Новые композиции для лечения болезни альцгеймера

НОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА Настоящее изобретение относится к применению композиции, содержащей баклофен или его соль для получения лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера и для защиты эндотелиальных клеток мозга против токсического действия белка Абета у субъекта с болезнью Альцгеймера. Настоящее изобретение относится к композициям для лечения болезни Альцгеймера (AD) и обусловленных ею расстройств.AD представляет собой прототипическую корковую деменцию, характеризующуюся нарушением памяти наряду с дисфазией (языковым расстройством, при котором имеется ухудшение речи и осмысления речи), диспраксией (неспособностью координировать и выполнять определенные целенаправленные движения и жесты при отсутствии двигательных или чувствительных нарушений) и агнозией (способностью распознавать предметы, людей, звуки, очертания или запахи), свойственными для вовлечения ассоциативных зон коры. Особые симптомы, такие как спастический парапарез (слабость нижних конечностей), также могут быть включены (1-4). Заболеваемость болезнью Альцгеймера значительно увеличивается с возрастом. В настоящее времяAD является наиболее частой причиной деменции. Клинически она характеризуется общим угасанием когнитивной функции, которое медленно прогрессирует и оставляет пациентов на терминальных стадиях прикованными к постели, не контролирующими себя и зависимыми от повседневного ухода. Смерть наступает в среднем через 9 лет после постановки диагноза (5). Рост заболеваемости AD значительно увеличивается с возрастом. Прогнозирование численности населения Организацией объединенных наций установило, что число людей старше 80 лет к 2050 году достигнет 370 млн. В настоящий момент установлено, что 50% людей старше 85 лет страдают AD. Вследствие этого через 50 лет страдать от деменции будут более чем 100 млн людей во всем мире. Огромное число людей, требующих постоянного ухода и другого обслуживания, будет серьезно влиять на медицинские, денежные и человеческие ресурсы (6). Ухудшение памяти является ранним признаком заболевания и затрагивает эпизодическую память(память на события сегодняшнего дня). Смысловая память (память на вербальные и зрительные значения) при заболевании затрагивается позже. Напротив, кратковременная память (краткосрочная память,затрагивающая структуры и процессы, используемые для временного сохранения и манипулирования информацией) и процедурная память (бессознательная память, которая представляет собой долгосрочную память навыков и процессов) долгое время сохраняются. По мере прогрессирования заболевания появляются дополнительные признаки языковых нарушений, зрительных перцептивных и пространственных нарушений, агнозий и апраксий. Классическая картина болезни Альцгеймера является в достаточной степени специфичной, чтобы позволить ее распознать приблизительно в 80% случаев (7). Тем не менее, имеет место клиническая неоднородность и она важна не только для клинического управления болезнью, но предоставляет дополнительно подключение специфических способов медикаментозного лечения для функционально различных форм (8). Патологический клинический признак AD включает амилоидные бляшки, содержащие бетаамилоид (Абета), нейрофибриллярные клубки (NFT), содержащие Tau, и нарушение функции и потерю нейронов и синапсов (9-11). За последнее десятилетие были предложены две главные гипотезы причиныAD: "гипотеза амилоидного каскада", которая утверждает, что нейродегенеративный процесс представляет собой последовательность событий, запускаемых аномальным процессингом БелкаПредшественника Амилоида (АРР) (12), и "гипотеза дегенерации нейронального цитоскелета" (13), которая предполагает, что изменения цитоскелета являются инициирующими событиями. Наиболее широко распространенной теорией, объясняющей прогрессирование AD, остается гипотеза амилоидного каскада(14-16), а исследователи AD главным образом сосредоточены на определении механизмов, лежащих в основе токсичности, связанной с белками Абета. В противоположность этому, со стороны фармацевтической промышленности на Тау-белок было обращено гораздо меньшее внимание, чем на амилоид,вследствие как фундаментальных, так и практических соображений. Более того, изменение синаптической плотности является патологическим нарушением, которое наилучшим образом коррелирует с когнитивным нарушением, чем два других. Исследования выявили, что патология амилоида, похоже, прогрессирует нейротрансмиттер-специфическим образом, причем холинергические окончания являются наиболее восприимчивыми, за которыми наступает очередь глутаматергических окончаний, и в завершение ГАМКэргических окончаний (11). Сущность изобретения Цель настоящего изобретения состоит в том, чтобы предоставить новые терапевтические подходы для лечения AD и обусловленных ею расстройств. Авторы изобретения обнаружили молекулярный проводящий путь, который задействован в возникновении AD и предлагает новые цели для развития новых способов лечения для улучшения состояния при AD и обусловленных ею расстройствах, особенно для усовершенствования комбинированных способов лечения, с использованием новых или имеющихся веществ, ранее использовавшихся для других показаний. Более конкретно, авторы изобретения обнаружили несколько лекарственных средств, которые, по отдельности или в комбинации (комбинациях), могут эффективно оказывать воздействие на подобный проводящий путь, и представляют новую и эффективную терапию для лечения AD и обусловленных ею расстройств. Вследствие этого, изобретение предоставляет новые композиции и способы для лечения AD забо-1 021731 левания и обусловленных ею расстройств. Задачей настоящего изобретения является предоставление композиции, как определено в формуле изобретения. Более конкретно, изобретение относится к композициям, подходящим для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств у нуждающегося в этом человеке, при этом указанные композиции содержат лекарственное средство, баклофен, которое усиливает ангиогенез. Данное изобретение также относится к композициям, подходящим для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств у нуждающегося в этом человека, при этом указанные композиции содержат комбинацию по меньшей мере двух лекарственных средств, которые усиливают ангиогенез, для комбинированного, раздельного или последовательного введения. Изобретение также относится к лекарственному средству или лекарственным средствам, которые усиливают ангиогенез и которые связываются с белком или модулируют активность белка, закодированного геном, выбранным из Изобретение также описывает примеры подобных лекарственных средств, которые включают соединения, выбранные из акампросата, альбутерола, алендроната, амбрисентана, аминокапроновой кислоты, аргатробана, баклофена, балсалазида, бекаплермина, каберголина, цилостазола, клопидогреля, дезирудина, дигидроэрготамина, эплеренона, фенолдопама, флудрокортизона, флунитразепама, гемфиброзила, гесперетина, иматиниба, кетотифена, лефлуномида, L-гистидина, лиотиронина, маримастата, мелоксикама, мепакрина, метазоламида, метимазола, милринона, монтелукаста, нетилмицина, нитроглицерина, нитропруссида, пегаптаниба, пентазоцина, фенформина, фенилбутирата натрия, пириметамина, сульфизоксазола, сунитиниба, тадалафила, темазепама, тербинафина, тиэтилперазина, тирофибана, топирамата, топотекана, видарабина и варфарина, или их комбинации. Изобретение также описывает композиции, дополнительно содержащие по меньшей мере одно лекарственное средство, которое модулирует синаптическую функцию, для комбинированного, раздельного или последовательного применения. Изобретение также описывает композиции, содержащие по меньшей мере одно лекарственное средство, которое модулирует стрессовую реакцию клеток, для комбинированного, раздельного или последовательного применения. Композиции данного изобретения, как правило, дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. Данное изобретение также описывает способ получения лекарственного средства для лечения бо-2 021731 лезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств, при этом способ включает стадию тестирования потенциального лекарственного средства на интенсивность действия на ангиогенез и выбора потенциальных лекарственных средств, которые усиливают ангиогенез. Изобретение также описывает способ получения композиции для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств, при этом способ включает получение комбинации лекарственного средства, который усиливает ангиогенез, и лекарственного средства, который модулирует синаптическую функцию или стрессовую реакцию клеток, и приготовления готовой формы указанной комбинации лекарственных средств для одновременного, раздельного или последовательного введения их человеку,нуждающемуся в них. Кроме того, изобретение описывает способ лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств, при этом способ включает введение одновременно, раздельно или последовательно человеку, нуждающемуся в нем, лекарственного средства или комбинации лекарственных средств, которые усиливают ангиогенез. Кроме того, изобретение описывает способ лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств, при этом способ включает введение одновременно, раздельно или последовательно человеку, нуждающемуся в нем, лекарственного средства, который усиливает ангиогенез, и лекарственного средства, который модулирует синаптическую функцию, и/или лекарственного средства, который модулирует стрессовую реакцию клеток. Кроме того, изобретение относится к применению лекарственного средства, которое усиливает ангиогенез, для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств. Кроме того, изобретение описывает применение комбинации по меньшей мере двух лекарственных средств, которые усиливают ангиогенез, для изготовления лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств, при этом указанные по меньшей мере два лекарственных средства вводят вместе, раздельно или последовательно. Как обсуждалось в настоящем изобретении,упомянутые выше способы лечения и комбинированные способы лечения предоставляют новые и эффективные подходы для лечения AD у людей. Краткое описание фигуры Чертеж: защитное действие выбранных лекарственных средств против токсичности бетаамилоидного пептида при высвобождении ЛДГ из эндотелиальных клеток мозга крыс. : р 0,05: существенное отличие от среды для лекарства. : р 0,01; : р 0, 0001; : р 0,00001: существенное отличие от А 25-35. Двусторонний критерий Стъюдента. 30 мкМ А 25-35 вызывает умеренную, но выраженную интоксикацию (фиг. с А по D, красным). Данная интоксикация в значительной степени предотвращается лефлуномидом (фиг. А), тербинафиноом (фиг. В), сульфизоксазолом (фиг. С) или баклофеном (-) (фиг. D). Кроме того, лефлуномид и тербинафин не только предотвращают вредное воздействие амилоида, но также понижают самопроизвольную гибель клеток в культурной среде. Подробное описание изобретения Настоящее изобретение предоставляет новые терапевтические подходы для лечения AD или обусловленных ею расстройств. Изобретение раскрывает новое применение лекарственных средств или комбинаций лекарственных средств, которое обеспечивает возможность эффективной коррекции подобных заболеваний и может быть использовано для лечения пациентов. Термин "обусловленное AD расстройство" обозначает болезнь Альцгеймера (AD), сенильную деменцию типа AD (SDAT), болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию, умеренные когнитивные нарушения (MCI), возрастное нарушение памяти (AAMI) и проблемы, связанные со старением, постэнцефалитный паркинсонизм, ALS (боковой амиотрофический склероз) и синдром Дауна. Как использовано в данном изобретении, "лечение" заболевания включает в себя терапию, предупреждение, профилактику, замедление развития или уменьшение выраженности симптомов, вызванных заболеванием. Термин "лечение" включает в себя, в частности, регулирование прогрессирования заболевания и связанных с ним симптомов. Термин "усиление", когда это относится к ангиогенезу, включает в себя какое-либо усиление ангиогенеза по сравнению с существующим у человека уровнем. Подобное повышение может включать восстановление, т.е. до нормального уровня, или меньшее увеличение, которого все же достаточно для улучшения состояния пациента. Подобное увеличение может оцениваться или контролироваться с использованием известных биологических тестов, таких как описаны в экспериментальной части. Также, указание конкретных соединений в контексте данного изобретения подразумевает включение не только конкретно названных веществ, но также их любой фармацевтически приемлемой соли,гидроксида, сложного эфира, эфира, изомеров, рацемата, конъюгатов или пролекарств. Термин "комбинация" обозначает лечение, при котором по меньшей мере два или более лекарственных средства совместно вводят человеку, чтобы вызвать биологический эффект. При комбинированной терапии согласно данному изобретению по меньшей мере два лекарственных средства могут вводиться вместе или раздельно, в одно и то же время или последовательно. Также по меньшей мере два лекарственных средства могут вводиться посредством различных путей и протоколов. В результате, хотя они могут быть составлены в виде готовой формы вместе, лекарственные средства комбинации могут также быть составлены в виде готовой формы раздельно. Как обсуждалось выше, изобретение относится к композициям для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств у нуждающегося в этом человека, с использованием лекарственного средства или комбинации лекарственных средств, которые усиливают ангиогенез. Посредством всеобъемлющего интегрирования экспериментальных данных, охватывающих результаты исследований биологии клеток, экспериментов по анализу профиля экспрессии и исследования генетических связей, описывающих различные аспекты болезни Альцгеймера и связи, существующие при передаче сигналов в клетках и функциональных проводящих путях, авторы изобретения выявили, что ангиогенез представляет важный механизм, который изменяется у людей, страдающих AD. Гены, локализованные в указанной функциональной сети и вовлеченные в болезнь Альцгеймера, были выбраны в соответствии со следующими критериями:(1) непосредственное взаимодействие с генами, обуславливающими семейные случаи болезни Альцгеймера (АРР, АроЕ, пресенилины, Тау-белок),(2) функциональные партнеры генов, выбранных в соответствии с критерием (1),(3) ближайшие функциональные партнеры генов, выбранных в соответствии с критерием (2). За счет данного процесса авторы изобретения получили возможность установить, что сеть, ответственная за ангиогенез, является основной функциональной сетью, затрагиваемой при болезни Альцгеймера. Ангиогенез играет основополагающую роль в обеспечении тканевого гомеостаза и в приспособительных реакциях к экологическим и физиологическим проблемам, таким как гипоксия или заживление ран; его дисфункция вносит вклад в патогенез многочисленных и различных по своей природе патологий, варьирующих от сердечно-сосудистых осложнений до опухолевого роста и метастазирования. Несмотря на то что болезнь Альцгеймера традиционно считается нейродегенеративным состоянием, сопровождающимся патологией коллатерального кровообращения, анализ авторов изобретения обеспечивает возможность повторной оценки патогенного воздействия сосудистой дерегуляции и объясняет важную и, возможно, патогенную роль для ангиогенных проводящих путей в этиологии данного заболевания. Авторы изобретения обнаружили, что гены, управляющие ангиогенезом, являются чрезвычайно многостимульными в сигнальных сетях, вовлеченных в болезнь Альцгеймера. Данное заключение имеет глубокие последствия для предупреждения и лечения болезни Альцгеймера и предоставляет новые рекомендации для комбинаторного лечения данного сложного нейродегенеративного заболевания. Авторы изобретения также обнаружили, что данная сеть могла бы быть формально подразделена на группы ангиогенных факторов и белков из двух проводящих путей (проводящий путь АМФК и метаболический проводящий путь LPA), тесно вовлеченных в регуляцию ангиогенеза. Белок амилоид Абета оказывает выраженное воздействие не только на биологию нейронов, но обладает также сильной антиангиогенной активностью (17). Другой ген, причинно связанный с семейными случаями болезни Альцгеймера - пресинилин, является способным модулировать посредством регуляции внутримембранного протеолиза ангиогенез посредством нескольких независимых путей передачи сигналов, опосредованных его функциональными субстратами VEGFR1, ErbB4, Notch, DCC, CD44, эфриновыми рецепторами и кадгеринами (18-20). Ген CD44 кодирует рецептор для гиалуроновой кислоты (НА), продукты деградации которой стимулируют ангиогенез (21). Данный рецептор был вовлечен в формирование и/или стабилизацию эндотелия формирующихся или только что сформированных сосудов (22). Он также может ограничивать и регулирует активность таких белков, как остеопонтин, коллагены и матричные металлопротеиназы (ММР),задействованные во внеклеточной матричной динамике, которая сопровождает образование новых кровеносных сосудов (23). Другие мембранные рецепторы, идентифицированные с помощью анализа данных авторов изобретения, включают IL20R, LEPTR, NRP1 и NRP2 и рецептор к эндотелину EDNRA. Ген IL20R кодирует рецептор для IL20, плейотропного цитокина, задействованного в образовании сосудистых трубок (24). Лептин, эндокринный гормон и лиганд для LEPTR, стимулирует ангиогенез в синергизме с фактором роста фибробластов FGF-2 и фактором роста эндотелия сосудов (VEGF), двумя наиболее сильнодействующими и повсеместно экспрессируемыми ангиогенными факторами. Кроме того, он вовлечен в повышение проницаемости сосудов (25). NRP1 и NRP2 представляют собой трансмембранные корецепторы,модулирующие активацию передачи сигналов VEGFR-2, которая обеспечивает развивающийся ангиогенез (26). В заключение, авторы изобретения также отобрали группу генов, задействованных в формировании и ремоделировании внеклеточного матрикса (THBS2, LAMA1, COL4A2, ADAMTS12 и ADAM10) или в функциональном процессинге (TLL2) хорошо известных ангиогенных модуляторов, таких как пролактин, гормон роста и плацентарный лактоген (27). Группа АМФ-активируемых протеинкиназ (АМФК) считается внутриклеточным датчиком соотношения АМФ:АТФ и играет главную роль в поддержании энергетического гомеостаза посредством регу-4 021731 лирования метаболических процессов, таких как метаболизм глюкозы или жирных кислот. Данная группа серин-/треонинкиназ активируется посредством метаболических стрессов, которые ингибируют продукцию АМФ или стимулируют потребление АМФ (28). В дополнение к ее точно установленной роли в регулировании энергетического баланса клетки,сигнальная система АМФК является также регулятором ангиогенеза, необходимого для миграции и дифференциации эндотелиальных клеток в условиях гипоксии (29). Данная киназа является одной из нижележащих эффекторов, ответственных за проангиогенные эффекты VEGF (30), адипонектина (31),IGF-1 и, возможно, PPAR-рецептора. Обнаружено, что АМФК патологически активируется у дважды трансгенных APP/PS2 мышей, модели болезни Альцгеймера in vivo (32). Авторы изобретения обнаружили несколько генов, связанных с болезнью Альцгеймера и представляющих как вышележащие модуляторы, так и нижележащие эффекторы АМФ-активируемых киназ. Среди вышележащих модуляторов белков АМФК, лептина и рецепторов CNTF, могли бы быть упомянуты CDH13 (33), предполагаемый корецептор для адипонектина Acrp30 и тромбиновые сигнальные пути,а также киназа CAMKK2, которая вместе с киназой LKB1 считается главным прямым модулятором активности АМФК (28). Что касается нижележащих эффекторов АМФК, то гены, задействованные в метаболизме жирных кислот и холестерина, представляют особый интерес. В частности, ген АСС 2, точно установленная мишень сигнальной системы АМФК, кодирует ацетил-КоА-карбоксилазу (АСС), которая катализирует АТФ-зависимое карбоксилирование ацетил-КоА в малонил-КоА, и таким образом регулирует ограничивающую скорость стадию в синтезе жирных кислот. Активированная АМФК фосфорилирует белок АСС 2, понижает его ферментативную активность и вследствие этого увеличивает окисление жирных кислот. Некоторые другие, главным образом митохондриальные, гены, задействованные в метаболизм жирных кислот, такие как EFTA, AUH, SLC25A21, PC, ME1 и EHHADH, могли бы также участвовать в АМФК-опосредованном регулировании энергетического баланса клетки в условиях болезни Альцгеймера. Из них, ген PC кодирует пируваткарбоксилазу и задействован в многочисленных метаболических проводящих путях, таких как глюконеогенез, липогенез и синтез нейротрансмиттера глутамата. Было показано, что нарушение активности PC могло бы быть связано с нарушением функции мозга (34-35). Интересно, что ГАМК(В)-рецептор был также идентифицирован как функциональная мишень для AMPактивируемой киназы. Последнее исследование продемонстрировало, что активация АМФК могла бы иметь нейропротективный характер - посредством фосфорилирования ГАМК(В)-рецептора (36) - и таким образом могла бы участвовать в прогрессировании патологии амилоида, мишенью которого являются ГАМКэргические окончания (11). Дополнительно, АМФК-сигнальный путь мог бы изменить развитие поражений, связанных с болезнью Альцгеймера, посредством влияния на метаболизм холестерина. АМФК может влиять на метаболизм холестерина посредством уменьшения активности факторов транскрипции SREBP (37). БелкиSREBP являются главными рецепторами и регуляторами уровней внутриклеточного холестерина; активируясья посредством протеолитического расщепления при падении уровня холестерина, SREBP связываются со специфическими стерол-регулируемыми элементами (SRE) в промотерных зонах генов, кодирующих ферменты, задействованные в биосинтезе холестерина, и увеличивают их транскрипцию. Холестерин не только служит предшественником для биосинтеза нейропротективных стероидов, но он также признается как важный регулятор текучести мембран и играет центральную роль в динамике дипидных рафтов, сосредоточенных на площадках для разнообразных веществ, вовлеченных в структурирование мембран, транспорт и сигнальную трансдукцию. Промежуточные продукты в биосинтезе холестерина, произведенные посредством фарнезила-РР и геранигеранила-РР синтетаз, играют центральную роль в модулировании активности малых GTPаз, включая RhoA и Rac, которые являются главными регуляторами ангиогенеза и роста аксонов. Некоторые другие гены, вовлеченные в метаболизм и транспорт холестерина, также могли бы влиять на развитие болезни Альцгеймера. Белки DHCR7, SRD5A1 и CYP7B1 задействованы в продукцию стероидов, которые могли бы защищать нервные клетки от токсических повреждений, связанных с болезнью Альцгеймера (38). Ген АВСА 1, который кодирует элемент семейства АТФ-связывающего кассетного (ABC) транспортера, также представляет отдельный интерес, поскольку он регулирует секрецию липопротеина АроЕ, главного предрасполагающего фактора риска для развития болезни Альцгеймера(39). Фосфатидиловая кислота (РА), лизофосфатидиловая кислота (LPA) и сфингозин-1-фосфат (S1P) представляют собой естественные фосфолипиды, которые обладают мощными сигнальными свойствами. В частности, данные фосфолипидные факторы роста демонстрируют различающиеся эффекты на ангиогенный потенциал эндотелиальных клеток и могли бы - дополняя друг друга, комбинированным образом - эффективно индуцировать неоваскуляризацию. S1P главным образом задействован в стимулировании хемотаксической миграции эндотелиальных клеток, тогда как LPA в большей степени задействован в стабилизации функции эндотелиального однослойного барьера на последних стадиях ангиогенеза (40).LPA оказывает воздействие на ангиогенез либо с помощью модулирующей активности RhoAGTPазы, либо с помощью повышенной экспрессии нескольких ангиогенных факторов - VEGF, PDGFB иIL-8 (41-45). Помимо своей тесной вовлеченности в ангиогенез, LPA также считается внеклеточной липидной сигнальной системой, вызывающей коллапс конуса роста аксона и влияющей на миграцию ранних постмитотических нейронов во время развития (46).LPA могут быть синтезированы посредством секретированной липофосфолипазы D (аутотаксина) и действует посредством специфических рецепторов EDG2, EDG4 и EDG7, связанных с G-белком, оказывая воздействие на пролиферацию клеток, продолжительность существования и подвижность (47). Наиболее вероятно, способность LPA к регулированию клеточной морфологии и подвижности опосредована посредством активации сигнального элемента RhoA-ROCK с помощью белка G12/13 (48). Некоторые экспериментальные данные показывают важную роль LPA-опосредованной передачи сигналов в патогенезе болезни Альцгеймера. Было продемонстрировано, что экспрессия аутотаксина повышена в лобной коре у пациентов с деменцией по типу Альцгеймера (49), и ретракция аксонов, индуцируемая LPA, in vitro сопровождается усиленным уровнем фосфорилирования Тау-белка в дифференцированных клетках нейробластомы человека (50), характерным для болезни Альцгеймера. Более того,генетические манипуляции с белками АРР или пресенилином оказывает воздействие на экспрессию фермента аутотаксина в мозге трансгенных мышей (51-52). Используя подход анализа данных авторов изобретения, авторы изобретения идентифицировали большое количество генов, задействованных в метаболизме LPA или модулированные посредством сигнальной системы LPA и потенциально связанные с прогрессированием болезни Альцгеймера (MTR,MAT2B, CUBN, АТР 10 А, ТНЕМ 2, PITPNC1, ENPPG, SGPP2, AGPAT, DGKH, DGKB, MGST2, PLD2 иDRD2). Из них ген CUBN кодирует рецептор для внутреннего фактора-витамина В 12, тогда как ранее с патогенезом болезни Альцгеймера связывали недостаточную биодоступность фолата и кобаламина (витаминов В 9 и В 12) (53). В настоящем изобретении авторы изобретения предлагают новые композиции, которые могут быть использованы для увеличения ангиогенеза, измененного при болезни Альцгеймера и других нейрогенеративных заболеваниях. Изобретение также описывает композиции и способы лечения AD, в которых применяют лекарственное средство или лекарственные средства, которые усиливают ангиогенез посредством связывания или модулирования активности белка, закодированного геном, выбранным из Последовательности всех перечисленных выше генов и белков имеются в библиотеках генов и могут быть выделены с помощью методов, известных в данной области. Кроме того, активность данных генов и белков может быть оценена с помощью методов, как таковых известных в данной области, как обсуждалось в экспериментальной части. Изобретение дополнительно описывает лекарственные средства, которые могут быть использованы для модулирования данных целевых генов и белков. Изобретение раскрывает идентификацию и функционирование отдельных лекарственных средств, которые, либо по отдельности, но предпочтительно в комбинации (комбинациях), модулируют упомянутый выше проводящий путь и могут быть использованы для лечения указанных заболеваний. В частности, авторы изобретения идентифицировали небольшие количества веществ, которые уже описаны в литературе, но используются для лечения иных заболеваний у людей. В связи с этим изобретение описывает композиции, которые содержат, по меньшей мере, ингибитор АСАТ (предпочтительно гесперетин), модулятор ADCY2 (предпочтительно видарабин), модулятор АМФК (предпочтительно выбранный из фенформина и видарабина), модулятор АУТОТАКСИНА (предпочтительно L-гистидин), ингибитор СА 10 (предпочтительно метазоламид), антагонист CYSLTR1 иCYSLTR2 (предпочтительно монтелукаст), ингибитор DHFR (предпочтительно пириметамин), модулятор DRD2 (предпочтительно выбранный из дигидроэрготамина и каберголина), агонист дофаминового рецептора DRD5 (предпочтительно фенолдопам), антагонист EDNRA (предпочтительно сульфизоксазол), модулятор F2 (предпочтительно варфарин), ингибитор FDPS (предпочтительно алендронат), модулятор GABBR2 (предпочтительно выбранный из баклофена и акампросата), модулятор синтезов гиалуроновой кислоты HAS1-3 (предпочтительно лефлуномид), модулятор HIF1A (предпочтительно выбранный из топотекана и мелоксикама), модулятор MGST2 (предпочтительно балсалазид), модулятор ММР 2 и ММР 9 (предпочтительно маримастат), модулятор NOS2A (предпочтительно выбранный из гемфиброзила, альбутерола и тиэтилперазина), модулятор NOS3 (предпочтительно кетотифен), агонист NR1I2(предпочтительно топирамата), модулятор NR3C2 (предпочтительно выбранный из эплеренона и флудрокортизона), агонист 0PRS1 (предпочтительно пентазоцин), модулятор P2RY1 и P2RY12 (предпочтительно выбранный из клопидогреля и торофибана), ингибитор рецептора TROMBIN PAR1 (предпочтительно аргатробан), ингибитор PDE11A (предпочтительно тадалафил), ингибитор PDE3A (предпочтительно цилостазол), ингибитор PDE4D (предпочтительно милринон), модулятор PDGFRA и PDGFRB(предпочтительно выбранный из бекаплермина и иматиниба), ингибитор фосфолипаз PLA1A и PLA2(предпочтительно выбранный из нетилмицина и мепакрина), модулятора PLAT (предпочтительно фенилбутират), модулятора PLD2 (предпочтительно выбранный из амбрисентана и фенолдопама), модулятор PLG (предпочтительно аминокапроновая кислота), агонист PPARA (предпочтительно гемфиброзил),агонист PPARG (предпочтительно фенилбутират натрия), активатор PRKG1 (предпочтительно выбранный из нитропруссида, нитроглицерина, тадалафила и цилостазола), модулятор RHOA (предпочтительно выбранный из алендроната и тербинафина), модулятор THRB (предпочтительно выбранный из лиотиронина и метимазола), ингибитор TROMBIN (предпочтительно дезирудин), модулятор TSPO (предпочтительно выбранный из флунитразепама и темазепама) и/или антагонист VEGFR1 (предпочтительно выбранный из сунитиниба и пегаптаниба). Как обсуждалось выше, в изобретении, в частности, предложена разработка комбинированных способов лечения направленных на механизмы AD и обусловленных ею расстройств. В связи с этим изобретение описывает композицию, которая содержит по меньшей мере одну из следующих комбинаций лекарственных средств, для комбинированного, раздельного или последовательного введения: модулятор рецептора GABBR2 (предпочтительно баклофен) и модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин); модулятор рецептора GABBR2 (предпочтительно баклофен) и антагонист рецептора к эндотелинуEDNRA (предпочтительно сульфизоксазол); модулятор рецептора GABBR2 (предпочтительно баклофен) и модулятор синтезов гиалуроновой кислоты HAS1-3 (предпочтительно лефлуномид), модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и антагонист рецептора к эндотелину EDNRA (предпочтительно сульфизоксазол); модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и модулятор синтезов гиалуроновой кислотыHAS1-3 (предпочтительно лефлуномид); модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и агонист дофаминового рецептора DRD 5 (предпочтительно фенолдопам); модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и ингибитор фосфолипаз PLA1A и PLA2 (предпочтительно мепакрин); модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и модулятор АМФК (предпочтительно фенформин); модулятор RHOA (предпочтительно тербинафин) и модулятор пуринергических рецепторов P2RY1 и P2RY12 (предпочтительно клопидогрель); модулятор рецептора GABBR2 (предпочтительно баклофен) и модулятор АМФК (предпочтительно фенформин); модулятор рецептора GABBR2 (предпочтительно баклофен) и модулятор пуринергических рецепторов P2RY1 и P2RY12 (предпочтительно клопидогрель); антагонист рецептора к эндотелину EDNRA (предпочтительно сульфизоксазол) и модулятор АМФК (предпочтительно фенформин); модулятор синтезов гиалуроновой кислоты HAS1-3 (предпочтительно лефлуномид) и агонист дофаминового рецептора DRD5 (предпочтительно фенолдопам) или модулятор синтезов гиалуроновой кислоты HAS1-3 (предпочтительно лефлуномид) и ингибитор фосфолипаз PLA1A и PLA2 (предпочтительно мепакрин). Изобретение также описывает композиции, содержащие соединение, выбранное из акампросата,альбутерола, алендроната, амбрисентана, аминокапроновой кислоты, аргатробана, баклофена, балсалазида, бекаплермина, каберголина, цилостазола, клопидогреля, дезирудина, дигидроэрготамина, эплеренона,фенолдопама, флудрокортизона, флунитразепама, гемфиброзила, гесперетина, иматиниба, кетотифена,лефлуномида, L-гистидина, лиотиронина, маримастата, мелоксикама, мепакрина, метазоламида, метимазола, милринона, монтелукаста, нетилмицина, нитроглицерина, нитропруссида, пегаптаниба, пентазоцина, фенформина, фенилбутирата натрия, пириметамина, сульфизоксазола, сунитиниба, тадалафила, темазепама, тербинафина, тиэтилперазина, тирофибана, топирамата, топотекана, видарабина и варфарина,или их комбинаций. Изобретение описывает композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из лефлуномида, сульфизоксазола, тербинафина, баклофена, клопидогреля, фенолдопама, мепакрина и фенформина или их солей или пролекарств или производных или составов с замедленным высвобождением, для одновременного, раздельного или последовательного введения. Изобретение описывает композиции, содержащие комбинацию по меньшей мере двух соединений,выбранных из группы, состоящей из лефлуномида, сульфизоксазола, тербинафина, баклофена, клопидогреля, фенолдопама, мепакрина и фенформина или их солей или пролекарств или производных или составов с замедленным высвобождением, для одновременного, раздельного или последовательного введения. В еще одном варианте осуществления композиции изобретения содержат комбинацию по меньшей мере двух соединений, выбранных из группы, состоящей из лефлуномида, сульфизоксазола, тербинафина, баклофена, клопидогреля, фенолдопама, мепакрина и фенформина, или их солей, или пролекарств,или производных, или составов с замедленным высвобождением, при этом указанная композиция усиливает ангиогенез, измененный при нейродегенеративных заболеваниях, выбранных из группы, состоящей из болезни Альцгеймера (AD), болезни Паркинсона (PD), бокового амиотрофического склероза (ALS) и рассеянного склероза (MS). Изобретение также описывает по меньшей мере два соединения, выбранных из группы, состоящей из лефлуномида, сульфизоксазола, тербинафина, баклофена, клопидогреля, фенолдопама, мепакрина и фенформина, или их солей, или пролекарств, или производных, или составов с замедленным высвобождением, для лечения болезни Альцгеймера (AD). Например, композиция лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств у нуждающегося в этом человека содержит по меньшей мере одну из следующих комбинаций лекарственных средств для комбинированного, раздельного или последовательного введения: баклофена и тербинафина; баклофена и сульфизоксазола; баклофена и лефлуномида; тербинафина и сульфизоксазола; тербинафина и лефлуномида; тербинафина и фенолдопама; тербинафина и мепакрина; тербинафина и фенформина; тербинафина и клопидогреля; баклофена и фенформина; баклофена и клопидогреля; сульфизоксазола и фенформина; лефлуномида и фенолдопама или лефлуномида и мепакрина. Другая композиция раскрытая в изобретении содержит комбинацию по меньшей мере двух соединений, выбранных из лефлуномида, тербинафина, сульфизоксазола и баклофена или их солей или пролекарств или производных или составов с замедленным высвобождением, для одновременного, раздельного или последовательного введения. Другая композиция, раскрытая в изобретении, содержит одно или более соединений, выбранных из лефлуномида, тербинафина, сульфизоксазола и баклофена или их солей или пролекарств или производных или составов с замедленным высвобождением, для лечения болезни Альцгеймера или обусловленных ею расстройств. Другая композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно лекарственное средство, который усиливает ангиогенез, для комбинированного, раздельного или последовательного применения. Например, указанное дополнительное лекарственное средство, которое усиливает ангиогенез, выбрано из ингибитора АСАТ (предпочтительно гесперетина), модулятора ADCY2 (предпочтительно видарабина), модулятора АМФК (предпочтительно видарабина), модулятора АУТОТАКСИНА (предпочтительно L-гистидина), ингибитора СА 10 (предпочтительно метазоламида), антагониста CYSLTR1 и CYSLTR2 (предпочтительно монтелукаста), ингибитора DHFR (предпочтительно пириметамина), модулятораDRD2 (предпочтительно выбранного из дигидроэрготамина и каберголина), модулятора F2 (предпочтительно варфарина), ингибитора FDPS (предпочтительно алендроната), модулятора GABBR2 (предпочтительно акампросата), модулятора HIF1A (предпочтительно выбранного из топотекана и мелоксикама),модулятора MGST2 (предпочтительно балсалазида), модулятора ММР 2 и ММР 9 (предпочтительно маримастата), модулятора NOS2A (предпочтительно выбранного из гемфиброзила, альбутерола и тиэтилперазина), модулятора NOS3 (предпочтительно кетотифена), агониста NR1I2 (предпочтительно топирамата), модулятора NR3C2 (предпочтительно выбранного из эплеренона и флудрокортизона), агонистаOPRS1 (предпочтительно пентазоцина), модулятора P2RY1 и P2RY12 (предпочтительно торофибана),ингибитора рецептора ТРОМБИНА PAR1 (предпочтительно аргатробана), ингибитора PDE11A (предпочтительно тадалафила), ингибитора PDE3A (предпочтительно цилостазола), ингибитора PDE4D (предпочтительно милринона), модулятора PDGFRA и PDGFRB (предпочтительно выбранного из бекаплермина и иматиниба), ингибитора PLA1A и PLA2 (предпочтительно нетилмицина), модулятора PLAT(предпочтительно фенилбутирата натрия), модулятора PLD2 (предпочтительно амбрисентана), модулятора PLG (предпочтительно аминокапроновой кислоты), агониста PPARA (предпочтительно гемфиброзила), агониста PPARG (предпочтительно фенилбутирата), активатора PRKG1 (предпочтительно выбранного из нитропруссида, нитроглицерина, тадалафила и цилостазола), модулятора RHOA (предпочтительно, алендроната), модулятора THRB (предпочтительно выбранного из лиотиронина и метимазола),ингибитора ТРОМБИНА (предпочтительно дезирудина), модулятора TSPO (предпочтительно выбранного из флунитразепама и темазепама) и/или антагониста VEGFR1 (предпочтительно выбранного из сунитиниба и пегаптаниба). Изобретение также описывает, что лекарственное средство, которое усиливает ангиогенез, может быть выбрано из лекарственного средства или лекарственных средств, которые связываются с или модулируют активность белка, закодированного геном, выбранным из Названные выше соединения перечислены в табл. 1, вместе с их номером по CAS. Изобретение описывает применение упомянутых выше соединений, а также их любой фармацевтически приемлемой соли, гидроксида, сложного эфира, эфира, изомеров, рацемата, конъюгатов или пролекарств. Пролекарства могут быть получены (например, посредством соединения лекарственного средства с подходящим носителем) для предложения лучшего контроля над фармакокинетическими параметрами лечения. Таблица 1 Примеры фармацевтически приемлемых солей включают фармацевтически приемлемые кислотноаддитивные соли, фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли, фармацевтически приемлемые соли металлов, аммониевые и алкилированные аммониевые соли. Кислотно-аддитивные соли включают соли неорганических кислот, а также органических кислот. Типичные примеры подходящих неорганических кислот включают хлористо-водородную, бромисто-водородную, йодисто-водородную, фосфорную, серную, азотную кислоты и т.п. Типичные примеры подходящих органических кислот включают муравьиную, уксусную, трихлоруксусную, трифторуксусную, пропионовую, бензойную, коричную,лимонную, фумаровую, гликолевую, молочную, малеиновую, яблочную, малоновую, миндальную, щавелевую, пикриновую, пировиноградную, салициловую, янтарную, метансульфоновую, этансульфоновую, винно-каменную, аскорбиновую, памовую, бисметиленсалициловую, этандисульфоновую, глюконовую, цитраконовую, аспарагиновую, стеариновую, пальмитиновую, ЭДТК, гликолевую, раминобензойную, глутаминовую, бензенсульфоновую, р-толуенсульфоновую кислоты, сульфаты, нитраты, фосфаты, перхлораты, бораты, ацетаты, бензоаты, гидроксинафтоаты, глицерофосфаты, кетоглютараты и т.п. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислотно-аддитивных солей перечислены, например, в J. Pharm. Sci. 1977, 66, 2, которая включена в данное изобретение посредством ссылки. Примеры солей металлов включают литиевую, натриевую, калиевую, магниевую соли и т.п. Примеры аммониевых и алкилированных аммониевых солей включают ам- 11021731 мониевые, метиламмониевые, диметиламмониевые, триметиламмониевые, этиламмониевые, гидроксиэтиламмониевые, диэтиламмониевые, бутиламмониевые, тетраметиламмониевые соли и т.п. Примеры органических оснований включают лизин, аргинин, гуанидин, диэтаноламин, холин и т.п. Лечение согласно изобретению может быть проведено отдельно или в виде комбинации лекарственных средств, и/или в сочетании с каким-либо другим лечением, имеющем мишенью тот же самый проводящий путь или имеющим иные варианты действия. Его можно проводить дома, в кабинете врача,клинике, поликлиническом отделении больницы или больнице, так чтобы врач мог внимательно следить за результатом лечения и делать какие-либо корректировки в случае необходимости. Изобретение также описывает композиции, дополнительно содержащие по меньшей мере одно лекарственное средство, которое модулирует синаптическую функцию, предпочтительно который улучшает синаптическую функцию, для комбинированного, раздельного или последовательного применения,выбранное из алфентанила, амилорида, амлодипина, азтреонама, буклизина, буметанида, бупренорфина,лидокаина, хлорзоксазона, цинакальцета, дазатиниба, дифиллина, элетриптана, эрготамина, фосфенитоина, фенобарбитала, прегабалина, пропилтиоурацила, тиагабина, триамтерена, вигабатрина и зонизамид В качестве альтернативы, или в дополнение к предшествующему варианту осуществления, композиции данного изобретения могут дополнительно содержать по меньшей мере одно лекарственное средство, которое модулирует стрессовую реакцию клеток, предпочтительно который ингибирует стрессовую реакцию клеток, для комбинированного, раздельного или последовательного применения. Наиболее предпочтительные лекарственные средства, которые модулируют стрессовую реакцию клеток, выбирают из арабитола, маннитола, метараминола, омепразола, прилокаина, рапамицина, рифабутина, тиогуанина,трегалозы и видарабина (см. табл. 3). В отдельном варианте осуществления изобретение относится к композициям, содержащим лекарственное средство, которое усиливает ангиогенез, лекарственное средство, которое улучшает синаптическую функцию, и лекарственное средство, которое ингибирует стрессовую реакцию клеток, для одновременного, раздельного или последовательного введения. Композиции изобретения, как правило, содержат один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или вспомогательных веществ. Продолжительность лечения зависит от стадии заболевания, подлежащего лечению, использовавшейся комбинации, возраста и состояния пациента, и от того,как пациент реагирует на лечение. Дозировку, частоту и способ введения каждой составной части комбинации можно регулировать независимо. Например, одно лекарственное средство можно вводить перорально, тогда как второе лекарственное средство можно вводить внутримышечно. Комбинационная терапия может быть запланирована периодическими циклами, которые включают периоды отдыха, так чтобы организм пациента имел возможность оправиться от каких-либо ранее не проявлявшихся побочных эффектов. Лекарственные средства могут также быть составлены в виде готовой формы вместе таким образом, чтобы за одно введение доставить все лекарственные средства. Введение каждого лекарственного средства комбинации может происходить с помощью какоголибо подходящего средства, которое приводит к концентрации лекарственного средства, которая, в сочетании с другими элементами, в состоянии скорректировать функционирование проводящих путей, вовлеченных в AD. Несмотря на то что имеется возможность введения активных составных частей комбинации в виде чистого химического вещества, предпочтительно их наличие в виде фармацевтической композиции,упоминаемой также в данном контексте, как фармацевтическая готовая форма. Возможные композиции включают композиции, подходящие для перорального, ректального, топического (включая трансдермальное, буккальное и подъязычное) или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и интрадермальное) введения. Наиболее часто, данные фармацевтические готовые формы прописывают пациенту в "упаковках для пациентов", содержащих ряд дозаторов или других средств для введения отмеренных унифицированных доз, для применения во время определенного периода лечения, в виде одной упаковки, обычно,блистерной упаковки. Упаковки для пациентов имеют преимущество над традиционными предписаниями, когда фармацевт отделяет дозу лекарственных средств для пациента от оптовой партии, в том, что пациент всегда имеет доступ к листку-вкладышу, находящемуся в упаковке для пациента, как правило,отсутствующую в традиционных предписаниях. Было показано, что включение листка-вкладыша улучшает согласие пациента с инструкциями врача. Таким образом, изобретение дополнительно включает в себя фармацевтическая готовая форма, который был описан в данном изобретении ранее, в сочетании с упаковочным материалом, подходящим для указанных составов. В подобной упаковке для пациента предусмотренное применение готовой формы для комбинационного лечения может стать понятным посредством инструкций, устройств, оборудования, приспособлений и/или других средств, чтобы помочь в использовании состава наиболее подходящим для лечения образом. Подобные меры делают упаковку для пациента особенно подходящей и приспособленной для применения для лечения комбинацией настоящего изобретения. Лекарственное средство может содержаться в любом соответствующем количестве в любом подходящем веществе-носителе, и может иметься в количестве, равном 1-99% по массе от общей массы композиции. Композиция может быть предоставлена в лекарственной форме, которая подходит для перорального, парентерального (например, внутривенно, внутримышечно), ректального, кожного, назального, вагинального, ингаляторного, поверхностного (пластырь) или глазного путей введения. Таким образом, композиция может быть в виде, например, таблеток, капсул, пилюль, порошков, гранул, суспензий,- 13021731 эмульсий, растворов, гелей, включая гидрогели, паст, мазей, кремов, пластырей, микстур, осмотических устройств доставки, суппозиториев, клизм, инъекций, имплататов, распыляемых растворов или аэрозолей. Фармацевтические композиции могут быть составлены в виде готовой формы согласно общепринятой фармацевтической практике (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20thed.), ed. A.R. Gennaro, Lippincott WilliamsWilkins, 2000 and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds. J. Swarbrick and J.C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York). Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть составлены в виде готовой формы для высвобождения действующего лекарственного вещества, по существу, немедленно после введения или с каким-либо предварительно заданным промежутком времени или временным периодом после введения. Готовые формы с регулируемым высвобождением включают (i) готовые формы, которые создают,по существу, постоянную концентрацию лекарственного средства в организме на протяжении увеличенного периода времени; (ii) готовые формы, которые после предварительно заданного времени запаздывания создают, по существу, постоянную концентрацию лекарственного средства в организме на протяжении увеличенного период времени; (iii) готовые формы, которые поддерживают действие лекарственного средства в течение предварительно заданного временного периода посредством сохранения относительно постоянного, эффективного уровня лекарственного средства в организме с сопутствующей минимизацией нежелательных побочных эффектов, связанных с колебаниями в плазме уровня действующего лекарственного вещества; (iv) готовые формы, которые локализуют действие лекарственного средства за счет, например, пространственного размещения композиции с регулируемым высвобождением рядом или в пораженной ткани или органе; и (v) готовые формы, которые направляют действие лекарственного средства посредством использования носителей или производных химического вещества для доставки лекарственного средства в конкретный намеченный тип клеток. Введение лекарственных средств в виде готовой формы с регулируемым высвобождением особенно предпочтительно в случаях, в которых лекарственное средство либо отдельно, либо в комбинации имеет(i) узкий терапевтический индекс (т.е. маленькая разница между концентрацией в плазме, приводящий к вредным побочным эффектам или токсическим реакциям, и концентрацией в плазме, приводящий к терапевтическому эффекту; в целом, терапевтический индекс, TI, определяют, как отношение дозы половинной выживаемости (LD50) к 50%-ной эффективной дозе (ED50; (ii) узкий диапазон поглощения в желудочно-кишечном тракте; или (iii) очень короткий биологический полупериод существования, так что необходим частый прием лекарства в течение дня для того, чтобы поддерживать уровень в плазме на терапевтическом уровне. Для того чтобы добиться регулируемого высвобождения, при котором скорость высвобождения превосходит скорость метаболизма исследуемого лекарственного средства, может осуществляться любая из множества стратегий. Регулируемого высвобождения можно добиться с помощью соответствующего выбора разнообразных параметров готовой формы и составных частей, включая, например, разнообразные типы композиций с регулируемым высвобождением и покрытия. Таким образом, лекарственное средство соединяют с соответствующими вспомогательными веществами с получением фармацевтической композиции, которая, при введении, высвобождает лекарственное средство регулируемым образом(композиции в виде таблеток или капсул из одного или множества компонентов, масляные растворы,суспензии, эмульсии, микрокапсулы, микросферы, наночастицы, пластыри и липосомы). Твердые лекарственные формы для перорального применения. Готовые формы для перорального применения включают таблетки, заключающие в себе действующий компонент (компоненты) в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. Данные вспомогательные вещества могут представлять собой, например, инертные разбавители или наполнители (например, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал, карбонат кальция, хлорид натрия, фосфат кальция, сульфат кальция, или фосфат натрия); вещества для гранулирования и для улучшения распадаемости таблеток (например, производные целлюлозы, включая микрокристаллическую целлюлозу, крахмалы, включая картофельный крахмал, кроскармеллозу натрия, альгинаты или альгиновую кислоту); связующие вещества (например,камедь, альгиновую кислоту, альгинат натрия, желатин, крахмал, пептизированный крахмал, микрокристаллическую целлюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропил метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, поливинилпирролидон или полиэтиленгликоль); и смазывающие вещества,регуляторы сыпучести и антиадгезивные вещества (например, стеариновая кислота, окиси кремния или тальк). Другие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества могут представлять собой красители, ароматизирующие вещества, пластификаторы, хумектанты, буферные вещества и т.п. Таблетки могут быть без покрытия или они могут быть покрыты с помощью известных методов,необязательно с целью отсрочить распадение и поглощение в желудочно-кишечном тракте и, посредством этого, обеспечить пролонгированное действие на протяжении более долгого периода. Покрытие может быть приспособлено для высвобождения действующего лекарственного вещества в соответствии с предварительно заданной схемой (например, для того, чтобы получить готовую форму с регулируемым высвобождением) или оно может быть не приспособлено для высвобождения действующего лекарственного вещества до окончания прохождения желудка (энтеросолюбильное покрытие). Покрытие может представлять собой сахарное покрытие, пленочное покрытие (например, на основании гидроксипропил метилцеллюлозы, метилцеллюлозы, метилгидроксиэтилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы, акриловых сополимеров, полиэтиленгликолей и/или поливинилпирролидона), или энтеросолюбильное покрытие (например, на основании сополимера метаакриловой кислоты, ацетат фталат целлюлозы, гидроксипропила метилцеллюлозы фталата, гидроксипропила метилцеллюлозы ацетата сукцината, поливинила ацетата фталата, шеллака и/или этилцеллюлозы). Может быть использован материал для временной задержки, такой как, например, глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Композиции для твердых таблеток могут включать покрытие, приспособленное для защиты композиции от нежелательных химических изменений, (например, химического распада перед высвобождением действующего лекарственного вещества). Покрытие может быть нанесено на твердую лекарственную форму способом, аналогичным тому, который описан в Энциклопедии фармацевтической технологии. Несколько лекарственных средств могут быть смешаны вместе в таблетке или могут быть разделены. Например, первое лекарственное средство заключено во внутренней части таблетки, а второе лекарственное средство снаружи таким образом, чтобы существенная часть второго лекарственного средства высвобождалась до высвобождения первого лекарственного средства. Готовые формы для перорального применения могут также быть представлены в виде жевательных таблеток, или в виде твердых желатиновых капсул, в которых действующий компонент смешан с инертным твердым разбавителем (например, картофельным крахмалом, микрокристаллической целлюлозой,карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином), или в виде мягких желатиновых капсул, в которых действующий компонент смешан с водой или масляной средой, например, жидким парафином, или оливковым маслом. Порошки и гранулы могут быть получены с использованием составных частей, упомянутых выше для таблеток и капсул, общепринятым образом. Композиции с регулируемым высвобождением для перорального применения могут, например,быть получены с возможностью высвобождения действующего лекарственного вещества за счет регулирования растворения и/или диффузии действующего лекарственного вещества. Высвобождение с регулируемым растворением или диффузией может быть достигнуто за счет соответствующего покрытия таблетки, капсулы, пеллеты или гранулированной готовой формы лекарственных средств или за счет включения лекарственного средства в соответствующую матрицу. Покрытие с регулируемым высвобождением может включать одно или более покрывающих веществ, упомянутых выше, и/или, например, шеллак, пчелиный воск, гликовоск, касторовый воск, карнаубский воск, стеариловый спирт, глицерилмоностеарат, глицерилдистеарат, глицерол пальмитостеарат, этилцеллюлозу, акриловые смолы, dl-полимолочную кислоту, целлюлозы ацетат бутират, поливинилхлорид, поливинил ацетат, винил пирролидон, полиэтилен, полиметакрилат, метилметакрилат, 2-гидроксиметакрилат, метакрилатные гидрогели, 1,3-бутиленгликоль, этиленгликоль метакрилат и/или полиэтиленгликоли. В матричной готовой форме с регулируемым высвобождением, матричный материал может также включать, например, гидратированную метилцеллюлозу, карнаубский воск и стеариловый спирт, карбопол 934, силикон, глицерил тристеарат, метил акрилат-метилметакрилат, поливинилхлорид, полиэтилен и/или галогенированный фторуглерод. Композиция с регулируемым высвобождением, имеющая в своем составе один или более лекарственных средств из заявленных комбинаций, может также быть в виде плавающей таблетки или капсулы(т.е. таблетки или капсулы, которая, при пероральном введении, плавает на поверхности содержимого желудка в течение определенного периода времени). Готовая форма в виде плавающей таблетки лекарственного средства (лекарственных средств) может быть получена посредством гранулирования смеси лекарственного средства (лекарственных средств) со вспомогательными веществами и 20-75% м/м гидроколлоидов, таких как гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза или гидроксипропилметилцеллюлоза. Затем полученные гранулы могут быть спрессованы в таблетки. При контакте с желудочным соком, таблетка образует, по существу, водонепроницаемый студенистый барьер на своей поверхности. Данный студенистый барьер участвует в поддержании плотности, равной менее чем единица, обеспечивая посредством этого возможность таблетке оставаться плавающей в желудочном соке. Жидкости для перорального введения. Порошки, дисперсные порошки или гранулы, подходящие для получения водной суспензии посредством добавления воды, представляют собой удобные лекарственные формы для перорального введения. Получение готовой формы в виде суспензии обеспечивает действующий компонент в смеси с диспергирующим или увлажняющим средством, суспендирующим средством и одним или более консервантами. Подходящими суспендирующими средствами являются, например, натрий карбоксиметилцеллюлоза,метилцеллюлоза, натрий альгинат и т.п. Парентеральные композиции. Фармацевтическая композиция может также вводиться парентерально посредством инъекции, вливания или имплантации (внутривенно, внутримышечно, подкожно и т.п.) в виде лекарственных форм,готовых форм или посредством подходящих устройств доставки или имплататов, содержащих общепри- 15021731 нятые, нетоксичные фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные средства. Получение в виде готовой формы и приготовление подобных композиций хорошо известно квалифицированным специалистам в области фармацевтических готовых форм. Композиции для парентерального использования могут быть предоставлены в виде дозированных лекарственных форм (например, в ампулах с однократной дозой) или в бутылочках, содержащих несколько доз, и в которые может быть добавлен подходящий консервант (см. ниже). Композиция может быть в форме раствора, суспензии, эмульсии, инфузионного устройства или устройства доставки для имплантации или она может быть представлена в виде сухого порошка, подлежащего восстановлению водой или другой подходящей средой для лекарства перед применением. Кроме действующего лекарственного вещества (лекарственных веществ) композиция может включать подходящие парентерально приемлемые носители и/или вспомогательные вещества. Действующее лекарственное вещество (лекарственные вещества) могут быть включены в микросферы, микрокапсулы, наночастицы, липосомы и т.п. для регулируемого высвобождения. Композиция может включать суспендирующие, солюбилизирующие,стабилизирующие, регулирующие рН средства и/или диспергирующие средства. Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть в форме, подходящей для стерильной инъекции. Для получения подобной композиции, подходящее действующее лекарственное вещество (лекарственные вещества) растворяют или суспендируют в парентерально приемлемой жидкой среде для лекарства. Среди приемлемых сред для лекарств и растворителей, которые могут быть использованы, имеется вода, при этом воду приводят к подходящему рН с помощью добавления соответствующего количества хлористо-водородной кислоты, гидроксида натрия или подходящего буфера, 1,3 бутандиола, раствора Рингера и изотонического раствора хлорида натрия. Водная готовая форма может также заключать в себе один или более консервантов (например, метил, этил или n-пропил ргидроксибензоат). В случаях, когда один из лекарственных средств всего лишь недостаточно или слабо растворим в воде, может быть добавлено средство, усиливающее растворение или солюбилизацию, или растворитель может включать 10-60% м/м пропиленгликоля и т.п. Парентеральные композиции с регулируемым высвобождением могут быть в форме водных суспензий, микросфер, микрокапсул, магнитных микросфер, масляных растворов, масляных суспензий или эмульсий. В качестве альтернативы, действующее лекарственное вещество (лекарственные вещества) могут быть включены в биосовместимые носители, липосомы, наночастицы, имплататы или инфузионные устройства. Материалы для использования при получении микросфер, и/или микрокапсул представляют собой, например, поддающиеся биологическому разложению/биологическому разрушению полимеры, такие как полигалактин, поли(изобутил цианоакрилат), поли(2-гидроксиэтил-L-глутамнин). Биосовместимыми носителями, которые могут быть использованы при приготовлении парентеральной готовой формы с регулируемым высвобождением, являются углеводы (например, декстраны), белки (например, альбумин), липобелки или антитела. Материалы для применения в имплататах могут быть не поддающимися биологическому разложению (например, полидиметилсилоксан) или поддающимися биологическому разложению (например, поли(капролактон), поли(гликолевая кислота) или поли(орто сложные эфиры. Ректальные композиции. Для ректального применения подходящие лекарственные формы для композиции включают суппозитории (эмульсионного или суспензионного типа) и ректальные желатиновые капсулы (растворы или суспензии). В типичной готовой форме для суппозиториев действующее лекарственное вещество (лекарственные вещества) объединяют с соответствующей фармацевтически приемлемой основой суппозитория, такой как масло какао, эстерифицированные жирные кислоты, обработанный глицерином желатин и разнообразные водорастворимые или дисперсные основания, наподобие полиэтиленгликолей. Могут быть включены разнообразные добавки, усиливающие агенты, или поверхностно-активные вещества. Чрескожные и топические композиции. Фармацевтические композиции могут также вводиться местно на кожу для чрескожного поглощения в лекарственных формах или готовых формах, заключающих в себе общепринятым образом нетоксичные фармацевтические приемлемые носители и вспомогательные вещества, включая микросферы и липосомы. Готовые формы включают кремы, мази, лосьоны, жидкие мази, гели, гидрогели, растворы,суспензии, наклейки, распыляемые растворы, пасты, пластыри и другие типы трансдермальных систем доставки лекарственных средств. Фармацевтически приемлемые носители или вспомогательные вещества могут включать эмульсифицирующие вещества, антиоксиданты, буферные вещества, консерванты,хумектанты, усиливающие проникновение агенты, комплексообразующие вещества, гелееобразующие. вещества, мазевые основы, ароматизирующие вещества и защищающие кожу вещества. Эмульсифицирующие вещества могут представлять собой встречающиеся в природе смолы (например, сенегальскую камедь или трагакантовую камедь). Консерванты, хумектанты, усиливающие проникновение агенты могут представлять собой эфиры параоксибензойной кислоты, такие как метил или пропил р-гидроксибензоат, и бензалкония хлорид, глицерин, пропиленгликоль, мочевину и т.д. Фармацевтические композиции, описанные выше для топического введения на коже, могут также быть использованы применительно к местному введению на часть тела, подвергаемую лечению, или в непосредственной близости от нее. Композиции могут быть предназначены для непосредственного нанесения или для нанесения посредством специальных устройств доставки лекарственного средства, таких как повязки или, в качестве альтернативы, пластыри, мягкие прокладки, губки, полоски или другие формы подходящих эластичных материалов. Дозировки и продолжительность лечения. Необходимо понимать, что лекарственные средства комбинации могут вводиться параллельно, либо в той же самой, либо другой фармацевтической готовой форме, или последовательно. Если происходит последовательное введение, задержка при введении второго (или дополнительного) действующего компонента должна быть такой, чтобы не потерять преимущество эффективного действия комбинации активных составных частей. Минимальное требование для комбинации согласно данному описанию состоит в том, что комбинация должна предназначаться для комбинированного использования с преимуществом эффективного действия комбинации активных составных частей. О предполагаемом использовании комбинации можно сделать вывод с помощью приспособлений, оборудования, конструкций и/или других средств для помощи при использовании комбинации согласно изобретению. Несмотря на то что активные лекарственные средства настоящего изобретения могут вводиться в виде раздельных доз, например два или три раза ежедневно, предпочтительной является однократная ежедневная доза каждого лекарственного средства в комбинации, причем наиболее предпочтительной является однократная ежедневная доза всех лекарственных средств в разовой фармацевтической композиции (дозированная лекарственная форма). Термин "дозированная лекарственная форма" относится к физически дискретным элементам (таким как капсулы, таблетки или загруженные цилиндры шприцов), подходящим в качестве однократных дозировок для пациентов-людей, причем каждый элемент содержит предварительно заданное количество активного вещества или веществ, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Введение может производиться от одного до нескольких раз ежедневно от нескольких дней до нескольких лет и может даже в течение жизни пациента. В большинстве случаев будет показано длительное или, по меньшей мере, периодически повторяемое долговременное применение. Дополнительно, на применяемую дозировку может оказывать воздействие фармакогеномная (воздействие генотипа на фармакокинетический, фармакодинамический профиль или профиль эффективности терапевтического средства) информация об отдельном пациенте. За исключением ситуаций, соответствующим особенно тяжелым случаям заболевания AD, когда могут потребоваться более высокие дозировки, предпочтительная дозировка каждого лекарственного средства в комбинации будет обычно находиться в пределах диапазона доз, не превышающего обычно предписываемые для долговременного поддерживающего лечения или который является безопасным,как доказано во время крупномасштабных клинических исследований 3 фазы. Наиболее предпочтительная дозировка обычно соответствует количествам от 1 до 10% дозировки,обычно предписываемой для долговременного поддерживающего лечения. Например, возможные дозировки для особенно предпочтительных комбинированных способов лечения данного изобретения могут представлять собой: эплеренон перорально от приблизительно 0,25 до 5 мг однократно или дважды в день и маримастат перорально от приблизительно 0,1 до 1 мг в день; гемфиброзил перорально от приблизительно 12 до 120 мг, вводимый в виде двух раздельных доз за 30 мин до приема пищи утром и вечером, и маримастат перорально от приблизительно 0,1 до 1 мг в день; маримастат перорально от приблизительно 0,1 до 1 мг в день и тербинафин перорально от приблизительно 2,5 до 25 мг однократно или дважды ежедневно; топотекан перорально от приблизительно 0,025 до 0,25 мг в день и метазоламид перорально от приблизительно 1 до 10 мг 2-3 раза ежедневно; эплеренон перорально от приблизительно 0,25 до 5 мг однократно или дважды в день и тадалафил перорально от приблизительно 0,05 до 0,5 мг в день; эплеренон перорально от приблизительно 0,25 до 5 мг однократно или дважды в день и цилостазол перорально от приблизительно 1 до 10 мг в день; сунитиниб перорально от приблизительно 0,5 до 5 мг в день и тербинафин перорально от приблизительно 2,5 до 25 мг однократно или дважды ежедневно; фенформин перорально от приблизительно 0,5 до 5 мг в день и баклофен перорально от приблизительно 0,4 до 8 мг в день, вводимый в виде двух или трех раздельных доз; фенформин перорально от приблизительно 0,5 до 5 мг в день и тербинафин перорально от приблизительно 2,5 до 25 мг однократно или дважды ежедневно; тадалафил перорально от приблизительно 0,05 до 0,5 мг в день и алендронат перорально от приблизительно 0,7 до 7 мг однократно еженедельно или от 0,7 до 7 мг однократно ежедневно; цилостазол перорально от приблизительно 1 до 10 мг в день и алендронат перорально от приблизительно 0,7 до 7 мг однократно еженедельно или от 0,7 до 7 мг однократно ежедневно; мепакрин перорально от приблизительно 3 до 30 мг в день и тербинафин перорально от приблизительно 2,5 до 25 мг однократно или дважды ежедневно; мепакрин перорально от приблизительно 3 до 30 мг в день и балсалазид перорально от приблизительно 7 до 75 мг для приема 3 раза в день; тербинафин перорально от приблизительно 2,5 до 25 мг однократно или дважды ежедневно и иматиниб перорально от приблизительно 4 до 60 мг в день. Необходимо понимать, что фактически вводимое количество лекарственного средства должно определяться врачом, с учетом соответствующих обстоятельств, включая состояние или состояния, подлежащие лечению, точную композицию, подлежащую введению, возраст, массу и реакцию индивидуального пациента, серьезность симптомов пациента и выбранный способ введения. Вследствие этого, упомянутые выше диапазоны дозировок предназначены для предоставления общего направления и подтверждение идей, изложенных в данном изобретении, но не предназначены для ограничения объема правовых притязаний изобретения. Следующие примеры приведены с целью иллюстрации, а не в качестве ограничений. Примеры Обоснование лекарственного средства с использованием анализов in vitro. Анализы in vitro представляют собой мощный инструмент для усовершенствования лекарственных средств и их комбинаций, воздействующих на проводящие пути, вовлеченные в AD. Лекарственные средства настоящего изобретения и их комбинации оптимизируют посредством воздействия при проведении специфических аналиов in vitro, приспособленных для сети AD, идентифицированной в данном изобретении. Впоследствии данные вещества или их комбинации могли бы быть протестированы на модели AD in vivo. Данные тесты in vitro начинаются с исследования защитного потенциала лекарственных средств на эндотелиальные клетки, подвергнутые токсическому действию белка Абета. Лекарственные средства в задействованном проводящем пути могли бы быть протестированы по отдельности, с последующими анализами их комбинаторного действия. На более поздней стадии наиболее эффективные комбинации,воздействующие на мишени в отдельных проводящих путях, объединяют и тестируют снова в анализах на клеточный стресс, разрастание аксонов и токсичность для сосудов. Клеточная культура. Прежде всего, культуру эндотелиальных клеток мозга крыс (Vect-Horus SAS, Marseille) культивируют на прохождение 0. При слиянии эндотелиальные клетки диссоциируют с помощью трипсина ЭДТК(Pan Biotech Ref: Р 10-023100). Клетки высевают с плотностью, равной 25 000 клеток/лунку в 96 луночных планшетах (лунки покрывают 30 мкл крысиного коллагена типа I при 1,5 мг/мл, Vect-Horus SAS,Marseille) и культивируют в среде MCBD 131 (М-131-500, Invitrogen), дополненной 1% добавкой для микрососудистого роста (MVGS, S-005-25, Invitrogen). Клетки культивируют при 37 С в атмосфере с увлажненным воздухом (95%)/CO2(5%). Половину среды каждый день заменяют свежей средой. Спустя 4 дня к среде клеточной культуры добавляют лекарственные средства в различных концентрациях, растворенные в 0,1% DMSO или воде. Проводят 1-часовую предварительную инкубацию в культурной среде, содержащей модифицированную по способу Дульбекко среду Игла (DMEM, Pan Biotech Ref: Р 04-03600), дополненной 2% фетальной бычьей сывороткой (FBS; Invitrogen ref: 16000-036), 1%P06-07100), 0,1 мг/мл Гепарином (Sigma), 10 нг/мл эпидермическим фактором роста (EGF, Invitrogen) и 10 нг/мл фактором роста эндотелия сосудов (VEGF, PHG0146, Invitrogen). Затем клетки подвергают токсическому воздействию 30 мкМ -амилоида (25-35; Sigma) вместе с лекарственными средствами в той же самой культурной среде. После этого клетки подвергают токсическому воздействию в течение 3 дней. Анализ активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ). Для каждой культуры после 3 дней токсического воздействия собирают и анализируют супернатант с помощью набора для выявления цитотоксичности (ЛДГ, Roche Applied Sciences). Данный колориметрический анализ для квантификации гибели клеток основан на измерении активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ), высвобождаемой из цитозоля поврежденных клеток в супернатант. Оптическую плотность(DO) оценивают с помощью спектрофотометра при длине волны 492 нм с помощью устройства многократного сканирования (Thermo, Ref Ascent). Результаты. Результаты, представленные на фигуре, получены из двух независимых культур, 6 лунок на условие. Все значения выражены в виде среднейс.о. На исходных данных выполнен анализ двустороннего критерия Стьюдента. Результаты выражены в процентах жизнеспособности клеток, в сравнении с контролем (средой для лекарства). Лекарственные средства инкубируют с эмбриональными эндотелиальными клетками мозга крыс за 1 ч перед токсическим воздействием А 25-35 30 мкМ, которое продолжается 3 дня. Через три дня после данной инкубации определяют количество высвобождения ЛДГ в культурной среде, отражающего уровень гибели клеток. Авторы изобретения наблюдали, что 4 лекарственных средства безусловно вызывают защитное действие против данного токсического воздействия А 25-35 (фигура). Тесты in vivo. Соединения и их комбинации, задействованные тестах in vitro, были протестированы в моделях болезни Альцгеймера in vivo. Сверхэкспрессия мутантных человеческих трансгенов белкапредшественника амилоида-бета (АРР), связанных с болезнью Альцгеймера, была наиболее надежным средством ускоренного депонирования Абета в мозге трансгенных мышей, которые служат в качестве моделей заболевания AD в многочисленных исследованиях. Поскольку они стареют, у данных АРРмутантных мышей развивается выраженная патология амилоида и другие признаки, свойственные AD,включая пониженную синаптическую плотность, реактивный глиоз и некоторые когнитивные нарушения. Многочисленные модели АРР-мутантных мышей демонстрируют небольшую выраженность очевидной потери нейронов и патологию нейрофибриллярных клубков (NFT). Мыши, гемизиготные по данному трансгену BRI-Абета 42, являются жизнеспособными и фертильными с нормальной продолжительностью жизни. Трансгенная BRI-Абета 42 мРНК экспрессируется по образцу, характерному для промотера белка-приона мышей; наиболее высокие уровни экспрессии трансгена обнаружены в клетках-зернах мозжечка и гиппокампе, за которыми следуют кора головного мозга, варолиев мост, таламус и средний мозг. В трансгенном гибридном белке, Абета 1-42 сливается с С-концом белка BRI на сайте расщепления таким образом, чтобы расщепление приводило к эффективной секреции Абета 1-42 в просвет или внеклеточное пространство. Вследствие этого, данные мыши специфически экспрессируют изоформу Абета 1-42. Гемизиготные мыши BRI-Абета 42 с возрастом накапливают детергентно-нерастворимые амилоидбета и приобретают имеющие сердцевину бляшки в мозжечке уже в 3-месячном возрасте. Развитие патологии переднего мозга происходит позже, внеклеточные бляшки Абета не присутствуют постоянно в гиппокапме и энторинальной/пириформной коре до 12-месячного возраста. Уже в 3 месяца в молекулярном слое мозжечка трансгенной мыши можно наблюдать отложения амилоида-бета (имеющие сердцевину бляшки), которые становятся более резко выраженными с возрастом; случайные внеклеточные бляшки видны в энторинальной/пириформной коре и гиппокапме в 6-месячном возрасте, но не обнаруживаются постоянно до 12-месячного возраста. Наиболее старые мыши демонстрируют широко распространенную патологию с имеющими сердцевину и диффузными бляшками в мозжечке, коре головного мозга,гиппокапме и обонятельной луковице. Внеклеточные амилоидные бляшки демонстрируют плотные амилоидные сердцевины с расходящимися лучами фибриллами; по периферии данных бляшек наблюдаются многочисленные пучки дистрофических нейритов. С бляшками связан реактивный глиоз. Способы лекарственной терапии. Трансгенные Tg (Prnp-ITM2B/APP69542) A12E mc мыши (57) были получены из Jackson Laboratory (http://jaxmice.jax.org/strain/007002.html. Мышей-основателей с наиболее высокими уровнями Абета 42 в плазме, линия BRI-Абета 42 А (12 е), содержали на смешанном В 6 С 3 фоне. Взрослые самцы трансгенных мышей имели свободный доступ к пище и воде. В соответствии с одобренным протоколом Комитета по институциональному уходу за животными и их использованием, мышей взвешивали и инъецировали интраперитонеально или принудительно кормили один раз ежедневно в течение от 10 до 20 последующих недель либо контрольным раствором (плацебо) или лекарственными средствами РХТ, приготовленными в различных дозах. Анализ выживаемости. Уровни выживаемости анализировали с использованием методов Каплана-Майера. Для всех парных многочисленных сравнительных тестов использовали методы Холма-Сидока (апостериорные). Цензурировали не относящиеся к делу смертельные случаи. Все сравнения производили между однопометными животными для ограничения каких-либо потенциально мешающих влияний от фоновых линейных различий. Поведенческие тесты. Поведенческие тесты разрабатывали и проводили в соответствии со способами, опубликованными несколькими авторами (58-61). Пространственное обучение и память в водном лабиринте морриса (MWM). Данный эксперимент проводят в круглом бассейне 90 см в диаметре, изготовленном из белой пластмассы и наполненном окрашенной в цвет молока водой. Платформа для спасения 8 см в диаметре, изготовленная из светлой пластмассы, погружена на 0,5 см ниже уровня воды. Зрительные ориентиры предоставляют с помощью различных геометрических форм, напечатанных буквами размера А 4 и помещенных на четыре окружающие стенки (расстояние от бассейна составляло от 50 до 70 см). Каждой мыши задавали четыре испытания ежедневно (с 5-7-минутным интервалом между испытаниями, всего 16 испытаний) в течение 4 дней. Каждое испытание проводили из одной из четырех различных стартовых точек. Передвижение мыши отслеживали с использованием программного обеспечения Videotrack (View Point). Было определено время, необходимое для определения местонахождения платформы для спасения (время ожидания спасения; до 60 с). После определения местонахождения платформы мышь имела возможность пребывать на ней в течение 15 с. Мышь, которая не могла отыскать платформу в течение 60 с, направляли на нее и обеспечивали возможность оставаться на ней в течение 15 с. В этом случае регистри- 19021731 ровали время ожидания, равное 60 с. Для всех четырех испытаний в день получали среднее значение для статистического анализа, за исключением первого испытания в 1 день. На 9 день (через 5 дней после последней тренировки) мышь подвергали 60-секундному опытному испытанию, при котором платформу удаляют, а мыши предоставляют возможность ее искать. Время, которое каждое животное проводило в каждом секторе, регистрировали (секторное время поиска). Использовали несколько групп самцов мышей в 3, 7, 10, и 12 месяцев. Незначительное количество мышей демонстрировали замирание (например, лежа неподвижно в воде и отказываясь плыть), что в значительной степени являлось помехой для тестирования, таких животных исключали из анализа данных. Все поведенческие тесты проводили в тихой обстановке с пониженной освещенностью. Тестирование кратковременной памяти в радиальном водном лабиринте. Данное основанное на познавательных способностях сенситивное измерение кратковременной памяти осуществляли с помощью устройства, состоящего из бассейна 100 см в диаметре, наполненного водой (также использовавшегося для Водного Лабиринта Морриса и задач на Распознавание платформы), со вставленной алюминиевой вставкой для создания шести радиально расположенных плавательных лучей. Тестирование состоит из пяти 1-минутных испытаний за ежедневную сессию, в течение 9-12 последующих дней. В начале каждой сессии светлую погруженную платформу располагают в одном из шести плавательных лучей (случайно выбранных, с ежедневным изменением). Для каждого из первых четырех обучающих испытаний, животное помещают в один из не содержащих платформу лучей (рандомизированная последовательность) и обеспечивают возможность поиска платформы. Во время 60 с испытания каждый раз, когда животное входит в еще один не содержащий платформу луч, его осторожно возвращают в исходное положение, а ошибку регистрируют. После четвертого испытания животному предоставляют возможность отдыха в течение 30 мин с последующим пятым (сохраняющим) испытанием, которое начинается в последнем не содержащем платформу плавательном луче. Количество ошибок(выбора неправильных лучей) и время ожидания спасения (время достижения платформы, максимально 60 с) регистрируют для каждого испытания. Пространственно ориентированное обучение и память в тесте с кольцевой платформой. Данный основанный на познавательных способностях тест с задачей проводят с помощью устройства, которое состоит из кольцевой платформы 69 см в диаметре, имеющей 16 отверстий "для спасения",расположенных равноудаленно по окружности. Убежище для спасения устанавливают под одним из отверстий, и платформу окружает черная штора, на которой помещают разнообразные зрительные стимулы. Животное помещают в центре платформы в начале однократного 5 мин испытания и демонстрируют негативные раздражители. Регистрируют общее количество ошибок (тыканья головой в не имеющие прохода отверстия) и время ожидания спасения (время достижения спасительного отверстия). Способность распознавания в тесте на распознавание платформы. Данное основанное на познавательных способностях поисковое задание оценивает идентификацию объекта и способность распознавания. Намеченный объект состоит из кольцевой платформы 9 см в диаметре, снабженной черным значком 10 см 40 см, который расположен на 0,8 см выше поверхности воды в кольцевом бассейне 100 см в диаметре. Тестирование состоит из четырех 60 с испытаний в день в каждый из четырех последующих дней. Каждый день, намеченный объект помещают в другой сектор бассейна для каждого испытания, и животное высвобождают в одном и том же местоположении по окружности бассейна для всех четырех испытаний. Для каждого испытания регистрируют общее время ожидания (максимально 60 с). Модифицированное исследование Ирвина. Используют модифицированный всесторонний профиль по Ирвину для определения, демонстрирует ли какая-либо из мышей физиологические, поведенческие или сенсомоторные нарушения, связанные с ее генотипом. Для исследования двигательных навыков, координации и мышечной силы мышь помещают на проволоке, которая была натянута между двумя колоннами высотой по 30 см, и оценивают их способность балансировать на проволоке. В дополнение, определяют их способность крепко сжимать и висеть на проволоке всеми четырьмя лапами в течение по меньшей мере 5 с и забираться опять на проволоку. Количественное определение сосудистого депонирования амилоида. Для количественного определения церебральной амилоидной ангиопатии (САА), залитые парафином участки 5 мкм с промежутками 30 мкм мягкой и паутинной оболочек мозга в проекции теменной или мозжечковой корой окрашивали с использованием иммунной метки с биотинилированным Ab9 антителом (анти-АВ 1-16, 1:500) в течение ночи при 4 С (n=5-7 мышей на генотип в каждой возрастной группе, n=6 участков на мышь). Определенно окрашенные кровеносные сосуды оценивали визуально с использованием модифицированной системы оценки Вонцаттела (62). Оценку тяжести САА рассчитывали посредством умножения количества САА сосудов на степень тяжести САА. Гистология, иммуногистохимия и иммунофлюоресценция.Tg и WT мышей от 3 до 12 месяцев обезболивали и проводили транскардиальную перфузию последовательно 0,9% NaCl и 4% параформальдегидом в 0,1 мол./л физиологическом растворе с фосфатным буфером (PBS) (рН 7,4) или 10% формалином и 4% параформальдегидом в 0,1 мол./л PBS (рН 7,4). Мозг и спинной мозг удаляли и сохраняли в 4% параформальдегиде. Некоторые образцы заливали парафином и нарезали на санном микротоме с толщиной, равной 10 мкм. Срезы из замороженных тканей (14 мкм) получали на криостате и устанавливали на покрытые хромовыми квасцами предметные стекла. Эндогенную пероксидазу блокируют посредством обработки среза метанол содержащей 0,3% H2O2 в течение 30 мин. Срезы блокируют в 10% лошадиной сыворотке. Используют первые антитела, которые инкубируют в течение ночи при 4 С в присутствии 1% лошадиной сыворотки. Все вторичные биотинилированные или меченые флуоресцеином, Техасским красным и АМСА антитела, флуорохром, набор ABC и 3,3'диаминбензидин в качестве хромогена для пероксидазной активности получены из Vector Laboratories. Инкубацию с вторичным антителом проводили при комнатной температуре в течение 1 ч. Все стадии отмывания (3-10 мин) и разведение антисыворотки проводили с использованием физиологического раствора с фосфатным буфером (0,1 мол./л PBS, рН 7.4) или физиологического раствора с Tris буфером (0,01 мол./л Tris, 0,15 мол./л NaCl, рН 7.4). Инкубацию с комплексом ABC и выявление 3,3'диаминбензидином осуществляли в соответствии с инструкциями производителя. Гематоксилиновое контрастное окрашивание проводили в соответствии со стандартными процедурами. Для каждого определения использовали минимум по три мыши на генотип, возраст и пол (63). Статистический анализ данных in vivo. Результаты всех экспериментов анализировали посредством STATISTICA 8,0 (Statsoft). Тяжесть САА анализировали посредством использования ANOVA с апостериорным критерием множественного сравнения Холма-Сидока или двухстороннего критерия Стьюдента. Если массив данных не соответствует предположениям параметрического теста, используют либо критерий КраскераУоллиса с последующим апостериорным множественным сравнением Дана, либо критерий ранговых сумм Манна-Уитни. Все сравнения проводят между однопометными животными. Моделирование реакции на лекарственные средства осуществляют с исключением контрольных (0 мг/кг) образцов. ED50 соответствует дозе (мг/кг), необходимой для индуцирования 50% максимальной вызываемой лекарственным средством в экспериментах. Ее вычисляют с использованием модели уравнения Хилла для регистрации ED50. Список библиографической литературы ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение композиции, содержащей баклофен или его соль, для получения лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера. 2. Применение по п.1, где указанная композиция содержит баклофен в комбинации по меньшей мере с одним соединением, выбранным из группы лефлуномида, сульфисоксазола, тербинафина, клопидогреля, фенолдопама, мепакрина и фенформина или их солей, для одновременного, раздельного или последовательного введения. 3. Применение по п.2, где указанная композиция содержит по меньшей мере одну из следующих комбинаций лекарственных средств, причем лекарственные средства в каждой из указанных комбинаций предназначены для одновременного, раздельного или последовательного введения: баклофен и сульфизоксазол,баклофен и лефлуномид,баклофен и фенформин или баклофен и клопидогрель. 4. Применение по любому одному из предшествующих пунктов, где композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. 5. Применение по любому одному из предшествующих пунктов, где указанную композицию вводят человеку многократно. 6. Применение композиции, содержащей баклофен или его соль, для получения лекарственного средства для защиты эндотелиальных клеток мозга против токсического действия белка Абета у субъекта с болезнью Альцгеймера.