Комбинационная терапия для лечения резистентной депрессии

1 Настоящее изобретение относится к областям фармакологии, медицины и лекарственной химии и обеспечивает способы лечения пациентов с резистентной депрессией или реагирующих частично. В последнее время депрессия, в своих многочисленных вариантах, стала более очевидной для обычного населения, чем ранее. Теперь ее признают предельно вредным расстройством,таким, которое причиняет страдания неожиданно большой части населения. Экстремальным симптомом депрессии является суицид, но миллионы людей испытывают не столь сильные страдания, живут с ощущением несчастья и частичной или полной бесполезности и своим страданием приносят страдания своим семьям. Прорывом в лечении депрессии было введение флуоксетина, ингибитора повторного поглощения серотонина (SRI), и теперь депрессивные состояния можно диагностировать и лечить с большей вероятностью, чем всего десять лет тому назад. Депрессия часто связана с другими заболеваниями и состояниями или является следствием других состояний. Например, она связана с болезнью Паркинсона, ВИЧ-инфекцией, болезнью Альцгеймера и злоупотреблением анаболических стероидов. Депрессия также может быть связана со злоупотреблением каким-либо веществом или поведенческими проблемами в результате или в комбинации с повреждением головы, умственной отсталостью или ударом. Несмотря на перспективную природу селективных ингибиторов повторного поглощения серотонина при лечении депрессии, многие пациенты, страдающие от обширной депрессии, не реагируют или реагируют лишь частично на лечение при помощи SRI или другие традиционные способы лечения депрессии, включая использование более старых трициклических агентов. Настоящее изобретение направлено на это, предлагая способы лечения пациентов,страдающих от резистентной депрессии, или реагирующих частично. Кроме того, так как часто проходит значительный период времени до появления терапевтического эффекта лечения посредством SRI, настоящее изобретение дает терапевтическую выгоду, обеспечивая способы лечения депрессии с более быстрым началом действия при ослаблении вредных последствий, часто связанных с лечением обычными антидепрессантами. Данное изобретение обеспечивает способ лечения пациента, страдающего от резистентной(обширной) депрессии или восприимчивого к ней,включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента оланзапина или его фармацевтически приемлемой соли, который является атипичным антипсихотическим средством, в комбинации с эффективным количеством второго компонента - флуоксетина или его фармацевтически приемлемой соли, ко 004539 2 торый является ингибитором повторного поглощения серотонина. В дополнение к этому, данное изобретение обеспечивает способ лечения пациента, частично реагирующего на лечение депрессии, который включает введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента оланзапина или его фармацевтически приемлемой соли, который является атипичным антипсихотическим средством, в комбинации с эффективным количеством второго компонента флуоксетина или его фармацевтически приемлемой соли, который является ингибитором повторного поглощения серотонина. Кроме того, данное изобретение обеспечивает способ ослабления вредных последствий,связанных с лечением пациента, страдающего от резистентной депрессии или восприимчивого к ней, который включает введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента - оланзапина или его фармацевтически приемлемой соли, который является атипичным антипсихотическим средством, в комбинации с эффективным количеством второго компонента - флуоксетина или его фармацевтически приемлемой соли, который является ингибитором повторного поглощения серотонина. Под термином "частичная реакция" понимают улучшение менее чем на 50%, по HAMD21 или шкале оценки депрессии по Монтгомери-Асберг (Montgomery-Asberg Depression Rating Scale), предпочтительно от примерно 1 до примерно 49%, более предпочтительно от примерно 10 до примерно 49%, наиболее предпочтительно от примерно 15 до примерно 49%. Термин "ослабление" означает снижение количества, тяжести или частоты побочных эффектов или вредных последствий, связанных с лечением депрессии обычными антидепрессантами, включая трициклические агенты и SRI,если такие продукты применяют при дозировке,которая оказывает благотворные эффекты на симптомы болезни. Термин "активация" обозначает возбуждение. Термин "половая дисфункция" обозначает расстройство или изменение в характере половой реакции человека (фаза возбуждения, фаза плато, фаза оргазма и фаза расслабления), Masters и др., Human Sexual Response, Little Brownand Company, Boston, 1966 и Human Sexual Inadequacy, Little Brown and Company, Boston,1970. Включены расстройства, относящиеся к эректильной реакции у самцов млекопитающих,и половые позывы и половые рефлексы (возбуждающие и оргазменные) у самцов и самок млекопитающих, такие как пониженное либидо,эректильная дисфункция, замедленная эякуляция и отсутствие оргазма. В этом документе все температуры указаны в градусах Цельсия и все количества, соотношения количеств и концентрации приведены 3 в весовых единицах, если не указано подругому. Соединения В общих выражениях, первый компонент настоящего изобретения является соединением,которое действует как атипичное антипсихотическое средство. Существенным отличительным признаком атипичного антипсихотического средства по сравнению с типичным антипсихотическим средством, таким как галоперидол, являются менее острые экстрапирамидальные симптомы, в особенности, дистонии,связанные с терапией. Клозапин (clozapine),прототип атипичного антипсихотичеcкого средства, отличается от типичных антипсихотических средств следующими характеристиками:(1) большей эффективностью при лечении общей психопатологии у пациентов с шизофренией, не чувствительной к типичным антипсихотическим средствам; (2) большей эффективностью при лечении отрицательных симптомов шизофрении и (3) менее частыми и количественно меньшими повышениями концентраций пролактина в сыворотке, связанными с терапией(Beasley и др., Neuropsychopharmacology, 14(2),111-123 (1996. Атипичные антипсихотиче-ские средства включают, но не ограничиваясь только им: Оланзапин (Olanzapine), 2-мeтил-4-(4 метил-1-пиперазинил)-10H-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин, представляет собой известное соединение и описан в Патенте США 5229382 как полезное средство для лечения шизофрении,расстройства типа шизофрении, острой мании,состояний легкой тревоги и психоза. Патент США 5229382 включен здесь во всей своей полноте в виде ссылки. Аналогично, если данное изобретение рассматривать в широком смысле, второй компонент представляет собой соединение, которое действует как ингибитор повторного поглощения серотонина. Определение активности соединения при данном применении сейчас является стандартным фармакологическим исследованием. Wong и др., Neuropsychopharmacology,8, 337-344 (1993). Многие соединения, включая описанные выше, обладают такой активностью и, без сомнения, еще многие соединения будут идентифицированы в будущем. В практике настоящего изобретения подразумевается, что оно включает ингибиторы повторного поглощения,которые демонстрируют 50% эффективные концентрации около 1000 нМ или менее, как описано в протоколе указанной выше работы Wong. Ингибиторы повторного поглощения серотонина включают, но не ограничиваясь только им: Флуоксетин (Fluoxetine), N-метил-3-(паратрифторметилфенокси)-3-фенилпропиламин,продается в виде соли гидрохлорида и в виде рацемической смеси двух его энантиомеров. Ранней ссылкой на это соединение является Патент США 4314081. 4 В работе Robertson и др., J.Med. Chem., 31,1412 (1988) описано разделение R- и Sэнантиомеров флуоксетина и показано, что их активность в качестве ингибиторов повторного поглощения серотонина одинакова. В данном документе термин "флуоксетин" используют для обозначения любой аддитивной соли кислоты или свободного основания, включая рацемическую смесь и любой из R-и S-энантиомеров. Все патенты США, упомянутые выше в связи с использованными в данном изобретении соединениями, включены здесь в виде ссылок. Предпочтительны комбинации и способы лечения с применением оланзапина в качестве первого компонента и флуоксетина в качестве второго компонента. Особо предпочтительно, когда первый компонент представляет собой оланзапин, и он является полиморфом оланзапина формы II,имеющим типичную картину рентгеновской порошковой дифракции, как представлено следующими межплоскостными расстояниями: Типичным примером рентгеновской дифракционной картины для формы II является следующая, в которой d обозначает межплоскостные расстояния, a I/I1 обозначает типичные относительные интенсивности Приведенные здесь примеры рентгеновской дифракции получены на рентгеновском порошковом дифрактомере Siemens D5000,имеющем медный источник излучения Кa с длиной волны 1=1.541 Кроме того, предпочтительно вводить полиморф оланзапина формы II в виде по существу чистого полиморфа оланзапина формы II. Использованное здесь выражение "по существу чистый" обозначает форму II в сочетании с формой I в количестве менее примерно 5%, предпочтительно менее примерно 2% формы I и еще предпочтительнее менее примерно 1% формы I. Кроме того, "по существу чистая" форма II содержит менее примерно 0,5% сопутствующих веществ, где термин "сопутствующие вещества" обозначает нежелательные химические примеси или остаточный растворитель или воду. В частности, "по существу чистая" формаII должна содержать меньше примерно 0,05% ацетонитрила, более предпочтительно меньше примерно 0,005% ацетонитрила. К тому же, полиморф данного изобретения должен содержать менее 0,5% ассоциированной воды. Полиморф, получаемый способом, описанным в патенте '382, обозначен как форма I и имеет типичную картину рентгеновской порошковой дифракции, по существу такую, как приведенная ниже, полученная на рентгеновском порошковом дифрактомере Siemens D5000, где Типичным примером рентгеновской дифракционной картины для формы I является следующая, в которой d обозначает межплоскостные расстояния, a I/I1 обозначает типичные относительные интенсивности: Приведенные здесь примеры рентгеновской дифракции получены с медным источником излучения Кa, имеющим длину волны 1=1.541. Межплоскостные расстояния в колонке, обозначенной "d", приведены в Ангстремах. В колонке, обозначенной "I/I1", приведены типичные относительные интенсивности. Хотя предпочтительным является оланзапин формы II, следует понимать, что используемый здесь термин "оланзапин" включает все сольваты и полиморфные формы, если специально не указано. Получение 1. Оланзапин технической чистоты В подходящую трехгорлую колбу добавляют следующее: Диметилсульфоксид (аналитический) 6 объемов Промежуточный продукт 1 75 гN-Метилпиперазин (реагент) 6 эквивалентов Промежуточный продукт 1 можно получить, применяя способы, известные специалистам. Например, получение промежуточного продукта 1 описано в указанном выше патенте'382. Для удаления образующегося при реакции аммиака подключают линию для подповерхностного барботирования азота. Реакционную смесь нагревают до 120 С и поддерживают при этой температуре во время протекания реакции. За ходом реакции следят посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии до тех пор, пока останется непрореагировавшим 5% промежуточного продукта 1. По завершении реакции смеси дают медленно охладиться до 20 С (примерно 2 ч). Затем реакционную смесь переносят в подходящую трехгорлую круглодонную колбу и помещают на водяную баню. К этому раствору добавляют при перемешивании 10 объемов метанола реагентной чистоты и перемешивают при 20 С в течение 30 мин. Медленно, примерно за 30 мин, добавляют три объема воды. Реакционную пасту охлаждают до 05 С и перемешивают 30 мин. Продукт отфильтровывают и влажный остаток на фильтре промывают охлажденным метанолом. Влажный остаток сушат в течение ночи в вакууме при 8 45 С. Продукт идентифицируют как оланзапин технический. Выход: 76,7%; чистота: 98,1%. Получение 2. Полиморф оланзапина формы II 270 г образца 2-метил-4-(4-метил-1 пиперазинил)-10 Н-тиено-[2,3-b][1,5]бензодиазепина технической чистоты суспендируют в безводном этилацетате (2,7 л). Эту смесь нагревают до 76 С и выдерживают при 76 С в течение 30 мин. Смеси дают охладиться до 25 С. Полученный продукт выделяют посредством вакуумного фильтрования. Этот продукт идентифицируют как форму II, применяя рентгеновский анализ порошка. Выход: 197 г. Описанный выше способ получения формы II обеспечивает фармацевтически первокласный продукт, обладающий чистотой 97%,с общим содержанием сопутствующих веществ 0,5% и выходом выделенного продукта 73%. Читателю-специалисту понятно, что большинство или все используемые в данном изобретении соединения способны образовывать соли, и что обычно применяют фармацевтические препараты в форме солей, часто потому,что они легче кристаллизуются, и их легче очищать, чем свободные основания. Во всех случаях данного описания предполагается применение описанных выше фармацевтических препаратов в виде солей, что часто предпочтительно,и фармацевтически приемлемые соли всех соединений включены в их названия. Многие соединения, используемые в данном изобретении, представляют собой амины и поэтому реагируют с любыми из многих неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых аддитивных солей кислот. Так как некоторые свободные амины из соединений данного изобретения при комнатной температуре обычно являются маслами, то для простоты обращения и введения предпочтительно перевести эти свободные амины в их фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислот, так как последние при комнатной температуре обычно представляют собой твердые вещества. Кислотами, обычно применяемыми для получения таких солей, являются неорганические кислоты, такие как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и подобные, и органические кислоты,такие как пара-толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота,пара-бромфенилсульфоновая кислота, угольная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота,бензойная кислота, уксусная кислота и подобные. Примерами таких фармацевтически приемлемых солей являются сульфат, пиросульфат,бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, 9 изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацинат,фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6 диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат,лактат, -гидроксибутират, гликолат, тартрат,метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1 сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и подобные. Предпочтительны фармацевтически приемлемые соли, образованные с соляной кислотой, щавелевой кислотой или фумаровой кислотой. Прием препарата Дозировку используемых в данном изобретении лекарственных препаратов должен устанавливать лечащий врач в заключительном исследовании, используя знание лекарственных препаратов, свойства лекарств в комбинации,определенные в клинических испытаниях, и характеристики пациента, включая другие заболевания кроме тех, ради которых врач проводит лечение пациента. Основные принципы дозировки и некоторые предпочтительные дозы могут и будут здесь приведены. Рекомендации по дозировке лекарственных препаратов в комбинации основаны на рекомендациях по дозировке каждого лекарственного компонента. Оланзапин: примерно от 0,25 до 100 мг один раз в день; предпочтительно от 1 до 30 мг один раз в день и наиболее предпочтительно от 1 до 25 мг один раз в день; Флуоксетин: примерно от 1 до 80 мг один раз в день; предпочтительно от примерно 10 до примерно 40 мг один раз в день; для булимии и навязчиво-компульсивного заболевания предпочтительно от примерно 20 до примерно 80 мг/кг один раз в день; В более общих выражениях, можно составить комбинацию настоящего изобретения, выбирая дозировку соединений первого и второго компонентов с учетом приведенных выше рекомендаций. Предпочтительные весовые соотношения оланзапин/флуоксетин включают: 1/5; 6/25; 12,5/25; 25/50; 17,5/50; 25/75. Дополнительную терапию настоящего изобретения осуществляют посредством введения первого компонента вместе со вторым компонентом любым способом, который одновременно обеспечивает эффективные концентрации этих соединений в организме. Все эти соединения, о которых идет речь, можно применять орально и обычно принимают орально, и, таким образом, оральный прием дополнительной комбинации является предпочтительным. Их можно принимать вместе в виде единых дозированных форм или можно принимать отдельно. Однако, оральный способ приема не является единственным и даже единственным предпочтительным способом. Например, для паци 004539 10 ентов, которые забывают или не терпят оральный прием лекарственных препаратов, очень желательным может быть трансдермальное введение. Одно из лекарств можно вводить одним способом, например, орально, а другое в конкретных обстоятельствах можно вводить трансдермально, подкожно, внутривенно, внутримышечно, интраназально или ректально. Способ введения можно менять любым образом, ограничиваясь физическими характеристиками лекарственных препаратов и удобством пациента и ухаживающего. Дополнительную комбинацию можно вводить как единую фармацевтическую композицию, и такие фармацевтические композиции,включающие оба соединения, представляют собой важные варианты настоящего изобретения. Такие композиции могут принимать любую физическую форму, которая приемлема фармацевтически, но особо предпочтительны фармацевтические композиции, принимаемые орально. Такие дополнительные фармацевтические композиции содержат эффективное количество каждого соединения, причем эти эффективные количества соответствуют дневным дозам принимаемых соединений. Каждая дозированная единица дополнительного средства может содержать дневные дозы всех соединений, или может содержать части дневных доз, например,одну треть дневных доз. По-другому, каждая дозированная единица может содержать полную дозу одного соединения и часть дозы других соединений. В таком случае пациент должен принимать ежедневно одну дозированную единицу комбинации и одну или более единиц, содержащих только другие соединения. Количество каждого лекарственного средства, содержащегося в каждой дозированной единице, зависит от особенности лекарственных средств, выбранных для терапии, и других факторов, таких как показание, по которому назначена дополнительная терапия. Инертные ингредиенты и способы составления дополнительных фармацевтических композиций обычные, за исключением присутствия комбинации настоящего изобретения. Здесь можно применять обычные способы составления препаратов, используемые в фармацевтике. Можно применять все обычные типы композиций, включая таблетки, жевательные таблетки,капсулы, растворы, растворы для парентерального применения, интраназальные спреи или порошки, пастилки, суппозитории, трансдермальные пластыри и суспензии. Обычно композиции содержат примерно от 0,5 до 50% соединений от общего количества в зависимости от желательных доз и типа используемой композиции. Однако, количество соединений лучше всего определить как эффективное количество, то есть количество каждого соединения, которое обеспечивает пациенту, нуждающемуся в таком лечении, желательную дозу. Активность допол 11 нительных комбинаций не зависит от природы композиции, так что композиции выбирают и составляют только из соображений удобства и экономии. Любые комбинации можно составить в виде любой требуемой формы композиции. Далее будет приведено некоторое обсуждение различных композиций, а затем представлены некоторые типичные препараты. Капсулы получают, смешивая соединение с подходящим разбавителем и заполняякапсулы подходящим количеством смеси. Обычные разбавители включают инертные порошкообразные вещества, такие как крахмал различных видов,порошкообразная целлюлоза, в особенности кристаллическая и микрокристаллическая целлюлоза, сахара, такие как фруктоза, маннит и сахароза, мука из злаков и подобные годные в пищу порошки. Таблетки получают путем прямого прессования, влажного гранулирования или сухого гранулирования. В их состав обычно входят разбавители, связующие, лубриканты и дезинтегрирующие агенты, а также соединение. Типичные разбавители включают, например, разные типы крахмала, лактозу, маннит, каолин,фосфат или сульфат кальция, неорганические соли, такие как хлорид натрия, и сахарную пудру. Применимы также порошкообразные производные целлюлозы. Типичными связующими таблеток являются такие вещества как крахмал,желатин и сахара, такие как лактоза, фруктоза,глюкоза и подобные. Удобны также природные и синтетические смолы, включая аравийскую камедь, альгинаты, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон и подобные. В качестве связующих могут также служить полиэтиленгликоль, этилцеллюлоза и воски. При получении таблеток необходимы лубриканты для предотвращения таблеток и пуансона от слипания в матрице. Лубриканты выбирают из таких скользких твердых веществ как тальк, стеарат магния и кальция, стеариновой кислоты и гидрированных растительных масел. Дезинтегранты для таблеток представляют собой вещества, которые набухают при увлажнении, разрушая таблетку и выделяя соединение. Они включают крахмалы, глины, целлюлозы, альгинаты и смолы. Более конкретно, можно использовать, например, кукурузный и картофельный крахмалы, метилцеллюлозу, агар, бентонит, древесную целлюлозу, порошкообразную природную губку, катионобменные смолы, альгиновую кислоту, гуаровую смолу, мякоть цитрусовых плодов и карбоксиметилцеллюлозу, а также лаурилсульфат натрия. Часто применяют препараты с энтеросолюбильной оболочкой, чтобы защитить активный ингредиент от высокого содержания кислоты в желудке. Такие препараты готовят, нанося на твердую дозированную форму покрытие из пленки полимера, который не растворяется в кислой среде и растворяется в щелочной среде. 12 Примерами таких пленок являются ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы и ацетатсукцинат гидроксипропилметилцеллюлозы. Препараты, содержащие комбинации, можно готовить в виде композиций с энтеросолюбильной оболочкой или готовить их в виде гранул с энтеросолюбильной оболочкой. Препарат с энтеросолюбильной оболочкой описан в Патенте США 5508276, включенном здесь во всей своей полноте в виде ссылки. На таблетки часто наносят сахар как вкусовой агент и покрытие. Соединения можно также готовить в виде жевательных таблеток, используя в препаратах большие количества приятных на вкус веществ, таких как маннит, что является сейчас установившейся практикой. Сейчас также часто используют препараты в виде быстрорастворимых таблеток, гарантируя, что пациент потребляет дозированную форму и избегает трудностей проглатывания твердых препаратов, которые беспокоят некоторых пациентов. Если требуется применять комбинацию в качестве суппозитория, можно использовать обычные основы. Традиционной основой для суппозиториев является масло какао, которое можно модифицировать, добавляя воски, для небольшого повышения его температуры плавления. Широко используют также смешивающиеся с водой основы для суппозиториев, включая, в частности, полиэтиленгликоли с различными молекулярными весами. Недавно стали популярны трансдермальные пластыри. Обычно они включают смолистую композицию, в которой растворяются или частично растворяются лекарственные препараты, которые сохраняются в контакте с кожей при помощи пленки, защищающей композицию. В последнее время в этой области появилось много патентов. Применяются также другие более сложные композиции для пластырей, в частности, композиции, имеющие мембрану, пронизанную бессчетным количеством пор, через которые закачиваются лекарства посредством осмотического действия. Следующие типичные препараты приведены для демонстрации и информации ученыхфармацевтов. Препарат 1. Получают твердые желатиновые капсулы, используя следующие ингредиенты: Оланзапин Флуоксетин гидрохлорид, рацемический Крахмал, высушенный Стеарат магния Всего 13 Целлюлоза микрокристаллическая Диоксид кремния, белая сажа Стеариновая кислота Всего Компоненты смешивают и прессуют, получая таблетки, каждая весом 465 мг. Активное соединение смешивают с этанолом и смесь добавляют к порции пропелланта 22, охлажденного до -30 С, и переносят в заполняющее устройство. Затем необходимое количество подают в контейнер из нержавеющей стали и разбавляют оставшимся пропеллантом. После этого оснащают контейнер клапаном. Применение данного изобретения Настоящее изобретение обеспечивает преимущество лечения при частичной реакции или резистентной депрессии посредством атипичных антипсихотических средств без сопутствующего увеличения веса, обычно наблюдаемого при подобном лечении, с заметной и неожиданной пользой для пациента. Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает активацию увеличения концентрации допамина и/или норепинефрина, наблюдаемую как эффект от введения первого компонента при введении второго компонента. Кроме того, следует ожидать, что выделение DA в префронтальной коре головного мозга,связанное с антагонизмом 5-HT2 и/или 5-НТ 3 рецепторов, ослабляет расстройство половых функций, обычно связанное с антидепрессантами, такими как SRI. В дополнение к этому, следует ожидать, что обычные SRI-ассоциированные побочные эффекты, такие как тошнота, рвота, диарея, бессонница, изменение веса,головная боль и/или возбуждение, снижаются по частоте/интенсивности на основе фармакологии этой новой комбинации. Исследования моноаминов посредством микродиализа Крысам Sprague-Dawley (Harlan или Charles River) весом 270-300 г имплантируют хирургически зонды для микродиализа под анестезией с применением хлоральгидрата/пентабарбитала (170 и 36 мг/кг внутрибрюшинно, в 30% пропиленгликоле, 14% этаноле) (Perry иFuller, Эффект флуоксетина на концентрацию серотонина и допамина в гипоталамусе крыс после введения флуоксетина с L-5-гидрокситриптофаном, Life Sci. 50, 1683-90 (1992. Используют стереотаксический инструмент Девида Копфа (David Kopf) для односторонней имплантации зонда в гипоталамус с координатами: ростральными - 1,5 мм, латеральными 1,3 мм и вентральными - 9,0 мм (Paxinos и Watson, 1986). Через 48 ч восстановления крыс помещают в большую пластиковую чашу с навесной системой для вращения жидкости (система СМА/120 для свободно передвигающихся животных, Bioanalytical Systems, West Lafayette,IN). Через зонд перфузируют фильтрованную(CSF) (150 мМ NaCl, 3,0 мМ КСl, 1,7 мМ CaCl2 и 0,9 мМ MgCl2) со скоростью 1,0 мл/мин. Трубка, отводящая диализат, подсоединена к клапану колонки для высокоэффективной жидкостной хроматограции с петлей 20 мл. В конце каждого 30 минутного периода подачи диализат, собравшийся в петле, вводят в аналитическую колонку (Spherisorb 3m ODS2, 2 Х 150 mm.Keystone Scientific). Способ, используемый для определения моноаминов, описан Перри и Фуллером (Perry,Fuller) (1992). Кратко говоря, диализат, собравшийся в 20 мл петле, исследуют на 5-НТ, NE иDA. 20 мл инжектируется в колонку с подвижной фазой, которая растворяет NE, DA и 5-НТ: 75 мМ ацетат калия, 0,5 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота, 1,4 мМ натрийоктансульфоновая кислота и 8% метанол, рН 4,9. Подвижную фазу для колонки с аминами доставляют при помощи насоса с программированием потока при начальной скорости потока 0,2 мл/мин, увеличивающейся за 5 мин до 0,3 мл/мин, затем снижающейся обратно до 0,2 мл/мин за 26 мин при общем времени прохода 30 мин. Программирование потока используют для элюирования 5-НТ за 25 мин. Электрохимический детектор (EGG, Model 400) для колонки с аминами устанавливают на напряжение 400 мВ и чувствительность 0,2 нА/В. Базовый уровень измеряют в течение по меньшей мере 90 мин до введения лекарства. Для введения необходимых доз лекарственных препаратов их готовят в фильтрованной деионизированной воде(объем 0,25-0,3 мл). Клинические испытания Эффективность способов настоящего изобретения при лечении резистентной депрессии или для обеспечения более быстрого начала действия лечения депрессии продемонстрирована в клинических испытаниях. В одном таком исследовании продолжительностью 8 недель(двойное слепое исследование) 28 пациентов с диагнозом "не поддающаяся лечению обширная депрессия" были распределены по трем группам с разным лечением: (1) флуоксетин (20-60 мг/день) и плацебо; (2) оланзапин (5-20 мг/день) и плацебо или (3) флуоксетин плюс оланзапин(20-60 мг/день и 5-20 мг/день, соответственно). За эффективностью лечения наблюдали, используя шкалу HAMD-21 (Hamilton M. Journalof Neurology, NeurosurgeryPsychiatry, 1960,23:56-62 и Hamilton M. Разработка шкалы оценки для первичного депрессивного заболевания.British Journal of Social and Clinical Psychology,1967, 6:278-296); шкалу оценки депрессии по Монтгомери-АсбергS.A., Asberg M. Новая шкала оценки депрессии,предназначенная чувствовать изменения. BritishJournal of Psychiatry, 1979, 134:382-389) и шкалу оценки тяжести депрессии Clinical Global Im 15(Guy W. ECDEU Assessment Manual for Psychopharmacology, исправл. изд. US Dept. of Health,Education and Welfare, Bethesda, MD, 1976). Группа, которая принимала оланзапин плюс флуоксетин, чувствовала большее улучшение по обеим шкалам, HAMD-21 и MADRS, чем группы, принимающие монотерапию. При использовании этой комбинации наблюдали также превосходную реакцию (а именно, улучшение на 50% или более от базовой линии). Аналогичные результаты получены с использованием шкалыCGI. Антидепрессивное действие оланзапина плюс флуоксетин становилось очевидным за семь дней от начала лечения. Это существенно раньше, чем обычно наблюдается при монотерапии, использующей только ингибитор поглощения серотонина, при том, что не замечено существенного вредного взаимодействия антипсихотического средства и ингибитора повторного поглощения серотонина. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения пациента, страдающего или восприимчивого к не поддающейся лечению обширной депрессии, включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента, который является оланзапином или его фармацевтически приемлемой солью, в комбинации с эффективным количеством второго компонента, который является флуоксетином или его фармацевтически приемлемой солью. 2. Способ лечения пациента, страдающего или восприимчивого к не поддающейся лечению обширной депрессии, включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента, который является оланзапином, в комбинации с эффективным количеством второго компонента, который является гидрохлоридом флуоксетина. 16 3. Способ по п.1, где препараты вводятся орально. 4. Способ по п.1, где соотношение оланзапина и флуоксетина по весу выбирают из группы, состоящей из 1/5, 6/25, 12,5/25, 25/50,17,5/50 и 25/75. 5. Способ лечения пациента, частично реагирующего на лечение обширной депрессии,включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента,который является оланзапином или его фармацевтически приемлемой солью, в комбинации с эффективным количеством второго компонента,который является флуоксетином или его фармацевтически приемлемой солью. 6. Способ лечения пациента, частично реагирующего на лечение обширной депрессии,включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента,который является оланзапином, в комбинации с эффективным количеством второго компонента,который является гидрохлоридом флуоксетина. 7. Способ по п.5, где препараты вводятся орально. 8. Способ по п.5, где соотношение оланзапина и флуоксетина по весу выбирают из группы, состоящей из 1/5, 6/25, 12,5/25, 25/50,17,5/50 и 25/75. 9. Способ уменьшения вредных последствий, связанных с лечением пациента, страдающего или восприимчивого к не поддающейся лечению обширной депрессии или частично реагирующего на лечение обширной депрессии,включающий введение указанному пациенту эффективного количества первого компонента,который является оланзапином, в комбинации с эффективным количеством второго компонента,который является флуоксетином. 10. Способ по п.9, где препараты вводятся орально. 11. Способ по п.9, где соотношение оланзапина и флуоксетина по весу выбирают из группы, состоящей из 1/5, 6/25, 12,5/25, 25/50,17,5/50 и 25/75.