Лекарственный препарат и способ его получения

1 Область техники Предполагаемое изобретение относится к медицине, а именно к лекарственным препаратам, воздействующим на иммунную систему, и к производству таких препаратов. Предшествующий уровень техники Известен лекарственный препарат Натрия нуклеинат-натриевая соль нуклеиновой кислоты, являющийся препаратом иммунологического действия, представляющий собой белый или слегка желтоватый, легко растворимый в воде с образованием опалесцирующих растворов порошок, обладающий способностью стимулировать миграцию и кооперацию Т- и Влимфоцитов, повышать фагоцитарную активность макрофагов и активность факторов неспецифической резистентности (см., например,Машковский М.Д. Лекарственные средства,Изд. Медицина, Москва, 1985, т. 2, с. 172). Однако инъецирование этого препарата вызывает болезненные ощущения, что проводит к необходимости введения пациентам обезболивающих средств. Наиболее близким аналогом-прототипом является применяемый в качестве иммуномодулятора и обладающий также противовоспалительными и антиоксидантными свойствами лекарственный препарат 2-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-дион натриевой соли дигидрат(см., например, патент РФ 21113222 с приоритетом от 30.09.97 г, МПК: А 61K 31/04,А 61K 31/13), представляющий собой светложелтый, легко растворимый в воде кристаллический порошок. Введение этого лекарственного препарата пациенту при слабой реакции клеточного иммунитета, например при наличии злокачественных новообразований, вызывает активизацию макрофагов, интерлейкинов и других острофазных белков. При воспалительных процессах этот иммуномодулятор на несколько часов подавляет активность макрофагов, но одновременно усиливает микробицидную систему клеток. Этот препарат не вызывает аллергических реакций и других побочных явлений, однако,при длительном лечении хронических и других заболеваний возможно привыкание организма пациента и снижение результативности действия применяемого лекарственного средства, что требует замены препарата на другой аналогичного действия, но более эффективный. Известен способ получения лекарственного препарата, включающий получение 3-аминофталгидазида, который подвергают реакции молекулярной перегруппировки с последующим воздействием гидрооксида натрия и выделением целевого продукта 2-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-дион натриевая соль дигидрата 2 Этот способ позволяет повысить выход продукта и уменьшить отходы производства,однако, его использование ограничено получением указанного препарата. Наиболее близким аналогом-прототипом является способ получения 5-амино-2,3-дигидрофтапазиндиона-1,4-диона (люминола) (см.,например, авт. св. СССР 130903 с приоритетом от 21.11.59 г., бюл.16 за 1960 г.), включающий восстановление 3-нитрофталевой кислоты в водной среде гидразингидратом в присутствии скелетного никелевого катализатора с последующим упариванием раствора и его нагреванием при температуре 120 С в присутствии гидразингидрата и уксусной кислоты. Известный способ позволяет получать целевой продукт в виде порошка оранжевого цвета, обладающего хорошими люминесцентными свойствами, однако, его применение в качестве лекарственного препарата неэффективно. Раскрытие изобретения В основу изобретения лекарственный препарат положена задача найти препарат сходного с препаратом-аналогом действия, но более эффективного, например для возможной его замены в случае привыкания к нему организма пациента. В основу изобретения способ получения лекарственного препарата положена задача разработки процедуры, обеспечивающей возможность получения продукта, являющегося эффективным лекарственным средством, обладающим иммуномодулирующими, противовоспалительными и антиоксидантными свойствами. Поставленная задача решается за счет лекарственного препарата натриевая соль 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-дион, обладающего иммуномодулирующим, противовоспалительным и антиоксидантным свойствами. Поставленная задача решается за счет того, что в способе получения натриевой соли 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона,включающем восстановление продукта гидразингидратом в присутствии скелетного никелевого катализатора, вначале взаимодействием 3 нитрофталевого ангидрида с гидразингидратом в уксусной кислоте при температуре (90-120)С получают 5-нитро-2,3-дигидрофталазин-1,4-дион,после восстановления которого гидразингидратом в водно-щелочной среде в присутствии скелетного никелевого катализатора выделяют 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-дион, который затем обрабатывают при температуре (20-80)С гидрооксидом натрия с добавлением низшего спирта или кетона и выделяют целевой продукт. Лучший вариант осуществления изобретения Лекарственный препарат представляет собой белый или светло-желтый, легко растворимый в воде кристаллический порошок. Лекарственный препарат получают следующим образом: (50-60) г 3-нитрофталевого 3 ангидрида (C8H3NO6) смешивают со (120-200) мл уксусной кислоты (СН 3 СООН), нагревают при перемешивании до температуры (90-100)С и постепенно (каплями) добавляют (15-20) мл гидразингидрата (N2 Н 4H2 О), поддерживая температуру реакционной смеси в пределах (105120)С. По окончании дозировки гидразингидрата реакционную массу доводят до кипения и выдерживают не менее (20-45) мин, а затем быстро охлаждают до температуры (70-85)С. Выпавшие в осадок кристаллы порошка 5 нитро-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона (C8H5N3O4) отфильтровывают и промывают уксусной кислотой с дистиллированной водой. Из фильтра дополнительно выделяют (5-10) г продукта,суммарный выход которого составляет (80-85)% в пересчете на массу взятого 3-нитрофталевого ангидрида.(40-50) г 5-нитро-2,3-дигидрофталазин-1,4 диона и (10-15) г гидрооксида калия (KOH) перемешивают до полного растворения в (500700) мл дистиллированной воды. Раствор нагревают до (60-75)С, а затем добавляют (12-15) мл гидразингидрата (N2 Н 4H2 О) и (2-5) г катализатора Ni-Ренея. Это вызывает бурную реакцию с саморазогревом и выделением азота (N2) и водорода (Н 2). При достижении температуры (85-95)С реакционную массу охлаждают, добавляя дистиллированную воду. Через (20-40) мин в раствор постепенно вносят еще (2-5) г катализатора, не допуская чрезмерно бурного хода реакции. Когда саморазогрев прекратится, вносят еще (5-10) г катализатора. После завершения реакции раствор декантируют с осадка катализатора, фильтруют и выделяют в осадок 5-амино-2,3-дигидрофталазин 1,4-дион (C8H7N3O2) подкислением реакционной массы водным раствором соляной кислоты(НСl), либо смесью соляной и уксусной кислот. Осадок отфильтровывают, промывают дистиллированной водой и сушат. Выход продукта (82-84)% в перерасчете на массу взятого 5-нитро-2,3-дигидрофталазин-1,4 диона. На завершающей стадии (30-40) г 5-амино 2,3-дигидрофталазин-1,4-диона растворяют в водном растворе едкого натра (NaOH) (10-15 гNaOH на 300-500 мл Н 2 О) при температуре раствора (20-80)0 С. Затем раствор фильтруют и добавляют в него (1500-2000) мл низшего спирта (ROH), например изопропилового спирта(20-25)С в течение (2-3) ч, выделяя целевой продукт (C8H6N3NaO2). Здесь можно использовать также другие низшие спирты или кетон. Выход целевого продукта (85-90)% в пересчете на массу взятого 5-амина-2,3-дигидрофталазина-1,4-диона. Для полученного лекарственного препарата характерны и информативны УФ спектры в 4 области (220-400) нм, полученные в концентрации 20 мкг/мл в различных растворителях: воде,0,01 М растворе хлористо-водородной кислоты,в спирте 95% и в 0,1 М растворе гидрооксида натрия. Промышленная применимость Проведенные исследования показали, что введение пациенту лекарственного препарата натриевой соли 5-амино-2,3-дигидрофталазин 1,4-дион при слабой реакции клеточного иммунитета, например при наличии злокачественных новообразований, вызывает активизацию макрофагов, которая проявляется выбросом имиTNF (фактора некроза опухолей), интерлейкинов и других острофазных белков. Одновременно также специфически реагируют на введение этого лекарственного препарата Т-лимфоциты. При воспалительных процессах это лекарственное средство избирательно на (4-8) ч подавляет активность макрофагов, снижая соответственно уровень TNF и острофазных белков,что приводит к сглаживанию симптомов интоксикации. Одновременно происходит активизация супероксидообразующей функции и фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов, усиливая этим микробицидную систему клеток и купируя воспалительный процесс. Эти результаты подтверждены инструментальными лабораторными исследованиями пациентов путем проведения анализа крови при проверке иммунологических показателей лейкоцитарной и лимфоцитарной систем. Введенный лекарственный препарат практически полностью выводится из организма пациента с выдыхаемым воздухом и мочой за (2060) мин. Его применение в широком диапазоне дозировок (от 20 до 1500 мг) не вызывает аллергических реакций и других побочных явлений и по механизму и по эффективности аналогично, а в некоторых случаях даже эффективней иммуномодулятора, выбранного в качестве прототипа, что позволяет варьировать этими лекарственными препаратами при лечении заболеваний, связанных с необходимостью длительного применения лекарственных препаратов, чтобы избежать привыкания к ним организма пациента. Данный лекарственный препарат может применяться в виде порошка для инъекций, а также в виде таблеток при пероральном приеме. Возможность применения предложенного лекарственного препарата подтверждается примерами. Пример 1. Больная С., 58 лет. Обратилась 02.02.2000 г. Жалобы на утомляемость, приступообразный,длительно непрекращающийся кашель, периодическое повышение температуры. Предполагает, что это остаточные явления после гриппа,которым она болела с 15.01 по 27.01.2000 г. При поступлении субфебрильная температура, сухой кашель, прослушиваются хрипы в легких. 5 Проведен курс лечения лекарственным препаратом натриевая соль 5-амино-2,3 дигидрофталазин-1,4-дион (далее Тамерит). Первые пять дней инъекции Тамерита разовой дозой 300 мг на 2 мл воды для инъекций,затем прием этого лекарственного препарата перорально в виде порошка или таблеток но 100 мг 2 раза в день, через час после еды. Через 3 дня после начала лечения заметно улучшилось общее состояние пациента, практически прекратился кашель, нормализовалась температура. Через 10 дней состояние удовлетворительное. Результаты лабораторных обследований пациента приведены в табл. 1. Пример 2. Больной И., 68 лет. Жалобы: затрудненное мочеиспускание с частыми позывами. Ультразвуковое исследование (УЗИ): отмечена гипертрофия предстательной железы. Диагноз: аденома предстательной железы 2-й степени. Проведен курс лечения из 20 и 15 инъекций лекарственного препарата 2-амино-1,2,3,4 тетрагидрофталазин-1,4-дион натриевой соли дигидрат с перерывом между первыми 20 и последующими 15 инъекциями в 30 суток. Дозировка препарата от 100 до 500 мг на 1-5 мл воды соответственно. После первых 20 инъекций аденома несколько уменьшилась, однако, после заключительных 15 инъекций дальнейшей положительной динамики не отмечено. Состояние больного нестабильно. Проведен дополнительный курс инъекций Тамерита - 10 инъекций в разовой дозе 200 мг на 2 мл воды для инъекций, ежесуточно по 1 инъекции. Отмечено улучшение общего состояния пациента, мочеиспускание нормализовалось. Результаты лабораторных обследований пациента приведены в табл. 2. Пример 3. Больной Г., 42 года. Рожистое воспаление левого предплечья, отечность, обострение псориаза, температура при поступлении - 39,9. До обращения проявления псориаза купировались использованием соответствующих мазей. Проведено ежесуточное инъецирование Тамеритом в разовой дозе 200 мг лекарственного препарата на 2 мл воды для инъекций. На 4-й день после начала отеки и гиперемия предплечья исчезли. Инъецирование продолжено еще в течение 5-ти дней с разовой дозой 100 мг лекарственного препарата на 1 мл воды для инъекций. Состояние пациента удовлетворительное. Наблюдается существенное улучшение состояния кожных покровов лица и рук. 6 Пациенту рекомендовано продолжить прием Тамерита перорально по 1 таблетке (100 мг),2-3 раза в день в течение еще (7-10) дней. Результаты лабораторных обследований пациента приведены в табл. 3. Таблица 1. Результаты лабораторных обследований пациентки С Наименование При посту- При выпоказателей плении писке 1 2 3 Общий анализ крови Гемоглобин, г/л 100 147 Эритроциты х 1012/л 3,9 5,0 Цвет. показ.0,85 0,9 Лейкоциты х 109/л 4,0 5,5 Эозинофилы, % 2,9 3,0 Нейтрофилы: палочкоядерные, % 6,0 6,0 сегментоядерные, % 69,5 74,0 Лимфоциты, % 20,5 23,0 Моноциты, % 5,5 6,0 СОЭ, мм/ч 5 13,0 Биохимический анализ крови Железо, мг/дл 50,0 51,5 Глюкоза, ммоль/л 4,2 5,3 Мочевина, мг/дл 19,0 16,5 Мочевая кислота,мг/дл 5,3 7,1 Альбумин, г/л 37,5 50,0 Белок, г/л 76,5 71,5 Холестерин, мг/дл 176,6 154,0 Триглицериды, мг/дл 212,1 195,0 Билирубин (общий),мг/дл 0,35 0,4 Креатинин, мг/дл 0,6 0,45 Щелочная фофатаза,и/л 198,0 212,0 Креатинкиназа, и/л 32,8 34,0 Аспартатаминотрансфераза, и/л 33,0 29,5 Аланинаминотрансфераза, и/л 85,0 70,7 Гамма-глутамилтрансфераза, и/л 94,5 93,0 Лактатдегидрогеназа,и/л 201,0 207,5 Результаты исследования клеточного и гуморального иммунитета Иммуноглобулин А,г/л 2,15 2,20 Иммуноглобулин М,г/л 2,0 2,21 Иммуноглобулин G,г/л 11,0 12,4 Т-лимфоциты, % 52,0 67,0 В-лимфоциты, % 18,0 24,5 Фагоцитоз латекса, % 60,0 76,2 Таблица 2. Результаты лабораторных обследований пациента И При После инъекций Наименование поступоказателей 2-амино 5-амино плении 1 2 3 4 Общий анализ крови Гемоглобин, г/л 120 130 135 Эритроциты х 1012/л 5,0 5,20 5,25 Цвет. показ. 0,9 0,95 0,95 Лейкоциты х 109/л 6,50 6,20 6,21 Эозинофилы, % 4,0 3,80 3,85 Нейтрофилы: палочкоядерные,% 6,5 5,5 6,0 сегментоядерные, % 60,0 64,3 70,0 Лимфоциты, % 12,0 12,5 14,6 Моноциты, % 3,0 2,5 2,5 СОЭ мм/ч 35 17,0 10 Биохимический анализ крови Железо, мг/дл 116,4 122,5 123 Глюкоза,ммоль/л 5,0 5,4 6,0 Мочевина, мг/дл 10,1 16,2 15,9 Мочевая кислота, мг/дл 2,7 5,3 6,3 Альбумин, г/л 38,8 51,6 60,5 Белок, г/л 71,3 69,0 65,5 Холестерин,мг/дл 204,2 195,7 176,4 Триглицериды,мг/дл 160,1 135,0 128,0 Билирубин(общий), мг/дл 0,3 0,52 0,55 Креатинин,мг/дл 0,47 0,38 0,34 Щелочная фофатаза, и/л 212,7 202,0 207,2 Креатинкиназа,и/л 34,0 37,5 38,5 Аспартатаминотрансфераза, и/л 35,5 29,9 28,6 Аланинаминотрансфераза, и/л 87,7 72,5 68,2 Гамма-глутамилтрансфераза, и/л 105,5 97,5 92,4 Лактатдегидрогеназа, и/л 204,7 210,0 214,5 Результаты исследования клеточного и гуморального иммунитета Иммуноглобулин А, г/л 2,07 2,33 2,41 Иммуноглобулин М, г/л 1,92 2,07 2,11 Иммуноглобулин G, г/л 11,1 12,3 12,6 Таблица 3. Результаты лабораторных обследований пациента Г Наименование При При показателей поступлении выписке 1 2 3 Общий анализ крови Гемоглобин, г/л 122 148 Эритроциты х 1012/л 6,2 6,9 Цвет. показ. 0,92 0,98 Лейкоциты х 109/л 7,0 6,2 Эозинофилы, % 4,7 4,0 Нейтрофилы: палочкоядерные, % 6,0 5,7 сегментоядерные, % 62,0 65,5 Лимфоциты, % 19,9 26,3 Моноциты, % 2,7 2,0 СОЭ, мм/ч 37 16,0 Биохимический анализ крови Железо, мг/дл 114,4 125,5 Глюкоза, ммоль/л 5,4 5,9 Мочевина, мг/дл 12,9 11,9 Мочевая кислота,мг/дл 3,2 4,15 Альбумин, г/л 46,5 57,1 Белок, г/л 76,2 77,7 Холестерин, мг/дл 209,0 200,6 Триглицериды,мг/дл 167,0 172,2 Билирубин (общий),мг/дл 0,85 0,65 Креатинин, мг/дл 0,90 0,85 Щелочная фофатаза, и/л 209,0 221,0 Креатинкиназа, и/л 31,5 37,5 Аспартатаминотрансфераза, и/л 30,5 27,3 Аланинаминотрансфераза, и/л 80,1 58,5 Гамма-глутамилтрансфераза, и/л 93,1 95,2 Лактатдегидрогеназа, и/л 210,5 229,6 Результаты исследования клеточного и гуморального иммунитета Иммуноглобулин А,г/л 2,20 2,47 Иммуноглобулин М, г/л 1,80 2,31 Иммуноглобулин G,г/л 13,0 13,7 Т-лимфоциты, % 57,7 60,3 В-лимфоциты, % 26,2 25,0 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ получения натриевой соли 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона,включающий следующие этапы:(а) взаимодействие 3-нитрофталевого ангидрида с гидразингидратом в уксусной кислоте при температуре 90-120 С с получением продукта взаимодействия;(б) восстановление продукта взаимодействия, полученного на стадии (а), гидразингидратом в водно-щелочной среде в присутствии скелетно-никелевого катализатора с получением реакционной смеси, содержащей 5-амино-2,3 дигидрофталазин-1,4-дион;(в) выделение 5-амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона из реакционной смеси, полученной на стадии (б);(г) обработка 5-амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона при температуре 20-80 С гидроксидом натрия с добавлением низшего спирта или кетона с получением смеси, содержащей натриевую соль 5-амино-2,3-дигидрофталазин 1,4-диона;(д) выделение натриевой соли 5-амино-2,3 дигидрофталазин-1,4-диона из смеси, полученной на стадии (г). 2. Применение натриевой соли 5-амино 2,3-дигидрофталазин-1,4-диона в качестве лекарственного препарата. 3. Применение по п.2 натриевой соли 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона в качестве иммуномодулятора. 4. Применение по п.2 натриевой соли 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона в качестве противовоспалительного средства. 5. Применение по п.2 натриевой соли 5 амино-2,3-дигидрофталазин-1,4-диона в качестве антиоксидантного средства.