Производные аминофталазинона, активные как ингибиторы киназ, способ их получения и содержащие их фармацевтические композиции

006645 Настоящее изобретение относится к аминофталазиноновым производным, активным как ингибиторы киназы, и, более конкретно, оно относится к производным 7-аминофталазин-1-она, способу их получения, фармацевтическим композициям, включающим их, и к их применению в качестве терапевтических средств, особенно при лечении заболеваний, связанных с нерегулированными протеинкиназами. Нарушение функционирования протеинкиназ (ПК) является основным критерием многочисленных заболеваний. Большая часть онкогенов и протоонкогенов включены в код раков человека для ПК. Увеличенные активности ПК также вовлечены во многие незлокачественные заболевания, такие как доброкачественная гиперплазия простаты, семейный аденоматоз, полипоз, нейрофиброматоз, псориаз, пролиферация клеток гладкой мускулатуры сосудов, связанная с атеросклерозом, фиброз легких, гломерулонефритный артрит и послеоперационный стеноз и рестеноз. ПК также участвуют в воспалительных состояниях и в размножении вирусов и паразитов. ПК могут также играть основную роль в патогенезе и развитии нейродегенеративных нарушений. Нарушение функционирования или регуляции ПК раскрыты, например, в Current Opinion in Chemical Biology 1999, 3, 459-465. Задачей изобретения является создание соединений, которые пригодны в терапии в качестве средств против множества заболеваний, вызываемых и/или ассоциированных с нерегулируемой активностью протеинкиназы. Еще одной задачей изобретения является создание соединений, которые обладают множественной ингибирующей активностью в отношении протеинкиназы. Авторы настоящего изобретения в настоящее время обнаружили, что некоторые производные 7 аминофталазин-1-она, далее в данном описании называемые аминофталазиноновыми производными или аминофталазинонами, обладают множественной ингибирующей активностью в отношении протеинкиназы и, таким образом, применимы в терапии для лечения заболеваний, ассоциированных с нерегулируемыми протеинкиназами. Более конкретно, аминофталазиноны данного изобретения применимы при лечении разнообразных раков, включающих, но не ограничиваясь ими, карциному мочевого пузыря, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, легкого, включая рак малых клеток легкого, пищевода, желчного пузыря, яичника, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, простаты и кожи, включая карциному сквамозных клеток; гематопоэтические опухоли лимфоидной линии, включающие лейкемию,острую лимфоцитарную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, В-клеточную лимфому, Тклеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, лимфому ворсинчатых клеток и лимфому Беркитта; гематопоэтические клетки миелоидной линии, включающие острые и хронические миелогенные лейкемии, миелодиспластический синдром и промиелоцитарную лейкемию; опухоли мезенхимального происхождения, включающие фибросаркому и рабдомиосаркому; опухоли центральной и периферической нервной системы, включающие астроцитому, нейробластому, глиому и шванномы; другие опухоли, включающие меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродермию, кератоксантому, тиреоидный фолликулярный рак и саркому Капоши. Вследствие ключевой роли ПК в регуляции клеточной пролиферации данные аминофталазиноны также являются применимыми для лечения разнообразных клеточных пролиферативных нарушений,таких как, например, доброкачественная гиперплазия простаты, семейный аденоматоз, полипоз, нейрофиброматоз, псориаз, пролиферация клеток гладкой мускулатуры сосудов, связанная с атеросклерозом,фиброз легких, гломерулонефритный артрит и послеоперационный стеноз и рестеноз. Соединения данного изобретения могут применяться для лечения болезни Альцгеймера, что можно предположить, исходя из того факта, что cdk5 включен в фосфорилирование тау-белка (J. Biochem., 117,741-749, 1995). Соединения данного изобретения в качестве модуляторов апоптоза могут также применяться для лечения рака, вирусных инфекций, профилактики развития СПИД у ВИЧ-инфицированных пациентов,аутоиммунных заболеваний и нейродегенеративных нарушений. Соединения данного изобретения могут применяться для ингибирования опухолевого ангиогенеза и метастазирования. Соединения данного изобретения применимы в качестве ингибиторов циклинзависимой киназы(cdk) и также как ингибиторы других протеинкиназ, таких как, например, протеинкиназы С в различных изоформах, Met, PAK-4, PAK-5, ZC-1, STLK-2, DDR-2, Aurora 1, Aurora 2, Bub-1, PLK, Chk1, Chk2,HER2, raf1, MEK1, МАРK, EGF-R, PDGF-R, FGF-R, IGF-R, VEGF-R, PI3K, weel киназа, Src, Abl, Akt,ILK, MK-2, IKK-2, Cdc7, Nek и, таким образом, являются эффективными для лечения заболеваний, связанных с другими протеинкиназами. Некоторые аминофталазиноновые и аминофталазиндионовые производные известны в области техники как химические промежуточные соединения, терапевтические средства и даже как ингибиторы протеинкиназы. В качестве примера соединения N-[3-[2,4-бис(1,1-диметилпропил)фенокси]пропил]-N'-(3,4 дигидро-4-оксо-6-фталазинил)мочевина и 2-[2,4-бис(1,1-диметилпропил)фенокси]-N-(3,4-дигидро-4-1 006645 оксо-6-фталазинил)бутанамид раскрыты как теплопроявляющие средства формирования образов в JP-A09061961 Heisei. СоединениеNovartis как синтетические промежуточные соединения для получения анилинофталазинов, как ингибиторов VEGF рецептора тирозинкиназы. В дополнение к вышесказанному, фталазиндионовые или фталазиноновые производные, содержащие аминогруппы в обоих положениях 6 и 7 цикла такие как, например, 7-(циклогексиламино)-6 фениламино-1(2 Н)-фталазинон и 6,7-бис(фениламино)-1(2 Н)-фталазинон раскрыты в ЕР-А-600831 отCiba-Geigy в качестве ингибиторов протеинкиназы. Соответственно, настоящее изобретение относится к способу лечения заболеваний, вызванных и/или ассоциированных с измененной активностью протеинкиназы путем введения млекопитающему,нуждающемуся в данном лечении, эффективного количества аминофталазинонового производного,представленного формулой (I) где Ra и Rb, каждый независимо, представляют собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкилC1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или один из Ra или Rb представляет собой водород или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу, выбранную из -COR', -CONHR', -COOR' или -SO2R', где R' представляет собой водород или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как изложено выше;R1 представляет собой группу формулы -CHR4R5, где R4 И R5 представляют собой, каждый независимо, водород или необязательно замещенную группу, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R1 представляет собой группу формулы -NHR', -NR'COR", -NR'CONHR" или -NR'SO2R", где R' имеет вышеуказанные значения, отличные от водорода, и R" представляет собой водород или имеет значения,изложенные выше для R';R2 представляет собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арилC1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; любой R3, будучи помещен в одно или несколько из свободных положений 5, 6 и 8 фталазинонового кольца, представляет собой, независимо от каждого другого, галоген, нитро, карбокси, циано или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, С 3-С 6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R3 представляет собой группу,выбранную из -COR', -CONHR', -SO2R', -NR'R", -NR'COR", -NR'CONHR' или -NR'SO2R", где R' и R" являются одинаковыми или различными, водородом или группой, как изложено выше;m равно 0 или целому числу от 1 до 3; или его фармацевтически приемлемой соли. В предпочтительном воплощении способа, описанного выше, заболевание, вызываемое и/или ассоциированное с измененной активностью протеинкиназы выбирают из группы, состоящей из рака, нарушений пролиферации клеток, болезни Альцгеймера, вирусных инфекций, аутоиммунных заболеваний и нейродегенеративных расстройств. Конкретные виды рака, которые можно лечить, включают карциному, карциному сквамозных клеток, гематопоэтические опухоли миелоидной или лимфоидной линии, опухоли мезенхимного происхождения, опухоли центральной и периферической нервной системы, меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродермию, кератоакантому, тиреоидный фолликулярный рак и саркому Капоши. В еще одном предпочтительном воплощении способа, описанного выше, нарушение пролиферации клетки выбирают из группы, состоящей из доброкачественной гиперплазии простаты, семейного адено-2 006645 матоза, полипоза, нейрофиброматоза, псориаза, пролиферации клеток гладкой мускулатуры, связанной с атеросклерозом, фиброза легких, гломерулонефритного артрита и послеоперационного стеноза и рестеноза. Кроме того, способ настоящего изобретения относится к ингибированию опухолевого ангиогенеза и метастазирования. Настоящее изобретение далее относится к производному аминофталазинона, представленному формулой (I) где Ra и Rb, каждый независимо, представляют собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкилC1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или один из Ra или Rb представляет собой водород или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу, выбранную из -COR' , -CONHR', -COOR' или -SO2R', где R' представляет собой водород или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как изложено выше;R1 представляет собой группу формулы -CHR4R5, где R4 и R5 представляют собой, каждый независимо,водород или необязательно замещенную группу, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R1 представляет собой группу формулы -NHR', -NR'COR", -NR'CONHR" или -NR'SO2R", где R' имеет вышеуказанные значения, отличные от водорода, и R" представляет собой водород или имеет значения, изложенные выше для R';R2 представляет собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арилC1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; любой R3, будучи помещен в одно или несколько из свободных положений 5, 6 и 8 фталазинонового кольца, представляет собой, независимо от каждого другого, галоген, нитро, карбокси, циано или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R3 представляет собой группу,выбранную из -COR', -CONHR',-SO2R' , -NR'R", -NR'COR", -NR'CONHR' или -NR'SO2R", где R' и R" являются одинаковыми или различными, водородом или группой, как изложено выше;m равно 0 или целому числу от 1 до 3; или его фармацевтически приемлемой соли; исключая соединения N-[3,4-дигидро-4-оксо-1-(4 пиридинилметил)-6-фталазинил]ацетамид и N-[3,4-дигидро-4-оксо-1-(4-пиридинилметил)-6-фталазинил]-2,2,2-трифторацетамид. Соединения формулы (I), в соответствии с настоящим изобретением, могут содержать асимметрические атомы углерода и могут, следовательно, существовать либо в виде рацемических смесей или индивидуальных оптических изомеров. Соответственно, все возможные изомеры и их смеси и как метаболиты, так и фармацевтически приемлемые биопредшественники (иначе относящиеся к пролекарствам) соединений формулы (I), a также любой терапевтический способ лечения, включающий их, также находятся в объеме настоящего изобретения. Как используют в настоящем документе, если не указано иначе, под термином галоген подразумевают атом хлора, брома, фтора или йода. Под термином прямой или разветвленный C1-C6 алкил подразумевают группу, такую как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, н-гексил и т.п. Под термином C3-C6 циклоалкил подразумевают группу, такую как, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил или циклогексил. Под термином арил и гетероарил подразумевают моно-, би- или поликарбоциклический и гетероциклический углеводород с 1-2 циклическими фрагментами, либо конденсированными друг с другом или связанными одинарными связями, где по меньшей мере одно из карбоциклических или гетероциклических колец является ароматическим. Неограничивающие примеры арильных и гетероарильных групп представляют собой, например,фенил, инданил, бифенил, - или -нафтил, флуоренил, 9,10-дигидроантраценил, пиридил, пиразинил,-3 006645 пиримидинил, пиридазинил, индолил, имидазолил, имидазопиридил, 1,2-метилендиоксифенил, тиазолил,изотиазолил, пирролил, пирролилфенил, фурил, фенилфурил, бензотетрагидрофуранил, оксазолил, изоксазолил, пиразолил, хроменил, тиенил, бензотиенил, изоиндолинил, бензоимидазолил, изоиндолинилфенил, хинолинил, изохинолинил, 2,6-дифенилпиридил, хиноксалинил, пиразинил, фенилхинолинил,бензофуразанил, 1,2,3-триазолил, 1-фенил-1,2,3-триазолил и т.п. Под термином 5-7-членный гетероциклил, следовательно, охватывающим ароматические гетероциклические группы, также относящиеся к арильным группам, далее подразумевают насыщенный или частично ненасыщенный 5-7-членный карбоцикл, где один или более атомов углерода замещены 1-3 гетероатомами, такими как азот, кислород и сера. Кроме приведенных выше гетероарильных групп дополнительными примерами 5-7-членных гетероциклильных групп, необязательно бензоконденсированных или далее замещенных, являются 1,3 диоксолан, пиран, пирролидин, пирролин, имидазолидин, пиразолидин, пиразолин, пиперидин, пиперазин, морфолин, тетрагидрофуран, азепин, диазепин и т.п. В соответствии с настоящей формулой (I) для специалиста является очевидным, что когда m равно 0, группы R3 отсутствуют или, другими словами, положения 5, 6 и 8 фталазинонового цикла, в соответствии с системой нумерации, приведенной ниже, являются незамещенными или замещенными водородом Подобным образом, когда m равно 1 или 2, один или два заместителя R3, одинаковые или отличные друг от друга, присутствуют в одном или двух из положений 5, 6 или 8; в конечном счете, когда m равно 3, все из доступных положений 5, 6 или 8 заняты группами R3, одинаковыми или различными, как указано выше. В соответствии с вышеприведенными значениями, предоставленными для заместителей Ra, Rb, R',R", R2, R3, R4 и R5, любая из вышеуказанных групп может быть далее необязательно замещена по любому из свободных положений одной или более группами, например, 1-6 группами, выбранными из групп,представляющих собой галоген, нитро, оксогруппы (=O), карбокси, циано, алкил, перфорированный алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, арил, гетероциклил, аминогруппы и их производные, такие как, например, алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино, уреидо, алкилуреидо или арилуреидо; карбониламиногруппы и их производные, такие как, например, формиламино, алкилкарбониламино, алкенилкарбониламино, арилкарбониламино, алкоксикарбониламино; гидроксигруппы и их производные,такие как, например, алкокси, арилокси, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, циклоалкенилокси или алкилиденаминоокси; карбонильные группы и их производные, такие как, например, алкилкарбонил,арилкарбонил, алкоксикарбонил, арилоксикарбонил, циклоалкилоксикарбонил, аминокарбонил, алкиламинокарбонил, диалкиламинокарбонил; сульфированные производные, такие как, например, алкилтио,арилтио, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкилсульфинил, арилсульфинил, арилсульфонилокси, аминосульфонил, алкиламиносульфонил или диалкиламиносульфонил. В свою очередь, во всех подходящих случаях, каждый из вышеуказанных заместителей может быть далее замещен одной или более из вышеупомянутых групп. Среди этих последних групп и, если не определено иначе в настоящем описании, под термином перфорированный алкил подразумевают прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, как определено выше, где более чем один атом водорода, замещены атомами фтора. Примеры перфторированных алкильных групп представляют собой, например, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 1,2-дифторэтил,1,1,1,3,3,3-гексафторпропил-2-ил и т.п. Под термином алкенил или алкинил подразумевают прямую или разветвленную C2-C6 алкенильную или алкинильную группу, такую как, например, винил, аллил, изопропенил, 1-, 2- или 3 бутенил, изобутиленил, гексенил, этинил, 1- или 2-пропинил, бутинил и т.п. Из всего вышеприведенного для специалиста очевидно, что под любой группой, наименование которой идентифицировано как составное наименование, такое как, например, циклоалкилалкил, арилалкил, гетероциклилалкил, алкокси, алкилтио, арилокси, арилалкокси, гетероциклилокси, гетероциклилалкокси, алкилкарбонилокси и т.п., подразумевают общепринятым образом составленную из частей, из которых она образована. Например, термин гетероциклилалкокси обозначает алкокси (т.е. алкилокси) группу, далее замещенную гетероциклильной группой. Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) представляют собой кислотноаддитивные соли с неорганической или органической, например, азотной, хлористо-водородной, бромисто-водородной, серной, перхлорной, фосфорной, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой,-4 006645 молочной, щавелевой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансульфоновой, изетионовой и салициловой кислотой, а также соли с неорганическими или органическими основаниями, например, основаниями щелочных или щелочно-земельных металлов, особенно гидроксидами натрия, калия, кальция или магния, карбонатами или бикарбонатами, ациклическими или циклическими аминами, предпочтительно метиламином, этиламином, диэтиламином, триэтиламином или пиперидином. Первый класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где один из Ra или Rb представляет собой атом водорода или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу -COR', где R' представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как приведено выше, и R1, R2, R3 иm такие, как определено выше. Более предпочтительными в пределах данного класса, являются соединения формулы (I), где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Еще один класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где один из Ra или Rb представляет собой атом водорода или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу -CONHR', гдеR' представляет собой атом водорода или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила,циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как приведено выше, и R1, R2, R3 и m такие, как определено выше. Более предпочтительными, в пределах данного класса, являются соединения формулы (I) , где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Еще один класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где один из Ra или Rb представляет собой атом водорода или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу -COOR', где R' представляет собой атом водорода или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как приведено выше, и R1, R2, R3 и m такие, как определено выше. Более предпочтительными, в пределах данного класса, являются соединения формулы (I), где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Еще один класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где один из Ra или Rb представляет собой атом водорода или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу -SO2R' , где R' представляет собой необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как приведено выше, и R1, R2, R3 иm такие, как определено выше. Более предпочтительными, в пределах данного класса, являются соединения формулы (I), где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Еще один класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где Ra и Rb оба представляют собой атом водорода и R1, R2, R3 и m такие, как определено выше. Более предпочтительными, в пределах данного класса, являются соединения формулы (I), где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Еще один класс предпочтительных соединений данного изобретения представлен соединениями формулы (I), где один из Ra или Rb представляет собой атом водорода или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу, необязательно далее замещенную, выбранную из алкила, циклоалкилалкила, арилалкила или гетероциклилалкила, как приведено выше, и R1, R2, R3 и m такие, как определено выше. Более предпочтительными в пределах данного класса являются соединения формулы (I), где R1 представляет собой группу -CHR4R5, где R4 и R5 такие, как определено выше, R2 является водородом и m равно 0. Конкретные примеры предпочтительных соединений формулы (I) данного изобретения необязательно в виде фармацевтически приемлемых солей представляют собой 1. Метиловый эфир 4-(4-оксо-6-пропиониламино-3,4-дигидрофталазин-1-илметил)бензойной кислоты; 2. Метиловый эфир 4-[4-оксо-6-(4-трифторметилбензоиламино)-3,4-дигидрофталазин-1 илметил]бензойной кислоты;-8 006645 167. 1-[1-(3-метилбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(2,4-дифторфенил)мочевину; 168 . 1-[1-(3-метилбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3,4-дихлорфенил)мочевину; 169. 1-[1-(3-метилбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-пиридин-3-илмочевину; 170. 7-амино-4-(3-метилбензил)-2 Н-фталазин-1-он; 171. N-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]пропионамид; 172. N-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-4-трифторметилбензамид; 173. [1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]амид фуран-2-карбоновой кислоты; 174. Этиловый эфир N-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]сукцинамовой кислоты; 175. N-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-циклопентилпропионбензамид; 176. [1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]амид 2-пропилпентановой кислоты; 177. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3-трифторметилфенил)мочевину; 178. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3-метоксифенил)мочевину; 179. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-п-толилмочевину; 180. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(2,4-дифторфенил)мочевину; 181. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3,4-дихлорфенил)мочевину; 182. 1-[1-(2,4-дихлорбензил)-4-оксо-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-пиридин-3-илмочевину; 183. 7-амино-4-(2,4-дихлорбензил)-2 Н-фталазин-1-он; 184. N-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)пропионамид; 185. N-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-4-трифторметилбензамид; 186. (4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)амид фуран-2-карбоновой кислоты; 187. Этиловый эфир N-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)сукцинамовой кислоты; 188. N-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-циклопентилпропионамид; 189. (4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)амид 2-пропилпентановой кислоты; 190. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-(3-трифторметилфенил)мочевину; 191. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-(3-метоксифенил)мочевину; 192. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-п-толилмочевину; 193. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-(2,4-дифторфенил)мочевину; 194. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-(3,4-дихлорфенил)мочевину; 195. 1-(4-оксо-1-хинолин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-пиридин-3-илмочевину; 196. 7-амино-4-хинолин-3-илметил-2 Н-фталазин-1-он; 197. N-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]пропионамид; 198. N-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-4-трифторметилбензамид; 199. [4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]амид фуран-2-карбоновой кислоты; 200. Этиловый эфир N-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]сукцинамовой кислоты; 201. N-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-циклопентилпропионамид; 202. [4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]амид 2-пропилпентановой кислоты; 203. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3-трифторметилфенил)мочевину; 204. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3-метоксифенил)мочевину; 205. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-п-толилмочевину; 206. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(2,4-дифторфенил)мочевину; 207. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-(3,4-дихлорфенил)мочевину; 208. 1-[4-оксо-1-(2-трифторметилбензил)-3,4-дигидрофталазин-6-ил]-3-пиридин-3-илмочевину; 209. 7-амино-4-(2-трифторметилбензил)-2 Н-фталазин-1-он. Как указано выше, способ получения аминофталазиноновых производных формулы (I) является также предметом настоящего изобретения. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены способом,включающим а) взаимодействие соединения формулы (II) где R3 и m имеют вышеприведенные значения и Hal представляет собой атом галогена, с подходящим производным фосфина (РL3) в необязательных восстановительных условиях таким образом, чтобы получить соединение формулы (III) где Р представляет собой атом фосфора и L являются фосфиновыми лигандами;b) взаимодействие соединения формулы (III) с альдегидной смолой-СНО в присутствии подходящего восстанавливающего агента таким образом, чтобы получить соединение на подложке из смолы формулы (IV) где R3, m, P, L, Hal и смола такие, как определено выше; с) взаимодействие соединения формулы (IV) с карбонильным производным формулы (V) или нитрозопроизводным формулы (VI)R4-CO-R5 (V) R'-NO (VI) где R4, R5 и R' такие, как определено выше, таким образом, чтобы получить соединение формулы (VII) где А представляет собой группу =CR4R5 или =NR', соответственно; и необязательно взаимодействие соединения формулы (VII) в соответствии с любой из альтернативных стадий d.1) или d.2), приведенных нижеd.1) с одним из производных формул (VIII), (IX), (X) или (XI) в необязательных основных условияхR'COZ (VIII), R'NCO (IX), R'OCOZ (X), R'SO2Z (XI),где Z представляет собой атом галогена или подходящую уходящую группу и R' такой, как определено выше, так чтобы получить соединение формулы (XII)Rb-Z (XIII),где Z представляет собой атом галогена и Rb представляет собой алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил,арил, арилалкил, гетероциклил или гетероциклилалкил, как определено выше, таким образом, чтобы получить соответствующее соединение вышеприведенной формулы (XII); е) взаимодействие таким образом полученных соединений формулы (VII) или (XII) с гидразиновым производным формулы (XIV)R2-NH-NH2 (XIV),где R2 такой, как определено выше, таким образом, чтобы получить соединения формулы (XV) или (XVI) соответственно где Rb, R2, R3, m и смола такие, как определено выше, и R1 представляет собой группу формулы -CHR4R5 или -NHR', где R4, R5 и R' такие, как определено выше;f) взаимодействие соединений формулы (XV) или (XVI) в кислотных условиях таким образом, чтобы получить соединение формулы (I) и, при необходимости, превращение его в еще одно соединение формулы (I) и/или в его фармацевтически приемлемую соль. Приведенный выше способ представляет собой способ-аналог, который может быть осуществлен в соответствии с хорошо известными методиками. Для квалифицированного специалиста в данной области является очевидным, что если соединение формулы (I), полученное в соответствии со способом, приведенным выше, получают в виде смеси изомеров, их разделение на индивидуальные изомеры формулы (I), выполняемое в соответствии с общепринятыми методиками, также находится в пределах объема настоящего изобретения. Аналогично, конверсия в свободное соединение (I) из его соответствующей соли, по методикам,хорошо известным в данной области, также находится в пределах объема данного изобретения. В соответствии со стадией а) данного способа, соединение формулы (II), где Hal представляет собой атом галогена, предпочтительно атом брома, взаимодействует с подходящим производным фосфина PL3,таким как, например, трифенилфосфин, три-н-бутилфосфин, три-трет-бутилфосфин или 1,4 бис(дифенилфосфино)бутан. Предпочтительно производное фосфина представляет собой трифенилфосфин PPh3. Реакция может быть осуществлена в разнообразных растворителях, например, включающих этилацетат, этилпропионат и т.п., диметилформамид, диметилацетамид и т.п., дихлорметан, хлороформ и т.п,ацетон или ацетонитрил; предпочтительным является использование этилпропионата. Температура может изменяться приблизительно от 20 до 100 С. Реакцию можно осуществлять добавлением фосфина к раствору соединения формулы (II) или добавлением раствора (II) к фосфину. При использовании трифенилфосфина соединение формулы (II) непосредственно преобразуется в соответствующее производное формулы (III), содержащее аминогруппу вместо исходной нитрогруппы. Альтернативно, при использовании реагентов PL3, отличных от трифенилфосфина, соединение формулы(II) может быть первоначально преобразовано в промежуточное производное формулы (IIа) где R3, m, Р и L такие, как определено выше, которое должно быть соответственно восстановлено в соединение формулы (III). Используемые условия восстановления являются общепринято используемыми для восстановления ароматических нитропроизводных в аминопроизводные и включают применение химических восстанавливающих агентов, таких как, например, дихлорид олова, железо и уксусную кислоту, цинк и хлористоводородную кислоту или трихлорид титана. Альтернативно, стадия восстановления может протекать в условиях каталитического гидрирования в присутствии подходящих катализаторов, обычно платины, палладия или палладия на активированном угле. Предпочтительно, соединение формулы (II) удобным образом преобразуется в соединение формулы(III) при использовании трифенилфосфина. В соответствии со стадией b) данного способа, соединение формулы (III) взаимодействует, в присутствии восстанавливающего агента, такого как, например, пиридин-борановый комплекс, цианоборгидрид натрия, триацетоксиборгидрид натрия, диметилсульфид борана и т.п., с подходящей альдегиднойRCHO смолой, например, полистирольной или полиэтиленгликольной смолой. Предпочтительно смола представляет собой 4-(4-формил-3-метоксифенокси)бутирил аминометилированную смолу или 4-(4-формил-3-метоксифенокси)бутирил (NOVAGEL). Реакцию осуществляют в присутствии подходящего растворителя, предпочтительно дихлорметана,2,2,2-трифторэтанола и уксусной кислоты, добавлением избытка восстанавливающего агента, необязательно растворенного в том же растворителе, непосредственно к смеси смолы и соединения формулы(III) и перемешиванием при температуре в интервале приблизительно от 0 до 40 С в течение подходящего времени. Например, реакцию можно проводить при приблизительно 20 С в течение приблизительно 15 ч. В соответствии со стадией с) данного способа соединение формулы (IV) далее взаимодействует с соединением формулы (V) или альтернативно с соединением формулы (VI), таким образом, чтобы получить соответствующее производное формулы (VII). Реакцию осуществляют в присутствии подходящего основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина, пиперидина, карбоната натрия, карбоната цезия, трет-бутоксида калия, метоксида натрия, диазобициклоундецена, гидроксида калия и т.п., необязательно в присутствии подходящего катализатора фазового переноса.- 11006645 Соединение формулы (V) или, альтернативно, формулы (VI) добавляют к суспензии соединения формулы (IV) в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, диметилформамид, тетрагидрофуран и т.п. Температуру далее приводят к подходящему значению, например приблизительно от -70 до 40 С в соответствии с электрофилом (V) или (VI), и добавляют основание. Перемешивание проводят в течение подходящего времени, например, приблизительно от 2 до 15 ч. Продукт формулы (VII), полученный таким образом, может быть далее введен во взаимодействие в соответствии с любой одной из альтернативных стадий d.1) или d.2) или непосредственно обработан в соответствии со стадией е). В соответствии со стадией d.1) данного способа, конкретно, соединение формулы (VII) взаимодействует с производным карбоновой кислоты формулы (VIII), с изоцианатом формулы (IX), с хлорформиатным производным формулы (X) или сульфонильным производным формулы (XI), таким образом, чтобы получить соответствующее соединение формулы (XII), где Rb представляет собой группу формулы -COR', -CONHR', -COOR' или -SO2R', соответственно. При использовании соединения формулы (VIII), (X) или (XI) Z представляет собой предпочтительно атом галогена и, даже более предпочтительно, атом хлора. В данном случае соединение формулы(VII) суспендируют в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, диметилформамид, тетрагидрофуран, диоксан и т.п., и далее добавляют подходящее основание, например, триэтиламин, диизопропилэтиламин, карбонат натрия и т.п. Далее добавляют электрофил общей формулы (VIII), (X) или (XI) и смесь перемешивают в течение приблизительно от 2 до 15 ч при температуре в диапазоне приблизительно от 20 до 80 С. При использовании изоцианата общей формулы (IX) реакционные условия являются такими же, как приведено выше, за исключением того, что основание может не потребоваться. В последнем случае необязательно может быть использован катализатор, такой как диметиламинопиридин. По существу аналогичные соображения применимы при рассмотрении стадии d.2) данного способа,где соединение формулы (VII) далее преобразуют в соответствующее функционализированное аминопроизводное формулы (XII) в соответствии с хорошо известными способами. Например, соединение формулы (VII) может быть введено во взаимодействие с производным формулы (XIII), где Z представляет собой галоген, например бром, и Rb представляет собой арилалкильную группу, такую как, например, бензильная группа, осуществляя работу по общепринятым способам. В соответствии со стадией е) данного способа соединение формулы (VII), полученное со стадии с),или, альтернативно, соединение формулы (XII), полученное с любой одной из стадий d.1) или d.2), взаимодействует с гидразином или производным гидразина формулы (XIV) таким образом, чтобы получить соответствующие соединения формул (XV) или (XVI). Соединение формулы (XII) суспендируют в подходящем растворителе, предпочтительно диметилформамиде, в присутствии гидрата гидразина или еще одного гидразина общей формулы (XIV) и перемешивают при подходящей температуре, например, при 20 С в течение приблизительно от 2 до 20 ч. В соответствии со стадией f) данного способа соединения формул (XV) или (XVI) взаимодействуют в кислотных условиях, предпочтительно в присутствии трифторуксусной кислоты, таким образом, чтобы получить требуемое соединение формулы (I). Соединения формул (XV) или (XVI) могут быть далее суспендированы в растворе 5-95% трифторуксусной кислоты в дихлорметане и смесь перемешивают при температуре в диапазоне приблизительно от 20 С до температуры кипячения с обратным холодильником в течение времени приблизительно от 5 мин до 3 ч. Из вышеизложенного для квалифицированного специалиста очевидно, что при осуществлении вышеуказанного отщепления смолы от соединения формулы (XV) будет получено соответствующее производное, содержащее как Ra, так и Rb в виде атомов водорода. Аналогично, исходя из соединения формулы (XVI), будет получено соответствующее производное формулы (I), содержащее один из Ra или Rb, например, Ra в виде атома водорода, а другой, например,Rb, в виде группы, как определено на стадиях d.l) или d.2). Кроме того, для квалифицированного специалиста очевидно, что при необходимости любое из вышеуказанных соединений формулы (I) может быть далее преобразовано в соответствии с общепринятыми способами в другие соединения формулы (I), как приведено на стадии f). Например, соединения формулы (I), где оба Ra и Rb являются отличными от атомов водорода, могут быть получены в соответствии с хорошо известными способами взаимодействием любого соединения формулы (I), содержащего Ra или Rb в виде атома водорода в еще одно соединение формулы (I),содержащее данный тот же атом водорода, замещенный подходящей группой. При получении соединений формулы (I) в соответствии с любым вариантом способа, которые, как подразумевают, все находятся в объеме настоящего изобретения, необязательные функциональные группы среди как исходных веществ или их промежуточных соединений, которые могут привести к протеканию нежелательных побочных реакций, необходимо должным образом защитить в соответствии с общепринятыми методиками. Аналогично, преобразование данных последних групп в свободные соединения со снятой защитой,может быть осуществлено в соответствии с известными методиками.- 12006645 Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) или альтернативно их свободные от солей соединения могут быть все получены в соответствии с общепринятыми способами. Соединения формулы (II) являются известными или их легко получают в соответствии с известными способами [см. ссылку, J. Org. Chem. (1985), 50, 4120-4125; J. Chem. Soc. (1961), 5275-5284]. Альтернативно, соединения формулы (II), где Hal представляет атом брома, могут быть получены,как изложено в рабочих примерах, а именно, взаимодействием коммерчески доступного 6-нитрофталида в условиях бромирования, например, с бромом в присутствии водного пероксида водорода в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, смеси дихлорметан/вода или гексан/вода при температуре в интервале приблизительно от 20 С до температуры кипячения с обратным холодильником. Соединения формул (V), (VI), (VIII), (IX), (X), (XI), (XIII) и (XIV) являются известными или их легко получают в соответствии с хорошо известными способами. Аналогично, альдегидная смола R-CHO, производное фосфина PL3 и любой другой подходящий реагент данного способа являются известными соединениями, которые коммерчески доступны или их легко получают в соответствии с известными способами. Соединения формулы (I) данного изобретения преимущественно получают в соответствии с методиками комбинаторной химии, широко известными в области, при осуществлении реакций между несколькими промежуточными соединениями традиционным способом. Следовательно, все из предпочтительных соединений данного изобретения, в любом соответствующем случае в виде фармацевтически приемлемых солей, являются удобным образом обозначенными и определенными как продукты способа, то есть как продукты формулы (I), которые можно получить,например, определенным способом. Следовательно, настоящее изобретение относится к любому конкретному соединению формулы (I),которое можно получить, например, посредством методики комбинаторной химии в соответствии со способом данного изобретения, прежде всего, взаимодействием соединения формулы (IV) с каждым одним из альдегидных производных формулы (V), приведенных в табл. I; взаимодействием любого из полученных в результате соединений формулы (VII) с каждым одним из хлорангидридных производных формулы (VIII), приведенных в табл. II; взаимодействием любого из полученных в результате соединений формулы (XII) с гидразином; и обработкой в соответствии со стадией f) данного способа. Также предоставлено любое конкретное соединение формулы (I), которое можно получить, например, посредством методики комбинаторной химии в соответствии со способом данного изобретения,прежде всего, взаимодействием соединения формулы (IV) с каждым одним из альдегидных производных формулы (V), приведенных в табл. I; взаимодействием любого из полученных в результате соединений формулы (VII) с каждым одним из изоцианатных производных формулы (IX), приведенных в табл. III; взаимодействием любого из полученных в результате соединений формулы (XII) с гидразином; и обработкой в соответствии со стадией f) данного способа.- 13006645 Таблица I Альдегидные производные формулы (V) R4-CO-R5 (R5=H) Таблица II Хлорангидридные производные формулы (VIII) R'COZ (Z=Cl)- 19006645 Таблица III Изоцианатные производные формулы (IX) R'NCO Соответственно, дальнейшей задачей настоящего изобретения является создание библиотеки из двух или более аминофталазиноновых производных формулы (I) где Ra и Rb, каждый независимо, представляют собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкилC1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или один из Ra или Rb представляет собой водород или необязательно замещенную прямую или разветвленную C1-C6 алкильную группу, а другой представляет собой группу, выбранную из -COR', -CONHR', -COOR' или -SO2R', где R' представляет собой водород или необязательно замещенную группу, выбранную из алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, арилалкила, гетероциклила или гетероциклилалкила, как изложено выше;R1 представляет собой группу формулы -CHR4R5, где R4 и R5 представляют собой, каждый независимо, водород или необязательно замещенную группу, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R1 представляет собой группу формулы -NHR', -NR'COR", -NR'CONHR" или -NR'SO2R", где R' имеет вышеуказанные значения, отличные от водорода, и R" представляет собой водород или имеет значения,изложенные выше для R';R2 представляет собой атом водорода или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3-C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арилC1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы;- 23006645 любой R3, будучи помещен в одно или несколько из свободных положений 5, 6 и 8 фталазинонового кольца, представляют собой, независимо от каждого другого, галоген, нитро, карбокси, циано или группу, необязательно далее замещенную, выбранную из прямого или разветвленного C1-C6 алкила, C3C6 циклоалкила или циклоалкил C1-C6 алкила, арила, арил C1-C6 алкила, 5-7-членного гетероциклила или гетероциклил C1-C6 алкила с 1-3 гетероатомами, выбранными из азота, кислорода или серы; или R3 представляет собой группу, выбранную из -COR', -CONHR',-SO2R' , -NR'R", -NR'COR", NR'CONHR' или NR'SO2R", где R' и R" являются одинаковыми или различными, водородом или группой, как изложено выше;m равно 0 или целому числу от 1 до 3; или их фармацевтически приемлемых солей. Из всего вышесказанного для специалиста является очевидным, что в случае получения таким образом библиотеки аминофталазиноновых производных, например, состоящей из нескольких тысяч соединений формулы (I), указанная библиотека может быть весьма успешно использована для исследования данных целевых киназ, как изложено выше. См., например, общую ссылку на библиотеки соединений и их применения в качестве инструментов для исследований биологических активностей, J. Med. Chem. 1999, 42, 2373-2382; и Bioorg. Med. Chem.Lett. 10 (2000), 223-226. Фармакология Соединения формулы (I) являются активными в качестве ингибиторов протеинкиназ и, следовательно, применимы, например, для ограничения нерегулируемой пролиферации опухолевых клеток. В терапии их можно использовать для лечения различных опухолей, таких как, например, карциномы, например карцинома молочной железы, карцинома легкого, карцинома мочевого пузыря, карцинома толстой кишки, опухоли яичника и эндометрия, саркомы, например, саркомы мягких тканей и кости и гематологические злокачественные изменения, такие как, например, лейкемии. Кроме того, соединения формулы (I) также пригодны для лечения других клеточных профилеративных нарушений, таких как псориаз, пролиферация клеток гладкой мускулатуры сосудов, ассоциированных с атеросклерозом и послеоперационным стенозом и рестенозом и для лечения болезни Альцгеймера. Ингибирующая активность предполагаемых ингибиторов протеинкиназы и активность выбранных соединений определяют способом анализа, основанным на использовании 96-луночного планшета MultiScreen-PH (Millipore), в котором на дно каждой лунки помещают фосфоцеллюлозную фильтровальную бумагу, позволяющую проведение связывания положительно заряженного субстрата после стадии промывки/фильтрации. Когда радиоактивно-меченый фосфатный фрагмент переносят сер/трео киназой к связанному фильтром гистону, испускаемый свет измеряют в сцинтилляционном счетчике. Анализ ингибирования активности cdk2/Циклина А Киназная реакция: 1,5 мкМ субстрата гистона H1, 25 мкМ АТФ (0,2 мкКи 33 Р -АТФ), 30 нг соэкспрессированного с бакуловирусом cdk2/Циклина А, 10 мкМ ингибитора в конечном объеме буфера,равном 100 мкл (Трис НСl 10 мМ рН 7,5, MgСl2 10 мМ, 7,5 мМ ДТТ) добавляют в каждую лунку 96 луночного планшета с U-образным дном лунок. После 10 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы MultiScreen. Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и 33 Р-меченый гистон H1 детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Результаты: данные анализируют и выражают как % ингибирования, в отношении к общей активности фермента (=100%). Все соединения, проявляющие ингибирование 50% далее анализируют для исследования и определения активности (IC50), a также кинетического профиля ингибитора посредством расчета Ki. Определение IC50: Применяемая методика является идентичной методике, описанной выше, где ингибиторы тестируют при различных концентрациях, изменяющихся в диапазоне от 0,0045 до 10 мкМ. Экспериментальные данные анализируют с помощью компьютерной программы GraphPad Prizm, используя четырехпараметрическое логистическое уравнение: у=дно+ (вершина-дно)/(1+10log IС 50-х)наклон где х представляет собой логарифм концентрации ингибитора, у представляет собой ответ; у начинается на дне и идет к вершине по сигмоидной форме. Расчет Ki: Как концентрация АТФ, так и субстрата гистона H1 являются изменяющимися: 4, 8, 12,24, 48 мкМ для АТФ (содержащие пропорционально разбавленную 33 Р -АТФ) и 0,4, 0,8, 1,2, 2,4, 4,8 мкМ- 24006645 для гистона, и их используют в отсутствие и присутствии двух различных, соответственно выбранных концентраций ингибитора. Экспериментальные данные анализируют с помощью компьютерной программы "SigmaPlot" для определения Ki, используя уравнение для статистической биреагентной системы где А=АТФ и В=гистон H1. Кроме того, выбранные соединения характеризуют на ряде сер/трео киназ, точно относящихся к клеточному циклу (сdk2/циклин Е, cdk1/циклин В 1, сdk4/циклин D1) и также определяют их специфичность по отношению к МАРK, РKА, EGFR, IGF1-R, Cdc7/dbf4 и aurora-2. Анализ ингибирования активности cdk2/Циклина Е Киназная реакция: 1,5 мкМ субстрата гистона Hi (SigmaН-5505), 25 мкМ АТФ (0,2 мкКи 33 Р АТФ), 15 нг со-экспрессированного с бакуловирусом cdk2/GST-Циклина E, подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Трис HCl 10 мМ рН 7,5, MgCl2, 10 мМ, 7,5 мМ ДТТ+0,2 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 10 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы MultiScreen. Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и 33 Р-меченый гистон H1 детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности cdkl/Циклина В 1 Киназная реакция: 1,5 мкМ субстрата гистона H1 (SigmaН-5505), 25 мкМ АТФ (0,2 мкКи 33 Р АТФ), 30 нг соэкспрессированного с бакуловирусом cdk1/Циклина В 1, подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Трис HCl 10 мМ рН 7,5, MgCl2 10 мМ, 7,5 мМ ДТТ+0,2 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 10 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Ca/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы MultiScreen. Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и 33 Р-меченый гистон H1 детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности cdk4/Циклина D1 Киназная реакция: 0,4 мкМ субстрата мышиного GST-Rb (769-921) ( sc-4112 от Santa Cruz), 10 мкМ АТФ (0,5 мкКи 33 Р -АТФ), 100 нг экспрессированного с бакуловирусом GST-cdk4/GST-ЦиклинаD1, подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 50 мкл (Трис HCl 10 мМ рН 7,5, MgCl2 10 мМ, 7,5 мМ ДТТ+0,2 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета сU-образным дном лунок. После 40 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 60 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы MultiScreen. Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и 33 Р-меченый фрагмент Rb детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности МАРK Киназная реакция: 10 мкМ субстрата МBР (SigmaМ-1891), 25 мкМ АТФ (0,2 мкКи 33 Р -АТФ), 25 нг бактериально экспрессированного GST-МАРK (Upstate Biotechnology14-173), подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Трис НСl 10 мМ рН 7,5, MgCl2 10 мМ,7,5 мМ ДТТ+0,1 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 15 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы MultiScreen.- 25006645 Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и Р-меченый МBР детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности РКА Киназная реакция: 10 мкМ субстрата гистона H1 (SigmaН-5505), 10 мкМ АТФ (0,2 мкКи 33 Р АТФ), 1 Ед РКА бычьего сердца (Sigma2645), подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Трис НСl 10 мМ рН 7,5, MgCl2 10 мМ, 7,5 мМ ДТТ+0,2 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 5 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет MultiScreen для обеспечения возможности связывания субстрата с фосфоцеллюлозным фильтром. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg, и фильтруют с помощью фильтрационной системы Multiscreen. Детектирование: Фильтры высушивают при 37 С, далее добавляют 100 мкл/лунку сцинтиллянта и 33 Р-меченый гистон H1 детектируют методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности EGFR Киназная реакция: 25 нМ непосредственно биотинилированного субстрата PolyGluTyr (Sigma0275), 2,5 мкМ АТФ (0,3 мкКи 33 Р -АТФ), 80 нг экспрессированного с бакуловирусом GST-EGFR, подходящие концентрации ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Hepes 50 мМ рН 7,5,MnCl2-MgCl2 3 мМ, 1 мМ ДТТ+3 мкМ NaVO3, 0,1 мг/мл БСА) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 5 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают 20 мкл 120 мМ ЭДТА. Связывание: 100 мкл переносят из каждой лунки в планшет стрептавидин-флэш, для обеспечения возможности связывания биотинилированного субстрата с планшетом. Планшеты далее промывают 3 раза 150 мкл/плашку PBS, свободного от Са/Mg. Детектирование: методом радиоактивного счета на приборе Top-Count. Анализ ингибирования активности IGF1-R Анализ ингибирования активности IGF1-R проводят в соответствии со следующей методикой. Киназная реакция: 10 мкМ субстрата биотинилированного МBР (Sigma кат.М-1891) , 0-20 мкМ ингибитора, 6 мкМ холодной АТФ, 2 нМ 33 Р -АТФ и 22,5 нг IGF1-R (предварительно инкубированного в течение 30 мин при комнатной температуре с 60 мкМ холодной АТФ) в конечном объеме буфера, равном 30 мкл (50 мМ HEPES рН 7,9, 3 мМ MnCl2, 1 мМ ДТТ, 3 мкМ NaVO3) добавляют в каждую лунку 96 луночного планшета с U-образным дном лунок. После 35 мин инкубации при комнатной температуре реакцию останавливают добавлением 100 мкл PBS-буфера, содержащего 32 мМ ЭДТА, 500 мкМ холодной АТФ, 0,1% Тритона Х 100 и 10 мг/мл покрытых стрептавидином СПА-шариков. После 15 мин инкубации отбирают 110 мкл суспензии и переносят в 96-луночные планшеты ONTIPLATE, содержащие 100 мкл 5 М CsCl. После 4 ч планшеты считывают в течение 2 мин в приборе Packard TOP-Count для считывания радиоактивности. Результаты: Экспериментальные данные анализируют с помощью программы GraphPad Prizm. Кроме того, ингибирующую активность предполагаемых ингибиторов протеинкиназы и активность выбранных соединений также определяют анализом, основанным на использовании СПА (Сцинтилляционного проксимационного анализа) в 96-луночном планшете. Анализ основан на способности покрытых стрептавидином СПА-шариков связывать биотинилированные пептиды, производные из сайта фосфорилирования гистона. Когда радиоактивно-меченый фрагмент фосфата переносится сер/трео киназами к биотинилированному пептиду гистона, испускаемый свет измеряют в сцинтилляционном счетчике. Анализ ингибирования активности cdk5/p25 Анализ ингибирования активности cdk5/p25 проводят в соответствии со следующей методикой. Киназная реакция: 1,0 мкМ субстрата биотинилированного пептида гистона, 0,25 мкКи 33 Р -АТФ, 4 нМ комплекса cdk5/p25, 0-100 мкМ ингибитора в конечном объеме буфера, равном 100 мкл (Hepes 20 мМ рН 7,5, MgCl2 15 мМ, 1 мМ ДТТ) добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 20 мин инкубации при 37 С реакцию останавливают добавлением 500 мкг СПАшариков в забуференном фосфатом физиологическом растворе, содержащем Тритон Х-100, 50 мкМ АТФ и 5 мМ ЭДТА. Шарикам дают осадиться и радиоактивность, включенную в 33 Р-меченый пептид, детектируют в сцинтилляционном счетчике Top-Count. Результаты: Данные анализируют и выражают как % ингибирования, используя формулу 100 Х(1-(Неизвестная-Базовая)/(Ферм. Контроль - Базовая Значения IС 50 рассчитывают, используя вариацию четырехпараметрического логистического уравнения- 26006645 Анализ ингибирования активности Cdc7/dbf4 Анализ ингибирования активности Cdc7/dbf4 проводят в соответствии со следующей методикой. Субстрат Биотин-МСМ 2 транс-фосфорилируют комплексом Cdc7/Dbf4 в присутствии АТФ, меченной 33-АТФ. Фосфорилированный субстрат Биотин-МСМ 2 далее связывают покрытыми стрептавидином СПА-шариками и степень фосфорилирования оценивают -счетом. Анализ ингибирования активности Cdc7/dbf4 проводят в 96-луночном планшете в соответствии со следующей методикой. В каждую лунку планшета добавляют:- 10 мкл тестируемого соединения (12 возрастающих концентраций в диапазоне от нМ до мкМ для получения кривой доза-ответ)- 10 мкл смеси холодной АТФ (конечная концентрация 10 мкМ) и радиоактивная АТФ (1/2500 молярное отношение с холодной АТФ) далее применяют для начала реакции, которая проводится при 37 С. Субстрат, фермент и АТФ разбавляют в 50 мМ HEPES рН 7,9, содержащий 15 мМ MgCl2, 2 мМDTT, 3 мкМ NaVO3, 2 мМ глицерофосфата и 0,2 мг/мл БСА. Растворитель для тестируемых соединений также содержит 10% ДМСО. После инкубации в течение 20 мин реакцию останавливают добавлением в каждую лунку 100 мклPBS рН 7,4, содержащего 50 мМ ЭДТА, 1 мМ холодного АТФ, 0,1% Тритона Х 100 и 10 мг/мл покрытых стрептавидином СПА-шариков. После 15 мин инкубации при комнатной температуре, чтобы обеспечить взаимодействие биотинилированного МСМ 2 со стрептавидиновыми шариками, шарики собирают в 96-луночный фильтрующий планшет (UnifilterR GF/B), используя Packard Cell Harvester (Filtermate), промытый дистиллированной водой, и далее считают, используя Top Count (Packard). Из результатов счета вычитают значения для холостых опытов и далее экспериментальные данные(для каждой точки трижды) анализируют, используя нелинейный регрессионный анализ (Sigma Plot). Анализ ингибирования активности aurora-2 Ингибирующую активность и эффективность выбранных соединений определяют аналитическим методом, основанным на применении анализа шариков стрептавидиновой сцинтилляционной проксимацией (amershampharmacia biotech) в 96-луночных планшетах. В конце реакции субстрат биотинилированного пептида связывают с шариками и последовательно позволяют стратифицироваться, используяCsCl2. Когда радиоактивно-меченый фосфатный фрагмент переносят посредством киназы к пептиду, связанному с шариками, излучаемый свет измеряют в сцинтилляционном счетчике. Анализ ингибирования активности Aurora-2 проводят в 96-луночном планшете в соответствии со следующей методикой. Киназная реакция: 8 мкМ биотинилированного пептида(4 повтора из LRRWSLG) , 10 мкМ АТФ (0,5 мкКи 33 Р -АТФ) , 10 нМ Aurora2, 10 мкМ ингибитора в конечном объеме буфера, равном 60 мкл (HEPES 50 мМ рН 7,0, MgCl2 10 мМ, 1 мМ ДТТ, 0,125 мг/мл БСА, 3 мкМ ортованадата) , добавляют в каждую лунку 96-луночного планшета с U-образным дном лунок. После 30 мин инкубации при комнатной температуре реакцию останавливают добавлением 100 мкл суспензии шариков. Стратификация: В каждую лунку добавляют 100 мкл CsCl2 7,5M и выдерживают в течение 1 ч перед счетом радиоактивности прибором Top-Count. Результаты: Данные анализируют и выражают как % ингибирования по отношению к общей активности фермента (=100%). Все соединения, проявляющие ингибирование 60%, далее анализируют для исследования активности ингибитора посредством расчета IC50. Используемая методика аналогична описанной выше методике, за исключением того, что применяют серийное разбавление ингибитора. Экспериментальные данные обрабатывают с помощью нелинейной регрессии, применяя следующее уравнение: где b представляет скорость для базовой линии,является наблюдаемой скоростью реакции, o является скоростью в отсутствие ингибиторов и [I] является концентрацией ингибитора. Соединения формулы (I) настоящего изобретения, пригодные для введения млекопитающим, например, людям, могут быть введены обычными путями, и уровень дозы зависит от возраста, массы тела,состояния пациента и пути введения. Например, подходящая дозировка, принятая для перорального введения соединения формулы (I) может изменяться в диапазоне приблизительно от 10 до 500 мг на дозу, от 1 до 5 раз в сутки. Соединения- 27006645 изобретения могут быть введены в различных дозированных формах, например, перорально в виде таблеток, капсул, таблеток, покрытых сахаром или пленкой, жидких растворов или суспензий; ректально в виде суппозиториев; парентерально, например, внутримышечно или посредством внутривенной и/или интратекальной и/или внутриспинальной инъекции или инфузии. Кроме того, соединения данного изобретения могут быть введены либо как отдельные средства или,альтернативно, в сочетании с известными противораковыми курсами лечения, такими как радиационная терапия или режим химиотерапии в сочетании с цитостатическими или цитотоксическими средствами,средствами антибиотического типа, алкилирующими средствами, антиметаболитными средствами, гормональными средствами, иммунологическими средствами, средствами типа интерферона, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторами СОХ-2), ингибиторами металломатриксной протеазы, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, противоростового фактора рецепторными средствами, анти-HER средствами, анти-EGFR средствами, противоангиогенезными средствами, ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами ras-raf сигнального трансдукционного пути, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, тубулинсвязывающими средствами, ингибиторами топоизомеразы I, ингибиторами топоизомеразы II и т.п. Например, соединения данного изобретения могут быть введены в сочетании с одним или более химиотерапевтическими средствами, такими как, например, экземестан, форместан, анастрозол, летрозол, фадрозол, таксан, производные таксана, капсулированные таксаны, СРТ-11, производные кампотецина, антрациклиновые гликозиды, например, доксорубицин, идарубицин, эпирубицин, этопозид, навелбин, винбластин, карбоплатин, цисплатин, эстрамустин, целекоксиб, тамоксифен, ралоксифен, Sugen-SU5416, Sugen SU-6668, герцептин и т.п., необязательно в их липосомных готовых формах. При получении готовой формы в виде фиксированной дозы такие продукты сочетания используют соединения данного изобретения в пределах диапазона дозировки, описанного выше, и другое фармацевтически активное средство в пределах разрешенного диапазона дозировки. Соединения формулы (I) могут применяться последовательно с известными противораковыми средствами, когда сочетанная готовая форма является неподходящей. Настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, включающие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, ассоциированные с фармацевтически приемлемым эксципиентом (который может представлять собой носитель или разбавитель). Фармацевтические композиции, содержащие соединения данного изобретения, обычно получают,следуя общепринятым способам, и их вводят в фармацевтически подходящей форме. Например, твердые пероральные формы могут содержать вместе с активным соединением разбавители, например лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие средства, например, оксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связывающие средства, например, крахмалы, аравийскую камедь,желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; дезаггреганты, например, крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или гликолат крахмала натрия; шипучие смеси; красители; подсластители; увлажняющие средства, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, в общем случае, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, применяемые в фармацевтических готовых формах. Указанные фармацевтические препараты могут быть получены известными методами, например, посредством способов смешивания, гранулирования, таблетирования, покрытия сахаром или покрытия пленкой. Жидкие дисперсии для перорального введения могут представлять собой, например, сиропы,эмульсии и суспензии. Сиропы могут содержать в качестве носителя, например, сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннитом и/или сорбитом. Суспензии и эмульсии могут содержать в качестве носителя, например, природную камедь, агар,альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензия или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например, пропиленгликоль и, по желанию, подходящее количество гидрохлорида лидокаина. Растворы для внутривенных инъекций или инфузий могут содержать в качестве носителя, например, стерильную воду, или предпочтительно они могут находиться в виде стерильных, водных, изотонических солевых растворов, или они могут содержать в качестве носителя пропиленгликоль. Суппозитории могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например, масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активный сложный эфир жирных кислот и полиоксиэтиленсорбитана или лецитин. Следующие примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение. Общие способы Флэш-хроматографию проводят на силикагеле (степень чистоты Merck 9385, 60). ВЭЖХ/МС проводят на колонке Waters X Terra RP 18 (4,6x50 мм, 3,5 мкм) с использованием ВЭЖХ системы Waters 2790, оборудованной детектором 996 Waters PDA и моделью Micromass ZQ единичного квадрупольного- 28006645 масс-спектрометра, снабженного электрораспылительным (ЭР) ионным источником. Подвижная фаза А представляет собой буфер из 5 мМ ацетата аммония (рН 5,5 со смесью уксусная кислота/ацетонитрил 95:5), а подвижная фаза В представляет собой смесь Н 2 О/ацетонитрил (5:95). Осуществляют градиент от 10 до 90% В в течение 8 мин, выдерживая 90% В в течение 2 мин. УФ-детектирование проводят при 220 нм и 254 нм. Скорость потока 1 мл/мин. Объем ввода 10 мкл. Полное сканирование, диапазон масс от 100 до 800 а.е.м. Напряжение на капилляре составляет 2,5 кВ. Температура источника 120 С. Конус составляет 10 В. Времена удерживания (ВЭЖХ время удерживания) даны в минутах при 220 нм или 254 нм. Массы приведены в виде соотношения m/z. При необходимости соединения очищают препаративной ВЭЖХ на колонке Waters Symmetry C18(19x50 мм, 5 мкм) с использованием препаративного ВЭЖХ Waters 600, снабженного детектором 996Waters PDA и моделью Micromass ZMD единичного квадрупольного масс-спектрометра с электрораспылительной ионизацией в режиме регистрации положительных ионов. Подвижная фаза А представляет собой водную 0,01% ТФУ, а подвижная фаза В является ацетонитрилом. Осуществляют градиент от 10 до 90% В в течение 8 мин, выдерживают 90% В в течение 2 мин. Скорость потока 20 мл/мин. 1 Н-ЯМР-спектроскопию проводят на приборе Mercury VX 400, с рабочей частотой 400,45 МГц,снабженного 5 мм зондом двойного резонанса (1 Н 15N-31P IDPFG Varian). Пример 1. 6-нитро-3-бром-3 Н-изобензофуран-1-он (II) К 125 мл раствора 6-нитрофталида (8,0 г, 0,047 моль) в дихлорметане добавляют бром (8,25 г, 0,052 моль, 1,15 экв.) и пероксид водорода (5,07 г 35% раствора в воде, эквивалентно 1,77 г пероксида водорода, 0,052 моль, 1,15 экв.). Смесь кипятят с обратным холодильником в умеренном режиме в течение 11 ч,далее охлаждают и концентрируют выпариванием растворителя. Водный слой отделяют и органическую фазу промывают водой перед высушиванием (Na2SO4). После выпаривания растворителя неочищенный остаток очищают флэш-хроматографией на силикагеле (гексан-этилацетат 8-2 до 7-3). Получают 8,18 г указанного в заголовке соединения. [М-1]-=257; ВЭЖХ время удерживания 5,37; 1 Н-ЯМР (CDCl3), характеристические сигналы (м.д.): 7,47 (с, 1 Н), 7,86 (д, 1 Н), 8,67 (дд, 1 Н), 8,74 (д,1 Н). Пример 2. Бромид (5-амино-3-оксо-1,3-дигидроизобензофуран-1-ил)-трифенилфосфония (III) Раствор 6-нитро-3-бром-3H-изобензофуран-1-она (8,7 г, 0,034 моль) в этилпропионате (464 мл) нагревают до 70-75 С и перемешивают в процессе добавления по каплям 313 мл этилпропионатного раствора трифенилфосфина (36 г, 0,137 моль, 4 экв.) в течение 7 ч. Нагрев и перемешивание продолжают в течение ночи, и далее смесь охлаждают до комнатной температуры. Осадок собирают, сушат в вакууме и очищают флэш-хроматографией на силикагеле. Градиент в системе дихлорметан-метанол-уксусная кислота от 97-3-0 до 93-5-2 применяют в качестве элюента с получением 6,2 г указанного в заголовке соединения. [М]+=410; ВЭЖХ время удерживания 4,72; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6), характеристические сигналы(м.д.): 6,01 (ушир.с, 2 Н способны к обмену с дейтерированной водой), 6,49 (дд, 1 Н), 6,80 (д, 1 Н), 6,87 (д,1 Н), 7,62-8,00 (м, 15 Н), 8,17 (с, 1 Н). Пример 3. Бромид (5-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)пропокси]-бензиламино-3-оксо 1,3-дигидроизобензофуран-1-ил)-трифенилфосфония Соединение примера 2 (252 мг, 0,514 ммоль) растворяют в 15,25 мл смеси растворителей, составленной из дихлорметана (13,5 мл), трифторэтанола (1,5 мл) и уксусной кислоты (0,25 мл). 4-(4-формил-3 метоксифенокси)бутирил аминометилированная смола Novabiochem (326 мг, заявленное замещение 0,94 ммоль/г, 0,6 экв.) выливают в раствор и полученную в результате суспензию перемешивают в умеренном режиме в течение 9 ч перед добавлением по каплям комплекса пиридин-боран (250 мкл, 6 ммоль, 10 экв.). После 40 ч смолу фильтруют, промывают дихлорметаном, метанолом и снова дихлорметаном, далее сушат в вакууме (518 мг, рассчитанная загрузка: 0,78 ммоль/г; ИК: 1787 см-1, выпрямленная полоса лактона). Пример 4. 4-[3-метокси-4-(3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5 иламинометил)фенокси]-N-(4-смола-бензил)бутирамид Бромид (5-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)-пропокси]бензиламино-3-оксо-1,3-дигидроизобензофуран-1-ил)трифенилфосфония примера 3 (100 мг, 0,078 мэкв.) суспендируют в обезвоженном дихлорметане (3 мл); добавляют пиридин-3-карбоксальдегид (50 мкл, приблизительно 6 экв.) с последующим добавлением ТЭА (50 мкл). Перемешивание при комнатной температуре поддерживают в течение 20 ч, далее смолу фильтруют и промывают дихлорметаном, метанолом и снова дихлорметаном перед сушкой в вакууме (ИК: 1776 см-1). Пример 5. N-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)пропокси]бензил-N-3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5-илбензамид 4-[3-метокси-4-(3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5-иламинометил)фенокси]-N-(4-смола-бензил)бутирамид примера 4 суспендируют в обезвоженном дихлорметане (3 мл); диизопропилэтиламин (200 мкл) и бензоилхлорид (100 мкл, 10 экв.) добавляют в данном порядке. После перемешивания при комнатной температуре в течение 20 ч смолу фильтруют и промывают дихлорметаном, метанолом и снова дихлорметаном перед сушкой в вакууме (ИК: 1786 см-1).- 29006645 Пример 6. 4-[3-метокси-4-(1-3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5 ил-3-п-толилуреидометил)фенокси]-N-(4-смола-бензил)бутирамид 4-[3-метокси-4-(3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5-иламинометил)фенокси]-N-(4-смола-бензил)бутирамид примера 4 суспендируют в обезвоженном дихлорметане (3 мл); и добавляют п-толуилизоцианат (100 мкл, 10 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 20 ч, смолу фильтруют и промывают дихлорметаном, метанолом и снова дихлорметаном перед сушкой в вакууме. Пример 7. N-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)пропокси]бензил-N-(4-оксо-1-пиридин-3 илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)бензамидN-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)пропокси]-бензил-N-3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5-илбензамид примера 5 суспендируют в диметилформамиде (3 мл) и добавляют водный гидразин (приблизительно 25% раствор (400 мкл, приблизительно 40 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 20 ч смолу фильтруют, промывают диметилформамидом, метанолом и дихлорметаном перед сушкой в вакууме (ИК: исчезновение выпрямленной полосы лактона). Пример 8. 4-3-метокси-4-[1-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-п-толилуреидометил]фенокси-N-(4-смола-бензил)бутирамид 4-[3-метокси-4-(1-3-оксо-1-[1-пиридин-3-илметилиден]-1,3-дигидроизобензофуран-5-ил-3-птолилуреидометил)фенокси]-N-(4-смола-бензил)бутирамид примера 6 суспендируют в диметилформамиде (3 мл) и добавляют водный гидразин (приблизительно 25% раствор) (400 мкл, приблизительно 40 экв.). После перемешивания при комнатной температуре в течение 20 ч смолу фильтруют, промывают диметилформамидом, метанолом и дихлорметаном перед сушкой в вакууме. Пример 9. N-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)бензамидN-2-метокси-4-[3-(4-смола-бензилкарбамоил)пропокси]-бензил-N-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил 3,4-дигидрофталазин-6-ил)бензамид примера 7 суспендируют в растворе 20% ТФУ в ДХМ (3 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтруют и раствор собирают и сушат с получением 15 мг указанного в заголовке соединения. [М+1]+=357; ВЭЖХ время удерживания 4,02; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6), характеристические сигналы (м.д.): 4,39 (с, 2 Н), 7,47-7,62 (м, 3H), 7,93-8,05 (м, 3H),8,26 (дд, 1 Н), 8,54 (м, 1 Н), 8,65 (ушир.с, 1 Н), 8,76 (д, 1 Н), 10,73 (с, 1 Н, способны к обмену с водой), 12,45(с, 1 Н, способны к обмену с водой). Пример 10. 1-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-п-толилмочевина 4-3-метокси-4-[1-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-3-п-толилуреидометил]фенокси-N-(4-смола-бензил)бутирамид примера 8 суспендируют в растворе 20% ТФУ в ДХМ (3 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтруют и раствор собирают и сушат с получением 11 мг указанного в заголовке соединения. [М+1]+=386; ВЭЖХ время удерживания 4,72; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6), характеристические сигналы (м.д.): 2,23 (с, 3H), 4,26 (с, 2 Н), 7,10 (д, 2 Н), 7,29(м, 1 Н), 7,33 (д, 2 Н), 7,64 (м, 1 Н), 7,83 (дд, 1 Н), 7,89 (д, 1 Н), 8,40 (м, 2 Н), 8,56 (д, 1 Н), 8,70 (ушир.с, 1 Н),9,22 (ушир.с, 1 Н), 12,38 (ушир.с, 1 Н). По аналогичной методике и взаимодействием соединения формулы (III) с соответствующим альдегидом формулы (V) и далее с подходящим хлорангидридным производным формулы (VIII) или изоцианатом формулы (IX) получают следующие соединения: 7-амино-4-(4-хлорбензил)-2 Н-фталазин-1-он [М+1]+=286; ВЭЖХ время удерживания 4,62; 1 Н ЯМР(ДМСО-d6), характеристические сигналы (м.д.): 4,11 (с, 2 Н), 6,97 (дд, 1 Н), 7,24-7,32 (м, 5 Н), 7,56 (д, 1 Н),12,05 (с, 1 Н, способы к обмену с дейтерированной водой). 7-амино-4-(4-метоксибензил)-2 Н-фталазин-1-он [М+1]+=282; ВЭЖХ время удерживания 3,83; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6), характеристические сигналы (м.д.): 3,68 (с, 3H), 4,04 (с, 2 Н), 6,10 (с, 2 Н, способны к обмену с дейтерированной водой), 6,82 (д, 2 Н), 6,97 (дд, 1 Н), 7,17 (д, 2 Н), 7,23 (д, 1 Н), 7,57 (д,1 Н). 7-амино-4-(4-нитробензил)-2 Н-фталазин-1-он [М+1] +=297; 1 Н ЯМР (ДМСО-d6), характеристические сигналы (м.д.): 4,29 (с, 2 Н), 6,18 (с, 2 Н, способны к обмену с дейтерированной водой), 7,00 (дд, 1 Н), 7,26 (д, 1 Н), 7,57 (м, 3H), 8,14 (д, 2 Н).N-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)пропионамид; [М+Н]+=309; ВЭЖХ время удерживания 2,88.N-(4-оксо-1-пиридин-3-илметил-3,4-дигидрофталазин-6-ил)-4-трифторметилбензамид; [М+Н]+=425; ВЭЖХ время удерживания 5,1.[М+Н]+=346; ВЭЖХ время удерживания 3,37.[М+Н]+=377; ВЭЖХ время удерживания 4,99;[М+Н]+=379; ВЭЖХ время удерживания 5,09.