количественный анализ белков. В конце периода инкубации определяли количество белков, содержащихся в клеточных лизатах,спектроколориметрическим методом по Брэдфорду. 1.6- Результаты. После первого периода инкубации в присутствии комплекса, который приводил к существенному ингибированию меланогенеза (-24,6% при T=72 ч, p0,05), клетки сохраняли свою способность производить меланин, когда продукты удаляли из культурной среды, независимо, без УФ-облучения или после облучения. Действительно, ингибирование составляло не более 9,6 и 8,3% без УФ-облучения или после облучения, соответственно (фиг. 1). Настоящее исследование позволило показать, что использование депигментирующего комплекса,содержащего продукты MS-A, MS-N и MS-Mel, не приводило к полной и неспецифической блокаде механизмов, вовлеченных в меланогенез. Действительно, его ингибирующая меланогенез активность была абсолютно обратимой, так как клетки, находившиеся в присутствии этого комплекса 72 ч, сохраняли свою способность производить меланин, когда последний удаляли из инкубационных сред. Состав В примерах проценты являются весовыми процентами. Пример 1. Крем для ухода осветляющий Арлацель 165 5,00 Пчелиный воск 5,00 Парафиновое масло жидкое 5,00 Цетиловый спирт 3,00-4 016034 Пропилпарабен 0,20 Трометамин до pH=6,2 Деминерализованная вода до 100 ( т.е. 4 ч./млн в креме) Пример 2. Лосьон Глицерин 3,00AA-2G 2,00 Никотинамид 2,00 Плюроник PE 6400 2,00 Космоцил CQ 0,50 Меланостати 5 0,40 Отдушка 0,20 Трометамин до pH=6,4 Деминерализованная вода до 100 ( т.е. 4 ч/млн в лосьоне) Пример 3. Крем по уходу за "зрелой кожей" Арлацель 165 5,00 Пчелиный воск 5,00 Парафиновое масло жидкое 6,00 Цетиловый спирт 3,00-Лупалин 0,10 Трометамин до pH=6,3 Деминерализованная вода до 100 ( то есть 4 ч./млн в креме) ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Комбинация, содержащая, по меньшей мере, антагонист рецептора MC1-R, ингибитор тирозиназы, выбранный из эфиров аскорбиновой кислоты, и ингибитор переноса меланосом к кератиноцитам,отличающаяся тем, что указанный антагонист рецептора MC1-R является продуктом, называемым нанопетид-1 согласно номенклатуре INCI. 2. Комбинация по п.1, отличающаяся тем, что ингибитор тирозиназы, выбранный из эфиров аскорбиновой кислоты, является 2-глюкозидаскорбиновой кислотой. 3. Комбинация по любому из пп.1 или 2, отличающаяся тем, что ингибитор переноса меланосом к кератиноцитам является никотинамидом. 4. Косметическая и/или дерматологическая композиция, содержащая комбинацию по любому из пп.1-3 в косметически или дерматологически приемлемом носителе. 5. Косметическая и/или дерматологическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что она содержит от 0,01 до 5% ингибитора переноса меланосом, от 0,01 до 5% ингибитора тирозиназы, выбранного из эфиров аскорбиновой кислоты, от 0,1 до 40 ч./млн антагониста рецептора MC1-R. 6. Косметическая и/или дерматологическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что она содержит от 0,01 до 5% никотинамида, от 0,01 до 5% 2-глюкозидаскорбиновой кислоты, от 0,1 до 40 ч./млн нанопептида-1. 7. Применение в косметике композиции по любому из пп.4-6 для профилактики или лечения явлений гиперпигментации кожи и/или защитного кожного покрова. 8. Применение комбинации по любому из пп.1-3 для получения дерматологической композиции,предназначенной для профилактики или лечения явлений гиперпигментации кожи и/или защитного кожного покрова. 9. Применение по п.7 или 8 для отбеливания кожи, и/или осветления цвета лица, и/или для выравнивания цвета лица, и/или для сглаживания различий окраски. 10. Применение по п.7 или 8 для профилактики или лечения регионарной гиперпигментации, вызванной меланоцитарной гиперактивностью, выбранной из идиопатической меланодермии или меланодермии, являющейся следствием эстрогеннопрогестиногенной контрацепции;-5 016034 гиперпигментаций, локализованных гиперактивностью и доброкачественной меланоцитарной пролиферацией, таких как веснушки, солнечные пятна или старческие пигментные пятна, называемые актиничным лентиго; случайной гиперпигментации или депигментации.