Чайная композиция, улучшающая иммунитет, и способ ее производства

Раскрыта композиция, содержащая чай, 0,1-15 мас.% растений, выбранных из Shankhpushpi,Shatavari, Vidarikhand, Arogiapacha или их смеси; и 0,01-0,5 мас.% вкусоароматического агента. Также раскрыт способ изготовления композиции. Банерджее Гаутам, Бансал Виши, Бхат Джиоти, Добрийал Раджендра Мохан,Джоши Хем Чандра, Упадхйайа Смитха Ашок, Вайшнав Панкадж Прадьюмнараи (IN) Павлюченко И.В. (RU) Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к чайной композиции. Более конкретно изобретение относится к чайным композициям, содержащим растительные материалы и/или экстракты растений, которые обеспечивают улучшение иммунитета у потребителя, в то время как чайная композиция обладает вкусом и другими органолептическими свойствами, предпочитаемыми постоянными потребителями чая. Предшествующий уровень техники Люди испытывают много стрессов в их повседневной жизни. Такие стрессы включают психические нагрузки, вызванные неблагоприятными отношениями на работе, в обществе в целом и с ближайшими родственниками. Стрессовые нагрузки на человеческий организм также вызваны вдыханием загрязненного воздуха и потреблением загрязненной воды и пищи и воздействием ультрафиолетового и другого излучения. Другие источники стресса включают воздействие на человеческий организм непрерывных изменений окружающей температуры и других погодных условий. Полагают, что такое непрерывное воздействие на организм внешних стрессов вызывает снижение иммунитета человеческого организма к болезням как микробиологической, так и иной природы. Современный человек находится в постоянном поиске способов, которыми можно повысить свой иммунитет. Однако в основном для разрешения проблемы сниженного иммунитета люди не отдают предпочтение медицинским решениям. Это происходит потому, что хотя, как полагают, медицинские решения являются эффективными, они, как считают, вызывают нежелательные побочные эффекты. Таким образом, существует постоянная потребность в "натуральных" решениях таких проблем. Наука о траволечении является одной из древних наук, которая находит место в современных медицинских исследованиях. Примеры траволечения включают Аюрведу в Индии и Традиционную Китайскую медицину в Китае. Растительные лекарственные средства также считают эффективными, но многие растения и их экстракты не нравятся людям, т.к. они имеют характерные запахи и вкус, которые часто являются неприятными. Многие из них имеют очень горький вкус. Поэтому в прошлом было сделано немало попыток обеспечить полезность для здоровья таких растений и их активных компонентов при помощи различных средств, таких как таблетки или сиропы, имеющие высокие уровни подсластителей. Люди также считают такие средства приема "лекарственными", и среди потребителей имеется сопротивление их длительному приему, несмотря на доказанную пользу для здоровья. Настоящие изобретатели работали над проблемой обеспечения повышения иммунитета при использовании растений и экстрактов из растений. Одна из проблем, с которой столкнулись, состоит в том, что,хотя множество растений упоминают в традиционной медицинской системе для повышения иммунитета,часто не хватает научных доказательств эффективности. Кроме того, если эффективность выбранных растений продемонстрирована, их включение в пищевой продукт вызывает проблемы, когда речь идет об их приемлемости с точки зрения вкуса и вкусоароматических свойств. Настоящие изобретатели работали над включением этих выбранных растений в чай. Включение в чай сталкивается с несколькими проблемами. В то время как чай является вторым, наиболее потребляемым напитком после воды, потребители чая, являются очень требовательными по поводу вкуса и вкусоароматических свойств, которые он обеспечивает. Изучение потребительского спроса изобретателями показало, что потребители чая не готовы пожертвовать вкусом и запахом, к которым они привыкли в течение нескольких лет или десятков лет. Таким образом, настоящие изобретатели боролись с противоречивыми требованиями, чтобы обеспечить,с одной стороны, повышение иммунитета при помощи чайного напитка, и с другой стороны, не нарушить вкус и запах потребляемого чая. Кроме того, следует весьма заботиться о том, чтобы включаемые растения и их активные компоненты не взаимодействовали антагонистически с сотнями соединений, особенно, полифенолами, присутствующими в чае, тем самым, возможно, сводя на нет желаемую пользу для здоровья. На желаемый полезный для здоровья эффект влияет много физиологических факторов индивидуумов, потребляющих их,и поэтому полезный эффект очень сложно измерить и определить количественно. Поэтому хотя можно подумать, что чай является простой средой для включения растительных агентов, полезных для здоровья, имеется большое число взаимодействующих факторов, которые необходимо тщательно изучить,чтобы прийти к композиции, которая не только обеспечивает желаемую пользу для здоровья, но также является приемлемой для широкого круга людей. Два наиболее популярных чайных продукта представляют собой черный чай и зеленый чай. Как правило, для приготовления черного листового чая, свежие зеленые листья растения Camellia sinensis высушивают (способ, обеспечивающий потерю влаги собранными чайными листьям и вызывающий химические/биохимические изменения, особенно, в аромате), мацерируют и ферментируют (процесс, в котором ферменты в чайном листе используют атмосферный кислород для окисления различных субстратов с образованием окрашенных продуктов), а затем сушат при высоких температурах (для прекращения ферментативной активности). Зеленый чай производят, не подвергая чайные листья процессу ферментации. Частичная ферментация дает виды чая промежуточного типа, известные как чай "улунг". Чай потребляют в виде горячего напитка или в виде холодного напитка (например, холодный чай). Многочисленные соединения в листьях, которые придают напитку его уникальные органолептические свойства, являются лишь умеренно растворимыми в холодной воде. Поэтому чай обычно заваривают в горячей воде или кипящей воде. Для получения холодного чая этот настой охлаждают перед употребле-1 018249 нием. Виды чая, растворимые в холодной воде, обычно приготовляют с помощью распылительной сушки настойки, полученной экстракцией черного чая и/или чайных волокон, генерируемых в процессе изготовления черного чая.US 6030622 (Shehadeh, 2000) заявляет композицию растительного экстракта для стимуляции клеточно-опосредованного иммунитета, содержащую смесь водного экстракта листьев или корней Аронника, водного экстракта кожуры граната, водного экстракта листового чая и водного экстракта цветков гибискуса, где указанная композиция содержит приблизительно равные части указанных экстрактов в количествах, эффективных для стимуляции клеточно-опосредованного иммунитета. Множество таких композиций, полезных для здоровья, являются доступными через Интернет, см.,например, http://www.chakrapaniayurveda.com/ouiproducts.html. Таким образом, в то время как о многих композициях ранее сообщали и/или их продавали, вопрос об их длительном применении большой группой населения ввиду неприятного вкуса продукта остается без ответа. Задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить чайную композицию, которая, с одной стороны, обеспечивает благоприятное воздействие на иммунитет, в то время как, с другой стороны, сохраняет общепринятый вкус и другие органолептические свойства чая. Другая задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить чайную композицию, которую, как ожидают, будет потреблять большая группа населения на долговременной основе, т.к. она обладает общепринятым вкусом и другими органолептическими свойствами чая, и при этом обеспечивает гарантированное благоприятное воздействие на иммунитет. Сущность изобретения Настоящее изобретение предлагает чайную композицию, улучшающую иммунитет, содержащую:(а) по меньшей мере 80 мас.% предшественника чайного напитка или чая, готового к употреблению;(c) 0,01-0,5 мас.% вкусоароматического агента. В конкретном предпочтительном воплощении вкусоароматическим агентом является кардамон, базилик или их смесь. Изобретение относится к чайной композиции, которая имеет в составе предшественник чайного напитка или чай, готовый к употреблению, и конкретные выбранные растения и вкусоароматический агент,которые находятся в выбранных количествах, таких, что композиция обеспечивает повышение иммунитета потребителя чая, в то же время обеспечивая то, что композиция выглядит, пахнет и ощущается на вкус так же, как обычный чай."Чай" или "предшественник чайного напитка" для целей настоящего изобретения означает листовой материал из Camellia sinensis var. sinensis или Camellia sinensis var. assamica и сырье, полученное из них. Это может, например, быть черный чай, зеленый чай или чай улунг. Предшественник чайного напитка может представлять собой листовой чай или быстрорастворимый чай. Чай по изобретению также включает смесь двух или более двух любых из этих видов чая. Хотя любой из вышеуказанных видов чая может быть использован, предпочтительным чаем является черный чай, особенно черный листовой чай. Чай предпочтительно присутствует в количестве по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85 мас.% композиции. Чай, который производят путем полной ферментации и который выглядит черным/коричневым по цвету, называют черным чаем. Большая часть производимого чая относится к этой разновидности. Технология изготовления черного чая, по существу, включает разрушение клеточной целостности молодых побегов чайного листа, тем самым, делая возможным перемешивание субстратов (полифенолов) и ферментов (полифенолоксидаз). Это приводит к инициированию серии биохимических и химических реакций с поглощением атмосферного кислорода и образованием окисленных полифенольных соединений,которые являются характерными для чая, наряду с летучими вкусоароматическими веществами, которые придают характерный аромат чаю. Зеленый чай производят, минуя стадию ферментации. Окисляющие ферменты угнетают/денатурируют с помощью пароструйной обработки свежесобранных листьев, например, в перфорированных лотках или путем их прожаривания, например, в горячих железных противнях. Обработку паром осуществляют в течение менее чем 1 мин. Лист затем подвергают дальнейшему нагреванию и прокатыванию до тех пор, пока он не станет темно-зеленым. Наконец, листья сушат до содержания влаги 34%. Т.к. ферментацию останавливают с помощью инактивации полифенолоксидазы, полифенолы не окисляются, и листья остаются зелеными. Напиток дает более слабый вкус и запах, чем черный чай благодаря отсутствию теафлавинов и теарубигинов. Частично ферментированный чай (улунг) также является пригодным. Если ферментацию осуществляют частично, чаи, образующиеся в результате, называют чай улунг. Чай улунг, главным образом, употребляют из-за его медицинских показаний. Под быстрорастворимым чаем подразумевают такой чайный порошок, который растворим в холод-2 018249 ной воде. Потребитель может купить такие быстрорастворимые чаи и растворить в любом желаемом количестве воды при любой желаемой температуре для приготовления чайного напитка. Под чаем, готовым к употреблению, подразумевают чайный напиток, который был предварительно приготовлен и затем упакован в виде напитка в контейнер. Потребителю лишь требуется открыть упаковку и выпить напиток при любой желаемой температуре. Что касается настоящего изобретения, в случае готовых к употреблению видов чая массовый процент собственно чая, растительных материалов и/или экстрактов растений и вкусоароматического агента следует выбирать так, как описано в изложении сущности изобретения без учета воды в них. Большое число растений перечислено в традиционных книгах по лекарственным растениям для благоприятного воздействия на иммунитет. Большое число таких растений также присутствует в традиционных медицинских препаратах. Однако существует мало литературных данных о подтверждении и,соответственно, количественном определении эффективности, если на самом деле вообще что-либо обнаружено в наличии. Настоящие изобретатели оценили большое число таких растений с использованием испытаний на клеточных культурах, чтобы прийти к растениям, которые обеспечивают наилучшую эффективность. Растительными материалами и/или экстрактами растений, которые решено было использовать для настоящего изобретения, являются Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и/или Arogiapacha.Shankhpushpi включает растения Evolvulus alsinoides, Convolvulus pluricaulis и Clitorea turnatea. Общее название по-русски: карликовая ипомея. Его также иногда произносят как Шанкхапушпи. Это многолетнее растение со стелющимися ветвями, маленькими листьями от эллиптических до продолговатых и с цветами, которые располагаются большей частью одиночно в верхних пазухах листа. Целиком растение используют в медицинских целях против жара, нервного переутомления и потери памяти.Shankhpushpi также используют в качестве тонизирующего средства для головного мозга. В настоящем изобретении любая часть Shankhpushpi может быть использована.Shatavari (иногда произносят как Шатауари (Shatawari, также известное как Шатамули (Shatamuli),включает растение Asparagus racemosus. Оно принадлежит к семейству лилейных (Liliaceae). Растение встречается повсюду в центральной и южной Индии и в нижних Гималаях. Растение содержит стероидные сапонины. Его традиционно используют для приготовления общих тонизирующих средств и, в особенности, используют в качестве тонизирующего средства для женской репродуктивной функции и для увеличения лактации. Дополнительно его используют для оказания помощи при дизентерии, спазмах, а также ввиду благоприятного антиоксидантного, иммуностимулирующего и антибактериального действия. Для целей настоящего изобретения предпочтительной частью Shatavari являются клубневые корни.Vidarikhand (также произносят как Видаарикханд (Vidaarikhand, также известное как Видари (Vidari), включает растение Ipomoea digitata. Оно также известно как молочный ямс или аллигаторный ямс. Оно представляет собой многолетнее вьющееся растение с клубневыми корнями и розовыми или красными цветками. Его используют для приготовления общих тонизирующих средств, для увеличения лактации и в связи с общей питательной ценностью. Для целей настоящего изобретения предпочтительной частью Vidarikhand являются клубни.Arogiapacha включает растение Trichopus zeylanicus, которое преимущественно растет в южных частях Индии. Плод обычно используют в медицинских целях. Полагают, что это растение должно обеспечивать жизнеспособность и энергичность лицу, которое его потребляет. Современные фармакологические исследования доказывают, что это растение является очень эффективным и укрепляющим тонизирующим средством. В настоящем изобретении используют любую часть растения Arogiapacha, хотя предпочтительно использование листьев. Особенно предпочтительно использование экстрактов растений в композиции согласно изобретению в виде водных экстрактов. Типичный способ экстракции водой включает кипячение растительного материала или его желаемой части в воде в массовом соотношении около 1:8 в течение около 1 ч. Экстракт, полученный таким образом, затем высушивают до содержания влаги менее чем около 8,0 мас.% с получением порошка. В настоящем изобретении растения предпочтительно присутствуют в виде порошков из водных экстрактов различных растений. Четыре растительных материала и/или экстракты растений, подходящие для использования в композиции изобретения, а именно Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и/или Arogiapacha, присутствуют в количестве 0,1-15 мас.%, предпочтительно в количестве 0,5-10 мас.%, еще более предпочтительно 1-6 мас.% от массы композиции. Существенным атрибутом чая являются его органолептические свойства. Качество чая обычно оценивают на основе его цвета, аромата, вкуса, вкусоароматических свойств, экстрактивности, послевкусия и терпкости. Эту оценку осуществляют дегустаторы, которые обучены давать объективное описание чая,который им предлагают. Цвет, наблюдаемый глазом, описывают на основе бальной шкалы для четырех дескрипторов, а именно светлый, красный, желтый и коричневый. Аромат является существенным для чая хорошего качества. Аромат это то, что ощущает нос. Дегустаторы оценивают аромат на основе бальной шкалы для трех дескрипторов, а именно чайный аромат, зеленый аромат и аромат свежести. Приемлемость чая для потребителя сильно зависит от вкусоароматических свойств продукта. Вкусоароматические свойства это то, что ощущается как сочетание вкуса, ощущаемого языком, и запаха, ощущаемого носом. Таким образом, как летучие компоненты, так и нелетучие компоненты являются ответственными за вкусоароматические свойства. Дегустаторы оценивают вкусоароматические свойства на основе бальной шкалы для чайных вкусоароматических свойств, зеленых вкусоароматических свойств и вкусоароматических свойств свежести. Экстрактивность представляет собой еще один параметр, с помощью которого оценивают качество чая. Экстрактивность показывает густоту или не плотность заварки, определяемую визуально и с помощью сенсорной оценки во рту. Вкус чая является другим важным параметром, который ощущается с помощью вкусовых рецепторов во рту, и на который влияют практически нелетучие компоненты в чае. Вкус оценивали по дескрипторам, а именно чайный вкус и горький вкус. В значительной мере послевкусие, которое представляет собой вкус, остающийся во рту через несколько минут, например через 2-5 мин после употребления чайной заварки, является другим важным для потребителя атрибутом чая. Послевкусие оценивают по дескрипторам: чайное послевкусие и горькое послевкусие. Потребители чая также предпочитают специфический (обычно низкий) уровень терпкости, который дегустаторы определяют количественно. Таким образом, для того чтобы любая новая чайная композиция отвечала запросам массового потребительского рынка, для изготовителей чая является весьма важным сохранить все вышеуказанные атрибуты чая при обеспечении в то же время благоприятного воздействия добавленных ингредиентов на здоровье так, чтобы традиционные потребители чая не отказались от чая на основе этих факторов, несмотря на то, что они теперь имеют дополнительный стимул, состоящий в том, что новая чайная композиция обладает повышенным благоприятным воздействием на здоровье. По результатам тестирования большого числа вкусоароматических агентов более предпочтительными вкусоароматическими агентами по изобретению являются имбирь, кардамон, базилик, тулси, корица, бергамот или их смесь. Еще более предпочтительными вкусоароматическими агентами являются кардамон (Elettaria cardamomum), базилик и/или тулси (Ocimum sanctum). Вкусоароматический агент предпочтительно находится в форме натурального масла. Предпочтительно вкусоароматический агент присутствует в количестве в пределах 0,1-0,4 мас.% композиции. Eletteria cardamomum также известен как кардамон и представляет собой общепринятую вкусоароматическую приправу, используемую в Индии и других странах. Если используют кардамон, он присутствует в виде либо порошка, либо масла,предпочтительно в виде масла. Ocimum sanctum также общеизвестен как Священный базилик в Европе или как Тулси в Индии. Если Ocimum sanctum присутствует в композиции изобретения, он предпочтительно присутствует в форме масла или в форме порошка, более предпочтительно в форме масла. В высокой степени предпочтительная композиция содержит и кардамон и тулси. Композиция согласно изобретению предпочтительно содержит связующее пищевое вещество. Связующие пищевые вещества, подходящие для использования в композиции настоящего изобретения, выбраны из полисахаридов, камедей, полимеров или их смеси. Наиболее подходящим для использования в качестве связующего вещества является полисахарид, предпочтительно смесь полисахаридов. Наиболее предпочтительными полисахаридами являются мальтодекстрины, модифицированный крахмал, аравийская камедь или их смесь. Мальтодекстрин представляет собой продукт, полученный путем контролируемого и частичного гидролиза крахмала. Он является промежуточным продуктом между крахмалом и глюкозой. Продукт,полученный таким образом, очищают, обрабатывают активированным углем, ионным обменом, а затем распылительной сушкой до желаемого уровня влажности. Мальтодекстрин представляет собой белый порошок, который является весьма безвкусным, с очень малой сладостью. Модифицированный крахмал является другим используемым связующим веществом, которое может быть использовано в композиции изобретения. Особенно предпочтительный модифицированный крахмал является перекрестно-сшитым крахмалом, где амилазная и амилопектиновая цепи крахмала схватываются вместе с образованием сети. Наиболее предпочтительный модифицированный крахмал для использования в качестве связующего вещества в настоящем изобретении представляет собой HICAP 100, который является модифицированным крахмалом, который продает National Starch and Chemicals. Аравийская камедь, также называемая гуммиарабик, является веществом, которое извлекают из двух видов дерева акации, произрастающих к югу от Сахары: Акация сенегальская и Акация сеяльская(Acacia seyal). Ее применяют, прежде всего, в пищевой промышленности в качестве стабилизатора, но она имеет более разнообразное применение. Аравийская камедь является сложной смесью сахаридов и гликопротеинов, что делает ее съедобной. Она является важным ингредиентом в сиропах для безалкогольных напитков, тягучая карамель, таких как жевательные шарики, и в пастиле. В прошлом аравийскую камедь использовали в качестве традиционного носителя для внесения вкусоароматического агента, высушенного распылением. Вышеуказанные связующие вещества выбраны единственно для того, чтобы служить большому количеству целей. Они служат, с одной стороны, для эмульгирования жидко/масляных добавок и, с другой стороны, служат для того, чтобы обеспечивать связывание твердых добавок, таких как, растительные порошки, с чайным порошком равномерным образом. Связующие вещества могут также обеспечивать некоторую степень инкапсулирования активных веществ, добавляемых к композиции, для обеспечения физической и химической стабильности во время хранения, транспортировки и использования. Общее количество связующего вещества находится предпочтительно в пределах 0,05-5,0 мас.% композиции. Композиция изобретения предпочтительно содержит не более чем 8 мас.% влаги. Согласно второму объекту настоящего изобретения предлагают способ приготовления чайной композиции, содержащей предшественник чайного напитка или чай, готовый к употреблению, и 0,1-15 мас.% растительного материала и/или экстракта растения, выбранного из Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и/или Arogiapacha, и 0,01-0,5% вкусоароматического агента, включающий стадию смешивания предшественника чайного напитка или чая, готового к употреблению, с растительным материалом и/или экстрактом растения и вкусоароматическим агентом. Предпочтительный способ по второму объекту настоящего изобретения включает стадии:(a) диспергирования вкусоароматического агента и, при необходимости, связующего пищевого вещества в воде с образованием дисперсии;(b) смешивания предшественника чайного напитка или чая, готового к употреблению, с дисперсией с образованием влажной чайной смеси;(c) смешивания указанной влажной чайной смеси с растительным материалом и/или экстрактом растения, выбранного из Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и Arogiapacha; и(d) сушки до содержания влаги менее чем 8 мас.%. Подходящие температуры для сушки влажной смеси с образованием композиции изобретения составляют, например, в пределах 50-75 С. Если композиция содержит листовой чай, благоприятное воздействие на здоровье, оказываемое композицией изобретения, может быть получено путем потребления настоя указанной композиции. Настой указанной композиции можно потреблять черным (т.е. чай без молока) или с добавлением молока в настой. Альтернативно, композицию можно также заваривать в смеси воды и молока или только в молоке. Эта композиция также подходит для упаковки в чайные пакетики там, где чай заваривают в чашках или чайниках. Композицию согласно изобретению используют для людей любой возрастной группы,которые хотят улучшить свой иммунитет. Источник и происхождение ингредиентов, использованных при разработке изобретения Примеры Изобретение будет далее продемонстрировано примерами. Примеры приведены только в качестве иллюстрации и никаким образом не ограничивают объем изобретения. Оценка иммунологической эффективности растений с использованием активации макрофагов иNK-клеточной активности в испытаниях на клеточных культурах in vitro. Двадцать два растения, которые используют в аюрведических лекарственных препаратах, которые,как известно, имеют благоприятное воздействие на общее состояние здоровья, были предварительно отобраны для систематического изучения благоприятного воздействия на иммунитет с использованием испытаний на клеточных культурах. Растениями, предварительно отобранными для изучения, были Равдинг (Ravding), Бхумиамалаки (Bhumiamlaki), Бадама (Badama), Капикаччу (Kapikachu), Твак (Twak),-5 018249 Мандукпарни (Mandukparni), Харидра (Haridra), Гуггулу (Guggulu), Пиппали (Pippali), Амалаки (Amlaki),Вача (Vacha), Белгири (Belgiri), Эла (Ela), Сунш (Sunth), Ястимадху (Yastimadhu), Нарикела (Narikela),Арогиапача (Arogyapacha), Ерандамоол (Erandamool), Видарикханд (Vidarikhand), Шатавари (Shatavari) и Шанкхпушпи (Shankhpushpi). Рецептуры проведения испытаний на клеточных культурах (i) активации макрофагов и (ii) NKклеточной активности описаны ниже. Использованные материалы. Исходную клеточную линию 264.7, K-562 получали в National Centre for Cellular Sciences (NCCS)NK92Mi, NK-клеточную линию доставляли из Американской Коллекции Типовых культур (АТСС).DMEM (модифицированная по способу Дульбекко среда Игла), среда RPMI (Rosewell Park Memorial Institute), фетальную бычью сыворотку (FBS), лошадиную сыворотку, форбол-12-миристат-13-ацетат(РМА), зимозан, LPS (липополисахарид), гистопак, кальцеин-АМ, реагент TRI, набор ДНКаз и антибиотики получали из Sigma-Aldrich, США. Латексные частицы (3 мкм) доставляли из Polyscience Inc., Germany. Краситель Гимза получали изS.D. Fine Chem. Ltd., Индия. Бычий сывороточный альбумин покупали в SRL. Конъюгат стрептавидина с пероксидазой хрена и ТМВ (тетраметилбензидин)/Н 2 О 2 покупали в Bangalore Genei. Все цитокины получали из системы RD, USA. Пластины для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) покупали в Nunc, USA. Набор для синтеза первой цепи кДНК, 10 буфер ПЦР (полимеразная цепная реакция), MgCl2, 2 мМSigma Aldrich (IL12). Праймеры: мышиный GAPDH (F): 5'-ACGACCCCTTCATTGACC-3' мышиный GAPDH (R): 5'-AGACACACACAGTAGACTCCACG-3' мышиный IL 12 (F): 5'-TTATGTTGTAGAGGTGGACTGG-3' мышиный IL 12 (R): 5'-TTTCTTTGCACCAGCCATGAGC-3' Все другие реагенты имели аналитическую степень чистоты. Методы.A. Клеточные культуры. Исходную клеточную линию 264.7 непрерывно поддерживали в DMEM с 10% FCS (фетальная телячья сыворотка). Их субкультивировали каждые 2-3 дня и инкубировали при 37 С в атмосфере, содержащей 5% диоксида углерода. Клеточную линию NK92Mi непрерывно поддерживали в MEM с -модификацией 12,5% FBS и 12,5% лошадиной сыворотки. Их субкультивировали каждые 2-3 дня и инкубировали при 37 С в атмосфере, содержащей 5% СО 2. Клеточную линию K562 непрерывно поддерживали в RPMI с 10% FCS. Клетки субкультивировали каждые 2-3 дня и инкубировали при 37 С в атмосфере, содержащей 5% диоксида углерода.B. Премирование макрофаговой клеточной линии растительными экстрактами.(i) Приготовление растительного экстракта. Желаемый растительный материал (200 мг) взвешивали и помещали в 5 мл дистиллированной воды и выдерживали на ротаторе в течение 2 ч при комнатной температуре. Это кипятили при 80 С в течение 1 ч и объем доводили до 10 мл. Супернатант отфильтровывали при помощи фильтра 0,22(0,22 мкм) и использовали для дальнейшего анализа.(ii) Испытание поглощающей способности макрофагов. Исходные клетки 264.7 высевали на покровном стекле при 105 клеток/покровное стекло и оставляли для прилипания. Клетки инкубировали с 100 нг/мл РМА (параметоксиамфетамин) (10 мин), или 1 мг/мл зимозана,опсонизированного сывороткой, в течение 1/2 ч, или 100 нг/мл LPS (липосахарида) в течение 1 ч, или 0,5% растительного экстракта в течение 2 ч. После инкубирования клетки инкубировали в течение 2 ч с 106 латексных частиц/105 клеток (клетки: частицы = 1:10). Клетки на покровном стекле высушивали на воздухе и фиксировали метанолом. Клетки окрашивали красителем Гимза в течение 10 мин.i. TNF (-фактор некроза опухолей) с помощью ELISA. Концентрацию TNF в супернатанте культуры определяли с использованием сэндвичевого методаELISA. Пластины для ELISA покрывали козлиными антимышиными антителами против TNF (80 нг/лунка в натрийкарбонатном буфере, рН 10,3) и оставляли на ночь при 4 С. Пластины промывали и блокировали 2% BSA (альбумин бычьей сыворотки) в течение 2 ч при комнатной температуре. Прибавляли 100 мкл либо стандартного раствора (в пределах 10-50 нг/мл мышиного TNF в забуференном фосфатом солевом растворе (PBS) с 0,1% BSA), либо супернатанта культуры. Пластины промывалиPBS/Tween 20 (0,05%). Детектируемое антитело, биотинилированное козлиным антимышиным TNF (2 нг/лунка) в Тризма-забуференном солевом растворе инкубировали в течение 2 ч. После промывания, как ранее, пластины инкубировали с конъюгированными стрептавидин-пероксидазой хрена (HRP) козлиными анти-IgG (1:1000) в течение 45 мин. Пластины промывали снова и инкубировали в течение 10-20 мин с субстратом тетраметилбензидином (ТМВ). Реакцию останавливали 1N серной кислотой и интенсивность цвета измеряли при 450 нм.i. Выделение Т-лимфоцитов. Мононуклеарные клетки периферической крови выделяли путем центрифугирования в градиенте плотности гистопак из венозной крови нормальных людей-волонтеров. Лейкоцитарную пленку (лимфоциты) выделяли из свежевзятой крови с ЭДТА и промывали PBS (рН 7,2). Клетки затем инкубировали в среде RPMI с добавкой 10% FCS в течение 1 ч при 37 С, 5% диоксида углерода.ii. Примирование клеток. Свободные лимфоциты инкубировали в присутствии или в отсутствие как IL-12 (10 нг/мл), так и IL18 (100 нг/мл) или супернатанта культуры, приготовленного, как описано выше, в соотношении 1:10 в течение 24 ч. По окончании 24 ч клетки испытывали на их цитотоксическую активность, как описано ниже.E. Испытание цитотоксической активности NK-клеток. Использовали способ испытания, который приведен в (2) с модификацией (3). Клетки K-562 использовали в качестве клеток-мишеней. Клетки K-562 (2 Х 106/мл) инкубировали с 16 мкм красителя кальцеина AM при 37 С в течение 1/2 ч. Клетки K-562 инкубировали в течение 4 ч с лимфоцитами в общем объеме 1 мл при 37 С, 5% СО 2 (1:50), т.е. 1000 клеток K-562:5X105 лимфоцитов. Клетки K-562 в чистом виде служили в качестве контроля. После инкубирования клетки центрифугировали, промывали дважды и снимали показания по флуоресценции приЕХ 495 нм иЕМ 530 нм. Результаты выражали в процентах цитолитической активности NK-клеток. Результаты испытания поглощающей способности макрофагов выражали в виде индекса фагоцитоза, т.е. общего числа частиц внутри клеток на 100 клеток, и % фагоцитоза, т.е. клеток, которые стали фагоцитарными (по меньшей мере 1 частица/клетка) на 100 клеток. По меньшей мере 400 клеток насчитали для каждого эксперимента. Эксперименты показали, что четыре растения, пригодных для изобретения, а именно Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и/или Arogiapacha, имели самые высокие индексы фагоцитоза, % фагоцитоза и величины TNF по сравнению со всеми другими растениями, прошедшими испытания. Данные для четырех растений суммированы в табл. 1. Все другие растения имели более низкие величины для всех трех измеренных показателей. Таблица 1 Цитотоксическая активность NK-клеток для четырех растений суммирована в табл. 2. Таблица 2 Данные, собранные и суммированные в табл. 1 и 2 для четырех растений по изобретению, показывают, что эти четыре растения имеют самый высокий потенциал для обеспечения благоприятного воздействия на иммунитет по сравнению с большим количеством растений, указанных в аюрведической литературе в качестве полезных для общего состояния здоровья. Выбор вкусоароматических агентов Различные вкусоароматические агенты смешивали с черным чаем, содержащим 7,5% Shankhpushpi,2,5% Shatavari, 2,5% Vidarikhand и 2,5% Arogiapacha. Композицию заваривали, и комиссия по оценке продуктов из 8-10 дегустаторов чая испытывала заварку на способность вкусоароматических агентов В вышеуказанных экспериментах имбирь использовали в форме олеорезина, в то время как остальные вкусоароматические агенты находились в форме масла. Данные в табл. 3 показывают, что примеры 3 и 9 вне концентрационных пределов вкусоароматического агента в изобретении являются неприемлемыми. Образцы примеров 1, 2, 5, 7, 8 являются слабо приемлемыми, и вкусоароматический агент находится в них на границе заявленного диапазона концентраций. Примеры 4 и 6 являются в высокой степени приемлемыми, при этом пример 6 является наиболее приемлемым. Данные также показывают, что кардамоновое и базиликовое масла являются наиболее приемлемыми вкусоароматическими агентами.QDA образцов чая изобретения по сравнению с контрольным образцом и сравнительными образцами, находящимися за рамками изобретения Количественный дескрипторный анализ (QDA) проводили на образцах, перечисленных в табл. 4. Таблица 4 Рецептура приготовления эмульсии с инкапсулированными вкусоароматическими добавками. В стакан емкостью 250 мл помещали 85 мл воды и к ней добавляли 15 г Hi-CAPR (который является модифицированным крахмалом из National starch и Chemical Co) при сильном перемешивании. Вкусоароматические масла медленно добавляли к смеси с образованием эмульсии с инкапсулированными вкусоароматическими добавками. Рецептура приготовления композиции. Черный чай (0,5 кг) помещали в миксер Hobart емкостью 2 л. Эмульсию с инкапсулированными вкусоароматическими добавками с желаемой концентрацией вкусоароматических агентов распыляли на чай при непрерывном перемешивании. Воду добавляли в чайную смесь при перемешивании для увлажнения чая и образования однородной смеси. Сухие смешанные растения в желаемых количествах добавляли и смешивали с однородной смесью. Смесь затем высушивали в сушильном аппарате с псевдоожиженным слоем при 70 С с образованием композиций.QDA проводили с использованием следующей рецептуры. Чай для дегустации членами комиссии по оценке продуктов приготовляли кипячением 20 г композиции, 40 г сахара и 1000 мл водно-молочной смеси (массовое соотношение 60:40) до одного полного подъема. Приготовленный чай подавали дегустаторам в изолированных кабинах для оценки. Дегустаторы оценивали образцы по следующим дескрипторам.(G) Терпкость. Все из вышеуказанных дескрипторов оценивали по шкале от 1,0 до 10,0. Было обнаружено, что на некоторые из дескрипторов, например на внешний вид, экстрактивность,горький вкус и терпкость, не влияло приготовление композиций. Другие дескрипторы были подвержены влиянию, и данные только по этим дескрипторам суммированы в табл. 5. Таблица 5 Данные в табл. 5 показывают, что на композиции негативно воздействует добавление растений(примеры 10 А, 11 А, 12 А и 13 А) по большинству дескрипторов, в то время как прибавление вкусоароматических агентов внутри концентрационного диапазона изобретения вызывает возвращение дескрипторов в желаемый диапазон по сравнению с черным чаем в качестве контроля. Дополнительные образцы внутри и за пределами изобретения. Количественный дескрипторный анализ (QDA) проводили на образцах, перечисленных в табл. 6. Рецептура для приготовления образцов была такой же, как рецептура, использованная для приготовления образцов, перечисленных в табл. 4. Образцы испытывала QDA-комиссия по оценке продуктов,и результаты суммированы в табл. 7. Таблица 7 Данные в табл. 7 показывают, что образцы чая, содержащие растения (сравнительные примеры 14 А,15 А), подвержены неблагоприятному влиянию в плане аромата и вкусоароматических свойств, в то время как включение вкусоароматических агентов в концентрационном диапазоне изобретения (примеры 14, 15) положительно воздействуют на большинство этих дескрипторов, что делает их приемлемыми для нормальных потребителей чая. Сравнительный пример В представляет собой образец чая с высоким общим количеством растений (25%), что находится вне концентрационного диапазона настоящего изобретения. Аромат и вкусоароматические свойства в высокой степени подвержены негативному воздействию, и даже включение вкусоароматических агентов (сравнительный пример С) имеет лишь слабое положительное влияние на аромат и вкусоароматические свойства чая. Иллюстрированные примеры, таким образом, предлагают композицию, которая обеспечивает гарантированное благоприятное воздействие на иммунитет при сохранении общепринятого вкуса и других органолептических свойств чая. Таким образом, композицию будет потреблять большая группа постоянных потребителей чая.(a) по меньшей мере 80 мас.% предшественника чайного напитка или чая, готового к употреблению;(c) 0,01-0,5 мас.% вкусоароматического агента. 2. Композиция по п.1, в которой вкусоароматическим агентом является кардамон, базилик или их смесь. 3. Композиция по п.1 или 2, в которой вкусоароматическим агентом является натуральное масло. 4. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой количество вкусоароматического агента составляет от 0,1 до 0,4 мас.% композиции. 5. Композиция по любому из предшествующих пунктов, содержащая водный экстракт растений. 6. Композиция по любому из предшествующих пунктов, содержащая растительный материал и/или экстракт в количестве 0,5-10 мас.% композиции. 7. Композиция по любому из предшествующих пунктов, которая дополнительно содержит связующее пищевое вещество. 8. Композиция по п.7, в которой указанное связующее вещество присутствует в количестве 0,05-5,0 мас.% композиции. 9. Композиция по п.7 или 8, в которой указанным связующим веществом является полисахарид, камедь, полимер или их смесь. 10. Композиция по любому из предшествующих пунктов, в которой указанный предшественник представляет собой листовой чай или быстрорастворимый чай. 11. Композиция по п.10, содержащая листовой чай. 12. Композиция по любому из предшествующих пунктов, содержащая черный чай. 13. Способ приготовления чайной композиции по любому из предшествующих пунктов, включающий стадии:(a) диспергирования вкусоароматического агента и, при необходимости, связующего пищевого вещества в воде с образованием дисперсии;(b) смешивания предшественника чайного напитка или чая, готового к употреблению, с дисперсией с образованием влажной чайной смеси;(c) смешивания указанной влажной чайной смеси с растительным материалом и/или экстрактом растения, выбранного из Shankhpushpi, Shatavari, Vidarikhand и Arogiapacha; и(d) сушки до содержания влаги менее чем 8 мас.%.