Средство для профилактики и лечения ринитов различной этиологии, способ его получения, фармацевтическая композиция на его основе, способ профилактики и лечения

009610 Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в медицинской практике в режиме монотерапии и в комплексном лечении ринитов различной этиологии. Международная классификация ринитов [1] предусматривает их деление на острую и хроническую формы, причем при хронической форме воспалительный процесс может быть вызван неспецифическим или специфическим возбудителем. Специфические формы инфекционного ринита (при дифтерии, склероме, туберкулезе, сифилисе и др.) достаточно редки. Острый инфекционный ринит (ОИР) чаще вызывается вирусами, хронический - бактериями, реже - грибами. Бактерии обычно являются возбудителями воспаления, сопровождающего атрофические процессы, а также осложняющего течение послеоперационного периода. Заслуживает внимания атрофическая форма ринита, значительную роль в патогенезе которой играет специфический возбудитель - клебсиелла. Инфекционный ринит может быть вызван целым рядом повреждающих факторов: хирургической травмой, воздействием химических и физических факторов, и в этих случаях бактерии также являются вторичным этиологическим фактором, который воздействует на поврежденную, лишенную своих защитных механизмов слизистую оболочку. Наиболее типичным возбудителем ОИР являются риновирусы [2]. Индивидуальная восприимчивость к вирусной инфекции зависит от многих факторов: возраста, физического развития, санитарно-гигиенических условий, степени адаптации к метеорологическим сдвигам и закаленности поверхности тела к воздействию низких либо контрастных температур, наличия интеркуррентных заболеваний. Дети болеют острым насморком чаще, чем теркуррентными заболеваниями. Дети болеют острым насморком чаще, чем взрослые. В отличие от вирусов гриппа и аденовирусов, поражающих обширные области эпителия полости носа, для риновирусной инфекции характерны изолированные очаги пораженного эпителия, в то время как большая часть слизистой оболочки остается интактной. Вирусное инфицирование обычно является лишь первой фазой заболевания, и оно прокладывает путь бактериальной инфекции. В условиях нормально функционирующего механизма мукоцилиарного транспорта бактерии не имеют возможности для достаточно длительного контакта с клетками эпителия полости носа. Такие условия создаются, когда клетки мерцательного эпителия, пораженные вирусом, временно не функционируют. Это продлевает время контакта патогенных бактерий с клетками и делает возможным вторичное бактериальное инфицирование. Весь цикл болезни завершается за 7-10 дней, но может иметь более короткое абортивное течение либо при неблагоприятных условиях затягиваться и приводить к развитию осложнений - синусита, отита, трахеобронхита и др. Более тяжелое течение острый ринит может приобретать у маленьких детей. Из-за отсутствия носового дыхания ребенок становится раздражительным, кричит, отказывается от груди, откидывает голову назад (симптом ложного опистотонуса). Хронический инфекционный ринит (ХИР) традиционно разделяют на простую (катаральную), гипертрофическую и атрофическую формы [3]. Эти формы редко существуют по отдельности, в чистом виде. Хронический катар полости носа при различных условиях может переходить в субатрофическую(атрофическую) либо гипертрофическую форму. Кроме того, гиперплазия подслизистого слоя слизистой оболочки часто сочетается с атрофическими изменениями эпителия либо, наоборот, с увеличением количества желез и гиперпродукцией слизи. Гипертрофические процессы чаще касаются нижних носовых раковин, которые увеличиваются в размерах, постепенно занимая все нижние отделы полости носа. Гипертрофия может быть локальной и захватывать преимущественно задние концы раковин, которые в этом случае приобретают вид полипа. Отдельной формой ХИР является сухой передний ринит. Этиология и патогенез этого заболевания остаются до конца не выясненными. Он может возникать при длительном воздействии пыли и других вредных производственных факторов - горячего сухого воздуха,химических веществ (аммиака, формалина, соляной, азотной, серной кислот и т.д.). Основным симптомом среди клинических проявлений ХИР является затруднение носового дыхания. Оно может быть непостоянным, сопровождаться периодической заложенностью то одной, то другой половины носа, усиливаться в ночные часы, практически всегда постепенно прогрессирует, что в конечном итоге и приводит пациента к врачу. Носовое дыхание может быть затруднено по разным причинам: в результате отека или гипертрофии носовых раковин или из-за скопления выделений или корок в общем носовом ходе [4]. Выделения при ХИР обычно густые, бесцветные или желтоватого, зеленоватого или серого цвета, могут отходить из носа в виде корочек, иногда в выделениях имеется примесь крови. Целями, которые в зависимости от конкретных клинических проявлений ринита в различной степени могут преследоваться при назначении топических препаратов, являются элиминация микробных возбудителей заболевания, лечение воспалительного процесса, восстановление носового дыхания, уменьшение секреции, стимуляция репаративных и трофических процессов в слизистой оболочке, нормализация функций защитных барьеров: мукоцилиарного транспорта и местного иммунитета слизистой оболочки. Согласно международному консенсусу по лечению аллергических ринитов [5], опубликованному в 2000 г., аллергический ринит - заболевание слизистой оболочки носа, в основе которого лежит аллергическое воспаление, вызываемое причинно-значимыми аллергенами, клинически проявляющееся ринореей,заложенностью носа, зудом в полости носа, повторяющимся чиханием. Дополнительная симптоматика может включать головную боль, нарушение обоняния и проявления конъюнктивита. В зависимости от особенностей течения и обострений аллергических ринитов, связанных с временем года, выделяют круглогодичную и сезонную формы заболевания.-1 009610 Сезонный аллергический ринит (САР) связан с воздействием аллергенов пыльцы. Заболеваемость САР существенно зависит от географической зоны, местного климата и времени цветения растений. Все это необходимо учитывать при интерпретации симптомов заболевания и постановке диагноза. Особенностью САР является периодичность обострений. Клинические симптомы заболевания рецидивируют из года в год в одно и то же время и имеют четкую связь с периодом цветения определенных видов растений. Симптомы САР у большинства пациентов исчезают сразу после окончания периода цветения аллергенных растений. Круглогодичный аллергический ринит (КАР) обусловлен аллергенами домашней пыли, клещей домашней пыли, домашних животных, пера подушек, тараканов, мышей, крыс, некоторых видов плесневых грибов. Для круглогодичного аллергического ринита характерна постоянная клиническая симптоматика на протяжении всего года. Наиболее частым и типичным клиническим симптомом при хроническом КАР является заложенность носа. Приступы чихания, бесцветные выделения из носа, зуд в носу, глазах, ушах,горле могут подтвердить аллергическую природу ринита. Характерным симптомом КАР может быть приступообразное чихание при пробуждении или в ранние утренние часы. У некоторых больных заложенность носа выражена больше ночью, что неблагоприятно влияет на сон. Течение КАР усугубляется при воздействии неспецифических факторов (холодный воздух, табачный дым, изменение метеоситуации), а также различных инфекционных агентов (вирусы, бактерии, грибы). Хроническое течение КАР у детей может способствовать развитию у них серозного среднего отита,носовых кровотечений, появлению болей в области лобных пазух, снижению обоняния, нарушению сна,а также покашливанию или сухому кашлю. При длительно текущем КАР у детей могут развиться полипы, аномалии прикуса, гипертрофия десен. В последние годы выделяют неаллергический ринит с синдромом эозинофилии (НАРСЭ) - заболевание, сходное по клинической симптоматике с аллергическими ринитами, но не имеющее в своей основе иммунологических (аллергических) механизмов развития. Чаще всего причиной НАРСЭ являются медикаменты, профессиональные вредности, инородные тела. Известны топические препараты для лечения ринитов [6, 7, 8]. Их можно разделить на следующие группы: антибактериальные, противовирусные, сосудосуживающие, блокаторы холинорецепторов, мукоактивиые, вакцины, увлажняющие и гигиенические средства, препараты с комплексным действием,комбинированные и фитопрепараты [9]. Антибактериальные препараты Мупироцин - мазь для носа, антибиотик с бактерицидным действием - обладает практически 100% эффективностью в отношении золотистого и эпидермального стафилококков, в том числе метициллинрезистентных и других мультирезистентных штаммов S. aureus. Стандартный курс лечения заключается в ежедневном дву-, троекратном нанесении мази на слизистую оболочку полости носа в течение 5 дней. Фюзафюнжин - ингаляционный антибиотик, выпускаемый в форме дозированного аэрозоля. Фюзафюнжин эффективен в отношении бактерий, чаще всего являющихся возбудителями ринита. Его отличительной чертой является стабильность спектра антибактериального действия. Помимо антибактериальных свойств фюзафюнжин обладает собственным противовоспалительным действием. Фрамицетин - антибиотик, благодаря своему антибактериальному действию может применяться в лечении острого и хронического ринита. Выпускается в форме носовых капель и назального спрея. Октенисепт - антисептический препарат для обработки слизистых оболочек - обладает исключительно широким спектром антимикробного действия, который охватывает грамположительные и грамотрицательные бактерии, хламидии, микоплазму, грибы, простейшие, а также вирусы простого герпеса и СПИДа. Главным недостатком препарата является то, что он не выпускается в формах, удобных для самостоятельного применения (капли, аэрозоль), поэтому его использование ограничено пока, в основном,кабинетами ЛОР-врачей. Существует группа комбинированных препаратов, в состав которых помимо антибактериальных средств входят кортикостероиды и/или сосудосуживающие препараты: полидекса с фенилэфрином (полимиксин+неомицин+дексаметазон+фенилэфрин), гикомицин-тева (неомицин+гидрокортизон), дексариноспрей (неомицин+дексаметазон) и др. Помимо непосредственного бактерицидного действия эти препараты обладают еще и противовоспалительным и десенсибилизирующим эффектом, однако, при их назначении следует помнить о практически100% биодоступности входящих в их состав кортикостероидных препаратов. Противовирусные препараты Интерферонявляется фактически единственным противовирусным препаратом, который использовался для введения в полость носа. Считают, что раствор интерферона должен применяться на самых ранних стадиях развития инфекционного ринита, поэтому уже в первые часы заболевания раствор интерферона рекомендуют закапывать в обе половины носа каждые 20-30 мин, затем 4-5 раз в сутки. Эффективность интраназального введения интерферонов для профилактики гриппа и ОРВИ начала исследоваться с 1960-х годов, однако, по данным некоторых исследований, она оказалась достаточно низкой.-2 009610 Топические сосудосуживающие препараты (деконгестанты) Применяемые в виде капель и аэрозолей сосудосуживающие препараты действуют на регуляцию тонуса кровеносных сосудов полости носа. Активируя адренергические рецепторы, они вызывают сокращение кавернозной ткани носовых раковин и, как следствие, расширение носовых ходов и улучшение носового дыхания. По механизму действия большинство топических деконгестантов являются -адреномиметиками, причем они могут селективно действовать на 1- либо 2-рецепторы. Особняком стоят сам адреналин, который способен стимулировать и 1, и 2-адренорецепторы, а также эфедрин, способствующий выделению норадреналина, и кокаин, предотвращающий его утилизацию тканями. Деконгестанты различаются по своим фармакодинамическим особенностям, выраженности и продолжительности действия и побочных эффектов. Все эти препараты при длительном применении вызывают развитие синдрома рикошета (как варианта синдрома отмены). Длительное (свыше 10 дней) использование этих препаратов может вызывать выраженный отек в полости носа, назальную гиперреактивность, изменения гистологического строения (ремоделирование) слизистой оболочки, т.е. развитие медикаментозного ринита. Следует также помнить о возможных побочных эффектах бензалкониума хлорида - консерванта, который входит в состав большинства топических деконгестантов. Деконгестанты следует с осторожностью назначать при наличии атрофических и субатрофических изменений слизистой оболочки, а также у детей младше 2 лет, потому что существующий интервал между терапевтической и токсической дозами невелик. К деконгестантам относятся нафтизин капли 0,05% и 0,1%, фармазолин капли 0,05% и 0,1%. Одним из известных эффективных топических деконгестантов является препарат эвказолин. Основные его составляющие: 0,1% раствор ксилометазолина гидрохлорида и эвкалиптовое масло. Применяют при остром рините и риносинусите, поллинозе, среднем отите для уменьшения отека слизистой оболочки носоглотки, при подготовке пациента к диагностическим и лечебным процедурам в носовых ходах. Антихолинергические препараты Классическим представителем данной группы является ипратропиума бромид, который, блокируя мускариновые рецепторы желез слизистой оболочки, прерывает парасимпатическую стимуляцию, опосредованную классическим медиатором ацетилхолином, и уменьшает количество водянистого секрета,усиленно продуцируемого в полость носа, например на ранней стадии развития ОИР. Бактериальные вакцины Примером использования лизатов бактерий для интраназального применения является препарат ИРС-19, содержащий лизаты 19 различных бактерий - наиболее распространенных возбудителей респираторных инфекций. Специфическое действие ИРС-19 связывают с увеличением синтеза секреторногоIgA. Увлажняющие и гигиенические средства Эта группа препаратов не является лекарствами. Их готовят либо из морской воды, стерилизуя ее и доводя содержание солей до изотонической концентрации (Аква Марис, Салин и др.), либо из воды минеральных источников, обладающей лечебными свойствами (например, Эрмсер Сальц). При лечении ринита применяются препараты с комплексным действием, комбинированные и фитопрепараты, в частности те, в состав которых входят эфирные масла, масло мяты перечной (ментол): пиносол, каметон и др. Таким образом, арсенал препаратов для лечения ОИР и ХИР в настоящее время достаточно разнообразен. Однако к недостаткам этих препаратов можно отнести то, что они не влияют на механизмы,лежащие в основе хронизации заболевания, на фундаментальные процессы, формирующие дисбаланс системы местного иммунитета в слизистой носа и носоглотки. Следовательно, весь уровень названной предшествующей биотехнологии лечения ринитов, по сути дела, является симптоматическим, решающим лишь сиюминутные задачи, формируя порочный круг хронизации патологического процесса и, следовательно, постепенной гибели эпителия носоглотки. Тем самым следует подчеркнуть, что практически отсутствуют средства, позволяющие восстанавливать базисные нарушения в системе взаимоотношений иммунологических и нейротрофических процессов,улучшать метаболизм клеток,оказывать цитопротекторный эффект и, таким образом, препятствовать формированию атрофических процессов в слизистой носа и корригировать систему местного иммунитета. Коррекция системы местного иммунитета является особенно важной и необходимой, так как фундаментальным механизмом формирования хронических, особенно вазомоторных, ринитов является дисбаланс системы местного иммунитета. Система местного иммунитета, будучи изначально слабым местом при заболеваниях инфекционно-аллергического характера, в процессе лечения антибактериальными препаратами и гормональными средствами все более разрушается. Ремиссии становятся все реже, восприимчивость к инфекции нарастает, и процесс становится хроническим с развитием метаболических нарушений в клетках эпителия носоглотки. На определенном этапе деструктивные процессы становятся-3 009610 превалирующими, определяя характер и тяжесть хронического инфекционно-воспалительного процесса,в данном случае - клинического течения хронических ринитов. Задачей данного изобретения является создание фармацевтической композиции, обладающей антибактериальной, противовирусной, иммуномодулирующей, цитопротекторной активностью, противовоспалительным и антидеструктивным действием. Для решения этой задачи предложена группа изобретений, объединенных единым изобретательским замыслом, а именно применение бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицината лития (тетралитиевой соли дисульфидглутатиона) со стабилизированной дисульфидной связью в качестве средства для профилактики и лечения ринитов различной этиологии; способ получения указанного средства, включающий окисление исходного соединения - восстановленного глутатиона (-L-глутамил-L-цистеинилглицина) - перекисью водорода в присутствии водного аммиака путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 20-35 мин при 18-25 С и рН 8; выделение свободного гексапептида (бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бисглицина) путем подкисления раствора ледяной уксусной кислотой до рН 5; перевод окисленной формы свободного гексапептида в тетралитиевую соль путем обработки его водного раствора водным растворомLiOH; фильтрацию полученного после окисления раствора вод вакуумом; стабилизацию дисульфидной связи гексапептида вследствие ее энергизации; выделение конечного продукта методом лиофильной сушки; стабилизация дисульфидной связи бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицината лития путем облучения реакционного раствора с помощью аппарата для ультрафиолетового облучения; фармацевтическая композиция для профилактики и лечения ринитов различной этиологии, включающая бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития (тетралитиевую соль дисульфидглутатиона),сульфат цинка, перекись водорода, адреналин и воду для инъекций при следующем их соотношении,мас.%: бис-(-L-Глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития(тетралитиевая соль дисульфидглутатиона) 0,5-7,0 Сульфат цинка 0,02-0,8 Перекись водорода 0,01-0,5 Адреналин 0,001-0,1 Вода для инъекций Остальное фармацевтическая композиция может быть выполнена в виде капель для носа или спрея для носа; способ профилактики и лечения ринитов различной этиологии, характеризующийся тем, что фармацевтическую композицию применяют 2-6 раз в день, по мере купирования воспалительного процесса число введений лекарственного препарата уменьшают до 2-3 раз в день, курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания. Сущность изобретения состоит в разработке фармацевтической композиции на основе бис-(-Lглутамил)-L-цистинил-бис-глицината лития (тетралитиевой соли дисульфидглутатиона), обладающего уникальными свойствами: способностью индуцировать апоптоз вирусинфицированных клеток и повышать устойчивость непораженных клеток к инфицированию бактериями, вирусами и другими агентами. Именно подобный набор свойств тетралитиевой соли дисульфидглутатиона и, следовательно, заявляемой фармацевтической композиции позволяет осуществить новое решение проблемы профилактики и лечения острых и хронических ринитов. Предпочтительным воплощением идеи изобретения стала разработка оригинального способа синтеза тетралитиевой соли дисульфидглутатиона со стабилизированной дисульфидной связью и включением лития по всем карбоксильным группам дисульфидглутатиона. При этом особенность способа заключается в том, что в процессе синтеза реакционный раствор, содержащий названное соединение, подвергается ультрафиолетовому облучению, чем достигается стабильность конечного продукта и, следовательно,присущих ему биолого-фармакологических эффектов. Разработана рецептура фармацевтической композиции, т.е. строго определенный состав и соотношение ее компонентов (ингредиентов). Оптимальный состав фармацевтической композиции лежит в основе ее биолого-фармакологической эффективности, что установлено в клинико-экспериментальных исследованиях и представлено в примерах реализации. Интегративным результатом биолого-фармакологических эффектов заявляемой фармакологической композиции как средства осуществления способа профилактики и лечения хронических ринитов различной этиологии является ее способность регулировать соотношение гуморального и клеточного иммунитета, а также метаболические процессы, лежащие в основе пролиферации, дифференцировки и апоптоза клеток слизистой носа и носоглотки. Для профилактики и лечения ринитов различной этиологии предложено средство - тетралитиевая соль дисульфидглутатиона со стабилизированной дисульфидной связью, имеющая структурную формулу Характеристика вещества 1. Химическое название: бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития. 2. Брутто-формула: C20H28N6O12Li4S2. 3. Молекулярная масса: 636,37. 4. Описание: белый порошок без запаха. 5. Растворимость: растворим в воде, изотоническом растворе хлорида натрия 0,9% для инъекций; не растворим в спирте 95%, хлороформе, эфире и других органических растворителях. 6. Прозрачность и цветность раствора: раствор 0,05 г препарата в 10 мл воды прозрачен и бесцветен. 7. рН 0,1% раствора: 5,0-6,0 потенциометрически. 8. Подлинность: аминокислотный анализ (6 н. HCl, 110 С, 20 ч): глицин-2,0 (2,0); глутаминовая кислота - 1,9 (2,0); цистеин - 1,9 (2,0); цистеин - 1,7 (2,0); ЯМР (1H)-спектроскопия: СН 2 ( 2,05; 2,40; 3,00; 3,80); СН ( 3,72; 4,65); ВЭЖХ: по времени выхода соответствует стандарту. 9. Количественное определение: ВЭЖХ: 95%. 10. Аминокислотный анализ: 85%. 11. ТСХ: гомогенен. 12. Содержание лития (Li) по эмиссионному спектральному методу: (4,40,1)%. Предлагаемый способ получения тетралитиевой соли дисульфидглутатиона (бис-(-L-глутамил)-Lцистинил-бис-глицината лития) включает окисление исходного соединения (I) - восстановленного глутатиона (-L-глутамил-L-цистеинилглицина) - перекисью водорода в присутствии водного аммиака путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 20-35 мин при 18-25 С и рН 8; выделение свободного гексапептида (бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицина) (II) путем подкисления раствора ледяной уксусной кислотой до рН 5; перевод окисленной формы свободного гексапептида в тетралитиевую соль (III) путем титрования водного раствора соединения (III) 4 экв. водного раствора LiOH; фильтрацию раствора; стабилизацию дисульфидной связи тетралитиевой соли дисульфидглутатиона путем облучения реакционного раствора с помощью аппарата для ультрафиолетового облучения (УФО) типа Изольда; выделение конечного продукта - тетралитиевой соли дисульфидглутатиона - методом лиофильной сушки. Способ иллюстрируется следующим примером. Пример 1. Восстановленный глутатион в количестве 170 г (0,55 моль) помещают в колбу, снабженную мешалкой и термометром, суспендируют в 200 мл воды и при перемешивании прибавляют 269 мл 1 н. раствораLiOH. Полученный прозрачный, слегка желтоватый раствор охлаждают до температуры 18-20 С и в течение 5 мин небольшими порциями добавляют 283 мл 3% раствора перекиси водорода с такой скоростью, чтобы температура реакционной смеси не превышала 22-25 С. Реакционную смесь перемешивают в течение 35 мин при указанной температуре, при этом подкисляют раствор ледяной уксусной кислотой до рН 5. Затем в колбу устанавливают электрод потенциометра, определяют рН раствора и по каплям прибавляют 1 н. раствор LiOH до рН 5,8-6,0, при этом температура не должна превышать 22-25 С. Далее охлаждение убирают и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Контроль полноты прохождения реакции окисления проводят методом ВЭЖХ. Если после стандартного интегрирования хроматограммы содержание окисленной формы глутатиона составляет менее 97%, перемешивание реакционной смеси продолжают еще 30 мин при том же режиме и хроматографический контроль повторяют.-5 009610 Если содержание окисленной формы глутатиона составляет не менее 97%, реакцию считают законченной. Полученный после реакции окисления раствор фильтруют под вакуумом через фильтр с размером пор не более 0,7 мкм, не допуская вспенивания раствора. Колбу и фильтр промывают дистиллированной водой (2x20 мл), промывку присоединяют к фильтрату. Отфильтрованный раствор подвергают ультрафиолетовому облучению на аппарате типа Изольда,мощность источника излучения 8 Вт. Выделение конечного продукта осуществляют методом лиофильной сушки. Предлагаемая фармацевтическая композиция включает бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бисглицинат лития в качестве основного действующего вещества, сульфат цинка, перекись водорода, адреналин в качестве дополнительных действующих веществ и воду для инъекций при следующем их соотношении, мас.%: бис-(-L-Глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития(тетралитиевая соль дисульфидглутатиона) 0,5-7,0 Сульфат цинка 0,02-0,8 Перекись водорода 0,01-0,5 Адреналин 0,001-0,1 Вода для инъекций Остальное Пример 2. Получение фармацевтической композиции в виде лекарственной формы капли для носа. Состав капель, г: бис-(-L-Глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития(тетралитиевая соль дисульфидглутатиона) 20,0 Сульфат цинка 2,5 Перекись водорода 1,0 Адреналин 0,1 Вода для инъекций До 1 л Для приготовления капель готовят 0,1% раствор перекиси водорода, последовательно растворяют в нем 20,0 г тетралитиевой соли дисульфидглутатиона, 2,5 г сульфата цинка и 0,1 г адреналина. Объем полученного раствора доводят до 1 л водой для инъекций. Полученный раствор подвергают стерильной фильтрации и разливают во флаконы. Флаконы герметично укупоривают. Данная фармацевтическая композиция может использоваться в двух лекарственных формах: помимо капель для носа предлагается спрей для носа, который обеспечивает получение полидисперсного аэрозоля с диаметром микрочастиц 150-300 мкм. Необходимо отметить, что предлагаемая оригинальная фармацевтическая композиция разработана впервые и ранее не использовалась в клинической практике для профилактики и лечения ринитов различной этиологии. Результаты доклинических исследований общетоксического действия ингредиентов композиции позволяют отнести основной компонент заявляемой фармацевтической композиции к 5 классу - практически нетоксичным лекарственным веществам [10, 11]. В результате проведенных доклинических исследований выявлено, что заявляемая фармацевтическая композиция обладает уникальными биолого-фармакологическими эффектами, обеспечивая иммуномодулирующее действие, в том числе активацию противоинфекционного иммунитета, нормализацию метаболических процессов в клетках тканей слизистой носа и носоглотки, следовательно, активацию репаративных процессов, т.е. эпителизацию участков повреждения наряду с наработкой противовоспалительных цитокинов. Названные биолого-фармакологические эффекты, в основном, обусловлены механизмами биохимической и иммунологической активности тетралитиевой соли дисульфидглутатиона вследствие ее позитивного влияния на метаболизм и, отсюда, на биоэнергетику клеток эпителия носоглотки и иммунокомпетентных клеток. Тетралитиевая соль дисульфидглутатиона наряду с выраженными метаболическими эффектами осуществляет регуляцию эндогенной продукции цитокинов, в том числе интерферонов (ИФН) альфа и гамма, что определяет иммунореабилитирующие и противовирусные эффекты фармацевтической композиции. Кроме того, благодаря стабильной форме тетралитиевой соли дисульфидглутатиона, получаемой по оригинальной методике синтеза, осуществляется коррекция соотношения продукции цитокинов Th1/Th2 класса с преимущественной активацией Th1 клеток вследствие стимуляции эндогенной продукции ИЛ 12, что обеспечивает стабильный уровень клеточно-опосредованного иммунного ответа, в том числе регулируемую функциональную дееспособность резидентных макрофагов. Замечательным свойством фармакологической активности энергизованной формы тетралитиевой соли дисульфидглутатиона являются-6 009610 ее нейробиохимические эффекты, заключающиеся в восстановлении метаболизма клеток нервных окончаний, следовательно, в обеспечении нервной трофики слизистой носа и носоглотки. Остальные компоненты фармацевтической композиции дополняют эффекты тетралитиевой соли дисульфидглутатиона: перекись водорода обеспечивает функции фармацевтически приемлемого носителя, а также обладает бактерицидным действием за счет выделения активного кислорода; сульфат цинка оказывает антисептическое, вяжущее, подсушивающее и местное противовоспалительное действие; адреналин повышает содержание цАМФ в клетках слизистой носа и в связи с этим оказывает сосудосуживающее действие, а также нормализует активность резидентных макрофагов. Следовательно, предпочтительным воплощением изобретения является фармакологически и фармацевтически оптимальное сочетание приведенных веществ и их соотношение в составе заявляемой фармацевтической композиции, предназначенной для профилактики и лечения ринитов различной этиологии путем ее применения в режиме монотерапии и/или в составе комплексной терапии с традиционными препаратами для достижения профилактического или лечебного эффекта вследствие регулирующего влияния на патогенетические механизмы развития и течения названных заболеваний. Согласно изобретению предлагаются фармацевтически приемлемые препараты в лекарственных формах капли для носа и спрей для носа на основе рецептуры заявляемой фармацевтической композиции для лечения следующих нозологических форм: острый инфекционный, сезонный или круглогодичный аллергический ринит, в т.ч. суб- и атрофический ринит; обострение хронического ринита, в послеоперационном периоде при аденоэктомии, полипэктомии,септопластике, турбинэктомии; профилактика воспалительных заболеваний пазух черепа (гайморит, фронтит, синусит) и отита; повреждения слизистой носа и носоглотки пылью, краской, мукой и другими профессиональными вредностями. В результате проведенных клинических испытаний фармацевтической композиции определены способ применения и дозы препарата. Способ применения: интраназально. Дозы. Взрослые: закапывать, минимум, 3-5 раз в день в оба носовых хода в течение 5-7 дней. При лечении хронических ринитов указанные курсы лечения необходимо повторять с промежутками в 10 дней между курсами до получения терапевтического эффекта. Дети: при заболеваниях носа и носоглотки, ОРВИ детям от 2 недель и старше - по 2-4 закапывания в каждый носовой ход ежедневно (при необходимости можно больше). Использование препарата возможно длительное время (от 7 дней до нескольких месяцев); для гигиены слизистой носа и профилактики заболеваний носа и носоглотки детям старше 2 лет и взрослым - по 1 закапыванию в каждый носовой ход ежедневно (при необходимости можно больше); при уходе за слизистой носа в послеоперационном периоде: детям от 6 лет и старше и взрослым по 4-6 закапываний в каждый носовой ход ежедневно (при необходимости можно больше). Использование препарата возможно длительное время - от 7 дней до нескольких месяцев. Каждое закапывание предполагает введение 5-10 капель препарата в носовые ходы. Меры предосторожности: при применении в послеоперационном периоде необходима консультация врача. Согласно изобретению способ лечения ринитов заключается в применении пациентом, нуждающимся в этом, предлагаемой фармацевтической композиции, причем ее применение осуществляется по крайней мере 2 раза в день в течение периода, необходимого для достижения терапевтического эффекта. Согласно изобретению предлагаемая оригинальная фармацевтическая композиция применяется в виде спрея или капель для носа 2-6 раз в день, по мере купирования воспалительного процесса число инстилляций уменьшают до 2-3 раз в день, курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания. Способ лечения ринитов с использованием предлагаемой фармацевтической композиции иллюстрируется следующими примерами. Пример 3. Исследование по изучению клеток воспаления и цитокинов у пациентов с аллергическим сезонным ринитом. Плацебо-контролируемое, рандомизированное исследование проводилось в сезон цветения. Испытуемые участвовали в исследовании в течение 14 дней и посещали клинику дважды: в начале исследования и через 14 дней. В исследование включали только пациентов, соответствующих перечисленным ниже критериям: мужчин и женщин старше 18 лет; с сезонным аллергическим ринитом (САР), обусловленным контактом с сезонными аллергенами в течение 2 предшествующих недель;с симптомами ринита в течение 2 пред-7 009610 шествующих недель; с минимальной общей оценкой симптомов (ООС) 6 при исходном обследовании(см. ниже), давших информированное согласие перед включением в исследование. Критерии исключения: острые и хронические инфекции верхних дыхательных путей в течение 30 дней до начала исследования; анатомические нарушения носа (например, искривление носовой перегородки), носовые полипы,применение антибиотиков, кортикостероидов внутрь или интраназально в течение предыдущих 4 недель и применение антигистаминных препаратов в течение 1 предшествующей недели. Все пациенты были разделены на 2 группы (по 10 пациентов в группе) и получали фармацевтическую композицию (инстилляции 5 раз в день) или плацебо (инстилляции 5 раз в день) в течение 2 недель. Другие фармакологические методы лечения в период исследования использовать не разрешалось. В крайнем случае, допускалось промывание носа физиологическим раствором. У всех испытуемых до начала лечения и после лечения выполняли промывание носа и получали соскоб из носа. Назальная цитология Цитологические образцы из носовой полости получали посредством соскоба с головки нижней носовой раковины с помощью ватного тампона. После соскоба кончик ватного тампона погружали в пластиковый лоток с фосфатным буферным раствором (ФБР) и переносили в полипропиленовую пробирку вместимостью 10 мл. Полученные жидкости центрифугировали в течение 10 мин при 500 об./мин и осадок ресуспендировали в ФБР (2 мл). Суспензии клеток отфильтровывали, чтобы уменьшить количество слизи, и готовили микроскопические препараты с помощью цитоцентрифуги, используя стандартные методики. Мазки окрашивали красителем Diff Quik и изучали под оптическим микроскопом (Olympus U-SPT,Olympus-Italy, Рим, Италия). Количество клеток воспаления выражали как среднее в 10 полях зрения при 100-кратном увеличении. Изучение образцов проводили слепым методом. Промывание носа Носовую полость промывали 5 мл физиологического раствора в соответствии со стандартными методиками. Во время промывания пациент сидел, наклонив голову назад, с закрытым мягким небом. Полученная жидкость была сопоставимой во всех группах; ее получали, для того чтобы оценить уровень цитокинов, и хранили при -20 С. Исследование цитокинов Содержание цитокинов измеряли методом ELISA (твердофазного иммуноанализа) (RD Systems,Чарльстон, Южная Каролина, США). При проведении анализа использовали количественную методику иммуноферментного сэндвич-анализа. В микропланшет вносили моноклональные антитела, специфичные для каждого цитокина. Анализ исследуемых образцов и стандартных разведений каждого специфичного цитокина выполняли раздельно, в двух повторностях, в соответствии с инструкциями производителя набора ELISA. Стандартные и исследуемые образцы пипеткой вносили в лунки планшета, и каждый цитокин связывался с иммобилизованным антителом. После удаления несвязавшихся веществ в лунки добавляли связанные с ферментом поликлональные антитела, специфичные для каждого цитокина. После удаления несвязавшегося реактива антитело-фермент в лунки добавляли раствор субстрата с последующим развитием окраски, интенсивность которой была пропорциональна количеству цитокина, связавшегося на первой стадии. Затем развитие окраски останавливали и измеряли интенсивность окраски. Интенсивность окраски измеряли на спектрофотометре при длине волны 490 нм (Molecular Device,Денвер, Колорадо, США). По средней оптической плотности строили калибровочную кривую и оценивали количество каждого цитокина во всех образцах посредством интерполяции по стандартной кривой. Результаты представляли собой среднее для двух повторностей. Результаты исследования Результаты проведенного исследования представлены на фиг. 1a, 1b и в таблице ниже. Содержание цитокинов в смывной жидкости пациентов до и после лечения, пг/мл Заключение Проведенное исследование показало, что заявляемая фармацевтическая композиция обладает иммуномодулирующей активностью, проявляющейся в снижении уровня клеток воспаления и провоспалительных цитокинов in vivo, что служит убедительным доказательством эффективности данной фармацевтической композиции для лечения ринитов различной этиологии, в том числе вазомоторных ринитов. Пример 4. Пациент К. Анатолий Викторович, 22 года, амбулаторная карта 1015. Курс терапии фармацевтической композицией: Обострение вазомоторного ринита. На задержку носового дыхания, слизистые выделения из носа. Заболел неделю назад, когда заметил заложенность носа, водянистые выделения из носа. Глазные капли нафтизин, 2 раза в день в течение недели, без терапевтического эффекта. При передней риноскопии: слизистая оболочка носа отечная,отмечается ее сухость, носовые раковины отечные, отделяемое в просвете носового хода слизистое справа и слева, при посеве эозинофилия. Носовое дыхание отсутствует. Фармацевтическая композиция, 3 раза в день, спрей для носа,7 дней. Сопутствующее лечение не проводилось. Заключение Проведение курса терапии фармацевтической композицией обеспечило положительную динамику,которая выразилась в отсутствии признаков воспаления слизистой носа: слизистая носа бледно-розовая,гладкая, сухости нет, носовое дыхание восстановлено. Пример 5. Пациентка П. Полина Аркадьевна, 18 лет, амбулаторная карта 1311. Диагноз: Жалобы при осмотре: Анамнез заболевания: Объективный осмотр: Курс терапии фармацевтической композицией: Хронический инфекционный ринит. На слизисто-гнойные выделения из носа, выраженное снижение функции носового дыхания. Больна около 7 лет, частые рецидивы ринита, периодическое отсутствие носового дыхания. При передней риноскопии: носовая перегородка по средней линии, слизистая оболочка гиперемирована, гнойное отделяемое в просвете носового хода слева и справа. При посеве - золотистый стафилококк. Фармацевтическая композиция, 3 раза в день, капли для носа,5 дней. Три повторных курса с перерывами в 7 дней. Сопутствующее лечение не проводилось. Состояние пациентки после окончания курса лечения. Терапия с использованием фармацевтических композиций обеспечила отсутствие жалоб пациента; отсутствие гнойного отделяемого из полости носа; значительное улучшение носового дыхания; отсутствие рецидивов ринита в течение 6 месяцев после окончания лечения. Пример 6. Пациентка Н. Людмила Игоревна, 49 лет, амбулаторная карта 1043. Диагноз: Жалобы при осмотре: Анамнез заболевания: Предшествующее лечение: Объективный осмотр: Курс терапии фармацевтической композицией: Сухой передний ринит. Затруднение носового дыхания, периодическая заложенность носа с одной и с другой стороны, усиливающаяся ночью. Работает на химическом предприятии около 20 лет, работа связана с действием профессиональных вредностей: аммиак, соляная и азотная кислота. Жалобы на задержку носового дыхания около 15 лет. Периодически применяет сосудосуживающие, антибактериальные капли для носа или спреи, облепиховое или ментоловое масло, антибактериальные мази. При передней риноскопии: носовая перегородка по средней линии, слизистая оболочка носа отечная, сухая, носовые раковины отечные, отделяемое в просвете носового хода отсутствует. Фармацевтическая композиция, 3 раза в день, спрей в область носа, 15 дней, затем 1 раз в день в течение 15 дней. Сопутствующее лечение не проводилось.-9 009610 Состояние пациента после окончания курса лечения. Объективный осмотр: На момент осмотра: носовая перегородка по средней линии,слизистая оболочка носа слева и справа не изменена, носовые раковины в пределах нормы, отделяемое в просвете носового хода отсутствует. Функция носового дыхания восстановлена. Терапия фармацевтической композицией: После окончания курса терапии: Вазомоторный ринит, гипертрофия задних концов нижних носовых раковин. На отсутствие носового дыхания в течение 18 лет, чихание по утрам, светло-водянистые выделения из носа (гидрорея). Пользуется нафтизином 15 лет 2-3 раза в день; в месяц - 7-8 флаконов. Риноскопически: носовая перегородка по средней линии, застойные явления в передних концах нижних носовых раковин, отек,цианоз, раковины в форме малины, задние концы буллезно утолщены, прикрывают хоаны на 1/3, носовое дыхание отсутствует. 20.09.2000 г. назначен курс терапии фармацевтической композицией 3 раза в день, спрей в область носа, 14 дней, затем 1 раз в день в течение 14 дней, затем 3 раза в неделю в течение месяца. Сопутствующее лечение не проводилось. На 24.11.2000 г. при передней риноскопии: слизистая розовая,носовые ходы свободны, носовое дыхание не затруднено. Фармацевтическая композиция в условиях доклинических и клинических исследований продемонстрировала высокий терапевтический эффект, обусловленный иммунокорригирующей активностью вследствие регуляции местного иммунитета, в том числе регуляции функции резидентных макрофагов; цитопротекторной активностью вследствие активации метаболизма и биоэнергетики клеток слизистой носа и носоглотки; антибактериальной и противовирусной активностью вследствие иммунокорригирующих эффектов,в первую очередь, за счет повышения уровня интерферонов (ИФН - таблица выше); противовоспалительным и репаративным действием препаратов вследствие регуляции уровня содержания провоспалительных цитокинов; индукцией апоптоза инфицированных клеток, что обеспечивает потенцирование эффектов традиционной антибактериальной и противовирусной химиотерапии; десенсибилизирующим действием вследствие регуляции иммунологической и биохимической фаз аллергической реакции в слизистой носа и носоглотки. Источники информации 1. International consensus reports on diagnosis and management of rhinitis. International rhinitis managementAm. J. Rhinol. - 2000. - Vol. 14. -5. - P. 339-343. 3. Ходяков Н.Д. Острые и хронические неспецифические воспалительные заболевания полости носа. Многотомное руководство по оториноларингологии; 3: 51-84. 4. Рихельманн Г., Лопатин А.С. Рос. ринол., 1994; 4: 33-47. 5. Van Cauwenberge P., Bachert С., Passalacqua С., Bousquet Y., Canonica G.M. et al. Consensus statementon the treatment of allergic rhinitis//Allergy and clinical immunology. - 2000. - Vol. 55. - N 01. - P. 116-134. 6. Энциклопедия лекарств, ежегодный сборник, вып. 10, 2003, Москва, ООО РЛС-2003. 7. Справочник Видаль Лекарственные препараты в России, изд. 8, 2002, Москва, Астрафармсервис. 8. РЛС-Аптекарь, ежегодный сборник, вып. 5, 2003, Москва, ООО РЛС-2003. 9. Крюков А.И., Туровский А.Б. Симптоматическая терапия при рините и фарингите//Consiliumprovisorum, 2001,5, т. 1. 10. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP). РД 64-126-91,Москва, ФК, 1992. 11. Проблемы нормы в токсикологии (под ред. проф. И.М. Трахтенберга), Москва, Медицина, 1991.- 10009610 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицината лития (тетралитиевой соли дисульфидглутатиона) со стабилизированной дисульфидной связью в качестве средства для профилактики и лечения ринитов различной этиологии. 2. Способ получения средства для профилактики и лечения ринитов различной этиологии, включающий окисление исходного соединения - восстановленного глутатиона (-L-глутамил-L-цистеинилглицина) - перекисью водорода в присутствии водного аммиака путем перемешивания водного раствора исходного вещества и указанных реагентов в течение 20-35 мин при 18-25 С и pH 8; выделение свободного гексапептида (бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицина) путем подкисления раствора ледяной уксусной кислотой до pH 5; перевод окисленной формы свободного гексапептида в тетралитиевую соль путем обработки его водного раствора водным раствором LiOH; фильтрацию полученного после окисления раствора под вакуумом; стабилизацию дисульфидной связи гексапептида путем облучения реакционного раствора с помощью аппарата для ультрафиолетового облучения; выделение конечного продукта методом лиофильной сушки. 3. Фармацевтическая композиция для профилактики и лечения ринитов различной этиологии,включающая бис-(-L-глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития (тетралитиевую соль дисульфидглутатиона), сульфат цинка, перекись водорода, адреналин и воду для инъекций при следующем их соотношении, мас.%: бис-(-L-Глутамил)-L-цистинил-бис-глицинат лития(тетралитиевая соль дисульфидглутатиона) 0,5-7,0 Сульфат цинка 0,02-0,8 Перекись водорода 0,01-0,5 Адреналин 0,001-0,1 Вода для инъекций Остальное 4. Фармацевтическая композиция по п.3, характеризующаяся тем, что выполнена в виде капель для носа или спрея для носа. 5. Способ профилактики и лечения ринитов различной этиологии, характеризующийся тем, что фармацевтические композиции по пп.3 и 4 применяют 2-6 раз в день, по мере купирования воспалительного процесса число введений лекарственного препарата уменьшают до 2-3 раз в день, курс лечения продолжают до исчезновения симптомов заболевания. Результаты исследования Назальная цитология Количество клеток воспаления (эозинофилов (фиг. 1a) и нейтрофилов (фиг. 1b до и после лечения заявляемой фармацевтической композицией