Парентеральная цисплатиновая эмульсия

1 Область изобретения Настоящее изобретение относится к технологии приготовления цисплатиновой эмульсии с пониженной токсичностью, которая является пригодной для парентерального введения. Предпосылки изобретения Цисплатин означает цис-диаминодихлорплатину (CDDP), представляет собой комплекс тяжелого металла, содержащий центральный атом платины, окруженный двумя атомами хлора, и двумя молекулами аммония в цис-положении. Он является сильнодействующим противораковым лекарственным средством, применяемым в лечении различных твердых опухолей, конкретно, опухолей яичек, яичников и мочевого пузыря. Цисплатин ковалентно связывается с основаниями ДНК и нарушает функционирование ДНК. Цисплатин инактивируется внутриклеточно и в кровотоке сульфгидрильными группами. Патенты US 4302446 (1981) и US 4322391(1982) описывают получение цисплатина в микрокристаллической форме для быстрой растворимости. Патент US 4310515 (1982) описывает способ приготовления стерильного водного раствора цисплатина. Патент US 4915956 (1990) также описывает сходный способ получения стерильного водного раствора цисплатина. Цисплатин является высокотоксичным при введении в виде водного раствора, поражающим почки, костный мозг и уши. Нефротоксичность является главным фактором, ограничивающем дозу, так как 90% цисплатина, что выделяется из тела, удаляется из почки как комбинация клубочковой фильтрации и тубулярной секреции (Physician Desk Reference 53rd edition; 1999). Различные попытки предпринимались для уменьшения нефротоксичности этого лекарственного средства. Эти попытки включают соответствующую гидратацию и поддержание выхода мочи до введения и в течение 24 ч после введения, внутривенное вливание амифостина в дозе 910 мг/м 2 за 30 мин до начала цисплатинового лечения. Тем не менее, обнаружили, что этого недостаточно. Другие попытки уменьшить нефротоксичность цисплатина включают комбинационную химиотерапию, получение аналогов цисплатина,улавливание цисплатина в липосомах и так далее. Цисплатин трудно задержать в липосомах эффективно ввиду его низкой водной растворимости. Более того, трудно стабилизировать препарат липосом, так как сообщалось, что цисплатин не удерживается в липосомном препарате во время хранения (Potkul, et. al. Am. J. Obstet.Eur. J. Cancer 29A(11): 1536-1542; 1993, Weiss,et.al. Drugs 46(3): 360-377; 1993). Главной задачей настоящего изобретения является разработка технологии приготовления цисплатина в качестве эффективного противо 004587 2 опухолевого лекарственного средства, пригодного для парентерального введения людям и другим млекопитающим и в то же время, не такого токсичного, как общепринятые водные растворы. Краткое изложение изобретения Таким образом, настоящее изобретение относится к стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции эмульсии типа масло в воде, имеющей низкую токсичность для парентерального введения, содержащей:a) масляную фазу, выбранную из группы растительных масел, сложных эфиров жирных кислот со средней или длинной цепью, фракционированного или модифицированного масла;c) эмульгаторы, такие как природные фосфатиды, модифицированные фосфатиды, синтетические неионогенные поверхностно-активные вещества;d) модификаторы тоничности, выбранные из группы соединений, таких как глицерин,маннит, декстроза;e) хелатообразователи, выбранные из группы соединений, таких как ЭДТА, дезферриоксаминмезилат; иf) воду. Способ приготовления вышеупомянутой композиции включает диспергирование цисплатина в масляной фазе, приготовление водной фазы с модификатором тоничности, хелатообразователем; доведение рН до 8-11 и эмульгирование двух фаз после добавления эмульгатора или к водной фазе, или к масляной фазе, или к обеим фазам; гомогенизирование эмульсии до размера частицы ниже 2 мкм, поддержание температуры гомогенизированного продукта ниже 25 С; фильтрование, заполнение в стеклянные контейнеры в атмосфере азота, запечатывание заполненных контейнеров и стерилизацию запечатанных контейнеров в автоклаве. Композиция данного изобретения содержит 0,005-0,5 мас.% цисплатина. Предпочтительно, композиция содержит от 0,05 до 0,1 мас.% цисплатина и более предпочтительно,около 0,05% или около 0,1 мас.% цисплатина. Цисплатин диспергируют в масляной фазе перед эмульгированием. Масляная фаза присутствует в количестве, которое равно вплоть до 30 мас.% композиции, предпочтительно от 5 до 25% и, более предпочтительно, около 10% или около 20%. Типично используемая масляная фаза представляет собой растительное масло и может быть одним или несколькими растительными маслами, такими как соевое масло, кунжутное масло, масло семян хлопчатника, сафлоровое масло, подсолнечное масло, арахисовое масло, кукурузное масло, касторовое масло или оливковое масло. Предпочтительно, когда растительное масло является соевым маслом. 3 Альтернативно, масляная фаза представляет собой сложный эфир жирных кислот со средней или длинной цепью, например, моно-, диили триглицерид, или готовое вещество, например, изопропилмиристат, изопропилпальмитат,этилолеат, сложный эфир глицерина или полиоксигидрогенизированное касторовое масло. Масляная фаза может также включать фракционированное масло, например, фракционированное кокосовое масло или модифицированное соевое масло. Композиция данного изобретения может также содержать смесь двух или нескольких вышеупомянутых масляных носителей. Диспергированный в масляной фазе цисплатин эмульгируют при помощи эмульгатора, с получением эмульсии типа масло в воде. Подходящие эмульгаторы включают природные фосфатиды и модифицированные фосфатиды. Природные фосфатиды включают яичный фосфатид и соевые фосфатиды. Альтернативно,эмульгатором могут быть синтетические неионогенные поверхностно-активные вещества,такие как этоксилированные простые и сложные эфиры и сополимеры полиоксиэтилен и полиоксипропилен. Используемый в настоящем изобретении эмульгатор может содержать смесь двух или нескольких вышеупомянутых эмульгаторов. Предпочтительными эмульгаторами являются яичный и соевый фосфатиды. Композицию настоящего иозобретения готовят соответственно, чтобы исключить загрязнение тяжелыми металлами посредством применения хелатообразователей. Хелатообразователи выбрают из этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), производных ЭДТА и десферриоксамин-мезилата или их смеси. В частности,использованным хелатообразователем является двунатриевая ЭДТА. Композицию настоящего изобретения предпочтительно готовят для диапазона рН 6,08,5. рН доводят щелочью, такой как гидроксид натрия или гидроксид калия, или смесью из них. Композицию настоящего изобретения готовят изотоничной с кровью посредством добавления модификатора тоничности, такого как глицерин, маннит, декстроза или смеси из них. Предпочтительным модификатором тоничности является глицерин. Композиции настоящего изобретения являются, в частности, стерильными эмульсиями типа масло в воде и их готовят в соответствии с общепринятыми процедурами приготовления,с использованием асептических способов или окончательной стерилизацией автоклавированием. В главном варианте воплощения изобретения цисплатин диспергируют в масляной фазе. В другом варианте воплощения изобретения тип приготовленной эмульсии представляет собой эмульсию типа масло в воде и цисплатин находится в масляной фазе. 4 В другом варианте воплощения изобретения хелатообразователи используют в эмульсиях для стабилизации эмульсии и предотвращения ее обесцвечивания. В другом варианте воплощения изобретения гомогенизацию выполняют в виде повторяемых циклов, чтобы достичь размера частиц/глобул меньше чем 2 мкм, с промежуточным охлаждением гомогенизированного продукта до температуры менее чем 25 С. Композиция настоящего изобретения дает продукт с пониженной токсичностью, который также пригоден для парентерального использования благодаря малому размеру частиц. Стерильность композиции настоящего изобретения обеспечивают благодаря тому, что продукт стерилизуют конечным автоклавированием. Композицию настоящего изобретения легко использовать в качестве продукта, так как этот продукт может быть растворен 5% инъекционным раствором декстрозы или физиологическим раствором для получения требуемой концентрации для парентерального введения. Композиция настоящего изобретения также имеет продолжительный срок годности и, следовательно, удобна в качестве готового товарного продукта. Примеры Изобретение теперь будет иллюстрировано в виде примеров. Примеры представлены только ради иллюстрации и никак не ограничивают рамки изобретения. Все сырье, используемое в этих примерах,было парентеральной чистоты. Используемое оборудование было обычным. Полную переработку выполняли в зоне с контролируемой окружающей средой. Во время переработки партии обеспечивали азотное покрытие. Пример 1. Композиция:g) Вода до 100%. Масляная фаза - цисплатин диспергировали в фильтрованном соевом масле, предварительно выдержанном при температуре около 70 С. Водная фаза - глицерин и двунатриевую ЭДТА добавляли к воде для инъекции, выдержанной при температуре около 70 С. Яичный фосфатид диспергировали в этом водном растворе и рН доводили до 8-11, используя водный раствор гидроксида натрия. Масляную фазу, приготовленную, как описано выше, добавляли к водной фазе при высокоскоростном перемешивании. Образованную эмульсию пропускали через гомогенизатор высокого давления. Гомогенизацию повторяли до тех пор, пока размер глобулы/частицы был ниже 5 2 мкм. Продукт охлаждали до температуры ниже 25 С немедленно после каждого цикла гомогенизации. Гомогенизированную эмульсию фильтровали и заполняли ею стеклянные контейнеры в атмосфере азота, герметизировали и автоклавировали. Конечный продукт этого примера имел содержание цисплатина 0,5 мг/мл. Пример 2. Композиция, приготовленная в этом примере, имела те же самые ингредиенты, что и в примере 1, за исключением некоторых изменений в количествах некоторых ингредиентов, как показано ниже:iii) двунатриевая ЭДТА 0,05 мас.% Обработку проводили как в примере I. Конечный продукт этого примера имел содержание цисплатина 1 мг/мл. Эмульсию цисплатина типа масло в воде, приготовленную как в примере 1, использовали для исследований токсичности на мышах. Исследование токсичности на мышах Токсичность эмульсии цисплатина типа масло в воде, приготовленной способом, описанным в примере 1, и токсичность водного раствора цисплатина, приготовленного стандартным способом, изучали на мышах. а) Следующие тесты были выполнены и наблюдения представлены в следующей таблице. Цисплатиновая Водный раствор эмульсия типа цисплатина Параметр масло в водеb) Гистопатологическое исследование. Гистопатологические исследования на мышах свидетельствовали о более тяжелых поражениях в почках в группе водного раствора цисплатина, чем в группе эмульсии цисплатина,при исследованиях в эквивалентных дозах.c) Исследование подострой токсичности. В исследованиях подострой токсичности на мышах цисплатиновую эмульсию и цисплатиновый водный раствор вводили интраперитонеально на протяжении периода 14 дней. Были получены следующие данные. Мыши, инъецированные водным раствором цисплатина, обнаруживали 62,5% летальности при дозе 2 мг на кг массы тела и 100% летальности при дозах 4 мг на кг массы тела и выше. 6 Мыши, инъецированные цисплатиновой эмульсией, обнаруживали только 37,5% летальности при дозе 10 мг на кг массы тела. ЛД 50 (средняя летальная доза) (интраперитонеально) Водный раствор цисплатина - 22 мг на кг Эмульсия цисплатина типа масло в воде 50 мг на кг При испытаниях при уровнях дозы цисплатина, изменяющихся в диапазоне от 2 мг на кг до 10 мг на кг массы тела на различные параметры, такие как вес органа, вес тела, потребление пищи, гематологические параметры, токсичность цисплатиновой эмульсии примера 1 обнаруживали только при наивысшей дозе 10 мг на кг, тогда как водный раствор цисплатина обнаруживал токсичность при всех дозах от 2 до 10 мг на кг. Это исследование показывает, что цисплатиновая эмульсия, приготовленная по способу примера 1, является относительно гораздо менее токсичной, чем общепринятый водный раствор цисплатина. Это исследование отчетливо показывает,что эмульсия, изготовленная по способу изобретения, является синергической композицией. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция для парентерального введения в виде эмульсии типа масло в воде,имеющая низкую токсичность и содержащаяa) масляную фазу, выбранную из группы растительных масел, сложных эфиров жирных кислот со средней или длинной цепью, фракционированного или модифицированного масла;c) эмульгаторы, такие как природные фосфатиды, модифицированные фосфатиды, синтетические неионогенные поверхностно-активные вещества;d) модификаторы тоничности, выбранные из группы соединений, таких как глицерин,маннит, декстроза;e) хелатообразователи, выбранные из группы соединений, таких как ЭДТА, десферриоксаминмезилат; иf) воду. 2. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по п.1, отличающаяся тем,что содержание цисплатина составляет от 0,005 до 0,5% от массы композиции. 3. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1 или 2,отличающаяся тем, что содержание цисплатина составляет от 0,05 до 0,1% от массы композиции. 4. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-3, отличающаяся тем, что содержание цисплатина со 7 ставляет приблизительно 0,05% от массы композиции. 5. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-3, отличающаяся тем, что содержание цисплатина составляет приблизительно 0,1% от массы композиции. 6. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-5, отличающаяся тем, что масляная фаза составляет до 30% включительно от массы композиции. 7. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-6, отличающаяся тем, что масляная фаза составляет приблизительно от 10 до 20% от массы композиции. 8. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-7, отличающаяся тем, что масляная фаза представляет собой растительное масло, или фракционированное растительное масло, или модифицированное растительное масло, или сложный эфир жирной кислоты, или их смесь. 9. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-8, отличающаяся тем, что масляная фаза представляет собой соевое масло. 10. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-9, отличающаяся тем, что в качестве хелатообразователя использована двунатриевая ЭДТА. 11. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-10, отличающаяся тем, что содержание двунатриевой ЭДТА составляет приблизительно до 0,1% включительно от массы композиции. 12. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-11, отличающаяся тем, что содержание двунатриевой ЭДТА составляет приблизительно от 0,005 до 0,05% от массы композиции. 13. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-12, отличающаяся тем, что в качестве эмульгатора использован природный фосфатид. 14. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-13, отличающаяся тем, что природный фосфатид представляет собой яичный фосфатид, или соевый фосфатид, или их смесь. 15. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-14, отличающаяся тем, что модификатор тоничности использован в количестве, достаточном для получения продукта, изотонического с кровью. 16. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-15, отличающаяся тем, что в качестве модификатора тоничности использован глицерин. 17. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-16, отличающаяся тем, что содержание глицерина 8 составляет приблизительно 2,25% от массы композиции. 18. Стерильная фармацевтическая цисплатиновая композиция по любому из пп.1-17, отличающаяся тем, что для получения необходимого рН используют водный раствор гидроксида натрия. 19 Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции для парентерального введения в виде эмульсии типа масло в воде, имеющей низкую токсичность,по любому из пп.1-18, предусматривающий диспергирование цисплатина в масляной фазе,приготовление водной фазы с модификатором тоничности, хелатообразователем; доведение рН до 8-11 и эмульгирование двух фаз после добавления эмульгатора или к водной фазе, или к масляной фазе, или к обеим фазам; гомогенизирование эмульсии до размера частиц меньше 2 мкм, поддержание температуры гомогенизированного продукта ниже приблизительно 25 С,фильтрование, помещение в стеклянные контейнеры в атмосфере азота, герметизацию заполненных контейнеров и стерилизацию герметизированных контейнеров автоклавированием. 20. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по п.19, отличающийся тем, что содержание цисплатина составляет от 0,005 до 0,5% от массы композиции. 21. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19 или 20, отличающийся тем,что содержание цисплатина составляет от 0,05 до 0,1% от массы композиции. 22. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-21, отличающийся тем, что содержание цисплатина составляет приблизительно 0,05% от массы композиции. 23. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-21, отличающийся тем, что содержание цисплатина составляет приблизительно 0,1% от массы композиции. 24. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-23, отличающийся тем, что масляная фаза составляет до 30% включительно от массы композиции. 25. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-24, отличающийся тем, что масляная фаза составляет приблизительно от 10 до 20% от массы композиции. 26. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-25, отличающийся тем, что масляная фаза представляет собой растительное масло, или фракционированное растительное масло, или сложный эфир жирной кислоты, или их смесь. 27. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-26, отличающийся тем, что растительное масло представляет собой соевое масло. 28. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-27, отличающийся тем, что в качестве хелатообразователя используют двунатриевую ЭДТА. 29. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-28, отличающийся тем, что двунатриевая ЭДТА составляет приблизительно до 0,1% включительно от массы композиции. 30. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-29, отличающийся тем, что содержание двунатриевой ЭДТА составляет приблизительно от 0,005 до 0,05% от массы композиции. 31. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-30, отличающийся тем, что в качестве эмульгатора используют природный фосфатид. 32. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции 10 по любому из пп.19-31, отличающийся тем, что природный фосфатид представляет собой яичный фосфатид, или соевый фосфатид, или их смесь. 33. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-32, отличающийся тем, что модификатор тоничности используют в количестве, достаточном для получения продукта, изотоничного с кровью. 34. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-33, отличающийся тем, что в качестве модификатора тоничности используют глицерин. 35. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-34, отличающийся тем, что содержание глицерина составляет приблизительно 2,25% от массы композиции. 36. Способ приготовления стерильной фармацевтической цисплатиновой композиции по любому из пп.19-35, отличающийся тем, что для получения требуемого рН используют водный гидроксид натрия.