Антивирусные соединения

1 Настоящее изобретение относится к области медицины, особенно к лечению вирусных инфекций людей. Более конкретно, настоящее изобретение относится к лечению риновирусных, энтеровирусных и флавивирусных инфекций. Частота вирусного заболевания верхних дыхательных путей, обычного насморка, огромна. Было подсчитано, что только в Соединенных Штатах ежегодно имеет место около миллиарда таких случаев. Риновирус, член семейства picornaviridae, является основной причиной простуды у людей. Поскольку было идентифицировано более чем 110 штаммов риновирусов, разработка практической риновирусной вакцины невозможна, и, по-видимому, химиотерапия представляет более желательный подход. Еще одним членом семейства пикорнавирусов является энтеровирус, который включает приблизительно восемьдесят патогенов человека. Многие из этих энтеровирусов вызывают подобные простуде симптомы; другие могут вызвать более серьезные заболевания, такие как полиомиелит,конъюнктивит, асептический менингит и миокардит. Свидетельством болезни, относящейся к риновирусной инфекции является выделение из носа и заложенность носа. Кроме того, данная болезнь причастна к воспалению среднего уха,предрасположением к развитию бронхита, обострениям синусита и причастна к осаждению астматического altoclis. Хотя многие считают,что она является всего лишь неприятностью,часто встречающиеся случаи ее у здоровых в остальных отношениях индивидуумов и приводящие в результате к проблемам экономического значения, связанным с длительным отсутствием работников и визитами к врачам, сделали ее предметом обширного исследования. Способность химических соединений подавлять рост вирусов in vitro может быть легко продемонстрирована с использованием теста на подавление вирусных бляшек или теста на цитопатическое действие (СРЕ). Cf Siminoff. Applied Microbiology, 9(1), 66 (1961). Хотя был идентифицирован ряд химических соединений,которые ингибируют пикорнавирусы, такие как риновирусы, многие неприемлемы из-за 1) органического спектра активности, 2) нежелательных побочных действий или 3) неспособности предотвращать инфекцию или болезнь у животных или людей. См. Textbook of Human Virology, edited by Robert B. Belshe, chapter 16. "Rhinoviruses", Roland A. Levandowski, 391-405(1985). Таким образом, несмотря на признанный терапевтический потенциал, связанный с ингибиторами риновирусов, и затраченные до настоящего времени усилия на исследования,жизнеспособного терапевтического агента пока еще нет. Например, в патентах США 4 008 243, 4 018 790, 4 118 573, 4 118 742, 4 174 454 и 2 4 492 708 описаны антивирусные соединения ряда бензимидазола. В общем, соединения, описанные в указанных выше патентах, не обладают желательным фармакологическим профилем для использования при лечении риновирусных инфекций. В частности, эти соединения не обладают удовлетворительной пероральной биологической доступностью или достаточно высокой ингибирующей активностью для компенсации их относительно низкой пероральной биологической доступности, чтобы позволить их широкое использование. Кроме того, в данной области широко признано мнение, что соединения, используемые для лечения риновирусных инфекций,должны быть очень безопасны с точки зрения токсикологии. Соответственно первостепенной целью изобретения является предоставление новых соединений ряда бензимидазола, которые ингибируют рост пикорнавирусов, таких как риновирусы, энтеровирусов, таких как полиовирусы,вирусы Коксаки групп А и В, или ЕСНОвирусы, и которые имеют желательный фармакологический профиль. Бензимидазольные соединения можно также использовать для ингибирования флавивирусов, таких как вирус гепатита С и вирус бычьей диарреи (BVDV). Настоящее изобретение представляет соединения формулы IR3 представляет диметиламино, С 1-С 10 алкил, галоген(С 1-С 6)-алкил, С 3-С 7-циклоалкил,замещенный С 3-С 7-циклоалкил, фенил, замещенный фенил, нафтил, тиенил, тиазолидинил,фурил, пирролидино, пиперидино, морфолино или группу формулыR4 и R5, независимо, представляют водород или С 1-С 4-алкил; или их фармацевтически приемлемые соли. Настоящее изобретение предоставляет также фармацевтические готовые препаративные формы, содержащие соединение настоящего изобретения или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом. Настоящее изобретение предоставляет также способ ингибирования пикорнавирусов,предусматривающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I, в которой a, R, R0, R1,R2, R3, R4 и R6 имеют значения, определенные выше, или его фармацевтически приемлемой соли. Настоящее изобретение относится к бензимидазольным соединениям формулы I, описанным выше, которые полезны в качестве антивирусных агентов. Все температуры, указанные здесь, приводятся в градусах Цельсия (С). Все единицы измерения, использованные здесь, даются в массовых единицах, за исключением жидкостей,которые даются в объемных единицах. Используемый здесь термин "С 1-С 10 алкил" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь, имеющую от одного до десяти атомов углерода. Типичные С 1 С 10-алкильные группы включают метил, этил,пропил, изопропил, бутил, изобутил, вторбутил, трет-бутил, пентил, неопентил, гексил, 2 метилгексил, гептил и аналогичные. Термин"С 1-С 10-алкил" включает в пределах своего определения термины "С 1-С 6-алкил" и "С 1-С 4 алкил"."Галоген (С 1-С 4)-алкил" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь, имеющую от одного до четырех атомов углерода, с присоединенными к ней 1, 2 или 3 атомами галогена. Типичные галоген(С 1-С 4)алкильные группы включают хлорметил, 2 бромэтил, 1-хлоризопропил, 3-фторпропил, 3 бромбутил, 3-хлоризобутил, иод-трет-бутил,трихлорметил, трифторметил, 2,2-хлориодэтил,2,3-дибромпропил и аналогичные."(С 1-С 4)Алкилтио" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь, имеющую от одного до четырех атомов углерода, присоединенную к атому серы. Типичные (C1-С 4)-алкилтиогруппы включают метилтио, этилтио, пропилтио, изопропилтио, бутилтио и аналогичные."(С 1-С 4)Алкокси" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь,имеющую от одного до четырех атомов углерода, присоединенную к атому кислорода. Типич 001389"Ди(С 1-С 4)алкиламино" представляет две неразветвленные или разветвленные алкильные цепи, имеющие от одного до четырех атомов углерода, присоединенные к общей аминогруппе. Типичные ди(С 1-С 4)алкиламиногруппы включают диметиламино, этиламино, метилпропиламино, этилизопропиламино, бутилметиламино, втор-бутилэтиламино и аналогичные."(С 1-С 4)Алкилсульфинил" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь, имеющую от одного до четырех атомов углерода, присоединенную к сульфинильному фрагменту. Типичные (С 1-С 4)алкилсульфинильные группы включают метилсульфинил,этилсульфинил, пропилсульфинил, изопропилсульфинил, бутилсульфинил и аналогичные."(С 1-С 4)Алкилсульфонил" представляет неразветвленную или разветвленную алкильную цепь, имеющую от одного до четырех атомов углерода, присоединенную к сульфонильной части. Типичные (С 1-С 4)алкилсульфонильные группы включают метилсульфонил, этилсульфонил, пропилсульфонил, изопропилсульфонил,бутилсульфонил и аналогичные."Замещенный фенил" представляет фенильное кольцо, замещенное 1-3 заместителями,выбранными из следующих: галоген, циано, С 1 С 4-алкил, С 1-С 4-алкокси, амино или галоген (С 1 С 4)алкил."Замещенный С 3-С 7-циклоалкил" представляет циклоалкильное кольцо, замещенное 13 заместителями, выбранными из следующих: галоген, циано, С 1-С 4-алкил, С 1-С 4-алкокси,амино или галоген(С 1-С 4)алкил. Заявленные соединения могут существовать в форме либо цис-, либо транс-изомера. Для целей настоящей заявки цис- относится к тем соединениям, в которых карбоксамидная часть находится в цис-положении к кольцу бензимидазола, и транс относится к тем соединениям, в которых карбоксамидная часть находится в транс-положении к кольцу бензимидазола. Оба изомера включены в объем заявленных соединений. Как упоминалось выше, изобретение включает фармацевтически приемлемые соли соединений, определенных формулой I. Соединения этого изобретения могут обладать достаточно кислотной, достаточно основной или обеими функциональными группами и соответственно реагируют с любым из большого числа неорганических оснований и неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей. Термин "фармацевтически приемлемая соль", используемый здесь, относится к солям соединений приведенной выше формулы, которые по существу нетоксичны для живых организмов. Типичные фармацевтически приемлемые соли включают такие соли, полученные 5 реакцией соединений настоящего изобретения с минеральной или органической кислоты или неорганическим основанием. Такие соли известны как кислотно-аддитивные и основноаддитивные соли. Кислотами, обычно используемыми для образования кислотно-аддитивных солей являются неорганические кислоты, такие как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, иодисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и тому подобные, и органические кислоты, такие как п-толуолсульфоновая, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, щавелевая кислота, пбромфенилсульфоновая кислота, угольная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота и тому подобные. Примерами таких фармацевтически приемлемых солей являются сульфат, пиросульфат,бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, вторичный кислый фосфат, первичный кислый фосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат,суберинат, себацинат, фумарат, малеат, бутин 1,4-диоат, гексин-1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат,фенилбутират, цитрат, лактат, -гидроксибутират, гликолат, тартрат, метансульфонат,этансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1 сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и тому подобные. Предпочтительными фармацевтически приемлемыми кислотно-аддитивными солями являются соли, образованные с минеральными кислотами, такими как хлористоводородная кислота и серная кислота, и соли,образованные с органическими кислотами, такими как малеиновая кислота и метансульфоновая кислота. Основно-кислотные соли включают соли,образованные из неорганических оснований,таких как гидроксиды, карбонаты и бикарбонаты аммония или щелочных или щелочноземельных металлов и аналогичные. Основания,которые можно использовать для получения солей изобретения, таким образом, включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия, бикарбонат калия, гидроксид кальция, карбонат кальция и тому подобные. Особенно предпочтительны формы калиевых и натриевых солей. Следует признать, что конкретный противоион, образующий часть любой соли данного изобретения, не является критическим, пока соль в целом фармакологически приемлема и 6 пока противоион не придает нежелательные свойства соли в целом. Предпочтительными соединениями данного изобретения являются соединения формулыR5 представляют водород, метил или этил; или их фармацевтически приемлемые соли. Из этих предпочтительных соединений более предпочтительны соединения формулы I, в которой а равно 0 или 1; каждый R, независимо, представляет водород, фтор, метил, этил, метокси, этокси, диметиламино;R3 представляет диметиламино, С 1-С 4 алкил, С 3-С 7-циклоалкил или пирролидино; или их фармацевтически приемлемые соли. Из этих соединений наиболее предпочтительными соединениями являются или их фармацевтически приемлемые соли. Соединения формулы I могут быть получены с помощью реакции подходящим образом замещенного ацетамида с основанием с образованием соответствующего аниона, который затем подвергают реакции с подходящим образом замещенным кетоном формулы IA с образованием карбинольного промежуточного соединения. Реакцию типично проводят в органическом растворителе в течение от одного до двенадцати часов при температуре от около -90 С до комнатной температуры с использованием избытка основания и ацетамидного реагента относительно кетонового реагента. Ацетамид перед использованием в реакции предпочтительно защищают подходящей защитной группой. Типичные основания включают гидрид натрия,диизопропиламид лития (LDA) и н-бутиллитий. Предпочтительным основанием является нбутиллитий. Выбор растворителя не является критическим, если только используемый растворитель инертен к реакции и реагенты достаточно солюбилизированы для проведения желаемой реакции. Растворителем, подходящим для использования в данной реакции, является тетрагидрофуран, хотя в качестве растворителя может также использоваться ацетамидный реагент. Карбинольный промежуточный продукт обычно получают за время от около одного до восемнадцати часов, когда реакцию начинают при -78 С и позволяют смеси медленно подогреваться до комнатной температуры. Реакцию можно контролировать ВЭЖХ и можно гасить добавлением кислоты, когда она в основном завершается. Типичные кислоты включают хлористо-водородную кислоту,бромистоводородную кислоту, муравьиную кислоту и аналогичные. Предпочтительной кислотой яв 001389 8 ляется концентрированная хлористо-водородная кислота. Получаемый карбинольный промежуточный продукт предпочтительно дегидратируют без предварительного выделения или очистки. В частности, карбинольный промежуточный продукт подвергают реакции с кислотой в течение от тридцати минут до двенадцати часов при температуре примерно от комнатной температуры до температуры дефлегмации смеси,получая желаемое соединение формулы I. Типичные кислоты включают хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, муравьиную кислоту, уксусную кислоту и сочетания кислот. Предпочтительным сочетанием кислот является муравьиная кислота, содержащая 1-6% концентрированной хлористоводородной кислоты. Целевое соединение обычно получают в течение времени от около тридцати минут до нескольких часов, когда реакцию проводят при температуре дефлегмации смеси. Реакцию предпочтительно контролируют ВЭЖХ, например, для обеспечения прохождения реакции до завершения. Соединения формулы I предпочтительно выделяют и получаемые цис/транс-изомеры разделяют с использованием известных в данной области методик. Например, цис- и трансформы выделенных соединений можно разделить с использованием колоночной хроматографии, например, ВЭЖХ с обращенной фазой. Соединения можно элюировать с колонки с использованием подходящего соотношения ацетонитрила и воды или метанола и воды. Цисформу соединения можно превратить в смесь цис/транс воздействием h-излучения и рециркулировать через вышеуказанный способ очистки. Кетоновые промежуточные продукты формулы IA, используемые в вышеуказанной реакции, можно получить по существу так, как подробно описано в публикациях, относящихся к данной области техники. Например, кетоновые промежуточные продукты можно получить по следующей реакционной схеме I. Реакционная схема IX представляет циано или -COOR', где R' представляет С 1-С 4-алкил;R имеют значения, определенные выше. Процесс по приведенной выше схеме I выполняют проведением реакций 1-4. После завершения реакции промежуточное соединение можно выделить при желании с помощью приемов, известных в данной области. Например,соединение можно кристаллизовать и затем собирать фильтрованием, или растворитель для реакции можно удалить экстракцией, выпариванием или декантацией. Промежуточное соединение перед проведением следующей стадии реакционной схемы можно далее очистить, если необходимо, с помощью обычных приемов, таких как кристаллизация или хроматография на твердых носителях, таких как силикагель или оксид алюминия (глинозм). Реакцию I.1 выполняют сначала обработкой подходящим образом замещенного галогеннитроанилина, предпочтительно фтор- или хлорнитроанилина, и подходящим образом замещенного фенилацетонитрила или бензоата основанием в органическом растворителе в течение от одного до двадцати четырех часов при температуре примерно от -10 до 40 С, получая кетоновый предшественник. Реакцию обычно проводят с использованием эквимолярных количеств реагентов в присутствии двух эквивалентов основания. Типичные основания включают гидрид натрия, трет-бутоксид калия, диизопропиламид лития (LDA). Предпочтительным основанием является трет-бутоксид калия. Примеры растворителей, подходящих для использования в этой реакции, включают диметилформамид, диметилацетамид и тому подобные. Выбор растворителя не является критическим коль скоро используемый растворитель инертен к проходящей реакции и реагенты достаточно солюбилизированы, чтобы осуществить желаемую реакцию. Кетоновый предшественник обычно получают за период примерно от одного до пятнадцати часов, когда реакцию начинают при 0 С и оставляют проходить далее при комнатной температуре. Кетоновый предшественник предпочтительно окисляют в той же самой 10 реакционной смеси без предварительного выделения или очистки. В частности, кетоновый предшественник подвергают реакции с окисляющим агентом в течение от тридцати минут до пятнадцати часов при температуре примерно от 0 до 30 С, получая соответствующее кетоновое соединение. Типичные окисляющие агенты или окислители включают пероксид водорода, кислород и воздух. Обычно кислород и воздух барботируют через реакционную смесь. Предпочтительным окислителем является пероксид водорода, предпочтительно в 30% растворе. Кетон обычно получают за время примерно от тридцати до пяти часов, когда реакцию проводят при температуре между 0 С и комнатной температурой. Реакцию предпочтительно контролируют с помощью ТСХ, например, для обеспечения прохождения реакции до завершения. В реакции I.2 нитрозаместитель у кетона восстанавливают по методикам, известным в данной области, получая соответствующее диаминобензофеноновое соединение. Например,нитрозаместитель можно восстановить каталитическим гидрированием, например, путем сочетания кетона, выделенного из реакции II.1, с газообразным водородом в этаноле или тетрагидрофуране и катализатором. Предпочтительным катализатором является палладий на угле или никель Ренея. Выбор растворителя не является критическим, если только используемый растворитель инертен к реакции и реагенты достаточно солюбилизированы, чтобы осуществить желаемую реакцию. Газообразный водород обычно используют под давлением до 4,219 ат(60 фунт./кв. дюйм), предпочтительно равным или около 2,109 ат (30 фент/кв. дюйм). Реакция обычно по существу завершается по истечении примерно от 1 до 24 ч, когда ее проводят при температуре в диапазоне от около 0 С до около 40 С. Реакцию предпочтительно проводят при температуре в диапазоне от около 20 С до около 30 С в течение примерно от 2 до 5 ч. В реакции I.3 диаминобензофеноновое соединение, выделенное из реакционной смеси реакции I.2, можно сульфонилировать подходящим образом замещенным сульфонилгалогенидом формулы R4-SО 2-галогенид, по существу по методике, подробно описанной выше, получая соответствующие сульфонамидобензофенoновые соединения. В реакции I.4 соединение, выделенное из реакционной смеси реакции I.3, циклизуют через нитрильный промежуточный продукт сначала обработкой сульфонамидобензофенонового соединения основанием в спиртовом растворителе, таком как изопропанол, с последующей реакцией с цианобромидом. Обычно сульфонамидобензофенон и основание подвергаются реакции при температуре примерно от около 0 С до около 30 С. Предпочтительным основанием является гидроксид натрия, предпочтительно 11 добавляемый в форме водного раствора (около 1-4 М). Когда сульфонамидобензофенон полностью растворяется, получаемый раствор смешивают с цианобромидом. Цианобромид в типичном случае добавляют в форме раствора (3-7 М,например, в ацетонитриле). Реакция обычно завершается по истечении одного - восемнадцати часов, когда реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Однако, в некоторых случаях нитрильный промежуточный продукт осаждается из реакционной смеси. Чтобы получить целевой кетон, данный осадок отделяют и затем кипятят с обратным холодильником в спиртовом растворителе, таком как изопропанол, в течение одного - четырех часов,получая желаемое кетоновое соединение формулы I. Альтернативно, соединение, выделенное после реакции I.3, циклизуют через нитрильный промежуточный продукт путем обработки сульфонамидобензофенонового соединения основанием в хлорированном растворителе, таком как метиленхлорид, с последующей реакцией с цианобромидом. В типичном случае, сульфонамидобензофенон и основание подвергаются реакции при температуре от около 0 С до около температуры дефлегмации смеси. Предпочтительным основанием является метоксид лития. Сульфонамидобензофенон и основание обычно образуют суспензию, которую затем смешивают с цианобромидом. Цианобромид обычно добавляют в форме раствора (3-7 М, например, в метиленхлориде). Реакция обычно завершается по истечении от одного до восемнадцати часов,когда реакционную смесь перемешивают при температуре в диапазоне от 0 С до температуры дефлегмации. Соединения формулы I, в которой R2 представляет NНС(O)(С 1-С 6-алкил), можно получить ацилированием соединения формулы I, в которой R2 представляет амино, по методикам, известным в данной области. Например, аминовое соединение можно ацилировать подходящим ацилгалогенидом, изоцианатом или хлорформиатом, предпочтительно в присутствии акцептора кислоты, такого как третичный амин,предпочтительно триэтиламин. Предпочтительным ацилирующим агентом является уксусный ангидрид. Реакцию обычно проводят при температуре от около -20 С до около 25 С. Типичные растворители для данной реакции включают простые эфиры и хлорированные углеводороды, предпочтительно диэтиловый эфир, хлороформ или метиленхлорид. Аминовый реагент обычно используют в эквимолярных количествах относительно ацилирующего реагента и предпочтительно в присутствии эквимолярных количеств акцептора кислоты, такого как третичный амин. Предпочтительным акцептором кислоты для данной реакции является Nметилморфолин (NMM). 12 Соединения, используемые в качестве первоначальных исходных материалов в синтезе соединений данного изобретения, известны в данной области и, если они коммерчески недоступны, легко синтезируются с помощью стандартных приемов, обычно используемыми в данной области. Специалистам данной области должно быть понятно, что при проведении описанных выше способов, может быть желательным введение в реагенты химических защитных групп,чтобы предотвратить протекание вторичных реакций. Любые амино, спиртовые, алкиламино или карбоксигруппы, которые могут присутствовать в реагентах, можно защитить с использованием любой стандартной аминоспиртовой пли карбоксизащитной группы, которая не оказывает неблагоприятного воздействия на способность остальной части молекулы реагировать нужным образом. Различные защитные группы можно затем удалить одновременно или последовательно с использованием методов, известных в данной области. Фармацевтически приемлемые соли изобретения обычно получают с помощью реакций соединения формулы I с эквимолярным или избыточным количеством кислоты или основания. Реагенты обычно смешивают в общем растворителе, таком как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран, метанол, этанол, изопропанол, бензол и тому подобные, для кислотно-аддитивных солей, или в воде, спирте или хлорированном растворителе, таком как метиленхлорид, для основно-аддитивных солей. Соли обычно осаждаются из растворов за период в диапазоне примерно от одного часа до около десяти дней и могут выделяться фильтрованием или другими обычными способами. Следующие препаративные примеры и примеры далее иллюстрируют характерные аспекты настоящего изобретения. Должно быть понятно, однако, что эти примеры включены только для иллюстративных целей и ни в каких отношениях не предназначаются для ограничения объема изобретения, и не должны истолковываться как ограничительные. В следующих препаративных примерах и примерах термины: точка плавления, спектры ядерного магнитного резонанса, масс-спектры с электронным ударом, масс-спектры с полевой десорбцией, масс-спектры с бомбардировкой быстрыми атомами, инфракрасные спектры,ультрафиолетовые спектры, элементный анализ,высокоэффективная жидкостная хроматография(или жидкостная хроматография высокого разрешения и тонкослойная хроматография сокращены как "т. пл", "NMR", "EIMS", "MS(FD)","MS(FAB)", "IR", "UV", "Анализ", "ВЭЖХ" и"ТСХ" соответственно. Данные MS(FD) представлены как массовое число, если не указано иное. Кроме того, максимумы абсорбции, перечисленные для ИК-спектров (IR), являются 13 только теми, которые представляют интерес, а не всеми наблюдаемыми максимумами. В связи с ЯМР-спектром (NMR) используют следующие сокращения: "s" представляет синглет, "d" представляет дублет, "dd" представляет дублет дублетов, "t" представляет триплет, "q" представляет квартет, "m" представляет мультиплет, "dm" представляет дублет мультиплетов и "br.s", "br.d", "br.t" и "br.m" обозначают уширенные: синглет, дублет, триплет и мультиплет соответственно. "J" обозначает константу сочетания (взаимодействия) в герцах(Гц). Если не указано иное, данные NMR относятся к свободному основанию соединения, о котором идет речь. DMSO обозначает ДМСО. ЯМР-спектры получали на приборе BrucerCorp. 250 МГц или на приборе General ElektricQE-300 300 МГц. Химические сдвиги выражены в величинах дельта, , (части на миллион (м.д) в области более низкого поля от тетраметилсилана). MS(FD)-спектры получали на спектрометреVarion-MAT 731 с использованием углеродных дендритных излучателей. EIMS-спектры получали на инструменте СЕС 21-110 фирмы Consolidated Electrodynamics Corporation. IRспектры получали на инструменте Perkin-Elmer 281. UV-спектры получали на инструменте Саrу 118. ТСХ проводили на пластинках с силикагелем E.Merck. Точки плавления не корректировались. Примеp 1 А. 3-Амино-4-нитро-4'-фторбензофенон. К холодному (0 С) раствору 17,25 г (100 ммоль) 5-хлор-2-нитроанилина и 12 мл (100 ммоль) 4-фторфенилацетонитрила в 200 мл диметилформамида добавляли 22,44 г (200 ммоль) трет-бутоксида калия в атмосфере азота. Реакционную смесь подогревали до комнатной температуры и реакцию проводили в течение ночи. Когда реакция по существу завершалась, о чем указывались результаты ТСХ (элюент 40% этилацетат в гексане), реакционную смесь охлаждали до 0 С с последующим добавлением 30 мл пероксида водорода (30% раствор в воде). Когда реакция по существу завершилась, о чем судили по данным ТСХ (элюент 40% этилацетат в гексане), реакционную смесь выливали в 1 литр 1 н. хлористо-водородной кислоты (водной), что приводило к образованию желтооранжевого осадка. Остаток отделяли фильтрованием. Выход: 23,3 г (89%). В. 3,4-Диамино-4'-фторбензофенон. К раствору 21 г продукта примера 1 А в 250 мл тетрагидрофурана и 250 мл этанола добавляли 3,0 г катализатора никеля Ренея. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи под давлением водорода (газообразного) 2,109 атм(30 фунт/кв. дюйм) и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме, получая желтый твердый продукт, который использовали без дальнейшей очистки. 14 С. 4-Амино-3-изопропилсульфонамидо-4'фторбензофенон. К раствору 18,14 г (79 ммоль) продукта примера 1 В в 160 мл безводного метиленхлорида и 32 мл безводного пиридина добавляли 13,25 мл (118 ммоль) изопропилсульфонилхлорида. Реакционная смесь подвергалась реакции при комнатной температуре в течение 5 ч в атмосфере азота. Когда реакция по существу завершалась, о чем свидетельствовали данные ТСХ (элюент этилацетат), реакционную смесь выливали в 400 мл 1 н. хлористо-водородной кислоты (водной). Получаемую смесь разбавляли 300 мл этилацетата, и образующиеся слои разделяли, органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая темно-красную смолу. Данную смолу очищали с использованием препаративной ВЭЖХ (градиентный элюент 3060% этилацетата в гексане). Фракции, содержащие желаемое соединение, объединяли и сушили в вакууме, получая 17,11 г желтой смолы,которую использовали без дальнейшей обработки. Выход: 65%. К раствору 17,11 г (51 ммоль) продукта примера 1 С и 25 мл 2 н. гидроксида натрия (водного) в 100 мл изопропанола добавляли 10 мл 5 М цианобромида в ацетонитриле. Реакционная смесь подвергалась реакции при комнатной температуре в течение 30 мин, что приводило к образованию осадка. Данный осадок отделяли фильтрованием, получая 11,68 г твердого продукта. Твердый продукт повторно суспендировали в 250 мл изопропанола, и получаемую смесь кипятили с обратным холодильником до тех пор, пока не растворялся весь материал, и затем охлаждали, получая 10,0 г желаемого соединения. Выход: 55%. Анализ для C17H16FN3O3S: Вычислено: С, 56,50; Н, 4,46: N, 11,63; Найдено: С, 56,71; Н, 4,48: N, 11,82; К холодному (-78 С) раствору бис (триметилсилил)ацетамида (8 эквивалентов) в тетрагидрофуране медленно добавляли раствор 2,5 М н-бутиллития (8 эквивалентов) в гексане. К полученной смеси добавляли продукт примера 1D(1 эквивалент). Реакционную смесь перемеши 15 вали в течение 8 ч при -78 С и затем давали ей подогреться до комнатной температуры. Когда реакция по существу завершалась, на что указывалась ВЭЖХ, реакцию гасили добавлением концентрированной хлористо-водородной кислоты (приблизительно 1 эквивалент) и затем концентрировали в вакууме, получая масло,которое затем снова растворяли в муравьиной кислоте, содержащей 1% концентрированной хлористо-водородной кислоты. Полученную смесь подвергали реакции в течение 4 ч при 95 С. Когда реакция по существу завершалась,на что указывалась ВЭЖХ, смесь концентрировали в вакууме, получая масло. Масло разделяли с использованием ВЭЖХ с обращенной фазой (элюент ацетонитрил в воде), получая цис- и транс-изомеры. цис не охарактеризован транс Анализ для C19H19N4O3SF: Вычислено: С, 56,71; Н, 4,76: N, 13,92; S 7,97; F 4,72; Найдено: С, 56,96; Н, 4,76: N, 13,90; S 7,96;(E=15680.556); 245.00 нм (E=26956.305). Соединения, описанные в примерах 2-4,получали по существу так, как подробно описано в примере 1A-E, с использованием N-метилN-триметилсилилацетамида вместо бис(триметилсилил)ацетамида. Пример 2(E=12272); 252.0 нм (Е=21329). транс Анализ для C20H21N4O3SF: Вычислено: С, 57,68; Н, 5,08: N, 13,45; цис Анализ для С 20 Н 20N4 О 3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12,89; Найдено: С, 55,29; Н, 4,89: N, 12,96;(Е=11944); 252.0 нм (Е=20932). транс Анализ для С 20 Н 20N4 О 3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12,89; Найдено: С, 55,45; Н, 4,70: N, 12,77; цис Анализ для С 20 Н 20N4 О 3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12,89; Найдено: С, 55,47; Н, 4,71: N, 12,84;(Е=20136); 242.0 нм (Е=17889). Соединения, описанные ниже, получали по существу так, как подробно описано в примере 1 А-Е, если не указано иначе. Пример 5 цис Анализ для C19H19FN4O3S: Вычислено: С, 56,71; Н, 4,76: N, 13,92; Найдено: С, 56,62; Н, 4,60: N, 13,86;(Е=21819). транс Анализ для C19H19FN4O3S: Вычислено: С, 56, 71; Н, 4,76: N, 13,92; Найдено: С, 56,90; Н, 4,69: N, 13,85; цис Анализ для C20H21FN4O4S: Вычислено: С, 55.55; Н, 4.89; N, 12.96; Найдено: С, 55.72; Н, 4.89; N, 12.86.(Е=18629); 260.0 нм (Е=20801). транс Анализ для C20H21FN4O4SН 2 О: Вычислено: С, 53.32; Н, 5.15; N, 12.24; Найдено: С, 53.23; Н, 5.11; N, 12.24. Это соединение получали по существу так,как подробно описано в примерах 1 А-Е, с использованиемN-метил-N-триметилсилилацетамида вместо бис(триметилсилил)ацетамида. цис Анализ для C21H23N4O4SF: Вычислено: С, 56.59; Н, 5.19; N, 12.55; Найдено: С, 56.42; Н, 5.24; N, 12.36.(Е=19090); 259.0 нм (Е=21760). транс Анализ для C21H23N4O4SF: Вычислено: С, 56.59; Н, 5.19; N, 12.55; Найдено: С, 56.52; Н, 5.20; N, 12.45. цис Анализ для С 19 Н 18N4 О 3SF2: Вычислено: С, 54,28; Н, 4,32; N, 13.33; Найдено: С, 54,19; Н, 4,47: N, 13,53; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):7.47 (d.(Е=17236). транс Анализ для С 19 Н 18N4 О 3SF20,5 Н 2 О: Вычислено: С, 53,14; Н, 4,46: N, 13,05; Найдено: С, 53,52; Н, 4,41: N, 13,05; 1 цис не охарактеризован транс Анализ для С 20 Н 22N4O4S: Вычислено: С, 57,96; Н, 5,35: N, 13,52; Найдено: С, 57,91; Н, 5,19: N, 13,35; 1 Это соединение получали по существу в соответствии с методикой, подробно описанной в примере 1 А-Е, за исключением того, что нбутиллитий (15,85 ммоль) медленно добавляли к раствору, который получали следующим образом. Холодный (-78 С) раствор бис(триметилсилил)амида лития (15,84 ммоль) и Nэтилацетамида (15,85 ммоль) в тетрагидрофуране перемешивали в течение 1 ч с последующим добавлением хлортриметилсилана(15,84 ммоль). Получаемый раствор перемешивали в течение 15 мин и затем позволяли ему медленно подогреться до комнатной температуры. Примечание: раствор охлаждали до -78 С до добавления н-бутиллития. цис Анализ для C21 Н 22N4O4SF2: Вычислено: С, 56,24; Н, 4,94: N, 12,49; Найдено: С, 56,11; Н, 5,09: N, 12,24; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):8.05 (t,1H); 7.35-7.55 (m, 2H); 6.9-7.3 (m, 5 Н); 6.88 (dd,1H); 6.18 (s, 1H); 3.85 (септет, 1H); 3.05 (р, 2H); 1.25 (d, 6H); 0.95 (t, 3 Н).(Е=13119.76). транс Анализ для C21H22O3SF2: Вычислено: С, 56,24; Н, 4,94: N, 12,49; Найдено: С, 56,46; Н, 4,85: N, 12,20; цис Анализ для C18H17N5O3SF2: Вычислено: С, 51,30; Н, 4.07: N, 16,62; Найдено: С, 50,94; Н, 4,00; N, 16,63; 1(Е=36270.16). транс Анализ для C18H17N5O3SF2: Вычислено: С, 51,30; Н, 4,07: N, 16,62; Найдено: С, 51,35; Н, 4,03; N, 16,68; 1UV/Vis (95% EtOH): 298.8 нм (Е=9947.5); 254.5 нм (Е=21502); 212.8 нм (Е=36486). транс Анализ для C19H17N4O3SF3: Вычислено: С, 52,05; Н, 3,91: N, 12,77; Найдено: С, 51,76; Н, 4,21; N, 12,47; 1 цис не охарактеризован транс Анализ для С 19 Н 16N4 О 3SF4: Вычислено: С, 50,00; Н, 3,53: N, 12,28; Найдено: С, 49,97; Н, 3,59: N, 12,03; 1 цис Анализ для C19H17N4O3SF2: Вычислено: С, 52,05; Н. 3,91: N. 12,77; Найдено: С, 52,09; Н, 3,96; N, 12,61; 1 Это соединение получали по существу так,как подробно описано в примере 7. цис Анализ для С 20 Н 20N4 О 3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12.89; Найдено: С, 55,27; Н, 4,67: N, 12,77; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):8.00 (m,1H); 7.45 (s, 1H); 7.0-7.35 (m, 6H); 6.85 (d, 1H);max=254 нм (E=20592); 214.5 нм (Е=36320). транс Анализ для C20H20N4O3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12,89; Найдено: С, 55,00; Н, 4,56: N, 13,02; 1 цис Анализ для C19H18N4O3SF2: Вычислено: С, 54,28; Н, 4,32: N, 13,33; Найдено: С, 54,50; Н, 4,25: N, 13,14; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):7.44 (m,2H); 7.22 (m, 2H); 7.11 (m, 4 Н); 7.00 (m, 1H); 6.88 (d, 1H); 6.18 (s, 1H); 3.79 (септет, 1H); 1.20(Е=20450); 214.5 нм (Е=37022). транс Анализ для С 19 Н 18N4 О 3SF2: Вычислено: С, 54,28; Н, 4,32: N, 13,33; Найдено: С, 54,50; Н, 4,34: N, 13,54; 1 цис Анализ для С 19 Н 18N4 О 3SF2: Вычислено: С, 54,28; Н, 4,31: N, 13,33; Найдено: С, 54,51; Н, 4,56: N, 13,41; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):7.49 (s,2H); 7.46 (m, 1H); 7.22 (m, 1H); 7.05-7.15 (m,4H); 7.04 (s, 1H); 6.91 (d, 1H); 6.21 (s, 1H); 3.82(Е=19511); 241 нм (Е=16526). Соединения примеров 17 и 18 получали по существу так, как подробно описано в примере 7. Пример 17 цис Анализ для C20H20N4O3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N, 12,90; Найдено: С, 55,48; Н, 4,54: N, 12,79; 1(E=11012); 254.0 нм (E=22088). транс Анализ для С 20 Н 20N4 О 3SF2: Вычислено: С, 55,29; Н, 4,64: N. 12,90; Найдено: С, 55,53; Н, 4,65: N, 12,96; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):8.13 (d,J=5Hz, 1H); 7.42 (d, J=1 Hz, 1H); 7.40 (q, J=8 Hz,1H); 7.22-7.13 (m, 4H); 7.05 (dd, J=8,1 Hz, 1H); 6.92 (d, J=8 Hz, 1H); 6.61 (s, 1H); 3.83 (септет, 25 цис Анализ для C20H19N4O3SF3: Вычислено: С, 55,09; Н, 4,23: N, 12,38; Найдено: С, 52,97; Н, 4,38: N, 12,37; 1 Н NMR (300 MHz, DMSO-d6):8.08 (m,1H); 7.49 (s, 1H); 7.37 (m, 1H); 6.95-7.20 (m, 4H); 6.87 (d, 1H); 6.19 (s, 1H); 3.84 (септет, 1H); 2.58(E=12010); 244 нм (E=19690). транс Анализ для C20H19N4O3SF3: Вычислено: С, 53,09; Н, 4,23: N, 12,38; Найдено: С, 53,31; Н, 4,29: N, 12,50; 1(E=20108); 244 нм (E=18099). Настоящие соединения, по-видимому, ингибируют репликацию плюс-цепочечной вирусной РНК путем препятствия структуре и/или функции комплекса вирусной репликации (связанный с мембраной комплекс вирусных и клеточных белков). Были выделены мутантные риновирусы и энтеровирусы, которые демонстрируют очень низкие уровни толерантности к лекарственным средствам. Эти мутанты содержат одно аминокислотное замещение в белке, который экспрессируется вирусным геном, известным как "3 А". Следовательно, соединения настоящего изобретения ингибируют риновирусы и энтеровирусы путем ингибирования функции 3 А. Ген 3 А кодирует гидрофобный белок, который служит в качестве каркасного белка, который присоединяет белки комплекса репликации к внутриклеточным мембранам. Репликативная стратегия флавивирусов,таких как вирус гепатита С (HCV) и вирус бычьей диареи (BVDVB) сходна с репликативной стратегией риновируса и энтеровируса, об 001389 26 суждаемых выше. В частности, оба семейства вирусов содержат одноцепочечную мессенджерсмысловую РНК, которая репликцируется в цитоплазматическом комплексе через промежуточную минус-цепочечную РНК. Кроме того,оба семейства вируса транслируют их геном в полппротеин, который впоследствии расщепляется. Кроме того, комплексы репликации обоих вирусов плотно ассоциируются с внутриклеточными мембранами. Наконец, оба семейства вирусов имеют аналогичные геномные структуры,включая присутствие 5' и 3'-нетранслированной области, которые необходимы вирусам для репликации. Имеется два белка HCV, которые имплицировались данной внутриклеточной ассоциацией: NS2 и NS4. Предполагается, что либоNS2, либо NS4 аналогичен белку 3 А пикорнавируса. В соответствии с этим, еще одним воплощением настоящего изобретения является способ лечения или профилактики флавивирусной инфекции, предусматривающий введение хозяину, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Предпочтительно подавление гепатита С. Как отмечается выше, соединения настоящего изобретения полезны в качестве антивирусных агентов. Они показали ингибирующую активность против различных энтеровирусов и риновирусов. Воплощением настоящего изобретения является способ лечения или профилактики пикорнавирусной инфекции, предусматривающий введение хозяину, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Термин эффективное количество", используемый здесь, означает количество соединения формулы I, которое способно ингибировать вирусную репликацию. Ингибирование пикорнавирусов, предусматриваемое настоящим способом, включает либо терапевтическое,либо профилактическое лечение в зависимости от соответствия. Конкретная доза соединения,вводимого согласно этому изобретению для получения терапевтического или профилактического действия, будет, конечно, определяться конкретными обстоятельствами, относящимися к данному случаю, включая, например, вводимое соединение, способ введения, состояние,которое лечат, и индивидуум, который лечат. Типичная суточная доза содержит дозированный уровень активного соединения данного изобретения примерно от 0,01 мг/кг до 50 мг/кг массы тела. Предпочтительные суточные дозы обычно составляют примерно от 0,05 мг/кг до 20 мг/кг и идеально примерно от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг. Соединения можно вводить различными путями, включая пероральный, ректальный,трансдермальный, подкожный, внутривенный, 27 внутримышечный и интраназальный. Соединения настоящего изобретения перед введением предпочтительно изготавливают в виде готовой препаративной формы. Следовательно, еще одним воплощением настоящего изобретения является фармацевтическая готовая препаративная форма, содержащая эффективное количество соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель для него. Активный ингредиент в таких готовых препаративных формах составляет от 0,1 до 99,9% по массе готовой препаративной формы."Фармацевтически приемлемый" означает, что носитель, разбавитель или наполнитель совместим с другими ингредиентами готовой препаративной формы и не вреден для его реципиента. Настоящие фармацевтические готовые препаративные формы получают известными методиками с использованием хорошо известных и легкодоступных ингредиентов. При изготовлении композиций настоящего изобретения активный ингредиент обычно смешивают с носителем пли разбавляют носителем, или заключают в носитель, который может быть в форме капсулы, саше, бумаги или другого контейнера. Когда носитель служит в качестве разбавителя,он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который действует в качестве носителя, наполнителя или среды для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, лепешек, саше, крахмальных облаток, эликсиров,суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (твердых или в жидкой среде); мазей, содержащих, например, до 10% по массе активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиторий, стерильных инъецируемых растворов, стерильных порошков и тому подобное. Следующие примеры готовых препаративных форм являются только иллюстративными и никоим образом не предназначаются для ограничения объема изобретения. Термин "активный ингредиент" означает соединение формулыI или его фармацевтически приемлемую соль. Готовaя препаративная форма 1 Твердые желатиновые капсулы получают с использованием следующих ингредиентов: Количество(мг/капсула) Активный ингредиент 250 Крахмал высушенный 200 Стеарат 10 Всего 460 мг Готовая препаративная форма 2 Таблетку получают с использованием приведенных ниже ингредиентов: Активный ингредиент Целлюлоза микрокристаллическая Диоксид кремния, мелкодисперсный Стеариновая кислота Всего Компоненты смешиваются и прессуются с образованием таблеток каждая весом 665 г. Готовая препаративная форма 3 Получают аэрозольный раствор, содержащий следующие компоненты: Масса Активный ингредиент 0,25 Метанол 25,75 Пропелент 22 (хлордифторметан) 70,00 Всего 100,00 Активное соединение смешивают с этанолом и смесь добавляют к части пропелента 22,охлажденного до -30 С, и переносят в заполняющее устройство. Требуемое количество затем подают в контейнер из нержавеющей стали и разбавляют остальным количеством пропелента. Контейнер затем снабжают клапанным элементом. Готовая препаративная форма 4 Таблетки, каждая из которых содержит 60 мг активного ингредиента, получают следующим образом: Количество(в виде 10% раствора в воде) 4 Натриевый карбоксиметилкрахмал 4,5 Стеарат магния 0,5 Тальк 1 Всего 15 Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито 45 меш по шкале США и тщательно смешивают. Водный раствор,содержащий поливинилпирролидон, смешивают с получаемым порошком, и смесь затем пропускают через сито 14 меш по шкале США. Полученные таким образом гранулы сушат при 50 С и пропускают через сито 18 меш США. Натриевый карбоксиметилкрахмал, стеарат магния и тальк, предварительно пропущенные через сито 60 меш США, затем добавляют к гранулам, которые, после смешивания, прессуют на таблетирующем устройстве, получая таблетки, весом 150 мг. Готовая препаративная форма 5 Капсулы, каждая из которых содержит 80 мг активного ингредиента, получают следующим образом. Количество(мг/капсула) Активный ингредиент 80 мг Крахмал 59 мг Микрокристаллическая целлюлоза 59 мг Стеарат магния 2 мг Всего 200 мг Активный ингредиент, целлюлозу, крахмал и стеарат магния смешивают, пропускают через сито 45 меш США и заполняют ими твердые желатиновые капсулы по 200 мг. Готовая препаративная форма 6 Суппозитории, каждая из которых содержит 225 мг активного ингредиента, изготавливают следующим образом: Активный ингредиент 225 мг Глицериды насыщенных жирных кислот 2000 мг Всего 2225 мг Активный ингредиент пропускают через сито 60 меш по шкале США и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот,предварительно расплавленных с использованием минимального необходимого тепла. Смесь затем выливают в форму для суппозиторий номинальной емкостью 2 г и оставляют охладиться. Готовая препаративная форма 7 Суппозитории, каждая из которых содержит 50 мг активного ингредиента на 5 мл дозу,изготавливают следующим образом: Активный ингредиент 50 мг Натриевая карбоксиметилцеллюлоза 50 мг Сироп 1,25 мг Раствор бензойной кислоты 0,10 мл Отдушка сколько нужно Краситель сколько нужно Очищенная вода до общего 5 мл количества Активный ингредиент пропускают через сито 45 меш США и смешивают с натриевой карбоксиметилцеллюлозой и сиропом с получением однородной пасты. Раствор бензойной кислоты, отдушку и краситель разбавляют частью воды и добавляют к пасте при перемешивании. Затем добавляют воду в количестве, достаточном для получения требуемого объема. Готовая препаративная форма 8 Внутривенную готовую препаративную форму можно получить следующим образом: Активный ингредиент 100 мг Изотоничный солевой раствор 1000 мл 30 Раствор указанных выше ингредиентов обычно вводят внутривенно субъекту со скоростью 1 мл в минуту. Следующий эксперимент проводили для демонстрации способности соединений формулы I ингибировать некоторые вирусы. Способ испытания для анализа антипикорнавирусной активности Клетки почек африканских мартышек(BSC-1) или клетки Hela (5-3) выращивали в колбах Falcon на 25 см 3 при 37 С в среде 199 с 5 процентной инактивированной фетальной бычьей сывороткой (FBS); пенициллином (150 единиц на 1 мл) и стрептомицином (150 микрограмм на миллитр (мкг/мл). Когда образовались сливающиеся монослои, супернатантную среду для роста удаляли и в каждую колбу добавляли 0,3 мл вируса с подходящим разведением (ЕСНО-вирус, вирус Менго, вирус Коксаки, вирус полиомелита или риновирус). После абсорбции в течение одно часа при комнатной температуре пласт инфицированных вирусами клеток покрывали средой, содержащей одну часть 1 процентного ионагара 2 и одну часть среды 199 двойной крепости с FBS, пенициллином и стрептомицином, которая содержит лекарственное средство в концентрациях 100, 50, 25, 12, 6,3 и 0 мкг/мл. Колба, не содержащая лекарственное средство, служила в качестве контроля для этого испытания. Исходные растворы винилацетиленбензимидазольных соединений разбавляли диметилсульфоксидом до концентрации 104 мкг/мл. Колбы затем инкубировали в течение 72 ч при 37 С для полиовируса, вируса Коксаки,ЕСНО-вируса и вируса Менго и 120 ч при 32 С для риновируса. Вирусные бляшки были видны в тех областях, в которых произошло инфицирование вирусом и его репродуцирование в клетках. В каждую колбу для инактивирования вируса и для фиксации клеточного пласта к поверхности колбы добавляли раствор 10 процентного формалина и 2 процентного ацетата натрия. Вирусные бляшки, независимо от размера, подсчитывали после окрашивания площадей вокруг клеток кристаллическим фиолетовым. Число бляшек сравнивали с числом бляшек контрольного опыта для каждой концентрации лекарственного средства. Активность испытуемого соединения выражали как процент снижения бляшек или процент ингибирования. Альтернативно, в качестве меры активности можно использовать концентрацию лекарственного средства, которая ингибирует образование бляшек на 50 процентов. 50 процентное ингибирование указывается символом IC50. Анализ in vitro CPE/XТТ на действие противBVDV Клетки MDBK диспергировали в титрационном микропланшете на 96 лунок при 10000 клеток на лунку минимальной существенной средой, содержащей сбалансированный солевой раствор Эрла (EBSS), 2% лошадиную сыворот 31 ку, пеницилин (100 единиц/мл) и стрептомицин(100 мкг/мл). Клетки микропланшетов выращивали при 37 С в инкубаторе в течение ночи. Клетки NDBK затем инфицировали 0,02 moi(множественность инфекции) вируса бычьей вирусной диареи (BVDV, ATCC VR-534). После оставления клеток для абсорбции вируса в клетках в течение 1-2 ч в лунки добавляли среду,содержащую серийные разбавления лекарственного средства, или только среду. После дальнейшего инкубирования в течение 3-4 дней(когда экстенсивный сре был виден в лунках только со средой), антивирусное действие испытуемых лекарственных средств оценивали путем проведения анализа ХТТ как описано ниже. Приготавливалась свежей ХТТ [натриевая соль внутренней соли 2,3-бис(метоксн-4-нитро 5-сульфофенил)-2 Н-тетразолий-5-карбоксанилида] при 1 мг/мл для теплой среды без FBS, и ее сразу использовали. На каждые 5 мл раствора ХТТ добавляли 25 мкл 5 мМ PMS (метосульфат феназина) в содержащем фосфатный буфер солевом растворе. Затем в каждую из лунок микротитрационного планшета добавляли 50 мкл свежеприготовленной смеси ХТТ/PMS. Инкубирование проводили при 37 С (СО 2) в течение 3-4 ч или до тех пор, пока не становилось видимым изменение окраски. Показание поглощения определяли при 450 нм/реф. 650 нм на спектрофотометре. Затем из линейной части каждой кривой зависимости доза-реакция определяли концентрацию лекарственного средства, требующуюся для достижения 50% цитотоксического действия, по сравнению с контролем без лекарственного средства и без вируса (ТС 50), и ингибирующую развитие вирусного цитопатического действия (сре) на 50% (IС 50). ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Соединение формулы IR3 представляет диметиламино, C1-C10 алкил, галоген(C1-С 6-алкил), С 3-С 7-циклоалкил,замещенный С 3-С 7-циклоалкил, фенил, замещенный фенил, нафтил, тиенил, тиазолидинил,фурил, пирролидино, пиперидино, морфолино или группа формулыR4 и R5 независимо представляют водород или C1-C4-алкил; или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п.1R5 представляет водород, метил или этил; или его фармацевтически приемлемая соль. 3. Соединение по п.2, в котором а равно 0 или 1; каждый R независимо представляет водород, фтор, метил, этил, метокси, этокси, диметиламино;R3 представляет диметиламино, С 1-С 4 алкил, С 3-С 7-циклоалкил или пирролидино; или его фармацевтически приемлемая соль. 4. Соединение по п.3, которое представляет 34 5. Фармацевтическая готовая препаративная форма, включающая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль,заявленные в любом из пп.1-4, ассоциированное с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или наполнителями. 6. Применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, охарактеризованных в любом из пп.1-4, в качестве фармацевтического средства. 7. Применение по п.6, при котором соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, охарактеризованные в любом из пп.1-4, используются в качестве антивирусного средства.