Соль морфин-6-глюкуронида

008212 Данное изобретение относится к соли морфин-6D-глюкуронида (M6G; см. фиг. 1) с повышенной стабильностью и к применению этой соли в качестве лекарственного средства, в частности в качестве аналгезирующего средства.M6G представляет собой метаболит морфина, который, как известно, является более мощным аналгезирующим средством, чем сам морфин, и к тому же имеет меньше побочных эффектов. Способы получения M6G описаны в WO 93/03051, WO 93/05057, WO 99/58545 и WO 99/38876. Хотя M6G в форме свободного основания стабилен при хранении при -20 С, он разлагается при хранении при комнатной температуре. На разложение указывает не только увеличение обнаруживаемых продуктов разложения, но и заметное изменение цвета соединения. Это ограничивает срок храненияM6G в форме свободного основания при температуре окружающей среды. Теперь обнаружено, что бромисто-водородная соль M6G (M6G.HBr) необычайно стабильна по сравнению с M6G в форме свободного основания и с другими солями M6G, в частности с гидрохлоридом(M6G.HCl) и сульфатом (M6G2.H2SO4). M6G.HBr показала очень ограниченную степень разложения и отсутствие изменения цвета после хранения при комнатной температуре в течение шести лет (см. пример 1 ниже). Согласно изобретению предложена бромисто-водородная соль M6G (M6G.HBr). Способы получения M6G.HBr описаны в примерах 2 и 3 ниже.M6G.HBr может быть использована в качестве лекарственного средства, в частности в качестве аналгезирующего средства, например для лечения острой и хронической ноцицептивной боли (такой как послеоперационная боль, боль, связанная со злокачественными и незлокачественными заболеваниями) и невропатической боли от умеренной до сильной.M6G.HBr можно вводить любым подходящим путем, например в виде твердого препарата (например для перорального введения, сухой порошковой ингаляции), в виде препарата в форме раствора (например для внутривенного (включая инфузию для РСА (аналгезия, контролируемая пациентом, подкожного, интраназального или сублингвального введения, или в виде трансдермального препарата (например путем простой диффузии или посредством усовершенствованных электрофоретических методов). Трансдермальное введение фармацевтически приемлемых солей M6G, образованных присоединением кислоты, описано в US 5705186. Согласно изобретению предложена также фармацевтическая композиция, содержащая эффективное аналгезирующее количество M6G.HBr вместе с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем. Эффективное аналгезирующее количество M6G.HBr варьирует в зависимости от пути введения и от таких факторов, как возраст, пол, масса и состояние субъекта, которому вводят лекарственное средство,и от типа состояния, которое лечат. Как правило, подходящая доза для острого состояния будет меньше,чем для хронического состояния. Подходящая доза находится в пределах 1-1000 мг/70 кг, предпочтительно 1-200 мг/70 кг, более предпочтительно в пределах 5-75 мг/70 кг. Предпочтительная доза для применения при остром состоянии находится в пределах 5-75 мг/70 кг. Предпочтительная доза для применения при хроническом состоянии находится в пределах 30-500 мг/70 кг. Дозировка для путей введения, при которых биодоступность высокая (например при внутривенном, подкожном, интраназальном, сублингвальном введении) будет ниже, чем для путей введения, при которых биодоступность низкая (например при пероральном введении).M6G.HBr можно также применять для симптоматического лечения нарушения дыхания у пациентов с прогрессирующим раком. Можно использовать любой подходящий путь введения, но предпочтительным путем является ингаляция распыленного M6G.HBr. Эффект введения распыленного M6G.HBr описан Quigley с соавторами (в J. pain symptom Manage., Letters, Vol. 23, No.1 (2002), pages 7-9). Дозировка M6G.HBr, эффективная для лечения нарушения дыхания у субъекта с прогрессирующим раком,варьирует в зависимости от пути введения и от таких факторов, как возраст, пол, масса и состояние субъекта, которому вводят лекарственное средство. Подходящая доза находится в пределах 1-200 мг/70 кг, предпочтительно в пределах 5-75 мг/70 кг. Согласно изобретению предложен также способ получения M6G.HBr, включающий: (1) приведение в контакт раствора бромистого водорода с раствором M6G в метаноле; (2) приведение в контакт раствора, полученного на стадии (1), с органическим растворителем до осаждения M6G.HBr; и (3) выделениеM6G.HBr, осажденного на стадии (2). Предпочтительно растворы и растворитель имеют температуру -15 С или ниже. Это минимизирует образование продуктов разложения. Предпочтительно осажденный M6G.HBr промывают до минимизации количества присутствующего органического растворителя. Например, осажденный M6G.HBr можно промыть диэтиловым эфиром. Предпочтительным органическим растворителем является 2-пропанол. Согласно предпочтительному способу охлажденный разбавленный раствор HBr добавляют к непрерывно перемешиваемому, охлажденному (до по меньшей мере -15 С) раствору M6G в метаноле. Затем добавляют 2-пропанол (или другой подходящий органический растворитель) и полученную суспензию-1 008212 выдерживают при температуре ниже -15 С при непрерывном перемешивании. После перемешивания суспензии полученные кристаллы отфильтровывают и промывают подходящим растворителем (например 2-пропанолом или диэтиловым эфиром) и сушат подходящим способом (например в вакууме при комнатной температуре). Приведенные ниже примеры 1 и 2 относятся к стабильности солей M6G при комнатной температуре и к способам получения солей M6G соответственно. В табл. 1 приведены данные по стабильности протестированных солей M6G, и на фиг. 1 показана химическая структура M6G и идентифицированных продуктов разложения. Пример 3 относится к стабильности солей и M6G в форме свободного основания при 25C/60%RH (RH - относительная влажность), 40C/75%RH и при 60 С. В табл. 2-4 приведены данные, относящиеся к примеру 3. Пример 1. Стабильность солей M6G при комнатной температуре через 6 лет Аналитическое исследование методом ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография): Образцы гидрохлорида M6G (M6G.HCl) (205-2056), сульфата M6G (M6G2.Н 2SO4) (205-2060) и бромисто-водородной соли M6G (M6G.HBr) (205-2059) хранили при комнатной температуре в течение почти 6 лет, а затем анализировали методом ВЭЖХ. Результаты показаны в табл. 1 вместе с результатами ВЭЖХ анализа образцов, полученных в аналогичных условиях несколькими месяцами раньше. Результаты:HN-67002 и HN-67003 (которые являются типичными продуктами окисления) увеличились до 1,3 и 2,1% соответственно. Содержание HN-33177, синтетической примеси M6G, осталось неизменным. Однако на хроматограмме имеется 17 пиков, которые не могут быть идентифицированы по времени задержки. В сумме эти примеси занимают 9,2% площади.HN-67002 и HN-67003 увеличилось до 1,1 и 1,8% соответственно. Содержание HN-33177 не изменилось. Однако на хроматограмме имеется 13 пиков, которые не могут быть идентифицированы по времени задержки. В сумме эти примеси занимают 10,7% площади с доминирующим пиком при 23,5 мин (6,55% площади).M6G.HBr (205-2059): Содержание M6G совсем не снизилось, а содержание HN-67002 (0,5%) и HN67003 (0,2%) значительно ниже, чем в образцах, рассмотренных выше. На хроматограмме имеется только 4 дополнительных пика. Ни один из этих пиков не занимает больше 0,4% площади. Эти результаты лучше, чем результаты, полученные для двух других протестированных солей. Выводы: Бромисто-водородная соль M6G подвергается очень ограниченному разложению и не меняет цвет после хранения в течение шести лет при комнатной температуре по сравнению со свободным основанием и другими протестированными солями. Таким образом, бромисто-водородная соль M6G имеет повышенную стабильность при комнатной температуре по сравнению с гидрохлоридом M6G и сульфатомM6G. Пример 2. Получение бромисто-водородной соли M6G и сульфата M6G Получение Q 3169 (M6G.HBr, 304-4428): 4,99 г M6G.2H2O растворяли в 11 мл метанола и охлаждали до -15 С. 1,16 мл HBr (48% в воде) разбавляли 0,85 мл метанола и охлаждали до -15 С и медленно добавляли к раствору M6G. Получали прозрачный, очень вязкий, бледно-желтый раствор. Этот раствор перемешивали в течение 5 мин, после чего добавляли 100 мл 2-пропанола (-15 С). Продукт сразу выпадал в осадок. Суспензию перемешивали в течение 3,5 ч при -20 С, кристаллы отфильтровывали, промывали 37,5 мл холодного 2-пропанола (-20 С) и сушили при комнатной температуре в высоком вакууме. Выход составил 5,61 г. Получение Q 3195 (M6G2.H2SO4, 304-4429): 5,02 г M6G.2H2O растворяли в 11 мл метанола и охлаждали до -15 С. 0,35 мл H2SO4 (96%) разбавляли 0,85 мл метанола, охлаждали до -15 С и медленно добавляли к раствору M6G. Получали прозрачный, очень вязкий, бледно-желтый раствор. Этот раствор перемешивали в течение 5 мин, после чего добавляли 100 мл 2-пропанола (-15 С). Продукт сразу выпадал в осадок. Суспензию перемешивали в течение 3,5 ч при -20 С, кристаллы отфильтровывали, промывали 37,5 мл холодного 2-пропанола (-20 С) и сушили при комнатной температуре в высоком вакууме. Выход составил 5,36 г. Пример 3. Стабильность солей M6G после 1 месяца при 60 С и 3 месяцев при 25 С/относительной влажности 60% и 40 С/относительной влажности 75% Приведенные ниже аналитические данные свидетельствуют о том, что стабильность бромистоводородной соли выше, чем у всех других оцениваемых солей, и к тому же эта соль более стабильна, чем морфин-6-глюкуронид в форме свободного основания. Данные демонстрируют, что бромистоводородная соль стабильна при хранении при 25C/60%RH и 40C/75%RH в течение 3 месяцев и при 60 С в течение 1 месяца. Свободное основание кажется относительно стабильным в условиях хранения 25C/60%RH через три месяца, но проявляет признаки разложения при 40C/75%RH через 3 месяца и при 60 С через 1 месяц.-2 008212 Все другие соли проявляют какую-либо форму разложения при 25C/60%RH и при повышенных температуре и влажности. Соль сульфат морфин-6-глюкуронида наименее стабильна при 25C/60%RH, тогда как гидрохлорид морфин-6-глюкуронида наименее стабилен при 40C/75%RH, когда он показывает самый большой уровень разложения из всех солей. Введение Различные соли и морфин-6-глюкуронид в форме свободного основания хранили при 25C/60%RH и 40C/75%RH в течение 3 месяцев и при 60 С в течение 1 месяца. Аналитическое тестирование включало:визуальную оценку внешнего видаопределение содержания воды (мас.%) анализом Карла Фишераколичественный анализ (мас.%) и определение родственных веществопределение цвета раствора УФ-спектрофотометрией(спектрофотометрический анализ в ультрафиолетовой области спектра). Результаты, полученные для каждого теста, были использованы для оценки стабильности различных солей и свободного основания. Методики экспериментов Материалы Определение характеристик тестируемых образцов, описание образцов Шесть различных солей морфин-6-глюкуронида были получены из морфин-6-глюкуронида в форме свободного основания: бромисто-водородная соль (HBr), сульфат (H2SO4), фосфат (Н 3 РO4), гидрохлоридHBr соль была получена способом, описанным в примере 2. Единственное отличие заключалось в том, что после фильтрации 2-пропанольной суспензии твердое вещество затем промывали три раза диэтиловым эфиром, после чего сушили в вакууме при комнатной температуре. Эту дополнительную стадию использовали для удаления из соли максимально возможного количества 2-пропанола. Другие неорганические соли (сульфат, фосфат, гидрохлорид) были получены аналогичным способом, т.е. путем добавления соответствующей кислоты к охлажденной перемешиваемой суспензии морфин-6-глюкуронида в форме свободного основания в метаноле, растирания полученного раствора с охлажденным 2-пропанолом до образования суспензии и последующего непрерывного перемешивания при низкой температуре. После фильтрации твердое вещество промывали диэтиловым эфиром, а затем сушили при комнатной температуре при пониженном давлении. Малеат и фумарат были получены путем добавления соответствующей кислоты при перемешивании при комнатной температуре к водному раствору морфин-6-глюкуронида в форме свободного основания до полного растворения всего вещества. Затем этот раствор сушили сублимацией с получением целевого твердого вещества. Для получения каждой соли использовали одну и ту же партию морфин-6-глюкуронида в форме свободного основания. Эта партия была синтезирована и проверена для подтверждения идентичности,химической и микробиологической чистоты. Все полученные соли были протестированы для подтверждения внешнего вида, количественного анализа образцов (мас.%) методом ВЭЖХ, подтверждения наличия корректного противоиона, содержания воды (мас.%) анализом Карла Фишера, анализа остаточного растворителя газовой хроматографией(ГХ) и определения цвета раствора путем измерения УФ поглощения при 420 нм, 5% раствора по массе. Каждое тестируемое вещество до направления на проверку стабильности хранили при температуре 2-8 С. Каждое вещество подразделяли на аликвоты по 900 мг, переносили в коричневые непрозрачные пластиковые флаконы из ПЭВП (полиэтилен высокой плотности) и перед герметизацией продували аргоном. Подготавливали достаточное количество образцов для каждой временной точки, а также запасные образцы для каждых из условий хранения. Образцы помещали в соответствующие инкубаторы, предварительно настроенные на условия хранения 25C/60%RH, 40C/75%RH и 60 С. Эталонные вещества хранили в надежно защищенных условиях при -20 С или ниже до тех пор, пока они не требовались для тестирования. Методы Образцы хранили для анализа согласно следующей таблице:X = внешний вид, содержание воды по результатам анализа Карла Фишера, количественный анализ и родственные вещества и цвет по результатам УФ/видимой спектрофотометрии (спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой области спектра). Методики тестирования Тест на идентичность, содержание и примеси Тестирование проводили в двух повторах (2 х 25 мг) ВЭЖХ анализом, показывающим стабильность. Результаты анализа представлены для самого M6G, для безводного M6G, для вещества без растворителя и для безводного вещества без растворителя, скорректированные для солевой формы с использованием релевантного коэффициента пересчета.-4 008212 Содержание воды по результатам анализа Карла Фишера Содержание воды определяли в двух повторах в аликвоте уравновешенного вещества (приблизительно 100 мг) с использованием титратора Tritrino 720 KFS. Цветность по данным спектрофотометрии в видимой области спектра Готовили раствор тестируемого вещества в воде с концентрацией 5% мас./об. и измеряли поглощение при 420 нм в кварцевой кювете 1 см с использованием видимого/УФ спектрофотометра Unicam UV4. Результаты Результаты показаны в табл. 2-4. Обсуждение После хранения в течение 3 месяцев при 25C/60%RH бромисто-водородная соль, гидрохлорид,фосфат и свободное основание остались в виде белых кристаллических твердых веществ, а другие соли показали различные степени цветности. Однако после хранения при 40C/75%RH в течение того же периода времени все соли (за исключением бромисто-водородной) и свободное основание по внешнему виду имели признаки пожелтения. Изменение внешнего вида отражено результатами по цвету раствора,который усиливается по мере того, как желтый цвет твердого вещества становится более интенсивным. Общая тенденция по влагосодержанию такова: чем выше влажность при хранении, тем больше влагосодержание в образцах. Однако исключением является свободное основание, в котором влагосодержание является достаточно постоянным независимо от условий хранения. Из солей самое большое изменение влагосодержания происходит у фосфата (увеличение примерно на 8% при 40C/75%RH по сравнению с исходным). Аналитические данные за 3 месяца указывают на некоторые интересные тенденции. Самыми стабильными веществами (на основе значений мас.%, полученных в результате количественного анализа) являются бромисто-водородная соль, свободное основание и фосфат. Следует отметить, что причиной того, что значения, полученные в результате количественного анализа фосфата, высоки на протяжении всего исследования (около 110%5%), является то, что имелись некоторые проблемы при получении этой соли. Эти проблемы привели к тому, что вещество представляло собой смесь фосфат/свободное основание в соотношении приблизительно 10,8:1. Содержание малеата и фумарата снижается примерно на 10% после 3 месяцев при 40C/75%RH по сравнению с исходными значениями. Интересно, что содержание гидрохлорида незначительно снижается после 3 месяцев хранения при 25C/60%RH (около 6% по сравнению с исходным), однако резко снижается после 3 месяцев хранения при 40C/75%RH (снижается приблизительно на 34% по сравнению с исходным). Фактически, это снижение больше, чем снижение,наблюдаемое для сульфата, который, как считалось только на основании данных после хранения в течение 1 месяца, является самой нестабильной солью. Низкое значение содержания, наблюдаемое после 3 месяцев хранения при 40C/75%RH, может быть связано с разрушением кристаллической формы при высокой влажности и, в результате, с высокой степенью разложения. Это разложение отражено количеством продуктов разложения, наблюдаемых в этом образце (всего около 54,5%). Даже после 3 месяцев хранения при 40C/75%RH увеличения количества продуктов разложения в бромисто-водородной соли по результатам ВЭЖХ практически нет. При тех же условиях имеет место увеличение приблизительно на 3% количества продуктов разложения свободного основания. Уровни разложения сходны для фумарата и малеата и несколько ниже для фосфата. Наименее стабильными солями являются сульфат и гидрохлорид, причем при 25C/60%RH гидрохлорид более стабилен, чем сульфат, а при 40C/75%RH наоборот. Выводы Полученные результаты показывают, что бромисто-водородная соль более стабильна, чем все другие соли и свободное основание. В целом, приведенные данные предполагают следующую последовательность по стабильности: Бромисто-водородная соль свободное основание фосфат/малеат/фумарат сульфат/гидрохлорид-5 008212 Таблица 1. Данные по стабильности солей M6G, которые хранились при температуре окружающей среды по примеру 1 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Бромисто-водородная соль морфин-6D-глюкуронида (M6G.HBr). 2. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное аналгезирующее количество M6G.HBr вместе с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем. 3. Фармацевтическая композиция, содержащая M6G.HBr в количестве, эффективном для лечения нарушения дыхания у субъекта с прогрессирующим раком, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем. 4. Применение M6G.HBr в качестве лекарственного средства. 5. Применение M6G.HBr в изготовлении лекарственного средства для лечения боли. 6. Применение по п.5 для лечения боли от умеренной до тяжелой при острых или хронических заболеваниях. 7. Применение M6G.HBr в изготовлении лекарственного средства для нарушения дыхания у субъекта с прогрессирующим раком. 8. Способ лечения боли, включающий введение субъекту эффективного аналгезирующего количества M6G.HBr. 9. Способ лечения нарушения дыхания у субъекта с прогрессирующим раком, включающий введение этому субъекту M6G.HBr в количестве, эффективном для ослабления нарушения дыхания. 10. Способ получения M6G.HBr, включающий:(1) приведение в контакт раствора бромистого водорода с раствором M6G в метаноле;(2) приведение в контакт раствора, полученного на стадии (1), с органическим растворителем до осаждения M6G.HBr и(3) выделение M6G.HBr, осажденного на стадии (2). 11. Способ по п.10, при котором растворы и растворитель имеют температуру -15 С или ниже.-9 008212 12. Способ по п.10 или 11, дополнительно включающий промывку осажденного M6G.HBr для минимизации количества присутствующего органического растворителя. 13. Способ по п.12, при котором осажденный M6G.HBr промывают диэтиловым эфиром. 14. Способ по любому из пп.10-13, при котором органический растворитель на стадии (2) представляет собой 2-пропанол.