Фармацевтическое соединение

010307 Изобретение относится к фармацевтическому соединению, которое представляет собой селективный ингибитор серинпротеазы, Фактора Xa, к фармацевтическим композициям, которые его содержат, и к его применению для лечения человека или животного. Серинпротеазы представляют собой группу протеолитических ферментов, которые объединены общим каталитическим механизмом, характеризующимся особенно реакционноспособным остатком Ser. Примеры серинпротеаз включают трипсин, триптазу, химотрипсин, эластазу, тромбин, плазмин, калликреин, Комплемент C1, акросомальную протеазу, лизосомальную протеазу, кокооназу, -литическую протеазу, протеазу A, протеазу B, серинкарбоксипептидазу, субтилизин, урокиназу, Фактор VIIa, Фактор IXa и Фактор Xa. Серинпротеазы активно изучались в течение нескольких десятилетий и терапевтическое значение ингибиторов серинпротеазы хорошо известно. Например, ингибитор Фактора Xa известен в качестве терапевтического агента - антикоагулянта, например, в лечении и профилактике тромботических расстройств. Применение ингибитора Фактора Xa как антикоагулянта является желательным с точки зрения избирательности его действия. Многие зарегистрированные в клинической практике антикоагулянты ассоциировались с побочными эффектами, связанными с неспецифической природой их воздействия на каскад коагуляции.WO 00/76971 раскрывает, что соединение 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1 метилпиперидин-4-ил)пиперазин представляет собой мощный селективный ингибитор Фактора Xa с особенно желательными биологическими свойствами. Таким образом, данное соединение и его фармацевтически приемлемые соли являются потенциально полезными для профилактики или лечения тромботических расстройств, в том числе тромбоза вен, легочной эмболии, тромбоза артерий, ишемии миокарда, инфаркта миокарда и церебрального тромбоза, включая предотвращение инфаркта при фибрилляции желудочков. Они потенциально могут быть полезными в лечении острой закупорки сосудов, связанной с тромболитической терапией и рестенозом, например, после транслюминальной коронарной ангиопластики или шунтирования коронарных или периферических артерий, а также для поддержания открытого состояния сосудов у пациентов, длительное время находящихся на гемодиализе. Для того чтобы рассматриваться в качестве кандидата для дальнейшей разработки фармацевтического средства, соединение должно обладать не только желательными биологическими свойствами, но его физические свойства также должны быть адаптированы для использования в производстве фармацевтического продукта. В частности, соединение должно быть стабильным, предпочтительно кристаллическим твердым соединением, которое может быть легко получено и из которого можно изготовить препаративную форму. Было показано, что особенно трудно получить стабильные кристаллические формы 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина. Соли 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина, которые образуют твердые кристаллические вещества, описаны в примерах 48a (гидрохлорид) и 48b (дифумарат)WO 01/96323. WO 02/100847, которая заявляет приоритет по заявке WO 01/96323, указывает на то, что гидрохлорид продемонстрировал нежелательные свойства, и дополнительно раскрывает тот факт, что соль дифумарат могут существовать более чем в одной кристаллической форме, каждая из которых заявлена в заявке на данное изобретение. Кристаллы дифумарата по своим свойствам превосходят кристаллы гидрохлорида. Однако дальнейший опыт работы с ними выявил потребность в соли с более совершенными свойствами. Таким образом, форма, раскрытая в WO 02/100847 как форма I, получена в виде тонких игольчатых кристаллов. Морфология тонких игл обладает недостатками с точки зрения получения препарата, в том числе, среди прочего, комкообразованием и низкой насыпной плотностью. Кроме того,было обнаружено, что форма I превращается в другой (высший) гидрат в условиях крайне высокой (около 80%) относительной влажности и в водных суспензиях превращается в форму, раскрытую вWO 02/100847 как форма 2. Форма, раскрытая в WO 02/100847 как форма 2, среди прочего, имеет такой недостаток, что размеры частиц очень малы, что приводит к очень медленной фильтрации. Таким образом, остается потребность в соли 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1 метилпиперидин-4-ил)пиперазина, которая образует кристаллическое твердое вещество, обладающее желательной морфологией, является стабильной в присутствии воды и в условиях очень высокой относительной влажности (выше 80%) и большие партии которой могут быть легко произведены. Было обнаружено, что новая соль 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазина легко может быть получена в стабильной кристаллической форме. Таким образом, в одном аспекте изобретение обеспечивает 1-(индол-6-карбонил-Dфенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин D-тартрат, который также может быть назван сольюD-винной кислоты 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазина (1:1). Предполагается, что основное соединение может существовать в рацемической (D/L) или хиральной форме и что предпочтительный D-изомер может быть введен в рацемической смеси с L-изомером или отдельно. D-конфигурация означает D-конфигурацию фенилглицина, из которого может быть получено соединение.-1 010307 В соответствии с другим аспектом данное изобретение обеспечивает 1-(индол-6-карбонил-Dфенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин D-тартрат в кристаллической форме. Обнаружено, что соль в форме кристаллов является стабильной, хорошо растворима в воде и является легкой в обращении и обработке. Было обнаружено, что D-тартрат 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазин может кристаллизоваться из различных систем вода-органический растворитель, в том числе систем вода/ацетон и вода/(C1-4)алканол, таких как вода/этанол, вода/н-пропанол и вода/изопропанол. Особенно хорошие выходы были получены с использованием систем вода/ацетон, особенно с объемным соотношением вода/ацетон приблизительно 15/85. Традиционно 1-(индол-6-карбонил-Dфенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин и 1 мол. экв. D-винной кислоты растворяют в воде, после чего добавляют органический растворитель. Засевание небольшим количеством предварительно полученных кристаллов может помочь инициировать кристаллизацию. Было обнаружено,что 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазина D-тартрат кристаллизуется в виде тонких пластинок, которые являются высоко агломерированными и образуют текучий порошок с улучшенной плотностью. Термическую стабильность и растворимость кристаллической соли тартрата определяли с помощью различных термических/термогравиметрических анализов с использованием ТА одновременного модуляTG/DTA. Образцы нагревают в открытых алюминиевых кюветах от 25 до 300C со скоростью нагревания 10C/мин при продувании азотом со скоростью 150 мл/мин. Температуру калибровали с помощью индия. Калибровку массы осуществляли с помощью предоставленных поставщиком стандартов и проверяли против десольватации натрия тартрата. Обнаружено, что кристаллы D-тартрата содержат приблизительно 5-6% по массе растворителя (преимущественно воды), что соответствует кристаллам дигидрата. При нагревании дигидрата выше приблизительно 50C, вода теряется. Приблизительно при 145C остаток безводного твердого вещества плавится. При повторном охлаждении расплав образует аморфное твердое вещество. Изотерму сорбции влаги кристаллами D-тартрата также определяли с использованием вакуумных микровесов, с использованием стадии сушки при 40C до регистрации начальных данных. При начальной стадии сушки наблюдалась первоначальная потеря массы 6%, что согласуется с удалением кристаллизационной воды. Поскольку относительная влажность увеличивалась, образец снова абсорбировал воду, с окончанием регидратации при достижении уровня относительной влажности приблизительно 20%. Как только образовывался дигидрат, он оставался стабильным в интервале от 5 до 95% относительной влажности при комнатной температуре. Стабильность при низкой и высокой относительной влажности является желательной для продукта,который будет использоваться или продаваться в разнообразных условиях окружающей среды. Кристаллический материал подвергали рентгеноструктурному анализу. Обнаружено, что полученная дифрактограмма содержит острые, интенсивные пики при 2=11,5; 15,9; 17,4; 18,1; 18,5 и 21,9. Пики при 2=5,2 и 12,0 также являются характерными для данной соли в кристаллической форме. Более подробный анализ пиков приведен в таблице. Дифрактограмма показана на фигуре чертежа.-2 010307 Рентгенограмму получали с помощью порошкового дифрактометра Siemens D5000, оборудованного источником CuK (=1,54056 ) и детектором твердого состояния Кевекса Si(Li), работающим при 50 кВ и 40 мА. Образец сканировали 2 от 3 до 40, с размером шага 0,02 в 2 и скоростью сканирования 9,0 с/шаг, с дивергенцией 1 мм, принимающими щелями и щелью детектора 0,1 мм. Сухой порошок упаковывали в нижний задний держатель образцов и поверхность сглаживали с использованием предметного стекла. Специалисту в области рентгеноструктурного анализа будет понятно, что точные значения, измеренные для 2 (или соответствующие расстояния d), могут варьировать в зависимости от конкретного анализируемого образца, используемого аппарата и процедуры анализа. Типичной является ошибка 0,1 2. Кристаллы соли D-тартрата также анализировали с помощью твердофазной спектроскопии 13C ядерного магнитного резонанса (ЯМР). Твердофазные 13C химические сдвиги отображают молекулярную структуру и электромагнитную обстановку в молекулах кристалла. Спектр кристаллов включает изотропные пики катиона препарата и аниона тартрата при следующих химических сдвигах: 25,3; 26,2; 42,6; 45,8; 46,2; 47,1; 48,3; 50,3; 52,1; 54,0; 55,5; 57,1; 61,8; 73,4; 74,2; 76,4; 101,5; 102,2; 112,9; 114,9; 117,3; 118,2; 119,6; 121,1; 125,6; 126,2; 127,4; 128,5; 129,5; 130,6; 132,2; 136,7; 139,5; 167,6; 169,0; 170,4; 174,9; 175,8; 178,6 и 179,2 промилле. Спектры 13C перекрестной поляризации/вращения образца под магическим углом (CP/MAS) ЯМРInova 400 МГц, работающего на частоте углерода 100,573 МГц, оборудованного полным комплектом для твердых веществ, и зонда Chemagnetics 4,0 мм Т 3. Использовали перекрестную поляризацию со сползающей амплитудой (RAMP-CP) при 62 кГц и ТРРМ расцепление при 70 кГц. Параметры измерения следующие: 90 протон; импульс радиочастотного излучения шириной 4,0 мкс; время контакта 3,0 мс; время повторения импульса 10 с; частота MAS 10,0 кГц; спектральная ширина 50 кГц и время измерения 50 мс. Химические сдвиги были отнесены к метильной группе гексаметилбензола (=17,3 ppm) путем замены образца. Были измерены значения равновесной растворимости кристаллов D-тартрата в воде и в 0,01 М HCl при 25C и получены значения 126 мг/мл и 125 мг/мл, соответственно (измерено как свободное основание). Таким образом, было обнаружено, что соль D-тартрат дает кристаллический материал, который является стабильным, превосходно поддается обработке и хорошо растворяется в воде. Будет понятно, что соль D-тартрат согласно изобретению может быть выделена в форме сольвата,такого как дигидрат, и что все такие сольваты, соответственно, находятся в рамках данного изобретения. Предусматривается, что сольват, который является физиологически несовместимым, может, тем не менее, быть полезным в производстве фармацевтического продукта, например, на стадии очистки. Соль D-тартрат по изобретению может вводиться любым традиционным способом, например, в желудочно-кишечный тракт (например, ректально или перорально), в нос, легкие, мышцы, сосуды или трансдермально. Соль D-тартрат может вводиться в виде любой традиционной лекарственной формы,например таблетки, порошки, капсулы, растворы, дисперсии, суспензии, сиропы, спреи, суппозитории,гели, эмульсии, пластыри и т.д. Такие композиции могут содержать компоненты, традиционно применяемые в фармацевтических препаратах, например разбавители, носители, модификаторы pH, подсластители, наполнители и дополнительные активные агенты. Предпочтительно, композиции для инъекции или инфузии будут стерильными и будут иметь форму пригодного раствора или суспензии. Такие композиции представляют собой дополнительный аспект изобретения. В данном аспекте изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, которая включает соль D-тартрат по изобретению вместе как минимум с одним фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом. Фармацевтическая композиция также необязательно может включать как минимум один дополнительный антитромботический и/или тромболитический агент. Соединение может быть эффективным в качестве части комбинированной терапии с антикоагулянтом с другим механизмом действия или с тромболитическим агентом. Еще один аспект изобретения обеспечивает применение соли D-тартрата по изобретению для производства лекарственного средства для лечения человека или животного (например, млекопитающего чувствительного вида) для борьбы (т.е. лечения или профилактики) с состоянием, отвечающим на указанный ингибитор (например, тромботическое расстройство, как описано выше). В еще одном аспекте изобретение обеспечивает способ лечения человека или животного (например,млекопитающего уязвимого вида) для борьбы с состоянием, которое отвечает на ингибитор Фактора Xa(например, тромботическое расстройство, как описано выше), причем указанный способ включает введение указанному реципиенту эффективного количества соли D-тартрата по изобретению. Дозировка соединения по изобретению будет зависеть от природы и выраженности состояния, подлежащего лечению, способа введения и размера и вида пациента. Однако в общем будут вводиться количества от 0,01 до 100 мкмоль/кг массы тела.-3 010307 Все публикации, цитированные в данном описании, таким образом, включены путем ссылки. Далее изобретение будет описано со ссылкой на следующие не ограничивающие примеры. Экспериментальная часть. 1-(Индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин может быть получен, например, способом, описанным в WO 01/96323. Пример 1. Получение 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазин D-тартрата дигадрата. 1-(Индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин (50 мг) и D-винную кислоту (0,5 мол. экв., приблизительно 8,3 мг) растворяют в безводном этаноле (1 мл) при слабом нагревании. При охлаждении образуется тонкий порошок/муть. Добавляют несколько капель воды и прозрачный раствор перемешивают при комнатной температуре. Через 4 дня осадок, который образовался, отделяют вакуумной фильтрацией с получением названного продукта (типично, 30 мг) в виде белого порошка. Альтернативно 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин(200 мг) и D-винную кислоту (один молярный эквивалент, 65 мг) растворяют в воде (2 мл) при комнатной температуре. Небольшую мутность раствора удаляют безнапорной фильтрацией. К прозрачному раствору добавляют изопропанол (8 мл) до образования стойкой мути. По прохождении приблизительно 15-20 мин наблюдается образование клейкого твердого вещества с последующим образованием белой суспензии. После загустевания суспензии добавляют еще изопропанол (2 мл) и суспензию выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. Твердый осадок отделяют вакуумной фильтрацией и промывают изопропанолом с последующим высушиванием в конвекционной печи при 70C в течение 1 ч с получением названного в заголовке продукта (типичный выход 190 мг). Пример 2. Получение 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазина D-тартрата дигидрата. К 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазину (46,0 г, 0,1 моль) и D-винной кислоте (15,0 г, 0,1 моль, Aldrich, энантиомерный избыток 99%) добавляют воду (230 мл) и ацетон (800 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин, во время чего материалы растворяются с образованием прозрачного раствора. К полученному раствору добавляют в виде одной порции кристаллы для затравки 1-(индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4 ил)пиперазина D-тартрата дигидрата (100 мг). К полученной суспензии очень медленно (60-100 мл/ч) добавляют вторую часть антирастворителя ацетона (800 мл). По окончании добавления суспензию перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре и затем охлаждают на бане, содержащей воду со льдом, до 5C еще в течение 2 ч. Кристаллы собирают и промывают холодным ацетоном (100 мл). Кристаллы сушат под вакуумом(приблизительно 15 мм, 2 кПа) при 40C в течение 24 ч с получением указанной в заголовке соли (55,7 г,86,8%). Альтернативно, кристаллы можно сушить продуванием азотом, чтобы избежать удаления гидратационной воды в продукте. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. 1-(Индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина D-тартрат. 2. 1-(Индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина D-тартрат в кристаллической форме. 3. 1-(Индол-6-карбонил-D-фенилглицинил)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина D-тартрат в кристаллической форме, дифрактограмма которого имеет острые, интенсивные пики при 2=11,5, 15,9,17,4, 18,1, 18,5 и 21,9. 4. Фармацевтическая композиция, которая включает соль D-тартрат по любому из пп.1-3 вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом. 5. Соль D-тартрат по любому из пп.1-3, которая предназначена для использования в терапии. 6. Применение соли D-тартрата по любому из пп.1-3 для изготовления лекарственного средства для лечения тромботического расстройства. 7. Способ лечения человека или животного для борьбы с тромботическим расстройством, включающий введение указанному человеку или животному эффективного количества соли D-тартрата по п.1. 8. Способ лечения человека или животного для борьбы с тромботическим расстройством, включающий введение указанному человеку или животному эффективного количества соли D-тартрата по п.2. 9. Способ лечения человека или животного для борьбы с тромботическим расстройством, который включает введение указанному реципиенту эффективного количества соли D-тартрата по п.3. 10. Фармацевтическая композиция, включающая соль D-тартрат по любому из пп.1-3, для борьбы с тромботическим расстройством.