Применение галоидного производного гидроксимовой кислоты для лечения нейродегенеративных заболеваний

011301 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к применению N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида для лечения нейродегенеративных заболеваний. Предшествующий уровень техники Известно, что нейродегенеративные заболевания являются прогрессирующими, разрушительными,хроническими, ассоциированными с возрастом нарушениями. С увеличением продолжительности жизни частота распространения этих, ассоциированных с возрастом заболеваний будет резко возрастать в последующие десятилетия. Лечение указанных заболеваний в настоящее время является только симптоматическим, каузальная терапия отсутствует из-за наличия в значительной степени неизвестного причинного фактора(ов) этих мультиэтиологических заболеваний. Хотя этиология и фактическая локализация клеточного повреждения и нарушения центральной нервной системы (ЦНС) при этих расстройствах,подобных болезни Альцгеймера (AD), болезни Паркинсона (PD), множественному склерозу (MS), невропатиям, болезни Гентингтона (HD), боковому амиотрофическому склерозу (ALS), могут различаться,существует много общих моментов в развитии заболеваний и во внутриклеточных событиях. Хотя имеется большой прогресс в симптоматическом лечении ряда нейродегенеративных заболеваний, до сих пор существует огромная неудовлетворенная потребность в фармакологическом и биофармакологическом путях лечения, которые будут замедлять и, возможно, останавливать прогрессирование этих заболеваний.AD является наиболее общим нейродегенеративным заболеванием и наиболее общей формой деменции (обуславливающей около 80% всех случаев заболевания). AD характеризуется потерей памяти,ухудшением речи, ухудшением зрительно-пространственных навыков, ухудшением способностей к умозаключениям, индиффрентной позой, но сохраненной двигательной функцией. Симптомы болезни Альцгеймера проявляются сначала в ухудшении памяти и, спустя несколько лет, в расстройстве познавательной способности, разрушении личности и неспособности к деятельности. Также может наступить дезориентация во времени и в пространстве и возбужденное состояние. Амилоидные бляшки и спутывание нейрофибрилл в головном мозге являются отличительными характеристиками заболевания; имеется также утрата нервных клеток в областях головного мозга, которые являются жизненно важными для памяти и других умственных способностей. Заболевание обычно начинается после 60 лет, риск его возникновения увеличивается с возрастом. Хотя молодые люди также могут заболеть болезнью Альцгеймера, это встречается значительно реже. Около 3 процентов мужчин и женщин в возрасте 65-74 года страдают AD и примерно половина из них в возрасте 85 лет и старше может иметь это заболевание. В настоящее время отсутствует метод лечения болезни Альцгеймера, и больные обычно живут около 8-10 лет со времени диагностики заболевания. Существует ряд лекарственных средств на рынке, которые ограниченное время могут помочь предотвратить ухудшение некоторых симптомов. Кроме того,некоторые лекарственные препараты могут способствовать контролю поведенческих симптомов AD. В настоящее время имеется четыре лекарственных средства, получивших одобрение FDA для лечения симптомов от слабого до умеренного AD. Эти лекарственные средства известны как ингибиторы холинэстеразы, которые, как предполагают исследования, действуют, препятствуя расщеплению ацетилхолина, химического вещества головного мозга, считающегося необходимым для памяти и мышления. Хотя ни одно из этих лекарственных средств не останавливает развития самой болезни, они могут помочь задержать или предотвратить появление симптомов, вызывающих ухудшение, в ограниченный период времени и могут помочь поддержанию самостоятельности длительный период времени. При прогрессировании болезни головной мозг вырабатывает все меньше и меньше ацетилхолина, и лекарственные средства могут в конце концов утратить свое действие. Экселон и Реминил являются наиболее удачными и пользующимися спросом лекарствами этого класса (см.: Neurodegenerative Disorders: The worldAm J Geriatr Psychiatry 11: 131-145, 2003). Испытания другого курса лечения AD включают экстракт Ginko biloba как антиоксиданта, но исследования пока не показали четко его эффективности у больных AD. Нестероидные противовоспалительные агенты, тестированные до настоящего момента, оказались неэффективными. Недавно получивший разрешение для применения в Европе Эбикса (Мемантин), неспецифический антагонист NMDA, который продается Merz и Lundbeck, предоставляется как полностью завершенный и соответствующий золотому стандарту курса лечения, Aricept. Клинические испытания показывают положительные результаты до сих пор (Mintzer J.E.: The search for better noncholinergic treatment options forsevere Alzheimer's disease, N Engl J Med 348: 1333-1341, 2003.). Другим до настоящего времени дискуссионным подходом была иммунизация как разработка лекарственных средств, способных уменьшить выработку бета-амилоида, так и очистка амилоидных отложений с помощью иммунизации.PD является вторым по частоте распространения заболевания и важности нейродегенеративным расстройством. Паркинсонизм развивается, когда определенные мозговые клетки в области головного мозга, известные как черное вещество, погибают или повреждаются. Точная причина нейрональной гибели неизвестна, но окислительный стресс и дисфункция митохондриальной цепи электронного транспорта, особенно снижение активности комплекса I, получили широкое признание. Эти нейроны вырабатывают важное химическое вещество, известное как дофамин, химический переносчик, ответственный за передачу сигналов между черным веществом и полосатым телом. Симптомы болезни Паркинсона включают следующие: тремор или непроизвольные и ритмические движения кистей рук, плеч, ног и челюсти, и являются главной особенностью. Классически тремор проявляется, когда индивидуум находится в покое, и снижается при преднамеренном телодвижении; постепенная утрата самопроизвольного телодвижения, которая часто ведет к различным проблемам, таким как скованность, снижение интеллекта или остроты ума, изменения голоса и снижение лицевой экспрессии; мышечная ригидность или тугоподвижность конечностей наблюдается во всех группах мышц, но чаще всего в руках, плечах или шее; постуральная неустойчивость или сутулость, согнутое положение тела с изгибанием в локтевой области, коленных суставах и тазобедренных суставах; постепенная утрата автоматического телодвижения, включая мигание глаз, и снижение частоты глотания; шаткая походка; депрессия и деменция. В настоящее время у больных этим заболеванием имеется большой выбор курсов лечения, и этот ряд будет постоянно расширяться в течение следующих 10-15 лет. Первая эффективная терапия паркинсонизма карбидопой/леводопой (Sinemet-Bristol Myers Squibb) была введена в 1970 г и революционизировала лечение; заболевания. Терапия оказалась очень эффективной в регуляции симптомов, таких как тремор, брадикинезия, равновесие и ригидность. Однако побочные эффекты в виде дискинезии и сниженный эффект при длительном лечении продемонстрировали необходимость альтернативных курсов лечения и/или дополнительных лекарственных средств для компенсирования побочных эффектов. Агонисты дофамина, которые поступили на рынок в 1980-х, заполнили эту потребность. Эти лекарственные средства показали эффективность как регуляторы дофаминового типа и как монотерапия для отсрочки необходимости лечения карбидопой/леводопой больных с недавно диагностированной болезнью Паркинсона. Другие, недавно разработанные курсы лечения, такие как СОМТ-ингибиторы, антихолинергики и селегилин/депренил, также имеют влияние, хотя и менее выраженное, на рынке PD (см. Neurodegenerative Disorders: The world market 2002-207; a Visiongain Report; VISIONGAIN, 2003). Боковой амиотрофический склероз (ALS), иногда называемый болезнью Лy Герига, является быстро прогрессирующим, неизменно летальным неврологическим заболеванием, которое разрушает нервные клетки (нейроны), отвечающие за контроль произвольно сокращающихся мышц. Болезнь представляет собой наиболее распространенное заболевание двигательных нейронов, которое характеризуется постепенной дегенерацией и гибелью двигательных нейронов (Rowland L.P., Schneider N.A.: Amyotrophiclateral sclerosis. N Engl J Med 344: 1688-1700, 2001). Двигательные нейроны являются нервными клетками, локализованными в головном мозге, стволе головного мозга и спинном мозге, которые служат в качестве регулирующих единиц и жизненно важной связи между нервной системой и произвольно сокращающимися мышцами тела. Информация от двигательных нейронов головного мозга (названных высшими двигательными нейронами) передается двигательным нейронам спинного мозга (названных низшими двигательными нейронами) и от них к отдельным мышцам. При ALS как высшие двигательные нейроны, так и низшие двигательные нейроны перерождаются или погибают, прекращая посылать информацию мышцам. Неспособные функционировать мышцы постепенно ослабевают, истощаются (атрофия) и подвергаются судорожному сокращению (фасцикуляции). В конечном счете, способность головного мозга запускать и регулировать произвольное движение утрачивается. Большинство больных ALS умирают от дыхательной недостаточности, обычно через 3-5 лет от начала проявления симптомов. Причина ALS неизвестна. Однако важный шаг в ответе на этот вопрос сделан в 1993 г., когда ученые обнаружили, что мутации в гене, продуцирующем фермент SOD1, были ассоциированы с некоторыми случаями семейного ALS (Rosen D.R. et al.: Mytations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associatedwith familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature, 362: 59-62, 1993). Этот фермент является сильным антиоксидантом, который защищает организм от повреждения, вызванного свободными радикалами. Свободные радикалы являются высоко нестабильными молекулами, вырабатываемыми клетками в процессе нормального метаболизма (главным источником является митохондрион). Если их не нейтрализовать,свободные радикалы могут накапливаться и вызывать случайное повреждение в ДНК, мембранных липидах и белках в клетках. Хотя пока неясно, как мутация в гене SOD1 вызывает дегенерацию двигательных нейронов, исследователи теоретически предсказали, что накопление свободных радикалов может происходить в результате нарушения функционирования этого гена. Хотя существует много различных особенностей, характерных для нейродегенеративных заболеваний, общей особенностью является утрата клеток, постепенная и прогрессирующая дегенерация определенных областей центральной нервной системы. Дисбаланс в продуцировании реактивных видов кислорода (ROS) и нейтрализующей способности усиливается в процессе старения и в довершение этого развиваются нейродегенеративные заболевания. Выше была описана роль SOD в ALS как сильного антиок-2 011301 сиданта, который защищает головной мозг от повреждения, вызванного свободными радикалами. При болезни Паркинсона ROS генерируются автоокислением в процессе нормального метаболизма дофамина или путем действия моноаминоксидазы (Lev N et al.: Apoptosis and Parkinson's disease; Progress in NeuroPsychopharmacology and Biological psychiatry 27: 245-250, 2003). При AD точные события инициации,ведущие к развитию заболевания, являются комплексными, но общепринято, что нейрональная гибель опосредуется частично повреждением, вызванным свободными радикалами (Pratico D. и Delanty N: Oxidative injury in diseases of the central nervous system: Focus on Alzheimer's disease, Am J Med 109: 577-585,2000). В настоящее время только доказательная терапия больных, страдающих ALS, Рилузолом увеличивает выживаемость приблизительно на 3 месяца. (Miller R.G., Mitchell J.D., Lyon M.Moore D. H. Riluzole for amyotrophic lateral sclerosis (ALS/motor neuron disease (MND). Cochrane. Database. Syst. Rev.CD001447 (2002. Поэтому необходимость новых терапевтических стратегий, применяемых для леченияALS, остается бесспорной. Известно из WO 97/16439, что несколько типов производных гидроксиламина усиливают экспрессию шаперонов в клетках, подвергнутых действию физиологического стресса, и используются для лечения заболеваний, связанных с функцией системы шаперонов. Различные новые категории производных гидроксиламина раскрыты в данной патентной публикации. Также определен принадлежащий к известному классу галогенангидридов гидроксимовой кислоты N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси] пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид, но N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1 оксид-3-карбоксимидоил хлорид конкретно не упомянут.N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид впервые раскрыт и заявлен в WO 00/50403 как способный снижать резистентность к инсулину. Как установлено,это полезно при лечении ряда осложнений хронического диабета, особенно ретинопатии, нейропатии и нефропатии, и патологического снижения нейрорегенерации, вызванной диабетом, хотя ослабляет резистентность к инсулину у больного. Химические свойства этого соединения и детали процедуры синтеза этого препарата также описаны в данном документе. Другое использование N-[2-гидрокси-3-(1 пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида в терапии диабета, особенно в терапии диабета типа II (инсулиннезависимого, NIDDM), описано в WO 03/026653. Изобретение, раскрытое в данном описании, относится к перорально применяемой антигипергликемической композиции, содержащей комбинацию метформина и N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3 карбоксимидоил хлорида как активного ингредиента. Значительный антигипергликемический эффект основан на синергизме, происходящем от комбинации двух активных агентов. Ни в одной из патентных публикаций, имеющих отношение к N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3 карбоксимидоил хлориду, не предполагается использование этого соединения помимо терапии диабета. Описание изобретения Было обнаружено, что N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоилхлорид обладает биологическими свойствами, делающими его полезным в терапии нейродегенеративных заболеваний. В исследовательской работе, проведенной на трансгенных мышах mSOD1(G93A), N[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид предотвращал прогрессирующую утрату двигательных нейронов и мышечной функции, которая в норме происходит на этой мышиной модели ALS. Основываясь на вышеуказанном, изобретение обеспечивает новое использование N-[2-гидрокси-3(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида для приготовления фармацевтических композиций для лечения или профилактики нейродегенеративных заболеваний. Предпочтительно изобретение обеспечивает новое использование N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида для приготовления фармацевтических композиций для лечения или профилактики бокового амиотрофического склероза. Далее изобретение обеспечивает способ лечения или предупреждения нейродегенеративных заболеваний, где пациенту вводят терапевтически эффективное количество N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида. Предпочтительно изобретение обеспечивает способ лечения или предупреждения бокового амиотрофического склероза, где терапевтически эффективное количество N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида вводят больному. В отношении изобретения термин N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3 карбоксимидоил хлорид относится к N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3 карбоксимидоил хлориду как к свободному основанию, фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты, образованной с минеральной или органической кислотой, а также к рацемическому соединению и каждому из оптически активных энантиомеров и смесям энантиомеров и фармацевтически пригодных солей оптически активных энантиомеров или смесей энантиомеров. Отмечено, что N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид предпочтительно используют в форме соли присоединения кислоты. Далее отмечено, что оптически активными формами этого соединения предпочтительно являются (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-3 011301 пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид. Более предпочтительными являются соли присоединения кислоты указанного оптически активного энантиомера и более предпочтительно(+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид цитрат. Термин нейродегенеративное заболевание относится к известным типам нейродегенеративных заболеваний, включая боковой амиотрофический склероз (ALS), болезнь Альцгеймера (AD), болезнь Паркинсона (PD), болезнь Гентингтона (HD), множественный склероз (MS) и различные типы невропатий. Лучший способ осуществления изобретения Следующие биологические тесты были проведены с (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид цитратом как с тестируемым соединением. Это химическое соединение будет упоминаться как соединение А. В этой работе были использованы трансгенные мыши mSODl(G93A) обоих полов. Всем экспериментальным животным в возрасте от 35 дней ежедневно вводили соединение А (10 мг/кг, в/б) с последующим режимом, сходным с таковым, ранее описанным Zhy с сотр., 2002 (Zhu S. et al.: Minocycline inhibitscytochrome с release and delays progression of amyotrophic lateral sclerosis in mice. Nature 417, 74-78 (2002. Оценка мышечной функции и числа двигательных единиц Непосредственная in vivo электрофизиологическая оценка мышечной функции задней конечности была выполнена на мышцах-разгибателях digitorum longus (EDL) обеих нижних конечностей для определения степени прогрессирования заболевания. Регистрируют изометрическое напряжение и оценивают число двигательных единиц. Как трансгенных животных, так и однопометных животных дикого типа наркотизировали хлоралгидратом (4% хлоралгидрат; 1 мл/100 г массы тела, в/б) и EDL-мышцы препарировали для оценки in vivo их сократительных свойств и числа двигательных единиц. Дистальные сухожилия EDL-мышц рассекали и прикрепляли к изометрическим силовым датчикам (динамометрическим устройствам UFI) с помощью шелковых нитей. Обе задних конечности жестко закрепляли на столе штифтами. Седалищный нерв выделяли в свободном состоянии и все его ответвления, за исключением нерва к EDL-мышце, перерезали. Дистальный конец нерва затем стимулировали с помощью двухполюсных серебряных электродов. Длина мышцы была установлена до того, как было вызвано максимальное сокращение в ответ на нервную стимуляцию. Изометрические сокращения были вызваны путем стимуляции отрезанного конца двигательного нерва с помощью импульса длительностью 0,02 мс. Тонические судороги были вызваны путем стимуляции EDL-мышцы 40, 80 и 100 Гц в течение 500 мс. Для оценки числа двигательных единиц в каждой мышце двигательные нервы EDL-мышц стимулировали каждые 4 с. Напряженность стимула постепенно повышали для получения ступенчатого приращения судорожных сокращений, как только отдельные двигательные аксоны были рекрутированы. Число ступенчатых приращений подсчитывали для оценивания числа двигательных единиц, присутствующих в каждой мышце (Dick J., Greensmith L.Vrbova G. Blocking NMDA receptors during a critical stageof development reduced the effects of nerve injury at birth on muscles and motoneurones. Neuromuscul. Disord. 5, 371-382 (1995. На основе данных конвульсивного сокращения мы оценивали некоторые характеристики сократительной способности EDL-мышц у обработанных и необработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A),включая период полурелаксации EDL, измерение времени считают для мышцы, которая расслабилась после сокращения. Паттерн утомления Так как EDL в норме является быстрой мышцей, она утомляется быстро, когда проводят длительную стимуляцию для получения характеристического паттерна утомления. Для изучения паттерна утомления EDL в данных экспериментах мышцы в обеих нижних конечностях стимулировали 40 Гц 250 мс каждую секунду в течение 3 мин и регистрировали мышечные сокращения. Гистология мышц В конце эксперимента EDL-мышцы обеих ног выделяли и взвешивали и быстро замораживали в расплавленном изопентане. Мышцы хранили при -80 до обработки для гистологического анализа. Оценка выживаемости двигательных нейронов После завершения физиологических экспериментов выживаемость двигательных нейронов оценивали путем подсчета числа двигательных нейронов в седалищном двигательном пуле в вентральных роговидных отростках поперечного среза поясничного отдела спинного мозга (White СМ., Greensmith L.toxin followed by partial denervation. Neuroscience 95, 1101-1109 (2000. Мышам давали глубокий наркоз(4% хлоралгидрат, 1 мл/100 г массы тела, в/б) и перфузировали транскардиально с фиксатором, содержащим 4% параформальдегид. Спинной мозг выделяли и поясничную область далее фиксировали в течение 2 ч в том же фиксаторе, защищенном от переохлаждения сахарозой (30% в MPB), и замороженные поперечные срезы толщиной 30 мкм нарезали на криостате и помещали на предметные стекла. Затем срезы слегка окрашивали контрастирующим касителем Ниссл (галлоцианин). Число окрашенных по Нисслу двигательных нейронов в обоих вентральных роговидных отростках подсчитывали с помощью-4 011301 светового микроскопа. Для того чтобы избежать подсчета одних и тех же клеток дважды в последовательных срезах, выживаемость двигательных нейронов оценивали в седалищном двигательном пуле в каждом 3-ем срезе поясничного отдела спинного мозга между уровнями L2-L5. Подсчитывали только те нейроны, у которых ядрышки были четко различимы при большом увеличении. Статистический анализ Результаты по всем оцененным параметрам анализировали с использованием U-теста Манна-Витни для сравнения независимых образцов. Двусторонние тесты использовали во всех вариантах, значимость устанавливали при Р 0,05. Результаты В возрасте 35 дней трансгенные мыши mSOD1(G93A) уже показывают микроскопические особенности дегенерации двигательных нейронов поясничного отдела и в возрасте 110 дней обнаруживают паралич задних конечностей. Влияние обработки соединением А на мышечную функцию задней конечности,а также на двигательную единицу и выживаемость двигательных нейронов оценивали в возрасте 120 дней, когда трансгенные мыши mSOD1(G93A) находятся в последней стадии заболевания. Выживаемость двигательных единиц У мышей дикого типа в норме имеется 28+/-0,6 (среднее +/-S.E.M., n=11) двигательных единиц вEDL-мышцах. У трансгенных мышей mSOD1(G93A) в возрасте 120 дней было только 8,3+/-0,7 (среднее +/S.E.M., n=10) двигательных единиц. Однако у трансгенных мышей mSOD1(G93A), обработанных соединением А, наблюдается достоверное улучшение выживаемости двигательных нейронов и 14,3+/-0,6 (среднее +/-S.E.M., n=10) двигательных единиц, выживших в возрасте 120 дней (р=0,003). Характеристика сократительной способности EDL-мышцi) Период полурелаксации EDL-мышц. На основе регистрации данных судорожного сокращения мы также исследовали некоторые характеристики сократительной способности EDL-мышц у обработанных и необработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A). EDL в норме является быстрой, утомляемой мышцей и у мышей дикого типа период полурелаксации EDL, измеренный как время, требуемое для расслабления мышцы после сокращения,составляет 25,8 мс +/-2,4 (среднее +/-S.E.M., n=10). С другой стороны у необработанных мышей период полурелаксации снижен в результате денервации и мышечной атрофии и, как было обнаружено, составляет 43,3 мс +/-6,93 (среднее +/-S.E.M., n=10). Однако у мышей, обработанных соединением А, период полурелаксации был значимо выше и, как было обнаружено, составляет 32,2 мс +/-1,80 (среднее +/S.E.M., n=10), (р=0,0030).ii) Паттерн утомления и индекс утомления EDL-мышц. Так как EDL в норме является быстрой мышцей, она утомляется быстро, когда проводят длительную стимуляцию для получения характеристического паттерна утомления. Паттерн утомления EDLмышц изучали у мышей дикого типа, трансгенных мышей mSOD1(G93A) и обработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A). Снижение напряжения после 3 мин стимуляции измеряли и рассчитывали коэффициент утомления (FI). У трансгенных мышей mSOD1(G93A) в возрасте 120 дней EDL-мышца становится резистентной к утомлению в результате дегенерации двигательных нейронов, денервации и последующих изменений фенотипа мышечного волокна. Таким образом, у трансгенных мышей mSOD1(G93A) в возрасте 120 дней EDL имеет коэффициент утомления 0,255+/-0,04 (среднее + /-S.E.M., n=10), по сравнению с 0,848 +/-0,028 (среднее +/-S.E.M., n=10) у мышей дикого типа. Однако у мышей, обработанных соединением A, EDL имеет коэффициент утомления 0,416 +/-0,007 (среднее +/-S.E.M., n=10). Таким образом,коэффициент утомления EDL был достоверно выше у обработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A) по сравнению с необработанными однопометными животными mSOD1(G93A) (р=0,05). Выживаемость двигательных нейронов После завершения физиологических экспериментов выживаемость двигательных нейронов оценивали путем подсчета числа двигательных нейронов в седалищном двигательном пуле в вентральных роговидных отростках поперечного среза поясничного отдела спинного мозга. В соответствии с наблюдаемым увеличением выживаемости двигательных единиц число выживших двигательных нейронов в седалищном двигательном пуле обработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A) также было достоверно повышено по сравнению с необработанными однопометными животными mSOD1(G93A). У мышей дикого типа было 593 +/-15,8 (среднее +/-S.E.M., n=13) двигательных нейронов в сегменте исследованного седалищного двигательного пула. У необработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A) в возрасте 120 дней достоверное число двигательных нейронов погибает и только 237 +/-14 (среднее +/-S.E.M., n=7) двигательных нейронов выживает. Однако у трансгенных мышей mSOD1(G53A), обработанных соединением А,резко возрастает выживаемость двигательных нейронов до 412 +/-28 (среднее +/-S.E.M., n=4) выживших двигательных нейронов даже в возрасте 120 дней (р=0,002). Эти результаты показывают, что последовательная ежедневная обработка трансгенных мышейmSOD1(G93A) соединением А (10 мг/кг; в/б) приводит к достоверному увеличению как числа двигательных единиц, так и выживаемости двигательных нейронов, а также к улучшению мышечной функции задних конечностей на последних стадиях заболевания (120 дней).-5 011301 Продолжительность жизни Ввиду достоверного повышения числа двигательных единиц и выживаемости двигательных нейронов, наблюдаемого у обработанных трансгенных мышей mSOD1(G93A) в возрасте 120 дней, в отдельных группах мышей мы изучали, влияет ли обработка соединением А на продолжительность жизни трансгенных мышей mSOD1(G93A). Мы обнаружили, что необработанные трансгенные мыши mSOD1(G93A) имеют среднюю продолжительность жизни 125 +/-1,8 (среднее +/-S.E.M., n=18) дней, что определено по неспособности мышей выпрямлять себя, когда их кладут на бок, и по утрате примерно 20% массы тела. Однако в группе, обработанной соединением А, снижение массы тела было замедленным и продолжительность жизни была достоверно выше, и мыши mSOD1(G93A) жили в среднем 153 +/-2,6 (среднее +/S.E.M., n=7) дней. Эти данные свидетельствуют о достоверном увеличении продолжительности жизни на 22% (р=0,001). Вышеуказанные биологические свойства делают N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)-пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид полезным для лечения нейродегенеративных заболеваний. Хотя все виды нейродегенеративных заболеваний могут приниматься во внимание, соединение изобретения особенно полезно для лечения ALS. Доза соединений зависит от состояния и заболевания больного, и ежедневная доза составляет 0,1-400 мг/кг, предпочтительно 0,1-100 мг/кг массы тела. Для терапии человека пероральная ежедневная доза составляет предпочтительно 10-300 мг. Эти дозы применяют в стандартных лекарственных формах, которые могут быть разделены на 2-3 меньших дозы на каждый день в определенных случаях, особенно при пероральном введении. Предпочтительно используют стереоизомер рацемического соединения, более предпочтительно(+)энантиомер. В этом случае меньшее количество активного компонента в указанных выше пределах будет достаточным для лечения. Активное вещество может быть введено в обычные фармацевтические композиции способом, известным в данной области. Эти фармацевтические композиции содержат в дополнение к обычным вспомогательным веществам и носителям, N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3 карбоксимидоил хлорид или один из его стереоизомеров, или соль присоединения кислоты одного из них в качестве активных компонентов. Фармацевтические композиции могут быть получены в форме твердого или жидкого препарата,обычно используемого в терапии. Простые таблетки или таблетки с покрытием, драже, гранулы, капсулы, растворы или сиропы могут быть получены для перорального применения. Эти лекарственные препараты могут быть получены с помощью обычных способов. Продукты могут содержать наполнители,такие как микрокристаллическая целлюлоза, крахмал или лактоза, смазывающие вещества, такие как стеариновая кислота или магния стеарат, материалы для покрытия, такие как сахар, пленкообразующие материалы, такие как гидроксиметилцеллюлоза, ароматические или подслащивающие вещества, такие как метилпарабен или сахарин, или окрашивающие вещества. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение химического вещества, выбранного из N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида, его оптически активного энантиомера или смеси энантиомеров и фармацевтически приемлемой соли оптически активного энантиомера или смеси энантиомеров для получения фармацевтической композиции для лечения или предупреждения нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы. 2. Применение по п.1, где химическим веществом является (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид. 3. Применение по п.2, где химическим веществом является соль (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида. 4. Применение по п.3, где химическим веществом является (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид цитрат. 5. Применение по любому из пп.1-4, где нейродегенеративное заболевание выбрано из бокового амиотрофического склероза, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, множественного склероза и невропатий центральной нервной системы. 6. Применение по п.5, где нейродегенеративным заболеванием является боковой амиотрофический склероз. 7. Способ лечения или предупреждения нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы, где терапевтически эффективное количество химического вещества, выбранного из N-[2 гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида, его оптически активного энантиомера или смеси энантиомеров и фармацевтически приемлемой соли оптически активного энантиомера или смеси энантиомеров вводят пациенту. 8. Способ по п.7, где химическим веществом является (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид. 9. Способ по п.8, где химическим веществом является соль (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил)-6 011301 пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорида. 10. Способ по п.9, где химическим веществом является (+)-R-N-[2-гидрокси-3-(1-пиперидинил) пропокси]пиридин-1-оксид-3-карбоксимидоил хлорид цитрат. 11. Способ по любому из пп.7-10, где нейродегенеративное заболевание выбирают из амиотрофического бокового склероза, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, множественного склероза и невропатий центральной нервной системы. 12. Способ по любому из пп.7-11, где нейродегенеративным заболеванием является боковой амиотрофический склероз.