Модуляторы активности гидролазы амидов жирных кислот

МОДУЛЯТОРЫ АКТИВНОСТИ ГИДРОЛАЗЫ АМИДОВ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В настоящем документе описан (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5 илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты,который используется в качестве модулятора активности FAAH. (4-Хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5 илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты может быть использован в составе фармацевтических композиций и способов, применяемых для лечения болезненных состояний, расстройств и патологических состояний, опосредованных активностью гидролазы амидов жирных кислот(FAAH), таких как тревога, боль, воспалительный процесс, расстройства сна, расстройства пищевого поведения, нарушения энергетического обмена и двигательные нарушения (например,рассеянный склероз). Также в настоящем документе описан способ синтеза (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЯНССЕН ФАРМАЦЕВТИКА НВ (BE) Перекрестные ссылки на родственные заявки Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США с серийным номером 61/330522, поданной 03 мая 2010 г. Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к соединению (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтическим композициям, содержащим данное соединение, способам синтеза данного соединения, а также к способам применения данного соединения для лечения болезненных состояний, расстройств и патологических состояний, опосредованных активностью гидролазы амидов жирных кислот (FAAH). Предпосылки создания изобретения В течение многих веков конопля считалась целебным растением. Основным биологически активным компонентом конопли является 9-тетрагидроканнабинол (ТГК). Открытие ТГК в конечном итоге привело к обнаружению двух эндогенных каннабиноидных рецепторов, ответственных за его фармакологическое действие, а именно рецепторы CB1 и СВ 2 (Goya et al., Exp. Opin. Ther. Patents, 2000 г., 10,1529). Эти открытия позволили не только найти место приложения действия ТГК, но и стали причиной проведения исследований эндогенных агонистов в данных рецепторах или эндоканнабиноидах. Первым найденным эндоканнабиноидом был амид жирной кислоты - этаноламид арахидоновой кислоты или анандамид (АЕА). АЕА активирует большое количество фармакологических эффектов экзогенных каннабиноидов (Piomelli et al., Nat. Rev. Neurosci., 2003 г., 4(11), 873). Катаболизм АЕА главным образом относят на счет интегрального мембранного белка - гидролазы амидов жирных кислот (FAAH), которая гидролизует АЕА до арахидоновой кислоты и этаноламина.FAAH была охарактеризована в 1996 г. Краваттом и соавторами (Cravatt et al., Nature, 1996 г., 384, 83). Впоследствии было установлено, что FAAH дополнительно отвечает за катаболизм большого числа важных липидных сигнальных молекул амидов жирных кислот, включающих другой основной эндоканнабиноид 2-арахидоноилглицерин (2-AG) (Devane et al., Science, 1992 г., 258, 1946-1949); снотворное вещество олеамид (Cravatt et al., Science, 1995 г., 268, 1506); подавляющее аппетит вещество N-олеоилэтаноламид (ОЕА) (Rodriguez de Fonesca, Nature, 2001 г., 414, 209) и противовоспалительное вещество пальмитоилэтаноламид (PEA) (Lambert et al., Curr. Med. Chem., 2002 г., 9(6), 663). Ингибиторы FAAH с небольшими молекулами должны повышать концентрации этих эндогенных сигнальных липидов и таким образом обеспечивать связанные с ними благоприятные фармакологические эффекты. Было представлено несколько докладов по эффектам различных ингибиторов FAAH в доклинических моделях. В частности, в докладах было представлено, что два ингибитора FAAH на основе карбамата обладают анальгезирующими свойствами при использовании в экспериментальных моделях на животных. Было представлено, что BMS-1 (см. WO 02/087569), структура которого показана ниже, оказывает на крыс анальгезирующее действие в модели нейропатической боли, основанной на лигировании спинального нерва по Чангу, и тесте Харгрейвса на острую тепловую ноцицепцию. Было представлено, что URB597 обладает эффективностью в модели тревоги у крыс при проведении испытаний на циркулярном и крестообразном лабиринтах, а также оказывает анальгезирующее действие на крыс в тестах с горячей пластиной и формалином (Kathuria et al., Nat. Med., 2003 г., 9(1), 76). Производное мочевины, фениламид 4-(3-фенил[1,2,4]тиадиазол-5-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, оказалось эффективным в обеих моделях нейропатической боли, основанной на лигировании спинального нерва по Чангу, и модели острой боли от ожоговой травмы, основанной на легкой термической травме (Karbarz et al., Anesth Analg., 2009 г., 108(1), 316-329). Также были представлены и другие мощные ингибиторы фермента FAAH на основе мочевины (WO 06/074025). Было представлено, что сульфонилфторид АМ 374 значительно снижает спастичность при хроническом привычном экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (CREAE) у мышей в модели рассеянного склероза на животных (Baker et al., FASEB J., 2001 г., 15 (2), 300).FAAH и обладает анальгезирующим действием в обоих тестах на тепловую ноцицепцию у крыс - с горя-1 022158 Результаты исследований по влиянию некоторых экзогенных каннабиноидов позволили установить,что ингибитор FAAH можно использовать для лечения различных патологических состояний, заболеваний, расстройств или симптомов. Они включают в себя боль, тошноту/рвоту, анорексию, спастичность,двигательные нарушения, эпилепсию и глаукому. До настоящего момента утвержденные терапевтические способы применения каннабиноидов включают в себя облегчение вызванной химиотерапией тошноты и рвоты у больных раком и повышение аппетита у больных ВИЧ/СПИДом, страдающих анорексией вследствие синдрома истощения. В некоторых странах для данных показаний в продаже доступны два продукта, а именно дронабинол (Marinol) и набилон. Помимо утвержденных показаний областью, которая привлекла большое внимание возможностями применения каннабиноидов, является анальгезия, то есть лечение боли. Пять маломасштабных рандомизированных исследований в контролируемых условиях показали, что ТГК превосходит плацебо, обеспечивая зависимую от дозы анальгезию (Robson et al., Br. J. Psychiatry, 2001 г., 178, 107-115). Известно, чтоAtlantic Pharmaceuticals занимается разработкой синтетического каннабиноида СТ-3, 1,1-диметилгептилпроизводного карбоксильного метаболита тетрагидроканнабинола, как перорально активного анальгетика и противовоспалительного вещества. Стало известно, что в Германии в мае 2002 г. была начата экспериментальная фаза II испытания СТ-3 в качестве препарата для лечения хронической нейропатической боли. Ряд лиц, страдающих заболеваниями, связанными с нарушением опорно-двигательных функций,такими как рассеянный склероз, заявили о благоприятном воздействии конопли как на связанную с болезнью боль, так и на спастичность, что подтверждается маломасштабными контролируемыми исследованиями (Croxford et al., J. Neuroimmunol, 2008 г., 193, 120-9; Svendsen, Br. Med. J., 2004 г., 329, 253). Аналогичным образом, пациенты с повреждением спинного мозга, например параплегией, сообщили,что после курения марихуаны болезненные спазмы облегчаются. Отчет, в котором представлены сведения о том, что каннабиноиды регулируют мышечные спазмы и тремор в модели CREAE рассеянного склероза, продемонстрировал, что данные эффекты опосредованы рецепторами CB1 и СВ 2 (Baker, Nature,2000 г., 404, 84-87). В рамках фазы 3 клинических испытаний на больных рассеянным склерозом и больных с повреждением спинного мозга использовали смесь тетрагидроканнабинола/каннабидиола(ТГК/CBD) с низким коэффициентом соотношения компонентов. Стало известно, что мыши, нокаутированные по гену FAAH, неизменно достигают лучших клинических показателей, чем мыши дикого типа из контрольной группы, но это улучшение не является результатом противовоспалительного действия, а,скорее, может отражать некоторый нейропротекторный эффект или эффект стимулирования ремиелинизации, развивающийся вследствие дефицита данного фермента (Webb et al., Neurosci Lett., 2008 г., том 439, 106-110). Были представлены отчеты о проведении маломасштабных клинических исследований в контролируемых условиях в других потенциальных коммерческих областях применения каннабиноидов. Стало известно, что испытания на добровольцах подтвердили, что при пероральном приеме, инъекциях и курении каннабиноидов они оказывают дозозависимое снижение внутриглазного давления (ВГД), таким образом ослабляя симптомы глаукомы. Офтальмологи прописывали марихуану пациентам, страдающим глаукомой, у которых другие лекарственные средства для регулирования внутриглазного давления были неэффективными (Robson et al., 2001 г., см. выше). Ингибирование FAAH с помощью ингибитора с небольшими молекулами может иметь преимущество перед лечением агонистом CB1 прямого действия. Введение экзогенных агонистов CB1 может вызывать ряд реакций, включая пониженную ноцицепцию, каталепсию, гипотермию и усиленное пищевое поведение. В частности, эти четыре реакции называют каннабиноидной тетрадой. Эксперименты с мышами, нокаутированными по гену FAAH (FAAH), продемонстрировали снижение реакции при тестировании ноцицепции, но не показали каталепсию, гипотермию или усиленное пищевое поведение (Cravatt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2001 г., 98(16), 9371). Голодание вызывало повышение концентрации АЕА в лимбической доле переднего мозга крыс, но не в других областях головного мозга, что свидетельствует о том, что стимулирование биосинтеза АЕА может быть анатомически ограничено направленными путями проводимости ЦНС (Kirkham et al., Br. J. Pharmacol., 2002 г., 136, 550). Тот факт, что рост концентрации АЕА наблюдается в мозге, а не носит системный характер, позволяет предположить,что ингибирование FAAH небольшой молекулой может усилить действие АЕА и других амидов жирных кислот в тканевых областях, где происходит синтез и выделение данных сигнальных молекул при данном патофизиологическом состоянии (Piomelli et al., 2003 г., см. выше). Помимо эффектов ингибитора FAAH в отношении АЕА и других эндоканнабиноидов ингибиторы катаболизма FAAH других липидных медиаторов могут быть использованы при некоторых других пока-2 022158 заниях по время лечения. Например, PEA продемонстрировал биологические эффекты в моделях воспаления (Holt et al., Br. J. Pharmacol., 2005 г., 146, 467-476), иммуносупрессии, анальгезии и нейропротекции на животных (Ueda et al., J. Biol. Chem., 2001 г., 276(38), 35552). Олеамид, другой субстрат FAAH,индуцирует сон (Boger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000 г., 97(10), 5044; Mendelson et al., Neuropsychopharmacology, 2001 г., 25, S36). Также было отмечено, что ингибирование FAAH воздействует на когнитивную функцию (Varvel et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 2006 г., 317(1), 251-257) и депрессию (Gobbi etal., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2005 г., 102(51), 18620-18625). Последние данные подтверждают два дополнительных показания для применения FAAH, что свидетельствует о том, что рецепторы, активируемые субстратом FAAH, играют большую роль в энергетическом обмене, а также в гомеостазе костной ткани (Overton et al., Br. J. Pharmacol., 2008 г., 153, доп.1,S76-81; и Plutzky et al., Diab. Vase. Dis. Res., 2007 г., 4, доп. 3, S12-4). Было продемонстрировано, что один из ранее указанных липидных сигнальных амидов жирных кислот - ОЕА, который катаболизируетFAAH, является одним из наиболее активных агонистов рецептора GPCR 119 (GPR119), для которого недавно идентифицировали лиганды (также называемого рецептором глюкозозависимого инсулинотропного пептида). Данный рецептор находится преимущественно в поджелудочной железе человека. Его активация улучшает гомеостаз глюкозы посредством глюкозозависимого высвобождения инсулина бетаклетками поджелудочной железы. Агонисты GPR119 могут подавлять колебания уровня глюкозы при ее приеме во время орального глюкозотолерантного теста, а ОЕА продемонстрировал независимое регулирование потребления пищи и повышения массы тела при введении грызунам, что свидетельствует о возможном преимуществе его использования при нарушениях энергетического обмена, таких как инсулинорезистентность и диабет. Субстрат FAAH PEA является агонистом PPAR (-рецептора, активируемого пролифератором пероксисом). Данные, полученные в процессе изучения маркеров-имитаторов во время исследований организма человека с использованием фенофибрата в качестве агониста PPAR, подтверждают предположение о том, что агонизм PPAR обладает потенциалом вызывать координированный отклик PPAR. Он позволяет улучшать состояние при дислипидемии, подавлять воспаление и ограничивать развитие атеросклероза у пациентов с метаболическим синдромом или диабетом типа 2. Анандамид является агонистом рецептора PPAR. Лечение анандамидом индуцирует дифференциацию клеток 3T3L1 в адипоциты, а также накопление капель триглицеридов и выработку адипонектина (Bouaboula et al.,Е. J. Pharmacol., 2005 г., 517, 174-181). Лечение низкими дозами каннабиноидов показало снижение степени развития атеросклероза у мышей - это дополнительно позволяет предположить терапевтический эффект ингибирования FAAH при дислипидемии, стеатозе печени, стеатогепатите, ожирении и метаболическом синдроме (Steffens et al., Nature, 2005 г., 434, 782-6). Одним из наиболее распространенных дегенеративных заболеваний является остеопороз. Он характеризуется сниженной минеральной плотностью костной ткани (МПКТ) и повышенным риском переломов костей. У мышей, не имеющих рецептора СВ 2, наблюдается выраженная ускоренная потеря трабекулярной и увеличение объема кортикальной костной ткани, зависящей от возраста. Селективный СВ 2 агонист повышает количество и активность остеобластов в эндокортикальной зоне, а также тормозит остеокластогенез в трабекулярной костной ткани и снижает потерю костной массы, вызванную овариэктомией (Ofek et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2006 г., 103, 696-701). МПКТ в значительной степени обусловлена генетическими факторами, хотя генетические факторы, влияющие на патогенез остеопороза у людей, по большей части неизвестны. О связи генетических факторов с МПКТ у людей свидетельствуют результаты генетических исследований, в которых была выявлена значительная взаимосвязь отдельных полиморфизмов и гаплотипов, охватывающая ген CNR2 человеческой хромосомы 1p36, что демонстрирует роль периферического рецептора CB2 в этиологии остеопороза (Karsak et al., Hum. Mol.Genet, 2005 г., 14, 3389-96). Таким образом, ингибиторы FAAH с небольшими молекулами должны быть полезными в лечении болей различной этиологии, тревоги, рассеянного склероза и других двигательных нарушений, тошноты/рвоты, расстройств пищевого поведения, эпилепсии, глаукомы, воспалительного процесса, иммуносупрессии, нейропротекции, депрессии, коррекции когнитивной деятельности и нарушений сна. Также они могут иметь меньше побочных эффектов в сравнении с экзогенными каннабиноидами. В различных публикациях сообщается о ряде гетероарилзамещенных производных мочевины. Некоторые соединения пиперазинила и пиперидинила в качестве модуляторов активности FAAH описаны в международной заявке на патентWO 2006/074025, международной заявке на патентPCT/US 2009/065757, международной заявке на патентPCT/US 2009/065752, заявке на патент СШАUS 2009/0062294 и предварительной заявке на патент США 61/263477. Некоторые производные пиперазин-1-карбоксамида и пиперидин-1-карбоксамида описаны в международной заявке на патентWO 2008/023720. Некоторые арилоксобутилпиперидины, арилоксобутилпирролидины и арилоксобутилпиперазины описаны в международной заявке на патентWO 2001/005763. Информация о некоторых производных пиперидина представлена в международной заявке на патентWO 99/50247. Информация о некоторых производных пиперазина представлена в международной заявке на патентWO 99/42107. Некоторые N-аралкилпиперазины описаны в международной заявке на патентWO 98/37077. Некото-3 022158 рые арилзамещенные гетероциклические производные мочевины описаны в предварительной заявке на патент США 61/184606. Тем не менее существует потребность в эффективных модуляторах активности FAAH с соответствующими фармацевтическими свойствами. Особенности и преимущества настоящего изобретения очевидны специалистам в данной области. На основании содержания настоящего документа, включая краткое описание изобретения, подробное описание изобретения, предпосылки создания изобретения, примеры и формулу изобретения, специалист в данной области сможет внести модификации и изменения в различные условия и способы применения,описанные в настоящем документе. Публикации, указанные в настоящем документе, полностью включены в настоящий документ путем ссылки. Краткое описание изобретения В настоящем документе описан (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и его фармацевтически приемлемые соли, у которых была обнаружена FAAH-модулирующая активность. Настоящее изобретение относится к общему и предпочтительному вариантам осуществления, определяемым соответственно независимыми и зависимыми пунктами формулы изобретения, которые приложены к настоящему документу и включены в него путем ссылки. В настоящем изобретении указаны экспериментальные данные, которые демонстрируют, что химические структурные элементы настоящего изобретения показывают более высокие значения IC50 для ингибирования фермента CYP2D6 относительно сравниваемого соединения. Кроме того, в тесте первичного наблюдения (тест Ирвина) на крысах (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5 илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты продемонстрировал преимущества в виде улучшенных характеристик и сниженных побочных эффектов на физиологические функции при введении соединения относительно сравниваемого соединения. Ингибирующая активность (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты IC50 при ингибировании фермента CYP2D6 улучшена в сравнении с ранее описанным соединением пиперазинилмочевины, пиридин-3-иламидом 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (см. заявку РСТWO 2006/074025, пример 150), которое в настоящем документе используется как сравниваемое соединение. (4-Хлорпиридин-3 ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты продемонстрировал значение IC50, которое в 7,5-5,5 раз превышает значение для сравниваемого соединения при использовании в качестве субстратов буфуралола или декстрометорфана соответственно. Более того, в тесте первичного наблюдения (тест Ирвина) на крысах химические структурные элементы настоящего изобретения показывают наличие непредвиденных свойств относительно сравниваемого соединения. В частности, сравниваемое соединение пиридин-3-иламид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты повысило реактивность на прикосновение у всех подопытных крыс при дозировке 10 мг/кг, тогда как (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в той же дозировке стимулировал реактивность только у одной из четырех подопытных крыс. Сравниваемое соединение вызывало седативный эффект через 15-120 мин и аномальную походку (покачивание) через 15 мин после введения у всех подопытных крыс при дозировке 60 мг/кг, тогда как подобных эффектов при введении (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты у подопытных крыс не наблюдали. Также согласно результатам наблюдений при дозировке 60 мг/кг сравниваемое соединение вызывало снижение мышечного тонуса у всех крыс через 60-120 мин после введения, тогда как(4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты повышал тонус брюшных мышц только у одной из четырех подопытных крыс. И, наконец, при дозировке 60 мг/кг сравниваемое соединение вызывало гипотермию у подопытных крыс через 15-60 мин и через 180 мин, тогда как данный эффект не наблюдали у крыс, которым вводили соединение, составляющее предмет настоящего изобретения. В одном общем аспекте настоящее изобретение относится к соединению (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. В конкретном варианте осуществления соединение представляет собой хлористо-водородную соль (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтически приемлемым пролекарствам (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и фармацевтически приемлемым метаболитам (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. В дополнительном общем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, каждая из которых включает: (а) терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного из следующих соединений: (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтически приемлемые соли (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтически приемлемые пролекарства (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоно-4 022158 вой кислоты и фармацевтически приемлемые метаболиты (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и (b) фармацевтически приемлемый эксципиент. В другом аспекте варианты осуществления настоящего изобретения могут быть использованы в качестве модуляторов активности FAAH. Таким образом, настоящее изобретение относится к способу модуляции активности FAAH, включающему воздействие на FAAH терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из следующих соединений: (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтически приемлемые соли (4 хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты,фармацевтически приемлемые пролекарства (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и фармацевтически активные метаболиты (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. В другом общем аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения субъекта, у которого продиагностировано или имеется заболевание, расстройство или медицинское состояние, опосредованное активностью гидролазы амидов жирных кислот (FAAH), включающему введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества по меньшей мере одного вещества, выбранного из (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и его фармацевтически приемлемых солей, фармацевтически активных пролекарств и фармацевтически активных метаболитов. В предпочтительных вариантах осуществления способа, обладающего признаками изобретения, заболевание, расстройство или медицинское состояние выбрано из следующего списка: тревога, депрессия, боль, нарушение сна, расстройство пищевого поведения, воспалительный процесс, рассеянный склероз и другие двигательные нарушения, синдром истощения при ВИЧинфекции, закрытые травмы черепа, инсульт, нарушение способности к обучению и нарушение памяти,болезнь Альцгеймера, эпилепсия, синдром Туретта, болезнь Ниманна-Пика, болезнь Паркинсона, хорея Хантингтона, неврит зрительного нерва, аутоиммунный увеит, симптомы наркотической или алкогольной абстиненции, тошнота, рвота, сексуальная дисфункция, тревога, посттравматические стрессовые расстройства, спазм сосудов головного мозга, глаукома, синдром раздраженного кишечника, воспалительное заболевание кишечника, иммуносупрессия, кожный зуд, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь, паралитическая непроходимость кишечника, секреторная диарея, язвенная болезнь желудка, ревматоидный артрит, нежелательная беременность, гипертензия, рак, гепатит, аллергия дыхательных путей, аутоиммунный диабет, хронический прурит, нейровоспаление, диабет, метаболический синдром,остеопороз, дислипидемия, стеатоз печени и стеатогепатит. В другом общем аспекте настоящее изобретение относится к способу синтеза (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты с использованием 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбальдегида и пиперазина в одностадийной реакции гидрогенизации. Дополнительные варианты осуществления, характеристики и преимущества изобретения будут очевидны из следующего подробного описания и практического осуществления изобретения. Подробное описание изобретения и его предпочтительных вариантов осуществления Настоящее изобретение может быть более полно оценено из нижеследующего описания, включающего определения терминов и заключительные примеры. Для краткости цитируемые публикации включены в настоящее описание путем ссылки. Термины включающий, содержащий, состоящий из используются в настоящем документе в их открытом, неограниченном значении. Структурная формула, приведенная в настоящем документе, также представляет как немеченые, так и меченные изотопами формы соответствующих соединений. Меченые изотопами соединения имеют структуры, соответствующие представленным в настоящей заявке формулам, за исключением того, что один или более атомов в них заменены атомом, имеющим определенную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть внедрены в соединения, составляющие предмет настоящего изобретения, включают в себя изотопы водорода, углерода, азота, кислорода или фтора, такие как 2 Н, 3 Н, 11 С, 13 С, 14 С, 15N, 18O, 17O и 18F соответственно. Такие меченые изотопами соединения можно использовать в исследованиях метаболизма (предпочтительно с 14 С), исследованиях кинетики реакций (например, с 2 Н или 3 Н), методиках выявления или визуализации (таких как позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ, включая количественные анализы распределения лекарственного средства или ткани-субстрата, или в радиационной терапии пациентов. В частности, соединение, меченное 18F или 11 С, может быть предпочтительно для исследований способами ПЭТ или ОФЭКТ. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (то есть 2 Н), может дать некоторые лечебные преимущества вследствие большей метаболической стабильности соединений, например большего периода полувыведения in vivo или сниженной необходимой дозировки. Соединения настоящего изобретения, меченные изотопами, и их пролекарства могут быть, по существу, приготовлены путем проведения процедур согласно схемам или примерам и способам приготовления, описанным ниже, путем замены реагента, не содержащего изотопно-меченых атомов, на доступный реагент с изотопно-мечеными атомами. В одном общем варианте осуществления настоящее изобретение относится к (4-хлорпиридин-3 ил)амиду 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, а также к фармацевтически приемлемым солям, фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически активным метаболитам данного соединения. В другом общем варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, каждая из которых содержит терапевтически эффективное количество FAAH-модулирующего вещества, выбранного из (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2 дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, фармацевтически приемлемых солей, фармацевтически приемлемых пролекарств и фармацевтически активных метаболитов данного соединения. Настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Термин фармацевтически приемлемая соль означает соль свободной кислоты или основания соединения (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, которая является не токсичной, биологически переносимой или иным образом биологически допустимой для введения субъекту (см., по существу, публикацию Paulekuhn G.S. et al., Trends in Active PharmaceuticalIngredient Salt Selection based on Analysis of the Orange Book Database, J. Med. Chem., 2007 г., 50: 6665-72,Berge S.M. et al., Pharmaceutical Salts, J Pharm Sci., 1977 г., 66:1-19, и Handbook of Pharmaceutical Salts,Properties, Selection, and Use, под ред. Stahl и Wermuth, Wiley-VCH and VHCA, г. Цюрих, 2002 г.). Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые соли, которые обладают фармакологической эффективностью, не обладают чрезмерной токсичностью и при контакте с тканями пациента не вызывают раздражения или аллергических реакций. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают в себя сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, йодиды, ацетаты, пропионаты, деканоаты, каприлаты, акрилаты, формиаты, изобутираты, капроаты, гептаноаты, пропиолаты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себакаты, фумараты, малеаты, бутин-1,4-диоаты, гексин-1,6-диоаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, фталаты,сульфонаты, ксиленсульфонаты, фенилацетаты, фенилпропионаты, фенилбутираты, цитраты, лактаты, гидроксибутираты, гликоляты, тартраты, метансульфонаты, пропансульфонаты, нафталин-1-сульфонаты,нафталин-2-сульфонаты и манделаты. В некоторых вариантах осуществления соединение (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты представляет собой хлористо-водородную соль. Соединение (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты может в достаточном количестве содержать основную группу и соответственно может вступать в реакцию с рядом неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемой соли. Соединение, составляющее предмет настоящего изобретения, содержит по меньшей мере одно азотистое основание. Таким образом, требуемую фармацевтически приемлемую соль можно получить любым соответствующим способом, доступным в данной области, например путем обработки свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, азотная кислота, борная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или органической кислотой, такой как уксусная кислота, фенилуксусная кислота, пропионовая кислота, стеариновая кислота, молочная кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, изетионовая кислота, янтарная кислота, валериановая кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, олеиновая кислота, пальмитиновая кислота, лауриновая кислота, пиранозидиловая кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновя кислота, альфа-гидроксикислота, такая как миндальная кислота, лимонная кислота или винная кислота; аминокислотой, такой как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота; ароматической кислотой, такой как бензойная кислота, 2-ацетоксибензойная кислота, нафтойная кислота или коричная кислота; сульфоновой кислотой, такой как лаурилсульфоновая кислота, птолуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота или этансульфоновая кислота; или любой другой кислотой или смесью кислот, считающейся эквивалентом или допустимым заместителем с точки зрения обычного специалиста в данной области. Настоящее изобретение также относится к фармацевтически приемлемым пролекарствам (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Термин пролекарство означает предшественник определенного соединения, который после назначения субъекту дает соединение in vivo путем использования химического или физиологического процесса,такого как сольволиз или ферментативное расщепление, или при физиологических условиях (например,пролекарство, приведенное к определенному физиологическому значению рН, превращается в соединение примера 1. Фармацевтически приемлемое пролекарство означает пролекарство, которое является нетоксичным, биологически переносимым и иным образом биологически допустимым для введения субъекту. Типичные процедуры отбора и приготовления соответствующих производных пролекарственных форм описаны (см., например, в работе Design of Prodrugs, под ред. Н. Bundgaard, Elsevier, 1985 г.). Примеры пролекарств включают в себя соединения, имеющие аминокислотный остаток или полипептидную цепь, состоящую из двух или более (например, двух, трех или четырех) аминокислотных остатков, ковалентно соединенных через амидную или эфирную связь со свободной аминогруппой (4 хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Примеры аминокислотных остатков включают в себя двадцать существующих в природе аминокислот,которые обычно обозначаются тремя буквами, а также 4-гидроксипролин, гидроксилизин, демозин, изодемозин, 3-метилгистидин, норвалин, бета-аланин, гамма-аминомасляная кислота, цитруллин гомоцистеин, гомосерин, орнитин и метионинсульфон. Дополнительные типы пролекарств могут быть изготовлены, например, путем получения производных свободных аминов в виде амидов, сульфонамидов или фосфонамидов. Настоящее изобретение также относится к фармацевтически активным метаболитам (4 хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Термин фармацевтически активный метаболит означает фармакологически активный продукт метаболизма (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты или его соли в организме. Пролекарства и активные метаболиты соединения могут быть определены обычными способами, известными или доступными специалистам в данной области (см., например,Bertolini et al., J. Med. Chem. 1997 г., 40, 2011-2016; Shan et al., J. Pharm. Sci. 1997 г., 86 (7), 765-767; Bagshawe, Drug Dev. Res. 1995 г., 34, 220-230; Bodor, Adv. Drug Res. 1984 г., 13, 224-331; Bundgaard, Design ofProdrugs (Elsevier Press, 1985 г.); и Larsen, Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (под ред. Krogsgaard-Larsen et al., Harwood Academic Publishers, 1991 г Соединение (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, а также его фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически активные метаболиты (в совокупности именуемые активными веществами), составляющие предмет настоящего изобретения, в способах, составляющих предмет настоящего изобретения, используют в качестве ингибиторов FAAH. Термин ингибиторы обозначает соединения,которые снижают, предупреждают, деактивируют экспрессию, десенсибилизируют или выполняют понижающую регуляцию активности FAAH. Активные вещества можно применять в способах, обладающих признаками изобретения, для лечения медицинских состояний, заболеваний или расстройств, опосредованных ингибированием или модуляцией FAAH, описанных в настоящем документе. Таким образом, активные вещества в соответствии с настоящим изобретением можно использовать как анальгетики,антидепрессанты, корректоры нарушения когнитивных функций, нейропротекторы, седативные, стимулирующие/подавляющие аппетит вещества или контрацептивы. Примеры патологических состояний, заболеваний и расстройств, опосредованных активностьюFAAH, включают в себя тревогу, депрессию, боль, нарушение сна, расстройства пищевого поведения,воспалительный процесс, рассеянный склероз и другие двигательные нарушения, синдром истощения при ВИЧ-инфекции, закрытые травмы черепа, инсульт, нарушение способности к обучению и нарушение памяти, болезнь Альцгеймера, эпилепсию, синдром Туретта, эпилепсию, болезнь Ниманна-Пика, болезнь Паркинсона, хорею Хантингтона, неврит зрительного нерва, аутоиммунный увеит, симптомы наркотической или алкогольной абстиненции, тошноту, рвоту, сексуальную дисфункцию, посттравматическое стрессовое расстройство, спазм сосудов головного мозга, диабет, метаболический синдром, остеоартрит и остеопороз. Таким образом, активные вещества можно применять для лечения субъектов, имеющих такой диагноз или заболевание, расстройство или патологическое состояние. Используемый в настоящем документе термин лечить или лечение относится к введению вещества или композиции, составляющих предмет настоящего изобретения, субъекту для получения желательного терапевтического эффекта путем ингибирования активности FAAH. Лечение включает в себя остановку развития, улучшение, облегчение,замедление развития, снижение тяжести, уменьшение частоты проявления или предотвращение заболевания, расстройства, патологического состояния или одного или более симптомов такого заболевания,расстройства или патологического состояния, опосредованного модуляцией активности FAAH. Термин субъект относится к млекопитающему пациенту, нуждающемуся в таком лечении, например, к человеку. Модуляторы включают в себя одновременно и ингибиторы, и активаторы, при этом термин ингибиторы относится к соединениям, которые снижают, блокируют, деактивируют, десенсибилизируют или понижают уровень экспрессии или активность FAAH, а активаторы представляют собой соединения, которые увеличивают, активируют, облегчают, сенсибилизируют или повышают уровень экспрессии или активность FAAH. Соответственно настоящее изобретение относится к способам применения описанных в настоящем документе активных веществ для лечения субъектов, имеющих диагноз или заболевание, расстройство или патологическое состояние, опосредованное активностью FAAH, например тревогу, боль, нарушения сна, расстройства пищевого поведения, воспалительный процесс, двигательные нарушения (например,-7 022158 рассеянный склероз), глюкозный и липидный метаболизм (например, диабет), а также гомеостаз костной ткани (например, остеопороз). Симптомы или болезненные состояния должны быть включены в понятие медицинские состояния,расстройства или заболевания. Например, боль может быть связана с различными заболеваниями, расстройствами или патологическими состояниями и может иметь различную этиологию. Типичные виды боли, которые можно лечить FAAH-модулирующим веществом (а в одном примере, приведенном в настоящем документе, - FAAH-ингибирующим веществом) в соответствии с принципами настоящего изобретения, включают в себя раковую боль, послеоперационную боль, боль в ЖКТ, боль при повреждении спинного мозга, висцеральную гиперальгезию, таламическую боль, головную боль (включая головную боль при стрессе и мигрени), поясничную боль, боль в шее, мышечно-скелетную боль, периферическую нейропатическую боль, центральную нейропатическую боль, боль, связанную с нейродегенеративными заболеваниями, и менструальную боль. Синдром истощения при ВИЧ-инфекции включает в себя сопутствующие симптомы, такие как потеря аппетита и тошнота. Болезнь Паркинсона включает в себя, например, дискинезию, вызванную терапией леводопой. Лечение рассеянного склероза может включать в себя лечение симптомов, таких как спастичность, нейрогенная боль, центральная боль или дисфункция мочевого пузыря. Симптомы наркотической абстиненции могу быть вызваны, например, зависимостью от опиатов или никотина. Тошнота или рвота могут быть вызваны химиотерапией, послеоперационным состоянием или приемом опиоидных препаратов. Лечение сексуальной дисфункции может включать в себя повышение либидо или задержку эякуляции. Лечение рака может включать в себя лечение глиомы. Нарушения сна включают в себя, например, синдром апноэ во сне, бессонницу и нарушения, требующие лечения веществом, обладающим седативным или наркоподобным действием. Расстройства пищевого поведения включают в себя, например, анорексию или потерю аппетита, связанную с таким заболеванием, как рак или ВИЧ-инфекция/СПИД. В способах лечения в соответствии с настоящим изобретением субъекту, у которого продиагностировано или имеется заболевание, расстройство или патологическое состояние, вводят эффективное количество по меньшей мере одного активного вещества в соответствии с настоящим изобретением. Термин терапевтически эффективное количество или эффективное количество означает количество или дозуFAAH-модулирующего вещества, по существу, достаточную для проявления требуемого терапевтического эффекта у пациентов, нуждающихся в лечении заболевания, расстройства или патологического состояния, опосредованного активностью FAAH. Эффективные количества или дозировки активных веществ, составляющих предмет настоящего изобретения, могут быть определены стандартными способами, например, моделированием, исследованиями с повышением дозы или клиническими испытаниями с учетом стандартных факторов, таких как способ или путь введения или доставки лекарственного средства, фармакокинетика вещества, степень тяжести и характер течения заболевания, расстройства или патологического состояния, предшествующий или текущий курс лечения субъекта, состояние здоровья и реакция субъекта на лекарственные средства, а также мнение лечащего врача. Примерная доза может находиться в диапазоне от приблизительно 0,0001 до приблизительно 200 мг активного вещества на кг веса тела субъекта в сутки, предпочтительно от приблизительно 0,001 до 100 мг/кг/сут., или от приблизительно 0,01 до 35 мг/кг/сут., или от приблизительно 0,1 до 10 мг/кг/сут. в однократной дозировке или при дробном введении (например, два, три или четыре раза в сутки). Для человека с массой тела 70 кг типичный интервал допустимой дозировки составляет от приблизительно 0,05 до приблизительно 7 г/сут. или от приблизительно 0,2 до приблизительно 5 г/сут. После облегчения симптомов заболевания, расстройства или патологического состояния субъекта дозировка может быть скорректирована для поддерживающего лечения. Например, дозировка, частота введения или оба аспекта сразу могут быть снижены в зависимости от симптомов до уровня, при котором поддерживается желательный терапевтический эффект от приема препарата. Разумеется, если проявления симптомов снижены до приемлемого уровня,лечение можно прекратить. Однако при наличии рецидивов симптомов пациенту может потребоваться долговременное периодическое лечение. Кроме того, активные вещества, составляющие предмет настоящего изобретения, можно применять в комбинации с дополнительными активными компонентами для лечения перечисленных выше состояний. Дополнительные активные компоненты можно применять по отдельности в виде веществ, назначаемых для приема совместно с активным веществом (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты, или могут входить в состав такого вещества в фармацевтической композиции, составляющей предмет настоящего изобретения. В одном примере осуществления дополнительные активные компоненты представляют собой компоненты, у которых известна или выявлена эффективность лечения патологических состояний, расстройств или заболеваний,опосредованных активностью FAAH, такие как другой модулятор FAAH или соединение с активностью в отношении другой мишени, связанной с конкретным патологическим состоянием, расстройством или заболеванием. Такую комбинацию можно использовать для повышения эффективности (например, путем включения в комбинацию соединения, усиливающего действие или эффективность активного вещества в соответствии с принципами настоящего изобретения), снижения одного или более побочных эффектов или требуемой дозы активного вещества в соответствии с принципами настоящего изобретения. В одном типичном варианте осуществления композиция в соответствии с принципами настоящего изобретения может содержать один или более дополнительных активных компонентов, выбранных из опиоидов, нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (НПВС) (например, ибупрофена, ингибиторов циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2) и напроксен), габапентина, прегабалина, трамадола, ацетаминофена и аспирина. Активные вещества, составляющие предмет настоящего изобретения, используют самостоятельно или в комбинации с одним или более дополнительными активными компонентами для приготовления фармацевтических композиций, составляющих предмет настоящего изобретения. Фармацевтическая композиция, составляющая предмет настоящего изобретения, включает: (а) эффективное количество по меньшей мере одного активного вещества в соответствии с принципами настоящего изобретения и (b) фармацевтически приемлемый эксципиент. Термин фармацевтически приемлемый эксципиент означает нетоксичное биологически переносимое и по остальным параметрам биологически допустимое для введения субъекту вещество, такое как инертное вещество, добавляемое в фармакологическую композицию или иным образом используемое в качестве средства доставки, носителя или разбавителя для облегчения введения вещества и совместимое с ним (некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты представлены в справочнике Handbook ofPharmaceutical Excipients, 6-е изд., Pharmaceutical Press, 2009 г.). Примеры эксципиентов включают в себя карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и типы крахмалов, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли. Формы доставки фармацевтических композиций, содержащих одну или более единиц дозирования активных веществ, могут быть приготовлены с использованием соответствующих фармацевтических эксципиентов и способов приготовления, известных в настоящее время или доступных специалистам в данной области в будущем. Композиции могут быть введены с применением способов, обладающих признаками изобретения, любым допустимым путем, например, перорально, парентерально, ректально, топическим способом, путем нанесения на глаз или путем ингаляции. Препарат может иметь форму таблеток, капсул, саше, драже, порошков, гранул, пастилок, порошков для восстановления, жидких препаратов или суппозиториев. Предпочтительно композиции приготовлены для внутривенного вливания, топического применения или перорального введения. Для перорального введения активные вещества, составляющие предмет настоящего изобретения,могут быть приготовлены в форме таблеток или капсул, а также в форме раствора, эмульсии или суспензии. Для получения пероральных композиций активные вещества могут быть приготовлены для получения дозировки, например, от приблизительно 5 мг до 5 г в сутки или от приблизительно 50 мг до 5 г в сутки в виде единичных или разделенных доз. Например, общую суточную дозу приблизительно от 5 мг до 5 г в сутки можно вводить один, два, три или четыре раза в сутки. Таблетки для перорального введения могут включать в себя активный(-ые) компонент(-ы), смешанный(-ые) с совместимыми фармацевтически приемлемыми эксципиентами, такими как разбавители, вещества для улучшения распадаемости таблеток, связывающие вещества, смазывающие вещества, подсластители, вкусовые добавки, красители и консерванты. Соответствующие инертные наполнители включают в себя карбонаты натрия и кальция, фосфаты натрия и кальция, лактозу, крахмал, сахар, глюкозу, метилцеллюлозу, стеарат магния, маннитол, сорбитол и т.п. Примеры жидких эксципиентов для перорального введения включают в себя этанол, глицерин, воду и т.п. Примеры веществ для улучшения распадаемости таблеток представляют собой крахмал, поливинилпирролидон (ПВП), натрия крахмал гликолят, микрокристаллическую целлюлозу и альгиновую кислоту. Связывающие вещества могут включать в себя крахмал и желатин. Смазывающим веществом, при его наличии, может быть стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. При необходимости таблетки могут быть покрыты таким материалом, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат для замедления всасывания в желудочнокишечном тракте, или могут иметь энтеросолюбильную оболочку. Капсулы для перорального применения могут быть твердыми и мягкими желатиновыми. Для приготовления твердых желатиновых капсул активные компоненты могут быть смешаны с твердым, полутвердым или жидким разбавителем. Мягкие желатиновые капсулы могут быть приготовлены путем смешивания активного компонента с водой, маслом, таким как арахисовое или оливковое масло, вазелиновым маслом, смесью моно- и диглицеридов короткоцепочечных жирных кислот, полиэтиленгликолем 400 или пропиленгликолем. Жидкости для перорального введения могут быть представлены в форме суспензий, растворов,эмульсий или сиропов, либо они могут быть лиофилизованы и поставляться в сухом виде для восстановления водой или иным соответствующим носителем перед использованием. Такие жидкие композиции необязательно могут содержать фармацевтически приемлемые эксципиенты, например суспендирующие вещества (например, сорбит, метилцеллюлозу, альгинат натрия, желатин, гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гель алюминия стеарата и т.п.); неводные носители, например масло (например,миндальное масло или фракционированное кокосовое масло), полипропиленгликоль, этиловый спирт или воду; консерванты (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоат или сорбиновую кислоту); сма-9 022158 чивающие вещества, например лецитин; и ароматизаторы или красители, при необходимости. Активные вещества, составляющие предмет настоящего изобретения, можно также вводить пациенту не пероральными путями. Например, композиции могут быть приготовлены в виде суппозиториев для ректального применения. В случае композиций для парентерального введения, включая внутривенное, внутримышечное, внутрибрюшинное или подкожное введение вещества, составляющего предмет настоящего изобретения, могут быть приготовлены в форме стерильных водных растворов или суспензий с добавлением соответствующих растворов до получения требуемых значений рН и изотоничности,либо в виде парентерально приемлемого масла. Соответствующие жидкие носители включают в себя раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Подобные лекарственные формы могут быть приготовлены в однодозовой форме, такой как ампула или одноразовое устройство для инъекций, в многодозовой форме, такой как флаконы, из которых может быть отобрано требуемое количество препарата,либо в твердой форме или в форме первичного концентрата, который может быть использован для приготовления состава для инъекций. Типичные дозы для инфузии находятся в диапазоне от приблизительно 1 до 1000 мкг/кг/мин вещества в виде смеси с фармацевтическим носителем в течение промежутка времени от нескольких минут до нескольких дней. Для топического применения вещества могут быть смешаны с фармацевтическим носителем в концентрации от приблизительно 0,1% до приблизительно 10% лекарственного средства в носителе. Другой способ введения веществ, составляющих предмет настоящего изобретения, может использовать пластыри для трансдермальной доставки препарата. Альтернативно в способах, составляющих предмет настоящего изобретения, активные вещества могут быть введены путем ингаляции, через нос или рот, например, в виде спрея, содержащего также соответствующий носитель. Примеры активных веществ, которые можно применять в способах, составляющих предмет настоящего изобретения, будут описаны со ссылкой на приведенные ниже типичные схемы синтеза для общего получения и следующие за ними конкретные примеры. Описанные выше соединения могут быть изготовлены согласно процессам, принятым в данной области и (или) описанным в нижеследующих схемах и примерах. Реакции по некоторым схемам могут протекать с использованием защиты или без нее, в зависимости от ситуации. Для этих целей можно использовать соответствующие защитные группы (см., например, описанные в публикациях ProtectiveGroups in Organic Chemistry под ред. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973 г.; и T.W. Greene и P.G.M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3-е изд., John WileySons, 1999 г.). Введенные защитные группы могут быть впоследствии удалены на любой удобной для этого стадии известными специалистам способами. Альтернативно может быть необходимо ввести вместо желаемого заместителя соответствующую группу, которая может быть проведена через схему реакции и затем заменена при необходимости на желаемый заместитель. Такие соединения, предшественники соединений или пролекарства также входят в объем настоящего изобретения. Для иллюстрации настоящего изобретения приведены следующие примеры. Приведенные примеры не ограничивают настоящее изобретение. Они предназначены только для предложения способа практического осуществления настоящего изобретения. Специалисты в данной области могут найти и другие способы осуществления настоящего изобретения, очевидные для них. Однако эти способы будут считаться подпадающими под действие настоящего изобретения. Ниже будет описан синтез (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты со ссылкой на типичные схемы синтеза и конкретные процедуры приготовления. Как будет очевидно специалистам в данной области, для получения различных соединений, описанных в настоящем документе, исходные материалы могут быть выбраны соответствующим образом так, чтобы желаемые заместители можно было провести через схему реакции с или без защиты,в зависимости от ситуации, и получить желаемый продукт. Альтернативно может быть необходимо или желательно ввести вместо желаемого заместителя соответствующую группу, которую можно провести через схему реакции и затем заменить при необходимости на требуемый заместитель. Схема А Для схемы А промежуточный продукт 1 получили путем взаимодействия 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбальдегида с пиперазином в условиях гидрогенизации. Реакцию можно проводить с использованием Pd(OH)2, Pt или Pd в качестве катализатора, растворенного в таких растворителях, как МеОН, EtOH или АсОН. Реакция может протекать при температуре от 20 до 80 С. Приемлемое давление Н 2 может варьироваться от 0,1 до 6 МПа (от 1 до 60 бар). Соотношение 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5 карбальдегида и пиперазина, как правило, один к шести эквивалентам. Реакцию можно проводить в уст- 10022158 ройстве гидрогенизации периодического или непрерывного действия. Схема В Для схемы В (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1 карбоновой кислоты получили из 3-амино-4-хлорпиридина и промежуточного продукта 1. 3-Амино-4 хлорпиридин обработали фенилхлорформиатом и пиридином в среде растворителя, такого как толуол, с получением соединения промежуточного продукта 2. Промежуточный продукт 2 взаимодействовал непосредственно с промежуточным продуктом 1 с получением (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Химия При получении (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин 1-карбоновой кислоты и в сравнительном примере ниже использовали следующие общие экспериментальные и аналитические способы. Если не указано иное, реакционные смеси перемешивали в азотной атмосфере. В случаях когда растворы или смеси являются концентрированными, их, как правило, концентрировали в ротационном испарителе при пониженном давлении. Если не указано иное, масс-спектры получали на анализаторе Agilent серии 1100 MSD при электрораспылительной ионизации (ЭРИ) в положительном режиме. ЯМР-спектры получали на спектрометре Bruker модели DPX400 (400 МГц), DPX500 (500 МГц) илиDRX600 (600 МГц). Формат данных 1 Н ЯМР представлен ниже: химический сдвиг в м.д. в сторону слабого поля относительно сигнала резонанса эталонного соединения тетраметилсилана (мультиплетность,константа взаимодействия J в Гц, интеграция). Химические названия были составлены с помощью ChemDraw Ultra 6.0.2 (CambridgeSoft Corp., г. Кембридж, штат Массачусетс) или ACD/Name версии 9 (Advanced Chemistry Development, г. Торонто,провинция Онтарио, Канада). Промежуточный продукт 1. 1-(2,2-Дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин В колбу Эрленмейера емкостью 2 л помещали пиперазин (185,1 г, 2,15 моль), 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбальдегид (100,0 г, 0,537 моль) и метанол (1,08 л). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч, затем дважды пропускали через H-Cube MidiTM (ThalesNano, г. Будапешт, Венгрия) с новым картриджем MidiCart 20% Pd(OH)2/C при следующих параметрах: 70 С, давление 1 атм, скорость потока 6 мл/мин, избыток H2 10%. Согласно анализу ВЭЖХ исходный реагент альдегид был на 90% израсходован после первого прохода и полностью израсходован после второго прохода. Метанол выпаривали, добавляли толуол (1,20 л) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученную белую суспензию фильтровали, а твердое вещество промывали толуолом(200 мл). Объединенный фильтрат промывали водой (2 раза по 300 мл), высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением продукта в виде бесцветного масла. Масло растворяли в гептане(100 мл) и выдерживали продукт при комнатной температуре для кристаллизации. Во время последующих экспериментов по синтезу для ускорения процесса кристаллизации вносили затравочные кристаллы. Суспензию охлаждали до 0 С, фильтровали, и твердое вещество высушивали в вакуумной печи при 50 С в течение 24 ч с получением заявляемого соединения в виде твердого вещества белого цвета (108,0 г,78%). Гептановый фильтрат концентрировали до объема приблизительно 20 мл, после чего вносили затравочные кристаллы продукта. Затем раствор перемешивали в течение ночи. После фильтрации и высушивания (6,7 г, 5%) получили вторую партию заявляемого соединения в виде твердого вещества белого цвета. Объединенный выход составил (115 г, 83%). МС (ЭРИ+): рассчитано для C12H14F2N2O2 m/z 256,1, полученное значение: 256,9 (М+Н)+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) : 7,11 (д, J=0,9 Гц, 1 Н), 6,99 (дд,J=9,0, 0,9 Гц, 1 Н), 6,95 (д, J=9,0 Гц, 1 Н), 3,45 (с, 2 Н), 2,92-2,83 (м, 4 Н), 2,39 (с, 4 Н); 13 С ЯМР (101 МГц,CDCl3) : 143,89, 142,72, 134,68, 131,65 (т, JC-F=255,3), 123,88, 110,13, 108,82, 63,10, 54,38, 46, 07. Пример 1. (4-Хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты В трехгорлую колбу Мортона емкостью 2 л, снабженную механической мешалкой, термопарой и капельной воронкой, в атмосфере азота помещали 3-амино-4-хлорпиридин (35,0 г, 272 ммоль) и толуол(740 мл). Раствор коричневого цвета охлаждали до 2 С. Одной порцией добавляли пиридин (25,3 мл, 310 ммоль), после чего в течение 30 мин по каплям добавляли фенилхлорформиат (32,6 мл, 259 ммоль). Максимальная температура содержимого колбы достигала 5 С. После перемешивания реакционной смеси при 2-5 С в течение 7 ч получили густую суспензию желтого цвета. В течение 3 мин добавляли охлажденный раствор K2CO3 (53,6 г, 388 ммоль) в воде (216 мл), при этом максимальная температура содержимого колбы достигала 6 С. Затем в течение 1 мин добавляли 1-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин (66,3 г, 259 ммоль) в виде твердого вещества. Смеси давали медленно нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 ч. Добавляли воду (200 мл), отделяли слой толуола и экстрагировали водным раствором HCl (1,8 М, 600 мл). Водный экстракт промывали толуолом (2 раза по 300 мл). В водный слой добавляли МеОН (500 мл) и охлаждали раствор до 5 С. Уровень рН доводили до 8-9 путем добавления раствора NaOH (50 вес.% приблизительно 50 мл). Скорость добавления раствора регулировали таким образом, чтобы температура содержимого колбы не превышала 17 С. Полученную суспензию перемешивали при температуре 5 С в течение 2 ч. Продукт собирали фильтрованием и промывали МеОН/Н 2 О (1:1, 70 мл). Твердое вещество высушивали в вакуумной печи при 50 С в течение 24 ч с получением заявляемого соединения в виде твердого вещества желтого/зеленого цвета (73 г, 69%). В трехгорлую колбу Мортона емкостью 1 л, оснащенную магнитной мешалкой, термопарой и обратным конденсатором, помещали неочищенный (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (98 г, 239 ммоль) и изопропилацетат (318 мл). Суспензию нагревали до 65 С, обрабатывали активированным углем (10,0 г) и перемешивали при 65 С в течение 1 ч. Затем смесь нагревали до 80 С и быстро профильтровали через тонкий целитовый фильтр. Фильтрат медленно охлаждали до комнатной температуры, после чего помещали в ледяную баню на 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием, промывали холодным iPrOAc (10 мл) и высушивали с получением (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (72 г, 73%). В трехгорлую колбу Мортона емкостью 2 л, оснащенную механической мешалкой, термопарой и обратным конденсатором, помещали сырой продукт (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (191 г, 465 ммоль) и изопропилацетат (705 мл). Суспензию нагревали до 65 С, обрабатывали активированным углем (11,2 г) и перемешивали при 65 С в течение 1 ч. Затем смесь нагревали до 75 С и быстро профильтровали. Фильтрат медленно охлаждали до комнатной температуры в течение ночи, после чего помещали в ледяную баню на 30 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием, промывали холодным iPrOAc (40 мл) и высушивали в вакуумной печи при 50 С в течение 72 ч. Получили (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде твердого вещества желтоватого цвета(161 г, 84%). МС (ЭРИ+): рассчитано для C18H17ClF2N4O3 m/z 410,1, полученное значение: 411,1 (М+Н)+. Аналитический расчет для C18H17ClF2N4O3: С, 52,63; Н, 4,17; N, 13,64. Полученное значение: С, 52,73; Н,4,15; N, 13,62; 1 Н ЯМР (600 МГц, CDCl3) : 9,36 (с, 1 Н), 8,19 (д, J=5,2 Гц, 1 Н), 7,29 (дд, J=5,3, 0,3 Гц, 1 Н),7,13 (д, J=0,9 Гц, 1 Н), 7,02-6,98 (м, 2 Н), 6,84 (с, 1 Н), 3,58-3,54 (м, 4 Н), 3,53 (с, 2 Н), 2,54-2,48 (м, 4 Н); 13 С ЯМР (151 МГц, CDCl3) : 153,49, 144,02, 143,88, 143,28, 142,98, 134,05, 133,09, 131,66 (т, JC-F=254,6 Гц),131,55, 123,89, 123,53, 110,03, 109,02, 62,28, 52,47, 44,23. Пример 1 А. бис-Гидрохлорид (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты Раствор, состоящий из (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (5,0 г, 12 ммоль) и этанола (200 мл), обрабатывали насыщенным водным раствором HCl (3,0 мл, 3 экв.). Растворитель удаляли в вакууме, добавляли этанол (100 мл), охлаждали суспензию до 0 С и профильтровали. Полученное твердое вещество белого цвета промывали холодным этанолом (25 мл) и высушивали в вакууме с получением бис-гидрохлорида (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (4,25 г, 72%). 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) : 11,61 (уш. с, 1 Н), 8,98 (с, 1 Н), 8,65 (с, 1 Н), 8,37 (д, J=5,4 Гц, 1 Н), 7,78 (д, J=1,4 Гц, 1 Н),7,69 (д, J=5,4 Гц, 1 Н), 7,52 (д, J=8,3 Гц, 1 Н), 7,46 (дд, J=8,3, 1,5 Гц, 1 Н), 4,39 (с, 2 Н), 4,28-4,12 (м, 2 Н),3,49-3,26 (м, 4 Н), 3,03 (с, 2 Н). Сравниваемое соединение. Пиридин-3-иламид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Фениловый эфир пиридин-3-илкарбаминовой кислоты. К раствору, состоящему из пиридин-3-иламина (9,49 г, 101 ммоль) и пиридина (8,77 г, 111 ммоль) в CH3CN (80 мл), при 0 С по каплям добавляли фенилхлорформиат (15,8 г, 101 ммоль). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение 2 ч. Реакцию гасили добавлением H2O (200 мл). Полученный осадок фильтровали и высушивали в вакууме для получения заявляемого соединения в виде твердого вещества желтовато-коричневого цвета (17,34 г, 80%). МС (ЭРИ+): рассчитано для C12H10N2O2 m/z 214,07, полученное значение: 215,3 (М+Н)+. 1H ЯМР (500 МГц, d6-ДМСО) : 10,46 (с, 1 Н), 8,69 (д, J=2,4 Гц, 1 Н), 8,27 (дд,J=4,7, 1,4 Гц, 1 Н), 7,93 (д, J=8,4 Гц, 1 Н), 7,47-7,41 (м, 2 Н), 7,37 (дд, J=8,4, 4,7 Гц, 1 Н), 7,31-7,22 (м, 3H). Пиридин-3-иламид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. К раствору фенилового эфира пиридин-3-илкарбаминовой кислоты (9,08 г, 42,4 ммоль) в ДМСО (84 мл) добавили 1-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин (11,4 г, 44,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, а затем обрабатывали водой (130 мл). Полученное твердое вещество отделяли фильтрацией, промывали водой (4 раза по 50 мл) и высушивали в вакууме. Твердое вещество перекристаллизовывали (EtOH-H2O) с получением пиридин-3-иламида 4-(2,2 дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (13,4 г, 84%). МС (ЭРИ+): рассчитано для C18H18F2N4O3 m/z 376,13, полученное значение: 377,1 (М+Н)+. 1H ЯМР (CDCl3) : 8,46 (д, J=2,5 Гц, 1 Н), 8,23-8,21 (м, 1 Н), 7,99-7,96 (м, 1 Н), 7,22-7,19 (м, 2 Н), 7,11 (с, 1 Н), 6,99-6,98 (м, 2 Н), 3,54-3,52 (м,4 Н), 3,49 (с, 2 Н), 2,46-2,44 (м, 4 Н). Биологическое тестирование Способ анализа 1 А. Трансфекция клеток человеческой FAAH Чашку Петри диаметром 10 см с конфлюэнтным монослоем клеток SK-N-MC разделяли за 2 дня до трансфекции. В стерильных условиях среду удаляли, а клетки отделяли от чашки путем добавления трипсина. Затем одну пятую часть клеток помещали в новую чашку диаметром 10 см. Клетки выращивали в инкубаторе при 37 С в атмосфере 5% CO2 в среде Игла MEM с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки. Через 2 дня клетки были конфлюэнтными приблизительно на 80%. Данные клетки отделяли от чашки с помощью трипсина и осаждали центрифугированием на клинической центрифуге. Осадок повторно суспендировали в 400 мкл полной среды и переносили в электропорационную кювету с расстоянием между электродами, равным 0,4 см. К клеткам добавляли сверхспиральную кДНК FAAH человека (1 мкг) и перемешивали. Для электропорации устанавливали напряжение 0,25 кВ и емкость 960 мкФ. После электропорации клетки разводили в полной среде (10 мл) и высевали на четыре чашки диаметром 10 см. Вследствие изменчивости эффективности электропорации были высеяны четыре концентрации клеток. Были использованы отношения 1:20, 1:10 и 1:5, а оставшиеся клетки добавляли в четвертую чашку. Клеткам давали восстановиться в течение 24 ч перед добавлением селекционной среды (полная среда с 600 мкг/мл G418). Через 10 дней чашки анализировали на выживание колоний клеток. Использовали чашки с хорошо изолированными колониями. Клетки из отдельных колоний выделили и протестировали. Клоны, показавшие наибольшую активность FAAH, измеренную путем гидролиза анандамида, использовали для дополнительных исследований. В. Анализ FAAH Замороженные сгустки клеток Т 84 или трансфицированные клетки SK-N-MC (содержимое чашек для культивирования размером 115 см) гомогенизировали в 50 мл буферного раствора для анализаFAAH (125 мМ буфера Трис, 1 мМ ЭДТА, 0,2% глицерина, 0,02% Triton X-100, 0,4 мМ Hepes, pH 9). Смесь для анализа состояла из 50 мкл клеточного гомогената, 10 мкл тестируемого соединения и 40 мкл анандамида [1-3 Н-этаноламин] (3 Н-АЕА, Perkin-Elmer, 10,3 C1/ммоль), который вводили последним до достижения конечной концентрации метки 80 нМ. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч. Во время инкубации 96-луночные фильтрующие планшеты Multiscreen (номер по каталогу MAFCNOB50; Millipore, г. Бедфорд, штат Массачусетс, США) наполняли 25 мкл активированного древесного угля (колоночный загрузчик Multiscreen, номер по каталогу MACL09625, Millipore) и однократно промывали 100 мкл МеОН. Также во время инкубации 96-луночные планшеты DYNEX MicroLite (номер по каталогу NL510410) заполняли 100 мкл MicroScint40 (номер по каталогу 6013641,Packard Bioscience, г. Мериден штат Коннектикут, США). Через 1 ч инкубирования 60 мкл реакционной смеси переносили в планшеты с древесным углем, которые затем помещали сверху на планшеты DYNEX с помощью рамок Centrifuge Alignment Frame (номер по каталогу MACF09604, Millipore). Несвязанный меченый этаноламин центрифугировали в нижний планшет (5 мин при 2000 об/мин), предварительно заполненный сцинтилляционной жидкостью, как описано выше. Планшеты герметично закрывали и оставляли на 1 ч при комнатной температуре перед замером счетчиком Hewlett Packard TopCount. Способ анализа 2 А. Трансфекция клеток FAAH крысы Чашку Петри диаметром 10 см с конфлюэнтным монослоем клеток SK-N-MC разделяли за 2 дня до трансфекции. В стерильных условиях среду удаляли, а клетки отделяли от чашки путем добавления трипсина. Затем одну пятую часть клеток помещали в новую чашку диаметром 10 см. Клетки выращива- 13022158 ли в инкубаторе при 37 С в атмосфере 5% СО 2 в среде Игла MEM с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки. Через 2 дня клетки были конфлюэнтными приблизительно на 80%. Данные клетки отделяли от чашки с помощью трипсина и осаждали центрифугированием на клинической центрифуге. Осадок повторно суспендировали в 400 мкл полной среды и переносили в электропорационную кювету с расстоянием между электродами, равным 0,4 см. К клеткам добавляли сверхспиральную кДНК FAAH крысы (1 мкг) и перемешивали. Для электропорации устанавливали напряжение 0,25 кВ и емкость 960 мкФ. После электропорации клетки разводили в полной среде (10 мл) и высевали на четыре чашки диаметром 10 см. Вследствие изменчивости эффективности электропорации были высеяны четыре концентрации клеток. Были использованы отношения 1:20, 1:10 и 1:5, а оставшиеся клетки добавляли в четвертую чашку. Клеткам давали восстановиться в течение 24 ч перед добавлением селекционной среды (полная среда с 600 мкг/мл G418). Через 10 дней чашки анализировали на выживание колоний клеток. Использовали чашки с хорошо изолированными колониями. Клетки из отдельных колоний выделили и протестировали. Клоны, показавшие наибольшую активность FAAH, измеренную путем гидролиза анандамида, использовали для дополнительных исследований. В. Анализ FAAH Трансфицированные клетки SK-N-MC Результаты измерений для протестированных в данных анализах соединений представлены в табл. 1 в виде средних показателей. Соединения анализировали либо в форме свободного основания, либо в форме хлористо-водородной соли. Сравниваемое соединение пиридин-3-иламид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты синтезировали в соответствии с процедурой,описанной в заявке на патент РСТWO 2006/074025, пример 150. Таблица 1 Анализ взаимодействий лекарственных средств Потенциал (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и сравниваемого соединения, пиридин-3-иламида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5 илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в отношении ингибирования изоферментов цитохрома Р 450 человека (CYP) исследовали путем инкубации соединения в различных концентрациях с микросомами печени человека и конкретными субстратами образцов CYP (табл. 2). Ингибирование CYP может влиять на профиль безопасности лекарственного средства, вмешиваясь в метаболизм молекул других лекарственных средств. Данный анализ подготавливали и выполняли с использованием автоматизированной лабораторной станции Biomek FXp для работы с жидкостями (Beckman Coulter Corp., г. Фуллертон, штат Калифорния),объединенной с шейкером-инкубатором Cytomat с заданной температурой 37 С (Thermo Electron Corp., г. Беллефонте, штат Пенсильвания). Для анализа использовали партию человеческих микросом печени от 50 доноров, объединенную и охарактеризованную компанией BD Gentest ( по каталогу 457111, партия 01220, 20 мг/мл в 250 мМ сахарозы). Каждый субстрат инкубировали с концентрацией белка 0,1, 0,15 или 0,2 мг/мл при общем объеме среды для инкубации, равном 0,16 мл. Инкубаты готовили в 100 мМ калийфосфатном буфере (рН 7,4) с добавлением 5 мМ хлорида магния и 1 мМ ЭДТА. В качестве положительного контроля использовали хинидин, ингибитор CYP2D6. Хинидин готовили в виде рабочего раствора в органическом растворителе (преимущественно метаноле с добавлением ДМСО и ацетонитрила в качестве вспомогательных растворителей) и вводили в суспензию микросом для получения желаемой концентрации. После этого раствор последовательно разводили дополнительными порциями суспензии микросом для получения восьми уровней концентрации. Конечное содержание органических веществ составляло менее 0,07%. Базовый раствор тестируемого соединения готовили с концентрацией 50 мМ или, по возможности, выше в подходящем органическом растворителе (ДМСО, метанол или ацетонитрил), в зависимости от пределов растворимости. Базовый раствор последовательно разбавляли метанолом и затем вводили в суспензию микросом для получения конечных концентраций инкубации 0, 0,1, 0,3, 1, 3, 10, 30 и 100 мкМ для сравниваемого соединения и 0, 0,06, 0,18, 0,6, 1,8, 6, 18 и 60 мкМ для (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Конечное содержание органических веществ составляло 0,2%. Инкубации для каждого субстрата образца проводили в трех повторностях. В инкубационные сосуды переносили контрольный ингибитор (хинидин) и маркерный субстрат(декстрометорфан или буфуралол) (аликвоты по 60 мкл). После прединкубационного периода при 37 С инициировали реакции путем добавления 40 мкл аликвоты регенерирующей системы NADPH (BD Gentest). Аликвота 4 0 мкл (разбавленная в соотношении 6:19 инкубационным буфером) дала конечные концентрации 1,3 мМ NADP+, 3,3 мМ глюкозо-6-фосфата и 0,4 ед./мл глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Пе- 14022158 риод инкубации составил 12 мин как для декстрометорфана, так и для буфуралола. Реакции прерывали путем непосредственного добавления ацетонитрила (160 мкл) в инкубационную смесь. После этого смесь переносили в планшет-коллектор, содержащий дополнительное количество ацетонитрила (400 мкл). Реакционные смеси для инкубации с равными концентрациями тестируемого соединения или контрольного ингибитора объединяли и переносили в фильтрующий планшет для осаждения белка Phenomenex Strata Impact, содержащий ацетонитрил и внутренние стандарты (100 мкл смеси следующих дейтерированных соединений с диапазоном концентраций от 0,5 до 2,8 мкМ: гидроксибуфуралол-d9,декстрорфан-d3. Полученный фильтрат выпарили до сухого состояния под током азота, а затем повторно растворили в 250 мкл подвижной фазы (1:1 метанол:вода с содержанием 0,1% уксусной кислоты). Образцы и стандарты анализировали на тройном квадрупольном масс-спектрометре Sciex API4000. Обработку данных проводили с помощью программного обеспечения Analyst 1.4.1 (Applied Biosystems/MDSSciex). Во время анализа IC50 отношения площадей хроматографических пиков метаболитов и внутренних стандартов переносили в программу SigmaPlot (версия 8.0) и строили график с использованием полулогарифмической шкалы (зависимость процента остаточной активности от концентрации ингибитора) для определения значения IC50.(4-Хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты ингибировал активность CYP2D6 при IC50=24 мкМ при использовании буфуралола в качестве тестового субстрата и 11 мкМ при использовании декстрометорфана в качестве тестового субстрата. (4 Хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты продемонстрировал преимущество перед сравниваемым соединением, которое ингибировало активностьCYP2D6 при значении IC50=3,2 мкМ при использовании буфуралола и 2,0 мкМ при использовании декстрометорфана в качестве тестовых субстратов. Эти результаты подтверждают снижение потенциального риска межлекарственных взаимодействий для (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты относительно сравниваемого соединения. Таблица 2 Тест первичного наблюдения (тест Ирвина) на крысах Гидрохлорид (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1 карбоновой кислоты и хлористо-водородную соль сравниваемого соединения исследовали при пероральном введении в тесте первичного наблюдения (тест Ирвина) на крысах для оценки общего воздействия этих соединений на поведение и физиологические функции. Способ, которым определяли первую токсическую дозу, активный диапазон доз и основное воздействие тестируемого вещества на поведение и физиологическую функцию, был описан в публикации Irwin et al. (Psychopharmacologia, 1968 г., 13, 222257). Крысам вводили тестируемое вещество и наблюдали за ними при одновременном сравнении с контрольной группой, которой был введен носитель (неслепое исследование). Одновременно наблюдали за всеми животными в группе. Изменения поведения, физиологические симптомы и симптомы нейротоксичности, ректальную температуру и диаметр зрачка регистрировали в соответствии со стандартной сеткой наблюдения, производной от сетки, которую использовал Ирвин. Сетка включает следующие пункты: смертность, судороги, тремор, хвост Штрауба, изменение активности, прыжки, аномальная походка(покачивание, хождение на цыпочках), нарушение двигательной координации, изменение тонуса брюшных мышц, утрата захвата, акинезия, оцепенение, нарушение сокращения мышц, потеря равновесия, хождение на передних лапах, корчи, пилоэрекция, стереотипии (фырканье, жевание, движения головой),подергивания головой, царапанье, изменение дыхания, агрессивность, изменение реакции при страхе/испуге, изменение реактивности на прикосновение, птоз, экзофтальм, нарушение установочного рефлекса, нарушение роговичного рефлекса, анальгезия, дефекация/диарея, слюноотделение, слезоотделение, ректальная температура (гипотермия/гипертермия) и диаметр зрачка (миоз/мидриаз). Тестируемые вещества оценивали в 2 дозировках (10 и 60 мг/кг), которые вводили перорально непосредственно до начала теста и сравнивали с реакцией на носитель в контрольной группе. Наблюдения проводили через 15, 30, 60, 120 и 180 мин после введения тестируемых веществ/носителей, а также через 24 ч. В тесте Ирвина гидрохлорид (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты оказал слабое преходящее возбуждающее действие только на одну крысу в диапазоне дозы от 10 до 60 мг/кг (табл. 3). При дозе 10 мг/кг гидрохлорид (4-хлорпиридин-3 ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты вызвал повышение реактивности на прикосновение у 1 из 4 крыс через 180 мин. При дозе 60 мг/кг гидрохлорид (4 хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты вызвал повышение тонуса брюшных мышц у 1 из 4 крыс через 60 мин и повышение реактивности на прикосновение у 1 из 4 крыс через 60 и 180 мин. Помимо преходящего эпизодического повышения тонуса брюшных мышц при дозировке 60 мг/кг никаких других эффектов в течение 24 ч после введения не наблюдали. В тесте Ирвина гидрохлорид (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты продемонстрировал преимущества в сравнении с хлористоводородной солью сравниваемого соединения при обеих дозах. В то время как гидрохлорид (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты вызывал повышение реактивности на прикосновение только у 1 из 4 крыс при дозе 10 мг/кг, хлористо-водородная соль сравниваемого соединения вызывала повышение реактивности на прикосновение у всех 3 крыс. При дозе 60 мг/кг хлористо-водородная соль сравниваемого соединения оказывала седативный эффект через 15-120 мин и вызывала аномальную походку (покачивание) через 15 мин у всех 3 крыс. Она вызывала снижение мышечного тонуса у 1 крысы через 30 мин и у всех 3 крыс через 60-120 мин. Она также вызывала гипотермию через 15-60 мин и через 180 мин. Данные результаты свидетельствуют о наличии седативного (угнетающего) эффекта (седация, признаки торможения двигательных функций и гипотермия) у хлористо-водородной соли сравниваемого соединения при пероральной дозе 60 мг/кг, которого не наблюдали у гидрохлорида (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение, представляющее собой (4-хлорпиридин-3-ил)амид 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол 5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты или его фармацевтически приемлемую соль. 2. Фармацевтически приемлемая соль по п.1, где указанная соль представляет собой хлористо-водородную соль (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. 3. Фармацевтически приемлемая соль по п.2, где указанная хлористо-водородная соль представляет собой дигидрохлорид. 4. Способ модуляции активности гидролазы амидов жирных кислот (FAAH), включающий воздействие на FAAH терапевтически эффективным количеством по меньшей мере одного из (4-хлорпиридин- 16022158 3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты и его фармацевтически приемлемой соли. 5. Фармацевтическая композиция, включающая:(a) терапевтически эффективное количество (4-хлорпиридин-3-ил)амида 4-(2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-илметил)пиперазин-1-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли и(b) фармацевтически приемлемый эксципиент. 6. Способ лечения субъекта, у которого диагностировано или который страдает от заболевания,расстройства или медицинского состояния, опосредованного активностью FAAH, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, как указано в п.5. 7. Способ по п.6, где заболевание, расстройство или медицинское состояние выбрано из тревоги,депрессии, боли, нарушения сна, расстройства пищевого поведения, воспалительного процесса, двигательных нарушений, синдрома истощения при ВИЧ-инфекции, закрытой травмы черепа, инсульта, нарушения способности к обучению и нарушения памяти, болезни Альцгеймера, эпилепсии, синдрома Туретта, болезни Ниманна-Пика, болезни Паркинсона, хореи Хантингтона, неврита зрительного нерва, аутоиммунного увеита, наркотической абстиненции, тошноты, рвоты, сексуальной дисфункции, посттравматического стрессового расстройства, спазма сосудов головного мозга, глаукомы, синдрома раздраженного кишечника, воспалительного заболевания кишечника, иммуносупрессии, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, паралитической непроходимости кишечника, секреторной диареи, язвенной болезни желудка, ревматоидного артрита, нежелательной беременности, гипертензии, рака, гепатита, аллергии дыхательных путей, аутоиммунного диабета, хронического прурита, нейровоспаления, диабета, метаболического синдрома и остеопороза. 8. Способ по п.6, где заболевание, расстройство или медицинское состояние представляет собой боль или воспаление. 9. Способ по п.6, где заболевание, расстройство или медицинское состояние представляет собой тревогу, расстройство сна, расстройство пищевого поведения или двигательное нарушение. 10. Способ по п.6, где заболевание, расстройство или медицинское состояние представляет собой рассеянный склероз. 11. Способ по п.6, где заболевание, расстройство или медицинское состояние представляет собой энергетический обмен или гомеостаз костной ткани.