Антитела для лечения и профилактики болезни альцгеймера и их применение

АНТИТЕЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Описано применение антитела, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом А для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера и схожих заболеваний, при которых схемы для пациента зависят от генотипа ApoE пациента, а также гуманизированная форма антитела 3D6, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом А, фармацевтическая композиция, содержащая указанное антитело, и выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая указанное антитело.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЯНССЕН САЙЕНСИЗ АЙРЛЭНД ЮCи (IE); ВАЙЕТ ЭлЭлСи (US)I. Общие положения. Болезнь Альцгеймера (БА) представляет собой прогрессирующее заболевание, приводящее к сенильной деменции. См. в целом Selkoe, TINS, 16:403 (1993), Hardy et al., WO 92/13069, Selkoe, J.(1995). В более широком смысле заболевание подразделяется на две категории: с поздним началом (в возрасте более 65 лет) и с ранним началом, когда заболевание развивается намного ранее сенильного периода, например в возрасте от 35 до 60 лет. Оба типа заболевания имеют одинаковую патологию, но в тех случаях, когда заболевание начинается в раннем возрасте, проявляется тенденция к большей тяжести и большему распространению нарушений. Заболевание характеризуется как минимум двумя типами поражений головного мозга: нейрофибриллярные клубки и сенильные бляшки. Нейрофибриллярные клубки представляют собой внутриклеточные отложения ассоциированного с микротубулами (микротрубочками) тау-протеина, состоящего из двух нитей, переплетенных между собой в виде пары. Сенильные (т.е. амилоидные) бляшки представляют собой участки дезорганизованного нейропиля до 150 мкм в поперечнике с внеклеточными отложениями амилоида в центре, которые видны под микроскопом при анализе срезов мозговой ткани. Накопление амилоидных бляшек в головном мозге также сопровождает синдром Дауна и другие когнитивные расстройства. Главной составной частью бляшек является пептид, названный А или -амилоидный пептид. А-пептид представляет собой внутренний фрагмент более крупного трансмембранного гликопротеина,называемого амилоидным белком-предшественником (АРР). Данный пептид имеет атомную массу 4-кДа и состоит из 39-43 аминокислот. В результате протеолитической обработки АРР различными ферментами секретазами А-пептид обнаруживают, главным образом, как в короткой форме, длиной 40 аминокислот, так и в длинной форме, длина которой составляет от 42 до 43 аминокислот. Часть гидрофобного трансмембранного домена АРР находится на карбоксильном конце А-пептида и возможно отвечает за способность А-пептидов группироваться в бляшки, особенно в случае длинной формы. Накопление амилоидных бляшек в головном мозге в конечном итоге приводит к гибели нейронных клеток. Физикальные симптомы, связанные с этим типом невральной деградации, характеризуют болезнь Альцгеймера. С наличием болезни Альцгеймера были взаимосвязаны некоторые мутации в белке АРР. См., например, Goate et al., Nature, 349:704 (1991) (замена валина 717 на изолейцин), Chartier Harlan et al., Nature,353:844 (1991 (замена валина 717 на глицин); Murrell et al., Science, 254:97 (1991) (замена валина 717 на фенилаланин); Mullan et al., Nature Genet. 1:345 (1992) (двойная мутация, заменяющая лизин 595-метионин 596 на аспарагин 595-лейцин 596). Полагают, что такие мутации вызывают болезнь Альцгеймера за счет увеличенной или измененной переработки АРР в А-пептид, в частности переработки АРР в большее количество длинной формы А-пептида (например, А 1-42 и А 1-43). Считают, что мутации в других генах, таких как гены пресенилина PS1 и PS2, косвенно влияют на переработку АРР, что приводит к образованию повышенного количества А-пептидов длинной формы (см. Hardy, TINS, 20:154(1997. Аполипопротеин Е (ApoE) кодирует белок процессинга холестерина. Ген, который картирован на 19q13.2, имеет три аллельных варианта: ApoE4, ApoE3 и ApoE2. Частота варианта ароЕ 4 этого гена в общей массе населения варьируется, но всегда находится на уровне менее 30% и часто в диапазоне 8-15%. Наиболее частой формой является ApoE3, а наименее частой - ApoE2. Для лиц с одним аллелем Е 4 риск развития болезни Альцгеймера, как правило, повышен в два-три раза. Для лиц с двумя аллелями Е 4 (обычно составляющих приблизительно 1% населения) этот риск повышен приблизительно в девять раз. Несмотря на это, даже у лиц с двумя аллелями Е 4 болезнь Альцгеймера развивается не всегда. Приблизительно у 40% пациентов с поздним началом болезни Альцгеймера обнаруживают как минимум один аллель Е 4. Генетический скрининг на Е 4 не проводили в плановом порядке, поскольку не было известно, каким образом можно использовать эту информацию для выбора терапевтической схемы. Сущность изобретения Изобретение относится к применению антитела, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом А для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера у пациента с нулевым числом аллелей ApoE4 ("пациент, не имеющий ApoE4") и страдающему болезнью Альцгеймера, причем антитело представляет собой гуманизированную форму мышиного антитела 3D6 (инвентарный номер АТСС РТА-5130), а положения 234, 235 и 237 в константной области тяжелой цепи заняты аминокислотами Ala, Ala и Ala соответственно, причем положения пронумерованы по системе нумерации EU. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело представляет собой антитело IgG изотипа. В одном из вариантов осуществления изобретения антитело представляет собой антитело человека изотипа IgG1. Изобретение также относится к гуманизированной форме антитела 3D6 (инвентарный номер АТСС РТА-5130), которое специфически связывается с N-концевым эпитопом А, при этом антитело содержит константную область тяжелой цепи человека с мутациями L234A, L235A и G237A, где положения пронумерованы по системе нумерации EU. В одном из вариантов осуществления изобретения изотип гуманизированного антитела представляет собой IgG1, IgG2 или IgG4 человека, предпочтительно IgG1. В одном из вариантов осуществления изобретения гуманизированное антитело содержит гуманизированную легкую цепь с аминокислотной последовательностью, включающей SEQ ID NO: 48, и гуманизированную тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, включающей последовательностьSEQ ID NO: 66 или 67. Изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики болезни Альцгеймера, содержащей вышеупомянутое гуманизированное антитело. Изобретение также относится к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей вышеупомянутое гуманизированное антитело, имеющей последовательность, содержащую нуклеотиды 58-1407 последовательности SEQ ID NO: 68. В одном из вариантов осуществления изобретения выделенное гуманизированное антитело содержит вариабельную область зрелой легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 2, вариабельную область зрелой легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 3 и константную область тяжелой цепи человека с изотипом IgG, где имеются мутации L234A, L235A и G237A, причем положения пронумерованы по системе нумерации EU. В одном из вариантов осуществления указанное выделенное антитело имеет изотип IgG1 человека. Краткое описание чертежей На фиг. 1 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. MITT = модифицированный принцип назначенного лечения. На фиг. 2 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов,которые полностью прошли программу клинических испытаний ("завершившие курс лечения"), по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. На фиг. 3 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов,носителей ApoE4, по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. На фиг. 4 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов,носителей ApoE4, полностью прошедших клиническое испытание, по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. На фиг. 5 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов,не являющихся носителями ApoE4, по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. На фиг. 6 дана аналогичная с фиг. 5 информация, за тем исключением, что на фиг. 6 показаны изменения по сравнению с плацебо, основанные на оценках по шкале MMSE. На фиг. 7 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAD, NTB и CDR-SB у леченых пациентов,не являющихся носителями ApoE4 и полностью прошедших клиническое испытание, по сравнению с пациентами, получавшими плацебо, с применением статистической модели с повторяющимися измерениями без допущения линейности. Столбцы выше нуля показывают улучшение по сравнению с плацебо. На фиг. 8 показана аналогичная с фиг. 7 информация, за тем исключением, что на фиг. 8 показаны изменения по сравнению с плацебо, основанные на оценках по шкале MMSE. На фиг. 9 показаны изменения оценок по ADAS-Cog, DAS, NTB и CDR-SB с динамикой по времени у леченых пациентов по сравнению с пациентами, получавшими плацебо в группе субъектов, не являющихся носителями ApoE4. На фиг. 10-12 показаны изменения оценок по BBSI в общей группе (носители и не носителиApoE4), носители ApoE4 и больные, не являющиеся носителями ApoE4, соответствующим образом сопоставляются с пациентами, получавшими плацебо. На фиг. 13 показана концентрация белка фосфо-тау у прошедших лечение пациентов по сравнению с пациентами, получавшими плацебо (без проведения различий по генотипам ApoE4). На фиг. 14 показаны изменения концентрации бапинейзумаба в сыворотке с динамикой по времени На фиг. 15 показана выверка доменов CH2 в IgG1 человека (SEQ ID NO: 95), IgG2 (SEQ ID NO: 96) и IgG4 (SEQ ID NO: 97) с мышиными IgG1 (SEQ ID NO: 98) и IgG2a (SEQ ID NO: 99). На фиг. 16 показана очистка от бляшек А посредством применения микроглии мыши, полученной из производных 3D6 мышиного IgG1. MsIgG1 и MsIgG2a представляют собой мышиные антитела против несущественных антигенов. Антитела 3D6 имеют вариабельную область, описанную в этом документе. 3D6/FcR1 показывает единичный мутант Е 233 Р в участке связывания Fc константной области IgG1. 3D6/C1q показывает тройной мутант в участке связывания C1q. См., например, таблицу 10 и пример 6. На фиг. 17 показана очистка от бляшек А посредством применения микроглии мыши, полученной из производных 3D6 мышиного IgG2a. IgG2a представляет собой мышиное антитело против несущественного антигена. Остальные антитела и условия описаны, например, в табл. 10 и примере 6. На фиг. 18 показана очистка от бляшек А посредством применения микроглии мыши, полученной из гуманизированных производных 3D6 (ААВ). Антитела и условия описаны, например, в табл. 10 и примере 6. На фиг. 19 показаны результаты анализа in vitro по измерению поглощения бисера, покрытого мышиным IgG, микроглиальными клетками мыши. Условия описаны в примере 6. На фиг. 20 показан сходный анализ с использованием индикаторных гуманизированных антител. Условия описаны в примере 6. На фиг. 21 показаны результаты анализа ELISA по измерению связывания C1q индикаторными гуманизированными антителами. См. пример 7. На фиг. 22 показаны результаты антителозависимого анализа с комплементом на цитотоксичность с использованием индикаторных гуманизированных антител. Результаты представлены в соответствии с описанием в примере 7. На фиг. 23 показаны результаты анализа ELISA по измерению связывания C1q индикаторными мышиными антителами. См. пример 8. На фиг. 24, 25 показаны результаты анализа на ситуативный испуг у мышей, леченных индикаторными гуманизированными антителами. Проведено сравнение результатов между мышами дикого типа и мышами линии Tg2576, как это описано в примере 9. На фиг. 26 показаны результаты анализа активности ADCC для антител анти-Льюис Y AbO2. См. пример 15. На фиг. 27 показаны результаты анализа активности CDC (коплементзависимой цитотоксичности) для антител анти-Льюис Y AbO2. См. пример 15. Определения. Термин "иммуноглобулин" или "антитело" (используемый в этом документе взаимозаменяемо) относится к антигенсвязывающему белку, имеющему базовую структуру из четырех полипептидных цепей,состоящую из двух тяжелых и двух легких цепей, причем указанные цепи стабилизированы, например,межцепочечными дисульфидными связями, которые обладают способностью специфически связывать антиген. Как тяжелые, так и легкие цепи свернуты в домены. Термин "домен" относится к глобулярному участку полипептида тяжелой или легкой цепи, содержащему пептидные петли (например, содержащему от 3 до 4 пептидных петель), которые стабилизированы, например, складчатым листом и/или внутрицепочечной дисульфидной связью. Далее в настоящем документе домены указываются как "константные" или "вариабельные", исходя из относительной утраты изменчивости внутри доменов для членов разнообразных классов в случае "константного" домена или значительной изменчивости внутри доменов для членов разнообразных классов в случае "вариабельного" домена. "Константные" домены в легкой цепи взаимозаменяемо упоминаются в этом документе как"Константные" домены в тяжелой цепи взаимозаменяемо упоминаются в этом документе как "константные области тяжелой цепи", "константные домены тяжелой цепи", области "СН" или домены"СН". Обычно также принято считать, что терминологическое определение "константная область тяжелой цепи" собирательно относится к доменам, представленным в полноразмерной константной области, к которым относятся домены СН 1, шарнир, CH2 и СН 3 в случае антител изотипа IgG. "Вариабельные" домены в легкой цепи взаимозаменяемо упоминаются в настоящем документе как "константные области легкой цепи", "константные домены легкой цепи", области "VL" или домены"VL". "Вариабельные" домены в тяжелой цепи взаимозаменяемо упоминаются в настоящем документе как "вариабельные области тяжелой цепи", "вариабельные домены тяжелой цепи", области "VH" или домены"VH". Термин "область" относится к части или сегменту цепи антитела и включает константные и вариабельные домены в соответствии с определениями, представленными в настоящем документе, а также более дискретные части или сегменты указных доменов. Например, вариабельные домены или области легкой цепи включают "гипервариабельные участки" или "CDR", рассеянные среди "каркасных участков" или "FR" в соответствии с определениями, данными в настоящем описании. Ссылки на антитело или иммуноглобулин включают интактные антитела и связывающие их фрагменты. В типичном случае фрагменты конкурируют с интактным антителом, из которого они извлечены,-3 022307 за специфическое связывание с антигеном. Фрагменты включают раздельные тяжелые и легкие цепи,Fab, Fab', F(ab')2, Fabc и Fv. Раздельные цепи включают NANOBODIES (т.е. выделенный фрагмент VH из тяжелой цепи антител верблюдов или лам, выборочно гуманизированный). Выделенные фрагментыVH также можно получить из других источников, таких как антитела человека. Фрагменты получают с применением методик рекомбинантной ДНК либо посредством ферментативного или химического разделения интактных иммуноглобулинов. Термин "антитело" также включает одну или более цепей иммуноглобулинов, которые химически конъюгированы с другими белками или экспрессируются как гибридные белки. Термин "антитело" также включает биспецифическое антитело. Биспецифическое или бифункциональное антитело представляет собой искусственное гибридное антитело, имеющее две различные пары "тяжелая цепь/легкая цепь" и два различных сайта связывания. Биспецифические антитела можно получить разнообразными способами, включая слияние гибридом или сцепление фрагментов Fab'."Специфическое связывание" антитела означает, что антитело демонстрирует заметную аффинность к антигену или предпочтительному эпитопу и предпочтительно не проявляет значительной перекрестной реактивности. Заметное или предпочтительное связывание включает связывание с аффинностью как минимум 106, 107, 108, 109 или 1010 М-1. Предпочтительны значения аффинности более 107 М-1,лучше более 108 М-1. Значения, промежуточные тем, которые сформулированы в этом документе, также входят в сферу настоящего изобретения, а предпочтительная аффинность связывания может быть указана как диапазон аффинностей, например, от 106 до 1010 М-1, предпочтительно от 107 до 1010 М-1, более предпочтительно от 108 до 1010 М-1. Антитело, "не проявляющее значительной перекрестной реактивности", представляет собой антитело, которое не осуществляет явной связи с нежелательным объектом (например, с нежелательным белково-подобным объектом). Например, антитело, которое специфически связывается с А, будет явно связываться с А, но незначительно реагировать с не являющимися А белками или пептидами (например, с другими белками и пептидами, включенными в бляшки). Антитело,специфичное к предпочтительному эпитопу, будет, например, давать несущественную перекрестную реакцию с удаленными эпитопами того же белка или пептида. Специфическое связывание можно определить любым способом для определения такого связывания, известным в данной области знаний. Предпочтительно определять специфическое связывание в анализе Скэтчарда и/или в конкурентных анализах на связывание. Термин "гуманизированный иммуноглобулин" или "гуманизированное антитело" относится к иммуноглобулину или антителу, которые включают как минимум одну гуманизированную цепь иммуноглобулина или антитела (т.е. как минимум одну гуманизированную легкую или тяжелую цепь). Термин"гуманизированная цепь иммуноглобулина" или "гуманизированная цепь антитела" (т.е. "гуманизированная легкая цепь иммуноглобулина" или "гуманизированная тяжелая цепь иммуноглобулина") относится к цепи иммуноглобулина или антитела (т.е. к легкой или тяжелой цепи соответственно), имеющей вариабельную область, которая включает вариабельный каркасный участок (также известный как каркас вариабельного региона), по существу, из иммуноглобулина или антитела человека, и гипервариабельные участки (CDR) (например, как минимум один CDR, предпочтительно два CDR, более предпочтительно три CDR), по существу, из иммуноглобулина или антитела нечеловеческого происхождения (например,грызуна и, по выбору, мыши) и дополнительно включает константные области (например, как минимум одну константную область или ее сегмент в случае легкой цепи и предпочтительно три константные области в случает тяжелой цепи). Термин "гуманизированная вариабельная область" (например, "гуманизированная вариабельная область легкой цепи" или "гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи") относится к вариабельной области, которая включает вариабельный каркасный участок (также известный как каркас вариабельной области), по существу, из иммуноглобулина или антитела человека, и гипервариабельные участки (CDR), по существу, из иммуноглобулина или антитела нечеловеческого происхождения. Фраза "по существу, из иммуноглобулина или антитела человека" или "по существу, человеческого происхождения" означает, что при выверке с аминокислотной последовательностью иммуноглобулина или антитела человека в целях сравнения область имеет как минимум 80-90% (например, как минимум 90%), предпочтительно 90-95%, более предпочтительно 95-99% идентичность (т.е. локальную идентичность последовательности) с последовательностью каркаса или константной области, что учитывает, например, возможность консервативных замещений, консенсусных замещений последовательности, замещений в зародышевой линии, обратных мутаций и т.п. Внесение консервативных замещений, консенсусных замещений последовательности, замещений в зародышевой линии, обратных мутаций и т.п. часто упоминают как "оптимизацию" гуманизированного антитела или цепи. Фраза "по существу, из иммуноглобулина или антитела нечеловеческого происхождения" или "по существу, не от человека" означает,что последовательность иммуноглобулина или антитела идентична соответствующей последовательности от другого биологического вида, например от нечеловекообразного млекопитающего, как минимум на 80-95%, предпочтительно на 90-95%, более предпочтительно на 96, 97, 98 или 99%. В соответствии с этим все области или аминокислотные остатки гуманизированного иммуноглобулина или антитела либо цепи гуманизированного иммуноглобулина или антитела, возможно, за исключением CDR, по существу, идентичны соответствующим областям или аминокислотным остаткам одной или более последовательностей нативного иммуноглобулина человека. Термин "соответствующая область" или "соответствующий остаток" относится к области или остатку второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности, которые занимают то же самое (т.е. равноценное) положение, что и область или остаток в первой аминокислотной или нуклеотидной последовательности, когда первая и вторая последовательности оптимально выверены в целях сравнения. Термины "гуманизированный иммуноглобулин" или "гуманизированное антитело" не охватывают химерные иммуноглобулины или антитела, как это будет определено ниже. Хотя гуманизированные иммуноглобулины или антитела являются химерными по своей конструкции (т.е. содержат области белка более чем из одного биологического вида), они включают дополнительные признаки (т.е. вариабельные области, содержащие остатки донорского CDR и остатки акцепторного каркаса), отсутствующие в химерных иммуноглобулинах или антителах, как определено в настоящем документе. Термин "химерный иммуноглобулин" или "химерное антитело" относится к иммуноглобулину или антителу, вариабельные области которого происходят от первого биологического вида, а константные области происходят от второго биологического вида. Химерные иммуноглобулины или антитела можно сконструировать, например, методами генетической инженерии из сегментов гена иммуноглобулина,относящегося к разным биологическим видам."Антиген" представляет собой объект (например, белково-подобный объект или пептид), с которым специфически связывается антитело. Термин "эпитоп" или "антигенная детерминанта" относится к сайту антигена, с которым специфически связывается иммуноглобулин или антитело (либо его антигенсвязывающий фрагмент). Эпитопы могут быть сформированы как смежными аминокислотами, так и несмежными аминокислотами, оказавшимися по соседству за счет третичного складывания белка. Эпитопы, сформированные из смежных аминокислот, типично сохранятся под действием денатурирующих растворителей, тогда как эпитопы,сформированные за счет третичного складывания, типично утрачиваются под действием денатурирующих растворителей. Типичный эпитоп включает как минимум 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислот в уникальной пространственной конформации. Способы определения пространственной конформации эпитопов включают, например, рентгеновскую кристаллографию и двумерный ядерный магнитный резонанс. См., например, Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, vol. 66,G.E. Morris, Ed. (1996). Антитела, которые распознают один и тот же эпитоп, можно идентифицировать в простом иммуноанализе, показывающем способность одного антитела блокировать связывание другого антитела с целевым антигеном, т.е. в конкурентном анализе на связывание. Конкурентное связывание определяют в анализе, в котором тестируемый иммуноглобулин подавляет специфическое связывание эталонного антитела с общим антигеном, таким как А. Известны многочисленные типы анализов на конкурентное связывание, например: твердофазный прямой или непрямой радиоиммуноанализ (RIA), твердофазный прямой или непрямой иммуноферментный анализ (EIA), конкурентный сэндвич-анализ (см. Stahli et al.,Methods in Enzymology, 9:242 (1983, твердофазный прямой EIA с биотином-авидином (см. Kirkland etImmunol. 137:3614 (1986, твердофазный прямой анализ с меткой, твердофазный прямой сэндвич-анализ с меткой (см. Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988, твердофазный прямой RIA с меткой 1-125 (см. Morel et al., Mol. Immunol. 25(1):7 (1988, твердофазный прямойal., Scand. J. Immunol. 32:77 (1990). В типичном случае такой анализ включает применение очищенного антигена, связанного с твердой поверхностью или клетками на твердой поверхности, немеченного тестируемого иммуноглобулина и меченого эталонного иммуноглобулина. Конкурентное ингибирование измеряют, определяя количество метки, связанной с твердой поверхностью или клетками в присутствии тестируемого иммуноглобулина. Обычно тестируемый иммуноглобулин представлен в избытке. Как правило, если конкурирующее антитело представлено в избытке, оно будет подавлять специфическое связывание эталонного антитела с общим антигеном как минимум на 50-55%, 55-60%, 60-65%, 65-70%,70-75% или более. Эпитоп также распознается иммунологическими клетками, например В- и/или Т-клетками. Клеточное распознавание эпитопа можно определить в анализах in vitro, которые измеряют антигензависимую пролиферацию по ассимиляции 3H-тимидина, секреции цитокина, секреции антитела или по антигензависимому цитолизу (анализу на цитотоксические Т-лимфоциты). Примерные эпитопы или антигенные детерминанты можно обнаружить в амилоидном белкепредшественнике (АРР), но предпочтительно в А-пептиде АРР. Существуют множественные формы АРР, например АРР 695, АРР 751 и АРР 770. Аминокислотам в АРР присваивают номера в соответствии с последовательностью изоформы АРР 770 (см., например, GenBank Accession No. P05067). Последователь-5 022307 ности А-пептидов и их родство с предшественником АРР проиллюстрированы на фиг. 1 в ссылке Hardy Если из контекста явно не следует иное, ссылка на А также включает природные аллельные вариации вышеуказанной последовательности, особенно связанные с наследственным заболеванием, такие как арктическая мутация, E693G, нумерация АРР 770. A41, А 40 и А 39 отличаются от А 42 отсутствием Ala, Ala-Ile и Ala-Ile-Val соответственно в С-концевой области. А 43 отличается от А 42 присутствием треонинового остатка в С-концевой области. Предпочтительные эпитопы или антигенные детерминанты, как указано в настоящем документе, расположены в N-концевом участке А-пептида и включают остатки в пределах аминокислот А 1-11, предпочтительно остатки А 42 1-10, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7 или 3-7. Добавочные предпочтительные эпитопы или антигенные детерминанты включают остатки А 2-4, 5,6, 7 или 8, остатки А 3-5, 6, 7, 8 или 9 либо остатки А 42 4-7, 8, 9 или 10. Другие предпочтительные эпитопы встречаются в центральной или С-концевой области, как будет описано ниже.N-концевой эпитоп А означает эпитоп в пределах остатков 1-11. Эпитоп в С-концевой области означает эпитоп в пределах остатков 29-43, а эпитоп в центральных областях означает эпитоп в пределах остатков 12-28. Термин "растворимый" или "диссоциированный" А относится к несгруппированному или дезагрегированному полипептиду А. Термин "нерастворимый" относится к сгруппированному А-полипептиду, например к А, скрепленному нековалентными связями. Полагают, что А (например, А 42) агрегируется, как минимум частично, из-за присутствия гидрофобных остатков в С-концевой области пептида (часть трансмембранного домена АРР). Один из способов получения растворимого А заключается в растворении лиофилизированного пептида в чистом DMSO с обработкой ультразвуком. Полученный раствор центрифугируют для удаления любых нерастворимых твердых частиц. Термин "участок Fc" относится к С-концевой области антитела IgG, в особенности к С-концевой области тяжелой цепи (цепей) указанного антитела IgG. Хотя границы региона Fc тяжелой цепи IgG могут незначительно варьироваться, регион Fc типично определяется как простирающийся приблизительно от аминокислотного остатка Cys226 до карбоксильного конца тяжелой цепи (цепей) IgG. Термин "эффекторная функция" относится к активности, присущей участку Fc антитела (например,антитела IgG), и включает, например, способность антитела связывать такие эффекторные молекулы, как комплемент и/или рецепторы Fc, которые способны контролировать некоторые иммунные функции антитела, например активность эффекторных клеток, лизис, активность, опосредованную комплементом,клиренс антитела и время полувыведения антитела. На эффекторную функцию также могут влиять мутации в шарнирной области. Термин "эффекторная молекула" относится к молекуле, которая способна связываться с региономFc антитела (например, антитела IgG), включая белок комплемента или рецептор Fc. Термин "эффекторная клетка" относится к клетке, способной связываться с участком Fc антитела(например, антитела IgG), в типичном случае через рецептор Fc, экспрессированный на поверхности эффекторной клетки, включая, но не ограничиваясь ими, лимфоциты, например антигенпредставляющие клетки и Т-клетки. Термин "нумерация Kabat", если не указано иное, определяет нумерацию аминокислотных остатков, соответствующую источнику Kabat et al. (Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed.Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991, включенному в этот документ в качестве ссылки. Термин "рецептор Fc" или "FcR" относится к рецептору, который связывается с регионом Fc антитела. Типичные рецепторы Fc, которые связываются с регионом Fc антитела (например, антитела IgG),включают, но не ограничиваясь ими, рецепторы подклассов FcRI, FcRII и FcRIII, включая аллельные варианты и альтернативно сплайсированные формы этих рецепторов. Обзор рецепторов Fc приведен в ссылках Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods, 4:25-34(1994) и de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995). Термин "адъювант" относится к соединению, которое при введении совместно с антигеном усиливает или перенаправляет иммунный ответ на антиген, но при самостоятельном введении не вызывает иммунного ответа на антиген. Адъюванты могут усиливать иммунный ответ посредством разных механизмов, включая рекрутмент лимфоцитов, стимуляцию В- и/или Т-клеток и стимуляцию макрофагов. Площадь под кривой (AUC) представляет собой площадь под кривой на графике концентрации лекарства в плазме во временной динамике. Применительно к отдельно взятому пациенту площадь под кривой представляет площадь под кривой, основанную на данных от этого пациента. Применительно к группе пациентов площадь под кривой представляет среднюю площадь под кривой в пределах сопоста-6 022307 вимого интервала времени для разных пациентов, входящих в состав выборки. Средняя концентрация в сыворотке для отдельно взятого пациента представляет собой среднюю концентрацию антитела (или индуцированных антител для активного агента) на протяжении определенного промежутка времени. Средняя концентрация в сыворотке применительно к группе пациентов представляет среднюю величину для средних концентраций в сыворотке у отдельно взятых пациентов на протяжении определенного промежутка времени. Максимальная концентрация в сыворотке для отдельно взятого пациента представляет максимальную концентрацию антитела (или индуцированных антител для активного агента) на протяжении определенного промежутка времени. Максимальная концентрация в сыворотке применительно к группе пациентов представляет среднюю максимальную концентрацию антитела или индуцированных антител у всех пациентов в группе на протяжении определенного промежутка времени. Для краткости термин "носитель ApoE4" иногда используется для обозначения пациентов, имеющих один или два аллеля ApoE4, а "лицо, не имеющее ApoE4" или "неноситель ApoE4" - для обозначения пациентов, имеющих нулевое число аллелей ApoE4. Подробное описание изобретенияI. Общие положения. Изобретение предлагает применение антитела, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом А для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера, при котором схема лечения, назначаемая пациенту, зависит от генотипа пациента по ApoE. Лечение основано на(1) наблюдении того факта, что определенные схемы иммунотерапии чаще приводят к развитию вазогенного отека (ВО) у пациентов, имеющих аллель ApoE4 (Е 4), чем у пациентов, утративших аллель Е 4, и еще чаще у пациентов, имеющих два аллеля Е 4; и/или (2) исходном наблюдении разной эффективности лечения у пациентов, имеющих ApoE4, и у пациентов, не имеющих аллеля ApoE4, либо у пациентов,получивших как минимум шесть доз, и у пациентов, получивших менее шести доз. Результаты также показывают, что частота случаев вазогенного отека повышается в зависимости от частоты введения и количества доз. Несмотря на то что практика изобретения не зависит от понимания механизма, выдвинута гипотеза о том, что связь вазогенного отека с генотипом ApoE4 может возникать в связи с большим накоплением отложений А и, следовательно, с индукцией более выраженной реакции очистки при связывании антител с отложениями. Очистка от амилоидных отложений может привести к вазогенному отеку посредством реализации любого из нескольких механизмов. Удаление амилоида из стенок кровеносных сосудов(сосудистого амилоида) может привести к повышенной проницаемости кровеносных сосудов, а увеличение количества амилоида в периваскулярном пространстве может замедлять дренаж интерстициальной жидкости, и/или увеличенный результирующий поток амилоида из межсосудистого компартмента в паренхиму мозга может создать осмотический градиент. Хотя эффект вазогенного отека обычно бессимптомен, обратим и не препятствует дальнейшему лечению, тем не менее желательно подобрать такую терапевтическую схему, которая снижает риск развития вазогенного отека. Таким образом, изобретение предлагает применение антитела, которое специфически связывается сN-концевым эпитопом А для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера,при котором схема иммунотерапии варьируется, например, для того, чтобы отрегулировать фагоцитарную реакцию в зависимости от статуса пациента по ApoE. Хотя фагоцитарная реакция полезна для очистки от амилоидных отложений, ее можно контролировать По выбору, чтобы избежать вазогенного отека. Обычно пациентам, имеющим два аллеля Е 4, которые наиболее склонны к вазогенному отеку, вводят тот же агент или в меньшей дозе, или с меньшей частотой, чем пациентам, имеющим нулевое число аллелей Е 4, либо вводят другой агент, который в меньшей степени способен индуцировать фагоцитарную реакцию, либо вводят агент пациенту другим способом, например подкожным. Пациентов с одним аллелем Е 4 можно лечить так же, как и пациентов или с нулевым числом аллелей Е 4, или с двумя аллелями Е 4, либо их лечение можно модифицировать таким образом, чтобы доза и/или частота введения агента были промежуточными между пациентами с нулевым числом аллелей Е 4 или с двумя аллелями Е 4.ApoE человека имеет входной инвентарный номер Р 02649 в базе данных UniProtKB/Swiss-Prot. Варианты Е 2, Е 3 и Е 4 описаны в Genomics, 3:373-379 (1988), J. Biol. Chem. 259:5495-5499 (1984) и Proc.Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82:3445-3449 (1985). Ассоциация формы Е 4 с болезнью Альцгеймера, начинающейся в позднем возрасте, была описана, например, в публикациях Corder, Science, 261, 921-3 (1993),Fairer, JAMA, 278, 1349-56 (1997) и Saunders, Neurology, 43, 1467- 72 (1993). Аллельные формы, представленные у любого индивида, можно определить множеством общепринятых методик, таких как прямое секвенирование, применение матриц GeneChip или подобных им, аллель-специфичных зондов,методов удлинения цепи на одно основание, специфического аллельного удлинения. Аллельные формы также можно определять на уровне белка способом ELISA, используя антитела, специфичные для разных аллельных продуктов экспрессии. Наборы для генетического и иммунологического анализа доступны для приобретения (например, от таких производителей, как Innogenetics, Inc. или Graceful Earth, Inc). Оп-7 022307 ределение аллельных форм обычно проводят in vitro, т.е. в образцах, извлеченных из организма пациента и никогда не возвращаемых обратно.III. Различные стратегии лечения или мониторинга в зависимости от ApoE. А. Различные схемы лечения. Некоторые схемы иммунотерапии болезни Альцгеймера и других заболеваний были увязаны с вазогенным отеком (ВО) в головном мозге некоторых пациентов. Обычно частота ВО повышена у носителей ApoE4 по сравнению с лицами, не имеющими ApoE4, а также у пациентов, получающих более высокие дозы некоторых агентов в определенных схемах иммунотерапии. ВО наблюдается на изображениях,полученных способом магнитно-резонансной томографии (МРТ), как высокая интенсивность сигнала в последовательности режима с подавлением сигнала свободной воды (FLAIR), демонстрирующем аномалии мозга и набухание извилин. ВО обычно наблюдается после первого или второго введения иммунотерапевтического агента, хотя были отмечены наблюдения и после третьего или четвертого введения. Большинство пациентов с ВО, обнаруженным на МРТ, бессимптомны. Проявления ВО разнородны, и находки на МРТ у конкретного пациента могут со временем изменяться. По набуханию извилин и, в некоторой степени, более значительным изменениям магнитного резонанса (МР), наблюдаемым в режимеFLAIR, можно отличить ВО от часто наблюдаемых изменений белого вещества в режиме FLAIR как у здоровых лиц пожилого возраста, так и у пациентов с болезнью Альцгеймера (Hentschel et al., 2005; deLeeuw et al., 2001). Вазогенный отек (ВО) характеризуется увеличением объема внеклеточной жидкости вследствие повышенной проницаемости эндотелиальных клеток капилляров головного мозга для макромолекулярных белков сыворотки (например, для альбумина). ВО может быть результатом повышенной проницаемости капилляров головного мозга. Если клинические симптомы, наблюдаемые у пациентов с ВО, существуют, то они вариабельны и до настоящего времени проявлялись как преимущественно легкие по характеру. В случаях ВО, наблюдаемого на регулярно проводимых МРТ, большинство пациентов бессимптомны. Клинические наблюдения в симптоматических случаях ВО включают изменение состояния психики (например, повышенную спутанность сознания, летаргию, дезориентацию и галлюцинации), рвоту,головную боль, нарушения походки, зрительные расстройства, утомляемость, раздражительность, атаксию, снижение аппетита и диарею. Как резюмируется выше, изобретение предлагает различные схемы лечения в зависимости от того,несет ли пациент нулевое число, один или два аллеля Е 4. Таким образом, в группе пациентов, проходящих лечение, лиц, имеющих нулевое число аллелей Е 4, можно лечить иначе, чем носителей двух аллелей. Лиц, имеющих один аллель Е 4, можно лечить иначе (промежуточным образом) по сравнению с пациентами, которые имеют нулевое число или два аллеля Е 4, либо их можно сгруппировать с пациентами,которые имеют нулевое число или два аллеля Е 4 в любой из схем, представленных ниже. Из этого следует, что лиц, имеющих один аллель Е 4, можно лечить иначе, чем лиц, имеющих нулевое число аллелей,и/или лиц, имеющих два аллеля ApoE4, можно лечить иначе, чем лиц, имеющих один аллель ApoE4. Нынешний опыт применения некоторых иммунотерапевтических агентов свидетельствует о том, что ВО чаще развивается при назначении пациентам доз выше 5 мг/кг (см. PCT/US07/09499). Для некоторых видов лечения статус ApoE4 является единственным генетическим маркером, определяющим разные схемы лечения для разных пациентов. При других видах лечения разные схемы лечения можно основывать на комбинации ApoE4 с другими генетическими маркерами, связанными с подверженностью болезни Альцгеймера или устойчивости к болезни Альцгеймера. По выбору, группа пациентов, проходящих лечение, достаточно велика по численности и имеет все подгруппы лиц с разным числом аллелей ApoE4, благодаря чему ассоциацию между разными схемами лечения и разным числом аллелей ApoE4 можно наблюдать при случайном назначении разных схем со статистической достоверностью как минимум 95%. Например, группа пациентов, проходящих лечение,может состоять как минимум из 100, 500 или 1000 лиц, причем 10-70% и более типично 30-50% из них имеют как минимум один аллель ApoE4. Группу пациентов, получающих лечение, можно также (т.е. по выбору) охарактеризовать как общую группу лиц, получающих определенное лекарство, выпускаемое определенным производителем. В ряде видов лечения, как это будет более подробно рассмотрено ниже, лицам, имеющим нулевое число аллелей ApoE4, вводят агент по схеме, направленной на достижение эффективности, оцениваемой по одному или более клинических критериев, таких, например, как когнитивные показатели (например,ADAS-Cog, NTB, DAD, MMSE, CDR-SB, NPI), биомаркеры (например, CSF-тау) и объем мозга (например, BBSI, VBSI), а также по другим параметрам, таким как, например, желательная безопасность, фармакокинетика и фармакодинамика. В некоторых видах лечения пациентам, имеющим один или два аллеля Е 4, вводят тот же агент, что и пациентам с нулевым числом аллелей Е 4, но в меньшей дозе или с меньшей частотой. Цель такого лечения заключается в достижении меньшей средней концентрации агента в сыворотке на протяжении определенного промежутка времени (сниженная площадь под кривой) и/или в снижении максимальной пиковой концентрации. Этого можно достичь, например снижая дозу при ее введении с такой же частотой или уменьшая частоту при введении той же дозы или снижая дозу и уменьшая частоту одновременно. Если дозу снижают, но частоту оставляют неизменной, снижение дозы обычно составляет 10-90%, чаще приблизительно 30-75 или 40-60%. Если уменьшают частоту, но сохраняют неизменной дозу, то типичное снижение частоты составляет от двух до пяти раз. Иногда частоту уменьшают, просто пропуская одну дозу или две дозы подряд в схеме, назначенной пациентам с нулевым числом аллелей ApoE4. Такие дозы можно пропустить, например, в период вазогенного отека у пациента. При других видах лечения лицам, имеющим один или два аллеля Е 4, вводят сниженную дозу агента, но с большей частотой по сравнению с лицами, имеющими нулевое число аллелей Е 4. Например, дозу можно снизить наполовину, а частоту увеличить вдвое. При таких видах лечения общее количество вводимого лекарства в двух подгруппах на протяжении определенного времени (т.е. площадь под кривой) будут одинаковыми в пределах ошибки эксперимента, но максимальная концентрация в плазме будет меньше у лиц, имеющих два аллеля Е 4. Например, предпочтительно, чтобы у пациентов, имеющих один или два аллеля Е 4, максимальная концентрация антитела в сыворотке составляла менее 14 мкг/мл, а для пациентов с нулевым числом таких аллелей она составляла менее 28 мкг/мл. В других видах лечения лечение проводят в разное время по отношению к прогрессированию заболевания в зависимости от статуса ApoE4. При таких видах лечения лечение проводят раньше у пациентов, имеющих два аллеля ApoE4, по сравнению с пациентами, имеющими нулевое число аллелей ApoE4,или у пациентов, имеющих один аллель ApoE4, по сравнению с пациентами, имеющими нулевое число аллелей ApoE4, и/или у пациентов, имеющих два аллеля ApoE4, по сравнению с пациентами, имеющими один аллель ApoE4. Прогрессирование заболевания можно оценить, например, по шкале MMSE, на которой балльная оценка от 27 до 20 считается нормальной, а оценка 20-26 баллов расценивается как болезнь Альцгеймера легкой степени тяжести. Таким образом, например, средняя балльная оценка для лиц,не имеющих ApoE4, в начале лечения может оказаться выше, чем у носителей ApoE4 (пациентов с одним или двумя аллелями ApoE4). По выбору, лечение носителей ApoE4 можно начинать профилактически,т.е. еще до явного проявления клинических симптомов. Таких пациентов можно идентифицировать при популяционном скрининге на статус ApoE4. Лечение можно начать сразу по выявлении такого статуса или позднее, когда пациент достигнет определенного возраста (например, 55, 60 или 65 лет), когда риск развития болезни Альцгеймера достигает высокого уровня. Хотя понимание механизма не является необходимым для практического осуществления таких видов лечения, полагают, что раннее лечение носителей ApoE4 может принести пользу, поскольку аллель ApoE4 снижает способность восстановления нейронных повреждений и/или потому, что отложения А у таких пациентов выражены в большей степени. При некоторых видах лечения лечение проводят, вводя лекарство разными способами пациентам с нулевым числом аллелей ApoE4 и пациентам, имеющим один аллель ApoE4, и/или пациентам, имеющим два аллеля ApoE4. Например, лекарство можно вводить внутривенно пациентам с нулевым числом аллелей ApoE4 и подкожно пациентам, имеющим один или два таких аллеля. В типичном случае дозировка лекарства выше и/или частота его введения меньше у пациентов, не имеющих аллелей ApoE4, по сравнению с носителями ApoE4. При некоторых видах лечения положительная реакция на лечение (т.е. подавление когнитивного спада или подавление снижения объема мозга) у носителей ApoE4 достигается в течение более длительного промежутка времени, чем у пациентов, не имеющих аллелей ApoE4. Больший промежуток времени может отражать меньшую способность к нейронному восстановлению и/или больший груз амилоидных отложений у таких пациентов и/или применение менее мощной терапевтической схемы. При таких видах лечения лечение можно проводить как минимум в течение одного года и, по выбору, как минимум 2, 3 или 4 года до его прекращения в связи с отсутствием эффекта. При некоторых видах лечения лечение проводят посредством как минимум шести ежеквартальных введений лекарства. Как отмечалось, лекарственные агенты иногда поставляются с этикеткой, на которой указано противопоказание к применению препарата для носителей ApoE4. Такие агенты можно использовать при тех видах лечения, которые в соответствии с изобретением применяются только для пациентов, не имеющих аллелей ApoE4 (т.е. введение антитела, которое связывается с А, или агента, который индуцирует такое антитело). При таких видах лечения носители ApoE4 не получают антитела, которое связывается с А,или агента, который индуцирует такое антитело, но могут получать другие лекарства, например мемантин. Виды лечения, при которых доза и/или частота введения лекарства снижаются в зависимости от статуса ApoE4, наиболее полезны для агентов, инициирующих реакцию очистки от амилоидных отложений. В общем такими агентами являются антитела, связывающиеся с эпитопом в пределах А 1-11, которые имеют регион Fc, или фрагменты А, которые индуцируют такие антитела (т.е. содержат эпитоп в пределах А 1-11). Антитела, связывающиеся с эпитопами в центральной или С-концевой областях А,обычно связываются преимущественно с растворимыми формами А, скорее чем с амилоидными отложениями, и поэтому инициируют слабую, если вообще какую-либо, реакцию очистки от амилоидных отложений, особенно плотных или сосудистых отложений. Примеры подходящих диапазонов доз и частоты их введения представлены ниже. Из этих диапазонов доз и частот можно выбрать разные дозы и/или частоты введения для пациентам с разным статусом Е 4. Например, пациентам с одним или двумя аллелями Е 4 каждые тринадцать недель можно вводить дозу антитела от 0,1 до 1 мг/кг посредством внутривенного вливания, а пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 каждые тринадцать недель можно вводить дозу от 1 до 2 мг/кг. По выбору, каждые тринадцать недель пациентам с двумя аллелями Е 4 вводят дозу от 0,15 до 0,5 мг/кг, пациентам с одним аллелем Е 4 вводят дозу от 0,15 до 1 мг/кг (например, от 0,5 до 1 мг/кг), а пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 вводят дозу 0,15-2 мг/кг (например, 1-2 мг/кг). В предпочтительной схеме пациентам с одним или двумя аллелями Е 4 вводят антитело, связывающееся с эпитопом А в пределах аминокислотных остатков 1-11 (например, бапинейзумаб), в дозе 0,5 мг/кг, а пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 - в дозе 2 мг/кг. Дозы вводят внутривенно с ежеквартальным интервалом до тех пор, пока не разовьется вазогенный отек (если это вообще произойдет). После появления вазогенного отека очередную дозу пропускают, а затем пациентов возвращают к графику ежеквартального введения доз, используя сниженную дозу 0,15 мг/кг. Если вновь разовьется вазогенный отек, лечение прекращают. Пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 вводят дозу 0,5-2 мг/кг, причем отдельные больные с нулевым числом аллелей Е 4, по выбору,могут получать дозы 0,5, 1,0, 1,5 и 2,0 мг/кг. В качестве другого примера пациентам с двумя аллелями Е 4 вводят первую дозу 0,5 мг/кг и последующие дозы 1 мг/кг. В альтернативном варианте пациентам с двумя аллелями Е 4 вводят первую дозу 0,5 мг/кг, вторую и третью дозы 1 мг/кг и последующие дозы 2,0 мг/кг. В качестве еще одного примера пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 можно один раз в неделю вводить антитело подкожно в дозе 0,015-0,2 мг/кг, а пациентам с двумя аллелями Е 4 такую же дозу можно вводить через каждые две недели. Можно продумать схемы, равноценные любой из представленных выше, варьируя количество лекарства, частоту или способ его введения, чтобы можно было получить такую же площадь под кривой распределения антитела в сыворотке (т.е. среднюю дозу, накопленную по времени). При некоторых видах лечения пациентам с одним или двумя аллелями Е 4 вводят агент для достижения меньшей средней динамической концентрации антитела в сыворотке по сравнению с пациентами,имеющими нулевое число аллелей Е 4. Меньшую среднюю концентрацию в сыворотке поддерживают на протяжении как минимум одного или трех месяцев, обычно от трех месяцев до одного года, или неопределенно долго. Предпочтительная средняя концентрация в сыворотке для всех таких пациентов находится в диапазоне 2-7 мкг антитела на 1 мл сыворотки, причем для пациентов с одним или двумя аллелями Е 4 она бывает ниже, чем для пациентов с нулевым числом аллелей Е 4. Например, пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 можно вводить агент для достижения средней концентрации антитела в сыворотке в диапазоне 4,5-7 мкг/мл, а пациентам с одним или двумя аллелями Е 4 можно вводить агент для достижения средней концентрации антитела в сыворотке в диапазоне 2-4,5 мкг/мл. При таких видах лечения пациентам в любой подгруппе, определенной по наличию двух, одного или нулевого числа аллелей Е 4, обычно вводят лекарство по одной и той же схеме. Однако для каждой подгруппы пациентов также можно подобрать специальную схему. В этом случае средняя доза и/или частота, и/или средняя концентрация в сыворотке, и/или максимальная концентрация в сыворотке агента либо антител, индуцированных агентом, в подгруппе пациентов с двумя аллелями Е 4 бывают ниже, чем в подгруппе пациентов, имеющих нулевое число аллелей Е 4. При некоторых видах лечения пациентам с двумя аллелями Е 4 вводят другой агент, чем пациентам с нулевым числом аллелей Е 4. Разные агенты обычно различаются по их способности индуцировать реакцию очистки от амилоидных отложений (т.е. отложений, существовавших ранее). Такую способность можно протестировать, например, в анализе по очистке ex vivo, как это описано в документе US 6750324. Вкратце, антитело и микроглиальные клетки инкубируют с амилоидными отложениями от пациента,страдающего болезнью Альцгеймера, или полученными из трансгенной мышиной модели, а реакцию очистки проверяют, используя меченое антитело к А. Способность активных агентов к очистке можно протестировать сходным образом, используя в качестве источника антитела для анализа сыворотки, индуцированные активным агентом. Очистительную способность как пассивных, так и активных агентов также можно оценить в трансгенной мышиной модели, что также описано в документе US 6750324, или у пациента человека мониторинг МРТ. По выбору, реакцию очистки измеряют в анализе, выявляющем различие между компактными и диффузными амилоидными отложениями. Различия в очистительной способности некоторых антител более очевидны или исключительно очевидны тогда, когда сравнение проводят по способности очистки от компактных амилоидных отложений. По выбору, реакцию оценивают по снижению очистки от сосудистого амилоида при использовании мутантного антитела по сравнению со сходным изотипом антитела, идентичного в других отношениях. Очистку от сосудистого амилоида можно оценить по статистической значимости различий между группами животных моделей или пациентов людей, получавших лечение мутантным антителом и антителом сходного изотипа без мутаций, идентичным в других отношениях. Дополнительно или альтернативно к анализам, измеряющим реакцию очистки, некоторые антитела,пригодные для применения, предлагаемого изобретением, можно распознавать по сниженному связыванию с C1q и/или рецептором (рецепторами) Fc. Способность связывания с C1q и/или рецептором Fc может уменьшаться при мутациях, локализованных поблизости от шарнирного участка тяжелой цепи,как это будет более подробно обсуждаться ниже. Уменьшенную способность можно определить, например сравнивая мутантное антитело со сходным изотипом идентичного в других отношениях антитела, но без мутаций, представленных в мутантном антителе, т.е. антитела, имеющего аминокислотные остатки константной области человека дикого типа (например, сравнение бапинейзумаба с ААВ-003), либо сравнивая идентичные в прочих отношениях антитела, имеющие разные изотипы (например, сравнение IgG1 человека с IgG4 человека). Некоторые антитела, обладающие пониженной способностью связываться с C1q и/или рецептором(рецепторами) Fc, уменьшают микрогеморрагию по сравнению с соответствующим контрольным изотипом, но сохраняют, как минимум, такую же активность в подавлении когнитивного спада и/или очистке от амилоидных отложений. Для некоторых антител пониженная способность очистки от амилоида,главным образом, касается очистки от отложений сосудистого амилоида и/или компактных амилоидных отложений, но не относится к диффузным амилоидным отложениям. Такие антитела потенциально могут обеспечить лучшую эффективность профиля побочных эффектов, особенно для носителей ApoE4. Антитела, обладающие пониженной способностью связывания с C1q и/или рецептором Fc, можно использовать при разных видах лечения, как это описано выше. Например, антитело, обладающее пониженным связыванием с C1q и/или рецептором Fc, можно вводить пациентам, имеющим один или два аллеля ApoE4, а идентичное в других отношениях антитело без мутаций - пациентам, имеющим нулевое число аллелей ApoE4. В альтернативном варианте антитело, обладающее пониженным связыванием сC1q и/или рецептором Fc, можно вводить пациентам независимо от числа аллелей ApoE4. Антитела с константными областями, мутированными для понижения связывания с C1q и/или рецептором Fc, иногда вводят в более высоких дозах, чем идентичные в других отношениях антитела без мутаций. Для некоторых таких антител дозу можно увеличивать для достижения равноценного терапевтического эффекта с меньшими побочными эффектами. Способность к очистке зависит как от эпитопной специфичности антитела (или антител, индуцированных фрагментом для активного введения), а также от наличия и типа эффекторной функции антитела,особенно за счет способности участка Fc, если таковой имеется, связываться с рецепторами Fc. Хотя очистка от амилоидных отложений является одним полезным механизмом действия, агенты, утратившие способность очистки от таких отложений, могут быть полезными благодаря другим механизмам действия, таким как связывание с растворимым А и/или с растворимыми олигомерными формами А. Такое связывание, среди прочих возможных механизмов действия, может уменьшать токсичность указанных разновидностей и/или подавлять их агрегацию с образованием отложений. Агенты, склонные индуцировать такую реакцию очистки, включают антитела, связывающиеся с эпитопом в пределах аминокислотных остатков А 1-11 и особенно 1-7, причем такие антитела преимущественно имеют изотип IgG1 человека, который наиболее сильно взаимодействует с рецепторами Fc. Фрагменты А, содержащие эпитопы в пределах аминокислотных остатков 1-11 и особенно 1-7, одинаково эффективны в индуцировании реакции очистки. По выбору, агенты, которые инициируют реакцию очистки, могут поставляться с этикеткой, на которой напечатано, что препарат противопоказан для применения пациентам с одним или двумя аллелями ApoE4. Агенты с меньшей склонностью или полным отсутствием склонности к индуцированию реакции очистки включают антитела к А, которые имеют иной изотип, чем IgG1 человека, антитела, которые утратили участок Fc (например, фрагменты Fab,фрагменты Fv или нанотела), либо антитела с участками Fc, куда методами генной инженерии внесены мутации, понижающие взаимодействие с рецепторами Fc. Такие агенты также включают антитела, которые специфически связываются с другим эпитопным участком А, чем аминокислотные остатки 1-11,(т.е. со срединным эпитопом или С-концевым эпитопом, как это описано выше), и антитела, которые специфически связываются с растворимыми или олигомерными формами А, не связываясь с амилоидными отложениями. Такие агенты также включают фрагменты А, утратившие эпитопы в пределах аминокислотных остатков А 1-11. При таких видах лечения пациентам, имеющим два аллеля Е 4, вводят агент с меньшей тенденцией к индуцированию фагоцитарной реакции очистки, чем пациентам, имеющим нулевое число таких аллелей. Например, пациентам с нулевым числом аллелей Е 4 можно вводить антитело, связывающееся с эпитопом А в пределах аминокислотных остатков 1-11 и имеющее изотипIgG1 человека, а пациентам, имеющим два аллеля Е 4, можно вводить такое же антитело, за тем исключением, что его фрагмент Fab либо имеет иной изотип, чем IgG1 человека, либо содержит сконструированный участок Fc для снижения связывания с рецепторами Fc. Агентом, вводимым пациентам, имеющим два аллеля Е 4, также может быть антитело со срединным или С-концевым эпитопом А либо фрагмент А из срединной или С-концевой области (т.е. агент, утративший эпитоп А в пределах А 1-11). При некоторых видах лечения пациентам, имеющим два аллеля Е 4, в первоначальных дозах вводят антитело, имеющее эпитоп в срединной или С-концевой области, а в дальнейшем антитело, имеющее эпитоп в N-концевой области. Таким антителом может быть гуманизированное антитело 266, гуманизированное антитело 2 Н 6, дегликозилированное гуманизированное антитело 2 Н 6 или RN1219. Таким антителом также может быть гуманизированное антитело, которое специфически связывается с эпитопом А в пределах аминокислотных остатков 28-40 или 33-40. Предпочтительное число первоначальных доз составляет 1, 2 или 3. Пациентам, имеющим нулевое число аллелей Е 4, можно вводить антитело, имеющее эпитоп в N-концевой области. Разные схемы, назначаемые разным пациентам в зависимости от их статуса по Е 4, можно поддерживать неопределенно долгое время. Однако обычно в этом нет необходимости. Было обнаружено, что побочный эффект вазогенного отека, связанного с аллелем Е 4, обычно наблюдается после введение третьей дозы, если вообще наблюдается. Таким образом, после получения приблизительно 2-3 доз лекарства у пациентов, имеющих один или два аллеля ApoE4 и не продемонстрировавших развития вазогенного отека, этот побочный эффект, по-видимому, не разовьется, и впоследствии, если это желательно, их можно лечить по той же схеме, что и пациентов с нулевым числом аллелей Е 4. Таким же образом, у тех пациентов с одним или двумя аллелями ApoE4, у которых действительно развился вазогенный отек, несмотря на назначенную дифференциальную схему лечения, это осложнение обычно разрешается, после чего, если это желательно, их можно лечить так же, как и пациентов, имеющих нулевое число аллелей Е 4. По выбору, после выздоровления пациента от вазогенного отека дозу титруют на повышение до той,что используется при лечении лиц, не имеющих аллелей Е 4. Вазогенный отек обычно разрешается сам по себе. Однако его разрешение можно облегчить, если это желательно, за счет введения кортикостероида. Упаковки агентов могут быть снабжены этикетками, на которых указаны различные процедуры лечения в зависимости от статуса пациента по ApoE4 в соответствии с любой из описанных выше схем или их комбинациями. В. Различные режимы мониторинга. Альтернативно или дополнительно, изобретение предлагает различные режимы мониторинга для пациентов в зависимости от их статуса по Е 4. Вазогенный отек представляет собой увеличение объема головного мозга из-за утечки плазмы в интерстициальное пространство. После выхода из кровеносных сосудов жидкость удерживается за пределами сосудистой сети, главным образом, в белом веществе головного мозга. Вазогенный отек можно контролировать, получая визуальные изображения мозга, особенно посредством МРТ, позитронно-эмиссионной томографии (изображения ПЭТ) или изображения в последовательности режима с подавлением сигнала свободной воды (FLAIR) (См. Pediatric Neurology,20(3):241-243; AJNR, 26:825-830; NEJM, 334(8):494-500; Pediatr Nephrol, 18:1161-1166; Internal MedicineJournal, 35:83-90; JNNP, 68:790-791; AJNR, 23:1038-1048; Pak J. Med. Sci., 21(2):149-154 и AJNR, 21:11991209. Вазогенный отек представлен высокой интенсивностью сигнала в белом веществе головного мозга. Наблюдаемый вазогенный отек часто бессимптомен, но может также сопровождаться головной болью,тошнотой, рвотой, спутанностью сознания, судорожными припадками, зрительными аномалиями, нарушениями умственной деятельности, атаксией, лобными симптомами, теменными симптомами, ступором и очаговыми неврологическими симптомами. В соответствии с представленными способами получения визуальных изображений головного мозга пациентов с двумя аллелями Е 4 можно обследовать чаще, чем пациентов с нулевым числом аллелей Е 4. Например, у пациентов с двумя копиями Е 4 визуальные изображения головного мозга можно получать перед началом лечения, а затем ежеквартально, тогда как пациентов с нулевым числом аллелей Е 4 можно обследовать такими же способами перед началом лечения, а затем ежегодно или два раза в год. В альтернативном варианте для пациентов с нулевым числом аллелей Е 4 можно вообще обойтись без визуальных обследований головного мозга. Пациентов, имеющих один аллель Е 4, можно обследовать указанными способами с промежуточной частотой между пациентами, имеющими нулевое число аллелей Е 4 или два таких аллеля, либо можно сгруппировать их с пациентами, имеющими нулевое число аллелей Е 4 или два таких аллеля. Из этого следует, что пациентов с одним аллелем Е 4 можно контролировать иначе (например, более часто), чем пациентов с нулевым числом аллелей Е 4, а пациентов с двумя аллелями Е 4 можно контролировать иначе (например, более часто), чем пациентов с одним аллелем Е 4. При развитии вазогенного отека мониторинг пациентов можно продолжать на всем протяжении вазогенного отека и приблизительно еще год после разрешения симптомов. После этого при условии отсутствия неврологических симптомов мониторинг, по выбору, можно проводить с шестимесячными или годовыми интервалами. Упаковки агентов могут быть снабжены этикетками, на которых указаны разные процедуры мониторинга в зависимости от статуса пациента по ApoE4 в соответствии с любым из описанных выше режимов или их комбинациями. С. Универсальные схемы лечения и режимы мониторинга. Несмотря на то что носители ApoE4 и пациенты, не имеющие аллелей ApoE4, могут давать разную реакцию на лечение, как это обсуждалось выше, некоторые схемы лечения, которые безопасны и эффективны для носителей ApoE4, также безопасны и эффективны (хотя и не всегда оптимальны) для пациентов, не имеющих аллелей ApoE4, т.е. могут применяться для обоих типов пациентов независимо от их статуса по ApoE. В некоторых из таких схем агентом является антитело, которое связывается сN-концевым эпитопом А, имеющем мутацию (мутации) в константной области, уменьшающие связывание с рецептором Fc и/или C1q. Примером такого антитела служит ААВ-003. При других схемах доза и/или частота введения агента, и/или максимальная концентрация в сыворотке, и/или средняя концентрация в сыворотке вводимого или индуцированного антитела ограничены пределами, описанными в документе PCT/US2007/009499, и далее будут обобщены здесь для снижения риска вазогенного отека.IV. Агенты. А. Антитела. В патентной и научной литературе было описано множество антител к А для применения в иммунотерапии и болезни Альцгеймера, некоторые из которых проходят клинические испытания (см., например, документ US 6750324). Такие антитела могут специфически связываться с N-концевым эпитопом,срединным (т.е. центральным) эпитопом или С-концевым эпитопом, как это было определено выше. Некоторые антитела специфичны по отношению к N-концевому эпитопу (т.е. такие антитела специфически связываются с N-концом А, не связываясь с АРР). Как отмечалось выше, можно использовать антитела,связывающиеся с эпитопами в пределах аминокислотных остатков 1-10, 1-3, 1-4, 1-5, 1-6, 1-7 или 3-7 А 42, или в пределах аминокислотных остатков 2-4, 5, 6, 7 или 8 А, или в пределах аминокислотных остатков 3-5, 6, 7, 8 или 9 А, или в пределах аминокислотных остатков 4-7, 8, 9 или 10 А 42. Некоторые антитела специфичны по отношению к С-концевому эпитопу (т.е. специфически связываются с С-концом А, не связываясь с АРР). Антитела могут быть поликлональными или моноклональными. Поликлональные сыворотки типично содержат смешанные совокупности антител, специфически связывающихся с разными эпитопами по всей длине АРР. Однако поликлональные сыворотки могут быть специфичными к особому сегменту А, например к А 1-11, не проявляя специфического связывания с другими сегментами А. Предпочтительными антителами считаются химерные, гуманизированные антителаWO 90/07861, US 5693762, US 5693761, US 5585089, US 5530101 и Winter, US 5225539) или антитела человека (Lonberg et al., WO 93/12227 (1993); US 5877397, US 5874299, US 5814318, US 5789650,US 5770429, US 5661016, US 5633425, US 5625126, US 5569825, US 5545806, Nature, 148, 1547-1553(1994), Nature Biotechnology, 14, 826 (1996), Kucherlapati, WO 91/10741 (1991 EP1481008, Bleck,Bioprocessing Journal 1 (Sept/Oct. 2005), US 2004132066, US 2005008625, WO 04/072266, WO 05/065348,WO 05/069970 и WO 06/055778. Примерами антител, которые можно применять, служат антитела 3D6, 10D5 и их варианты. Оба антитела рассмотрены в патентных документах US 20030165496, US 20040087777, WO 02/46237 иPCT/US05/45614. 3D6 представляет собой моноклональное антитело (mAb), которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека, особенно с аминокислотными остатками 1-5. По сравнению с этим 10D5 представляет собой mAb, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека, особенно с аминокислотными остатками 3-6. Клеточная линия, продуцирующая моноклональное антитело 3D6(RB96 3D6.32.2.4), была депонирована в коллекции культур американского типа (АТСС), Манассас, штат Вирджиния 20108, США 8 апреля 2003 г. согласно условиям Будапештского Договора с присвоением инвентарного номера РТА-5130. Клеточная линия, продуцирующая моноклональное антитело 10D5(RB44 10D5.19.21), была депонирована в АТСС 8 апреля 2003 г. согласно условиям Будапештского договора с присвоением инвентарного номера РТА-5129. Бапинейзумаб (международное непатентованное название, объявленное Международной организацией здравоохранения) означает гуманизированное антитело 3D6, в легкой цепи которого имеется зрелая вариабельная область с аминокислотной последовательностью, обозначенной SEQ ID NO: 2, а в тяжелой цепи имеется зрелая вариабельная область с аминокислотной последовательностью, обозначеннойSEQ ID NO: 3. (Константные области тяжелой и легкой цепей антитела, объявленного ВОЗ под названием бапинейзумаб, представляют собой IgG1 человека и каппа-фактор человека соответственно). Гуманизированная легкая цепь, включая вариабельную и константную области, обозначена ниже какSEQ ID NO: 48, а гуманизированная тяжелая цепь, включая вариабельную и константную области, обозначена как SEQ ID NO: 66 или 67 (SEQ ID NO: 66 дополнительно имеет С-концевой лизин по сравнению с SEQ ID NO: 67). Гуманизированная вариабельная область легкой цепи 3D6: Гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи 3D6: Второй вариант гуманизированного антитела 3D6 с легкой цепью, содержащей зрелую вариабельную область, которая имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 4, и тяжелую цепь, содержащую зрелую вариабельную область с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 5, показан ниже. Гуманизированная вариабельная область легкой цепи 3D6: Гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи 3D6: Третий вариант гуманизированного антитела 3D6, содержащего легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 6, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 7, описан в патентной заявке US 2005/0090648 А 1, опубликованной 28 апреля 2005 г., на которую выдан патент US 7318923; эти документы включены в описание в виде ссылки практически полностью. Гуманизированная легкая цепь 3D6: Гуманизированная тяжелая цепь 3D6: Вариант гуманизированного антитела 10D5 с легкой цепью, содержащей зрелую вариабельную область, которая имеет аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 8, и тяжелую цепь, содержащую зрелую вариабельную область с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 9, показан ниже. Гуманизированная вариабельная область легкой цепи 10D5: Гуманизированная вариабельная область тяжелой цепи 10D5: Предпочтительным антителом является 12 А 11 либо его химерная либо гуманизированная форма или нанотело. Описание антитела 12 А 11 или его вариантов дано в документах US 20050118651,US 20060198851, WO 04/108895 и WO 06/066089, которые включены в описание в виде ссылки практически полностью. Антитело 12 А 11 представляет собой mAb, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека, особенно в пределах аминокислотных остатков 3-7. Клеточная линия, продуцирующая моноклональное антитело 12 А 11, была депонирована в АТСС(Коллекция культур американского типа, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209) 12 декабря 2005 г. с присвоением инвентарного номера РТА-7271 в АТСС. Предпочтительным вариантом гуманизированного антитела 12 А 11 является вариант 1, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 11. Вариант 1 гуманизированного антитела 12 А 11 описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Гуманизированная легкая цепь 12 А 11: Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 1): Второй вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 12 (вариант 2), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 2): Третий вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 13 (вариант 2.1), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 2.1): Четвертый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 14 (вариант 3), описан в документе WO 02/088306, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 3): Пятый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 15 (вариант 4.1), описан в документе US 20050118651 А 1,- 16022307 опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 4.1): Шестой вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 16 (вариант 4.2), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 4.2): Седьмой вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 17 (вариант 4.3), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 4.3): Восьмой вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 18 (вариант 4.4), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 4.4): Девятый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 19 (вариант 5.1), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.1): Десятый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 20 (вариант 5.2), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.2): Одиннадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 21 (вариант 5.3), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.3): Двенадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 22 (вариант 5.4), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.4): Тринадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 23 (вариант 5.5), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.5): Четырнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 24 (вариант 5.6), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 5.6): Пятнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 25 (вариант 6.1), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 6.1): Шестнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 26 (вариант 6.2), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 6.2): Семнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 27 (вариант 6.3), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 6.3): Восемнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 28 (вариант 6.4), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание практически полностью в виде ссылки. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 6.4): Девятнадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 29 (вариант 7), описан в документе US 20050118651 А 1, опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание в виде ссылки практически полностью. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 7): Двадцатый вариант гуманизированного антитела 12 А 11, содержащий легкую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 10, и тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, обозначенной как SEQ ID NO: 30 (вариант 8), описан в документе US 20050118651 А 1,опубликованном 2 июня 2005 г., который включен в описание в качестве ссылки практически полностью. Вариабельная область тяжелой цепи гуманизированного антитела 12 А 11 (вариант 8): Другие типичные антитела включают антитело 12 В 4 или его вариант, как это описано в патентных документах US 20040082762 A1 и WO 03/077858. Антитело 12 В 4 представляет собой mAb, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека,особенно в пределах аминокислотных остатков 3-7. Легкая (SEQ ID NO: 31) и тяжелая (SEQ ID NO: 32) цепи антитела 12 В 4 имеют следующие вариабельные области (не включая сигнальные последовательности): Другими типичными антителами являются антитело 6 С 6 или его вариант, как это описано в патентных документах US 20060165682 и WO 06/06604. Антитело 6 С 6 представляет собой mAb, которое спе- 20022307 цифически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека,особенно в пределах аминокислотных остатков 3-7. Клеточная линия, продуцирующая антитело 6 С 6,была депонирована 1 ноября 2005 г. в АТСС согласно условиям Будапештского Договора с присвоением инвентарного номера РТА-7200. Другими типичными антителами являются антитело 2 Н 3 или его варианты, как это описано в патентном документе US 20060257396. Антитело 2 Н 3 представляет собой mAb, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека, особенно в пределах аминокислотных остатков 2-7. Клеточная линия, продуцирующая антитело 2 Н 3, была депонирована 13 декабря 2005 г. в АТСС согласно условиям Будапештского Договора с присвоением инвентарного номера РТА-7267. Другими типичными антителами являются антитело 3 А 3 или его варианты, как это описано в патентном документе US 20060257396. Антитело 3 А 3 представляет собой mAb, которое специфически связывается с N-концевым эпитопом, расположенным в -амилоидном пептиде человека, особенно в пределах аминокислотных остатков 3-7. Клеточная линия, продуцирующая антитело 3 А 3, была депонирована 13 декабря 2005 г. РТА-7269. Другими типичными антителами являются антитела 2 В 1, 1 С 2 и 9G8. Клеточные линии, продуцирующие антитела 2 В 1, 1 С 2 и 9G8, были депонированы 1 ноября 2005 г. в АТСС согласно условиям Будапештского Договора с присвоением инвентарных номеров РТА-7202, РТА-7199 и РТА-7201 соответственно. Другим типичным антителом является гуманизированное антитело 266 или его вариант. Антитело 266 специфически связывается с эпитопом в области аминокислотных остатков 13-28 А. Клеточная линия, продуцирующая антитело 26, была депонирована 20 июля 2004 г. в АТСС согласно условиям Будапештского Договора с присвоением инвентарного номера РТА-6123. Гуманизированные формы антитела 266 описаны в патентных документах US 20040265308, US 20040241164, WO 03/016467 и US 7195761. Легкая (SEQ ID NO: 33) и тяжелая (SEQ ID NO: 34) цепи антитела 266 имеют следующие вариабельные области (не включая сигнальные последовательности): где Хаа в положении 1 представлен Glu или Gin, Хаа в положении 7 представлен Ser или Leu, Хаа в положении 46 представлен Glu, Val, Asp или Ser, Хаа в положении 63 представлен Thr или Ser, Хаа в положении 75 представлен Ala, Ser, Val или Thr, Хаа в положении 76 представлен Lys или Arg, Хаа в положении 89 представлен Glu или Asp, a Хаа в положении 107 представлен Leu или Thr. Типичное гуманизированное антитело 266 содержит следующие последовательности легкой Антитело также может быть представлено 15 С 11 или его гуманизированной формой (см. документUS 20060165682), которые специфически связываются с эпитопом в пределах А 15-24. Антитело также может быть представлено гуманизированной формой 20 С 2 или ее вариантом. Такие антитела описаны, например, в патентном документе US 2007081998. Центральный линейный эпитоп 20 С 2 соответствует аминокислотным остаткам 3-8 А 1-42, а конформационный эпитоп зависит от элементов в пределах аминокислотных остатков 17-42 А. Легкая (SEQ ID NO: 37) и тяжелая(SEQ ID NO: 38) цепи гуманизированного антитела 20 С 2 (вариант 1) имеют следующие последовательности вариабельной области (не включая сигнальные последовательности): Дополнительное гуманизированное антитело 20 С 2 (вариант 2) содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 37) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи Еще одним антителом, которое можно использовать в соответствии с изобретением, является антитело С 705 или его вариант, которые связываются с эпитопом, содержащим аминокислотные остатки 7-12 пептида А, как это описано в патентной заявке WO 05/028511. Антитело С 705 содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 40) и вариабельную область тяжелой цепи(SEQ ID NO: 41), сигнальные последовательности выделены подчеркиванием: Еще одним антителом, которое можно использовать в соответствии с изобретением, является антитело С 706 или его вариант, которые связываются с эпитопом, содержащим аминокислотные остатки 6-11 пептида А, как это описано в патентной заявке WO 05/028511. Антитело С 706 содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 42) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO: 43). Сигнальные последовательности выделены подчеркиванием: Другие антитела, которые можно использовать в соответствии с изобретением, включают гуманизированные антитела 2286 и их варианты. Эти антитела распознают эпитоп, содержащий аминокислоты 28-40 пептида А, как это описано в документе US 20070160616. Гуманизированное антитело 2286 (вариант 1) содержит вариабельную область легкой цепи (SEQ ID NO: 44) и вариабельную область тяжелой цепи (SEQ ID NO: 45) (не включая сигнальные последовательности): Еще один вариант гуманизированного антитела 2286 содержит вариабельную область легкой цепи(SEQ ID NO: 44) и вариабельную область тяжелой цепи (SEQ ID NO: 46) (не включая сигнальные последовательности): Дополнительные антитела, которые можно использовать в соответствии с изобретением, представлены четвертым вариантом гуманизированного антитела 3D6 и вторым вариантом гуманизированного антитела 10D5, как это раскрыто в патентах US 7318923 и US 7320790 соответственно. Эти антитела связываются с N-концевым участком пептида А, как объяснялось выше. Гуманизированное антитело 3D6(вариант 4) содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 71) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO: 72): Гуманизированное антитело 10D5 (вариант 2) содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 73) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи Другим типичным антителом является гуманизированное антитело 2 Е 7, как это раскрыто в патентной заявке WO 07/113172. Антитело 2 Е 7 связывается с аминокислотными остатками 1-12 пептида А, но не с участком 2-13 или удлиненными вариантами пептида. Гуманизированное антитело 2 Е 7 (вариант 1) содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 75) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO: 76): Второй вариант гуманизированного антитела 2 Е 7 содержит вариабельную область легкой цепи(SEQ ID NO: 75) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO: 77) (см., например, WO 07/113172): Гуманизированное антитело 2 Е 7 (вариант 3) содержит последовательность вариабельной области легкой цепи (SEQ ID NO: 75) и последовательность вариабельной области тяжелой цепи (SEQ ID NO: 78) Дополнительным антителом, которое можно использовать в соответствии с изобретением, является гуманизированное антитело 9TL (инвентарные номера АТСС РТА-6124 и РТА-6125), как это описано в документе WO 06/036291. Вариабельные последовательности тяжелой и легкой цепей без сигнальных последовательностей обозначены как SEQ ID NO: 79 и SEQ ID NO: 80 соответственно: В соответствии с изобретением также можно использовать гуманизированные варианты антитела 6G. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей без сигнальных последовательностей обозначены как Дополнительные антитела, которые можно использовать в соответствии с изобретением, представлены гуманизированными вариантами антитела 2.1, как это описано в патентной заявке WO 06/081171. Эти антитела основаны на CDR мышиного антитела 2.1 и замещают аминокислотные остатки вариабельного каркасного участка легкой цепи VKII A 19/JK4 человека. Вариабельный каркасный участок тяжелой цепи, используемый для замещения, грубо основан на VH 2-70. Типичное гуманизированное антитело 2.1 содержит вариабельные области тяжелой и легкой цепей (без сигнальных последовательностей), обозначенные как SEQ ID NO: 83 и SEQ ID NO:84 соответственно: Другие антитела, которые можно использовать в соответствии с изобретением, включают антителаCW1181 и CW1185. Эти антитела специфически связываются с двумя участками пептида А, как это описано в патентных документах WO 03/070760 и US 20050196399. Первый участок содержитAEFRHDSGY (SEQ ID NO: 85) или фрагмент этой последовательности (например, AEFRHD(SEQ ID NO: 86) или EFRHDSG (SEQ ID NO: 87), EFRHD (SEQ ID NO: 88, а второй участок содержит аминокислотную последовательность YEVHHQKLVFFAEDVG (SEQ ID NO: 89) или ее фрагмент (например, VFFA (SEQ ID NO: 90) или QKLFFAEDV (SEQ ID NO: 91. Дополнительным антителом, которое можно использовать в соответствии с изобретением, является моноклональное антитело NAB61. Антитело NAB61 связывается с А 1-11, но не связывается с полноразмерными АРР или С 99, как это раскрыто в патентной заявке WO 07/062088. Сходным образом, в соответствии с изобретением можно использовать моноклональное антитело 82 Е 1. Антитело 82 Е 1 связывается с N-концом пептида А, но не с полноразмерным АРР, как это раскрыто в документеUS 20080025988. Другими антителами, рассматриваемыми изобретением, являются антитела против ADDL. Такие антитела были созданы и отобраны на способность специфически связываться с ADDL, не связываясь с мономером или амилоидными фибриллами А. См., например, WO 04/031400. Другие антитела, которые можно использовать, включают (i) каталитическое антитело АВР 102Merck/Acumen); -амилоидстероидное антитело (ASPD) (Mitsubishi Pharma Corp).; (xi) антитело, полученное из РВМС пациента AN1792 (Neurimmune Therapeutics AG); (xii) BC05 (Takeda); (xiii) антителаRN-1219 (h2286), от Pfizer/Rinat Neurosciences). Каждое из этих антител можно использовать в соответствии с применением, предлагаемым изобретением. Антитело АВР 102 расщепляет агрегированный А, как это описано, например, в документахUS 6387674 и WO 99/06536. Антитело ACI-01 Ab7 C2 связывается с пептидом А между аминокислотными остатками 10-20 и описано в документе US 20070166311. Антитело иммуноглобулин IVIgGammagard SD описано, например, на веб-сайте компании Baxter Bioscience по адресу Baxter.com. Антитело BAN 2401 представляет собой гуманизированное антитело, которое связывается с протофибриллами А, и описано, например, в патентной заявке WO 05/123775. Антитело человека R-1450 HuCAL имеет двойной эпитоп 266/3D6. Гуманизированное антитело LY2062430 (IgG) связывается с пептидом А между аминокислотными остатками 16-23 и описано, например, в патенте США 7195761. Гуманизированное антитело h3D6 связывается с пептидом А в аминокислотных остатках 1-5 и описано, например, в патенте США 7318923. Антитело ВС 05 связывается с С-концевым эпитопом А и описаноAsami-Odaka et al. (2005), Neurodegenerative Diseases, 2:36-43. Антитела CEN701-CEN706 описаны, например, в патентной заявке WO 05/028511. Гуманизированное антитело PF-04360365 связывается с пептидом А между аминокислотными остатками 28-40 и описано, например, в патентной заявке Любые антитела или фрагменты антител, описанные в этом документе, можно сконструировать и изготовить, используя стандартные методы, как это раскрыто, например, в документах US 20040038304,US 20070020685, US 200601660184, US 20060134098, US 20050255552, US 20050130266, US 2004025363,US 20040038317, US 20030157579 и US 7335478. Любые из антител, описание которых дано выше, можно получить с разными изотипами или мутантными изотипами для того, чтобы контролировать степень связывания с разными рецепторами Fc. Антитела, утратившие участок Fc (например, фрагменты Fab), теряют способность связываться с рецепторами Fc. Выбор изотипа также влияет на связывание с рецепторами Fc. Были определены соответствующие аффинности разных изотипов IgG человека к трем рецепторам Fc: FcRI, FcRII и FcRIII. (См.RavetchKinet, Annu. Rev. Immunol. 9, 457 (1991. FcRI представляет собой высокоаффинный рецептор, который связывается с IgG в мономерной форме, а два других рецептора являются низкоаффинными рецепторами, которые связываются с IgG только в мультимерной форме. В целом как IgG1, так и IgG3 проявляют значительную активность связывания со всеми тремя рецепторами, IgG4 - с FcRI, a IgG2 только с одним типом FcRII, называемым HaLR (см. Parren et al., J. Immunol. 148, 695 (1992). Таким образом, изотип IgG1 человека обычно выбирают для более сильного связывания с рецепторами Fc, если это желательно, а изотип IgG2 обычно выбирают для более слабого связывания. Мутации в сайтах шарнирной области, соседние с этими сайтами или расположенные поблизости от них (например, замещающие аминокислотные остатки 234, 235, 236 и/или 237 другими остатками) во всех изотипах, уменьшают аффинность к рецепторам Fc, особенно к рецептору FcRI (см., например,документ US 6624821). По выбору, положения 234, 236 и/или 237 замещаются аланином, а положение 235 - глутамином. (см., например, документ US 5624821). В изотипе IgG2 человека положение 236 утрачивается. Типичными сегментами аминокислот для положений 234, 235 и 237 в IgG2 человека являютсяAla Ala Gly, Val Ala Ala, Ala Ala Ala, Val Glu Ala и Ala Glu Ala. Для изотипа IgG1 человека предпочтительна комбинация мутаций L234A, L235A и G237A. Особенно предпочтительным антителом является бапинейзумаб, имеющий изотип IgG человека и имеющий в участке Fc эти три мутации. Другими замещениями, уменьшающими связывание с рецепторами Fc, являются мутация Е 233 Р (особенно в мышином IgG1) и мутация D265A (особенно в мышином IgG2a). Другие мутации и комбинации мутаций,уменьшающие связывание с Fc и/или C1q, описаны в примерах (E318A/K320A/R322A (особенно в мышином IgG1), L235A/E318A/K320A/K322A (особенно в мышином IgG2a). Сходным образом, для разрушения связывания с Fc остаток 241 (Ser) в IgG4 человека можно заместить, например, пролином. Для модулирования эффекторной активности в константной области могут быть осуществлены дополнительные мутации. Например, в константной области IgG2a можно осуществить мутации A330S,P331S или обе. Для IgG4 можно осуществить мутации Е 233 Р, F234V и L235A, с делецией G236 или любую комбинацию этих мутаций. IgG4 также может нести одну или обе из мутаций S228P и L235E. Использование разорванных последовательностей константной области для модулирования эффекторной функции далее описано, например, в документах WO 06/118959 и WO 06/036291. Для модулирования эффекторной активности в константную область IgG человека могут быть внесены дополнительные мутации (см., например, WO 06/03291). Они включают следующие замещения:(iv) E233P, L234V, L235A, G236 с делецией, A327G, A330S, P331S и (v) E233P, L234V, L235A, A327G,A330S, P331S в IgG1 человека. Аффинность антитела к FcR можно изменить, внеся мутации в определенные аминокислотные остатки константной области тяжелой цепи. Например, разрыв сайта гликозилирования в IgG1 человека может уменьшить связывание с FcR, т.е. ослабить эффекторную функцию антитела (см., например,WO 06/036291). Трипептидные последовательности NXS, NXT и NXC, где X означает любую другую аминокислоту, за исключением пролина, являются сайтами распознавания ферментов для гликозилирования остатка N. Разрыв трипептида в любой аминокислоте, особенно в области CH2 IgG, воспрепятствует гликозилированию в этом сайте. Например, мутация N297 в IgG1 человека препятствует гликозилированию и уменьшает связывание FcR с антителом. Последовательности нескольких типичных гуманизированных антител 3D6 и их составных частей показаны ниже. Константные области человека демонстрируют межиндивидуальную аллотипическую и изоаллотипическую вариацию, т.е. у разных лиц константные области могут различаться по одному или более полиморфных положений. Изоаллотипы отличаются от аллотипов тем, что сыворотки, распознающие изоаллотип, связываются с неполиморфным участком одного или более других изотипов. Аллотип константной области IgG1, показанный ниже, представляет собой 3D6 (ААВ-001), т.е. Glmz,имеющий Glu в положении 356 и Met в положении 358. Аллотип константной области каппа, показанный ниже, представляет собой Km3, который имеет Ala в положении 153 и Val в положении 191. Другой аллотип Km(1) имеет Val и Leu в положениях 153 и 191 соответственно. Обзор аллотипических вариантов представлен в ссылках J. Immunogen, 3:357-362 (1976) и Loghem, Monogr Allergy, 19: 40-51 (1986). Включены другие аллотипические и изоаллотипические варианты проиллюстрированных константных областей. Также включены константные области, имеющие любые подстановки аминокислотных остатков,- 27022307 занимающих полиморфные положения в природных аллотипах. Примеры других аллотипов IgG1 тяжелой цепи включаю: Glm(f), Glm(a) и Glm(x). Glm(f) отличается от Glm(z) тем, что он имеет Arg вместоLys в положении 214. Glm(a) имеет аминокислоты Arg, Asp, Glu, Leu в положениях 355-358. Полноразмерная легкая цепь гуманизированного антитела 3D6 (сигнальная последовательность подчеркнута) (бапинейзумаб и ААВ-003): Полноразмерная легкая цепь гуманизированного антитела 3D6, не включая сигнальную последовательность (бапинейзумаб и ААВ-003): ДНК, кодирующая полноразмерную легкую цепь гуманизированного антитела 3D6 (сигнальная последовательность подчеркнута) (бапинейзумаб и ААВ-003): Константная область тяжелой цепи человека, изотип IgG1, L234A/G237A: С-концевой остаток K может отсутствовать, как это показано ниже: Полноразмерная длинная цепь гуманизированного антитела 3D6 (изотип IgG1, L234A/G237A),включая сигнальную последовательность (подчеркнута): С-концевой остаток K может отсутствовать, как это показано ниже: Полноразмерная тяжелая цепь гуманизированного антитела 3D6, не включая сигнальную последовательность (изотип IgG1, L234A/G237A): С-концевой остаток K может отсутствовать, как это показано ниже: