Комбинированная противоопухолевая терапия, включающая применение производных замещенного акрилоилдистамицина и ингибиторов топоизомераз i и ii

006684 Данное изобретение относится к области лечения рака и представляет противоопухолевую композицию, содержащую производное замещенного акрилоилдистамицина, точнее производное -бром- или-хлоракрилоилдистамицина, и ингибитор топоизомеразы I или II типа, проявляющие синергическое противоопухолевое действие. Дистамицин А и его аналоги, в дальнейшем называемые дистамицин и дистамицинподобные производные, известны в данной области как цитотоксические агенты, используемые в противоопухолевой терапии. Дистамицин А является антибиотиком с антивирусной и антипротозойной активностью, содержащим полипиррольную структуру (Nature 203: 1064 (1964); J. Med. Chem. 32: 774-778 (1989. В публикациях международных патентных заявок WO 90/11277, WO 98/04524, WO 98/21202, WO 99/50265, WO 99/50266 и WO 01/40181 (заявляющие приоритет заявки на патент Великобритании 9928703,9), все на имя заявителя и включенные в заявку в качестве ссылок, описывают производные акрилоилдистамицина,в которых амидинофрагмент дистамицина необязательно замещен азотсодержащими концевыми группами, такими как, например, цианамидино, N-метиламидино, гуанидино, карбамоил, амидоксим, циано и тому подобными и/или в которых полипиррольная структура дистамицина или ее часть замещена карбоциклическим или гетероциклическим фрагментом. В первом аспекте данного изобретения представляют фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель и в качестве активного ингредиента производное акрилоилдистамицина формулы (I) где R1 означает атом брома или хлора;R2 означает группу формулы (II) где R5, R6 и R7, одинаковые или разные, означают водород или С 1-С 4 алкил; или его фармацевтически приемлемую соль; и противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II типа. В объем данного изобретения включены фармацевтические композиции, содержащие любой из возможных изомеров, соединений формулы (I), рассматриваемых отдельно или в смеси, а также метаболиты и фармацевтически приемлемые биопредшественники (иначе говоря, известные как пролекарства) соединений формулы (I). Если не указано особо, в данном описании изобретения указанный дистамицин или дистамицинподобная структура R2 означает любой фрагмент, структурно прочно связанный с самим дистамицином,например, возможно посредством замещения концевого амидинофрагмента дистамицина и/или его полипиррольной структуры или ее части. Ингибиторы топоизомеразы I и II известны в данной области и описаны в различных научных публикациях. Главными представителями ингибиторов топоизомеразы I являются производные камптотецина,такие как, например, СРТ-11, топотекан, 9-аминокамптотецин, 9-нитрокамптотецин и 10,11 метилендиоксикамптотецин. Ингибиторами топоизомеразы II являются, в частности, производные антрациклина, такие как доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, неморубицин и идарубицин; соединения подофиллотоксина этопозид и тенипозид; производное антрахинона, подобное митоксантрону и лозоксантрону; производные-1 006684 акридина, подобные амсакрину и актиномицину D. См. Cancer Principles and Practice of Oncology, Lippincott-Raven Ed. (1997), 452-467. В соответствии с предпочтительным аспектом изобретения предоставлены вышеуказанные фармацевтические композиции, в которых ингибиторами топоизомеразы являются ингибиторы топоизомеразыII, в частности доксорубицин и этопозид. Если не указано особо, в данном описании под названными группами С 1-С 4 алкила или алкокси подразумевают группу с прямой или разветвленной цепью, выбранную из метила, этила, н-пропила, изопропила, н-бутила, изобутила, втор-бутила, трет-бутила, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, нбутокси, изобутокси, втор-бутокси или трет-бутокси. Более предпочтительными являются фармацевтические композиции изобретения, содержащие вышеуказанное производное акрилоилдистамицина формулы (I), где R1 означает бром или хлор; R2 означает вышеприведенную группу формулы (II), где r равно 0, m равно 0 или 1, n равно 4, а В имеет описанные выше значения. В пределах названного класса еще более предпочтительными являются фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы (I), где R1 означает бром или хлор; R2 является вышеуказанной группой формулы (II), в которой r равно 0, m равно 0 или 1, n равно 4, а Х и Y, оба, означают СН-группы,а В выбран из где R4 означает циано или гидрокси и R5, R6 и R7, одинаковые или разные, означают водород или С 1 С 4 алкил. Фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы (I) являются соли фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот, таких как, например, хлористо-водородная, бромисто-водородная, серная, азотная, уксусная, пропионовая, янтарная, малоновая, лимонная, винная, метансульфоновая, п-толуолсульфоновая кислота и тому подобные. Примерами предпочтительных производных акрилоилдистамицина формулы (I) в композициях изобретения, необязательно в форме фармацевтически приемлемых солей, предпочтительно хлористоводородной кислоты, являются 1) гидрохлорид N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино(имино)метил]аминоэтил)амино]карбонил-1-метил 1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)4-[(2-бромакрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамида; 2) гидрохлорид N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино(имино)метил]аминоэтил)амино]карбонил-1-метил 1H-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1H-пиррол-3-ил)4-[(2-хлоракрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамида. Вышеупомянутые соединения формулы (I) или конкретно охарактеризованные как таковые или посредством общей формулы являются известными или могут быть легко получены известными способами, которые описаны, например, в вышеуказанных публикациях международных патентных заявок WO 90/11277, WO 98/04524, WO 98/21202, WO 99/50265 и WO 99/50266, а также в WO 01/40181. Кроме того, в данном изобретении представляют продукт, содержащий производное акрилоилдистамина формулы (I), которое охарактеризовано выше, и противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в противоопухолевой терапии. Следующим аспектом данного изобретения является способ лечения млекопитающего, включая человека, страдающего неопластическим заболеванием, включающий введение указанному млекопитающему вышеуказанного производного акрилоилдистамицина формулы (I) и противоопухолевого ингибитора топоизомеразы I или II в количествах, эффективных для осуществления синергического противоопухолевого действия. В данном изобретении также предусматривается способ снижения побочных эффектов, вызванных противоопухолевой терапией антибластомным агентом, у млекопитающего, включая человека, при необходимости такого снижения, включающий введение указанному млекопитающему комбинированного препарата, содержащего противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II и производное акрилоилдистамицина формулы (I), описанное выше, в количествах, эффективных для осуществления синергического противоопухолевого действия. Под используемым в описании термином "синергическое противоопухолевое действие" подразумевают ингибирование роста опухоли, предпочтительно полную регрессию опухоли, в результате введения эффективного количества комбинированного препарата, содержащего производное акрилоилдистамицина формулы (I) и ингибитор топоизомеразы I или II млекопитающим, включая человека.-2 006684 Под используемым термином "введенный" или "введение" подразумевают парентеральное и/или пероральное применение; термин "парентеральное" означает внутривенное, подкожное и внутримышечное введение. Согласно способу данного изобретения производное акрилоилдистамицина может быть введено одновременно с соединением, проявляющим активность ингибитора топоизомеразы I или II, например, с соединением класса камптотецина, антрациклина, митоксантрона, эпиподофиллотоксина или акридина. Альтернативно, оба соединения могут быть введены последовательно в любом порядке. В этом отношении очевидно, что фактический, предпочтительный способ и порядок введения будут изменяться, кроме прочего, в зависимости от используемого конкретного препарата акрилоилдистамицина формулы (I), от используемого определенного препарата ингибитора топоизомеразы I или II, например, камптотецинов, таких как СРТ-11, топотекан, 9-АС; антрациклинов, таких как доксорубицин,даунорубицин, эпирубицин, идарубицин, неморубицин; антрахинонов, таких как митоксантрон и лозоксантрон; эпиподофиллотоксинов, таких как этопозид, тенипозид; производных акридина, таких как амсакрин и актиномицин D, конкретного вида опухоли, которую лечат, а также конкретного субъекта, которого лечат. Для введения производного акрилоилдистамицина формулы (I) согласно способу изобретения курс обычно применяемой терапии включает дозы, варьирующиеся приблизительно от 0,05 до 100 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 0,1 до 50 мг/м 2 поверхности тела. Что касается введения ингибитора топоизомеразы I или II согласно способу изобретения, курс обычно используемой терапии включает следующее: при введении камптотецинов дозы варьируются приблизительно от 1 до 1000 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 10 до 500 мг/м 2 поверхности тела; при введении антрациклинов дозы варьируются приблизительно от 0,1 до 1000 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 0,5 до 500 мг/м 2 поверхности тела; при введении эпиподофиллотоксинов дозы варьируются приблизительно от 1 до 500 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 10 до 400 мг/м 2 поверхности тела; при введении антрахинонов дозы варьируются приблизительно от 1 до 300 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 5 до 100 мг/м 2 поверхности тела,при введении производных акридина и актиномицина D дозы варьируются приблизительно от 1 до 1000 мг/м 2 поверхности тела и более предпочтительно приблизительно от 10 до 500 мг/м 2 поверхности тела. Противоопухолевая терапия данного изобретения особенно подходит для лечения опухолей молочной железы, яичников, легких, прямой кишки, почек, желудка, поджелудочной железы, печени, меланомы, лейкоза и опухолей мозга у млекопитающих, включая человека. Следующий аспект данного изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество производного акрилоилдистамицина формулы (I), описанной выше, и противоопухолевого ингибитора топоизомеразы I или II, для получения лекарственного средства для применения, для предупреждения или лечения метастаза или лечения опухолей посредством ингибирования ангиогенеза. Как сказано выше, эффект производного акрилоилдистамицина формулы (I) и ингибитора топоизомеразы I или II, такого как производное антрациклина или этопозида, значительно повышается без параллельного увеличения токсичности. Другими словами, комбинированная терапия данного изобретения повышает противоопухолевое действие производного акрилоилдистамицина и ингибитора топоизомеразы I или II и, следовательно, обеспечивает наиболее эффективное и наименее токсичное лечение опухолей. Супераддитивный эффект комбинированных препаратов изобретения продемонстрирован, например, с помощью следующих тестов in vivo, которые предназначены для иллюстрации данного изобретения без какого-либо ограничения его. В таблице ниже представлена антилейкозная активность в отношении диссеминированного лейкозаL1210 у мышей, полученная комбинированием гидрохлорида N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино-(имино)метил] аминоэтил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино] карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)-4-[(2-бромакрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамида, как репрезентативного соединения формулы (I) - внутренний код PNU 166196, с доксорубицином. Доксорубицин в дозе 10 мг/кг (день +1 после инъекции опухоли и через 2 ч после введения PNU 166196) и PNU 166196 в дозе 0,52 мг/кг (дни +1) были ассоциированы без проявления токсичности со значениями %ILS 58 и 33 соответственно. При комбинировании доксорубицина и PNU 166196 в тех же дозах по той же схеме, наблюдали увеличение активности со значением %ILS 100, что, таким образом, указывает на синергический эффект.-3 006684 Антилейкозная активность производного (I) акрилоилдистамицина в сочетании с доксорубицином в отношении мышиного диссеминированного лейкоза L12101 Соединение Схема лечения 2 Доза, мг/кг/день 1. Лейкозные клетки L1210 (105/мышь CD2F1) вводили внутривенно на 0 день. 2. Лечение проведено внутривенно. 3. Увеличение продолжительности жизни: [(среднее время выживания леченых мышей/среднее время выживания контролей)100] - 100. 4. Количество токсических случаев смерти/количество мышей. Доксорубицин вводили через 2 ч после введения PNU 166196. Для этих экспериментов PNU 166196 и доксорубицин солюбилизировали в воде для инъекции. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель и в качестве активного ингредиента производное акрилоилдистамицина формулы (I) где R1 означает атом брома или хлора;R2 означает группу формулы (II) где R5, R6 и R7, одинаковые или разные, означают водород или С 1-С 4 алкил; или его фармацевтически приемлемую соль; и противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II типа. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой ингибитор топоизомеразы представляет ингибитор топоизомеразы II, выбранный из производных антрациклина, включающих доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, неморубицин и идарубицин; соединений эпиподофиллотоксина, включая этопозид и тенипозид; производных антрахинона, включая митоксантрон и лозоксантрон; производных акридина,включающих амсакрин и дактиномицин. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, в которой ингибитор топоизомеразы II представляет собой доксорубицин или этопозид. 4. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая производное акрилоилдистамицина, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, выбранное из группы, состоящей из 1) гидрохлорида N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино(имино)метил]аминоэтил)амино]карбонил-1-метил 1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)4-[(2-бромакрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамида; 2) гидрохлорида N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино(имино)метил]аминоэтил)амино]карбонил-1-метил 1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)4-[(2-хлоракрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамида. 5. Продукты, содержащие производное акрилоилдистамицина формулы (I)-4 006684 определенное в п.1; или его фармацевтически приемлемую соль; и противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения для лечения опухолей. 6. Продукты по п.5, в которых ингибитор топоизомеразы представляет ингибитор топоизомеразы II,выбранный из производных антрациклина, включающих доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, неморубицин и идарубицин; соединений эпиподофиллотоксина, включающих этопозид и тенипозид; производных антрахинона, включающих митоксантрон и лозоксантрон; производных акридина, включающих амсакрин и дактиномицин. 7. Продукты по п.6, в которых ингибитором топоизомеразы II являются доксорубицин или этопозид. 8. Продукты по п.5, в которых производное акрилоилдистамицина выбрано из группы, определенной в п.4. 9. Применение производного акрилоилдистамицина формулы (I) по п.1 для получения лекарственного средства для использования в комбинированной терапии с противоопухолевым ингибитором топоизомеразы I или II для лечения опухолей. 10. Применение по п.9, где лекарственное средство дополнительно содержит указанный ингибитор топоизомеразы I или II. 11. Применение по п.9 или 10, где ингибитор топоизомеразы является ингибитором топоизомеразыII, выбранным из этопозида или доксорубицина. 12. Применение по п.9 или 10, где производное акрилоилдистамицина выбрано из группы, которая определена в п.4. 13. Применение по любому одному из пп.9-12, где опухоль выбрана из опухолей молочной железы,яичников, легкого, прямой кишки, почек, желудка, поджелудочной железы, печени, меланомы, лейкоза и опухолей мозга. 14. Применение производного акрилоилдистамицина формулы (I), которое определено в п.1, для получения лекарственного средства для использования в комбинированной терапии с противоопухолевым ингибитором топоизомеразы I или II для предупреждения или лечения метастаза или для лечения опухолей посредством ингибирования ангиогенеза. 15. Применение по п.14, где лекарственное средство дополнительно содержит указанный ингибитор топоизомеразы I или II. 16. Способ лечения млекопитающего, включая человека, страдающего неопластическим заболеванием, включающий введение указанному млекопитающему производного акрилоилдистамицина формулы (I), которое определено в любом одном из пп.1-4, и противоопухолевого ингибитора топоизомеразы I или II в количествах, эффективных для достижения синергического противоопухолевого эффекта. 17. Способ снижения побочных эффектов, вызванных противоопухолевой терапией антибластомным препаратом, у млекопитающего, включая человека, при необходимости такого снижения, включающий введение указанному млекопитающему комбинированного препарата, содержащего противоопухолевый ингибитор топоизомеразы I или II и производное акрилоилдистамицина формулы (I), которое определено в любом одном из пп.1-4, в количествах, эффективных для достижения синергического противоопухолевого действия. 18. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой производным дистамицина, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, является N-(5-[(5-[(5-[(2-[амино(имино)метил]амино этил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино]карбонил-1-метил-1 Н-пиррол-3-ил)-4-[(2-бромакрилоил)амино]-1-метил-1 Н-пиррол-2-карбоксамид и в которой ингибитор топоизомеразы представляет ингибитор топоизомеразы II, выбранный из группы, состоящей из этопозида или доксорубицина.