Твердые формы (s)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-((r)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1h-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)про­паноата и способы их применения

Изобретение относится к твердым формам (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и его солей, к способам их получения и лечения различных заболеваний. Беднарз Марк С. (US), Де Поль Сьюзан (CH), Канамарлапуди Раманаиах К. (US), Перлберг Анетт 017275 Заявка на данный патент заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США 60/975846, поданной 28 сентября 2007 г., вся совокупность признаков которой включена в настоящее описание путем ссылки. 1. Область изобретения Данное изобретение относится к твердым формам (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор 2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и его солей. 2. Предпосылки создания изобретения Различные твердые формы одного и того же соединения могут обладать в значительной степени разными свойствами. Например, аморфная форма лекарственного средства может обладать отличными характеристиками растворимости и различным характером биодоступности по сравнению с его кристаллической(ими) формой(ами), т.е. свойствами, которые могут влиять на то, каким образом следует вводить лекарственное средство для достижения оптимального эффекта. Аморфные и кристаллические формы лекарственного средства также могут обладать различными технологическими свойствами (например, текучесть, сжимаемость), скоростями растворения, растворимостью и стабильностью, все из которых могут оказывать влияние на изготовление дозируемых форм. Следовательно, по множеству причин желательно иметь доступ к разнообразным формам лекарственного средства. Более того, управляющие органы власти (например, Администрация по контролю за продуктами питания и лекарствами США) могут потребовать идентификации всех твердых (например, полиморфных) форм нового лекарственного вещества до получения содержащих его продуктов; A. Goho, Science News 166(8): 122-123(2004). Соединения могут существовать в одной или нескольких кристаллических формах, но их существование и характеристики не могут быть предсказаны с какой-либо уверенностью. Кроме того, не существует стандартного способа получения всех возможных полиморфных форм соединения. И даже после выявления одного полиморфа существование и характеристики других форм могут только быть определены путем дополнительных экспериментальных исследований. 3. Краткое изложение сущности изобретения Данное изобретение относится частично к твердым формам ингибитора триптофангидроксилазы (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноату и его фармацевтически приемлемым солям. Заслуживающие особого внимания твердые формы являются кристаллическими. Один вариант осуществления изобретения охватывает фармацевтические композиции, включающие описанные в данном изобретении твердые формы. Другой вариант осуществления изобретения охватывает способы лечения, регулирования и предотвращения различных заболеваний и состояний, которые включают применение описанных в данном изобретении твердых форм. 4. Краткое описание иллюстраций На фиг. 1 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма кристаллической формы (S)этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Дифрактограмма получена на дифрактометре Rigaku MiniFlex (медьK излучение). На фиг. 2 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма кристаллической формы гиппурата(S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Дифрактограмма получена на приборе Bruker D8Advance (медь-Ка излучение). На фиг. 3 представлен спектр комбинационного рассеяния кристаллической формы гиппурата (S)этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Спектр был получен на спектрометре Bruker RFS100 (возбуждение при 1064 нм). На фиг. 4 представлена рентгеновская порошковая дифрактограмма кристаллической формы сукцината(S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Дифрактограмма получена на приборе Bruker D8Advance (медь-K излучение). 5. Подробное описание изобретения Данное изобретение относится частично к твердым (например, кристаллическим) формам (S)-этил 2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и его фармацевтически приемлемым солям. Соединение представляет собой ингибитор триптофангидроксилазы. При введении животным соединение снижает периферические уровни серотонина и может использоваться для лечения широкого спектра заболеваний и нарушений. См. патентную заявку США 60/874596, поданную 12 декабря 2006 г. Данное изобретение также относится к дозируемым формам (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и его фармацевтически приемлемым солям и к способам их применения.-1 017275 5.1. Определения. Если не указано иное, выражения "заболевание или нарушение, опосредованное периферическим серотонином" и "заболевание и нарушение, опосредованное периферическим серотонином" означают заболевание и/или нарушение, имеющие один или несколько симптомов, на тяжесть протекания которых влияют периферические уровни серотонина. Если не указано иное, термины "регулировать", "регулирующий" и "регулирование" включают предотвращение рецидива определенного заболевания или нарушения у пациента, который уже страдал от данного заболевания или нарушения, и/или удлинение времени ремиссии у пациента, который страдал от данного заболевания или нарушения. Термины охватывают модулирование начала, развития и/или продолжительности заболевания или нарушения или изменения способа реакции пациента на заболевание или нарушение. Если не указано иное, термины "предотвращать", "предотвращение" и "профилактика" подразумевают действие, которое осуществляется перед тем, как пациент начнет страдать от определенного заболевания или нарушения, и которое ингибирует заболевание или нарушение или уменьшает тяжесть его протекания. Другими словами термин охватывает профилактику. Если не указано другого, "профилактически эффективное количество" соединения представляет собой количество, достаточное для предотвращения появления заболевания, или состояния, или одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием или состоянием, или для предотвращения возникновения его рецидива. Профилактически эффективное количество соединения означает то количество терапевтического агента, самого по себе или в сочетании с другими агентами, которое обеспечивает профилактическую пользу для предотвращения заболевания или состояния. Термин "профилактически эффективное количество" может включать количество, которое улучшает профилактику в целом или усиливает профилактическую эффективность другого профилактического агента. Если не указано иное, выражение "терапевтически эффективное количество" соединения представляет собой количество, достаточное для обеспечения терапевтической пользы при лечении или регулировании заболевания или состояния или отсрочки появления или минимизации одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием или состоянием. Терапевтически эффективное количество соединения означает то количество терапевтического агента, самого по себе или в сочетании с другой терапией, которое обеспечивает терапевтическую пользу при лечении или регулировании заболевания или состояния. Термин "терапевтически эффективное количество" может включать количество, которое улучшает терапию в целом, снижает или исключает симптомы или причины заболевания или состояния или усиливает терапевтическую эффективность другого терапевтического агента. Если не указано иное, термины "лечить", "подвергать лечению" и "лечение" подразумевают действие, которое осуществляется в то время как пациент страдает от определенного заболевания или нарушения и которое уменьшает тяжесть протекания заболевания или нарушения или одного или нескольких его симптомов, или задерживает, или замедляет развитие заболевания или нарушения. Если не указано иное, термин "включать" имеет такое же значение, что и термин "включает, но не ограничивается указанным". Аналогично термин "такой как" имеет такое же значение, как и термин "такой как, но не ограничиваясь указанным". Если не указано иное, одно или несколько прилагательных, непосредственно предшествующих ряду существительных, следует рассматривать как относящиеся к каждому из этих существительных. Например, выражение "необязательно замещенный алкил, арил или гетероарил" имеет такое же значение,как и "необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил". Если не указано другого, структура или название соединения или типа соединений охватывает все формы такого соединения или типа соединений и все композиции, включающие такое соединение или типы соединений. Также следует отметить, что подразумевается, что любой атом, показанный на рисунке с недостаточно насыщенной валентностью, связан с достаточным числом атомов водорода для заполнения недостающей валентности. Кроме того, химические связи, обозначенные одной сплошной линией, параллельной одной штриховой линии, охватывают как простые, так и двойные (например, ароматические) связи,если это позволяет валентность. Структуры, которые представляют собой соединения с одним илинесколькими хиральными центрами, но стереохимия которых не указана (например, жирными или штриховыми линиями), включают чистые стереоизомеры и их смеси (например, рацемические смеси). Аналогично, названия соединений с одним или несколькими хиральными центрами, для которых не указана точно стереохимия данных центров, включают чистые стереоизомеры и их смеси. 5.2. Формы (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Данное изобретение относится к твердым формам (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор 2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и его фармацевтически приемлемым солям. Заслуживающие особого внимания твердые формы являются кристаллическими. Один вариант осуществления изобретения относится к кристаллическому (S)-этил-2-амино-3-(4-(2 амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноату в виде свободного основания. Одна форма данного соединения имеет температуру плавления, составляющую примерно 104 С, как определено методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) (температура начала плавления). Данная форма имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму (XRPD), содержащую пики, расположенные примерно при 10,7, 12,2, 12,8, 17,7 и/или 22,0 2. Как хорошо понятно специалистам в данной области, относительные интенсивности пиков на дифрактограмме XRPD кристаллического вещества могут изменяться в зависимости от способа получения образца и сбора данных. Учитывая это, пример распределения пиков на порошковой дифрактограмме XRPD приведен на фиг. 1. Другой вариант осуществления включает кристаллический гиппурат (S)-этил-2-амино-3-(4-(2 амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноата. Одна форма данного соединения имеет температуру плавления около 142 С (начало плавления по данным ДСК с пиком около 147 С). Данная форма имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, содержащую пики, расположенные примерно при 8,2, 9,5, 12,6, 16,9, 23,8, 22,0, 22,7,24,3 и/или 29,1 2. Пример распределения пиков на порошковой дифрактограмме (XRPD) данной кристаллической формы приведен на фиг. 2. Пример Фурье-КР спектра данной кристаллической формы приведен на фиг. 3. Другой вариант осуществления включает кристаллический сукцинат (S)-этил-2-амино-3-(4-(2 амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноата. Одна форма данного соединения имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, содержащую пики, расположенные примерно при 7,7, 11,5, 11,7, 15,7, 17,9, 21,1 и/или 23,2 2. Пример распределения пиков на порошковой дифрактограмме (XRPD) данной кристаллической формы приведен на фиг. 4. Данное изобретение охватывает твердые вещества, которые представляют собой смеси как аморфных, так и кристаллических форм. Некоторые такие твердые вещества включают кристаллический (S)этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноат или его фармацевтически приемлемую соль в количестве, составляющем по меньшей мере примерно 50, 75, 80, 85, 90, 95 или 99 вес.%. Кристаллические соли (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата могут быть получены путем контактирования раствора, содержащего (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноат с фармацевтически приемлемой кислотой в условиях, достаточных для получения соли (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4 хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата; снижение растворимости соли в растворе в условиях, достаточных для получения кристаллической соли (S)этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата; и выделение кристаллической соли. Раствор может включать растворители, такие как изопропилацетат, этилацетат, этанол, изопропанол, метил-трет-бутиловый эфир и метилизобутилкетон. Заслуживающие особого внимания кислоты включают гиппуровую и янтарную кислоты. Растворимость соли в растворе может быть снижена путем охлаждения раствора, путем повышения концентрации в растворе (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата или путем добавления к раствору"антирастворителя" (т.е. растворителя, в котором соль не растворима). Примером антирастворителя является гептан. Кристаллическое свободное основание (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил 1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата может быть получено путем добавления основного водного раствора к органической суспензии для получения смеси, содержащей органическую и водную компоненты, где органическая суспензия включает соль (например, соль гиппуровой кислоты)(S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и органический растворитель; выде-3 017275 ления органической компоненты смеси и охлаждения и/или концентрирования органической компоненты для получения кристаллического (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Примеры органических растворителей включают простые эфиры. Примеры основных водных растворов включают водные растворы бикарбоната натрия. 5.3. Способы лечения. Данное изобретение относится к способу ингибирования триптофангидроксилазы (TPH), который включает контактирование ТРН с соединением по изобретению (т.е. раскрытым в данном изобретении соединением). В конкретном способе ТРН представляет собой изоформу ТРН 1. В конкретном способе ингибирование происходит in vitro, в другом - ингибирование осуществляется in vivo. Данное изобретение относится к способам лечения, профилактики и регулирования различных заболеваний и нарушений, опосредованных периферическим серотонином, которые включают ингибирование активности ТРН 1 у пациента, нуждающегося в таком лечении, профилактике или регулировании. Конкретные заболевания и нарушения включают карциноидный синдром и заболевания и нарушения желудочно-кишечного тракта. Примеры конкретных заболеваний и нарушений включают боли в животе(например, связанные с мозговидной карциномой щитовидной железы), тревожное состояние, карциноидный синдром, глютеновую болезнь, запор (например, запор, имеющий ятрогенную причину и идиопатический запор), болезнь Крона, депрессию, диабет, диарею (например, желчно-кислотную диарею, индуцированную энтеротоксином секреторную диарею, диарею, имеющую ятрогенную причину, идиопатическую диарею (например, идиопатическую секреторную диарею) и диарею "путешественника"), рвоту, функциональную боль в животе, функциональную диспепсию, синдром раздраженной толстой кишки(слизистый колит, IBS), непереносимость лактозы, множественная эндокринная неоплазия (MEN) типа I и II, синдром Огилвье, синдром панкреатической холеры (синдром Вернера-Моррисона), панкреатическую недостаточность, медуллярную параганглиому, склеродерму, соматическое нарушение и синдром Золлингера-Эллисона. 5.4. Фармацевтические композиции. Данное изобретение включает фармацевтические композиции и дозируемые формы, включающие твердые формы по изобретению. Фармацевтические композиции и дозируемые формы по данному изобретению необязательно могут содержать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или эксципиентов. Некоторые фармацевтические композиции представляют собой отдельные единичные дозируемые формы, подходящие для перорального, местного, чресслизистого (например, назального, легочного, сублингвального,влагалищного, буккального или ректального), парентерального (например, подкожного, внутривенного,в виде болюсной инъекции, внутримышечного или внутриартериального) или чрескожного введения пациенту. Примеры дозируемых форм включают, но не ограничиваются указанным, таблетки; таблетки в виде капсул; капсулы, такие как мягкие эластичные желатиновые капсулы; облатки; пилюли; пастилки; дисперсии; суппозитории; мази; припарки (средства для лечения с помощью припарок); пасты; порошки; перевязочные материалы; кремы; пластыри; растворы; пэтчи; аэрозоли (например, назальные спреи или ингаляторы); гели; жидкие дозируемые формы, подходящие для перорального или чресслизистого введения пациенту, включая суспензии (например, водные или неводные жидкие суспензии, эмульсии масло-в-воде или жидкие эмульсии вода-в-масле), растворы и эликсиры; жидкие дозируемые формы, подходящие для парентерального введения пациенту; и стерильные твердые вещества (например, кристаллические или аморфные твердые вещества), влагосодержание которых может быть восстановлено для получения жидкой дозируемой формы, подходящей для парентерального введения пациенту. Препараты должны быть пригодными для способа введения. Например, при пероральном введении может потребоваться растворимая в кишечнике оболочка для защиты активного ингредиента от разложения в желудочно-кишечном тракте. В другом примере активный ингредиент можно вводить в виде липосомного препарата для защиты его от разлагающих ферментов, облегчения транспорта в системе кровообращения и/или эффективной доставки через клеточные мембраны к внутриклеточным сайтам. Композиция, форма и тип дозируемых форм по изобретению обычно будут изменяться в зависимости от их применения. Например, дозируемая форма, используемая при остром лечении заболевания, может содержать большие количества одного или нескольких активных ингредиентов, которые она содержит, по сравнению с дозируемой формой, используемой при хроническом лечении того же заболевания. Аналогично,парентеральная дозируемая форма может содержать меньшие количества одного или нескольких из активных ингредиентов, которые она включает, чем пероральная дозируемая форма, используемая для лечения того же заболевания. Эти и другие особенности, в отношении которых будут отличаться друг от друга определенные дозируемые формы, охватываемые данным изобретением, будут очевидны для специалистов в данной области. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990). В 3-горлую круглодонную колбу емкостью 3 л, оборудованную механической мешалкой, контроллером температуры и вводом азота, загружали трет-бутоксид калия (Aldrich 95%, 84,6 г, 0,716 моль) и ДМСО (400 мл, 4 Х) при комнатной температуре и перемешивали в течение 15 мин. К данному раствору добавляли пиразол 2 (59 г, 0,719 моль) с последующим промыванием ДМСО (50 мл, 0,5 Х). Полученный оранжевый мутный раствор перемешивали в течение 15 мин и добавляли фторид 1 (100 г, 0,477 моль) с последующим промыванием ДМСО (50 мл, 0,5 Х). Затем данную смесь нагревали до 50 С и выдерживали в течение 5 ч при данной температуре. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли МТВЕ (750 мл) и добавляли воду (500 мл), получая коричневую мутную смесь. После перемешивания в течение 15 мин органический слой отделяли и последовательно промывали 1 н. HCl(250 мл), насыщенным раствором соли (250 мл) и водой (250 мл). Анализ в растворе органического слоя проводили с использованием ГХ (конверсия 99%, выходы в растворе 3 и его региоизомера 4 составляли 83% и 17% соответственно). Раствор в МТВЕ затем концентрировали в вакууме до общего объема примерно 200 мл (KF продемонстрировал 0,737% воды). Добавляли ТГФ (500 мл), концентрировали до объема 2 Х (KF=0,158%). Последовательные операции добавление ТГФ-концентрирование повторяли, получая 2 Х раствора (KF=0,023%), который непосредственно использовали на следующей стадии. Аналитические образцы соединений 3 и 4 очищали с помощью колоночной хроматографии и охарактеризовывали. Соединение 3: белые кристаллы. 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)7,80 (1 Н, д, J=2,3 Гц), 7,61 (1 Н, д, J=8,6 Гц), 7,58 (1 Н, д, J=2,5 Гц), 7,22(0,053%). К вышеуказанному раствору добавляли раствор i-PrMgCl в ТГФ (Aldrich, 2 М, 286 мл, 0,572 моль) при температуре 0-10 С в течение 1 ч. Полученный раствор перемешивали в течение 30 мин при 10 С (ГХ показала завершение обменной реакции магний-бром). Затем к раствору реактива Гриньяра добавляли этилтрифторацетат (74 мл, 0,620 моль) при температуре от -20 до -10 С в течение 45 мин,медленно нагревали до 0 С и перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Реакционную смесь выливали в 2 н. HCl (300 мл) при 0 С и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Органический слой разбавляли МТВЕ (500 мл) и промывали насыщенным раствором соли (250 мл), а затем водой (250 мл). Анализ в растворе органического слоя проводили с использованием ГХ (соединение 5: 67% выход в растворе, соответствующий региоизомер 6 присутствовал в количестве примерно 20% относительно соединения 5). Затем раствор концентрировали в вакууме до объема 2 Х. Для удаления воды добавляли ТГФ (500 мл) и упаривали до объема 2 Х. Повторяли операцию добавление ТГФконцентрирование до объема 2 Х. Добавляли гептан (500 мл), концентрировали до объема 2 Х для обмена растворителя, предназначенного для перекристаллизации. Опять добавляли гептан (500 мл) и концентрировали до объема раствора 3,5 Х. Раствор в гептане объемом 3,5 Х затем переносили в 3-горлую круглодонную колбу с рубашкой емкостью 1 л, оборудованную механической мешалкой, контроллером температуры и вводом азота. Раствор нагревали до 60 С и полученный гомогенный раствор медленно (1-2 ч)-5 017275 охлаждали до комнатной температуры при перемешивании, дополнительно охлаждали до 0 С и перемешивали в течение 30 мин при той же температуре. Кристаллы собирали и промывали охлажденным на льду гептаном (200 мл), сушили в вакууме при 50 С, получая бледно-желтое твердое вещество (соединение 5, 85,7 г, 99% чистота по данным ГХ, 62% выход из расчета на фторид 1). 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3)7,85 (1 Н, д, J=2,5 Гц), 7,48 (1 Н, д, J=1,7 Гц), 7,38 (1 Н, д, J=8,3 Гц), 7,31 В 3-горлую круглодонную колбу с рубашкой емкостью 3 л, оборудованную механической мешалкой, контроллером температуры и вводом азота, загружали последовательно димер дихлор(пентаметилциклопентадиенил)иридия(III) ([СрIrCl2]2, STREM, CAS: 12354-85-7, 34 мг, 0,043 ммоль), (1R,2R)-(-)-N-(4-толуолсульфонил)-1,2-дифенилэтилендиамин (STREM, CAS: 144222-34-4, 32 мг, 0,087 ммоль) и воду (400 мл, 4 Х) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 3 ч при 40 С, получая гомогенный оранжевый раствор. К раствору активного катализатора добавляли формиат калия (145,5 г, 1,73 моль) и раствор кетона, 1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтанона (100 г, 99% чистота по данным ГХ, 0,346 моль) в CH3CN (500 мл, 5 Х) при 40 С. Реакционную смесь затем перемешивали при 40 С в течение 2 ч, в этот момент с помощью ГХ было определено, что реакция завершилась. После охлаждения до 30 С водный слой (примерно 480 мл) удаляли. Органический слой (примерно 600 мл, 6 Х) обрабатывали активированным углем (Darco G-60,20 г, 0,2 Х) при 45 С в течение 2 ч и фильтровали через 1/4 дюймовый слой Celpure P65 (USP-NF, фармацевтическое качество, Sigma) и промывали CH3CN (200 мл, 2 Х). Фильтрат концентрировали до объема 250 мл (2,5 Х) и переносили в 3-горлую круглодонную колбу с рубашкой емкостью 2 л, оборудованную механической мешалкой и контроллером температуры. Для увеличения объема раствора до 300 мл (3 Х) добавляли дополнительно CH3CN (50 мл, 0,5 Х). Данный раствор нагревали до 60 С и при этой температуре к данному раствору добавляли воду (500 мл, 5 Х). После перемешивания в течение 15 мин при 60 С полученную подобную эмульсии молочную смесь медленно охлаждали до комнатной температуры. Кристаллы затем фильтровали при комнатной температуре и промывали смесью CH3CN/вода (1:2, 150 мл,1,5 Х). Влажный осадок на фильтре (108 г, KF: 8,83%) сушили в вакууме при 45 С в течение 4 ч, получая целевой спирт (белое твердое вещество, 95 г, 94% выход, 99% химическая чистота, 99% ее, KF: 0,014%). 1 Н ЯМР (метанол-d4, 400 МГц)2,19 (ушир. с, 3H), 5,23 (дд, 6,8 Гц, 7,2 Гц, 1 Н), 6,19 (д, 2,4 Гц, 1 Н),7,29 (д, 2 Гц, 1 Н), 7,42 (дд, 2,0 Гц, 6,4 Гц, 1 Н), 7,59 (д, 2,4 Гц, 1 Н), 7,68 (д, 8,4 Гц, 1 Н); 13 С ЯМР (метанол-d4)13,4, 67,2, 108,3, 121,7, 124,5, 127,4, 130,1, 131,9, 134,1, 136,4, 141,6, 152,3. ЖХ/МС: МН+=291. 6.3. Получение (S)-метил-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(4-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пропаноата Данное соединение получали в соответствии с литературной методикой (Shieh, et al., J. Org. Chem. 57:379-381 (1992. К раствору Boc-Tyr-OMe (Bachem, California, 100 г, 0,34 моль) и N-метилморфолина(51 г, 1,5 экв.) в дихлорметане (1000 мл) добавляли трифлатный ангидрид (ангидрид трифторметансульфоновой кислоты) (100 г, 1,05 экв.) в течение 2 ч при температуре от -5 до -15 С. Полученный красный раствор перемешивали при -10 С в течение 10 мин. Анализ методом ВЭЖХ показал полное исчезновение исходного вещества. Реакцию гасили 10%-ной лимонной кислотой (500 мл). Органический слой промывали 10%-ной лимонной кислотой (500 мл), а затем водой (500 мл). Полученный бледно-розовый раствор концентрировали при пониженном давлении до объема 200 мл. Раствор разбавляли ацетонитрилом (600 мл) и дополнительно концентрировали до получения 200 г раствора. Этот раствор использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Согласно оценке, проведенной путем удаления растворителя из образца досуха с получением низкоплавкого бледно-желтого твердого вещества, выход составлял 98%. ЖХ-МС (ESI): МН+=428,0, MNH4+=445,0. Данное соединение получали в соответствии с литературной методикой (Fxroozma, et al., Tetrahedron Lett. 40:213-216 (1999. Бис(пинаколато)дибор (90 г, 1,1 экв.), ацетат калия (63 г, 2 экв.), трициклогексинфосфин (2,3 г, 2,5% моль) и ацетат палладия (0,72 г, 1 мол.%) смешивали в ацетонитриле (950 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Добавляли раствор (S)метил-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(4-(трифторметилсульфонилокси)фенил)пропаноата (190 г, 0,32 моль) и полученную смесь нагревали при 80 С в течение 1 ч и охлаждали. Анализ методом ВЭЖХ показал, что исходное вещество израсходовалось полностью. Реакционную смесь гасили водным раствором бикарбоната калия (57 г в 475 мл воды) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь фильтровали через слой целлюлозы для удаления палладиевой черни. Образец органического слоя концентрировали и очищали колоночной хроматографией (градиент: от 1:10 до 1:4 смеси этилацетат/гексаны), получая (S)-метил 2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пропаноат в виде прозрачного масла. ЖХ-МС (ESI): МН+=406,2, MNH4+=423,2, М 2 Н+=811,5, M2NH4+=428,5. 1 Н ЯМР (CDCl3)7,76 (д, J=8,1 Гц, 2 Н), 7,15 (д, J=7,6 Гц, 2 Н), 4,96 (д, J=7,3 Гц, 1 Н), 4,60 (м, 1 Н),3,72 (с, 3H), 3,13 (м, 2 Н), 1,44 (с, 9 Н), 1,36 (с, 12 Н). Вышеуказанный органический слой сложного эфира перемешивали с водным раствором гидроксида лития (23 г в 500 мл воды) при комнатной температуре в течение 30 мин. pH полученной суспензии доводили примерно до 10 с использованием 6 н. соляной кислоты и фильтровали. Осадок на фильтре промывали водой (200 мл). Ацетонитрил удаляли из фильтрата при пониженном давлении, получая водную суспензию (950 мл, дополнительно добавляли воду во время отгонки). Суспензию фильтровали через слой целлюлозы и промывали водой (200 мл). Фильтрат промывали МТВЕ (500 мл) и повторно разбавляли с использованием 700 мл МТВЕ. Смесь подкисляли до pH примерно 4,5 с использованием 6 н. соляной кислоты. Органический слой промывали водой (500 мл) и концентрировали при пониженном давлении до получения соединения - кислоты в виде коричневого масла (206 г, 95% выход из расчета на оцененную методом ЯМР чистоту). Неочищенный продукт может быть непосредственно использован на следующей стадии. Альтернативно, соединение может быть очищено с помощью перекристаллизации или смеси МТВЕ/гептан, давая белое твердое вещество, которое содержит небольшое количество соответствующей бороновой кислоты. Масс-спектр (ESI): MH+=392,2, MNH4+=409,2, М 2 Н+=783,4, M2NH4+=800,4. 1 В 3-горлую круглодонную колбу емкостью 2 л, оборудованную механической мешалкой и контроллером температуры, добавляли (S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2 диоксаборолан-2-ил)фенил)пропановую кислоту (30,3 г, 0,078 моль), 2-амино-4,6-дихлорпиримидин(728 мл). К вышеуказанной перемешиваемой суспензии затем медленно добавляли водный раствор бикарбоната калия (27,85 г, 3,5 экв., в 173 мл H2O) таким образом, чтобы выделение газообразного CO2 не было интенсивным. Данную смесь нагревали при 75 С в течение 6 ч, в данный момент времени анализ-7 017275 методом ВЭЖХ показал более чем 99% конверсию исходного вещества. Этанол удаляли из смеси при пониженном давлении, получая водную суспензию (200 мл), дополнительно добавляли H2O (90 мл) и раствор концентрировали до объема 250 мл. К суспензии добавляли воду (90 мл), затем суспензию фильтровали и промывали водой (60 мл 2). Фильтрат экстрагировали этилацетатом (150 мл). Водный раствор обрабатывали Darco-G60 (6,0 г) при 60 С в течение 2 ч, фильтровали через целит (Celpure 300, 10 г) и разбавляли ТГФ (240 мл) и толуолом (180 мл). К смеси медленно добавляли 6 н. HCl при комнатной температуре до достижения pH 4,0. Органический слой отделяли, промывали водой (180 мл) и добавлялиDarco-G60 (6,0 г); полученную смесь нагревали при 60 С в течение 2 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит (Celpure 300, 10 г). Осадок на фильтре промывали ТГФ (30 мл 2). Полученный раствор концентрировали в вакууме до общего объема 180 мл, в данный момент продукт выпадал в осадок из раствора. Суспензию затем охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и осадок на фильтре промывали толуолом (30 мл 2). Твердое вещество сушили при нагревании в вакууме при 50 С в течение ночи, получая 24,0 г продукта в виде светло-желтого твердого вещества, которое по данным 1 Н ЯМР содержало 8 вес.% толуола, с выходом 75% (скорректированный). По данным ВЭЖХ продукт имел 91% чистоту с примесью 9,0% дикислоты. 6.6. Альтернативный способ получения (S)-3-(4-(2-амино-6-хлорпиримидин-4-ил)фенил)-2-(третбутоксикарбониламино)пропановой кислоты из (S)-2-амино-3-(4-боронофенил)пропановой кислоты с использованием карбоната калия в качестве основания.(S)-2-Амино-3-(4-боронофенил)пропановую кислоту (Ryscor Science, Inc., Северная Каролина, 1,0 г,4,8 ммоль) и карбонат калия (1,32 г, 2 экв.) смешивали в водном этаноле (15 мл этанола и 8 мл воды). Дитрет-бутилдикарбонат (1,25 г, 1,2 экв.) добавляли в виде одной порции. После перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре анализ методом ВЭЖХ показал полное исчезновение исходного соединения и образование (S)-3-(4-боронофенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты. Добавляли 2-амино-4,6-дихлорпиримидин (1,18 г, 1,5 экв.) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II)(34 мг, 1 мол.%) в качестве катализатора и полученную смесь нагревали при 65-70 С в течение 3 ч. Данные анализа методом ВЭЖХ показали полное исчезновение промежуточного соединения, (S)-3-(4 боронофенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты. После концентрирования и фильтрования по данным ВЭЖХ анализа полученного водного раствора в сравнении со стандартным раствором указанного в заголовке соединения получено 1,26 г (67% выход). 6.7. Альтернативный способ получения (S)-3-(4-(2-амино-6-хлорпиримидин-4-ил)фенил)-2-(третбутоксикарбониламино)пропановой кислоты из (S)-2-амино-3-(4-боронофенил)пропановой кислоты с использованием смеси карбонат калия/бикарбонат калия в качестве основания.(S)-2-Амино-3-(4-боронофенил)пропановую кислоту (10 г, 48 ммоль) и бикарбонат калия (14,4 г, 3 экв.) смешивали в водном этаноле (250 мл этанола и 50 мл воды). Ди-трет-бутилдикарбонат (12,5 г, 1,2 экв.) добавляли в виде одной порции. По данным анализа методом ВЭЖХ реакция не завершилась после перемешивания в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли карбонат калия (6,6 г, 1,0 экв.) и дополнительное количество ди-трет-бутилдикарбоната (3,1 г, 0,3 экв.). После перемешивания в течение 2,5 ч при комнатной температуре анализ методом ВЭЖХ показал полное исчезновение исходного соединения и образование (S)-3-(4-боронофенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты. Добавляли 2-амино-4,6-дихлорпиримидин (11,8 г, 1,5 экв.) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (0,34 г, 1 мол.%) в качестве катализатора и полученную смесь нагревали при 75-80 С в течение 2 ч. Данные анализа методом ВЭЖХ показали полное исчезновение промежуточного соединения (S)-3-(4 боронофенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты. Смесь концентрировали при пониженном давлении и фильтровали. Фильтрат промывали этилацетатом (200 мл) и разбавляли смесью ТТФ/МТВЕ в соотношении 3:1 (120 мл). Данную смесь подкисляли до рН примерно 2,4 с использованием 6 н. соляной кислоты. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток осаждали в изопропаноле, фильтровали и сушили при 50 С в вакууме, получая указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого твердого вещества (9,0 г, 48% выход). Чистота: 92,9% по данным анализа методом ВЭЖХ. Концентрирование маточного раствора дало дополнительно 2,2 г не совсем белого порошка (12% выход). Чистота: 93,6% по данным анализа методом ВЭЖХ. 6.8. Получение В 3-горлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, оборудованную механической мешалкой, кон-8 017275 троллером температуры и обратным холодильником, загружали монохлорангидрид (S)-3-(4-(2-амино-6 хлорпиримидин-4-ил)фенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты (20,0 г, 51 ммоль), (R)1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтанол (99% ее, 16,3 г, 56 ммоль, 1,1 экв.),Cs2CO3 (24,9 г, 76 ммоль, 1,5 экв.) и безводный 1,4-диоксан (150 мл, 7,5 Х, KF=0,003%). Смесь перемешивали в атмосфере азота и температуру повышали до 100 С при хорошем перемешивании. Реакционную смесь перемешивали при 100 С в течение 1 ч и дополнительно добавляли Cs2CO3(33,2 г, 102 ммоль, 2,0 экв.). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 18 ч при 100 С. Гетерогенную реакционную смесь охлаждали до 90 С и при хорошем перемешивании добавляли воду (150 мл,7,5 Х). Смесь охлаждали до комнатной температуры. К двухфазному раствору добавляли ди-третбутилдикарбонат (1,11 г, 5,1 ммоль, 0,1 экв.) при комнатной температуре и перемешивали в течение 2 ч при той же температуре. Добавляли толуол (100 мл, 5 Х), полученную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре и фазы разделяли. К органическому слою добавляли воду (100 мл,5 Х), полученную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре и фазы разделяли. Водный слой (pH 10,5) затем подкисляли до рН 7-6 с использованием 6 н. HCl при комнатной температуре. К данной смеси добавляли EtOAc (100 мл, 5 Х) и проводили дальнейшее подкисление до рН 4 с использованием 6 н. HCl при комнатной температуре при хорошем перемешивании. После отделения органического слоя водный слой экстрагировали EtOAc (100 мл, 5 Х). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (100 мл, 5 Х). EtOAc-слой затем концентрировали в вакууме до общего объема примерно 40 мл (2 Х). Добавляли EtOH (100 мл, 5 Х) и концентрировали до получения раствора объемом 2 Х. Последовательность добавление EtOH (150 мл, 7,5 Х)-концентрирование повторяли,получая раствор объемом 2 Х (S)-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропановой кислоты, который использовали непосредственно на следующей химической стадии. Анализ в растворе показал, что выход составлял примерно 75% из расчета на (S)-3-(4-(2-амино-6-хлорпиримидин-4-ил)фенил)-2-(третбутоксикарбониламино)пропановую кислоту, предполагая, что чистота соединения составляла 100%. Аналитически чистую Вос-кислоту получали с помощью колоночной хроматографии и охарактеризовывали. 1 Н ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц)1,30 (с, 9 Н), 2,34 (с, 3H), 2,86 (дд, 1 Н), 3,07 (дд, 1 Н), 4,14 (м, 1 Н),6,45 (д, 1 Н), 6,83 (с, 1 Н), 7,29 (дд, 1 Н), 7,33 (д, 2 Н), 7,61 (дд, 1 Н), 7,75 (д, 1 Н), 7,99 (д, 2 Н), 8,21 (д, 1 Н),12,5-12,8 (ушир., с, 1 Н); 13 С ЯМР (ДМСО-d6)13,99, 13,89, 22,05, 27,78, 28,08, 28,32, 31,21, 36,22, 54,83, 67,41, 67,73, 78,03,91,15, 107,69, 124,99, 125,18, 126,59, 128,12, 129,30, 130,23, 132,69, 134,65, 135,08, 140,73, 140,89, 150,41,155,39, 162,76, 166,17, 168,22, 173,40. Элементный анализ. Вычислено для C30H30ClF3N6O5: С, 55,69; Н, 4,67; N, 12,99. Найдено: С, 55,65; Н, 4,56; N, 12,74. Вышеуказанный 2 Х раствор разбавляли EtOH (60 мл, 3 Х) и CH3CN (100 мл, 5 Х) при комнатной температуре. К данному раствору (KF=0,034%) добавляли TBTU (97% чистота, Fluka, 19,7 г, 61 ммоль,1,2 экв.) и N-метилморфолин (6,17 мл, 56 ммоль, 1,1 экв.) в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. ВЭЖХ показала, что Вос-кислота количественно преобразована в сложный Вос-эфир (S)-этил-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропаноата. Реакционную смесь концентрировали примерно до объема 2 Х при пониженном давлении (температура бани 40 С, 100 мбар) и разбавляли EtOAc (100 мл, 5 Х) и водой (100 мл, 5 Х). Органический слой промывали насыщенным водным раствором KHCO3 (рН 8,5) (2100 мл, 5 Х) и насыщенным раствором соли (50 мл,2,5 Х). Этот красный органический слой затем обрабатывали активированным углем (Darco G-60, 8 г,0,4X) при 50 С в течение 1,5 ч и фильтровали через 1/4 дюймовый слой Celpure P65 (USP-NF, фармацевтическое качество, Sigma), осадок на фильтре промывали CH3CN (100 мл, 5 Х). Полученный фильтрат желтого цвета концентрировали до получения раствора объемом 2 Х. Добавляли CH3CN (100 мл, 5 Х) и раствор концентрировали до получения раствора объемом 2 Х. Последовательность операций добавлениеCH3CN-концентрирование повторяли, получая раствор сложного Вос-эфира в CH3CN объемом 2 Х, который непосредственно использовали на следующей стадии. Аналитически чистый сложный Вос-эфир получали с помощью колоночной хроматографии и охарактеризовывали. 1H ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц)1,11 (т, J=7,06 Гц, 3H), 1,31 (с, 9 Н), 2,34 (с, 3H), 2,85-3,08 (м, 2 Н),4,1-4,2 (м, 1 Н), 6,45 (д, J=2,29 Гц, 1 Н), 6,84 (с, 1 Н), 7,25-7,41 (м, 3H), 7,66 (дд, J=8,58, 2,10 Гц, 1 Н) 7,71 (д,J=2,1 Гц, 1 Н) 7,80 (д, J=8,58 Гц, 1 Н), 8,0 (д, J=8,39 Гц, 2 Н), 8,21 (д, J=2,29 Гц, 1 Н); 13 С ЯМР (ДМСО-d6)13,2, 14,0, 22,1, 24,7, 27,7, 28,0, 28,3, 28,4, 31,2, 33,9, 34,1, 36,2, 36,6, 55,0,56,3, 60,4, 67,1, 67,4, 67,7, 68,0, 78,2, 78,5, 91,1, 107,7, 122,1, 125,0, 125,2, 126,6, 127,7, 128,1, 129,3, 130,2,132,7, 134,7, 135,1, 140,4, 140,7, 150,4, 154,2, 155,3, 162,8, 166,1, 168,2, 171,9. Элементный анализ, вычислено для C32H34ClF3N6O5: С, 56,93; Н, 5,08; N, 12,45. Найдено: С, 57,20; Н, 4,86; N, 12,21. Вышеуказанный раствор объемом 2 Х разбавляли дополнительно CH3CN (160 мл, 8 Х) при комнат-9 017275 ной температуре. К данному раствору (KF=0,005%) добавляли метансульфоновую кислоту (18,4 мл, 255 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали при 45 С в течение 1 ч, в этот момент времени анализ методом ВЭЖХ показал, что реакция удаления Вос-группы завершилась. Реакционную смесь концентрировали до объема 2 Х, охлаждали до 0-5 С, разбавляли охлажденной льдом водой (100 мл, 5 Х),и этот водный раствор промывали дважды холодным изопропилацетатом (IPAc, 100 мл, 5 Х и 50 мл, 2,5 Х). Водный слой затем подщелачивали до pH 6 с использованием 20%-ного водного раствора Na2CO3 при 5 С при перемешивании. К этой смеси добавляли IPAc (100 мл, 5 Х) и проводили дополнительное подщелачивание до рН 8,5 с использованием 20%-ного водного раствора Na2CO3 при комнатной температуре при хорошем перемешивании. После отделения органического слоя водный слой экстрагировали IPAc(50 мл, 2,5 Х). Объединенные мутные органические слои концентрировали до получения раствора объемом 2 Х. Добавляли IPAc (100 мл, 5 Х) и смесь концентрировали до получения раствора объемом 2 Х, который содержал неорганические соли. Смесь фильтровали, твердые вещества промывали IPAc (100 мл,5 Х) и фильтрат концентрировали до получения раствора объемом 2 Х. По данным ВЭЖХ анализа данного прозрачного раствора в IPAc получено 20,8 г указанного в заголовке соединения (36 ммоль, 99% по данным ВЭЖХ, 71% выход для раствора). Аналитически чистое указанное в заголовке соединение получали с помощью колоночной хроматографии и охарактеризовывали. 1 Н ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц)1,15 (т, J=7,07 Гц, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,50 (м, 2 Н), 3,63 (т, J=6,82 Гц,1 Н), 4,07 (кв, J=7,07, 14,5 Гц, 2 Н), 6,50 (д, J=2,27 Гц, 2 Н), 6,87 (с, 1 Н), 7,33 (м, 3H), 7,65 (дд, J=8,59, 2,27 Гц, 1 Н), 7,71 (д, J=2,27 Гц, 1 Н), 7,81 (д, J=8,59 Гц, 1 Н), 8,01 (д, J=8,08 Гц, 2 Н), 8,26 (д, J=2,27 Гц, 1 Н); 13 С ЯМР (ДМСО-d6)13,4, 13,9, 18,5, 21,0, 21,5, 25,4, 55,6, 56,0, 59,9, 66,9, 67,1, 67,4, 67,7, 68,0,91,1, 107,7, 122,1, 124,9, 125,0, 125,2, 126,5, 127,7, 128,1, 129,4, 130,2, 132,7, 134,6, 135,1, 140,7, 140,9,150,4, 162,8, 166,2, 168,2, 174,8. Элементный анализ, вычислено для C27H26ClF3N6O3: С, 56,40; Н, 4,56; N, 14,62. Найдено: С, 56,51; Н, 4,52; N, 14,51. 6.9. Получение гиппурата (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол 1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. Раствор в IPAc объемом 2 Х (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата добавляли к мелкоизмельченной суспензии гиппуровой кислоты (6,49 г, 36 моль, 1,0 экв.) в IPAc (208 мл, 10 Х) и EtOH (42 мл, 2 Х) при 60 С. Прозрачный желтый раствор затем охлаждали до 50 С, в этот момент добавляли затравку для кристаллизации и перемешивали в течение 1 ч при той же температуре. Затем суспензию медленно охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение 14 ч при комнатной температуре. Твердые вещества отфильтровывали, промывали охлажденным на льду IPAc (0-5 С, 42 мл, 2 Х) и сушили в вакууме при 50 С в течение ночи, получая белое твердое вещество (19,0 г, 69% выход). Т.пл.: 145 С(температура начала плавления по данным ДСК). 6.10. Получение кристаллического (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата в виде свободного основания. Общее количество в 35,79 г гиппуратной соли суспендировали в 350 мл метил-трет-бутилового эфира. рН данной перемешиваемой суспензии доводили до рН 9,6 путем добавления 125 мл 10% вес./об. водного раствора карбоната натрия. Через 1,5 ч верхнюю органическую фазу отбирали и промывали 100 мл насыщенного раствора соли. Концентрирование органического слоя давало 28,47 г бледного оранжево-желтого стеклообразного масла, которое кристаллизовалось при стоянии в течение выходных дней. Твердые вещества превращали в крошку и растирали с 400 мл гептана примерно при 45 С. После охлаждения до температуры окружающей среды суспендированные кристаллы выделяли фильтрованием, промывали гептаном и сушили в вакууме примерно при 40 С, получая 25,49 г указанного в заголовке соединения в виде кристаллического белого порошка. Т.пл.: 104 С (температура начала плавления по данным ДСК). 6.11. Получение кристаллического сукцината (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3 метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата.(S)-Этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноат (80,2 мг) суспендировали в 0,2 мл ТГФ. К этому раствору добавляли раствор янтарной кислоты в ТГФ (16,4 мг в 0,372 мл раствора, 1 экв.) при перемешивании на магнитной мешалке. Добавляли по каплям гептан (1,8 мл) и полученную суспензию перемешивали в течение 1,5 ч. Дополнительно добавляли гептан (1 мл) и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (19,5 ч). Белое твердое вещество выделяли центрифугированием на фильтре(15000 об/мин, 5 мин, 0,22 мкм PVDF мембрана). Все процитированные выше ссылки (например, патенты и патентные заявки) включены в данное описание путем ссылки во всей своей полноте.- 10017275 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Кристаллический (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноат или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п.1, которое представляет собой кристаллический (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино 6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноат. 3. Соединение по п.2, которое имеет температуру плавления, составляющую примерно 104 С. 4. Соединение по п.2, которое имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, имеющую пики при одном или нескольких из значений около 10,7, 12,2, 12,8, 17,7 и/или 22,0 2. 5. Соединение по п.2, которое имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, по существу,такую, как показано на фиг. 1. 6. Кристаллическая соль (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1 ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата. 7. Кристаллическая соль по п.6, представляющая собой соль гиппуровой кислоты. 8. Кристаллическая соль по п.7, которая имеет температуру плавления, составляющую примерно 145 С. 9. Кристаллическая соль по п.7, которая имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, содержащую пики при одном или нескольких из значений около 8,2, 9,5, 12,6, 16,9, 21,8, 22,0, 22,7, 24,3 и/или 29,1 2. 10. Кристаллическая соль по п.7, которая имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, по существу, такую, как показано на фиг. 2. 11. Кристаллическая соль по п.7, которая имеет спектр комбинационного рассеяния, по существу,такой, как показано на фиг. 3. 12. Кристаллическая соль по п.6, представляющая собой соль янтарной кислоты. 13. Кристаллическая соль по п.12, которая имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, содержащую пики при одном или нескольких из значений около 7,7, 11,5, 11,7, 15,7, 17,9, 21,1 и/или 23,2 2. 14. Кристаллическая соль по п.12, которая имеет рентгеновскую порошковую дифрактограмму, по существу, такую, как показано на фиг. 4. 15. Способ получения кристаллической соли (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3 метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата, включающий контактирование раствора, содержащего (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноат, с фармацевтически приемлемой кислотой в условиях, достаточных для образования соли (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата; снижение растворимости соли в растворе в условиях, достаточных для получения кристаллической соли(S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата; и выделение кристаллической соли. 16. Способ по п.15, где раствор включает изопропилацетат, этилацетат, этанол, изопропанол, метилтрет-бутиловый эфир или метилизобутилкетон. 17. Способ по п.15, где кислота представляет собой гиппуровую кислоту или янтарную кислоту. 18. Способ по п.15, где растворимость соли снижают за счет охлаждения раствора. 19. Способ по п.15, где количество растворенной соли уменьшают путем увеличения концентрации(S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата в растворе. 20. Способ по п.15, где растворимость соли понижают путем добавления антирастворителя. 21. Способ по п.20, где антирастворитель представляет собой гептан. 22. Способ получения кристаллического (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3 метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата, включающий добавление основного водного раствора к органической суспензии для получения смеси, содержащей органическую и водную компоненты, где органическая суспензия содержит соль (S)-этил-2-амино-3-(4(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноата и органический растворитель; выделение органической компоненты из смеси; охлаждение и/или концентрирование органической компоненты для получения кристаллического (S)-этил 2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата и выделение кристаллического свободного основания. 23. Способ по п.22, где соль (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Нпиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата представляет собой соль гиппуровой кислоты.- 11017275 24. Способ по п.22, где органический растворитель представляет собой простой эфир. 25. Способ по п.22, где основный водный раствор включает бикарбонат натрия. 26. Способ по п.22, дополнительно включающий промывание кристаллического (S)-этил-2-амино-3(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2-трифторэтокси)пиримидин-4 ил)фенил)пропаноата органическим растворителем. 27. Способ лечения, профилактики или регулирования заболевания или нарушения, опосредованного периферическим серотонином, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении,профилактике или регулировании, терапевтически или профилактически эффективного количества кристаллического (S)-этил-2-амино-3-(4-(2-амино-6-R)-1-(4-хлор-2-(3-метил-1 Н-пиразол-1-ил)фенил)-2,2,2 трифторэтокси)пиримидин-4-ил)фенил)пропаноата или его фармацевтически приемлемой соли. 28. Способ по п.27, где заболевание или нарушение представляет собой карциноидный синдром. 29. Способ по п.27, где заболевание или нарушение представляет собой заболевание или нарушение желудочно-кишечного тракта. 30. Способ по п.29, где заболевание или нарушение представляет собой синдром раздраженной толстой кишки (слизистый колит).