Ингибиторы npy для лечения женской сексуальной дисфункции

006254 Область изобретения Настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции для лечения женской сексуальной дисфункции (ЖСД), в частности расстройства полового возбуждения у женщины(РПВЖ). Настоящее изобретение относится также к способу лечения ЖСД, в частности РПВЖ. Для удобства список сокращений, которые используются в нижеследующем тексте, приведен перед разделом Формула изобретения. Сексуальная реакция у женщин Фазу возбуждения сексуальной реакции у женщин нелегко отличить от фазы влечения до тех пор,пока не начнутся физиологические изменения во влагалище и клиторе, а также в других половых органах. Половое возбуждение и наслаждение сопровождаются сочетанием сосудистых и нервно-мышечных явлений, которые приводят к переполнению кровью клитора, губ и стенки влагалища, усилению смазывания влагалища и расширению вагинального просвета (Levin, 1980; Ottesen, 1983; Levin, 1991; Levin,1992; Sjoberg, 1992; Wagner, 1992; Schiavi et al., 1995; Masters et al., 1996; Berman et al., 1999). Переполнение кровью влагалища создает условия для транссудации, а этот процесс ответственен за усиление смазывания влагалища. Транссудация делает возможным ток плазмы через эпителий на поверхность влагалища, движущей силой которого является усиленный кровоток в вагинальном капиллярном ложе во время возбужденного состояния. Кроме того, переполнение кровью приводит к увеличению длины влагалища и диаметра просвета, особенно в дистальных 2/3 вагинального канала. Расширение просвета влагалища является следствием сочетания релаксации гладких мышц его стенки и релаксации скелетных мышц дна тазовой полости. Считается, что некоторые сексуальные болевые расстройства,такие как вагинизм, по меньшей мере, частично являются следствием неадекватной релаксации, препятствующей расширению влагалища; предстоит еще выяснить, является ли это в первую очередь проблемой гладких или скелетных мышц (Levin, 1980; Ottesen, 1983; Levin, 1991; Levin, 1992; Sjoberg, 1992;Wagner, 1992; Schiavi et al., 1995; Masters et al., 1996; Berman et al., 1999). Сосудистая и микрососудистая сеть влагалища иннервируется нервами, содержащими нейропептиды, а также другие нейромедиаторы-кандидаты. Они включают в себя родственный гену кальцитонина пептид (CGRP), нейропептид Y (NPY), синтазу оксида азота (NOS), вещество Р и вазоактивный интестинальный пептид (VIP) (Hoyle et al., 1996). Пептиды, которые присутствуют в клиторе, обсуждаются ниже. Синтаза оксида азота, которая часто локализована вместе с VIP, иммунологически проявляет более сильную экспрессию в глубоких артериях и венах, чем в кровеносных сосудах проприо (Hoyle et al.,1996). Женская сексуальная дисфункция Известно, что некоторые индивидуумы могут страдать женской сексуальной дисфункцией (ЖСД). ЖСД лучше всего определить как затруднение или неспособность женщины получить удовлетворение в сексуальном выражении. ЖСД является собирательным термином для нескольких разных сексуальных расстройств у женщин (Leiblum, 1998, Berman et al., 1999). У женщины может отсутствовать влечение, могут быть затруднения с возбуждением или оргазмом, боль при половом сношении или сочетание этих проблем. Некоторые типы заболеваний, лекарственные средства, повреждения или психологические проблемы могут вызвать ЖСД. Исследования, изучающие сексуальную дисфункцию у пар, показывают, что вплоть до 76% женщин имеют жалобы на сексуальную дисфункцию, и что 30-50% женщин в США испытывают ЖСД. Подтипы ЖСД включают в себя расстройство гипоактивного полового влечения, расстройство полового возбуждения у женщин, оргазмическое расстройство и расстройство полового влечения. Разрабатываемые терапии направлены на лечение конкретных подтипов ЖСД, преимущественно расстройств влечения и возбуждения. Категории ЖСД лучше всего определять, противопоставляя их фазам нормальной сексуальной реакции у женщин: влечения, возбуждения и оргазма (Leiblum, 1998). Половое влечение, или либидо, является двигателем полового выражения, и его проявления часто включают в себя сексуальные мысли либо в обществе заинтересованного партнера, либо под воздействием других эротических стимулов. В противоположность этому, возбуждение представляет собой сосудистую реакцию на половую стимуляцию,важным компонентом которой является смазывание влагалища и растяжение влагалища. Таким образом,половое возбуждение, в противоположность половому влечению, представляет собой реакцию, относящуюся к генитальному (например вагинальному и клиторному) кровотоку и не обязательно к чувствительности. Оргазм представляет собой высвобождение полового напряжения, которое достигает кульминации во время возбуждения. Следовательно, ЖСД обычно возникает, когда женщина проявляет неадекватную или неудовлетворительную реакцию в любой из этих фаз, обычно в фазе влечения, возбуждения или оргазма. Категории ЖСД включают в себя расстройство гипоактивного полового влечения, расстройство полового возбуждения, оргазмическое расстройство и сексуальные болевые расстройства. Расстройство гипоактивного полового влечения имеет место, если женщина не имеет или имеет слабое желание быть сексуальной, либо не имеет или имеет мало сексуальных мыслей или фантазий. Причиной этого типа ЖСД может быть низкий уровень тестостерона вследствие либо естественной ме-1 006254 нопаузы, либо хирургической менопаузы. Другими причинами являются болезнь, лекарственные средства, утомление, депрессия и тревога. Расстройство полового возбуждения у женщин (РПВЖ) характеризуется неадекватной генитальной реакцией на половую стимуляцию. Гениталии (например влагалище и/или клитор) не подвергаются переполнению кровью, которое характеризует нормальное половое возбуждение. Стенки влагалища недостаточно смазываются, вследствие чего половое сношение становится болезненным. Это может служить препятствием наступлению оргазма. Расстройство возбуждения может быть вызвано снижением эстрогена при менопаузе или после родов и в период лактации, а также болезнями с сосудистыми компонентами, такими как диабет и атеросклероз. Другие причины проистекают от лечения диуретиками, антигистаминами, антидепрессантами, например SSRIs, или антигипертензивными агентами. РПВЖ более детально обсуждается ниже. Сексуальные болевые расстройства (которые включают в себя диспареунию и вагинизм) характеризуются болью в результате проникания и могут быть вызваны лекарственными средствами, которые ослабляют смазывание, эндометриозом, воспалением органов в области таза, воспалительным кишечным заболеванием или проблемами мочевоготракта. Распространенность ЖСД трудно оценить, поскольку этот термин охватывает несколько типов проблемы, некоторые из которых трудно определить, а также в связи с тем, что интерес в лечении ЖСД является относительно недавним. Многие сексуальные проблемы у женщин связаны либо непосредственно с процессом старения женщины, либо с хроническими заболеваниями, такими как диабеты и гипертензия. В сообщениях о встречаемости и распространенности ЖСД имеются большие расхождения, которые отчасти объясняются использованием различных критериев оценки, однако большинство исследователей сообщают о том, что значительная доля здоровых в других отношениях женщин имеет симптомы одной или более чем одной подгруппы ЖСД. Например, сравнительные исследования сексуальной дисфункции у пар, показали, что 63% женщин имеют дисфункцию возбуждения или оргазмическую дисфункцию по сравнению с 40% мужчин с эректильной или эякуляторной дисфункцией (Flank et al., 1978). Однако распространенность расстройства полового возбуждения у женщин значительно варьирует от обследования к обследованию. По данным недавнего Отчета об обследовании национального здоровья и социальной жизни 19% женщин сообщили о затруднениях со смазыванием, а в амбулаторной гинекологической клинике о подобных затруднениях со смазыванием сообщили 14% женщин (Rosen et al.,1993). Некоторые исследования выявили также дисфункцию полового возбуждения у женщин-диабетиков(вплоть до 47%), и это включало ослабление смазывания влагалища (Wincze et al., 1993). Связь между невропатией и сексуальной дисфункцией отсутствовала. Многочисленные исследования показали также, что от 11 до 48% всех женщин могут иметь возрастное снижение полового влечения. Также от 11 до 50% женщин сообщают о проблемах с возбуждением и смазыванием и вследствие этого испытывают боль при половом акте. Вагинизм намного менее распространен, поражая примерно 1% женщин. Исследования сексуально опытных женщин показали, что 5-10% имеют первичную аноргазмию. Другие 10% имеют нечастые оргазмы, а еще 10% испытывают их несогласованно (Spector et al., 1990). Поскольку ЖСД состоит из нескольких подтипов, при которых симптомы проявляются в отдельных фазах цикла сексуальной реакции, единой терапии не существует. Современная терапия ЖСД фокусируется главным образом на психологических вопросах и вопросах взаимоотношений. Терапия ЖСД постепенно развивается, поскольку все больше клинических и фундаментальных исследований посвящается изучению данной медицинской проблемы. Жалобы женщин на сексуальные расстройства не являются полностью психологическими по патофизиологии, особенно для тех индивидуумов, которые могут иметь компонент дисфункции сосудистого генеза (например РПВЖ), влияющий на общую жалобу женщины на сексуальное расстройство. В настоящее время не существует лекарств, разрешенных для лечения ЖСД. Эмпирическая лекарственная терапия включает в себя введение эстрогена (местно или в виде гормонозаместительной терапии), андрогенов или лекарств, влияющих на настроение, такие как буспирон или тразодон. Эти возможные варианты лечения часто являются неудовлетворительным из-за низкой эффективности или неприемлемых побочных эффектов. Поскольку интерес к фармакологическому лечению ЖСД является относительно недавним, терапия состоит из следующего: психологическое консультирование, половые смазывающие средства, продаваемые без рецепта, и кандидаты для исследований, в том числе лекарственные средства, одобренные для других состояний. Эти лекарственные средства включают в себя гормональные агенты, либо тестостерон, либо комбинации эстрогена и тестостерона, а с недавнего времени сосудистые лекарства, эффективность которых доказана при эректильной дисфункции у мужчин. Ни для одного их этих агентов не было продемонстрировано высокой эффективности при лечении ЖСД. Расстройство полового возбуждения у женщин (РПВЖ) Реакция полового возбуждения включает в себя прилив крови в область таза, смазывание влагалища и растяжение и набухание наружных половых органов. Нарушение вызывает заметный дистресс-2 006254 и/или межличностные трудности. Исследования, изучающие сексуальную дисфункцию у пар, показывают, что существует большое число женщин, которые страдают дисфункцией полового возбуждения,иначе известной как расстройство полового возбуждения у женщин (РПВЖ). Руководство по диагностике и статистике (DSM) IV Американской ассоциации психиатров определяет расстройство полового возбуждения у женщин (РПВЖ) следующим образом: устойчивая или повторяющаяся неспособность достигать или поддерживать адекватную реакцию смазывания-набухания при половом возбуждении до завершения половой активности. Это нарушение может вызывать заметный дистресс или межличностные трудности. РПВЖ является широко распространенным сексуальным расстройством, поражающим женщин в период пред-, пери- и постменопаузы (HRT). Оно связано с сопутствующими расстройствами, такими как депрессия, сердечно-сосудистые заболевания, диабеты и урогенитальные (УГ) расстройства. Первичными последствиями РПВЖ являются недостаточность переполнения кровью/набухания,недостаточность смазывания и отсутствие ощущения удовольствия в гениталиях. Вторичными последствиями РПВЖ являются снижение полового влечения, боль во время полового сношения, затруднение в достижении оргазма. Недавно была выдвинута гипотеза, что симптомы РПВЖ по меньшей мере у части пациентов имеют сосудистую основу (Goldstein et al., 1998), и данные на животных подкрепляют эту точку зрения (Parket al., 1997). Лекарственными средствами-кандидатами для лечения РПВЖ, которые находятся в стадии исследований на эффективность, являются, прежде всего, терапии эректильной дисфункции, которые способствуют кровообращению в мужских гениталиях. Они включают в себя два типа препаратов - пероральные или сублингвальные лекарственные средства (Апоморфин, Фентоламин, Силденафила) и простагландин (ПГЕ 1 - Альпростадил), который инъецируют или вводят трансуретрально мужчинам и местно в гениталии женщинам. Настоящее изобретение направлено на создание эффективных средств лечения ЖСД, и в частности РПВЖ. Краткое изложение аспектов настоящего изобретения Основополагающим открытием настоящего изобретения является возможность лечить женщину,страдающую ЖСД (предпочтительно РПВЖ), с использованием агента, который представляет собой И:NPY. В соответствии с настоящим изобретением на И:NPY по настоящему изобретению ссылаются как на агент по настоящему изобретению. Агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно использовать также в комбинации с одним или более чем одним дополнительным фармацевтически активным агентом. На дополнительный фармацевтически активный агент, если он присутствует или используется в комбинации с агентом по настоящему изобретению, может быть ссылка как на дополнительный агент. Один или более чем один из этих дополнительных агентов может представлять собой один или более чем один из следующих: И:ФДЭ, И:НЭП, другой И:NPY. Комбинации агентов более детально обсуждаются ниже. Если дополнительный агент по настоящему изобретению представляет собой И:ФДЭ, то для некоторых воплощений указанная ФДЭ представляет собой ФДЭ, гидролизующую цАМФ (и возможно гидролизующую цГМФ). Термин гидролизующая цАМФ включает в себя также метаболизм и/или разрушение цАМФ. Термин гидролизующая цАМФ (и возможно цГМФ) означает, что этот дополнительный агент может быть способен гидролизовать цГМФ в дополнение к цАМФ. Здесь термин гидролизующая цГМФ также включает в себя метаболизм и/или разрушение цГМФ. Однако относительно некоторых воплощений настоящего изобретения следует иметь в виду, что дополнительный агент по настоящему изобретению не обязательно должен быть способен гидролизовать цГМФ. Здесь общие ссылки на агенты могут применяться к дополнительным агентам, так же как и к агентам по настоящему изобретению. В соответствии с настоящим изобретением агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) действует на мишень, предпочтительно специфично на определенную мишень. На эту мишень иногда дается ссылка как на мишень по настоящему изобретению. Однако агент по настоящему изобретению может действовать на одну или более чем одну другую мишень. На эти другие мишени могут быть ссылки как на дополнительную мишень. Также, если используют дополнительный агент, то действие этого дополнительного агента может быть направлено на ту же самую мишень по настоящему изобретению и/или на дополнительную мишень (которая не обязательно должна представлять собой ту же самую дополнительную мишень, на которую действует этот агент по настоящему изобретению). Мишени описаны в данном описании изобретения. Следует иметь в виду, что в данном описании изобретения общие ссылки на мишени могут применяться к дополнительным мишеням, так же как и к мишени по настоящему изобретению. Следующим основополагающим открытием настоящего изобретения является возможность усиливать генитальный (например вагинальный или клиторный) кровоток у женщин с использованием агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY).-3 006254 В своих экспериментах авторы изобретения обнаружили, что РПВЖ связано с ослаблением генитального кровотока, в частности с ослаблением кровотока во влагалище и/или клиторе. Следовательно,лечение женщин с РПВЖ может быть достигнуто путем усиления генитального кровотока вазоактивными агентами. В своих исследованиях авторы изобретения выявили, что цАМФ опосредует вагинальную и клиторную вазорелаксацию, и что генитальный (например вагинальный и клиторный) кровоток можно усилить/потенцировать посредством повышения уровней цАМФ. Это еще одно основополагающее открытие. В этом отношении никто ранее не предполагал, что РПВЖ можно лечить таким образом, то есть прямым или косвенным повышением уровней цАМФ. Более того, в данной области техники не существует теорий, которые позволяют предположить, что РПВЖ связано с негативной модуляцией активности и/или уровней цАМФ или что цАМФ ответственен за опосредование вагинальной и клиторной вазорелаксации. Поэтому настоящее изобретение является еще более неожиданным. Кроме того, авторы изобретения обнаружили, что, применяя агенты по настоящему изобретению,можно усилить переполнение кровью гениталий и лечить РПВЖ - например, усилить смазывание во влагалище и повысить чувствительность во влагалище и клиторе. Таким образом, в широком аспекте настоящее изобретение относится к использованию потенциатора цАМФ, для лечения ЖСД, в частности РПВЖ. Настоящее изобретение имеет преимущество в том, что создает средства для восстановления нормальной реакции полового возбуждения, а именно: усиления генитального кровотока, приводящего к переполнению кровью влагалища, клитора и губ. Это приводит к усилению вагинального смазывания посредством транссудации плазмы, повышению вагинальной податливости и повышению генитальной(например вагинальной и клиторной) чувствительности. Следовательно, согласно настоящему изобретению предложены средства для восстановления или потенцирования нормальной реакции полового возбуждения. Подробное описание аспектов настоящего изобретения В одном аспекте настоящее изобретение относится к применению фармацевтической композиции,содержащей ингибитор нейропептида Y (И:NPY), способный потенцировать циклический аденозин-3',5'монофосфат (цАМФ) в гениталиях женщины, страдающей женской сексуальной дисфункцией (ЖСД), и возможно фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент, в качестве средства для лечения ЖСД. Здесь эта композиция (подобно любой другой композиции, упомянутой здесь) может быть упакована для последующего применения в лечении ЖСД, в частности РПВЖ. В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению И:NPY в изготовлении лекарства (такого как фармацевтическая композиция) для лечения ЖСД, в частности ЖСД. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения женщины, страдающей ЖСД, в частности РПВЖ, при котором вводят И:NPY, который способен потенцировать цАМФ в гениталиях женщины, в таком количестве, чтобы вызвать потенцирование цАМФ в гениталиях этой женщины; при этом указанный И:NPY возможно смешан с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом. Предложен также способ анализа для идентификации агента, который можно использовать для лечения ЖСД, в частности РПВЖ, при котором определяют, может ли этот агент прямо или косвенно потенцировать цАМФ; при этом потенцирование цАМФ в присутствии этого агента является показателем того, что этот агент может быть полезен в лечении ЖСД, в частности РПВЖ; и при этом указанный агент представляет собой И:NPY. В качестве примера, способ анализа для идентификации агента, который может прямо или косвенно потенцировать цАМФ, чтобы лечить ЖСД, в частности РПВЖ, при котором агент приводят в контакт с компонентом, способным воздействовать на активность и/или уровни цАМФ, и измеряют активность и/или уровни цАМФ; при этом потенцирование цАМФ в присутствии этого агента является показателем того, что этот агент может быть полезен в лечении ЖСД, в частности РПВЖ; и при этом указанный агент представляет собой И:NPY. В качестве еще одного примера, способ анализа для идентификации агента, который может прямо или косвенно потенцировать цАМФ для того, чтобы лечить ЖСД, в частности РПВЖ, при котором агент приводят в контакт с цАМФ и измеряют активность цАМФ; при этом потенцирование цАМФ в присутствии этого агента является показателем того, что этот агент может быть полезен в лечении ЖСД, в частности РПВЖ; и при этом указанный агент представляет собой И:NPY. Предложен способ, включающий в себя стадии, на которых: (а) осуществляют анализ, как описано здесь; (б) идентифицируют один или более чем один агент, который может прямо или косвенно потенцировать активность цАМФ; и (в) получают некое количество одного или более чем одного идентифицированного агента; и где указанный агент представляет собой И:NPY. Согласно этому аспекту агент, идентифицированный на стадии (б), может быть модифицирован таким образом, чтобы, например, максимизировать активность, а затем стадию (а) можно повторить. Эти стадии можно повторять до тех пор, пока желаемая активность или фармакокинетический профиль не будут достигнуты.-4 006254 Таким образом, предложен также способ, включающий в себя стадии, на которых: (а 1) осуществляют анализ, как описано здесь; (б 1) идентифицируют один или более чем один агент, который может прямо или косвенно потенцировать активность цАМФ; (б 2) модифицируют один или более чем один указанный идентифицированный агент; (а 2) возможно повторяют стадию (а 1); и (в) получают некое количество одного или более чем одного идентифицированного агента (то есть тех, которые были модифицированы); и где указанный агент представляет собой И:NPY. Предложен также способ лечения ЖСД, в частности РПВЖ, путем потенцирования цАМФ с использованием агента in vivo; где этот агент способен прямо или косвенно потенцировать цАМФ при способе анализа in vitro; где этот способ анализа in vitro представляет собой способ анализа, как он описан здесь; и где указанный агент представляет собой И:NPY. Предложено также применение агента в приготовлении фармацевтической композиции для лечения ЖСД, в частности РПВЖ; где этот агент способен потенцировать цАМФ прямо или косвенно при анализе in vitro способом анализа, как описано здесь; и где указанный агент представляет собой И:NPY. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению животной модели, включающей в себя анестезированную самку животного вместе со средствами для измерения изменений генитального кровотока у указанного животного после стимуляции его тазового нерва и средства для стимуляции тазового нерва, для идентификации И:NPY, способного лечить ЖСД. Предложен также способ анализа для идентификации агента, который может прямо или косвенно потенцировать цАМФ для того, чтобы лечить РПВЖ, при котором агент вводят животной модели, как описано здесь, и измеряют любое потенцирование цАМФ и/или усиление кровотока во влагалище и/или клиторе указанного животного; и где указанный агент представляет собой И:NPY. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу диагностики ЖСД у женщины,при котором определяют, содержит ли образец, взятый из гениталий женщины или их секрета, NPY, который оказывает прямое или косвенное воздействие на уровень или активность цАМФ в гениталиях этой женщины, и присутствует ли он в количестве, которое может вызывать ЖСД, и который может быть модулирован для достижения благоприятного эффекта посредством использования И:NPY, который лечит ЖСД. В следующем аспекте настоящее изобретение относится к диагностическому набору для диагностики ЖСД у женщины, содержащему средства для обнаружения NPY в образце, взятом из гениталий женщины или их секрета, и определения количества указанного NPY, средства для определения уровня или активности цАМФ и средства для определения достижения благоприятного эффекта посредством использования И:NPY, который лечит ЖСД. Для удобства эти и последующие аспекты настоящего изобретения теперь обсуждаются под соответствующими заголовками разделов. Однако то, что указано в каждом разделе не обязательно ограничивается содержанием каждого конкретного раздела. Предпочтительные аспекты Агент по настоящему изобретению (то есть И: NPY) предпочтительно представляет собой агент для лечения РПВЖ. Агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) предпочтительно представляет собой медиатор генитальной (например вагинальной или клиторной) вазорелаксации у женщин. В одном воплощении агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) предпочтительно представляет собой агент для перорального введения. В другом воплощении агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) может быть агентом для местного введения. Предпочтительно, агент по настоящему изобретению представляет собой антагонист. Агент по настоящему изобретению представляет собой И:NPY (иногда пишут как NPYi). Для некоторых применений агент предпочтительно представляет собой И:NPY Y1, или И:NPY Y2,или И:NPY Y5, более предпочтительно агент представляет собой И:NPY Y1. Предпочтительно агент представляет собой избирательный И:NPY. Предпочтительно агент представляет собой И:NPY Y1. Предпочтительно агент представляет собой избирательный И:NPY Y1. Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то есть H:NPY) можно вводить в комбинации с другим фармацевтически активным агентом. Здесь это совместное введение нет необходимости делать одновременно, не говоря уже об одинаковом пути. Примером совместно вводимой композиции может быть композиция, которая содержит агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) и дополнительный агент, причем этот дополнительный агент может оказывать прямое потенцирующее воздействие на цАМФ. Примеры комбинаций обсуждаются ниже. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно имеет косвенное потенцирующее воздействие на цАМФ. Примеры таких дополнительных агентов включают в себя И:НЭП и/или И:NPY. В альтернативном выражении для некоторых применений этот дополнительный агент предпочтительно не оказывает прямого потенцирующего воздействия на цАМФ. Очевидно, что этот агент может оказывать косвенное потенцирующее воздействие на цАМФ, действуя на естественные и естественно-5 006254 локализованные прямо действующие агенты - такие как естественный и естественно локализованныйVIP. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно оказывает прямое потенцирующее воздействие на цАМФ. Примеры таких дополнительных агентов включают в себя И:ФДЭ. Для некоторых применений дополнительный агент представляет собой ингибитор, то есть он способен проявлять ингибиторную функцию. Для некоторых применений дополнительный агент представляет собой антагонист. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:ФДЭ(иногда пишут как ФДЭi). Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:ФДЭ. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:ФДЭ 1 или И:ФДЭ 2 (иногда пишут как И:ФДЭII, или ФДЭIIi, или ФДЭ 2i), или И:ФДЭ 3, или И:ФДЭ 4, или И:ФДЭ 7, или И:ФДЭ 8, более предпочтительно этот агент представляет собой И:ФДЭ 2. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:ФДЭII. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:НЭП(иногда пишут как НЭПi). Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:НЭП. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И: НЭП,где указанный НЭП представляет собой ЕС 3.4.24.11. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:НЭП, где указанный НЭП представляет собой ЕС 3.4.24.11. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:NPY(иногда пишут как NPY). Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:NPYY1, или И:NPY Y2, или И:NPY Y5, более предпочтительно этот агент представляет собой И:NPY Y1. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:NPY. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой И:NPYY1. Для некоторых применений дополнительный агент предпочтительно представляет собой избирательный И:NPY Y1. Для некоторых применений агент не вызывает - либо его вводят таким образом, что он не вызывает- продолжительного падения кровяного давления (например в течение периода примерно 5 мин или более). В данном воплощении, если агент нужно вводить местно, то этот агент может быть способным вызывать падение кровяного давления (как, например, если бы его вводили внутривенно), при условии что при местном введении минимальные уровни агента проходят в кровяное русло. Для перорального агента предпочтительно, чтобы этот агент не вызывал продолжительного падения кровяного давления. В предпочтительном аспекте агент по настоящему изобретению (то естьИ:NPY) не вызывает - или его вводят таким образом, что он не вызывает - большого изменения частоты сердечных сокращений. Лечение Следует иметь в виду, что в данном описании изобретения все ссылки на лечение включают в себя одно или более чем одно из следующего: лечебную, паллиативную и профилактическую терапию. Предпочтительно термин "лечение" включает в себя по меньшей мере лечебную терапию и/или паллиативную терапию. Женские гениталии Термин женские гениталии используется в соответствии с определением, которое дано в Gray'sAnatomy, C.D.Clemente, 13rh American Edition: Генитальные органы включают в себя внутреннюю и наружную группу. Внутренние органы расположены в пределах таза и включают в себя яичники, маточные трубы, матку и влагалище. Наружные органы являются поверхностными и расположены против урогенитальной диафрагмы и внизу тазового свода. Они включают в себя лобок, большие губы и малые губы, клитор, преддверие, луковицу преддверия и большие железы преддверия. Эндогенный цАМФ В особенно предпочтительном воплощении агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) потенцирует эндогенный цАМФ, например потенцирует уровни эндогенного цАМФ. Здесь термин эндогенный цАМФ означает цАМФ, который является результатом половой стимуляции (полового возбуждения). Следовательно, этот термин не охватывает уровни цАМФ, которые повышаются независимо от полового влечения. Таким образом, согласно настоящему изобретению лечение РПВЖ достигается посредством прямого или косвенного потенцирования эндогенной цАМФ сигнализации, что, в свою очередь, усиливает ва-6 006254 гинальный кровоток/смазывание и/или клиторный кровоток, тем самым усиливая естественную реакцию полового возбуждения. Таким образом, способ лечения по настоящему изобретению восстанавливает или потенцирует нормальную реакцию возбуждения. При способе лечения по настоящему изобретению этого результата можно достичь, используя антагонист рецептора NPY. Здесь предложена животная модель испытаний. Эту животную модель испытаний можно использовать для определения усиления генитального кровотока в результате потенцирования цАМФ. В этой животной модели стимулируют тазовый нерв, что вызывает эффект, который имитирует физиологию полового возбуждения/реакции. В этих экспериментах агенты по настоящему изобретению (то есть И:NPY) вызывают усиление кровотока выше контрольного усиления после того, как этот нерв был стимулирован. В отсутствие стимуляции эти агенты не обладают эффектом (или обладают пренебрежимо малым эффектом) вызывать усиление кровотока. Обычно в этих экспериментах нерв стимулируют, чтобы получить базисное усиление кровотока. Затем агент-кандидат (или реальный агент) дают животному системно или местно, например внутривенным, местным или пероральным путем. Усиление кровотока выше контрольного усиления, следовательно, является показателем агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY). Половая стимуляция Настоящее изобретение также охватывает введение агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) до и/или во время половой стимуляции. Здесь термин половая стимуляция может быть синонимом термину половое возбуждение. Данный аспект настоящего изобретения создает преимущество,поскольку он обеспечивает системную избирательность. Естественный каскад происходит только в гениталиях, а не в других локализациях, например в сердце и т.д. Следовательно, достижение избирательного воздействия на гениталии будет возможно. Таким образом, в некоторых аспектах настоящего изобретения чрезвычайно желательно, чтобы имела место стадия половой стимуляции. Авторы изобретения обнаружили, что эта стадия может обеспечить системную избирательность. Здесь половая стимуляция может представлять собой одно или более чем одно из следующего: визуальная стимуляция, физическая стимуляция, звуковая стимуляция или мысленная стимуляция. Таким образом, агенты по настоящему изобретению (то есть И:NPY) предпочтительно вводят до или во время половой стимуляции, особенно когда эти агенты предназначены для перорального введения. Следовательно, в этом предпочтительном аспекте согласно настоящему изобретению предложено применение агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) в изготовлении лекарства для лечения РПВЖ; где этот агент способен потенцировать цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, страдающей РПВЖ; и где указанная женщина подвергается половой стимуляции до или во время введения указанного лекарства. Предпочтительно, согласно настоящему изобретению предложено применение агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) в изготовлении лекарства для лечения РПВЖ; где этот агент способен потенцировать цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, страдающей РПВЖ; где указанная женщина подвергается половой стимуляции до или во время введения указанного лекарства; и где указанное лекарство вводят указанной женщине перорально. Кроме того, в этом предпочтительном аспекте согласно настоящему изобретению предложен способ лечения женщины, страдающей РПВЖ, при котором этой женщине вводят агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY), который способен потенцировать цАМФ в сексуальных гениталиях, причем в таком количестве, чтобы вызвать потенцирование цАМФ в сексуальных гениталиях этой женщины; при этом агент возможно смешан с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом; и при этом указанная женщина подвергается половой стимуляции до или во время введения указанного агента. Предпочтительно, согласно настоящему изобретению предложен способ лечения женщины, страдающей РПВЖ, при котором этой женщине вводят агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY),который способен потенцировать цАМФ в сексуальных гениталиях, причем в таком количестве, чтобы вызвать потенцирование цАМФ в сексуальных гениталиях этой женщины; при этом агент возможно смешан с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом; при этом указанная женщина подвергается половой стимуляции до или во время введения указанного агента; и при этом указанный агент вводят указанной женщине перорально. Потенцирование цАМФ При использовании здесь со ссылкой на цАМФ термин потенцирование включает в себя одно или более чем одно из следующего: повышение эффективности цАМФ, повышение уровней цАМФ, повышение активности цАМФ, снижение уровня расщепления цАМФ, снижение уровня ингибирования цАМФ. Потенцирующий эффект может быть прямым эффектом. Примером прямого эффекта может быть положительная регуляция уровней цАМФ агентом, который повышает его экспрессию.-7 006254 Альтернативно, потенцирующий эффект может быть косвенным эффектом. Примером такого эффекта может быть действие на вещество, которое в противном случае ингибировало бы и/или снижало уровни и/или активность цАМФ. Другим примером такого эффекта может быть усиление действия вещества, которое повышает эффективность цАМФ, повышает уровни цАМФ, повышает активность цАМФ,снижает уровень расщепления цАМФ или снижает уровень ингибирования цАМФ. Примером ПцАМФ может быть И:ФДЭ, такой как И:ФДЭII. Миметик цАМФ В некоторых аспектах настоящего изобретения дополнительный агент может действовать как миметик цАМФ. Используемый здесь термин миметик цАМФ означает агент, который может действовать подобно цАМФ (например, иметь подобный биологический профиль и эффект) в сексуальных гениталиях женщины и при этом оказывает одно или более чем одно из следующих действий: повышает эффективность цАМФ-подобных компонентов, повышает уровни цАМФ-подобных компонентов, повышает активность цАМФ-подобных компонентов, снижает уровень расщепления цАМФ-подобных компонентов,снижает уровень ингибирования цАМФ-подобных компонентов. Примером миметика цАМФ может быть форсколин. Теперь авторы изобретения обнаружили, что форсколин повышает вагинальный и клиторный кровоток и может действовать также в качестве вагинального релаксанта. В предпочтительном аспекте миметик цАМФ вводят перорально. Активатор цАМФ Используемый здесь термин активатор цАМФ означает вещество, которое контролирует или высвобождает цАМФ в сексуальных гениталиях женщины. Этот контроль может быть прямым (например направленным на сам цАМФ) или косвенным (например через активацию цАМФ). Для удобства авторы изобретения ссылаются на эти вещества как на АцАМФ. Мишень Термин мишень, используемый здесь со ссылкой на настоящее изобретение, означает любое вещество, которое представляет собой цАМФ, АцАМФ, ИцАМФ или НМцАМФ. Иначе выражаясь, на мишень,как используется здесь, может быть ссылка как на мишень ПцАМФ. Мишень, как она описана здесь, и/или дополнительная мишень может представлять собой аминокислотную последовательность и/или нуклеотидную последовательность, кодирующую ее, и/или единицу экспрессии, ответственную за ее экспрессию, и/или ее модулятор. Мишень может представлять собой также комбинацию таких мишеней. Агент Агент по настоящему изобретению представляет собой И:NPY. Агент по настоящему изобретению может представлять собой любой подходящий агент, который может действовать как ПцАМФ. Агент (то есть агент по настоящему изобретению и/или дополнительный агент) может представлять собой аминокислотную последовательность или ее химическое производное. Это вещество может также представлять собой органическое соединение или другое химическое вещество. Агент может также представлять собой нуклеотидную последовательность, которая может быть смысловой последовательностью или антисмысловой последовательностью. Агент может также представлять собой антитело. Таким образом, термин агент включает в себя, но не ограничивается им, соединение, которое может быть получено из любого подходящего источника или синтезировано с помощью любого подходящего источника, как природного, так и неприродного. Агент может быть сконструирован или получен из библиотеки соединений, которые могут включать в себя пептиды, а также другие соединения, такие как небольшие органические молекулы, такие как соединения свинца. В качестве примера, агент может представлять собой природное вещество, биологическую макромолекулу или экстракт, изготовленный из биологических материалов, таких как бактерии, грибы, либо клетки или ткани животных (в частности млекопитающих), органическую или неорганическую молекулу, синтетический агент, полусинтетический агент, структурный или функциональный миметик, пептид,пептидомиметик, производный агент, пептид, отщепленный от целого белка, или пептиды, синтезированные синтетическим путем (таким как, например, либо с использованием синтезатора пептидов, либо рекомбинантными способами, либо их комбинациями), рекомбинантный агент, антитело, природный или неприродный агент, слитый белок или его эквивалент, а также мутанты, их производные или сочетания. Используемый здесь термин агент может означать отдельную единицу, либо он может означать комбинацию агентов. Если агент представляет собой органическое соединение, то для некоторых применений, таких как если этот агент представляет собой И:NPY, это органическое соединение типично может содержать две или более чем две связанные углеводородные группы. Для некоторых применений агент предпочтительно содержит по меньшей мере две циклические группы, причем одна из них может представлять собой конденсированную циклическую кольцевую структуру. Для некоторых применений предпочтительно по-8 006254 меньшей мере одна из этих циклических групп представляет собой гетероциклическую группу. Для некоторых применений эта гетероциклическая группа предпочтительно содержит по меньшей мере один N в кольце. Примеры таких соединений представлены здесь в разделе Примеры. Если дополнительный агент представляет собой органическое соединение, то для некоторых применений, таких как если этот агент представляет собой И:НЭП, это органическое соединение типично может содержать амидную группу (то есть -N(Н)-С(O)- или также -С(O)-N(Н)-) и одну или более чем одну углеводородную группу. Здесь термин углеводородная группа означает группу, содержащую по меньшей мере С и Н, а также возможно содержащую один или более чем один другой подходящий заместитель. Примеры таких заместителей могут включать в себя галогено-, алкокси-, нитро-, алкильную группу, циклическую группу и т.д. В дополнение к тому, что возможны заместители, представляющие собой циклическую группу, комбинация заместителей может образовать циклическую группу. Если углеводородная группа содержит более чем один С, то эти атомы углерода не обязательно должны быть связаны друг с другом. Например, по меньшей мере два атома углерода могут быть связаны через подходящий элемент или группу. Таким образом, углеводородная группа может содержать гетероатомы. Подходящие гетероатомы очевидны для специалистов в данной области и включают в себя, например, серу,азот и кислород. Для некоторых применений агент предпочтительно содержит по меньшей мере одну циклическую группу. Для некоторых применений агент предпочтительно содержит по меньшей мере одну циклическую группу, связанную с другой углеводородной группой посредством амидной связи. Примеры таких соединений представлены здесь в разделе Примеры. Если дополнительный агент представляет собой органическое соединение, то для некоторых применений, таких как если этот агент представляет собой И:ФДЭ, это органическое соединение типично может содержать две или более чем две связанные углеводородные группы. Для некоторых применений агент предпочтительно содержит по меньшей мере две циклические группы, причем возможно одна из этих циклических групп может представлять собой конденсированную циклическую кольцевую структуру. Для некоторых применений по меньшей мере одна из этих циклических групп предпочтительно представляет собой гетероциклическую группу. Для некоторых применений эта гетероциклическая группа предпочтительно содержит по меньшей мере один N в кольце. Примеры таких соединений представлены в разделе Примеры. Агент может содержать галогеногруппы. Здесь галогено означает фторо, хлоро, бромо или иодо. Агент может содержать одну или более чем одну алкильную, алкокси, алкенильную, алкиленовую или алкениленовую группу, которая может быть неразветвленной или разветвленной. Агент может находиться в форме фармацевтически приемлемой соли, такой как соль присоединения кислоты или соль основания, либо ее сольвата, включая гидрат. Подходящие соли рассматриваются в Berge et al., J.Pharm.Sci., 1977, 66, 1-19. Подходящие соли присоединения кислоты образуются из кислот, которые образуют нетоксичные соли, примерами которых являются соли гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат, бисульфат,нитрат, фосфат, гидрофосфат, ацетат, малеат, фумарат, лактат, тартрат, цитрат, глюконат, сукцинат, сахарат, бензоат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат. Подходящие соли оснований образуются из оснований, которые образуют нетоксичные соли, примерами которых являются соли натрия, калия, алюминия, кальция, магния, цинка и диэтаноламина. Фармацевтически приемлемую соль агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) легко можно получить путем смешивания вместе растворов агента и желаемой кислоты или основания, где как подходит. Эту соль можно осадить из раствора и собрать фильтрованием, либо ее можно выделить выпариванием растворителя. Агент может существовать в полиморфной форме. Агент может содержать один или более чем один асимметрический атом углерода и, следовательно,существовать в двух или более стереоизомерных формах. В случае, когда агент содержит алкенильную или алкениленовую группу, может иметь место цис (Е) и транс (Z) изомерия. Настоящее изобретение включает в себя индивидуальные стереоизомеры агента и, если это свойственно, его индивидуальные таутомерные формы вместе с их смесями. Разделение диастереоизомеров или цис и транс изомеров может быть успешно выполнено традиционными способами,например фракционной кристаллизацией, хроматографией или ВЭЖХ стереоизомерной смеси агента или его подходящей соли или производного. Индивидуальный энантиомер агента может быть получен также из соответствующего оптически чистого промежуточного соединения либо разделением, например ВЭЖХ, соответствующего рацемата с использованием подходящей хиральной стационарной фазы, либо фракционной кристаллизацией диастереоизомерных солей, образованных взаимодействием соответствующего рацемата с подходящей оптически активной кислотой или основанием, где как подходит. Настоящее изобретение также включает в себя все подходящие изотопные разновидности агента или его фармацевтически приемлемой соли. Изотопную разновидность агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) или его фармацевтически приемлемой соли определяют как разновидность, в которой по меньшей мере один атом заменен атомом, имеющим то же атомное число, но имеющим атомную-9 006254 массу, отличную от атомной массы, обычно обнаруживаемой в природе. Примеры изотопов, которые могут быть введены в агент и его фармацевтически приемлемые соли, включают в себя изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, такие как 2H, 3H, 13 С, 14 С, 15N, 17 О, 18 О, 31 Р,32P, 35S, 18F и 36Cl соответственно. Некоторые изотопные разновидности агента и его фармацевтически приемлемых солей, например те, в которые введен радиоактивный изотоп, такой как 3H или 14 С, полезны в исследованиях тканевого распределения лекарственного средства и/или субстрата. Тритиевые, то есть 3H, и углерод-14, то есть 14 С, изотопы особенно предпочтительны в связи с простотой их получения и обнаружения. Кроме того,замещение изотопами, такими как дейтерий, то есть 2H, может давать определенные терапевтические преимущества благодаря более высокой метаболической стабильности, например, повышенному периоду полураспада in vivo или пониженной потребности дозировки, и поэтому при некоторых обстоятельствах она может быть предпочтительна. Изотопные разновидности агента и его фармацевтически приемлемых солей, как правило, могут быть получены традиционными способами с использованием соответствующих изотопных разновидностей подходящих реагентов. Для специалистов в данной области очевидно, что агент может образовываться из пролекарства. Примеры пролекарств включают в себя объекты, которые имеют определенную защитную группу (группы) и которые могут не обладать фармакологической активностью сами по себе, но в определенных случаях их можно вводить (например перорально или парентерально), после чего они претерпевают метаболизм в организме с образованием агента, который является фармакологически активным. Кроме того, очевидно, что некоторые группировки, известные как про-группировки, например как описано в Design of Prodrugs, H. Bundgaard, Elsevier, 1985 (раскрывается здесь посредством ссылки), могут быть помещены на соответствующие функциональные группы агентов. Такие пролекарства также включены в объем изобретения. ПцАМФ может осуществлять одно или более чем одно из следующего: прямо или косвенно повышать эффективность цАМФ, прямо или косвенно повышать уровни цАМФ, прямо или косвенно повышать активность цАМФ, прямо или косвенно снижать уровень расщепления цАМФ, прямо или косвенно снижать уровень ингибирования цАМФ. Предпочтительно агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) прямо или косвенно повышает уровни цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, страдающей РПВЖ. Более предпочтительно агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) прямо или косвенно избирательно повышает уровни цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, страдающей РПВЖ. Более предпочтительно агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) прямо или косвенно избирательно повышает уровни цАМФ, где указанный цАМФ представляет собой цАМФ, индуцируемый половым возбуждением. В особенно предпочтительном аспекте агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) повышает относительное количество цАМФ, индуцируемого половым возбуждением. Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) избирательно лечит РПВЖ. В одном аспекте агент может действовать на подходящую мишень как ингибитор или антагонист и тем самым повышать уровни цАМФ в сексуальных гениталиях женщины. В данном тексте авторы изобретения использовали термин ингибитор для обозначения ингибитора и/или антагониста. В другом аспекте агент может действовать на подходящую мишень как активатор или агонист и тем самым повышать уровни цАМФ в сексуальных гениталиях женщины. В данном тексте авторы изобретения использовали термины активатор и позитивный регулятор для обозначения активатора и/или позитивного регулятора и/или агониста. Таким образом, агент может действовать на подходящую мишень как агонист, антагонист, позитивный регулятор или ингибитор. Агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) может представлять собой одну единицу, которая способна проявлять два или более чем два из этих свойств. Альтернативно или дополнительно агент по настоящему изобретению может представлять собой комбинацию агентов, которые способны проявлять одно или более чем одно из этих свойств. Предпочтительно агент может действовать на подходящую мишень как избирательный агонист, избирательный антагонист, избирательный позитивный регулятор или избирательный ингибитор. Агент также может быть способным проявлять одно или более чем одно другое благоприятное функциональное свойство. Например, агент по настоящему изобретению может потенцировать цАМФ, а также потенцировать цГМФ. Для некоторых применений (как например местное применение) агент может также проявлять ингибиторное действие по отношению к АПФ (ангиотензинпревращающий фермент). Анализ АПФ представлен здесь в Экспериментальном Разделе. Для некоторых применений (например у конкретных типов пациентов) такие агенты (то есть агенты, которые также проявляют ингибиторное действие по отношению к АПФ) могут быть неподходящими для перорального введения.- 10006254 Для некоторых применений агент может проявлять также ингибиторное действие по отношению к ЭПФ (эндотелий-превращающий фермент). Анализы ЭПФ общеизвестны в данной области техники. Фармацевтические комбинации Агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно использовать в комбинации с одним или более чем одним другим фармацевтически активным агентом, таким как ПцГМФ (такой ингибитор фосфодиэстеразы типа 5, как например Силденафил, или донор оксида азота, или предшественник оксида азота, например L-аргинин, или ингибиторы аргиназы) и/или действующее на центральную нервную систему фармацевтическое средство (например агонисты рецепторов дофамина, такие как апоморфин, или селективные агонисты рецептора D2 дофамина, такие как PNU-95666, или агонист рецепторов меланокортина, такой как меланотан II). Указания по использованию апоморфина в качестве фармацевтического препарата можно найти в US-A-5945117. В данном конкретном документе апоморфин вводят сублингвально. Дополнительно или альтернативно агент можно использовать в комбинации с одним или более чем одним ингибитором ФДЭ 5 (например силденафилом, варденафилом (Вауеr ВА 38-9456) и IС 351(Cialis, Icos Lilly, одним или более чем одним донором оксида азота (например NMI-921), одним или более чем одним агонистом рецепторов дофамина (например апоморфином, уприма, иксеном), одним или более чем одним гетероциклическим амином, таким как гетероциклические амины, описанные в общих чертах и конкретно в WO 00/40226, в частности примеры 7, 8 и 9, одним или более чем одним агонистом рецепторов меланокортина (например меланотаном II или РТ 14), одним или более чем одним открывателем калиевого канала (например открывателем калиевого канала КАТФ (например миноксидилом, никорандилом), и/или активируемым кальцием открывателем калиевого канала (например BMS204352), одним или более чем одним антагонистом 1-адреноцептора (например фентоламином, вазофемом, вазомаксом), одним или более чем одним агонистом рецепторов VIP или аналога VIP (например Ro125-1553) или фрагментов VIP, одним или более чем одним антагонистом -адреноцепторов в сочетании с VIP (например инвикорпом, авиптадилом), одним или более чем одним антагонистом а 2-адреноцептора(например иохимбином), одним или более чем одним эстрогеном, эстрогеном и медроксипрогестероном или медроксипрогестерона ацетатом (МПА), либо агентом гормонозаместительной терапии эстрогенов и метилтестостерона (например HRT (гормонозаместительная терапия), в частности премарин, сенестин,эстрофеминал, эквин, эстрас, эстрофем, эллесте соло, эстринг, эстрадерм, эстрадерм TTS, эстрадерм матрикс, дерместрил, премфаз, премпро, премпак, премик, эстратест, эстратест HS, тиболон), одним или более чем одним заместительным агентом тестостерона (inc DHEA (дегидроандростедион), тестостерон(Тострелл) или тестостероновый имплантат (Органон, одним или более чем одним тестостерон/эстрадиол агентом, одним или более чем одним агонистом эстрогенов, например лазофоксифеном,одним или более чем одним агонистом или антагонистом рецепторов серотонина (например агонистом и антагонистом рецепторов 5 НТ 1 А, 5 НТ 2 С, 5 НТ 2 А и 5 НТ 3, как они описаны в WO 2000/28993), одним или более чем одним агонистом простаноидных рецепторов (например Muse, алпростадил, мизопростол),одним или более чем одним агонистом пуринергических рецепторов (в частности P2Y2 и P2Y4), одним или более чем одним агентом-антидепрессантом (например бупропионом (Велбутрин), мирртазапином,нефазодоном). Структура IС 351 представляет собой Если вводят комбинацию активных агентов, то их можно вводить одновременно, по отдельности или последовательно. Комбинация С VIP Согласно настоящему изобретению агент не представляет собой VIP (или предпочтительно не представляет собой его аналог или его фрагмент). Однако в некоторых воплощениях агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно вводить совместно с VIP, либо с его аналогом или фрагментом. В очень предпочтительном аспекте VIP, либо его аналог или его фрагмент, не вводят. Его не вводят в связи с тем, что было сообщение о том, что инфузии VIP приводят к значительным нежелательным сердечнососудистым эффектам, таким как увеличение частоты сердечных сокращений и снижение диастолического кровяного давления (Ottesen 1983, 1987, 1995). Кроме того, и даже несмотря на то, что Ottesen и его соавторы продемонстрировали, что VIP индуцирует усиление вагинального кровотока и смазывания у здоровых добровольцев, механизм, посредством которого VIP проявляет свои эффекты, неясен. В литературе имеется ряд примеров VIP сигнализа- 11006254 ции через различные вторичные системы посредников, например цГМФ/гуанилатциклазу (Ashur-Fabian,1999), монооксид углерода (СО)/гемоксигеназу (Fan et al., 1998) и цАМФ/аденилатциклазу (Foda, 1995;Schoeffer, 1985; Gu, 1992). Примеры этому приведены в недавнем сообщении, которое раскрывает, как вазорелаксирующие эффекты VIP в маточной артерии можно объяснить высвобождением оксида азота(Jovanovic, 1998). Опять же, имеется также подтверждение VIР модуляции оксида азота (NО)/цГМФ в мужской мочеполовой функции (Kim, 1994). Кроме того, в литературе было сообщение о том, что VIP не воздействует на уровни цАМФ в культурах гладкомышечных клеток влагалища (см. Traish, A., Moreland, R.B., Huang, Y., et al (1999). Development of human and rabbit vaginal smooth muscle cell cultures: Effects of vasoactive agents on intracellularFahrenkrug, 1990. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology, vol. 17, 61-68) сообщают, что воздействие VIP на вагинальный кровоток независимо от пути введения является скорее частью системного сосудорасширяющего эффекта, а не локальным ответом. Кроме того, они сообщают о ряде сосудистых побочных эффектов, связанных с VIP, a именно: о покраснении, гипотензии и тахикардии. Значения Ki Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент) предпочтительно имеет значение Ki менее примерно 100 нМ, предпочтительно менее примерно 75 нМ, предпочтительно менее примерно 50 нМ, предпочтительно менее примерно 25 нМ, предпочтительно менее примерно 20 нМ, предпочтительно менее примерно 15 нМ, предпочтительно менее примерно 10 нМ, предпочтительно менее примерно 5 нМ. Значения Kb Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент) предпочтительно имеет значение Кb менее примерно 100 нМ, предпочтительно менее примерно 75 нМ, предпочтительно менее примерно 50 нМ, предпочтительно менее примерно 25 нМ, предпочтительно менее примерно 20 нМ, предпочтительно менее примерно 15 нМ, предпочтительно менее примерно 10 нМ, предпочтительно менее примерно 5 нМ. Значения K Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то естьИ:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент) предпочтительно имеет значение Кa менее примерно 100 нМ, предпочтительно менее примерно 75 нМ, предпочтительно менее примерно 50 нМ, предпочтительно менее примерно 25 нМ, предпочтительно менее примерно 20 нМ, предпочтительно менее примерно 15 нМ, предпочтительно менее примерно 10 нМ, предпочтительно менее примерно 5 нМ. Фармакокинетика В некоторых воплощениях настоящего изобретения агенты по настоящему изобретению (то есть И:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент, например И: НЭП) предпочтительно имеют logD от -2 до +4, более предпочтительно от -1 до +2. log D может быть определен стандартными методами,известными в данной области, такими, которые описаны в J. Pharm. Pharmacol. 1990, 42:144. В дополнение или альтернативно, в некоторых воплощениях агенты по настоящему изобретению(то есть И:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент, например И:НЭП) предпочтительно характеризуются поступлением в сасо-2 более чем 2 х 10-6 смс-1, более предпочтительно более чем 5 х 10-6 смс-1. Значение поступления в сасо можно определить стандартными методами, известными в данной области, такими как описано в J. Pharm. Sci. 79, 7, р.595-600, и Pharm. Res. Vol. 14, No. 6 (1997). Избирательность Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент) предпочтительно имеет по меньшей мере примерно 100-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 150-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 200-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 250-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 300-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 350-кратную избирательность к желаемой мишени. Для некоторых применений агент по настоящему изобретению (то естьИ:NPY) (и возможно возможный дополнительный агент) предпочтительно имеет по меньшей мере примерно 400-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 500-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 600-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 700-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 800-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 900-кратную избирательность к желаемой мишени, предпочтительно по меньшей мере примерно 1000-кратную избирательность к желаемой мишени.- 12006254 Методы химического синтеза В типичном случае агент может быть получен методами химического синтеза. Агент или его мишень или варианты, гомологи, производные, фрагменты или миметики могут быть получены химическими способами для синтеза агента целиком или частично. Например, пептиды могут быть синтезированы твердофазными методами, отщеплены от смолы и очищены посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (например Creighton (1983) Protein StructuresAnd Molecular Principles, WH Freeman and Co, New York NY). Состав этих синтетических пептидов можно подтвердить аминокислотным анализом или секвенированием (например по методике расщепления Эдмана; Creighton, см. выше). Прямой синтез агента, или его вариантов, гомологов, производных, фрагментов или миметиков может быть осуществлен с использованием различных твердофазных методов (Roberge JY et al. (1995) Science 269: 202-204), а автоматический синтез может быть успешно выполнен например с использованием синтезатора пептидов ABI 43 1 A (Perkin Elmer) в соответствии с инструкциями, предоставленными изготовителем. Дополнительно аминокислотные последовательности, составляющие агент или любую его часть, можно изменять в процессе прямого синтеза и/или объединять, используя химические способы, с последовательностью из других субъединиц или любой их частью, с получением варианта агента или мишени, такого как, например, вариант ФДЭ. В альтернативном воплощении изобретения кодирующую последовательность агента, его мишени или вариантов, гомологов, производных, фрагментов или миметиков можно синтезировать, целиком или частично, используя химические способы, общеизвестные в данной области техники (см. Caruthers MH etal. (1980) Nuc. Acids Res. Symp. Ser. 215-23, Horn Т et al. (1980) Nuc. Acids Res. Symp. Ser. 225-232). Миметик Используемый здесь термин миметик относится к любому химическому соединению, которое включает в себя, но не ограничивается ими, пептид, полипептид, антитело или другое органическое химическое соединение, которое обладает такой же количественной активностью или таким же эффектом,как и упомянутый агент, по отношению к мишени. Химическое производное Термин производное или производный, как он используется здесь, включает в себя химическую модификацию агента. Иллюстрацией таких химических модификаций может быть замещение водорода галогеногруппой, алкильной группой, ацильной группой или аминогруппой. Химическая модификация В одном воплощении настоящего изобретения агент может представлять собой химически модифицированный агент. Химическая модификация агента может либо усиливать, либо ослаблять взаимодействие с образованием водородной связи, взаимодействие зарядов, гидрофобное взаимодействие, ван-дер-ваальсово взаимодействие или дипольное взаимодействие между агентом и мишенью. В одном аспекте идентифицированный агент может действовать в качестве модели (например матрицы) для разработки других соединений. Рекомбинантные способы В типичном случае агент для использования в анализе по настоящему изобретению может быть получен по методикам рекомбинантных ДНК. Потенцирование цГМФ Используемый здесь со ссылкой на цГМФ термин потенцирование включает в себя любое из следующего: повышение эффективности цГМФ, повышение уровней цГМФ, повышение активности цГМФ,снижение уровня расщепления цГМФ, снижение уровня ингибирования цГМФ. Потенцирующий эффект может представлять собой прямой эффект. Альтернативно он может представлять собой вторичный эффект и/или нисходящий эффект. При этом агент, который потенцирует цГМФ, предпочтительно действует на ИцГМФ и/или на НМцГМФ, причем модулятор цГМФ обладает негативным воздействием на цГМФ, так что этот агент снижает и/или устраняет и/или маскирует и/или направляет в другую сторону нежелательный эффект ИцГМФ и/или НМцГМФ, направленный на цГМФ. Поэтому настоящее изобретение охватывает комбинацию одного или более чем одного И:ИцАМФ и одного или более чем одного И:ИцГМФ. В одном аспекте И:ИцГМФ представляет собой И:ФДЭцГМФ. ИцАМФ и/или НМцАМФ Авторы изобретения показали, что цАМФ опосредует генитальный (например вагинальный или клиторный) кровоток, и путем усиления цАМФ сигнализации им удалось усилить генитальный (например вагинальный или клиторный) кровоток в животной модели. Таким образом, агент, который позитивно регулирует/усиливает опосредованную цАМФ вазорелаксацию, должен быть эффективным в лечении РПВЖ. Для удобства авторы изобретения ссылаются на эти вещества как на ингибиторы цАМФ (ИцАМФ) и/или ингибиторы НМцАМФ. Здесь ИцАМФ и НМцАМФ обладают негативным воздействием на уровни или активность цАМФ.- 13006254 Таким образом, этот агент может представлять собой любой один или более чем один из: И:ИцАМФ и/или И:НМцАМФ. Этот агент может представлять собой одну единицу, которая способна проявлять два или более чем два из этих свойств. Альтернативно или дополнительно этот агент может представлять собой комбинацию агентов, которые способны проявлять одно или более чем одно из этих свойств. Примеры ИцАМФ и НМцАМФ включают в себя NPY и возможно одно или более чем одно из ФДЭ и НЭП, или любой компонент, связанный с ними. Этот связанный компонент может представлять собой,например, рецептор и/или кофактор. Таким образом, агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно использовать в сочетании с одним или более чем одним из следующего: И:ФДЭ (иногда пишут как ФДЭ,) и И:НЭП. Подобным образом, этот агент может представлять собой одну единицу, которая способна проявлять два или более чем два из этих свойств. Альтернативно или дополнительно этот агент может представлять собой комбинацию агентов, которые способны проявлять одно или более чем одно из этих свойств. И:ИцАМФ и/или И:НМцАМФ В соответствии с настоящим изобретением авторы изобретения обнаружили, что РПВЖ возможно лечить и/или предупреждать, используя агент, который снижает и/или устраняет и/или маскирует и/или направляет в другую сторону и/или предотвращает нежелательный эффект ИцАМФ и/или НМцАМФ, направленный на цАМФ. Этот агент может даже восстанавливать уровни цАМФ, которые были снижены ИцАМФ и/или НМцАМФ. Для удобства авторы изобретения ссылаются на эти вещества как на И:ИцАМФ и/или И:НМцАМФ. Здесь И:ИцАМФ и И:НМцАМФ предотвращают или снижают негативное воздействие на уровни или активность цАМФ. Таким образом, в одном предпочтительном аспекте агент представляет собой И:ИцАМФ и/или И:НМцАМФ, причем НМцАМФ обладает нежелательным воздействием на цАМФ. АцАМФ В соответствии с настоящим изобретением авторы изобретения обнаружили, что один из важных случаев РПВЖ является следствием низких уровней или низкой активности цАМФ в женских гениталиях. Таким образом, агент может представлять собой ПР:АцАМФ. Таким образом, агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) предпочтительно может также быть способным действовать как А:АЦ, A:VIPr, A:VIPn, И:И:VIPr или И:И:VIPn, и/или его можно использовать в сочетании с одним или более чем одним из А:АЦ, A:VIPr, A:VIPn, И:И:VIPr или И:И:VIPn. Этот агент может представлять собой одну единицу, которая способна проявлять два или более чем два из этих свойств. Альтернативно или дополнительно этот агент может представлять собой комбинацию агентов, которые способны проявлять одно или более чем одно из этих свойств. ПР:АцАМФ В другом отношении дополнительная мишень может представлять собой компонент, который повышает уровень цАМФ. Следовательно, агент может также действовать как ПР:АЦ. Следовательно, например агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) может быть также способным действовать как ПР:АцАмф, А:АЦ, A:VIPr, A:VIPn, И:И:VIPr или И:И:VIPn, и/или его можно использовать в сочетании с одним или более чем одним агентом, который может представлять собой любой из: ПР:АцАМФ, А:АЦ, A:VIPr, A:VIPn, И:И:VIPr или И:И:VIPn. В качестве примера мишень может представлять собой сам по себе цАМФ, либо АЦ или VIP (либо их комбинации). Комбинация И:ИцАМФ, и/или И:МцАМФ, и/или ПР:АцАМФ В другом аспекте агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно использовать с комбинацией потенциаторов цАМФ. Например, агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно применять в комбинации с одним или более чем одним из И:ФДЭцАМФ И:ФДЭnцАМФ И:NPY И:NPY Yn И:НЭП ПР:АцАМФ А:АЦ- 14006254 Ингибитор Термин ингибитор, как он используется здесь в отношении агента по настоящему изобретению(то есть И:NPY), означает агент, который может снижать и/или устранять и/или маскировать и/или предотвращать нежелательное действие ИцАМФ и/или нежелательное действие МцАМФ, направленное на цАМФ. Активатор Термин активатор, как он используется здесь в отношении агента по настоящему изобретению(то есть И:NPY), означает агент, который может повышать и/или продуцировать и/или демаскировать и/или развивать и/или обеспечивать действие цАМФ и/или АцАМФ. Этот активатор может действовать как агонист. Другие активные компоненты В другом аспекте агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) может также находиться в комбинации с одним или более чем одним другим активным компонентом, таким как один или более чем один из агентов, способных потенцировать цГМФ. Аминокислотная последовательность Используемый здесь термин аминокислотная последовательность является синонимом термину полипептид и/или термину белок. В некоторых случаях термин аминокислотная последовательность является синонимом термину пептид. В некоторых случаях термин аминокислотная последовательность является синонимом термину белок. Аминокислотную последовательность можно получить, выделив ее из подходящего источника, либо ее можно получить синтетическим путем, либо ее можно получить путем использования методик рекомбинантных ДНК. Предложена также аминокислотная последовательность, которая способна действовать как мишень в анализе для идентификации одного или более чем одного агента и/или его производного, способного воздействовать на эту аминокислотную последовательность, чтобы потенцировать цАМФ для лечения РПВЖ. Нуклеотидная последовательность Используемый здесь термин нуклеотидная последовательность является синонимом термину полинуклеотид. Нуклеотидная последовательность может представлять собой ДНК или РНК либо геномного, либо синтетического, либо рекомбинантного происхождения. Нуклеотидная последовательность может быть двунитевой или однонитевой, представляя собой либо смысловую, либо антисмысловую нить, либо их сочетания. Для некоторых применений нуклеотидная последовательность предпочтительно представляет собой ДНК. Для некоторых применений нуклеотидную последовательность предпочтительно получают, используя методики рекомбинантных ДНК (например рекомбинантную ДНК). Для некоторых применений нуклеотидная последовательность предпочтительно представляет собой кДНК. Для некоторых применений нуклеотидная последовательность предпочтительно может быть такой же, как встречающаяся в природе форма для данного аспекта. Предложена также нуклеотидная последовательность, кодирующая вещество, способное действовать как мишень в анализе (таком как анализ двух гибридов дрожжей) для идентификации одного или более чем одного агента и/или его производного, способных воздействовать на эту аминокислотную последовательность, чтобы потенцировать цАМФ для лечения РПВЖ. Для специалистов очевидно, что многочисленные разнообразные нуклеотидные последовательности могут кодировать мишени в результате вырожденности генетического кода. Кроме того, очевидно,что специалисты могут, используя рутинные методики, делать нуклеотидные замены, которые существенно не влияют на активность, кодируемую этой нуклеотидной последовательностью по настоящему изобретению, чтобы отражать использование кодонов любого конкретного организма-хозяина, в котором экспрессируется мишень. Таким образом, термины вариант, гомолог или производное в отношении нуклеотидной последовательности, приведенной в прилагаемых перечнях последовательностей,включают в себя замену, вариацию, модификацию, замещение, делецию или добавление одной (или более чем одной) нуклеиновой кислоты из этой последовательности или к этой последовательности, приводящие к нуклеотидной последовательности, кодирующей функциональную мишень по настоящему изобретению (или даже агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY), если указанный агент содержит нуклеотидную последовательность или аминокислотную последовательность). Как указано выше, в отношении гомологии последовательности имеет место предпочтительно по меньшей мере 75%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, более предпочтительно по меньшей мере 90% гомология с последовательностями, представленными в перечне последовательностей. Более предпочтительно имеет место по меньшей мере 95%, более предпочтительно по меньшей мере 98% гомология. Сравнения нуклеотидной гомологии можно проводить, как описано выше. Предпочтительной- 15006254 программой сравнения последовательностей является программа GCG Wisconsin Bestfit, описанная выше. По умолчанию оценочная матрица имеет согласованное значение 10 для каждого идентичного нуклеотида и -9 для каждого несогласованного. Занижение для образования гэпа по умолчанию составляет-50, а занижение для удлинения гэпа по умолчанию составляет -3 для каждого нуклеотида. Предложены также нуклеотидные последовательности, которые способны избирательно гибридизоваться с представленными здесь последовательностями, либо с любым их вариантом, фрагментом или производным, либо с комплементом любого из вышеуказанного. Длина нуклеотидных последовательностей предпочтительно составляет по меньшей мере 15 нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере 20, 30, 40 или 50 нуклеотидов. Эти последовательности можно использовать в качестве зондов, таких как в диагностическом наборе. Варианты/гомологи/производные Кроме упомянутых здесь специфичных аминокислотных последовательностей и нуклеотидных последовательностей, предложено также применение их вариантов, гомологов и производных. Здесь термин гомология может приравниваться к термину идентичность. В контексте настоящего изобретения принято, что гомологичная последовательность включает в себя аминокислотную последовательность, которая может быть по меньшей мере на 75, 80 или 90% идентичной, предпочтительно по меньшей мере на 95 или 98% идентичной. В частности, обычно следует учитывать гомологию в отношении тех районов, которые известны как существенные для активности. Хотя гомологию можно также рассматривать с точки зрения подобия (то есть аминокислотных остатков,имеющих подобные химические свойства/функции), в контексте описанного здесь предпочтительно выражать гомологию в терминах идентичности последовательности. Сравнение гомологии можно проводить глазами или, более обычно, с помощью общедоступных программ сравнения последовательностей. Эти коммерчески доступные компьютерные программы могут вычислять % гомологии между двумя или более чем двумя последовательностями.% гомологии можно вычислять между прилегающими последовательностями, то есть одну последовательность выравнивают с другой последовательностью, и каждую аминокислоту в одной последовательности непосредственно сравнивают с соответствующей аминокислотой в другой последовательности по одному остатку. Это называется выравниванием без гэпов. Обычно такие выравнивания без гэпов осуществляют только в пределах относительно малого числа остатков. Хотя этот способ является очень простым и надежным, он не способен учесть то, что например в идентичной в другом отношении паре последовательностей одна инсерция или делеция приведет к тому,что следующие аминокислотные остатки не будут выровнены, что, возможно, приведет к большому снижению % гомологии при проведении глобального выравнивания. Следовательно, большинство способов сравнения последовательностей разработано таким образом, чтобы получать оптимальные выравнивания с учетом возможных инсерций и делеций без необоснованного занижения общей оценки гомологии. Это достигается путем вставки гэпов в выравнивание последовательностей таким образом, чтобы постараться максимизировать локальную гомологию. Однако при этих более сложных способах определяют штрафные очки гэпов для каждого гэпа,который встречается при выравнивании, таким образом, что для одного и того же числа идентичных аминокислот при выравнивании последовательности при как можно меньшим числе гэпов - что отражает более высокую степень родства между двумя сравниваемыми последовательностями - будет достигаться более высокая оценка, чем при большом числе гэпов. Обычно используют цены родства по гэпам (affine gap costs), которые назначают относительно высокую цену за существование гэпа и меньшие штрафные очки для каждого следующего остатка в гэпе. Эта система оценки гэпов наиболее широко используется. Высокие штрафные очки для гэпов, конечно, будут приводить к оптимизированному выравниванию при гэпах меньших размеров. Большинство программ выравнивания дают возможность модифицировать штрафные очки для гэпов. Однако при использовании такого программного обеспечения для сравнений последовательностей предпочтительно использовать значения по умолчанию. Например, при использовании пакета программ GCG Wisconsin Bestfit (см. ниже) штрафные очки для гэпа по умолчанию составляют -12 для гэпа и -4 для каждого удлинения. Вычисление максимума % гомологии, следовательно, прежде всего требует получения оптимального выравнивания с учетом штрафных очков для гэпов. Подходящей компьютерной программой для осуществления такого выравнивания является пакет программ GCG Wisconsin Bestfit (University of Wisconsin, U.S.A.; Devereux et al., 1984, Nucleic Acids Research 12:387). Примеры другого программного обеспечения, которое может осуществлять сравнение последовательностей, включают в себя, но не ограничены ими, пакет программ BLAST (см. Ausubel et al., 1999 ibid - Chapter 18), FASTA (Atschul et al.,1990, J. Mol. Biol., 403-410) и комплект программ сравнения GENEWORKS. Как BLAST, так и FASTA доступны как для автономного, так и для оперативного поиска (см. Ausubel et al., 1999 ibid, pages 7-58 to 7-60). Однако предпочтительно использовать программу GCG Wisconsin Bestfit. Также пригодна новая программа, названная BLAST 2 Sequences, для сравнения белковой и нуклеотидной последовательности- 16006254 Хотя конечный % гомологии можно измерить с точки зрения идентичности, сам по себе процесс выравнивания обычно не основан на сравнении пар по принципу все или ничего. Вместо этого, как правило, используют матрицу оценки со шкалой подобия, которая назначает очки для каждого попарного сравнения, основанного на химическом подобии или эволюционном расстоянии. Примером такой широко используемой матрицы является матрица BLOSUM62 - матрица по умолчанию для комплекта программ BLAST. В программах GCG Wisconsin, как правило, используется либо общедоступные значения по умолчанию, либо изготовленная на заказ сравнительная таблица символов, если она поставляется (дополнительные подробности см. в руководстве для пользователя). Предпочтительно использовать общедоступные значения по умолчанию для пакета программ GCG или матрицу по умолчанию BLOSUM62 в случае другого программного обеспечения. Как только программное обеспечение дало оптимальное выравнивание, возможно вычисление % гомологии, предпочтительно % идентичности последовательности. Обычно программное обеспечение производит это вычисление как часть сравнения последовательностей и дает количественный результат. В последовательностях могут также быть делеции, инсерции или замены аминокислотных остатков,которые приводят к молчащей замене и дают в результате функционально эквивалентное вещество. Преднамеренные аминокислотные замены можно получить на основе подобия полярности, заряда, растворимости, гидрофобности, гидрофильности и/или амфипатической природы этих остатков, пока сохраняется вторичная связывающая активность этого вещества. Например, отрицательно заряженные аминокислоты включают в себя аспарагиновую кислоту и глутаминовую кислоту; положительно заряженные аминокислоты включают в себя лизин и аргинин; и аминокислоты с незаряженными полярными главными группами, имеющие подобные значения гидрофильности, включают в себя лейцин, изолейцин,валин, глицин, аланин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, фенилаланин и тирозин. Консервативные замены можно делать, например, согласно приведенной ниже таблице. Аминокислоты в одном и том же блоке во второй графе и предпочтительно в одной и той же строке в третьей графе можно заменять друг на друга. Может иметь место гомологичная замена (термины "замена" и "замещение" оба используются здесь для обозначения обмена существующего аминокислотного остатка на альтернативный остаток), то есть замена подобного на подобный, например основного на основной, кислотного на кислотный, полярного на полярный и т.д. Может также иметь место негомологичная замена, то есть от одного класса остатков к другому, либо такая, в которую альтернативно вовлечено включение неприродных аминокислот, таких как орнитин (здесь на него ссылаются как на Z), диаминомасляная кислота орнитин (здесь на него ссылаются как на В), норлейцин орнитин (здесь на него ссылаются как на О), пириилаланин, тиенилаланин,нафтилаланин и фенилглицин. Замены могут быть также сделаны на неприродные аминокислоты, альфа и альфа-дизамещенные аминокислоты, N-алкиламинокислоты, молочную кислоту, галоидные производные природных аминокислот, такие как трифтортирозин, n-Cl-фенилаланин, n-Вr-фенилаланин, п-I-фенилаланин, L-аллилглицин, -аланин, Lаминомасляную кислоту, Lаминомасляную кислоту, Lаминоизомасляную кислоту, Lаминокапроновую кислоту, 7-аминогептановую кислоту, L-метионина сульфон, L-норлейцин, L-норвалин, п-нитро-L-фенилаланин, L-гидроксипролин, L-тиопролин, метильные производные фенилаланина (Рhе), такие как 4-метил-Рhе, пентаметил-Phe, L-Рhе (4-амино),L-Tyr (метил), L-Phe (4-изопропил), L-Tic (1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота), Lдиаминопропионовую кислоту и L-Phe (4-бензил). Обозначениеиспользовано в целях вышеприведенного обсуждения (относительно гомологичной и негомологичной замены), чтобы указать на гидрофобную природу этого производного, тогда как обозначениеиспользовано, чтобы указать на гидрофильную природу этого производного,указывает на амфипатические характеристики. Вариант аминокислотных последовательностей может включать в себя подходящие спейсерные группы, которые можно встраивать между любыми двумя аминокислотными остатками последовательности, в том числе алкильные группы, такие как метильная, этильная или пропильная группы, в дополнение к аминокислотам-спейсерам, таким как остатки глицина или -аланина. Следующая форма вариации, в которую вовлечено присутствие одного или более чем одного из аминокислотных остатков в пептоидной форме, должна быть хорошо известна специалистам в данной области. Во избежание сомнений пептоидная форма используется для ссылки на вариант аминокислотных остатков, где группазаместитель -углерода находится скорее на атоме азота этого остатка, а не на -углероде. Способы по- 17006254 лучения пептидов в пептоидной форме известны в данной области (например, Simon RJ et al., PNAS(1992) 89(20), 9367-9371, и Horwell DC, Trends Biotechnol. (1995) 13(4), 132-134). Гибридизация Предложено также использование последовательностей, которые могут гибридизоваться с представленными здесь последовательностями мишеней, так, как будто агент представляет собой антисмысловую последовательность. Термин гибридизация, как он используется здесь, должен включать в себя процесс, в результате которого нить нуклеиновой кислоты соединяется с комплементарной нитью посредством спаривания оснований, а также процесс амплификации, который происходит при технологиях полимеразной цепной реакции (ПЦР). Нуклеотидные последовательности, способные избирательно гибридизоваться с представленными здесь нуклеотидными последовательностями или с их комплементом, должны быть, как правило, по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 85 или 90% и более предпочтительно по меньшей мере на 95 или 98% гомологичными соответствующим представленным здесь комплементарным нуклеотидным последовательностям на протяжении района по меньшей мере 20, предпочтительно по меньшей мере 25 или 30, например по меньшей мере 40, 60, 100 или более смежных нуклеотидов. Предпочтительные нуклеотидные последовательности будут содержать районы, гомологичные нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO 2 перечней описанных здесь последовательностей, предпочтительно по меньшей мере на 80 или 90%, и более предпочтительно по меньшей мере на 95% гомологичные нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO 2 перечней последовательностей, описанных здесь. Термин избирательно гибридизующийся означает, что нуклеотидную последовательность, когда ее применяют в качестве зонда, используют в условиях, при которых обнаруживается, что нуклеотидная последовательность-мишень гибридизуется с этим зондом на уровне, значительно превышающим фон. Фоновая гибридизация может происходить в связи с присутствием других нуклеотидных последовательностей, например в кДНК или геномной ДНК библиотеке, которую подвергают скринингу. В этом случае под фоном подразумевают уровень сигнала, генерируемого взаимодействием между зондом и неспецифическим ДНК-членом библиотеки, который является менее чем в 10 раз, предпочтительно менее чем в 100 раз интенсивным, чем при специфическом взаимодействии, наблюдаемом с ДНК-мишенью. Интенсивность взаимодействия можно измерить, например, посредством радиоактивного мечения зонда, например 32P. Условия гибридизации основаны на температуре плавления (Тпл) комплекса связывания нуклеиновых кислот (Berger and Kimmel, 1987, Guide to Molecular Cloning techniques, Methods in Enzymology, Vol 152, Academic Press, San Diego CA), и возлагают определенную строгость, как объяснено ниже. Максимальная строгость обычно создается при примерно Тпл -5 С (на 5 С ниже Тпл зонда); высокая строгость - при температуре примерно на 5-10 С ниже Тпл; промежуточная строгость - при температуре примерно на 10-20 С ниже Тпл; и низкая строгость - при температуре примерно на 20-25 С ниже Тпл. Как известно специалистам в данной области, гибридизацию максимальной строгости можно использовать для идентификации или обнаружения идентичных нуклеотидных последовательностей, тогда как промежуточную (или низкую) строгость гибридизации можно использовать для идентификации или обнаружения подобных или родственных полинуклеотидных последовательностей. В предпочтительном аспекте предложены также нуклеотидные последовательности, которые могут гибридизоваться с описанной здесь нуклеотидной последовательностью в строгих условиях (например 65 С и 0,1xSSC (1xSSC = 0,15M NaCl, 0,015M Nа 3 цитрат, рН 7,0). Если описанная здесь нуклеотидная последовательность является двунитевой, обе нити этого дуплекса либо индивидуально, либо в сочетании включены. Если нуклеотидная последовательность является однонитевой, комплементарная последовательность этой нуклеотидной последовательности также включены. Нуклеотидные последовательности, которые не являются на 100% гомологичными описанным здесь последовательностям, могут быть получены рядом способов. Другие варианты описанных здесь последовательностей могут быть получены, например, путем зондирования ДНК библиотек, созданных из ряда источников. Кроме того, могут быть получены другие вирусные/бактериальные или клеточные гомологи, в частности клеточные гомологи, обнаруживаемые в клетках млекопитающих (например в клетках крысы, мыши, быка и приматов), и такие гомологи и их фрагменты, как правило, будут способны избирательно гибридизоваться с последовательностями, представленными здесь в перечне последовательностей. Такие последовательности могут быть получены путем зондирования ДНК библиотек,созданных из других видов животных, либо геномных ДНК библиотек из других видов животных, и зондирования таких библиотек зондами, полностью или частично содержащими представленную здесь нуклеотидную последовательность, в условиях строгости от средней до высокой. Подобные соображения применяют к получению видовых гомологов и аллельных вариантов аминокислотных и/или нуклеотидных последовательностей по настоящему изобретению. Варианты и штаммовые/видовые гомологи также могут быть получены с использованием вырожденной ПЦР, в которой будут использованы праймеры, сконструированные к последовательностям- 18006254 мишеням в пределах вариантов и гомологов, кодирующих консервативные аминокислотные последовательности в пределах описанных здесь последовательностей. Консервативные последовательности можно предсказать, например, путем выравнивания аминокислотных последовательностей из нескольких вариантов/гомологов. Выравнивания последовательностей можно осуществлять, используя компьютерное программное обеспечение, известное в данной области. Например, широко используется программаGCG Wisconsin PileUp. Праймеры, используемые в вырожденной ПЦР, будут содержать одно или более чем одно вырожденное положение, и их будут использовать при условиях более низкой строгости, чем условия, которые используют для клонирующих последовательностей с праймерами единственной последовательности против известных последовательностей. Альтернативно, такие нуклеотидные последовательности могут быть получены путем сайтнаправленного мутагенеза охарактеризованных последовательностей, таких как нуклеотидная последовательность, представленная на SEQ ID NO 2 перечней последовательностей. Это может быть полезным,если, например, молчащие замены кодонов требуются для последовательностей, чтобы оптимизировать предпочтительность кодонов для конкретной клетки-хозяина, в которой экспрессируется эта нуклеотидная последовательность. Другие изменения последовательности могут быть желательны, чтобы ввести сайты узнавания ферментов рестрикции, или чтобы изменить активность белка, кодируемого этими нуклеотидными последовательностями. Нуклеотидные последовательности можно использовать для получения праймера, например ПЦР праймера, праймера для альтернативной реакции амплификации, зонда, например меченого выявляющей меткой традиционными способами с использованием радиоактивных или нерадиоактивных меток, или эти нуклеотидные последовательности можно клонировать в векторы. Длина таких праймеров, зондов и других фрагментов должна составлять по меньшей мере 15, предпочтительно по меньшей мере 20, например по меньшей мере 25, 30 или 40 нуклеотидов, и они также охвачены термином нуклеотидная последовательность, как он используется здесь. Нуклеотидные последовательности, такие как ДНК полинуклеотиды и зонды, можно получить рекомбинантным, синтетическим путем или любыми способами, доступными специалистам в данной области. Их можно также клонировать по стандартным методикам. Как правило, праймеры получают синтетическими способами, включающими в себя поэтапное производство желаемой последовательности нуклеиновой кислоты по одному нуклеотиду за раз. Методики для выполнения этого с использованием автоматизированных технологий, общедоступны в данной области техники. Более длинные нуклеотидные последовательности, как правило, получают, используя рекомбинантные способы, например используя ПЦР (полимеразная цепная реакция) методики клонирования. Такие способы включают в себя создание пары праймеров (например примерно от 15 до 30 нуклеотидов), фланкирующих район последовательности-мишени, который желательно клонировать, приведение этих праймеров в контакт с мРНК или кДНК, полученной из клетки животного или человека, проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) в условиях, которые приводят к амплификации желаемого района,выделение амплифицированного фрагмента (например путем очистки реакционной смеси на агарозном геле) и выделение амплифицированной ДНК. Праймеры могут быть сконструированы таким образом,чтобы они содержали подходящие сайты узнавания ферментов рестрикции, так чтобы амплифицированную ДНК можно было клонировать в подходящий вектор клонирования. Вследствие свойственной генетическому коду вырожденности для клонирования и экспрессии последовательностей-мишеней можно использовать другие последовательности ДНК, которые кодируют по существу такую же или функционально эквивалентную аминокислотную последовательность. Как известно специалистам в данной области, для некоторых систем экспрессии может быть благоприятным получать последовательности-мишени с кодонами, не встречающимися в природе. Кодоны, предпочтительные для конкретного прокариотического или эукариотического хозяина (Murray E et al. (1989) NucAcids Res 17: 477-508), можно выбрать, например, чтобы повысить скорость экспрессии мишени или чтобы получить рекомбинантные РНК транскрипты, имеющие желаемые свойства, такие как более длительный период полураспада, чем у транскриптов, продуцируемых с последовательности, встречающейся в природе. Векторы экспрессии Нуклеотидная последовательность для использования в качестве мишени или для экспрессии мишени может быть включена в рекомбинантный вектор замещения. Этот вектор можно использовать для репликации нуклеотидной последовательности в совместимой клетке-хозяине и/или ее экспрессии из совместимой клетки-хозяина. Экспрессию можно регулировать, используя регуляторные последовательности, которые включают в себя промоторы/энхансеры и другие сигналы регуляции экспрессии. Можно использовать прокариотические промоторы и промоторы, функциональные в эукариотических клетках. Можно использовать тканеспецифичные или стимул-специфичные промоторы. Можно также использовать химерные промоторы, содержащие элементы последовательности от двух или более чем двух различных промоторов, описанных выше.- 19006254 Белок, продуцируемый рекомбинантной клеткой-хозяином посредством экспрессии нуклеотидной последовательности, может быть секретируемым или может содержаться внутриклеточно в зависимости от последовательности и/или от используемого вектора. Кодирующие последовательности могут быть сконструированы с сигнальными последовательностями, которые направляют секрецию вещества, кодируемого этими последовательностями, через мембрану конкретной прокариотической или эукариотической клетки. Слитые белки Аминокислотная последовательность-мишень может быть получена в виде слитого белка, например чтобы способствовать его выделению и очистке. Примеры белков-партнеров слияния включают в себя глутатион-S-трансферазу (GST), 6xHis, GAL4 (ДНК-связывающий домен и/или домен транскрипционной активации) и -галактозидазу. Может быть также удобным включить сайт протеолитического расщепления между белком-партнером слияния и интересующей белковой последовательностью, чтобы дать возможность удалить последовательности белка слияния. Предпочтительно белок слияния не скрывает активность мишени. Слитый белок может содержать антиген или антигенный детерминант, слитый с веществом, описанным здесь. В данном воплощении этот слитый белок может представлять собой не встречающийся в природе слитый белок, содержащий вещество, которое может действовать в качестве адъюванта в смысле обеспечения общей стимуляции иммунной системы. Антиген или антигенный детерминант можно присоединить либо к амино, либо к карбокси концу вещества. В другом воплощении аминокислотную последовательность можно лигировать с гетерологичной последовательностью, чтобы кодировать слитый белок. Например, для скрининга пептидных библиотек на агенты, способные влиять на активность вещества, может быть полезным кодировать химерное вещество, экспрессирующее гетерологичный эпитоп, который распознается коммерчески доступным антителом. Антитела Предложено также антитело. Дополнительно или альтернативно мишень может представлять собой антитело. Дополнительно или альтернативно средства для обнаружения мишени могут представлять собой антитело. Антитела могут быть получены стандартными способами, таким как иммунизация веществом по изобретению или использование библиотеки фагового дисплея. Для целей данного изобретения термин антитело, если не указано другое, включает в себя, но не ограничивается ими, поликлональное, моноклональное, химерное, одноцепочечное, Fab фрагменты,фрагменты, продуцируемые библиотекой Fab экспрессии, а также их миметики. Такие фрагменты включают в себя фрагменты целостных антител, которые сохраняют их связывающую активность по отношению к веществу-мишени, Fv, F(ab') и F(ab')2 фрагменты, а также одноцепочечные антитела (scFv), слитые белки и другие синтетические белки, которые содержат антиген-связывающий сайт антитела. Кроме того, антитела и их фрагменты могут представлять собой гуманизированные антитела. Нейтрализующие антитела, то есть те, которые ингибируют биологическую активность веществ полипептидов, являются особенно предпочтительными для диагностики и лечения. Если желательными являются поликлональные антитела, выбранное животное (например мышь,кролика, козу, лошадь и т.д.) подвергают иммунизации иммуногенным полипептидом, несущим эпитоп(эпитопы), получаемый от идентифицированного агента и/или описанного здесь вещества. В зависимости от видов-хозяев для усиления иммунологического ответа можно использовать различные адъюванты. Такие адъюванты включают в себя, но не ограничены ими, адъювант Фрейнда, минеральные гели, такие как гидроксид алюминия, и поверхностно-активные вещества, такие как лизолецитин, плюроновые полиолы, полианионы, пептиды, масляные эмульсии, гемоцианин из блюдечка и динитрофенол. BCG (Bacilli Calmette-Guerin) и Corynebacterium parvum являются потенциально полезными адъювантами человека, которые можно применять, если очищенное вещество полипептид вводят индивидуумам с иммунологическим риском, в целях стимуляции системной защиты. Сыворотку от иммунизированного животного собирают и обрабатывают по известным методикам. Если сыворотка, содержащая поликлональные антитела к эпитопу, получаемому от идентифицированного агента и/или вещества по настоящему изобретению, содержит антитела к другим агентам, эти поликлональные антитела можно очистить с помощью иммуноаффинной хроматографии. Методики получения и обработки поликлональных антисывороток известны в данной области техники. Чтобы такие антитела можно было изготовить, предложены также полипептиды или их фрагменты, гаптенизированные с другим полипептидом, для использования в качестве иммуногенов у животных или людей. Специалист в данной области также может легко получить моноклональные антитела, направленные против эпитопов, получаемых от идентифицированного агента и/или вещества, описанного здесь. Общая методология изготовления моноклональных антител с помощью гибридом хорошо известна. Бессмертные антитело-продуцирующие клеточные линии можно создать с помощью клеточного слияния, а также с помощью других методик, таких как прямая трансформация В лимфоцитов онкогенной ДНК или трансфекция вирусом Эпштейна-Барра. Группы моноклональных антител, продуцируемых против сфе- 20006254 рических эпитопов, можно подвергать скринингу на различные свойства; то есть на изотип и аффинность к эпитопу. Моноклональные антитела к веществу и/или идентифицированному агенту можно получить, используя любую методику, которая разработана для продуцирования молекул антител непрерывными клеточными линиями в культуре. Они включают в себя, но не ограничены ими, гибридомную методику,впервые описанную Koehler and Milstein (1975 Nature 256: 495-497), методику В-клеточных человеческих гибридом (Kosbor et al. (1983) Immunol. Today 4:72; Cote et al (1983) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80: 20262030) и методику EBV-гибридом (Cole et al. (1985) Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R LissInc., pp. 77-96). Кроме того, можно использовать методики, разработанные для продуцирования химерных антител, сплайсинг генов мышиных антител с генами человеческих антител с получением молекулы с подходящей антигенной специфичностью и биологический активностью (Morrison et al (1984) Proc.Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855; Neuberger et al (1984) Nature 312: 604-608; Takeda et al (1985) Nature 314: 452-454). Альтернативно, методики, описанные для получения одноцепочечных антител (патент США 4946779) можно адаптировать для получения специфичных к веществу одноцепочечных антител. Антитела, как моноклональные, так и поликлональные, которые направлены против эпитопов, доступных от идентифицированного агента и/или вещества, особенно полезны в диагностике, а те, которые являются нейтрализующими, полезны при пассивной иммунотерапии. Моноклональные антитела, в частности, можно использовать, чтобы вызвать противоидиотипические антитела. Противоидиотипические антитела представляют собой иммуноглобулины, которые несут внутренний образ вещества и/или агента, против которого желательна защита. Методики создания противоидиотипических антител известны в данной области техники. Эти противоидиотипические антитела могут быть также полезны в терапии. Антитела можно также получить, индуцируя их in vivo продуцирование в популяции лимфоцитов,или с помощью скрининга библиотек рекомбинантных иммуноглобулинов или групп высокоспецифичных связывающих реагентов, как описано в Orlandi et al (1989, Proc. Natl. Acad. Sci. 86: 3833-3837) иWinter G. And Milstein C. (1991; Nature 319: 293-299). Можно также создать фрагменты антител, которые содержат специфичные сайты связывания для вещества. Например, такие фрагменты включают в себя, но не ограничены ими, F(ab')2 фрагменты, которые можно получить с помощью ферментативного гидролиза молекулы антитела пепсином, и Fab фрагменты, которые можно создать с помощью удаления дисульфидных мостиков F(ab')2 фрагментов. Альтернативно можно сконструировать библиотеки Fab экспрессии, что позволяет быстро и легко идентифицировать моноклональные Fab фрагменты с желаемой специфичностью (HuseWD et аl (1989) Science 256:1275-1281). Репортеры В аналитических способах (а также скринингах), описанных здесь, можно использовать широкое разнообразие репортеров, причем предпочтительные репортеры обеспечивают удобно обнаруживаемые сигналы (например при спектроскопии). В качестве примера репортерный ген может кодировать фермент, который катализирует реакцию, изменяющую свойства поглощения света. Примеры репортерных молекул включают в себя, но не ограничены ими, -галактозидазу, инвертазу, зеленый флуоресцентный белок, люциферазу, хлорамфеникол, ацетилтрансферазу, -глюкуронидазу,экзо-глюканазу и глюкоамилазу. Альтернативно, меченые радиоактивной меткой или меченые флуоресцентной меткой нуклеотиды можно включать во вновь образующиеся транскрипты, которые затем идентифицируют при связывании с олигонуклеотидными зондами. В одном предпочтительном воплощении продуцирование репортерной молекулы измеряют по ферментативной активности продукта репортерного гена, такого как -галактозидаза. В данной области техники известно множество протоколов для обнаружения и измерения экспрессии мишени, например с использованием либо поликлональных, либо моноклональных антител, специфичных к этому белку. Примеры включают в себя иммуноферментный твердофазный анализ (ELISA),радиоиммунологический анализ (RIA) и активируемый флуоресценцией анализ клеток (FACS). Предпочтительным является двухсайтовый иммунологический анализ на моноклональной основе, использующий моноклональные антитела, реактивные к двум не интерферирующим эпитопам на полипептидах, но можно также применять конкурентный анализ связывания. Эти и другие анализы описаны, среди прочего, в Hampton R et al. (1990, Serological Methods, A Laboratory Manual, APS Press, St Paul MN) и MaddoxDE et al. (1983, J. Exp. Med. 15,8: 121 1). Широкое разнообразие меток и методик конъюгации известно специалистам в данной области, и их можно использовать в различных анализах нуклеиновых кислот и аминокислот. Способы получения меченых зондов гибридизации или ПЦР для обнаружения полинуклеотидных последовательностеймишеней включают в себя олигомечение, ник-трансляцию, концевое мечение или ПЦР амплификацию с использованием меченого нуклеотида. Альтернативно, кодирующую последовательность или любую ее часть можно клонировать в вектор для получения мРНК зонда. Такие вектора известны в данной области- 21006254 техники, коммерчески доступны, и их можно использовать для синтеза РНК зондов in vitro добавлением подходящей РНК полимеразы, такой как Т 7, Т 3 и SP6, и меченых нуклеотидов. Ряд фирм, таких как Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ), Promega (Madison, WI) и US BiochemicalCorp (Cleveland, ОН) поставляют коммерческие наборы и протоколы для этих методик. Подходящие репортерные молекулы или метки включают в себя радионуклиды, ферменты, флуоресцентные, хемилюминесцентные или хромогенные агенты, а также субстраты, кофакторы, ингибиторы, магнитные частицы и тому подобное. Патенты, в которых имеются указания по использованию таких меток, включают в себяUS-A-3817837; US-A-3850752; US-A-3939350; US-A-3996345; US-A-4277437; US-A-4275149 и US-A4366241. Рекомбинантные иммуноглобулины можно также получить, как показано в US-A-4816567. Дополнительные способы количественного определения экспрессии конкретной молекулы включают в себя радиоактивно-меченые (Melby PC et al. 1993 J. Immunol. Methods 159: 235-44) или биотинилированные (Duplaa С et al. 1993 Anal. Biochem. 229-36) нуклеотиды, коамплификацию контрольной нуклеиновой кислоты и стандартные кривые, на которые интерполируют экспериментальные результаты. Количественное определение множественных образцов можно ускорить с помощью проведения анализа в формате ELISA, где интересующий олигомер представлен в различных разведениях, и спектрофотометрический или колориметрический ответ дает быстрое количественное определение. Хотя присутствие/отсутствие экспрессии маркерного гена позволяет предположить, что интересующий ген также присутствует, его присутствие и экспрессию необходимо подтвердить. Например,если нуклеотидная последовательность встроена внутри последовательности маркерного гена, рекомбинантные клетки, содержащие эту последовательность, можно идентифицировать по отсутствию функции маркерного гена. Альтернативно, маркерный ген можно расположить в тандеме с кодирующей последовательностью-мишенью под контролем одного промотора. Экспрессия маркерного гена в ответ на индукцию или отбор обычно указывает также на экспрессию мишени. Альтернативно, клетки-хозяева, которые содержат кодирующую последовательность для мишени и экспрессируют кодирующие районы этой мишени, можно идентифицировать с помощью разнообразных методик, известных специалистам в данной области. Эти методики включают в себя, но не ограничены ими, ДНК-ДНК или ДНК-РНК гибридизацию, а также методики биологического или иммунологического теста на белок, которые включают в себя технологии на основе мембран, на основе растворов или на основе гранул для обнаружения и/или количественного определения нуклеиновой кислоты или белка. Общие анализы на активность/уровни цАМФ Способность тестируемого агента потенцировать цАМФ можно определить путем измерения соответствующего повышения или снижения уровня мишени. Дополнительно или альтернативно, способность тестируемого агента потенцировать цАМФ можно определить путем измерения соответствующего повышения уровней цАМФ. Например, можно адаптировать методику Smith et al 1993 (Appl. Biochem.Biotechnol. 41: 189-218). Имеются также коммерчески доступные наборы иммунологического анализа для измерения цАМФ (например Amersham International, Arlington Heights, IL и DuPont, Boston, MA). Подробности по подходящему анализу цАМФ приведены в Экспериментальном Разделе. Скрининги Любую одну или более чем одну подходящую мишень, такую как аминокислотная последовательность или нуклеотидная последовательность, можно использовать для идентификации ПцАМФ в любом из разнообразных методик скрининга лекарств. Мишень, используемая в таком тесте, может свободно находиться в растворе, может фиксироваться на твердом носителе, ее может нести клеточная поверхность,либо она может быть локализована внутри клетки. Эта мишень может даже находиться внутри животной модели, где указанная мишень может представлять собой экзогенную мишень или введенную мишень. Эта животная модель обычно является не человеческой животной моделью. Отмена активности мишени или образование комплексов связывания между мишенью и тестируемым агентом могут быть измерены. Методики скрининга лекарств могут быть основаны на способе, описанном Geysen в Европейской патентной заявке 84/03564, опубликованной 13 сентября 1984. В кратком изложении, большие количества различных небольших пептидных тестируемые соединений синтезируют на твердом субстрате, таком как пластмассовые стержни или какая-либо другая поверхность. Эти пептидные тестируемые соединения подвергают взаимодействию с подходящей мишенью или ее фрагментом и промывают. Затем определяют связанные вещества, например соответствующим образом адаптированными способами, общеизвестными в данной области техники. Очищенную мишень также можно нанести непосредственно на планшеты для использования в методиках скрининга лекарств. Альтернативно, для улавливания пептида и иммобилизации его на твердом носителе можно использовать не нейтрализующие антитела. Предложено также использование конкурентных скрининговых анализов лекарственных средств,при которых нейтрализующие антитела, способные связываться с мишенью, специфично конкурируют с тестируемым соединением за связывание с мишенью. Другая методика скрининга разработана для скрининга с высокой пропускной способностью (HTS) агентов, обладающих подходящей связывающей аффинностью к веществам, и основана на способе, подробно изложенном в WO 84/03564.- 22006254 Ожидается, что эти способы анализа, описанные здесь, подходят как для малого, так и для широкомасштабного скрининга тестируемых соединений, а также в количественных анализах. Таким образом, предложен также способ идентификации агентов, которые потенцируют цАМФ,при котором подходящую мишень приводят в контакт с агентом, а затем измеряют активность и/или уровни цАМФ. Предложен способ идентификации агентов, которые избирательно потенцируют цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, при котором приводят в контакт подходящую мишень из сексуальных гениталий женщины, а затем измеряют активность и/или уровни цАМФ. Предложен способ идентификации агентов, которые потенцируют цАМФ, при котором подходящую мишень приводят в контакт с агентом, а затем измеряют активность и/или уровни этой мишени. Предложен также способ идентификации агентов, которые избирательно потенцируют цАМФ в сексуальных гениталиях женщины, при котором приводят в контакт подходящую мишень из сексуальных гениталий женщины, а затем измеряют активность и/или уровни этой мишени. В предпочтительном аспекте предложенный скрининг включает в себя по меньшей мере следующие стадии (которые не обязательно должны быть в таком же порядке последовательности), на которых:(а) осуществляют in vitro скрининг, чтобы определить, имеет ли агент-кандидат соответствующую активность (например антагонизм NPY); (б) осуществляют один или более чем один скрининг избирательности, чтобы определить избирательность указанного агента-кандидата (например увидеть, является ли указанный агент также ингибитором АПФ, например используя протокол анализа, представленного здесь); и (в) осуществляют in vivo скрининг с указанным агентом-кандидатом (например используя функциональную животную модель). Обычно, если указанный агент-кандидат проходит скрининг (а) и скрининг (б), тогда осуществляют скрининг (в). Диагностика Согласно настоящему изобретению предложен также диагностический набор для обнаружения предрасположенности к РПВЖ. В этом отношении этот набор содержит объект, который способен указать на присутствие одной или более чем одной - или также отсутствие одной или более чем одной - из мишеней в тестируемом образце. Предпочтительно этот тестируемый образец получают из сексуальных гениталий женщины или из их секрета. Например, диагностическая композиция может содержать любую нуклеотидную последовательность, упомянутую здесь, или ее вариант, гомолог, фрагмент или производное, либо последовательность,способную гибридизоваться с любой полноразмерной или частичной последовательностью. Чтобы обеспечить основу для диагностики заболевания, следует установить нормальные или стандартные значения для мишени. Это можно осуществить путем объединения жидкостей организма или клеточных экстрактов, взятых у нормальных субъектов, либо у животного, либо у человека, с антителом к мишени в условиях, подходящих для образования комплекса, которые общеизвестны в данной области. Количество стандартного образования комплекса можно подсчитать путем сравнения его с сериями разведений положительных контролей, где известное количество антитела сочетается с известными концентрациями очищенной мишени. Затем стандартные значения, полученные с нормальными образцами,можно сравнить со значениями, полученными с образцами, взятыми у субъектов, потенциально пораженных РПВЖ. По отклонению между стандартным значением и значением у субъекта устанавливают наличие болезненного состояния. Сама мишень или любая ее часть может обеспечить базу для диагностики и/или терапевтического соединения. В целях диагностики можно использовать полинуклеотидные последовательности мишени,чтобы обнаружить и количественно определить генную экспрессию при состояниях, расстройствах или заболеваниях, в которые может быть вовлечено РПВЖ. Полинуклеотидную последовательность, кодирующую мишень, можно использовать для диагностики РПВЖ в результате экспрессии этой мишени. Например, для обнаружения аномалии в экспрессии мишени полинуклеотидные последовательности, кодирующие мишень, можно использовать в гибридизации или ПЦР анализах тканей из биопсий или аутопсий, либо биологических жидкостей. Виды таких качественных или количественных способов могут включать в себя Саузерн- или Нозерн-анализ, дотблот или другие технологии на мембранной основе; ПЦР технологии; технологии погружения стержня,штыря или гранулы; и ELISA или другие технологии формата множественных образцов. Все эти технологии хорошо известны в данной области техники и фактически составляют основу многих коммерчески доступных диагностических наборов. Такие анализы могут быть приспособлены для оценки эффективности конкретного режима терапевтического лечения и могут быть использованы в исследованиях животных, в клинических испытаниях или в мониторинге лечения индивидуального пациента. Чтобы обеспечить базу для диагностики заболевания, следует установить нормальный или стандартный профиль для экспрессии мишени. Это осуществляют путем объединения жидкостей организма или клеточных экстрактов, взятых у нормальных субъектов, либо у животного, либо у человека, с мишенью или ее частью, в условиях, подходящих для гибридизации или амплификации. Стандартную гибридизацию можно определить количественно путем сравнения значений, полученных для нормальных субъектов, с серией разведений положительных кон- 23006254 тролей, выполняемой в том же эксперименте, где используют известное количество очищенной мишени. Стандартные значения, полученные с нормальными образцами, можно сравнить со значениями, полученными с образцами от субъектов, потенциально пораженных расстройством или заболеванием, связанным с экспрессией кодирующей последовательности мишени. По отклонению между стандартным значением и значением субъекта устанавливают наличие болезненного состояния. Если заболевание установлено, вводят существующий терапевтический агент, и можно построить терапевтические профили или значения. Наконец, этот анализ можно повторять на регулярной основе, чтобы оценить, прогрессируют эти значения или возвращаются к нормальному или стандартному паттерну. Успешные терапевтические профили можно использовать для выявления эффективности лечения за период несколько дней или несколько месяцев. Таким образом, предложено использование полипептида-мишени или его варианта, гомолога,фрагмента или производного, для продуцирования антител против мишени, которые можно использовать, например в диагностических целях, для обнаружения и количественного определения уровней мишени при состояниях РПВЖ. Предложены также диагностические анализы и наборы для обнаружения мишени в клетках и тканях, содержащие очищенную мишень, которую можно использовать в качестве положительного контроля, и антитела против мишени. Такие антитела можно использовать в основанных на растворах, основанных на мембранах или основанных на тканях технологиях для обнаружения любого болезненного состояния, либо состояния, относящегося к экспрессии белка-мишени или экспрессии его делеций, либо его варианта, гомолога, фрагмента или производного. Способы анализа Диагностические композиции и/или способы и/или наборы можно использовать в следующих методиках, которые включают в себя, но не ограничены ими, конкурентные и не конкурентные анализы, радиоиммунологический анализ, биолюминесцентные и хемилюминесцентные анализы, флюориметрические анализы, сэндвич-анализы, иммунорадиометрические анализы, дот-блот анализы, ферментные анализы, включая ELISA, микротитровальные планшеты, покрытые антителами полоски или стержни для погружения для быстрого мониторинга мочи или крови, иммуногистохимию и иммуноцитохимию. Например, набор для иммуногистохимии можно также использовать для локализации активностиNPY в ткани гениталий. Этот набор для иммуногистохимии дает возможность определить локализациюNPY в срезах ткани и культивируемых клетках с использованием как световой, так и электронной микроскопии, которую можно применять как в исследовательских, так и в клинических целях. Такая информация может быть полезной в диагностических и, возможно, в терапевтических целях для обнаружения и/или предупреждения и/или лечения ЖСД, такой как РПВЖ. Для каждого набора устанавливают диапазон, чувствительность, точность, надежность, специфичность и воспроизводимость анализа. Вариации внутри анализа и между анализами устанавливают в точках 20, 50 и 80% на стандартных кривых размера или активности. Зонды Предложены также зонды гибридизации нуклеиновых кислот или ПЦР, которые способны обнаруживать (в частности зонды, которые способны избирательно обнаруживать) полинуклеотидные последовательности, включая геномные последовательности, кодирующие кодирующий район мишени, или близкородственные молекулы, такие как аллели. Специфичность зонда, то есть его происхождение из высоко консервативного, консервативного или неконсервативного района или домена, и строгость гибридизации или амплификации (высокая, промежуточная или низкая), должна определять, идентифицирует ли этот зонд только встречающуюся в природе кодирующую последовательность мишени или родственные последовательности. Зонды для обнаружения родственных последовательностей нуклеиновых кислот выбирают из консервативных или высоко консервативных нуклеотидных районов членов семейства мишени, и такие зонды можно использовать в пуле вырожденных зондов. Для обнаружения идентичных последовательностей нуклеиновых кислот или там, где желательна максимальная специфичность, зонды нуклеиновых кислот выбирают из неконсервативных нуклеотидных районов или уникальных районов полинуклеотидов мишени. Используемый здесь термин неконсервативный нуклеотидный район относится к нуклеотидному району, который является уникальным для кодирующей последовательности мишени, описанной здесь, и не встречается у родственных членов этого семейства. ПЦР, как описано в US-A-4683195, US-A-4800195 и US-A-4965188, предполагает дополнительные применения для олигонуклеотидов, основанных на последовательностях мишени. Такие олигомеры, как правило, синтезируют химически, но их можно сконструировать ферментативным путем или продуцировать из рекомбинантного источника. Олигомеры, как правило, содержат две нуклеотидные последовательности, одну со смысловой ориентацией (5'-3') и одну с антисмысловой ориентацией (3'-5'), применяемые в оптимизированных условиях для идентификации конкретного гена или состояния. Те же два олигомера, встроенные наборы олигомеров или даже вырожденный пул олигомеров можно применять в менее строгих условиях для обнаружения и/или количественного определения близкородственных ДНК или РНК последовательностей.- 24006254 Последовательность нуклеиновой кислоты для мишени можно также использовать, чтобы конструировать зонды гибридизации, как описано ранее, для картирования эндогенной геномной последовательности. Эту последовательность можно картировать на конкретной хромосоме или в специфичном районе хромосомы, используя общеизвестные методики. Они включают в себя in situ гибридизацию с мазками хромосом (Verma et al. (1988) Human Chromosomes: A Manual of Basic Techniques, PergamonPress, New York City), хромосомами, механически отобранными с помощью проточной цитометрии, или искусственными хромосомными конструкциями, такими как YAC, бактериальные искусственные хромосомы (ВАС), бактериальные PI конструкции или библиотеки кДНК отдельных хромосом.In situ гибридизация хромосомных препаратов и методики физического картирования, такие как анализ сцепления с использованием установленных хромосомных маркеров, бесценны в развитии генетических карт. Примеры генетических карт можно найти в Science 1995, 270:410f и 1994; 265:1981f. Часто помещение гена на хромосому другого вида млекопитающих может выявить сопряженные маркеры,даже если номер или плечо конкретной хромосомы человека неизвестны. Новые последовательности можно привязать к плечам хромосом или их участкам с помощью физического картирования. Оно обеспечивает ценную информацию для исследователей, занимающихся поиском генов заболевания, используя позиционное клонирование или другие методики исследования гена. После грубой локализации заболевания или синдрома посредством генетического сцепления в конкретном районе генома, любые последовательности, картированные в этой области, могут представлять собой сопряженные или регуляторные гены для дальнейшего исследования. Нуклеотидную последовательность, как она описана здесь,можно также использовать для обнаружения различия в хромосомной локализации вследствие транслокации, инверсии и т.д. между нормальным индивидуумом, носителем и больным. Клетки-хозяева Используемый здесь термин клетка-хозяин включает в себя любую клетку, которая может содержать мишень для агента. Таким образом, предложены клетки-хозяева, трансформированные или трансфецированные полинуклеотидом, который представляет собой или экспрессирует мишень. Предпочтительно, указанный полинуклеотид переносится в векторе для репликации и экспрессии полинуклеотидов, которые должны являться мишенью или должны экспрессировать эту мишень. Эти клетки следует выбирать таким образом, чтобы они были совместимы с указанным вектором, и они могут представлять собой, например,прокариотические (например бактериальные), грибные, дрожжевые или растительные клетки. Грамотрицательную бактерию Е.соli широко используют в качестве хозяина для гетерологичной генной экспрессии. Однако большие количества гетерологичного белка имеют тенденцию к аккумуляции внутри клетки. Последующая очистка желаемого белка из всей массы внутриклеточных белков E.coli иногда бывает затруднительна. В противоположность E.coli, бактерии из рода Bacillus являются самыми подходящими для использования в качестве гетерологичных хозяев в связи с их способностью секретировать белки в культуральную среду. Другими бактериями, подходящими для использования в качестве хозяев, являются бактерии из родов Streptomyces и Pseudomonas. В зависимости от природы полинуклеотида, кодирующего описанный здесь полипептид, и/или от желательности дальнейшего процессинга экспрессированного белка, предпочтительными могут быть эукариотические хозяева, такие как дрожжи или другие грибы. Вообще, дрожжевые клетки предпочитают другим грибным клеткам в связи с тем, что с ними легче работать. Однако, некоторые белки либо слабо секретируются из дрожжевой клетки, либо в некоторых случаях не претерпевают правильный процессинг (например гипергликозилирование в дрожжах). В этих случаях организм-хозяин следует выбирать из других грибов. Примерами подходящих хозяев экспрессии являются грибы, такие как грибы вида Aspergillus (такие как те, которые описаны в ЕР-А-0184438 и ЕР-А-0284603) и вида Trichoderma; бактерии, такие как бактерии вида Bacillus (такие как те, которые описаны в ЕР-А-0134048 и ЕР-А-0253455), вида Streptomyces и вида Pseudomonas; и дрожжи, такие как дрожжи вида Kluyveromyces (такие как те, которые описаны в ЕР-А-0096430 и ЕР-А-0301670) и вида Saccharomyces. Например, типичные хозяева экспрессии могут быть выбраны из Aspergillus niger, Aspergillus niger var. tubigenis, Aspergillus niger var. awamori, Aspergillus aculeatis, Aspergillus nidulans, Aspergillus oryzae, trichoderma reesei, Bacillussubtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens, Kluyveromyces lactis и Saccharomyces cerevisiae. Использование подходящих клеток-хозяев, таких как дрожжевые, грибные и растительные клеткихозяева, может обеспечить посттрансляционные модификации (например миристоилирование, гликозилирование, укорочение, лапидацию и фосфорилирование по тирозину, серину или треонину), которые могут потребоваться для придания оптимальной биологической активности рекомбинантным продуктам экспрессии по настоящему изобретению. Организм Используемый здесь термин организм включает в себя любой организм, который может содержать мишень и/или продукты, полученные из нее. Примеры организмов могут включать в себя гриб,дрожжи или растение.- 25006254 Используемый здесь термин трансгенный организм включает в себя любой организм, который содержит мишень и/или полученные продукты. Трансформация клеток-хозяев/организмов-хозяев Как указано выше, организм-хозяин может представлять собой прокариотический или эукариотический организм. Примеры подходящих эукариотических организмов включают в себя E.coli и Bacillussubtilis. Указания по трансформации прокариотических хозяев хорошо документированы в данной области техники (см. например Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition, 1989,Cold Spring Harbor laboratory Press) и Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (1995), JohnWileySons, Inc). Если используют прокариотического хозяина, нуклеотидной последовательности может потребоваться подходящая модификация перед трансформацией, такая как удаление интронов. В другом воплощении трансгенный организм может представлять собой дрожжи. В этом отношении дрожжи также широко используют в качестве носителя для гетерологичной генной экспрессии. ВидSaccharomyces cerevisiae имеет долгую историю промышленного применения, включая его применение для гетерологичной генной экспрессии. Обзор экспрессии гетерологичных генов в Saccharomyces cerevisiae сделан Goodey et al (1987, Yeast Biotechnology, D R Berry et al, eds, pp 401-429, Allen and Unwin,London) и King et al (1989, Molecular and Cell Biology of Yeasts, E F Walton and G Т Yarronton, eds, pp 107133, Blackie, Glasgow). По нескольким причинам Saccharomyces cerevisiae хорошо подходят для гетерологичной генной экспрессии. Во-первых, они не патогенны для людей и не способны продуцировать определенные эндотоксины. Во-вторых, они имеют долгую историю безопасного использования на протяжении веков коммерческого применения для различных целей. Это привело к широкому общественному признанию. Втретьих, интенсивное коммерческое применение и исследования, посвященные этому организму, привели в результате к богатству знаний по генетике и физиологии, а также характеристикам крупномасштабной ферментации Saccharomyces cerevisiae. Обзор принципов гетерологичной генной экспрессии в Saccharomyces cerevisiae и секреции генных продуктов сделан E. Hinchcliffe, E. Kenny (1993, Yeast as a vehicle for the expression of heterologousgenes, Yeasts, Vol. 5, Anthony H Rose and J Stuart Harrison, eds, 2nd edition, Academic press Ltd.). В распоряжении имеется несколько типов дрожжевых векторов, включая интегративные векторы,которым требуется рекомбинация с геномом хозяина для их поддержания, и автономно реплицирующиеся плазмидные векторы. Чтобы получить трансгенные Saccharomyces, конструкции экспрессии изготавливают путем вставки описанной здесь нуклеотидной последовательности в конструкцию, предназначенную для экспрессии в дрожжах. Разработано несколько типов конструкций, используемых для гетерологичной экспрессии. Эти конструкции содержат промотор, активный в дрожжах, слитый с описанной здесь нуклеотидной последовательностью. Обычно используют промотор дрожжевого происхождения, такой как промотор GAL1. Обычно используют сигнальную последовательность дрожжевого происхождения, такую как последовательность, кодирующая сигнальный пептид SUC2. Терминатор, активный в дрожжах, завершает систему экспрессии. Для трансформации дрожжей разработано несколько протоколов трансформации. Например, трансгенные Saccharomyces можно получить, следуя указаниям Hinnen et al (1978, Proceedings of the National(1983, J Bacteriology 153, 163-168). Трансформированные дрожжевые клетки отбирают, используя различные селективные маркеры. Среди маркеров, используемых для трансформации, находится ряд ауксотрофных маркеров, таких какLEU2, HIS4 и TRP1, и доминантные маркеры устойчивости к антибиотикам, такие как маркеры аминогликозидных антибиотиков, например G418. Другой организм-хозяин представляет собой растение. Основным принципом в конструировании генетически модифицированных растений является встраивание генетической информации в геном растения таким образом, чтобы получить стабильное поддержание этого встроенного генетического материала. Для встраивания этой генетической информации существует несколько методик, при этом двумя главными принципами является прямое введение генетической информации и введение генетической информации путем использования векторной системы. Обзор общих методик можно найти в статьях Potrykus (Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol [1991] 42: 205-225) и Christou (Agro-Food-Industry Hi-TechMarch/April 1994 17-27). Дополнительные указания по трансформации растений можно найти в ЕР-А 0449375. Таким образом, предлагается способ трансформации клетки-хозяина нуклеотидной последовательностью, которая должна быть мишенью или экспрессировать мишень. Клетки-хозяева, трансформированные этой нуклеотидной последовательностью, можно культивировать в условиях, подходящих для экспрессии и выделения кодируемого белка из клеточной культуры. Белок, продуцируемый рекомбинантной клеткой, может быть секретируемым, либо может содержаться внутриклеточно в зависимости от используемой последовательности и/или вектора. Для специалистов в данной области очевидно, что век- 26006254 торы экспрессии, содержащие кодирующие последовательности, можно сконструировать с сигнальными последовательностями, которые направляют секрецию кодирующих последовательностей через конкретную прокариотическую или эукариотическую мембрану. Другие рекомбинантные конструкции могут присоединять кодирующую последовательность к нуклеотидной последовательности, кодирующей домен полипептида, который может способствовать очистке растворимых белков (Kroll DJ et al (1993) DNACell Biol 12:441-53). Фармацевтические композиции Предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество агента по настоящему изобретению (то есть И:NPY) и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиенты (включая их комбинации). Фармацевтические композиции могут предназначаться для использования в медицине и ветеринарии и типично содержат один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент. Приемлемые носители или разбавители для терапевтического применения общеизвестны в области фармацевтики и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack PublishingCo. (A. R. Gennaro edit. 1985). Выбор фармацевтического носителя, эксципиента или разбавителя может быть сделан с учетом назначенного пути введения и стандартной фармацевтической практики. Фармацевтические композиции могут содержать в качестве носителя, эксципиента или разбавителя или в дополнение к нему любой подходящий связывающий агент(ы), смазывающий агент(ы), суспендирующий агент(ы), покрывающий агент(ы), солюбилизирующий агент(ы). Консерванты, стабилизаторы, красители, а также корригирующие агенты могут быть включены в фармацевтическую композицию. Примеры консервантов включают в себя бензоат натрия, сорбиновую кислоту и эфиры п-гидроксибензойной кислоты. Можно использовать также антиоксиданты и суспендирующие агенты. В зависимости от различных систем доставки к композиции/препарату могут быть различные требования. Например, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена в виде препарата для доставки с использованием мини-насоса или мукозальным путем, например в виде назального спрея или аэрозоля для ингаляции, либо проглатываемого раствора, либо для доставки парентеральным путем, для чего композицию изготавливают в виде препарата в инъецируемой форме для доставки например внутривенным, внутримышечным или подкожным путем. Альтернативно, может быть создан препарат для введения с помощью и тем и другим путем. Если агент требуется доставлять через слизистую оболочку, через желудочно-кишечную слизистую оболочку, то он должен обладать способностью сохранять стабильность во время транспорта через желудочно-кишечный тракт; например, он должен быть устойчивым к протеолитическому расщеплению,стабильным при кислом рН и устойчивым к воздействию детергентов желчи. По обстоятельствам, фармацевтические композиции можно вводить ингаляцией; в форме суппозитория или пессария; местно в форме лосьона, раствора, крема, мази или присыпки, пользуясь кожным пластырем; перорально в форме таблеток, содержащих эксципиенты, такие как крахмал или лактоза, или в капсулах или овулях, либо одни, либо в смеси с эксципиентами, или в форме эликсиров, растворов или суспензий, содержащих корригирующие или красящие агенты; или их можно инъецировать парентерально, например внутривенно, внутримышечно или подкожно. Для парентерального введения композиции лучше всего использовать в форме стерильного водного раствора, который может содержать другие вещества, например достаточное количество солей или моносахаридов, чтобы сделать этот раствор изотоническим с кровью. Для трансбуккального или сублингвального введения композиции можно вводить в форме таблеток или лепешек, препараты которых могут быть приготовлены общепринятым способом. В некоторых воплощениях агенты можно также использовать в комбинации с циклодекстрином. Известно, что циклодекстрины образуют комплексы включения и комплексы не включения с молекулами лекарственного средства. Образование комплекса лекарственное средство-циклодекстрин может модифицировать растворимость, скорость растворения, биологическую доступность и/или стабильность молекулы лекарственного средства. Комплексы лекарственное средство-циклодекстрин, как правило,полезны для большинства лекарственных форм и путей введения. В качестве альтернативы прямого комплексообразования с лекарственным средством циклодекстрин можно использовать в качестве вспомогательной добавки, например в качестве носителя, разбавителя или солюбилизатора. Альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины используют чаще всего, и подходящие примеры описаны в WO-A-91/11172, WOA-94/02518 и WO-A-98/55148. В предпочтительном воплощении агенты по настоящему изобретению (то есть И:NPY) доставляют системно (например перорально, трансбуккально, сублингвально, более предпочтительно перорально. Поэтому агент предпочтительно находится в форме, которая является подходящей для пероральной доставки. Для некоторых воплощений агент, когда его применяют, предпочтительно не действует на центральную нервную систему. Для некоторых воплощений агент, когда его применяют, предпочтительно действует периферически.- 27006254 Введение Термин введение включает в себя доставку с помощью вирусных и невирусных методик. Механизмы вирусной доставки включают в себя, но не ограничены ими, аденовирусные векторы, аденоассоциированные вирусные (AAV) векторы, герпесвирусные векторы, ретровирусные векторы, лентивирусные векторы и бакуловирусные векторы. Механизмы невирусной доставки включают в себя трансфекцию, опосредованную липидами, липосомы, иммунолипосомы, липофектин, катионные фациальные амфифилы (CFA) и их комбинации. Агенты по настоящему изобретению (то есть ингибиторы И:NPY) можно вводить сами по себе, но,как правило, их вводят в виде фармацевтической композиции - например когда агент находится в смеси с подходящим фармацевтическим эксципиентом, разбавителем или носителем, выбранным с учетом назначенного пути введения и стандартной фармацевтической практики. Например, агент можно вводить (например перорально или местно) в форме таблеток, капсул, овулей, эликсиров, растворов или суспензий, которые могут содержать корригирующие или красящие агенты, для применений немедленного, замедленного, модифицируемого, длительного, импульсного или регулируемого высвобождения. Таблетки могут содержать эксципиенты, такие как микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, цитрат натрия, карбонат кальция, дикальцийортофосфат и глицин, разрыхлители, такие как крахмал (предпочтительно кукурузный, картофельный или тапиоковый крахмал), крахмальный гликолят натрия, натрий-кроскармелоза и некоторые комплексные силикаты, и связующие для гранулирования, такие как поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза (ГПМЦ), гидроксипропилцеллюлоза (ГПЦ),сахароза, желатин и аравийская камедь. Кроме того, могут быть включены смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота, глицерилбегенат и тальк. Твердые композиции подобного типа можно использовать также в качестве наполнителей в желатиновых капсулах. Предпочтительные в этом отношении эксципиенты включают в себя лактозу, крахмал, целлюлозу, молочный сахар или высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Для водных суспензий и/или эликсиров агент можно объединять с различными подслащивающими или вкусоароматическими агентами, красящим веществом или красителями, с эмульгирующими и/или суспендирующими агентами и с разбавителями, такими как вода, этанол, пропиленгликоль и глицерин, и их комбинации. Пути введения (доставки) включают в себя, но не ограничены ими, один или более чем один из следующих: пероральный (например в виде таблетки, капсулы или в виде проглатываемого раствора), местный, через слизистую оболочку (например в виде назального спрея или аэрозоля для ингаляции), назальный, парентеральный (например с помощью инъецируемой формы), желудочно-кишечный, внутрипозвоночный, внутрибрюшинный, внутримышечный, внутривенный, внутриматочный, внутриглазной,внутрикожный, внутричерепной, внутритрахеальный, интравагинальный, интрацеребровентрикулярный,интрацеребральный, подкожный, офтальмический (включая внутристекловидный и внутрикамерный),чрескожный, ректальный, трансбуккальный, вагинальный, эпидуральный, сублингвальный путь. Следует иметь в виду, что не весь агент необходимо вводить одним и тем же путем. Также, если композиция содержит более чем один активный компонент, то эти компоненты можно вводить различными путями. Если агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) вводят парентерально, то примеры такого введения включают в себя одно или более чем одно из следующих: внутривенное, внутриартериальное,внутрибрюшинное, внутриоболочковое, интравентрикулярное, интрауретральное, интрастернальное,внутричерепное, внутримышечное или сублингвальное введение агента; и/или используя технику инфузии. Для парентерального введения агент лучше всего использовать в форме стерильного водного раствора, который может содержать другие вещества, например достаточное количество солей или глюкозы,чтобы сделать этот раствор изотоническим с кровью. Водные растворы следует соответствующим образом забуферить (предпочтительно до рН от 3 до 9), если необходимо. Приготовление подходящих парентеральных препаратов в стерильных условиях легко осуществляют по стандартным фармацевтическим методикам, хорошо известным специалистам в данной области. Как указано, агент по настоящему изобретению (то есть И:NPY) можно вводить интраназально или ингаляцией, и удобно доставлять его в форме сухого порошкового ингалятора или аэрозольного распыляемого препарата из контейнера под давлением, насоса, пульверизатора или распылителя с использованием подходящего пропеллента, например дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, гидрофторалкана, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан (HFA 134A) или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан (HFA 227 ЕА), диоксида углерода или другого подходящего газа. В случае аэрозоля под давлением единицу дозировки можно определить при помощи клапана для доставки отмеренного количества. Контейнер под давлением, насос, пульверизатор или распылитель может содержать раствор или суспензию активного соединения, например с использованием смеси этанола и пропеллента в качестве растворителя, который может дополнительно содержать смазывающий агент, например триолеат сорбита. В препараты капсул и картриджей (изготовленных, например, из желатина) для использования в ингалято- 28006254 ре или инсуффляторе можно включать порошкообразную смесь агента и подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал. Альтернативно, агент можно вводить в форме суппозитория или пессария, или его можно применять местно в форме геля, гидрогеля, лосьона, раствора, крема, мази или присыпки. Агент можно вводить также кожно или чрескожно, например путем использования кожного пластыря. Их можно также вводить легочным или ректальным путем. Их можно вводить глазным путем. Для офтальмического применения препараты соединений могут быть приготовлены виде микронизированных суспензий в изотоническом стерильном физиологическом растворе с установленным рН или, предпочтительно, в виде растворов в изотоническом стерильном физиологическом растворе с установленным рН, возможно в сочетании с консервантом, таким как бензилалкония хлорид. Альтернативно, они могут быть введены в состав мази, такой как вазелин. Для нанесения местно на кожу агент может быть приготовлен в виде подходящей мази, содержащей активное соединение, суспендированное или растворенное, например, в смеси с одним или более чем одним из следующего: минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен-полиоксипропиленовое соединение, эмульгированный воск и вода. Альтернативно, его можно приготовить в виде подходящего лосьона или крема, суспендируя или растворяя, например, в смеси одного или более чем одного из следующего: минеральное масло, моностеарат сорбита, полиэтиленгликоль, жидкий парафин, полисорбат 60, воск из цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и вода. Описанные здесь композиции можно вводить с помощью прямой инъекции. Для некоторых применений агент вводят предпочтительно перорально. Для некоторых применений агент вводят предпочтительно местно. Уровни доз Обычно врач будет определять фактическую дозировку, которая наиболее подходит для индивидуального субъекта. Конкретный уровень доз и частота дозировки для любого конкретного пациента могут варьировать, и будут зависеть от ряда факторов, в том числе от активности конкретного применяемого соединения, метаболической стабильности и длительности действия соединения, от возраста, массы тела,общего состояния здоровья, пола, диеты, вида и времени введения, скорости выведения, комбинации лекарственных средств, тяжести конкретного состояния и индивидуальной терапии. Агент и/или фармацевтическую композицию, описанную здесь, можно вводить в соответствии с режимом от 1 до 10 раз в сутки, например один раз или два раза в сутки. Для перорального и парентерального введения пациентам-людям суточный уровень дозировки агента может находиться в однократной дозе или раздельных дозах. В зависимости от потребности агент можно вводить в дозе от 0,01 до 30 мг/кг массы тела, например от 0,1 до 10 мг/кг, более предпочтительно от 0,1 до 1 мг/кг массы тела. Естественно, упомянутые здесь дозировки являются примером среднего случая. Несомненно, могут быть индивидуальные случаи, когда будут предпочтительны более высокие или более низкие диапазоны дозировки. Препарат Агент может быть приготовлен в виде фармацевтической композиции, например смешиванием с одним или более чем одним подходящим носителем, разбавителем или эксципиентом по методикам, которые известны в данной области техники. Ниже представлено несколько не ограничивающих примеров препаратов. Препарат 1: таблетку изготавливают, используя следующие ингредиенты: масса/мг Агент 250 Целлюлоза микрокристаллическая 400 Диоксид кремния, белая сажа 10 Стеариновая кислота 5 Всего 665 Эти компоненты смешивают и прессуют для формования таблеток, каждая из которых весит 665 мг. Препарат 2: внутривенный препарат может быть изготовлен следующим образом: Агент 100 мг Изотонический физиологический раствор 1000 мл Фармацевтически активная соль Агент можно вводить в виде фармацевтически приемлемой соли. Обычно фармацевтически активную соль легко можно получить, используя желаемую кислоту или основание, по обстоятельствам. Эту соль можно осадить из раствора и собрать фильтрованием, или можно выделить ее путем выпаривания растворителя. Животные контрольные моделиIn vivo модели могут быть использованы для исследования и/или разработки терапии или терапевтических агентов для лечения РПВЖ. Эти модели могут быть использованы для исследования воздействия различных средств/ведущих соединений на ряд параметров, которые указывают на реакцию полово- 29006254 го возбуждения. Эти животные контрольные модели могут быть использованы как анализ или в анализе,предложенном здесь. Эта животная контрольная модель будет представлять собой не человеческую животную контрольную модель. В распоряжении имеется ряд животных моделей васкулогенной женской сексуальной дисфункции,которые можно использовать. Например, можно сделать ссылку на инвазивные животные модели (например см. Park et al., 1997). Здесь вагинальную и клиторную гемодинамические реакции можно регистрировать непосредственно после стимуляции тазового нерва у нормальных и атеросклеротических самок кролика. In vivo эффекты средств, потенцирующих цАМФ можно исследовать либо у нормальных животных, либо у животных с РПВЖ. В качестве еще одного примера можно сделать ссылку на неинвазивные животные модели (например см. обзор Goldstein et al., 1998; Laan et al., 1998). Здесь импульсная волновая ультразвуковая доплеровская эхография обеспечивает средства обнаружения изменений кровотока в вагинальной и клиторной артериях. Эту модель можно использовать для исследования васкулогенных эффектов во время фармакологического введения вазодилататоров. Другие неинвазивные методики, которые можно использовать, включают в себя вагинальную фотоплетизмографию, которая обеспечивает количественное измерение переполнения кровью слизистой влагалища, и методики вагинального теплового клиренса, которые основаны на том принципе, что изменения вагинального кровотока можно регистрировать путем измерения теплоотдачи от внутривлагалищного зонда, поддерживаемого при постоянной температуре. Животная модель полового возбуждения В своих исследованиях авторы изобретения разработали здоровую воспроизводимую модель физиологии полового возбуждения. В этой модели используют анестезированного кролика и применяют лазерные доплеровские технологии для мониторинга генитального кровотока, одновременно рутинно регистрируя сердечно-сосудистые параметры. Авторы изобретения способны измерять малые изменения в вагинальном (а также клиторном) кровотоке, вызванные стимуляцией тазового нерва или инфузией VIP в отсутствие и в присутствии тестируемых агентов. Авторы изобретения полагают, что их животная модель непосредственно отражает клинические данные. Следовательно, эту модель можно использовать для изучения агентов-кандидатов для лечения РПВЖ, например измеряя усиление вагинального или клиторного кровотока. Физиологическое измерение полового возбуждения у женщин Для измерения клиторного и вагинального кровотока можно использовать ряд различных методик. Например, можно использовать вагинальную фотоплетизмографию, методику вагинальной теплоотдачи,МРВ (магнитно-резонансную визуализацию) с повышенной контрастностью клитора и влагалища, импульсную лазерную доплеровскую визуализацию клитора/вульвы и клиторную ультразвуковую эхографию. Количественно вагинальное смазывание также может быть измерено по методикам, известным в данной области, таким как (а) взвешивание вагинальных тампонов перед и после стимуляции и (б) измерение рН вагинальной жидкости. В отношении последнего аспекта нормальная кислая среда во влагалище в покое становится более щелочной, поскольку она достигает рН крови, когда во время половой стимуляции происходит транссудация жидкости.NPY (нейропептид Y) Согласно одному из аспектов настоящего изобретения дополнительная мишень представляет собой ПцАМФ мишень, причем эта ПцАМФ мишень представляет собой NPY или один из связывающихся с ним рецепторов. Нуклеотидные последовательности и аминокислотные последовательности для NPY и его рецепторов описаны в литературе. Некоторые последовательности представлены в приведенных здесь Перечнях последовательностей. Теперь авторы изобретения обнаружили, что нейропептид Y (NPY) оказывает ингибиторное регуляторное влияние на опосредованную вазоактивным интестинальным пептидом (VIP) вазорелаксацию. Следовательно, ингибирование рецепторов NPY будет приводить в результате к повышенному опосредованному тазовым нервом и VIP-опосредованному усилению генитального (например вагинального и клиторного) кровотока. Клинически это должно приводить к усилению переполнения кровью влагалища и/или клитора, которое в конечном счете приводит к усилению смазывания посредством транссудации плазмы и повышению вагинальной податливости. Следовательно, подходящей мишенью для лечения РПВЖ является NPY или один из связывающихся с ним рецепторов. Таким образом, в предпочтительном аспекте дополнительная мишень представляет собой NPY Y1Y2 или Y5 антагонист, предпочтительно пероральный NPY Y1 Y2 или Y5 антагонист. Этот агент будет лечить РПВЖ посредством усиления генитального (например вагинального или клиторного) кровотока и усиления смазывания.NPY-опосредованный антагонизм VIP-индуцированного усиления кровотока, следовательно, представляет собой потенциальную терапевтическую мишень, посредством которой можно влиять на крово- 30