Сочетание агониста (5-th2) и антагониста (5-ht6) серотонина в качестве фармацевтической композиции

006604 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к профилактике или лечению болезни, связанной с рецепторами 5-НТ 2C и 5-HT6. Кроме того, изобретение относится к фармацевтической композиции для терапевтического применения, содержащей агонист рецептора 5-НТ 2C и антагонист рецептора 5-НТ 6. Предпосылки создания изобретения Серотонин (5-гидрокситриптамин или 5-НТ) является ключевым нейротрансмиттером периферической и центральной нервной системы (ПНС и ЦНС) и участвует в различных сенсорных, двигательных и поведенческих функциях, таких как регуляция питания, сон, температура тела, кровяное давление, эмоции и познание. В ПНС и ЦНС млекопитающих экспрессируются по меньшей мере 14 различных подтипов рецепторов серотонина, формально классифицированных; см. Glennon et al., Neurosci. Biobehav. Rev.,1990, 14, 35-37; и D. Hoyer et al., Pharmacol. Rev., 1994, 46, 157-203. Серотонинергические агонисты и антагонисты предлагаются для лечения широкого ряда расстройств, в том числе, тревоги, депрессии,гипертензии, мигрени, ожирения, злоупотребления лекарственными средствами и привыкания к ним,компульсивных расстройств, шизофрении, аутизма, нейродегенеративных расстройств (например, болезни Альцгеймера, паркинсонизма и хореи Гентингтона) и рвоты, вызываемой химиотерапией. Подсемейство рецепторов 5-НТ 2 состоит из трех подтипов - рецепторов 5-НТ 2A, 5-НТ 2B и 5-НТ 2C. Серотониновые рецепторы 5-НТ 2C экспрессируются во многих участках головного мозга и участвуют в регуляции приема пищи (Dourish С.Т., Obes. Res., 1995, 3, Suppl. 4, 449S-462S; Bickerdike M.J. et al., Diabetes, Obes. Metab., 1999, 1, 207-214). Показано, что неспецифический агонист рецептора 5-НТ 2C мхлорфенилпиперазин (m-СРР), который несколько предпочтителен для рецептора 5-НТ 2C, снижает потребление корма у мышей, экспрессирующих нормальный рецептор 5-НТ 2C, в то время как соединение теряет активность в отношении мышей, экспрессирующих мутированную неактивную форму рецептора 5-НТ 2 С (Tecott L.H. et al., Nature, 1995, 374, 542-546). Кроме того, сообщается, что m-CPP и азепиноиндол U-22394A -последний недавно идентифицирован как агонист рецептора 5-НТ 2 С (неопубликованные данные) - снижают массу тела у людей после лечения в течение двух и девяти недель, соответственно (Walsh A.E.S., Psychopharmacology, 1994, 116, 120122; Sargent P.A. et al., Psychopharmacology, 1997, 133, 309-312; и Gallant D.M. et al., Curr. Ther. Res., 1967,9, 579-581). В последнее время ряд производных пирроло[3,2,1-ij]хинолина идентифицирован как агонисты рецептора 5-НТ 2C, обладающие селективностью относительно рецептора 5-НТ 2A (Isaac M. et al., Bioorg.Med. Chem. Lett., 2000, 10, 919-921). Предполагается, что такие соединения представляют новый подход к лечению ожирения и эпилепсии. Также предполагается, что подтип рецепторов 5-НТ 2C вовлекается в расстройства ЦНС, такие как депрессия и тревога (Jenck F. et al., Expert Opin. Invest. Drugs, 1998, 7, 1587-1599; Leysen D.C.M. IDrugs,1999, 2, 109-120). Также предполагается, что подтип рецепторов 5-НТ 2C вовлекается в расстройства мочеиспускания, такие как недержание мочи (Leysen D.C.M. IDrugs, 1999, 2, 109-120). Также рецептор 5-НТ 6 (идентифицированный в 1993 - Monsma et al., Mol. Pharmacol., 1993, 43, 320327, и Ruat M. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1993, 193, 269-276) вовлекается в регуляцию приема пищи и расстройства ЦНС. Так, например, в Bentley J.C. et al., Br. J. Pharmacol., 1999, 126, 66 Р, описывается снижение потребления корма у крыс путем введения антагониста 5-НТ 6. Также некоторые антидепрессанты и атипичные антипсихотические средства показывают высокую аффинность к рецептору 5-НТ 6, что наводит на мысль о причастности рецептора 5-HT6 к шизофрении (Roth et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 1994, 268, 1403-1410;Sleight et al., Expert Opin. Ther. Patents, 1998, 8, 1217-1224; Bourson et al., Br. J. Pharm., 1998, 125, 15621566; Boess et al., Mol. Pharmacol., 1998, 54, 577-583; Sleight et al., Br. J. Pharmacol., 1998, 124, 556-562). Кроме того, рецептор 5-НТ 6 связан с состояниями генерализованного стресса и тревоги (Yoshioka et al.,Life Sci., 1998, 17/18, 1473-1477). Краткое изложение сущности изобретения Согласно настоящему изобретению, неожиданно было обнаружено, что комбинированное введение агониста рецептора 5-HT2C и антагониста рецептора 5-НТ 6 снижает потребление пищи в большей степени, чем введение, или одного агониста, или одного антагониста. Такое комбинированное введение агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-НТ 6 может представлять терапевтические преимущества по сравнению с лечением или одним агонистом или одним антагонистом. Поэтому в одном из своих аспектов настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество сочетания агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-HT6 и, необязательно, фармацевтически приемлемый носитель. В другом аспекте изобретение относится к способу предупреждения или лечения болезни, в частности, ожирения, связанной с рецептором 5-НТ 2C и рецептором 5-HT6, включающему введение человеку или животному, нуждающемуся в этом, агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-HT6 (одновременно или последовательно) в количествах, достаточных для получения лечебного эффекта.-1 006604 В еще одном аспекте изобретение относится к применению агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-НТ 6 для получения лечебного средства для лечения болезни, связанной с рецептором 5HT2C и рецептором 5-НТ 6. В другом аспекте изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции, где агонист рецептора 5-НТ 2C и антагонист рецептора 5-НТ 6, соединенные в терапевтическом количестве,тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем. В еще одном аспекте изобретение относится к продукту, содержащему агонист рецептора 5-HT2C и антагонист рецептора 5-НТ 6, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении болезни, в частности, ожирения, связанной с рецептором 5-HT2C и рецептором 5-НТ 6. Краткое описание чертежей Фиг. 1 показывает воздействие на потребление корма мышами ob/ob после комбинированного введения агониста рецептора 5-НТ 2C (PNU-183933F; 50 мг/кг, ро (перорально и антагониста рецептора 5 НТ 6 (PNU-186053A; 50 мг/кг, sc (подкожно, а также действие одного агониста и одного антагониста. Фиг. 2 показывает воздействие на потребление корма мышами ob/ob после комбинированного введения агониста рецептора 5-НТ 2C (BVT.2938F; 5 мг/кг, sc) и антагониста рецептора 5-НТ 6 (BVT.5182C; 3 мг/кг, sc), а также действие одного агониста и одного антагониста. Подробное описание изобретения Как указано выше, настоящее изобретение основано на неожиданном открытии, что комбинированное введение агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-НТ 6 снижает потребление пищи в большей степени, чем введение или одного агониста или одного антагониста. Такое комбинированное введение агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-НТ 6 также может представлять некоторые преимущества, например, при лечении ожирения, по сравнению с лечением, или одним агонистом,или одним антагонистом. Во-первых, при комбинированном введении требуются меньшие дозы каждого соединения для получения подобного или улучшенного снижения потребления пищи, чем при лечении одним соединением. Во-вторых, более низкие дозы, требуемые при комбинированном введении, могут снизить опасность вредных событий. В-третьих, более низкие дозы, требуемые при комбинированном введении, могут снизить опасность развития толерантности и склонности к злоупотреблению. В-четвертых, лечение, основанное на двух целях, может повысить индивидуальную лечебную эффективность относительно лечения, основанного на одной цели. Также может снизиться опасность неотвечаемости (нереспондеров). Благоприятное воздействие комбинированного введения по данному изобретению полезно не только для модуляции пищевого поведения и для лечения избыточного веса и ожирения, но также может быть полезным для лечения расстройств ЦНС, таких как депрессия, мания, шизофренические расстройства, тревога, расстройства памяти (такие как болезнь Альцгеймера), мигрень, привыкание к чрезмерному употреблению лекарственных средств, судорожный синдром, личностные расстройства, посттравматический стресс-синдром и расстройства сна, а также для лечения недержания мочи (или вообще мочевого пузыря при повышенной активности), половых дисфункций, желудочно-кишечных расстройств и глаукомы. Используемый в данном описании термин "агонист рецептора 5-НТ 2 С" относится к соединению, вызывающему активацию серотонинового рецептора 5-НТ 2 С. Агонист рецептора 5-НТ 2 С предпочтительно имеет константу аффинности Ki менее 50 нМ, предпочтительно менее 20 нМ, и внутреннюю активностьin vitro, измеренную как содержание внутриклеточного Са 2+, выше 20%, предпочтительно выше 50%,относительно 5-НТ (1 мкМ). Используемый в данном описании термин "антагонист рецептора 5-НТ 6" относится к соединению,вызывающему блокаду реакций, опосредуемых серотониновым рецептором 5-НТ 6. Антагонист рецептора 5-НТ 6 предпочтительно имеет константу аффинности Ki менее 50 нМ, предпочтительно менее 20 нМ,и внутреннюю активность in vitro, измеренную как содержание внутриклеточного сАМР, менее 50%,предпочтительно менее 20%, относительно 5-НТ (1 мкМ). Анализы in vitro, которые можно использовать для определения аффинности и внутренней активности, соответственно, агонистов рецептора 5-НТ 2C и антагонистов рецептора 5-НТ 6, известны в технике и приводятся ниже в экспериментальной части как анализы для определения аффинности к рецепторам 5 НТ 2A и 5-НТ 2B. Как правило, агонисты рецептора 5-HT2C и антагонисты рецептора 5-НТ 6 должны быть достаточно селективны, чтобы не оказывать какого-либо существенного вредного побочного действия. Однако термины "селективный" и "существенный" в данном контексте должны интерпретироваться широко, причем их значения достаточно очевидны для специалистов в данной области техники. Агонист рецептора 5-HT2C предпочтительно обладает селективностью для рецептора 5-НТ 2C по меньшей мере 5, предпочтительно по меньшей мере 10, предпочтительнее по меньшей мере 20 относи-2 006604 тельно рецепторов 5-НТ 2A, 5-НТ 2B и 5-HT6, соответственно (измеренной как отношения аффинностей 5HT2A/5-НТ 2C, 5-НТ 2B/5-НТ 2C и 5-НТ 6/5-НТ 2C). Антагонист рецептора 5-НТ 6 предпочтительно обладает селективностью для рецептора 5-HT6 по меньшей мере 5, предпочтительно по меньшей мере 10, предпочтительнее по меньшей мере 20, относительно рецепторов 5-НТ 2A, 5-НТ 2B и 5-HT2C, соответственно (измеренной как отношения аффинностей 5 НТ 2A/5-НТ 6, 5-НТ 2B/5-НТ 6 и 5-НТ 2C/5-НТ 6). Соответствующие испытания для определения того, является ли соединение селективным агонистом рецептора 5-НТ 2C или селективным антагонистом рецептора 5-НТ 6, известны в технике, и как указывалось выше, описываются ниже в экспериментальной части. В настоящее время предпочтительными агонистами рецептора 5-НТ 2C являются классы соединений арилпиперазинов и пиперазинилпиразинов, в частности, соединения, описанные в WO 00/76984 и заявках на патент Швеции 0004244-0 и 0004245-7, поданных 20 ноября 2000 г. В частности, для целей настоящего изобретения в качестве агониста рецептора 5-НТ 2C используется фумарат (2R)-метил-1-3-[2-(3-пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазин (BVT.2938F). В настоящее время предпочтительными антагонистами рецептора 5-HT6 являются соединения класса азепининдолов, такие как класс арилсульфонзамещенных гексагидроазепининдолов, описанных в WO 01/05793. Другими предпочтительными антагонистами рецептора 5-НТ 6 являются соединения класса арилсульфонилиндолов, такие как класс соединений, описанных в заявке на патент Швеции 0003810-9. В частности, для целей настоящего изобретения в качестве антагониста рецептора 5-НТ 6 используется гидрохлорид 6-метил-9-(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индол (PNU-186053 А). Агонисты рецептора 5-НТ 2C и антагонисты рецептора 5-HT6 могут представлять собой соединения как таковые или, в соответствующих случаях, их фармацевтически приемлемые соли (аддитивные соли кислот и оснований) или их стереохимические изомерные формы (включая оптические изомеры, такие как энантиомеры и рацематы). Фармацевтически приемлемые аддитивные соли, указанные выше, являются терапевтически активными нетоксичными аддитивными солями кислот и оснований, которые способны образовывать соединения. Соединения со свойствами оснований можно превратить в их фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислот путем обработки основных форм соответствующей кислотой. Примерами кислот являются неорганические кислоты, такие как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, иодисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, и органические кислоты, такие как уксусная кислота, пропановая кислота, гидроксиуксусная кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, гликолевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, щавелевая кислота, бензолсульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, трифторуксусная кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, салициловая кислота, п-аминосалициловая кислота, памовая кислота, бензойная кислота, аскорбиновая кислота и подобные кислоты. Примерами форм аддитивных солей оснований являются натриевые,калиевые, кальциевые соли и соли, образованные с фармацевтически приемлемыми аминами, такими как, например,аммиак, алкиламины, бензатин, и аминокислотами, такими как, например, аргинин и лизин. Используемый в данном описании термин "аддитивная соль" также включает сольваты, которые могут образовывать соединения и их соли, такие как, например, гидраты, алкоголяты и т.п. Агонисты рецептора 5-НТ 2C и антагонисты рецептора 5-НТ 6 могут представлять собой пролекарства или формы, которые могут высвобождать нужный активный ингредиент после метаболической трансформации in vivo. Обычные процедуры отбора и получения подходящих пролекарственных производных описываются, например, в "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985. Агонисты рецептора 5-НТ 2C и антагонисты рецептора 5-НТ 6 для целей введения можно включить в состав различных фармацевтических форм или в одну и ту же лекарственную форму, такую как одна и та же таблетка, или в отдельные лекарственные формы. Однако в последнем случае может оказаться целесообразным поместить стандартную лекарственную форму агониста рецептора 5-НТ 2C и стандартную лекарственную форму антагониста рецептора 5-HT6 в одну и ту же упаковку, например в ячейки одного и того же блистера. Агонисты рецептора 5-HT2C и антагонисты рецептора 5-HT6 в форме свободных оснований или солей можно включить в подходящие формы галеновых препаратов, такие как композиции для перорального применения, для инъекции, для введения в виде назального спрея, или подобные формы, в соответствии с принятыми фармацевтическими процедурами. Такие фармацевтические композиции согласно изобретению содержат эффективное количество агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5HT6 в сочетании с совместимыми фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями, что хорошо известно в технике. Носители могут представлять собой любое инертное вещество, органическое или неорганическое, подходящее для перорального, энтерального, ректального, чрескожного, подкожного или парентерального введения, такое как вода, желатин, аравийская камедь, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, натрийкрахмалгликолят, вторичный фосфат кальция, стеарат магния, тальк,коллидный диоксид кремния, и подобные вещества. Такие композиции также могут содержать другие-3 006604 фармакологически активные вещества и обычные добавки, такие как стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, корригенты, буферные вещества и т.п. Композиции по изобретению можно получить, например, в твердой или жидкой форме для перорального применения, такой как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, сиропы, эликсиры, диспергируемые гранулы, облатки, суппозитории и т.п., в форме стерильных растворов, суспензий или эмульсий для парентерального введения, спреев, например, назального спрея, трансдермальных препаратов, например пластырей, и т.п. Уровень дозы каждого конкретного агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-HT6 и частота приема доз конкретного сочетания будут изменяться в зависимости от различных факторов,включая возможности каждого конкретного используемого соединения, метаболическую устойчивость и длительность действия такого соединения, возраст пациента, массу тела, общее состояние здоровья, пол,питание, способ и время введения, скорость выведения, сочетание лекарственных средств, тяжесть состояния, от которого лечат. Ежесуточная дозировка агониста рецептора 5-НТ 2C и антагониста рецептора 5-НТ 6, каждого, может колебаться от примерно 0,001 до примерно 150 мг/кг массы тела, предпочтительно от примерно 0,01 до примерно 100 мг/кг массы тела, в частности, от примерно 0,1 до примерно 50 мг/кг массы тела, вводимая однократно или в виде нескольких доз, например, доз от 0,01 мг до примерно 1 г каждая. Как правило, такую комбинированную дозировку дают перорально, но также можно выбрать другой способ введения, например парентеральный или ректальный. Примером комбинированной лекарственной формы в виде таблеток может быть или форма (А) в виде двух отдельных таблеток, т.е. одной таблетки, содержащей 10, 20 или 50 мг агониста рецептора 5-НТ 2C, и одной таблетки, содержащей 10, 20 или 50 мг антагониста рецептора 5-НТ 6, или (В) в виде комбинированной таблетки, содержащей 10, 20 или 50 мг агониста рецептора 5-НТ 2C и 10, 20 или 50 мг антагониста рецептора 5-HT6. Изобретение поясняется с помощью приведенного ниже экспериментального раздела, не являющегося ограничительным. Экспериментальный раздел А. Получение испытываемых соединений Свободное основание агониста рецептора 5-НТ 2C фумарата(2R)-метил-1-3-[2-(3 пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина ("PNU-183933F") получают так, как описывается в WO 00/76984. Свободное основание превращают в его соль фумарат, т.пл. 126-129 С. МС m/z 315 (М)+. Элементный анализ: (C16H21N5O2.C4H4O4), С, Н, N. Антагонист рецептора 5-НТ 6 гидрохлорид 6-метил-9-(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола ("PNU-186053A") получают так, как описывается в WO 01/05793. Агонист рецептора 5-НТ 2C фумарат (2R)-1-(3-2-[(2-этокси-3-пиридинил)окси]этокси-2 пиразинил)-2-метилпиперазина ("BVT.2938F") получают так, как описывается в WO 00/76984. Антагонист рецептора 5-HT6 гидрохлорид 1-(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1H-индола("BVT. 5182C") получают так, как описывается в заявке на патент Швеции 0003810-9, поданной 20 октября 2000 г. Вкратце, BVT.5182C получают согласно общей процедуре, отображенной ниже на схеме 1, исходя из коммерчески доступного 4-пиперазиноиндола (соединение 1), которое проходит стадии (а)(с) с образованием гидрохлорида 1-(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1H-индола (выход 80%). Чистота по ВЭЖХ 95%; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6)9,64 (ушс, 2 Н), 8,00-7,85 (м, 3 Н), 7,79 (д, J=3,77 Гц, 1 Н), 7,707,65 (м, 1 Н), 7,63-7,60 (м, 3H), 7,27-7,22 (м, 1 Н) , 6,95 (д, J=3,76 Гц, 1 Н), 6,81-6,77 (м, 1 Н), 3,30-3,20 (м,4 Н); 13 С-ЯМР (ДМСО-d6)144,79, 137,02, 135,22, 134,62, 129,82, 126,85, 125,63, 125,54, 123,49, 111,15,107,87, 107,76, 47,81, 42,86; МС (поз. ES-FIA) m/z 342 (М+Н). Схема 1 Стадия (а): Защита пиперазина группой ВОС по N4 4-Пиперазиноиндол (1 экв.), DMAP (0,1 экв.) и Et3N (4 экв.) растворяют в ДМФА. Добавляют(ВОС)2O (1,1 экв.) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре (12 ч). ДМФА выпаривают, и остаток очищают хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента смеси хлороформа, метанола и аммиака. ВЭЖХ: чистота 100%. МС m/z 302,2 (М+Н). Стадия (b): Получение промежуточного соединения 3 Промежуточное соединение 2 (1,0 экв.) растворяют в ДМФА, добавляют NaH (1,3 экв.) и суспензию перемешивают в течение 0,5 ч в атмосфере азота. Добавляют бензолсульфонилхлорид (1,2 экв.), и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Летучие вещества выпари-4 006604 вают. Остаток растворяют в DCM, раствор промывают насыщенным раствором NаНСО 3, сушат (MgSO4),фильтруют и концентрируют, и получают маслянистый остаток, который очищают хроматографией на силикагеле с использованием в качестве элюента гексана и этилацетата (7:3), и получают трет-бутил-4[1-(бензолсульфонил)-1 Н-индол-4-ил)]-1-пиперазинкарбоксилат (3). ВЭЖХ: чистота 100%. Анализ методом ЯМР (1 Н и 13 С) и МС подтверждает установленную структуру. Стадия (с): Удаление защитной ВОС-группы Группу ВОС из промежуточного соединения 3 удаляют, растворяя соединение в метаноле и добавляя затем эфир, насыщенный газообразным НСl. Гидрохлорид (4) отфильтровывают и сушат. В. Получение фармацевтической композиции Таблетка Активные ингредиенты 1 и 2 смешивают с ингредиентами 3, 4, 5 и 6 в течение примерно 10 мин. Затем добавляют стеарат магния (7), полученную смесь перемешивают в течение примерно 5 мин и прессуют в форме таблеток с покрытием или без него. С. Аффинность к рецепторам и анализ эффективности Анализ аффинности к рецептору 5-НТ 2C Аффинность к рецептору 5-HT2C определяют в сравнительных экспериментах, где с помощью технологии анализа близости сцинтилляции (SPA) контролируют способность соединения при серийном разведении заменять 3H-меченный 5-НТ, связанный с мембранами, полученными из трансфицированной клеточной линии НЕК 293, устойчиво экспрессирующей белок рецептора 5-НТ 2C человека. Неспецифическое связывание определяют с использованием 5 мкМ миансерина. Анализ аффинности к рецептору 5-НТ 2A Аффинность к рецептору 5-НТ 2A определяют в сравнительных экспериментах, где способность соединения при серийном разведении заменять 3H-меченный кетансерин или диэтиламид лизергиновой кислоты (LSD), связанный с мембранами, полученными из трансфецированной клеточной линии СНО,устойчиво экспрессирующей белок рецептора 5-НТ 2A человека, контролируют путем измерения сцинтилляционным счетчиком радиоактивности гомогенатов мембран, фильтрованных на фильтрах из стекловолокна. Неспецифическое связывание определяют с использованием 5 мкМ миансерина. Анализ аффинности к рецептору 5-НТ 2B Аффинность к рецептору 5-НТ 2B определяют в сравнительных экспериментах, где способность соединения при серийном разведении заменять 3H-меченный 5-НТ, связанный с мембранами, полученными из трансфицированной клеточной линии СНО, устойчиво экспрессирующей белок рецептора 5-НТ 2B человека, контролируют с помощью технологии анализа близости сцинтилляции (SPA). Неспецифическое связывание определяют с использованием 5 мкМ миансерина. Анализ эффективности в отношении рецептора 5-HT2C Эффективность агониста в отношении рецептора 5-НТ 2C определяют по способности соединения мобилизовать внутриклеточный кальций в трасфицированных клетках НЕК 293, устойчиво экспрессирующего белок рецептора 5-НТ 2C человека, с использованием образующего хелатный комплекс с кальцием флуоресцентного красителя FLUO-3 (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США). Относительную эффективность (%) измеряют относительно эффективности серотонина при содержании 1 мкМ. Анализ аффинности к рецептору 5-HT6 В анализе на связывание радиолиганда используют диэтиламид [3H]-лизергиновой кислоты (LSD). Анализ осуществляют в 96-луночных планшетах путем добавления 11 мкл раствора испытываемого соединения при соответствующем разведении (в анализе используют 11 серийных концентраций образцов при двукратном повторе), 11 мкл раствора радиолиганда и 178 мкл промытой смеси гранул SPA, сенсибилизированных WGA, и мембран в буфере для связывания, полученных из клеток НЕК 293, содержащих клонированный рецептор 5-НТ 6 человека. Планшеты встряхивают в течение примерно 5 мин и затем инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем планшеты загружают в счетные кассеты и проводят подсчет импульсов в сцинтилляционном счетчике. Полученное cpm (число импульсов в минуту) специфического связывания вставляют в односайтовую модель связывания с использованием GraphPad Prism, версия 2.0. Установленные значения IC50 переводят в величины Ki константы аффинности с использованием уравнения Ченга-Прусоффа (Cheng Y.C. et al., Biochem. Pharmacol., 1973, 22, 3099-3108). Анализ эффективности в отношении рецептора 5-HT6 Возможности антагониста для рецептора 5-НТ 6 определяют по способности соединения антагонизировать повышение сАМР, вызываемое 5-НТ в клетках НЕК 293, устойчиво экспрессирующих белок рецептора 5-НТ 6 человека, с использованием прямой системы скрининг-анализа сАМР SPA (RPA559,Amersham Pharmacia Biotech, Упсала, Швеция).D. Испытание на потребление корма Испытываемые соединения Агонисты рецептора 5-НТ 2C фумарат(2R)-метил-1-3-[2-(3-пиридинилокси)этокси]-2 пиразинилпиперазина ("PNU-183933F") и фумарат (2R)-1-(3-2-[(2-этокси-3-пиридинил)окси]этокси-2 пиразинил)-2-метилпиперазина ("BVT.2938F") растворяют в физиологическом растворе (0,9% NaCl) и разбавляют в том же носителе до соответствующей концентрации. Антагонисты рецептора 5-НТ 6 гидрохлорид 6-метил-9-(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6 гексагидроазепино[4,5-b]индола("PNU-186053A") и гидрохлорид 1-(фенилсульфонил)-4-(1 пиперазинил)-1H-индола ("BVT.5182C") растворяют и разбавляют в 25% циклодекстрине. Свежие растворы получают в день обработки. Животные Используют самцов мышей в возрасте 8-9 недель (C57BL/6JBom-Lepob (ob/ob), Бомхольтсгард, Дания) со средней массой тела 45 г. Животные содержатся по одному в клетках при 231 С, влажность 4060%, и имеют свободный доступ к воде и стандартному лабораторному корму. Световой цикл 12 ч света/12 ч темноты устанавливают, выключая свет в 5 ч дня. Животных выдерживают в течение по меньшей мере одной недели перед началом исследования. В периоды эксперимента животные получают специальный корм (BioServ, Френктаун, Нью-Джерси, США, свободные от пыли гранулы с точной массой каждой 20 мг). Экспериментальный раздел В начале исследования животных переносят в специальные "рабочие испытательные клетки" (модульная система испытаний поведения животных Habitest, Colbourn Instr., Аллентаун, Пенсильвания,США). Такие клетки содержат кормушку с датчиками для измерения потребления корма, оптический ликометр для регистрации потребления воды и инфракрасный монитор для регистрации общей двигательной активности. Мониторы присоединяют к компьютеру, непрерывно контролирующему и регистрирующему события. Пищевые гранулы взвешивают в количестве, необходимом для одного полного исследования, и заполняют свежей водопроводной водой и взвешивают бутыли для воды. Животных выдерживают в новой для них окружающей среде в течение трех суток для установления базовых показателей. Животных взвешивают в 3 ч дня в начале и в конце исследования. Соединения вводят между 4,20 и 5,00 ч дня до наступления темноты. Три группы животных получают (i) антагонист 5-НТ 6 в 25% циклодекстрине; (ii) агонист 5-HT2C в физиологическом растворе и (iii) сочетание агониста 5-НТ 2C и антагониста 5-HT6, соответственно. При комбинированном введении антагонист 5-НТ 6 или физиологический раствор вводят за 30 мин до введения агониста 5-НТ 2C или 25% циклодекстрина. Четвертая группа получает,соответственно, носитель, вводимый таким же способом. Исследование заканчивают на пятый день. Взвешивание осуществляют на весах Mettler-Toledo PR5002/pR802 с вспомогательным компьютером. Оценка результатов Группа для каждой дозы состоит из 12-16 животных. Данные корректируют на потерю корма, основанную на взвешивании потерянного корма в течение 22 ч, и предполагают, что такая потеря пропорциональна времени. Вычисления проводят с данными до и после обработки. Величины выражают в виде процентов от базового потребления корма (среднеестандартное отклонение) для разницы между поглощением корма до обработки и через 3 ч (5-8 ч после полудня), 6 ч (5-11 ч после полудня), 12 ч (5 ч дня - 5 ч утра), 21 ч (5 ч дня - 2 ч дня). Результаты, приведенные на фиг. 1, показывают, что комбинированная обработка антагонистом рецептора 5-НТ 6 "PNU-186053 А" (50 мг/кг, подкожно) и агонистом рецептора 5-НТ 2C "PNU-183933F" (50 мг/кг, перорально) снижает потребление корма значительно больше, чем соединения, принятые по одному. Соответственно, результаты, приведенные на фиг. 2, показывают, что комбинированная обработка агонистом рецептора 5-НТ 2C "BVT.2938F" (5 мг/кг, подкожно) и антагонистом рецептора 5-НТ 6"BVT.5182C" (3 мг/кг, подкожно) снижает потребление корма через 12 и 21 ч после введения значительно больше, чем соединения, принятые по одному. Таким образом, очевидно, что комбинированное лечение агонистом рецептора 5-НТ 2C и антагонистом рецептора 5-HT6 снижает потребление корма более эффективно по сравнению с лечением, или одним агонистом, или одним антагонистом. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество сочетания агониста рецептора 5-HT2C, которым является арилпиперазин, такой как пиперазинилпиразин и антагониста рецептора-6 006604 5-НТ 6, выбранного из азепиноиндолов, таких как арилсульфонзамещенные гексагидроазепининдолы и арилсульфонилиндолы или соли, энантиомера или пролекарства указанного агониста и/или антагониста и, необязательно, фармацевтически приемлемый носитель. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой агонист рецептора 5-HT2C имеет селективность в отношении рецептора 5-HT2C по меньшей мере примерно 10, предпочтительно по меньшей мере примерно 20, по сравнению с рецептором 5-НТ 2A, рецептором 5-НТ 2B и рецептором 5-НТ 6, соответственно. 3. Фармацевтическая композиция по п.1 или 2, в которой антагонист рецептора 5-НТ 6 имеет селективность в отношении рецептора 5-НТ 6 по меньшей мере примерно 10, предпочтительно по меньшей мере примерно 20, по сравнению с рецептором 5-НТ 2A, рецептором 5-НТ 2B и рецептором 5-НТ 2C, соответственно. 4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой агонистом рецептора 5-HT2C является фумарат(2R)-метил-1-3-[2-(3-пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина (PNU-183933F). 5. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой агонистом рецептора 5-НТ 2C является фумарат(2R)-1-(3-2-[(2-этокси-3-пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазина (BVT.2938F). 6. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 6-метил-9-(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола (PNU-186053A). 7. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 1-(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1H-индола (BVT.5182C). 8. Способ получения фармацевтической композиции по любому из пп.1-7, в котором терапевтическое количество сочетания агониста рецептора 5-HT2C, которым является арилпиперазин, такой как пиперазинилпиразин и антагониста рецептора 5-НТ 6, выбранного из азепиноиндолов, таких как арилсульфонзамещенные гексагидроазепининдолы и арилсульфонилиндолы тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем. 9. Способ по п.8, в котором агонистом рецептора 5-НТ 2C является фумарат (2R)-метил-1-3-[2-(3 пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина (PNU-183933F). 10. Способ по п.8, в котором агонистом рецептора 5-НТ 2 С является фумарат (2R)-1-(3-2-[(2 этокси-3-пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазина (BVT.2938F). 11. Способ по п.8, в котором антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 6-метил-9(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола (PNU-186053A). 12. Способ по п.8, в котором антагонистом рецептора 5-HT6 является гидрохлорид 1(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1 Н-индола (BVT.5182C). 13. Продукт, содержащий агонист рецептора 5-НТ 2C, которым является арилпиперазин, такой как пиперазинилпиразин и антагонист рецептора 5-НТ 6, выбранный из азепиноиндолов, таких как арилсульфонзамещенные гексагидроазепининдолы и арилсульфонилиндолы в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении болезни, связанной с рецептором 5-НТ 2C и рецептором 5-НТ 6. 14. Продукт по п.13, в котором агонистом рецептора 5-НТ 2C является фумарат (2R)-метил-1-3-[2(3-пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина (PNU-183933F). 15. Продукт по п.13, в котором агонистом рецептора 5-НТ 2C является фумарат (2R)-1-(3-2-[(2 этокси-3-пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазина (BVT.2938F). 16. Продукт по п.13, в котором антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 6-метил-9(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола (PNU-186053A). 17. Продукт по п.13, в котором антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 1(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1 Н-индола (BVT.5182C). 18. Продукт по п.13, где болезнь выбирают из числа нарушений питания. 19. Продукт по п.18, где болезнь представляет собой избыточный вес или ожирение. 20. Применение агониста рецептора 5-НТ 2C, которым является арилпиперазин, такой как пиперазинилпиразин и антагониста рецептора 5-НТ 6, выбранного из азепининдолов, таких как арилсульфонзамещенные гексагидроазепининдолы и арилсульфонилиндолы для изготовления лечебного средства для лечения болезни, связанной с рецептором 5-НТ 2C и рецептором 5-НТ 6. 21. Применение по п.20, где агонистом рецептора 5-HT2C является фумарат (2R)-метил-1-3-[2-(3 пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина (PNU-183933F). 22. Применение по п.20, где агонистом рецептора 5-НТ 2C является фумарат (2R)-1-(3-2-[(2-этокси 3-пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазина (BVT.2938F). 23. Применение по п.20, в котором антагонистом рецептора 5-HT6 является гидрохлорид 6-метил-9(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола (PNU-186053A). 24. Применение по п.20, в котором антагонистом рецептора 5-HT6 является гидрохлорид 1(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1 Н-индола (BVT.5182C). 25. Применение по любому из пп.20-24, где болезнь выбирают из числа нарушений питания. 26. Применение по любому из пп.20-25, где болезнь представляет собой избыточный вес или ожирение.-7 006604 27. Способ предупреждения или лечения болезни, связанной с рецептором 5-НТ 2 С и рецептором 5 НТ 6, включающий введение человеку или животному, нуждающемуся в этом, агониста рецептора 5 НТ 2 С, которым является арилпиперазин, такой как пиперазинилпиразин и антагониста рецептора 5-НТ 6,выбранного из азепиноиндолов, таких как арилсульфонзамещенные гексагидроазепининдолы и арилсульфонилиндолы в достаточных количествах для обеспечения терапевтического эффекта. 28. Способ по п.27, где агонистом рецептора 5-НТ 2 С является фумарат (2R)-метил-1-3-[2-(3 пиридинилокси)этокси]-2-пиразинилпиперазина (PNU-183933F). 29. Способ по п.27, где агонистом рецептора 5-НТ 2 С является фумарат (2R)-1-(3-2-[2-(этокси-3 пиридинил)окси]этокси-2-пиразинил)-2-метилпиперазина (BVT.2938F). 30. Способ по п.27, в котором антагонистом рецептора 5-НТ 6 является гидрохлорид 6-метил-9(фенилсульфонил)-1,2,3,4,5,6-гексагидроазепино[4,5-b]индола (PNU-186053A). 31. Способ по п.27, в котором антагонистом рецептора 5-HT6 является гидрохлорид 1(фенилсульфонил)-4-(1-пиперазинил)-1 Н-индола (BVT.5182C). 32. Способ по любому из пп.27-31, где болезнь выбирают из числа нарушений питания. 33. Способ по п.32, где болезнь представляет собой избыточный вес или ожирение. 34. Способ по любому из пп.27-33, где агонист рецептора 5-НТ 2 С и антагонист рецептора 5-НТ 6 вводят в виде комбинированной фармацевтической композиции.