Композиция для лечения спида

1 Данное изобретение относится к веществу или композиции для лечения СПИДа, к способу ее получения и применения. Композиция включает в себя в качестве активного вещества диметилформамид C3H7NO(ДМФ). ДМФ обычно используется как полярный растворитель и он легко абсорбируется кожей,легкими или после перорального воздействия. Скорость абсорбции жидкого ДМФ кожей равна 9,4 мг/см 2/ч. ДМФ быстро подвергается превращению в ходе обмена веществ, основным участком биотрансформации является печень и выделение его происходит в основном с мочой. Основными метаболитами у крыс, мышей, хомяков и человека являются N-(оксиметил)-Nметилформамид (ОММФ), N-(оксиметил)формамид (ОМФ) и N-ацетил-S-(N-метилкарбамоил)цистеин (АМКЦ). Неизменившийся ДМФ выделяется в мочу в виде небольшой части дозы. Доступные ограниченные сведения показывают, что значительная часть дозы остается невыделившейся и/или выделяется в виде неидентифицированных соединений. ДМФ характеризуется низкой токсичностью при дермальном, оральном введении и при введении путем ингаляций. Считается, что он является слабым - средним раздражителем для глаз и легко проникает через кожу. Нет сведений о том, что кожа чувствительна к ДМФ.NOAEL (количество, не вызывающее заметного вредного воздействия) нельзя установить путем проведения опытов несколько раз в течение 90 дн. Опыты с проведением ингаляции для собак в течение 28 дней показали, что при концентрации 63 мг/м 3 вредное воздействие не наблюдается. В других опытах на собаках обнаружены обратимые сердечно-сосудистые изменения при концентрации 60 мг/м 3. ДМФ является тератогенным и, вероятно,эмбриолетальным веществом. NOAEL, при котором заметно его воздействие на кроликов,равно 44 мг/кг веса тела при оральном введении и 150 мг/м 3 при ингаляции. Согласно другому аспекту данного изобретения предусмотрен способ получения лекарственного средства или препарата для лечения СПИДа, причем способ включает стадию соединения ДМФ, по меньшей мере, с одним физиологически приемлемым эксципиентом или носителем. Далее, изобретение относится к применению при лечении СПИДа композиции, содержащей ДМФ как активный терапевтический агент и, по меньшей мере, один физиологически приемлемый эксципиент или носитель. Настоящее изобретение предусматривает далее способ лечения СПИДа, включающей введение субъекту, нуждающемуся в лечении,композиции, содержащей физиологически эффективную дозу ДМФ как активного терапевтического агента и, по меньшей мере, один физио 001957 2 логически приемлемый эксципиент или носитель, как указано выше. Дозировка может быть выбрана таким образом, чтобы обеспечить концентрацию терапевтически активного агента в крови субъекта,подлежащего лечению, равную примерно 50500 частей на миллион, предпочтительно примерно 50-200 частей на миллион. Установлено,что пиковая концентрация ДМФ в плазме, равна 50-100 частей на миллион, повышает количество Т-клеток CD4 у пациента, зараженного ВИЧ 1, с 312 до более 1000/мл в течение 3 недель после начала лечения. Доза может быть введена через кожу, то есть путем проникновения через кожу терапевтически активного агента, например, при наложении на кожу пластыря или ватного тампона,пропитанного активным терапевтическим агентом или композицией, содержащей активный терапевтический агент. Концентрация активного терапевтического агента в композиции, использованной для пропитки пластыря или ватного тампона, может быть равна, примерно, 10100%. Изобретение также предусматривает дозированную форму для лечения вирусной и/или микробной инфекции, которая представляет собой средство для локального введения, такое как кожный пластырь или мягкая прокладка, на которых адсорбировано или абсорбировано эффективное количество активного терапевтического агента, описанного выше. Средство для локального применения может представлять собой изделие из синтетического полимерного материала, например, TEFLON (товарный знак), на котором адсорбирован или абсорбирован активный терапевтический агент. Обычно дозированная форма включает ДМФ в смеси с коллоидальной двуокисью кремния, образующей гель, которым пропитывают пластырь. Пластырем может быть пластырь Virodene P058. Настоящее изобретение ниже описано в примере со ссылкой на прилагаемые фигуры и примеры, причем на фиг. 1 показана зависимость вирусной нагрузки от времени для пациента, инфицированного СПИДом, которому накладывали пластырь Virodene P058 (ДМФ); на фиг. 2 показана зависимость концентрации ДМФ в плазме от времени во время первой серии опытов по определению токсичности на людях; на фиг. 3 показана зависимость концентрации ДМФ в плазме от времени во время второй серии опытов по определению токсичности на людях. Свойства ДМФ (BASF Industrial Chemicals,Диметилформамид, проспект М 5351 е. октябрь,1989).C3H7ON Относительная молярная масса 73,095 г/моль Температура замерзания-61 С ДМФ представляет собой бесцветную, высококипящую, мобильную, полярную, гигроскопичную жидкость со слабым характерным запахом. Как апротонный растворитель с высокой диэлектрической постоянной ДМФ является прекрасным растворителем, растворяется в воде и в липидах и имеет низкое давление паров при 23 С. При контакте ДМФ с сильными окислителями, алкилалюминием и галогенированными соединениями могут возникнуть пожары и произойти взрывы. ДМФ хранится в контейнере без доступа воздуха ниже -5 С. Растворы перфузата/ КЗА(ОV) смешивают в требуемых количествах,когда это нужно и не хранят для дальнейшего использования. Лечение ВИЧ Исследования токсичности проводили на людях, как и стадия 3 клинических испытаний на пациентах, инфицированных ВИЧ-1, с применением кожных пластырей Virodene PO 58. Изобретатель также проводил исследования ДМФ in vitro на клеточных структурах. Пациенту, инфицированному ВИЧ-1, вводят диметилформамид (Virodene PO 58) при наложении кожных пластырей, пропитанных гелем диметилформамида, на тело пациента. Два пластыря накладывали на различные части тела пациента, например, на предплечье. Каждый пластырь содержал, примерно, 7,064 г геля,включающего ДМФ (92,5% м/м) и коллоидную двуокись кремния (7,5% м/м). Гель служил для предотвращения вытекания жидкого ДМФ из пластырей. Пластыри готовили максимум за 12 ч до использования, так как ДМФ очень быстро испаряется. Концентрация ДМФ в крови пациента составляет 100 частей на миллион. Для пациента весом 60 кг для получения концентрации 100 частей на миллион требуется, примерно, 14 г в течение 12 ч. Пациенту вводили Nацетилцистеинглютатион и/или (перорально или внутривенно) фосфолипиды в количестве 250 300 мг каждый день в качестве регулятора для печени. Вместо этого или в добавление к этому пациенту для регулирования работы печени можно также вводить глютамин. Основываясь на исследованиях Marz и Nohova, определили,что площадь поверхности, требующаяся для абсорбции этого количества, составляет около 127,2 см 2. Для получения в крови концентрации,равной 100 частей на миллион, в час должно абсорбироваться около 1,272 г ДМФ, следовательно, каждый липкий пластырь должен содержать 7,064 г ДМФ для доставки требующе 001957 4 гося количества, причем площадь поверхности каждого пластыря составляет 6,36 см 2. Скорость абсорбции ДМФ равна 9,4 мг/см 2/ч. Теоретически такое лечение позволяет ввести 125-135 частей на миллион, но вследствие испарения ДМФ,достигают величины 100 частей на миллион. Способность абсорбировать у разных пациентов различная в зависимости от таких факторов, как тип кожи и толщина кожи. Для достижения желаемых концентраций ДМФ у пациентов, проводят мониторинг концентрации ДМФ в плазме каждому пациенту и подбирают лечение в зависимости от этой концентрации ДМФ каждому пациенту (см. фиг. 2 и 3, показывающие различные концентрации ДМФ в плазме у пациентов,подвергавшихся одному и тому же лечению). Таким образом, каждая полоска пластыря содержала, примерно, 7,064 г геля ДМФ и двуокиси кремния. Каждый пластырь накладывали на 12 ч или один раз в неделю на срок в 12 недель, или дважды в неделю на срок 6 недель. Анализы крови отдельных пациентов показали увеличение числа Т-клеток CD4 от 350 до 1000 и быстрое снижение ПЦР (ценных реакций полимеразы) (вирусная нагрузка) от 120000 до 500/мл в течение трех недель (см. фиг. 1) всего лишь после трехразового повторения курса лечения. Определение ПЦР проводили на мониторе Roche amplicor HIV (ВИЧ). Неопределяемой концентрацией вирусов считается вирусная нагрузка менее 500/мл. У некоторых пациентов, проходивших курс лечения, наблюдалось острое угревое состояние или симптомы краснухи. При лечении ДМФ, когда концентрация ДМФ в крови пациента составила 50 - 100 частей на миллион, симптомы краснухи и сильная угревая сыпь резко уменьшились или вообще исчезли через 7 дней. До лечения при помощи диметилформамида проводилось полное клиническое и психическое обследование пациента. Обследование позволило получить основные биохимические и гематологические сведения о пациенте. Проводились также подробные вирологические серологические ВИЧ-1 исследования для определения количества вирусов во всем теле пациента и их проводили в течение недели или во время курса лечения. Концентрация ДМФ в крови пациента определялась ежечасно во время лечения. Каждое утро брали образцы крови из вены при помощи внутривенной линии, которая оставалась открытой для введения нормального физиологического раствора со скоростью 20 мл/ч и проводился также ежедневный мониторинг активного метаболита АКМЦ, выделившегося из ДМФ (например, отбирались каждые 4 ч образцы мочи). Последующее введение ДМФ регулируется в соответствии с измеренными изменениями концентрации ДМФ в крови, возникающими вследствие изменений показателей абсорбции и ежедневно снимались полные гематологический и 5 биохимический профили для обнаружения изменений в работе печени. Проводили также ежедневные полные клиническое и психологическое обследования. Ежедневная вирологическая серотология позволяет установить содержание вирусов в теле пациента и осуществить мониторинг улучшения иммунного состояния пациента (клеткиCD4 Т-хелпер) и изучались также прогностические факторы. Серологические исследования основывались на антигене р 24 и количественном наблюдении за ЦРП или можно применять другие методы. Проводилось также еженедельное определение количества CD4 и бета-2 макроглобулина для того, чтобы управлять иммунным состоянием пациента и делать прогноз. Все клинические и лабораторные данные заводятся в централизованную базу данных для облегчения быстрого отклика на любое ухудшение, чтобы лечение давало максимальный клинический результат при минимальных побочных эффектах. Испытания включали: а) Сыворотка: - S - Na, S - К, S - Cl, S - СО 2,S- мочевина, Сурат, S-креат, S - Ca,S-Mg, S - фос, сыворотка, общее, S - сопряженная; б) Гемоглобин: - НВ Det, красные кровяные тельца, гематокрит, MCV, MCH, MCHC,RDW; в) Электрофорез протеина: ST - протеин, S- альбумин, S - общий Глоб, S - альфа 1 Глоб, S альфа 2 Глоб, S - Бета Глоб, S - Гамма Глоб; г) Дифференцированное количество белых телец: - количество белых телец, Нейтро абсолют, Лифо абсолют, Моно абсолют, Эозино абсолют, Базо абсолют; д) Ферменты печени: - S - алк. Фос, S Гамма GT, S - Alt (SGPT), S-AST (SGOT), S LD; е) Вирология: Маркеры клеток, ЦПР, Бета 2 6 ж) Анализ крови на содержание ДМФ; з) Анализ мочи на содержание АМКЦ. Оказывается, ДМФ действует как один из обратных ингибиторов транскриптазы и ингибитор протеазы. Проводились испытания in vitro и оказывается, что ДМФ растворяет частицы вирусов, например, капсид. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Композиция для лечения СПИДа, содержащая диметилформамид в качестве активного терапевтического вещества и, по меньшей мере, один физиологически приемлемый эксципиент или носитель. 2. Композиция по п.1, у которой физиологически приемлемым эксципиентом или носителем является коллоидная окись кремния. 3. Способ получения композиции для лечения СПИДа, заключающийся в соединении диметилформамида, по меньшей мере, с одним физиологически приемлемым эксципиентом или носителем. 4. Применение для лечения СПИДа композиции по п.1. 5. Способ лечения СПИДа, включающий введение субъекту, нуждающемуся в лечении,композиции по п.1. 6. Способ по п.5, отличающийся тем, что вводят количество композиции, обеспечивающее концентрацию активного вещества в крови,равную примерно 50-500 ppm. 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что вводят количество композиции, обеспечивающее концентрацию активного вещества в крови,равную примерно 50-200 ppm. 8. Способ по любому из пп.5-7, отличающийся тем, что введение осуществляют чрескожно. 9. Дозированная форма для лечения СПИДа, которая представляет собой средство для локального применения, на котором абсорбировано или адсорбировано эффективное количество диметилформамида.