Производные оксазина и их применение для лечения неврологических нарушений

ПРОИЗВОДНЫЕ ОКСАЗИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕВРОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ Лей, Лиу Сюй (CN), Люнд Райнер Мартин, Махауер Райнер, Мбитц Хенрик, Нойманн Ульф, Рамос Рита,Рюегер Генрих, Шефер Михаэль,Тинтельнот-Бломлей Марина,Венстра Зим Якоб, Фгтле Маркус Настоящее изобретение относится к новым гетероциклическим соединениям, выбранным из группы, включающей и их фармацевтически приемлемые соли. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей данные соединения и используемой для лечения неврологических расстройств. Болезнь Альцгеймера является разрушающим нейродегенеративным нарушением. Его спорадические формы поражают население старших возрастов (резкое увеличение частоты в возрасте старше 75 лет), кроме того, существуют различные семейные формы, начинающиеся на четвертом или пятом десятке лет жизни. Патологически она характеризуется наличием внеклеточных старческих бляшек и внутриклеточных нейрофибриллярных сплетений в головном мозге пациента. Центральным компонентом старческих бляшек являются небольшие, обладающие молекулярной массой, равной 4 кДа, амилоидные пептиды. Они образуются посредством протеолитического процессинга большого трансмембранного белка, предшественника амилоидного белка (АРР). Расщепление АРР бета-секретазой (ВАСЕ-1) приводит к высвобождению растворимого фрагмента АРР-бета, тогда как состоящий из 99 аминокислот длинный С-конец остается прикрепленным к мембране. Затем этот С-концевой фрагмент протеолитические обрабатывается гамма-секретазой (мембранный полиферментный комплекс) с образованием амилоидных пептидов разной длины, преимущественно содержащих 40 и 42 аминокислоты (Hardy J., Selkoe D.J.(2002) Science; 297 (5580): 353-356). Если в патологическом состоянии образование этих пептидов происходит с увеличенной скоростью или нарушено их удаление из головного мозга, повышенные концентрации амилоидного пептида приводят к образованию олигомеров, фибрилл и в конечном счете, бляшек (Farris W. et al. (2007) Am.J. Pathol.; 171 (1): 241-251). Показано, что отложение амилоидных пептидов и бляшек в головном мозге является первым измеримым явлением в патогенезе болезни Альцгеймера и что оно запускает утрату синапсов,синаптических контактов и нейронов (Grimmer T. et al. (2009) Neurobiology of Aging; 30 (12): 1902-1909). После атрофии головного мозга, вызванной массовой утратой нейронов, происходят нарушения познавательной способности, памяти, ориентации и способности решать задачи повседневной жизни, т.е. клинически проявляется слабоумие (Okello A. et al. (2009) Neurology; 73 (10): 754-760). ВАСЕ-1, также известная под названием Asp2 или Memapsin 2, является трансмембранной аспартатпротеазой, значительно экспрессирующейся в нейронах. Вместе со своим субстратом, АРР, она располагается в комплексе Гольджи и эндоцитозных камерах (Willem M., Lammich S., Haass С. (2009)Semin.Cell Dev. Biol.; 20(2): 175-182). Исследования на мышах, лишенных этого фермента, показали отсутствие образования амилоидного пептида, и животные являлись здоровыми и способными к деторождению (Ohno M. et al. (2007) Neurobiol. Dis.; 26(1): 134-145). Генетическая абляция ВАСЕ-1 у мышей,сверхэкспрессирующих АРР, показала отсутствие образования бляшек и обращение нарушения познавательной способности (Ohno M. et al. (2004) Neuron; 41 (1):27-33). Содержание ВАСЕ-1 повышено в головном мозге пациентов, страдающих спорадической болезнью Альцгеймера (Hampel Н., Shen Y. (2009)Scand. J. Clin. Lab. Invest.; 69(1): 8-12). Совместно эти данные свидетельствуют о том, что ингибирование ВАСЕ-1 может быть подходящей стратегией лечения болезни Альцгеймера. Настоящее изобретение относится к новым производным оксазина, обладающим ингибирующей активностью по отношению к ВАСЕ, к их получению, к их применению в медицине и к содержащим их лекарственным средствам. Настоящего изобретение относится к соединению формулы[3-(5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5 циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты и их фармацевтически приемлемые соли. Поэтому первым объектом являются соединения, выбранные из группы и их фармацевтически приемлемые соли. В одном из вариантов воплощения настоящего изобретения предлагается соединение и его фармацевтически приемлемая соль, где соединение имеет следующую формулу: В другом воплощении настоящего изобретения предлагается соединение и его фармацевтически приемлемая соль, где соединение имеет следующую формулу: Еще в одном воплощении настоящего изобретения предлагается соединение и его фармацевтически приемлемая соль, где соединение имеет следующую формулу: Еще одним объектом изобретения является фармацевтическая композиция, используемая для лечения неврологических растройств, включающая соединение, как определено выше, или его фармацевтически приемлемую соль, в качестве активного ингредиента, и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Вследствие наличия одного или более чем одного асимметрического атома углерода, который может содержаться в соединении формулы I, соответствующее соединение формулы I может находиться в чистой оптически активной форме или в форме смеси оптических изомеров, например, в форме рацемической смеси. Все такие оптически чистые изомеры и их смеси, включая рацемические смеси, входят в объем настоящего изобретения. При использовании в настоящем изобретении термин "изомеры" означает разные соединения, которые обладают одной и той же молекулярной формулой, но различаются по расположению и конфигурации атомов. Кроме того, при использовании в настоящем изобретении термин "оптический изомер" или"стереоизомер" означает любую из разных стереоизомерных конфигураций, которые могут существовать для данного соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, и включает геометрические изомеры. Следует понимать, что заместитель может быть присоединен к атому углерода, являющемуся хиральным центром. Поэтому настоящее изобретение включает энантиомеры, диастереоизомеры и рацематы соединения. "Энантиомеры" представляют собой пару стереоизомеров, которые являются зеркальными изображениями, не налагающимися друг на друга. Смесь двух энантиомеров состава 1:1 называется "рацемической" смесью. Этот термин используется для обозначения рацемической смеси, если это является подходящим. "Диастереоизомеры" являются стереоизомерами, которые содержат не менее двух асимметрических атомов, но которые не являются зеркальными изображениями друг друга. Абсолютную сте-2 020008 реохимическую конфигурацию описывают с помощью R-S системы Кана-Ингольда-Прелога. Если соединение является чистым энантиомером, то стереохимическую конфигурацию каждого хирального атома углерода можно описать, как R или S. Разделенные соединения, абсолютная конфигурация которых не установлена, можно описать с помощью символов (+) или (-) в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризации света при длине волны линии D натрия (право- и левовращающие). Некоторые соединения, описанные в настоящем изобретении, содержат один или большее количество асимметрических центров и поэтому могут образовывать энантиомеры, диастереоизомеры и другие стереоизомерные формы, абсолютную стереохимическую конфигурацию которых можно обозначить как(R)- или (S)-. В объем настоящего изобретения входят все такие возможные изомеры, включая рацемические смеси, оптически чистые формы и смеси промежуточного состава. Оптически активные (R)- и (S)изомеры можно получить с помощью хиральных синтонов или хиральных реагентов или выделить по обычным методикам. Если соединение содержит двойную связь, то заместители могут находиться в Е или Z конфигурации. Если соединение представляет собой дизамещенный циклоалкил, то заместители циклоалкила могут находиться в цис- или транс-конфигурации. Соединение формулы I может существовать в таутомерных формах. Все такие таутомеры входят в объем настоящего изобретения. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-3R,6R)-5-амино-3,6 диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в свободной форме. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил)-4-фторфенил]амиду 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в форме фармацевтически приемлемой соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-3R,6R)-5 амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-циано-3 метилпиридин-2-карбоновой кислоты в форме гидрохлоридной соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-R)-5-амино-3 дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты в свободной форме. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2 карбоновой кислоты в форме фармацевтически приемлемой соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4 фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты в форме гидрохлоридной соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-R)-5-амино-3 дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-циано-3-метилпиридин-2 карбоновой кислоты в свободной форме. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5 циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в форме фармацевтически приемлемой соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в форме гидрохлоридной соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к гидрату гидрохлорида [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты. При использовании в настоящем изобретении термины "соль" или "соли" означают соль присоединения с кислотой или соль присоединения с основанием соединения, предлагаемого в настоящем изобретении. "Соли", в частности, включают "фармацевтически приемлемые соли". Термин "фармацевтически приемлемые соли" означает соли, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, и которые обычно не являются нежелательными в биологическом или ином отношении. Во многих случаях соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут образовать соли с кислотой и/или основанием вследствие наличия аминогруппы и/или карбоксигрупп или сходных с ними групп. Фармацевтически приемлемые соли присоединения с кислотами можно образовать с неорганическими кислотами и с органическими кислотами, например ацетат, аспартат, бензоат, безилат, бромид/гидробромид, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, камфорсульфонат, хлорид/гидрохлорид,хлортеофиллонат, цитрат, этандисульфонат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат, гиппурат, гидройодид/йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, манделат, мезилат, метилсульфат, нафтоат, напзилат, никотинат, нитрат, октадеканоат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидрофосфат/дигидрофосфат, полигалактуронат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфосалицилат, тартрат, тозилат и трифторацетат. Неорганические кислоты, из которых можно образовать соли,включают, например, хлористо-водородную кислоту, бромисто-водородную кислоту, серную кислоту,азотную кислоту и фосфорную кислоту. Органические кислоты, из которых можно образовать соли,включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту,лимонную кислоту, бензойную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфо-3 020008 новую кислоту, толуолсульфоновую кислоту и сульфосалициловую кислоту. Фармацевтически приемлемые соли присоединения с основанием можно образовать с неорганическими и органическими основаниями. Неорганические основания, из которых можно образовать соли, включают, например, аммоний и основания металлов групп I-XII Периодической системы. В некоторых вариантах осуществления образуются соли натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, серебра, цинка и меди; особенно подходящие соли включают соли аммония, калия, натрия, кальция и магния. Органические основания, из которых можно образовать соли, включают, например, первичные,вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы. Некоторые органические амины включают изопропиламин, бензатин, холин, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и трометамин. Фармацевтически приемлемые соли, предлагаемые в настоящем изобретении, можно синтезировать из исходного соединения, основного или кислотного фрагмента по обычным химическим методикам. Обычно такие соли можно получить по реакции свободных кислотных форм этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания (такого как гидроксид, карбонат, бикарбонат и т.п. Na, Ca, Mg или K) или по реакции свободных основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующей кислоты. Такие реакции обычно проводят в воде или в органическом растворителе или в их смеси. Обычно, если это возможно, предпочтительными являются неводные среды, такие как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Перечни дополнительных подходящих солей приведены, например, в публикациях "Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed.,Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985) и "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, andUse" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002). Если в одной молекуле содержатся одновременно основная группа и кислотная группа, то соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также могут образовывать внутренние соли, например цвиттерионные молекулы. Пролекарственные соединения настоящего изобретения превращаются in vivo в соединения, предлагаемые в настоящем изобретении. Пролекарство представляет собой активное или неактивное соединение, которое после введения субъекту химически изменяется вследствие физиологического воздействия in vivo, такого как гидролиз, метаболизм и т.п., с превращением в соединение, предлагаемое в настоящем изобретении. Методики приготовления и применения пролекарств и их применимость хорошо известны специалистам в данной области техники. Пролекарства можно по характеру разделить на две неэксклюзивные категории, пролекарства-биологические предшественники и пролекарства-носители. См. публикацию The Practice of Medicinal Chemistry, Ch. 31-32 (Ed. Wermuth, Academic Press, San Diego,Calif., 2001). Обычно пролекарства-биологические предшественники являются соединениями, которые неактивны или обладают низкой активностью по сравнению с активным лекарственным соединением, и содержат одну или большее количество защитных групп, и превращаются в активную форму вследствие метаболизма или сольволиза. И активная форма лекарства, и любой высвободившийся продукт метаболизма должны обладать приемлемо низкой токсичностью. Пролекарства-носители являются лекарственными соединениями, которые содержат фрагментпереносчик, например, которые улучшают всасывание или локализуют высвобождение в центре (центрах) воздействия. Для такого пролекарства-носителя предпочтительно, чтобы связь между лекарственным фрагментом и фрагментом-переносчиком была ковалентной, пролекарство было неактивным или менее активным, чем лекарственное соединение, и любой высвобождающийся фрагмент-переносчик являлся в приемлемой степени нетоксичным. В случае пролекарств, для которых фрагмент-переносчик предназначен для усиления всасывания, высвобождение фрагмента-переносчика обычно должно быть быстрым. В других случаях предпочтительно использовать фрагмент, который обеспечивает медленное высвобождение, например, некоторые полимеры или другие фрагменты, такие как циклодекстрины. Пролекарства-носители, например, можно использовать для улучшения одной или большего количества следующих характеристик: увеличения липофильности, увеличения длительности фармакологического воздействия, улучшения специфичности на участке воздействия, уменьшения токсичности и побочных реакций и/или улучшения характеристик лекарственного препарата (например, стабильности, растворимости в воде, подавления нежелательных органолептических или физико-химических характеристик). Например, липофильность можно увеличить путем образования сложных эфиров (а) гидроксигрупп с липофильными карбоновыми кислотами (например, с карбоновой кислотой, содержащей по меньшей мере один липофильный фрагмент) или (b) карбоксигрупп со спиртами (например, со спиртом, содержащим по меньшей мере один липофильный фрагмент, например, с алифатическими спиртами). Типичными пролекарствами являются, например, эфиры карбоновых кислот с S-ацил- и Оацилпроизводными тиолов, спиртов и фенолов, где ацил обладает значением, определенным в настоящем изобретении. Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые сложные эфиры, которые посредством гидролиза в физиологических условиях превращаются в исходную карбоновую кислоту, например низшие алкиловые сложные эфиры, циклоалкиловые сложные эфиры, низшие алкениловые сложные эфиры, бензиловые сложные эфиры, моно- или дизамещенные низшие алкиловые сложные эфиры, такие как -(амино, моно- или ди-(низший алкил)амино-, карбокси-, низш. алкоксикарбонил)-4 020008 низшие алкиловые сложные эфиры, -(низший алканоилокси-, низший алкоксикарбонил- или ди(низший алкил)аминокарбонил)-низшие алкиловые сложные эфиры, такие как пивалоилоксиметиловый эфир и т.п., обычно применяющиеся в данной области техники. Кроме того, амины маскируют путем образования производных арилкарбонилоксиметила, которые in vivo расщепляются эстеразами с высвобождением свободного лекарственного средства и формальдегида (Bundgaard, J. Med. Chem. 2503(1989. Кроме того, лекарственные средства, содержащие кислую группу NH, такую как имидазольную,имидную, индольную и т.п., маскируют с помощью N-ацилоксиметильных групп (Bundgaard, Design ofProdrugs, Elsevier (1985. Гидроксигруппы маскируют путем образования сложных и простых эфиров. В ЕР 039051 (Sloan and Little) раскрыты пролекарства, являющиеся основаниями Манниха гидроксамовых кислот, их получение и применение. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, включая их соли, также можно получить в форме их гидратов или с включением других растворителей, использовавшихся для их кристаллизации. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, по своей природе или полученной структуре могут образовывать сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями (включая воду); поэтому в объем настоящего изобретения входят сольватированные и несольватированные формы. Термин "сольват" означает молекулярный комплекс соединения, предлагаемого в настоящем изобретении (включая его фармацевтически приемлемые соли) с одной или большим количеством молекул растворителя. Такими молекулами растворителя являются обычно использующиеся в фармацевтике, для которых известно, что они нетоксичны для реципиента, например, вода, этанол и т.п. Термин "гидрат" означает комплекс, в котором молекулой растворителя является вода. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, включая их соли, гидраты и сольваты, по своей природе или полученной структуре могут образовывать полиморфные формы. В объем настоящего изобретения входят все фармацевтически приемлемые изотопно-меченые соединения формулы I, в которой один или более чем один атом заменен/заменены одним или более чем одним атомом, обладающими таким же атомным номером, но атомной массой или массовым числом,отличающимся от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примерами таких изотопов являются изотопы углерода, такие как 11 С, 13 С или 14 С, хлора, такие как 36Cl, фтора, такие как 18F, брома, такие как 76Br, водорода, такие как 2 Н или 3 Н, йода, такие как 123I, 124I, 125I или 131I, азота,такие как 13N или 15N, кислорода, такие как 15 О, 17 О и 18 О, фосфора, такие как 32 Р, и серы, такие как 35S. Изотопно-меченое соединение формулы I можно получить по методикам, аналогичным описанным в примерах, или по обычным методикам, известным специалистам в данной области техники, с использованием соответствующего изотопно-меченого реагента или исходного вещества. Введение более тяжелого изотопа, такого как Н(D), может придать соединению формулы I большую метаболическую стабильность, что может привести, например, к увеличению периода полувыведения in vivo или уменьшению необходимой дозы. Некоторые изотопно-меченые соединения формулы I, например, содержащие радиоактивный изотоп, такой как 3 Н или 14 С, применимы для исследования распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Соединения формулы I, содержащие изотопы, испускающие позитроны, такие как 11 С, 18F, 13N или 15 О, могут быть полезны, например, для изучения занятости рецепторов субстрата с помощью позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ) или однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (ОФЭКТ). Фармацевтически приемлемые сольваты в контексте настоящего изобретения включают такие, в которых растворитель, образующий сольват, может быть изотопно-замещенным, например D2O, d6 ацетон, d6-ДМСО. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, т.е. соединения формулы (I), которые содержат группы, способные выступать в качестве доноров и/или акцепторов для водородных связей, могут образовывать совместные кристаллы с подходящими образующими совместные кристаллы веществами. Эти совместные кристаллы можно получить из соединений формулы (I) по известным методикам образования совместных кристаллов. Такие методики включают размол, нагревание, совместную сублимацию, совместное плавление или взаимодействие в растворе соединений формулы (I) с образующим совместные кристаллы веществом при условиях кристаллизации и выделение образовавшихся таким образом совместных кристаллов. Подходящие образующие совместные кристаллы вещества включают описанные в WO2004/078163. Поэтому настоящее изобретение также относится к совместным кристаллам,включающим соединение формулы (I). В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению, предлагаемому в настоящем изобретении, или его фармацевтически приемлемой соли, которое выбрано из группы,включающей: В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-(5-амино-3-дифторметил 3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты или его фармацевтически приемлемой соли. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к[3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты или его фармацевтически приемлемой соли. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к [3-S)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амиду 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты или его фармацевтически приемлемой соли. В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5 цианопиридин-2-карбоновой кислоты или его фармацевтически приемлемой соли. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-R)-5-амино-3 дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты, которая характеризуется порошковой рентгенограммой, содержащей по меньшей мере 1, 2 или 3 пика, обладающие значениями углов рефракции 2-тета , измеренными с использованием излученияCuK, выбранными из группы, включающей 8,3, 10,8, 16,6, 18,8, 21,5, 22,2, 23,3, 25,4 и 28,5, более предпочтительно, если указанные значения могут обладать значениями, отличающимися на 0,2 2. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-R)-5 амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты, которая характеризуется порошковой рентгенограммой, полученной с использованием излучения CuK, в основном такой же, как порошковая рентгенограмма, приведенная на фиг. 1. Подробное описание приведено в примере 152. В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4 фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6 трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2 карбоновой кислоты, которая характеризуется порошковой рентгенограммой, содержащей по меньшей мере 1, 2 или 3 пика, обладающие значениями углов рефракции 2-тета , измеренными с использованием излучения CuK, выбранными из группы, включающей 8,3, 9,0, 10,8, 12,8, 13,8, 15,4, 16,2, 17,1, 18,2 и 24,5 , где указанные значения могут обладать значениями, отличающимися на 0,2 2. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-3R,6R)-5-амино 3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты, которая характеризуется порошковой рентгенограммой, полученной с использованием излучения CuK , в основном такой же, как порошковая рентгенограмма, приведенная на фиг. 2. Подробное описание приведено в примере 72b. В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5 циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Способ получения соединения формулы I, в свободной форме или в форме соли, включает: а) реакцию соединения формулы в которой R1, R3, R4, R5, R6, E1 и Е 2 являются такими, как определено для формулы I, в свободной форме или в форме соли, с соединением формулы в которой R2 является таким, как определено для формулы I, и L обозначает отщепляющуюся группу, в свободной форме или в форме соли,-6 020008 в которой R1, R3, R4, R5, R6, E1 и Е 2 являются такими, как определено для формулы I, в свободной форме или в форме соли, с соединением формулы в которой R2 является таким, как определено для формулы I, в свободной форме или в форме соли,c) необязательное восстановление, окисление или другую функционализацию полученного соединения,d) отщепление любой необязательно содержащейся защитной группы (групп) иe) выделение полученного таким образом соединения формулы I в свободной форме или в форме соли. Реакции можно провести по обычным методикам, например, как описано в примерах. Обработку реакционных смесей и очистку полученных таким образом соединений можно провести по известным методикам. Соли можно получить известным образом из свободных соединений и наоборот. Соединения формулы I также можно получить дополнительными обычными способами, например,описанными в примерах. Исходные вещества формул II и III являются известными, их можно получить по обычным методикам с использованием в качестве исходных веществ известных соединений, можно получить из известных соединений, как это описано в примерах или можно получить по методикам, аналогичным описанным в примерах. Соединения формулы I в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, ниже в настоящем изобретении часто называющиеся, как "средства, предлагаемые в настоящем изобретении",по данным исследований in vitro или in vivo обладают ценными фармакологическими характеристиками и поэтому применимы в лекарственных средствах. Например, средства предлагаемые в настоящем изобретении, являются ингибиторами аспартатпротеаз и их можно применять для лечения или предупреждения патологического состояния, заболевания или нарушения, включающего введение таких ферментов. В частности, средства, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют бета-секретазу и таким образом приводят к образованию бетаамилоида и последующей агрегации в олигомеры и фибриллы. Способность средства, предлагаемого в настоящем изобретении, ингибировать протеазы можно оценить, например, с помощью исследований, описанных ниже в настоящем изобретении. Исследование 1. Ингибирование ВАСЕ-1 человека Рекомбинантный ВАСЕ-1 (внеклеточный домен, экспрессированный в бакуловирусе и очищенный по стандартным методикам) при концентрации, равной от 0,1 до 10 нМ, инкубируют с исследуемым соединением при различных концентрациях при комнатной температуре в течение 1 ч в ацетатном буфере при концентрации, равной от 10 до 100 мМ, рН 4,5, содержащем 0,1% ХЛАПС (3-3 холамидопропил)диметиламмоний)-1-пропансульфоновая кислота). Синтетический пептидный субстрат,способный тушить флуоресценцию, полученный из последовательности АРР и содержащий подходящую пару флуорофор-тушитель, добавляют до конечной концентрации, равной от 1 до 5 мкМ, и усиление флуоресценции регистрируют при подходящей длине волны возбуждения/испускания в спектрофлуориметре для микропланшетов в течение 5-30 мин с 1-минутными интервалами. Значения IC50 рассчитывают по выраженному в процентах ингибированию активности ВАСЕ-1 в зависимости от концентрации исследуемого соединения Исследование 2: Ингибирование ВАСЕ-2 человека Рекомбинантный ВАСЕ-2 (внеклеточный домен, экспрессированный в бакуловирусе и очищенный по стандартным методикам) при концентрации, равной от 0,1 до 10 нМ, инкубируют с исследуемым соединением при различных концентрациях при комнатной температуре в течение 1 ч в ацетатном буфере при концентрации, равной от 10 до 100 мМ, рН 4,5, содержащем 0,1% ХЛАПС. Синтетический пептидный субстрат, полученный из последовательности АРР и содержащий подходящую пару флуорофортушитель, добавляют до конечной концентрации, равной от 1 до 5 мкМ, и усиление флуоресценции регистрируют и усиление флуоресценции регистрируют при подходящей длине волны возбуждения/испускания в спектрофлуориметре для микропланшетов в течение 5-30 мин с 1-минутными интервалами. Значения IC50 рассчитывают по выраженному в процентах ингибированию активности ВАСЕ-2 в зависимости от концентрации исследуемого соединения. Исследование 3: Ингибирование катепсина D человека Рекомбинантный катепсин D (экспрессированный в бакуловирусе, как прокатепсин D, очищенный по стандартным методикам и активированный путем инкубации в натрийформиатном буфере, рН 3,7) инкубируют с исследуемым соединением при различных концентрациях при комнатной температуре в течение 1 ч в натрийформиатном или натрийацетатном буфере при подходящем значении рН в диапазоне от 3,0 до 5,0. Синтетический пептидный субстрат Mca-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(DNP)-DArg-NH2 добавляют до конечной концентрации, равной от 1 до 5 мкМ, и усиление флуоресценции регистрируют при длине волны возбуждения 325 нм и длине волны испускания 400 нм в спектрофлуориметре для микропланшетов в течение 5-30 мин с 1-минутными интервалами. Значения IC50 рассчитывают по выраженному в процентах ингибированию активности катепсина D в зависимости от концентрации исследуемого соединения. Исследование 4: Ингибирование высвобождения амилоидного пептида 1-40 из клеток Клетки яичника китайского хомячка трансфицируют геном амилоидного белка-предшественника. Клетки помещают в 96-луночный микропланшет для титрования при плотности, равной 8000 клеток/лунка, и культивируют в течение 24 ч в культуральной среде DMEM (модифицированная Дульбекко среда Игла), содержащей 10% ФТС (фетальная телячья сыворотка). Исследуемое соединение добавляют к клеткам при различных концентрациях и клетки культивируют в течение 24 ч в присутствии исследуемого соединения. Надосадочные жидкости собирают и концентрацию амилоидного пептида 1-40 определяют с помощью современных иммуноферментных методик, например иммуноферментного анализа(ELISA) с двойной фиксацией, однородного иммуноферментного анализа с использованием флуоресценции с разрешением по времени (HTRF) или электролюминесцентного иммуноферментного анализа. Активность соединения рассчитывают по выраженному в процентах ингибированию высвобождения амилоидного пептида в зависимости от концентрации исследуемого соединения. Средства, предлагаемые в настоящем изобретении, исследованы по меньшей мере по одной из описанных выше методик. Конкретные характеристики активности средств, предлагаемых в настоящем изобретении, приведены в примере 187. При использовании в настоящем изобретении термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает любой и все растворители, диспергирующие среды, покрытия, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, консерванты (например, бактерицидные агенты, фунгицидные агенты), изотонические агенты, агенты, задерживающие всасывание, соли, консерванты, лекарственные средства, стабилизаторы лекарственных средств, связующие, инертные наполнители, разрыхлители, смазывающие агенты,подсластители, ароматизаторы, красители и их комбинации, как это должно быть известно специалисту с общей подготовкой в данной области техники (см., например, публикацию Remington's PharmaceuticalSciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329). За исключением случаев, когда обычный носитель несовместим с активным ингредиентом, подразумевается его использование в терапевтических или фармацевтических композициях. Термин "терапевтически эффективное количество" соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, означает количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, которое приводит к биологической или медицинской реакции субъекта, или облегчает симптомы, замедляет или задерживает прогрессирование заболевания, или предупреждает заболевание и т.п. В одном неограничивающем варианте осуществления термин "терапевтически эффективное количество" соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, означает количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, которое при введении субъекту эффективно (1) по меньшей мере для частичного ослабления, подавления,предупреждения и/или облегчения протекания патологического состояния или нарушения, или заболевания (i) опосредуемого с помощью ВАСЕ-1, или (ii) связанного с активностью ВАСЕ-1, или (iii) характеризующегося активностью (нормальной или аномальной) ВАСЕ-1; или (2) для уменьшения или ингибирования активности ВАСЕ-1. В другом неограничивающем варианте осуществления термин "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, которое при введении в клетку или ткань или в неклеточный биологический материал или среду эффективно, по меньшей мере, для частичного уменьшения или ингибирования активности ВАСЕ-1. Значение термина "терапевтически эффективное количество", проиллюстрированное в приведенных выше вариантах осуществления для ВАСЕ-1, является таким же применительно к любым другим относящимся к этому белкам/пептидам/ ферментам, таким как ВАСЕ-2 или катепсин D. При использовании в настоящем изобретении термин "субъект" означает животное. Обычно животным является млекопитающее. Субъект также означает например, приматов (например, людей, мужчин или женщин), коров, овец, коз, лошадей, собак, кошек, кроликов, крыс, мышей, рыб, птиц и т.п. В некоторых вариантах осуществления субъектом является примат. В других вариантах осуществления субъектом является человек. При использовании в настоящем изобретении термин "ингибировать", "ингибирование" или "подавление" означает ослабление или подавление данного патологического состояния, симптома или нарушения, или заболевания или значительное ослабление исходной биологической активности или про-8 020008 цесса. При использовании в настоящем изобретении термин "лечить", "лечение" любого заболевания или нарушения в одном варианте осуществления означает улучшение протекания заболевания или нарушения (т.е. остановку или ослабление развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов). В другом варианте осуществления "лечить", "лечение" означает улучшение по меньшей мере одного физического параметра, который может не ощущаться пациентом. В еще одном варианте осуществления "лечить", "лечение" означает изменение протекания заболевания или нарушения, физическое (например, стабилизацию проявляющегося симптома) или физиологическое (например, стабилизацию физикального параметра), или и то, и другое. В еще одном варианте осуществления "лечить","лечение" означает предупреждение или задержку начала или развития, или прогрессирования заболевания или нарушения. При использовании в настоящем изобретении субъект "нуждается в" лечении, если лечение окажет на такой субъект благоприятное биологическое или медицинское воздействие или улучшит качество его жизни. При использовании в настоящем изобретении термин "средство", предлагаемое в настоящем изобретении, используется взаимозаменяемым образом с термином "соединение", предлагаемое в настоящем изобретении, и не отличается от него по значению. При использовании в настоящем изобретении (в особенности в формуле изобретения) термины, использующиеся в единственном числе, включают множественное число, и наоборот, если в настоящем изобретении не указано иное и если это явно не противоречит контексту. Использование любого и всех примеров или указаний на типичные значения (например, "такой как") в настоящем изобретении предназначено просто для лучшего описания настоящего изобретения и не налагает ограничения на объем настоящего изобретения, определяющийся формулой изобретения. Благодаря их способности ингибировать протеазы средства, предлагаемые в настоящем изобретении, применимы, например, для лечения или предупреждения ряда приводящих к инвалидности психиатрических, психотических, неврологических или сосудистых патологических состояний, например, патологического состояния, заболевания или нарушения сосудистой системы или нервной системы, для которого играет роль выработка или агрегация бета-амилоида, или основанные на ингибировании ВАСЕ 2 (бета-сайт АРР-расщепляющий фермент 2) или катепсина D, которые являются близкими гомологами аспартилпротеаз пепсинового типа и бета-секретазы, и вследствие корреляции экспрессирования ВАСЕ 2 или катепсина D с дополнительной канцерогенной и метастатической способностью опухолевых клеток, применимы в качестве противораковых лекарственных средств, например для подавления процесса метастазирования, связанного с опухолевыми клетками. Примеры указанных заболеваний или нарушений сосудистой системы или нервной системы включают без ограничений состояние тревоги, такое как паническое расстройство с агорафобией или без нее, агорафобию без панического расстройства в анамнезе, боязнь животных или другие специфические фобии, включая социофобию, состояние социальной тревоги, тревогу, обсессивно-компульсивное нарушение, стрессовое нарушение, включая посттравматическое или острое стрессовое нарушение, или генерализованное или вызванное токсикоманией состояния тревоги; неврозы; припадки; эпилепсию, в особенности парциальные припадки, простые, комплексные или парциальные припадки, переходящие во вторичные генерализованные припадки или генерализованные припадки [абсанс (типический или атипический), миоклонические, клонические, тонические,тонические-клонические или атонические припадки]; судороги; мигрень; аффективное расстройство,включая депрессивное или биполярное расстройство, например, однократное или рецидивирующее большое депрессивное расстройство, большую депрессию, дистимическое расстройство, дистимию, депрессивную задержку менструации, биполярное I или биполярное II маниакальное расстройство или циклотимическое расстройство; психотические нарушения, включая шизофрению и депрессию; нейродегенеративное заболевание, например нейродегенеративное заболевание, обусловленное ишемией головного мозга; острый, травматический или хронический дегенеративный процесс в центральной нервной системе, такой как болезнь Паркинсона, синдром Дауна, слабоумие, например, старческое слабоумие,слабоумие, связанное с тельцами Леви или лобно-височное слабоумие, нарушение познавательной способности, ухудшение познавательной способности, например слабое ухудшение познавательной способности, нарушение памяти, амилоидную невропатию, периферическую невропатию, болезнь Альцгеймера, синдром Герстманна-Штройстлера-Шейнкера, болезнь Ниманна-Пика, например болезнь НиманнаПика типа С, воспаление головного мозга, поражение головного мозга, спинного мозга или нерва, например, травматическое повреждение головного мозга (ТПГ), травму нерва или травму головного мозга,сосудистый амилоидоз, кровоизлияние в мозг с амилоидозом, хорею Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, рассеянный склероз или синдром ломкой хромосомы; почесуху; амилоидную ангиопатию головного мозга; энцефалопатию, например инфекционную губкообразную энцефалопатию; удар; нарушение внимания, например синдром дефицита внимания с гиперактивностью; синдром Туретта; нарушение речи, включая заикание; нарушение циркадного ритма, например у субъектов, страдающих от влияния десинхроноза после трансмеридианного перелета или посменной работы; боль; ноцицепцию; зуд; рвоту, включая острую, задержанную рвоту или рвоту в предвидении опасности, такую как рвота,-9 020008 вызванная химиотерапией или облучением, укачивание в транспорте или постоперативную тошноту или рвоту; нарушение питания, включая нервную анорексию и нервную булимию; предменструальный синдром; мышечный спазм или спастичность, например у пациентов страдающих параличом нижних конечностей; нарушение слуха, например звон в ушах или возрастное ухудшение слуха; недержание мочи; глаукому; миозит с включенными тельцами; или связанные с приемом веществ нарушения, включая злоупотребление веществами или зависимость от веществ, включая такие вещества, как алкоголь, эффекты абстиненции. Средства, предлагаемые в настоящем изобретении, также могут быть применимы для улучшения познавательной способности, например у субъектов, страдающих от дементного патологического состояния, такого как болезнь Альцгеймера; или для премедикаций перед анестезией или вспомогательными процедурами, такими как эндоскопия, включая эндоскопию желудка; или в качестве лигандов, например радиолигандов или лигандов для позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ). Для указанных выше показаний подходящая доза будет зависеть, например, от соединения, использующегося в качестве активного фармацевтического ингредиента, реципиента, пути введения, типа и тяжести подвергающегося лечению патологического состояния, заболевания или нарушения или необходимого эффекта. Однако показано, что обычно для животных удовлетворительные результаты получают при суточной дозе, равной от примерно 0,1 до примерно 100, предпочтительно от примерно 1 до примерно 50 мг/(кг массы тела животного). Для более крупных животных, например, людей, показанная суточная доза находится в диапазоне от примерно 0,5 до примерно 2000, предпочтительно от примерно 2 до примерно 200 мг средства, предлагаемого в настоящем изобретении, обычно вводимого, например, в виде разделенных доз до 4 раз в сутки или в форме пролонгированного действия. Для соединения [3-R)-5 амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин 2-карбоновой кислоты прогнозируемая суточная доза находится в диапазоне от 10 до 370 мг (полная суточная доза для лица массой 70 кг). Средство, предлагаемое в настоящем изобретении, можно вводить любым удобным путем, в частности энтерально, предпочтительно перорально, например в виде таблеток или капсул, или парентерально, например в виде раствора или суспензии для инъекций. Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая средство, предлагаемое в настоящем изобретении, в качестве активного фармацевтического ингредиента совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем и необязательно совместно с другими вспомогательными веществами, такими как ингибиторы ферментов цитохрома Р 450, средства, предотвращающие разложение активных фармацевтических ингредиентов под действием цитохрома Р 450, средства, улучшающие фармакокинетические характеристики активных фармацевтических ингредиентов, средства, улучшающие или увеличивающие биологическую доступность активных фармацевтических ингредиентов и т.п., например, сок грейпфрута, кетоконазол или предпочтительно ритонавир. Такую композицию можно приготовить обычным образом, например, путем смешивания ее компонентов. Разовые дозированные формы содержат, например, от примерно 0,1 до примерно 1000, предпочтительно от примерно 1 до примерно 500 мг средства, предлагаемого в настоящем изобретении. Например, для доклинических исследований на животных соединение, предлагаемое в настоящем изобретении,такое как[3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4 фторфенил]амид 5-цианопиридин-2-карбоновой кислоты, можно приготовить в виде суспензии в 0,5% растворе метилцеллюлозы с добавлением 0,1% Tween80. Кроме того, фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, можно приготовить в твердой форме (включая без наложения ограничений капсулы, таблетки, пилюли, гранулы, порошки или суппозитории) или в жидкой форме (включая без наложения ограничений растворы, суспензии или эмульсии). Фармацевтические композиции можно подвергнуть обычной фармацевтической обработке, такой как стерилизация, и/или они могут содержать обычные инертные разбавители, смазывающие агенты или буферные агенты, а также вспомогательные вещества, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы и буферные агенты и т.п. Обычно фармацевтические композиции являются таблетками или капсулами из желатина, включающими активный ингредиент, а также:b) смазывающие агенты, например диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, ее магниевую или кальциевую соль и/или полиэтиленгликоль; для таблеток такжеc) связующие, например алюмосиликат магния, крахмальная паста, желатин, трагакантовую камедь,метилцеллюлозу, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидон; при необходимостиd) разрыхлители, например крахмалы, агар, альгиновую кислоту или ее натриевую соль, или шипучие смеси; и/илиe) абсорбенты, красители, ароматизаторы и подсластители. На таблетки по методикам, известным в данной области техники, можно нанести пленочное покрытие или энтеросолюбильное покрытие. Композиции, подходящие для перорального введения, включают соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в эффективном количестве в виде таблеток, лепешек, водных или масляных суспензий, диспергирующихся порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул или сиропов,или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, получают по любой методике, известной в данной области техники для приготовления фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или большее количество агентов, выбранных из группы, включающей подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты, чтобы получить фармацевтически привлекательные и обладающие приятным вкусом препараты. Таблетки могут содержать активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми инертными наполнителями, которые являются подходящими для изготовления таблеток. Этими инертными наполнителями являются, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и разрыхляющие агенты, например кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, например крахмал, желатин или камедь акации; и смазывающие агенты, например стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки не содержат покрытия или на них по известным методикам наносят покрытие для задержки распада и всасывания в желудочно-кишечном тракте,что обеспечивает непрерывное воздействие в течение более длительного периода времени. Например,можно использовать такое замедляющее вещество, как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Препараты для перорального применения также могут представлять собой капсулы из твердого желатина, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или капсулы из мягкого желатина, в которых активный ингредиент смешан с водой или масляной средой, например арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом. Некоторые композиции для инъекций представляют собой изотонические водные растворы или суспензии, а суппозитории предпочтительно готовят из эмульсий или суспензий жиров. Указанные композиции можно стерилизовать и/или прибавлять к ним вспомогательные вещества, такие как консервирующие, смачивающие или эмульгирующие агенты, стимуляторы растворения, соли для регулирования осмотического давления и/или буферные агенты. Кроме того, они также могут содержать другие терапевтически ценные вещества. Указанные композиции получают по обычным технологиям смешивания,гранулирования или нанесения покрытий и они содержат примерно 0,1-75% или содержат примерно 150% активного ингредиента. Композиции, подходящие для чрескожного введения, включают эффективное количество соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, с носителем. Носители, подходящие для чрескожного введения, включают впитывающиеся фармакологически приемлемые растворители, способствующие проникновению через кожу реципиента. Например, устройства для чрескожного введения представляют собой повязку, включающую защитный слой, резервуар, содержащий соединение необязательно с носителями, необязательно барьер, регулирующий доставку соединения через кожу реципиента с заданной скоростью в течение пролонгированного периода времени, и средства закрепления устройства на коже. Композиции, подходящие для местного введения, например, на кожу или в глаза, включают водные растворы, суспензии, мази, кремы, гели или распыляемые композиции, например, для подачи в виде аэрозоля и т.п. Такие устройства местного действия являются особенно подходящими для воздействия на кожу, например, для лечения рака кожи, например, для использования профилактических средств в солнцезащитных кремах, лосьонах, аэрозольных препаратах и т.п. Поэтому они являются особенно подходящими для использования в средствах местного действия, включая косметические, хорошо известных в данной области техники. Они могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, агенты, регулирующие тоничность, буферные агенты и консерванты. При использовании в настоящем изобретении местное введение также может представлять собой ингаляционное или назальное введение. Обычно его можно провести в виде сухого порошка (по отдельности или в виде смеси, например, сухой смеси с лактозой, в виде смесей с компонентами, например, с фосфолипидами) с помощью ингалятора для сухих порошков или в виде аэрозольного спрея, подаваемого из находящегося по давлением контейнера, с помощью насоса, распыляющего устройства, атомизатора или устройства типа небулайзер с использованием или без использования подходящего пропеллента. Настоящее изобретение также относится к безводным фармацевтическим композициям и дозированным формам, включающим соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, в качестве активных ингредиентов, поскольку вода может облегчать разложение некоторых соединений. Безводные фармацевтические композиции и дозированные формы, предлагаемые в настоящем изобретении, можно получить с использованием безводных или обладающих низкой влажностью ингредиентов в условиях низкой влажности. Безводную фармацевтическую композицию можно готовить и хранить так, чтобы она оставалась безводной. В соответствии с этим безводные композиции упаковывают в материалы, для которых известно, что они защищают от воздействия воды, так чтобы их было можно включить в подходящие наборы препаратов. Примеры подходящих упаковочных средств включают, но не ограничиваются только ими, герметично запаиваемую фольгу, пластмассы, контейнеры для разовых доз (например, флаконы), блистерные упаковки и ленточные упаковки. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям и дозированным формам, которые включают один или большее количество агентов, которые регулируют скорость, с которой будет разлагаться соединение, предлагаемое в настоящем изобретении в качестве активного ингредиента. Такие агенты, которые в настоящем изобретении называют "стабилизаторами", включают, но не ограничиваются только ими, антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, буферные агенты, регулирующие рН, и солевые буферные агенты и т.п. В соответствии с изложенным выше другим объектом настоящего изобретения является средство,предлагаемое в настоящем изобретении, предназначенное для применения в качестве лекарственного средства, например, для лечения или предупреждения неврологического или сосудистого патологического состояния, заболевания или нарушения, для которого играет роль выработка или агрегация бетаамилоида, или для подавления процесса метастазирования, связанного с опухолевыми клетками. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к средству, предлагаемому в настоящем изобретении, предназначенному для применения для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого активностью ВАСЕ-1, ВАСЕ-2 или катепсина D. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к средству, предлагаемому в настоящем изобретении, предназначенному для применения для лечения болезни Альцгеймера. Средство, предлагаемое в настоящем изобретении, можно вводить в виде единственного активного фармацевтического ингредиента или в виде комбинации по меньшей мере с одним другим активным фармацевтическим ингредиентом, эффективным, например, для лечения или предупреждения неврологического или сосудистого патологического состояния, заболевания или нарушения, для которого играет роль выработка или агрегация бета-амилоида, или для подавления процесса метастазирования, связанного с опухолевыми клетками. Такая фармацевтическая комбинация может представлять собой разовую дозированную форму, где разовая дозированная форма содержит заранее заданное количество каждого из по меньшей мере двух активных компонентов совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Альтернативно, фармацевтическая комбинация может представлять собой упаковку, содержащую по меньшей мере два активных компонента по отдельности, например, упаковку или дозирующее устройство, применимое для одновременного или раздельного введения по меньшей мере двух активных компонентов, в котором эти активные компоненты расположены по отдельности. Другим объектом настоящего изобретения являются такие фармацевтические комбинации. В комбинированной терапии средство, предлагаемое в настоящем изобретении, и другое терапевтическое средство могут быть изготовлены и/или приготовлены одним и тем же или разными изготовителями. Кроме того, соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, и другое терапевтическое средство могут быть объединены в комбинированном средстве: (i) до передачи комбинированного продукта врачам (например, в случае набора, включающего соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, и другое терапевтическое средство); (ii) самими врачами (или под руководством врача) незадолго до введения; (iii) в самом пациенте, например, во время последовательного введения соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, и другого терапевтического средства. Приведенные ниже примеры иллюстрируют настоящее изобретение, но не ограничивают его. Примеры Аббревиатуры АЦН - ацетонитрил АсОН - уксусная кислотаt-BuOH - трет-бутанол ДАТС - диэтиламинотрифторид серы (Et2N)2SF3 ДХМ - дихлорметан ДИАД - диизопропилазодикарбоксилат ДИПЭА - диизопропилэтиламин ДМАП - 4-диметиламинопиридин ДМФ - диметилформамид ДМСО - диметилсульфоксид ДФФФ - бис(дифенилфосфино)ферроцен ЭИ - энантиомерный избыток ЭДХ - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорид экв. - эквивалент(ы)IPAc - изопропилацетат ЖХМС - жидкостная хроматография с масс-спектрометрией ДАЛ - диизопропиламид лития МеОН - метанол мин - минута (минуты) МС - масс-спектрометрия ЯМР - спектрометрия ядерного магнитного резонанса НФ - нормальная фаза ПЭ - петролейный эфирRt - время удерживания КТ - комнатная температура ПДС - псевдодвижущийся слой ТМБЭ - трет-бутилметиловый эфир ТФК - трифторуксусная кислота ТГФ - тетрагидрофуран ТСХ - тонкослойная хроматография СЭЖХ - сверхэффективная жидкостная хроматография Общая информация по хроматографии Методика ВЭЖХ H1 (RtH1): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,030 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C18, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК; В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 30-100% В за 3,25 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика ВЭЖХ Н 2 (RtH2): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,030 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C18, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК; В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 0-100% В за 3,25 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика ЖХМС Н 3 (RtH3): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,0 30 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C18, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК, В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 10-100% В за 3,25 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика ЖХМС Н 4 (RtH4): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,030 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C8, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК, В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 10-95 % В за 2,00 мин, 95% В 2,00 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика СЭЖХ Н 5 (RtH5): Размеры колонки для ВЭЖХ: 2,1 50 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Acquity UPLC HSS Т 3 С 18, 1,7 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,1 об.% ТФК, В) АЦН + 0,1 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 5-100% В за 1,5 мин, скорость потока = 1,0 мл/мин Методика ЖХМС Н 6 (RtH6): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,030 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C18, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК; В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 40-100 % В за 3,25 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика ЖХМС Н 7 (RtH7): Размеры колонки для ВЭЖХ: 3,030 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Zorbax SB-C18, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% ТФК; В) АЦН + 0,05 об.% ТФК Градиентный режим для ВЭЖХ: 50-100% В за 3,25 мин, скорость потока = 0,7 мл/мин Методика ЖХМС Н 8 (RtH8): Размеры колонки для ВЭЖХ: 4,020 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Mercury MS Synergi, 2 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,1 об.% муравьиной кислоты, В) АЦН Градиентный режим для ВЭЖХ: 0,5 мин 30% В, 30-95% В за 1 мин, 0,9 мин 95% В, скорость потока = 2,0 мл/мин Температура колонки для ВЭЖХ: 30 С Методика ЖХМС Н 9 (RtH9): Размеры колонки для ВЭЖХ: 4,020 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Mercury MS Synergi, 2 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,1 об.% муравьиной кислоты, В) АЦН Градиентный режим для ВЭЖХ: 0,5 мин 70% В, 70-100% В за 1 мин, 0,6 мин 70% В, скорость потока = 2,0 мл/мин Температура колонки для ВЭЖХ: 30 С Методика СЭЖХ Н 10 (RtH10): Размеры колонки для ВЭЖХ: 2,150 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Acquity UPLC HSS Т 3, 1,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% муравьиной кислоты + 3,75 мМ ацетат аммония В) АЦН + 0,04 об.% муравьиной кислоты Градиентный режим для ВЭЖХ: 2-98% В за 1,7 мин, 98% В 0,45 мин,скорость потока = 1,2 мл/мин Методика ЖХМС H11 (RtH11): Размеры колонки для ВЭЖХ: 2,130 мм Тип колонки для ВЭЖХ: Ascentis Express С 18, 2,8 мкм Элюент для ВЭЖХ: А) вода + 0,05 об.% муравьиной кислоты + 3,75 мМ ацетат аммония, В) АЦН + 0,04 об.% муравьиной кислоты Градиентный режим для ВЭЖХ: 2-98 % В за 1,4 мин, 0,75 мин 98% В,скорость потока =1,2 мл/мин Температура колонки для ВЭЖХ: 50 С Пример 42. Гидрохлоридa) 1-(5-Бром-2-фторфенил)этанон Раствор 17,78 мл (126 ммоль) диизопропиламина в 375 мл ТГФ охлаждали до -78 С. По каплям добавляли 1,6 М раствор BuLi в гексанах (79 мл, 126 ммоль). Через 15 мин по каплям добавляли 20 г 4 бром-1-фторбензола (114 ммоль), поддерживая температуру равной ниже -60 С. После перемешивания в течение 2,5 ч при -70 С добавляли 13,22 мл этилдифторацетата. Смесь нагревали при -40 С и затем реакцию останавливали путем выливания смеси в 1 М HCl. Смесь экстрагировали лигроином, сушили надMgSO4H2O, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель; гексан/515% ТМБЭ) и получали искомый продукт в виде желтой жидкости. 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 8,09 (dd, 1H), 7,82-7,77 (m, 1 Н), 7,17 (t, 1H), 6,45 (t, 1H, CHF2)b) Трет-бутиловый эфир 1-[(5-бром-2-фторфенил)-1-дифторметилаллил]карбаминовой кислоты Смесь 16 г (63,2 ммоль) 1-(5-бром-2-фторфенил)этанона и 26,3 г (69,6 ммоль) N-третбутоксикарбонилтрифенилиминофосфорана нагревали при 90 С в толуоле в течение 18 ч. Смесь растирали с гексаном и фильтровали для удаления трифенилфосфиноксида. Фильтрат очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/1-5% ТМБЭ) и получали 11,37 г (32,3 ммоль) искомого продукта в виде немного загрязненного желтого масла. ТСХ: Rf (гексан/EtOAc 6:1) = 0,65. Продукт растворяли в 100 мл ТГФ и охлаждали до -78 С. По каплям добавляли винилмагнийбромид (48 мл 1 М раствора в ТГФ), не давая температуре реакционной смеси превысить -60 С. Смесь перемешивали при -70 С в течение 1 ч и затем ей давали нагреться до 0 С. Реакцию останавливали 10% водным раствором хлорида аммония и экстрагировали с помощью ТМБЭ. Органический слой промывали рассолом, обрабатывали активированным древесным углем и MgSO4H2O и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и кристаллизовали из гексана и получали искомый продукт в виде бесцветных кристаллов. ВЭЖХ: RtH1= 3,575 мин; МСИЭР [M+Na]+=402/404(1 Br);c) Трет-бутиловый эфир [1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифтор-1-гидроксиметилэтил]карбаминовой кислоты Суспензию 10,99 г (28,9 ммоль) трет-бутилового эфира 1-(5-бром-2-фторфенил)-1 дифторметилаллил]карбаминовой кислоты и 3,84 г (43,4 ммоль) гидрокарбоната натрия в 200 мл ДХМ и 80 мл МеОН охлаждали до -78 С. Смесь О 3 с кислородом вводили до установления постоянной синей окраски. Избыток озона удаляли путем пропускания кислорода в течение 10 мин. Тремя порциями добавляли NaBH4 (2,187 г, 57,8 ммоль) в виде твердого вещества. Смесь перемешивали в течение 10 мин при -78 С и затем ей давали нагреться до 0 С. Через 30 мин смесь выливали в охлажденную льдом 1 н.HCl и экстрагировали с помощью ТМБЭ. Органическую фазу промывали с помощью 1 н. HCl, рассолом,сушили над MgSO4.H2O и выпаривали. Неочищенный продукт кристаллизовали из гексана и получали искомый продукт в виде бесцветных кристаллов. ТСХ: Rf (гексан/EtOAc 4:1) = 0,29. ВЭЖХ: RtH1= 3,000 мин; МСИЭР [M+Na]+ =406/408(1 Br); 1d) N-[1-(5-Бром-2-фторфенил)-2,2-дифтор-1-гидроксиметилэтил]-2-хлорацетамид Суспензию 10,22 г (26,6 ммоль) трет-бутилового эфира [1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифтор-1 гидроксиметилэтил]карбаминовой кислоты в 133 мл 4 н. HCl в диоксане перемешивали в течение 2 ч при КТ. Смесь выпаривали и получали гидрохлорид 2-амино-2-(5-бром-2-фторфенил)-3,3-дифторпропан-1 ола. ВЭЖХ: RtH3= 2,550 мин; МСИЭР [М+Н]+ =284,286(1 Вг); Неочищенный продукт переносили в 63 мл ДХМ и 63 мл 10% водного раствора соды и энергично перемешивали при охлаждении льдом. По каплям добавляли раствор 3,34 мл (42 ммоль) хлорацетилхлорида в 10 мл ДХМ. Баню со льдом удаляли и перемешивание продолжали в течение 1 ч. Смесь разбавляли с помощью ТМБЭ и водой. Органическую фазу сушили над MgSO4.H2O и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/25-33% EtOAc) и получали искомый продукт в виде немного загрязненной смолы.e) 5-(5-Бром-2-фторфенил)-5-дифторметилморфолин-3-он Раствор 9,59 г (26,2 ммоль) N-[1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифтор-1-гидроксиметилэтил]-2 хлорацетамида в 134 мл трет-бутанола обрабатывали с помощью 3,58 г KOtBu. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения смесь разбавляли с помощью EtOAc и 1 н. HCl. Органическую фазу промывали рассолом, сушили над MgSO4.H2O, фильтровали и выпаривали. Получали продукт в виде бесцветных кристаллов (ТМБЭ/гексан). ТСХ: Rf (гексан/EtOAc 2:1) = 0,29. ВЭЖХ: RtH3= 2,950 мин; МСИЭР [М+Н]+ =324/326(1 Br); 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 7,61-7,55 (m, 2H), 7,09 (dd, 1H), 6,80 (br, 1H), 6,35 (t, 1H, CHF2), 4,374,17 (m, 4 Н).f) 5-(5-Бром-2-фторфенил)-5-дифторметилморфолин-3-тион Смесь 7,34 г (22,65 ммоль) 5-(5-бром-2-фторфенил)-5-дифторметилморфолин-3-она и 5,19 г (12,46 ммоль) реагента Лавессона в 73 мл ТГФ кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь концентрировали и кристаллизовали из ДХМ/гексан и перекристаллизовали из EtOH и получали искомый продукт в виде бесцветных кристаллов. ВЭЖХ: RtH3= 3,370 мин; МСИЭР [М+Н]+=340/342(1 Br); 1 Н-ЯМР (ДМСО-d6, 360 МГц): 11,40 (s, 1H), 7,77-7,70 (m, 1H), 7,63 (dd, 1H), 7,37 (dd, 1 Н), 6,35 (t,1 Н, CHF2), 4,50 (d, 1 Н), 4,44 (d, 1 Н), 4,29 (d, 1H), 4,10 (d, 1H).NH3/MeOH перемешивали при КТ в течение 6 ч. Смесь выпаривали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (ДХМ/1-5% МеОН, затем ДХМ/МеОН/водный раствор NH3 95:4,5:0,5) и получали искомый продукт в виде желтоватой смолы. ВЭЖХ: RtH3= 2,477 мин; МСИЭР [М+Н]+ =323/325(1 Br); 1 Н-ЯМР (ДМСО-d6, 360 МГц): 7,99 (dd, 1H), 7,62-7,56 (m, 1H), 7,22 (dd, 1H), 6,31 (br, 2H), 6,12 (t,1H, CHF2), 4,25 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 3,94 (d, 1H), 3,75 (d, 1H).h) Трет-бутиловый эфир [5-(5-бром-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты К охлажденному льдом раствору 6,38 г (19,75 ммоль) 5-(5-бром-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6- 15020008 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламина в 100 мл ТГФ добавляли 5,60 г (25,67 ммоль) Вос 2 О и 5,17 мл (29,6 ммоль) ДИПЭА. Смесь перемешивали в течение 4 ч при КТ, затем смесь разбавляли с помощью ТМБЭ и промывали 5% водным раствором NaHCO3. Органическую фазу сушили над MgSO4H2O, фильтровали и концентрировали. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/5-20% EtOAc) давала искомый продукт в виде бесцветного твердого вещества. ТСХ: Rf (гексан/EtOAc 9:1) = 0,27. ВЭЖХ: RtH1= 3,299 мин; МСИЭР [М+Н]+=423/425(1 Br); 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 7,81 (dd, 1H), 7,50-7,44 (m, 1H), 7,00 (dd, 1H), 6,12 (t, 1H, CHF2), 4,83 (d,1H), 4,60 (d, 1H), 4,37 (dd, 1H), 3,94 (d, 1H), 1,52 (s, 9H).i) Трет-бутиловый эфир [5-(5-азидо-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты К раствору 7,27 г (17,18 ммоль) трет-бутилового эфира [5-(5-бром-2-фторфенил)-5-дифторметил 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]-карбаминовой кислоты и 2,443 г (17,18 ммоль) транс-N,N'диметилциклогексан-1,2-диамина в 237 мл EtOH добавляли раствор 8,93 г (137 ммоль) азида натрия и 1,361 г (6,87 ммоль) аскорбата натрия в 102 мл воды. Смесь дегазировали и помещали в атмосферу азота. Добавляли CuI (1,309 г, 6,87 ммоль) и смесь нагревали при 70 С. Образовавшаяся в начале суспензия превращалась в гомогенный синий раствор. Смесь охлаждали до КТ, разбавляли водой и ТМБЭ. Органическую фазу промывали рассолом и сушили над MgSO4.H2O. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/5-8% ТМБЭ) и получали искомый продукт в виде бесцветного твердого вещества. ВЭЖХ: RtH1= 3,173 мин; МСИЭР [М+Н]+=386; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц, сигналы уширены из-за наличия поворотных изомеров): 7,39-7,44 (m,1 Н), 7,15-7,06 (m, 1 Н), 7,05-6,98 (m, 1 Н), 6,14 (t, 1H, CHF2), 4,80 (d, 1H), 4,60 (d, 1H), 4,39 (d, 1H), 3,97 (d,1H), 1,52 (s, 9H).j) Трет-бутиловый эфир [5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты Раствор 4,89 г (12,69 ммоль) трет-бутилового эфира [5-(5-азидо-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты в 64 мл EtOH и 17 мл ТГФ обрабатывали с помощью 1,1 г 10% Pd-C и перемешивали в атмосфере водорода до израсходования исходного вещества. Смесь разбавляли с помощью ДХМ и фильтровали через целит. Продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/25-50% EtOAc) и получали искомый продукт в виде бесцветного вспененного вещества. ВЭЖХ: RtH3= 2,778 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 360; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц, спектр невозможно интерпретировать из-за наличия поворотных изомеров): 7,1-6,1 (m, 4 Н), 5,0-4,9 (m, 4 Н), 1,52 (br s, 9H).k) Трет-бутиловый эфир (5-5-[(5-бромпиридин-2-карбонил)амино]-2-фторфенил-5-дифторметил 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты К раствору 325 мг (0,952 ммоль) трет-бутилового эфира [5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты, 212 мг (1,047 ммоль) 5-бромпиридин-2 карбоновой кислоты, 168 мг (1,238 ммоль) HOAt и 0,34 мл (2,38 ммоль) Et3N в 5 мл ДХМ добавляли 237 мг (1,24 ммоль) ЭДХHCl. Смесь перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой, 1 н. HCl, рассолом и 5% водным раствором NaHCO3. Органическую фазу сушили надMgSO4H2O, фильтровали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/14-18% EtOAc) и получали искомый продукт в виде бесцветного вспененного вещества. ТСХ: Rf (гексан/EtOAc 3:1) = 0,35. ВЭЖХ: RtH1= 3,127 мин; МСИЭР [М+Н]+=525/527(1 Br); 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 9,90 (br s, 1 Н), 8,72 (d, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,09 (dd, 1H), 7,94-7,86 (m, 2H),7,47 (t, 1H), 7,38-7,28 (m, 3H), 5,92 (t, 1H, CHF2), 4,87 (d, 1 Н), 4,67 (d, 1H), 4,6-4,45 (br, 1H), 4,34 (d, 1H),4,00 (d, 1H), 1,56 (br s, 9H). 1) [3-(5-Амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5-бромпиридин-2-карбоновой кислоты Раствор 100 мг (0,184 ммоль) трет-бутилового эфира (5-5-[(5-бромпиридин-2-карбонил)амино]-2 фторфенил-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты в 1,4 мл 4 н. HCl в диоксане перемешивали при 50 С. Через 15 мин 0,3 мл 3 н. HCl в МеОН добавляли и ставший гомогенным раствор перемешивали в течение 3 ч. Смесь концентрировали и кристаллизовали из смеси а) 2-(5-Бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К раствору диизопропиламина (57,3 мл, 402 ммоль) в ТГФ (500 мл) при температуре ниже -50 С в атмосфере аргона добавляли 1,6 М раствор nBuLi в гексане (260 мл, 416 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин при -75 С добавляли 4-бром-1-фторбензол (31,1 мл, 277 ммоль), поддерживая температуру равной ниже -70 С. После перемешивания в течение 2 ч при -75 С добавляли ацетон (41,2 мл, 554 ммоль) при температуре ниже -65 С и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -75 С, нагревали до -50 С и выливали в 10% водный раствор NH4Cl. Смесь экстрагировали с помощью ТМБЭ, органические фазы промывали водным раствором KHSO4, насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт кристаллизовали из гексана и получали искомое соединение в виде белого кристаллического вещества: ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf =0,45; ВЭЖХ RtH5= 1,045 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,74 (dd, 1 Н), 7,36 (m, 1H), 6,83 (dd, 1H), 2,04 (d, 1H), 1,63 (s, 6H).b) 4-Бром-1-фтор-2-изопропинилбензол К раствору 2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ола (119,7 г, 498 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) добавляли гидрохинон (2,74 г, 24,9 ммоль) и 250 мл 85% Н 3 РО 4. Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 3,5 ч при 50 С. Смесь выливали в воду со льдом и экстрагировали с помощью CH2Cl2. Органические фазы промывали 2 н. водным раствором NaOH и водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в гексан и фильтровали через слой силикагеля и после концентрирования при 600 мбар получали искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ (гексан):c) (S)-2-(5-Бром-2-фторфенил)пропан-1,2-диол К суспензии K3Fe(CN)6 (186 г, 561 ммоль), K2CO3 (78 г, 561 ммоль), (DHQ)2-PHAL (1,311 г, 1,674 ммоль) и K2OsO2(OH)4 (0,378 г, 1 ммоль) в t-BuOH-H2O 1:1 (1600 мл) при 0 С добавляли 4-бром-1-фтор 2-изопропинилбензол (36 г, 167 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 14 ч при 0 С. После осторожного добавления Na2S2O5 (100 г) при 0-5 С реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и затем экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали 5% раствором NaS3O3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,46; ВЭЖХ RtH5=0,767 мин; МСИЭР: 266, 268d) (S)-2-(5-Бром-2-фторфенил)-2-метилоксиран К раствору (S)-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-1,2-диола (37,35 г, 150 ммоль) в CH2Cl2 (400 мл) в атмосфере аргона при 0-5 С добавляли NEt3 (41,8 мл, 300 ммоль) и по каплям добавляли мезилхлорид(12,8 мл, 165 ммоль). После перемешивания в течение 0,5 ч при 0-5 С реакционную смесь добавляли к холодной 1 н. HCl и экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенные экстракты промывали с помощью 1 н. HCl, Н 2 О и насыщенным раствором NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный мезилат растворяли в ТМБЭ (500 мл) и 200 мл 2 н. водного раствора NaOH и после перемешивания в течение 2 ч при 25 С смесь экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные экстракты промывали раствором NaH2PO4 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали (S)-энантиомер в виде бесцветного масла: 78% ЭИ (Chiralpak AS-H 1218, гексан-EtOH 97:3, 0,4 мл/мин); ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf =0,69; ВЭЖХ RtH5= 1,186 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,46 (dd, 1H), 7,30 (m, 1H), 6,83 (dd, 1H), 2,88 (d, 1H), 2,72 (d, 1H), 1,59e) (S)-1-Азидо-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К раствору (S)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-метилоксирана (51,85 г, 224 ммоль) в EtOH (800 мл) добавляли NaN3 (36,8 г, 531 ммоль), NH4Cl (60,6 г, 1122 ммоль) и 18-краун-6 (59,8 г, 224 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали до половины ее объема. Оставшееся масло экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде светло-желтого масла: ТСХ (гексанEtOAc 1:1): Rf =0,70; ВЭЖХ RtH3= 1,115 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,72 (dd, 1 Н), 7,32 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,51 (d, 1H), 2,44f) (S)-1-Амино-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К суспензии LiAlH4 (4,65 г, 122 ммоль) в ТГФ (250 мл) в атмосфере аргона при 0-5 С в течение 30 мин добавляли раствор (S)-1-азидо-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ола (33,4 г, 122 ммоль) в ТГФ (150 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0-5 С реакцию останавливали путем осторожного добавления воды (4,7 мл), 4 н. NaOH (4,7 мл) и воды (14,1 мл) и повторно перемешивали в течение 3 ч при 25 С. Белую суспензию сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Затвердевший продукт перекристаллизовали из смеси ТМБЭ-гексан и получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: 98% ЭИ (Chiralpak AD-H гексан-ЕЮН 75-25 + 0,05% NEt3); TCX (CH2Cl2-MeOH 10:1) Rf =0,10; ВЭЖХ RtH5= 0,558 мин; МСИЭР: 248, 250 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,76 (dd, 1H), 7,25 (m, 1H), 6,82 (dd, 1H), 4,16 (br s, 1H), 3,19 (d, 1H),2,72 (d, 1H), 1,44 (s, 3H), 0,85 (br s, 2H).NaOH в течение 0,5 ч. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 20 С. Реакционную смесь разбавляли с помощью ТМБЭ и промывали водой и раствором NaH2PO4 и рассолом, сушили над MgSO4,фильтровали и концентрировали и после кристаллизации из смеси ТМБЭ-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (толуол-EtOAc 3:1): Rf=0,51; ВЭЖХ RtH5=1,118 мин; МСИЭР: 450, 452 [(M+NH4)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,88 (m, 1 Н), 7,81 (m, 1H), 7,65 (m, 2H), 7,59 (dd, 1H), 7,24 (m, 1H), 6,79(11,6 мл, 72,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при 25 С и концентрировали. Искомое соединение получали после очистки с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 2:1) в виде желтых кристаллов: ТСХ (толуол-EtOAc 3:1): Rf =0,69; ВЭЖХ RtH5= 1,308 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):8,31 (m, 1H), 7,28 (m, 3H), 7,60 (dd, 1H), 7,42 (m, 1H), 6,81 (dd, 1H), 3,24i) Этиловый эфир (R)-2-[(R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]3,3,3-трифтор-2-метилпропионовой кислоты К суспензии NaH (2,53 г 60% в минеральном масле, 63 ммоль) в ДМФ (160 мл) в атмосфере аргона по каплям добавляли этиловый эфир (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропионовой кислоты (11,99 г, 63 ммоль) и после перемешивания в течение 0,5 ч при 20 С (R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-метил-1-(2 нитробензолсульфонил)азиридин (21,85 г, 52,6 ммоль). Реакционную смесь выдерживали при 25 С в течение 16 ч. Смесь добавляли к холодному водному раствору 2 н. HCl и продукт экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом,сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Оставшееся твердое вещество перекристаллизовали из смеси ТМБЭ-гексан и получали искомое соединение в виде желтых кристаллов: ТСХ (гексанEtOAc 1:1): Rf =0,59; ВЭЖХ RtH5= 1,444 мин; МСИЭР: 618, 620 [(M+NH4)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,83 (dd, 1H), 7,61 (m, 3H), 7,48 (dd, 1H), 7,27 (m, 1H), 6,73 (s, 1H), 6,60j) (R)-2-[(R)-2-(5-Бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]-3,3,3-трифтор-2 метилпропионамид Раствор этилового эфира(R)-2-[(R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]-3,3,3-трифтор-2-метилпропионовой кислоты (26,6 г, 44,2 ммоль) в 7 н. NH3 в МеОН (75 мл) перемешивали в течение 16 ч при 50 С. Растворитель удаляли при пониженном давлении и оставшееся твердое вещество перекристаллизовали из Et2O и получали искомое соединение в виде желтых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf=0,35; ВЭЖХ RtH5=1,184 мин; МСИЭР: 589, 591N-[(R)-1-(5-Бром-2-фторфенил)-2-R)-1-циано-2,2,2-трифтор-1-метилэтокси)-1-метилэтил]-2 нитробензолсульфонамид К раствору (R)-2-([R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]-3,3,3 трифтор-2-метилпропионамида (20,83 г, 35,6 ммоль) в CH2Cl2 (300 мл) в атмосфере аргона и при 0-5 С добавляли NEt3 (12,5 мл, 89 ммоль) и трифторуксусный ангидрид (6,15 мл, 42,7 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч при 25 С реакционную смесь добавляли к холодному раствору NaHCO3 и продукт экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенные экстракты промывали холодным 0,1 н. водным раствором HCl, водой и насыщенным раствором NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентриро- 18020008 вали и получали искомое соединение в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без обработки: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,73; ВЭЖХ RtH5= 1,364 мин; МСИЭР: 571, 573 [(M+NH4)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,89 (d, 1 Н), 7,62 (ddd, 1H), 7,57 (ddd, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, 1H),6,58 (dd, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,17 (s, 2H), 1,81 (s, 3H), 1,72 (s, 3H). 1)N-[(R)-1-(5-бром-2-фторфенил)-2-R)-1-циано-2,2,2-трифтор-1-метилэтокси)-1 метилэтил]-2-нитробензолсульфонамида (6,54 г,11,8 ммоль) и N-ацетилцистеина (2,4 г, 26,0 ммоль) в МеОН (80 мл) добавляли K2CO3 (3,62 г, 26,0 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80 С в течение 16 ч. После удаления растворителя остаток растворяли в воде и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4,фильтровали и концентрировали и после очистки с помощью хроматографии на силикагеле (гексанEtOAc от 10:1 до 1:2 с добавлением 0,03% NEt3) получали искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ (гексан-EtOAс 1:1): Rf=0,58; ВЭЖХ RtH5=0,843 мин; МСИЭР: 369, 371 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,66 (dd, 1H), 7,35 (m, 1H), 6,81 (dd, 1H), 3,87 (m, 2H), 1,53 (s, 3H), 1,49(2R,5R)-5-(5-бром-2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламина (1,66 г, 4,5 ммоль) и ацетата натрия (0,369 г, 4,5 ммоль) в МеОН ( 50 мл) гидрировали над 10% Pd-C в течение 6 ч при 50 С. Катализатор отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали. Остаток растворяли в насыщенном растворе NaHCO3 и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf=0,19; ВЭЖХ RtH5=0,777 мин; МСИЭР: 291 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,41 (dt, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,11 (t, 1H), 7,05 (dd, 1 Н), 4,11 (dd, 1H), 3,84n) (2R,5R)-5-(2-Фтор-5-нитрофенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 иламин К раствору (2R,5R)-5-(2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 иламина (1,035 г, 3,57 ммоль) в H2SO4 (6 мл) при охлаждении смесью воды со льдом порциями добавляли KNO3 (0,379 г, 3,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25 С, разбавляли водой и при охлаждении подщелачивали с помощью K2CO3. Продукт экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4,фильтровали и концентрировали. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 4:1 до 1:1 с добавлением 0,05% NEt3) давала искомое соединение в виде светло-желтого масла: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,50; ВЭЖХ RtH5= 0,749 мин; МСИЭР: 336 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):8,48 (dd, 1 Н), 8,14 (m, 1H), 7,15 (dd, 1H), 4,20 (br s, 2H), 4,04 (dd, 1H),3,81 (dd, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H). о) Трет-бутиловый эфир [(2R,5R)-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты К раствору(0,72 мл, 5,1 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч при 25 С. Реакционную смесь выпаривали и оставшееся масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 7:3) и после кристаллизации из смеси Et2O-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf =0,37; ВЭЖХ RtH5=1,355 мин; МСИЭР: 436 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):11,04 (br s, 1 Н), 8,24 (m, 2H), 7,30 (dd, 1H), 4,41 (dd, 1H), 4,11 (dd, 1H),1,68 (s, 3H), 1,51 (s, 9H), 1,49 (s, 3H).(24 мл) гидрировали над 5% Pd-С в течение 4 ч при 50 С. Катализатор отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали и после кристаллизации из смеси ТМБЭ-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,42; ВЭЖХ RtH5= 0,955 мин; МСИЭР: 406 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты (76 мг, 0,187 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли 5-бромпиридин-2-карбоновую кислоту (47 мг, 0,225 ммоль), ЭДХ.HCl (48 мг, 0,244 ммоль), HOAt ( 29 мг,0,206 ммоль) и ДИПЭА (0,08 мл, 0,469 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 25 С в течение 16 ч. Смесь концентрировали, остаток растворяли в EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 1:1) и получали искомое соединение в виде светло-желтого вспененного вещества: ВЭЖХ RtH5= 1,297 мин); МСИЭР: 590, 592 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):10,88 (br s, 1 Н), 9,71 (br s, 1H), 8,84 (s, 2H), 7,89 (m, 1H), 7,49 (dd, 1H),7,12 (dd, 1H), 4,38 (d, 1H), 4,04 (d, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,52 (s, 9H).r) [3-3R,6R)-5-Амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2H-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид гидрохлорид 5-бромпиримидин-2-карбоновой кислоты Раствор трет-бутилового эфира 2R,5R)-5-5-[(5-бромпиримидин-2-карбонил)амино]-2 фторфенил-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-карбаминовой кислоты (90 мг, 0,153 ммоль) в 4 н. HCl в диоксане (1 мл) перемешивали при 40-45 С в течение 6 ч. Смесь концентрировали и остаток кристаллизовали из Et2O и получали искомое соединение в виде бежевого твердого вещества: ВЭЖХ RtH5= 0,837 мин); МСИЭР: 490,492 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (600 МГц, ДМСО-d6): 11,61 (br s, 1 Н), 11,14 (br s, 1H), 9,61 (br s, 2H), 9,26 (s, 2H), 7,88 (d,1H), 7,80 (d, 1H), 7,32 (dd, 1H), 4,31 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 1,72 (s,3H), 1,62 (s, 3H). Пример 72. Соединение, приведенное в табл. 9, может быть получено по методике, аналогичной используемой в примере 71. Таблица 9 Более подробное описание получения соединения примера 72: Гидрохлорид [3-3R,6R)-5-амино 3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1.4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты а) Трет-бутиловый эфир 2R,5R)-5-5-[(5-циано-3-метилпиридин-2-карбонил)амино]-2 фторфенил-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты К раствору трет-бутилового эфира [(2R,5R)-5-(5-амино-2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты (82 мг, 0,20 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли 5 циано-3-метилпиридин-2-карбоновую кислоту [кислота-3] (42 мг, 0,26 ммоль), ЭДХ.HCl (51 мг, 0,26 ммоль), HOAt (31 мг, 0,22 ммоль) и ДИПЭА (0,09 мл, 0,52 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 25 С в течение 16 ч. Смесь концентрировали, остаток растворяли в EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 1:1) и получали искомое соединение в виде светложелтого вспененного вещества: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,81; ВЭЖХ RtH5= 1,437 мин; МСИЭР: 550CH2Cl2 (0,3 мл) добавляли ТФК (0,6 мл) и реакционную смесь выдерживали при 25 С в течение 2 ч. Реакционную смесь добавляли к холодному 10% водному раствору K2CO3 и продукт экстрагировали с по- 20020008 мощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в виде бесцветного вспененного вещества. Искомое соединение превращали в его гидрохлорид путем растворения свободного основания в CH2Cl2, добавления 1 экв. 2 н. HCl в Et2O, выпаривания досуха, затем кристаллизации из CH2Cl2-Et2O и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: ВЭЖХ RtH5= 0,957 мин; МСИЭР: 450 [(М+Н)+]; 1 а) 2-(5-Бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К раствору диизопропиламина (57,3 мл, 402 ммоль) в ТГФ (500 мл) добавляли в атмосфере аргона 1,6 М раствор nBuLi в гексане (260 мл, 416 ммоль) при температуре ниже -50 С. После перемешивания в течение 30 мин при -75 С добавляли 4-бром-1-фторбензол (31,1 мл, 277 ммоль), поддерживая температуру ниже -70 С. После перемешивания в течение 2 ч при -75 С добавляли ацетон (41,2 мл, 554 ммоль) при температуре ниже 65 С и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при -75 С, нагревали до -50 С и выливали в 10% водный раствор NH4Cl. Смесь экстрагировали с помощью ТМБЭ, органические фазы промывали водным раствором KHSO4, насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт кристаллизовали из гексана и получали искомое соединение в виде белого кристаллического вещества: ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf =0,45; СЭЖХ RtH5=1,045 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,74 (dd, 1 Н), 7,36 (m, 1H), 6,83 (dd, 1H), 2,04 (d, 1H), 1,63 (s,6H).b) 4-Бром-1-фтор-2-изопропинилбензол К раствору 2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ола (119,7 г, 498 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) добавляли гидрохинон (2,74 г, 24,8 ммоль) и 250 мл 85% Н 3 РО 4. Полученную реакционную смесь перемешивали в течение 3,5 ч при 50 С. Смесь выливали в воду со льдом и экстрагировали с помощью CH2Cl2. Органические фазы промывали 2 н. водным раствором NaOH и водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в гексан и фильтровали через слой силикагеля и после концентрирования при 600 мбар получали искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ (гексан):c) (S)-2-(5-Бром-2-фторфенил)пропан-1,2-диол К суспензии K3Fe(CN)6 (186 г, 561 ммоль), K2CO3 (78 г, 561 ммоль), (DHQ)2-PHAL (1,311 г, 1,674 ммоль) и K2OsO2(OH)4 (0,378 г, 1 ммоль) в t-BuOH-H2O 1:1 (1600 мл) при 0 С добавляли 4-бром-1-фтор 2-изопропинилбензол (36 г, 167 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 14 ч при 0 С. После осторожного добавления Na2S2O5 (100 г) при 0-5 С реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и затем экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали 5% раствором NaS3O3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,46; СЭЖХ RtH5=0,767 мин; МСИЭР: 266, 268d) (S)-2-(5-Бром-2-фторфенил)-2-метилоксиран К раствору (S)-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-1,2-диола (37,35 г, 150 ммоль) в СН 2 С 12 (400 мл) в атмосфере аргона при 0-5 С добавляли NEt3 (41,8 мл, 300 ммоль) и по каплям добавляли мезилхлорид(12,8 мл, 165 ммоль). После перемешивания в течение 0,5 ч при 0-5 С реакционную смесь добавляли к холодной 1 н. HCl и экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенные экстракты промывали с помощью 1 н. HCl, Н 2 О и насыщенным раствором NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный мезилат растворяли в ТМБЭ (500 мл) и 200 мл 2 н. водного раствора NaOH и после перемешивания в течение 2 ч при 25 С смесь экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные экстракты промывали раствором NaH2PO4 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали (S)-энантиомер в виде бесцветного масла: 78% ЭИ (Chiralpak AS-H 1218, гексан-ЕЮН 97:3, 0,4 мл/мин); ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf =0,69; СЭЖХ RtH5=1,186 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,46 (dd, 1 Н), 7,30 (m, 1H), 6,83 (dd, 1H), 2,88 (d, 1H), 2,72 (d, 1H), 1,59e) (S)-1-Азидо-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К раствору (S)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-метилоксирана (51,85 г, 224 ммоль) в ЕЮН (800 мл) добавляли NaN3 (36,8 г, 531 ммоль), NH4C1 (60,6 г, 1122 ммоль) и 18-краун-6 (59,8 г, 224 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали до половины ее объема. Оставшееся масло экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде светло-желтого масла: ТСХ (гексанEtOAc 1:1): Rf =0,70; СЭЖХ RtH3= 1,115 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,72 (dd, 1 Н), 7,32 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,51 (d, 1H), 2,44f) (S)-1-Амино-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ол К суспензии LiAlHU (4,65 г, 122 ммоль) в ТГФ (250 мл) в атмосфере аргона при 0-5 С в течение 30 мин добавляли раствор (S)-1-азидо-2-(5-бром-2-фторфенил)пропан-2-ола (33,4 г, 122 ммоль) в ТГФ (150 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0-5 С реакцию останавливали путем осторожного добавления воды (4,7 мл), 4 н. NaOH (4,7 мл) и воды (14,1 мл). После перемешивания в течение 3 ч при 25 С белую суспензию сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Затвердевший продукт перекристаллизовали из смеси ТМБЭ-гексан и получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: 98% ЭИ (Chiralpak AD-H гексан-EtOH 75-25 + 0,05% NEt3); TCX (СH2Cl2-MeOH 10:1) Rf=0,10; СЭЖХNaOH в течение 0,5 ч. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 20 С. Реакционную смесь разбавляли с помощью ТМБЭ и промывали водой и раствором NaH2PO4 и рассолом, сушили над MgSO4,фильтровали и концентрировали и после кристаллизации из смеси ТМБЭ-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (толуол-EtOAc 3:1): Rf=0,51; СЭЖХ RtH5=1,118 мин; МСИЭР: 450, 452 [(M+NH4)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,88 (m, 1 Н), 7,81 (m, 1 Н), 7,65 (m, 2 Н), 7,59 (dd, 1 Н), 7,24 (m, 1H), 6,79(11,6 мл, 72,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч при 25 С и концентрировали. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 2:1) получали искомое соединение в виде желтых кристаллов: ТСХ (толуол-EtOAc 3:1): Rf=0,69; СЭЖХ RtH5=1,308 мин; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):8,31 (m, 1H), 7,28 (m, 3H), 7,60 (dd, 1H), 7,42 (m, 1 Н), 6,81 (dd, 1H),3,24 (s, 1H), 2,81 (s, 1H), 2,06 (s, 3H).i) Этиловый эфир (R)-2-[(R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]3,3,3-трифтор-2-метилпропионовой кислоты К суспензии NaH (2,53 г 60% в минеральном масле, 63 ммоль) в ДМФ (160 мл) в атмосфере аргона по каплям добавляли этиловый эфир (R)-3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2-метилпропионовой кислоты (11,89 г, 63 ммоль) и после перемешивания в течение 0,5 ч при 20 С (R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-метил-1-(2 нитробензолсульфонил)азиридин (21,85 г, 52,6 ммоль). Реакционную смесь выдерживали при 25 С в течение 16 ч. Смесь добавляли к холодному 2 н. водному раствору HCl и продукт экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом,сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Оставшееся твердое вещество перекристаллизовали из смеси ТМБЭ-гексан и получали искомое соединение в виде желтых кристаллов: ТСХ (гексанEtOAс 1:1): Rf=0,59; СЭЖХ RtH5= 1,444 мин; МСИЭР: 618, 620 [(M+NH4)+]. 1j) (R)-2-[(R)-2-(5-Бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]-3,3,3-трифтор-2 метилпропионамид Раствор этилового эфира(R)-2-[(R)-2-(5-бром-2-фторфенил)-2-(2-нитробензолсульфониламино)пропокси]-3,3,3-трифтор-2-метилпропионовой кислоты (26,6 г, 44,2 ммоль) в 7 н. NH3 в МеОН (75 мл) перемешивали в течение 16 ч при 50 С. Растворитель удаляли при пониженном давлении и оставшееся твердое вещество перекристаллизовали из Et2O и получали искомое соединение в виде желтых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf=0,35; СЭЖХ RtH5=1,184 мин; МСИЭР: 589, 591NEt3 (12,5 мл, 89 ммоль) и при 0-5 С трифторуксусный ангидрид (6,15 мл, 42,7 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч при 25 С реакционную смесь добавляли к холодному раствору NaHCO3 и продукт экстрагировали с помощью CH2Cl2. Объединенные экстракты промывали холодным 0,1 н. водным раствором HCl, водой и насыщенным раствором NaHCO3, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без обработки: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,73; СЭЖХ RtH5=1,364 мин; МСИЭР: 571, 573 [(M+NH4)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,89 (d, 1H), 7,62 (ddd, 1H), 7,57 (ddd, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, 1H),6,58 (dd, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,17 (s, 2H), 1,81 (s, 3H), 1,72 (s, 3H). 1)N-[(R)-1-(5-бром-2-фторфенил)-2-R)-1-циано-2,2,2-трифтор-1-метилэтокси)-1 метилэтил]-2-нитробензолсульфонамида (6,54 г, 11,8 ммоль) и N-ацетилцистеина (2,4 г, 26,0 ммоль) в МеОН (80 мл) добавляли K2CO3 (3,62 г, 26,0 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80 С в течение 16 ч. После удаления растворителя остаток растворяли в воде и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4,фильтровали и концентрировали и после очистки с помощью хроматографии на силикагеле (гексанEtOAc от 10:1 до 1:2 с добавлением 0,03% NEt3) получали искомое соединение в виде желтого масла: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,58; СЭЖХ RtH5= 0,843 мин; МСИЭР: 369, 371 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,66 (dd, 1H), 7,35 (m, 1H), 6,81 (dd, 1H), 3,87 (m, 2H), 1,53 (s,3H), 1,49(2R,5R)-5-(5-бром-2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламина (1,66 г, 4,5 ммоль) и ацетата натрия (0,369 г,4,5 ммоль) в МеОН (50 мл) гидрировали над 10% Pd-C в течение 6 ч при 50 С. Катализатор отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали. Остаток растворяли в насыщенном растворе NaHCO3 и экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и получали искомое соединение в виде бесцветного масла: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf=0,19; СЭЖХ RtH5=0,777 мин; МСИЭР: 291 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):7,41 (dt, 1 Н), 7,26 (m, 1H), 7,11 (t, 1H), 7,05 (dd, 1H), 4,11 (dd, 1H), 3,84n) (2R,5R)-5-(2-Фтор-5-нитрофенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 иламин К раствору (2R,5R)-5-(2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 иламина (1,035 г, 3,57 ммоль) в H2SO4 (6 мл) при охлаждении льдом с водой порциями добавляли KNO3(0,379 г, 3,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 25 С, разбавляли водой и при охлаждении подщелачивали с помощью K2CO3. Продукт экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO3 и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 4:1 до 1:1 с добавлением 0,05% NEt3) давала искомое соединение в виде светло-желтого масла: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf =0,50; СЭЖХ RtH5= 0,749 мин; МСИЭР: 336 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):8,48 (dd, 1 Н), 8,14 (m, 1H), 7,15 (dd, 1H), 4,20 (br s, 2H), 4,04 (dd, 1H),3,81 (dd, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H). о) Трет-бутиловый эфир [(2R,5R)-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты К раствору(0,72 мл, 5,1 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч при 25 С. Реакционную смесь выпаривали и оставшееся масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-EtOAc от 20:1 до 7:3) и после кристаллизации из смеси Et2O-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 3:1): Rf=0,37; СЭЖХ RtH5=1,355 мин; МСИЭР: 436 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (360 МГц, CDCl3):11,04 (br s, 1 Н), 8,24 (m, 2H), 7,30 (dd, 1H), 4,41 (dd, 1H), 4,11 (dd, 1H),1,68 (s, 3H), 1,51 (s, 9H), 1,49 (s, 3H).(24 мл) гидрировали над 5% Pd-C в течение 4 ч при 50 С. Катализатор отфильтровывали через целит и фильтрат концентрировали и после кристаллизации из смеси ТМБЭ-гексан получали искомое соединение в виде бежевых кристаллов: ТСХ (гексан-EtOAc 1:1): Rf=0,42; СЭЖХ RtH5=0,855 мин; МСИЭР: 406q) Трет-бутиловый эфир 2R,5R)-5-5-[(5-циано-3-метилпиридин-2-карбонил)амино]-2 фторфенил-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты К раствору трет-бутилового эфира [(2R,5R)-5-(5-амино-2-фторфенил)-2,5-диметил-2-трифторметил 5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты (2,2 г, 5,43 ммоль) в ДМФ (20 мл) при 0-5 С добавляли 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновую кислоту (0,868 г, 5,87 ммоль), ЭДХ (1,095 г, 7,05 ммоль), HOAt (1,182 г, 8,68 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 25 С в течение 16 ч. Реакционную смесь добавляли к холодному насыщенному раствору NaHCO3 и продукт экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные слои, содержащие ТМБЭ, промывали с помощью Н 2 О и рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали и после кристаллизации из диизопропилового эфира получали искомое соединение в виде бесцветных кристаллов: СЭЖХ RtH5=l,472 мин); МСИЭР: 550; [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):11,11 (s, 1 Н), 10,11 (s, 1H), 8,79 (br s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,84 (m, 1H),7,68 (dd, 1H), 7,21 (dd, 1H), 4,49 (d, 1H), 4,16 (d, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,64 (s,3H), 1,62 (s, 9H).r) [3-3R,6R)-5-Амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2H-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты К раствору трет-бутилового эфира 2R,5R)-5-5-[(5-циано-3-метилпиридин-2-карбонил)амино]-2 фторфенил-2,5-диметил-2-трифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты (2,27 г, 4,13 ммоль) в CH2Cl2 (25 мл) добавляли ТФК (41,3 ммоль, 3,18 мл) и реакционную смесь перемешивали при 25 С в течение 2,5 ч. Реакционную смесь добавляли к 10% водному раствору NaHCO3 (рН 8) и свободное основание экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали водой, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт дважды перекристаллизовали путем его растворения в EtOH (15 мл) при 50-60 С и после насыщения посредством Н 2 О (68 мл) прозрачному раствору давали охлаждаться до температуры окружающей среды в течение ночи и после фильтрования и сушки получали искомое соединение чистотой 99% в виде белого кристаллического вещества: СЭЖХ RtH5= 0,805 мин; МСИЭР: 450 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (600 МГц, ДМСО-d6): 10,72 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,78 (d, 1 Н), 7,71 (m, 1 Н), 7,15(t, 1 Н), 6,08 (br s, 2 Н), 3,81 (d, 1H), 3,78 (d, 1H), 2,52 (s, 3 Н), 1,46 (s, 3 Н), 1,41 (s, 3 Н). Пример 72b. Анализ кристаллического [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6 дигидро-2 Н-[1.4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты с помощью ПРРГ и ДСК Кристаллический [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил)-4-фторфенил]амид 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты анализировали с помощью ПРРГ и 10 самых характеристических пиков приведены в таблице 9.5 (см. также фиг. 2). Таблица 9.5 Анализ с помощью порошковой рентгенографии (ПРРГ) проводили с использованием рентгеновского дифрактометра Brucker D8 Advance. Измерения проводили примерно при 30 кВ и 40 мА при следующих условиях: Скорость сканирования 0,3 с/шаг (эквивалентно длительности шага, (непрерывное сканирование): равной 107,1 с) Размер шага: 0,017 (2-тета) Щель Соллера 2,5 Щели (слева направо): V12 (переменная), щель для устранения рассеяния 6 мм Рентгенограммы снимали в диапазоне от 2 до 40 (2-тета) с использованием излучения CuK для идентификации всей рентгенограммы. Кристаллический [3-3R,6R)-5-амино-3,6-диметил-6-трифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил)-4-фторфенил]амид 5-циано-3-метилпиридин-2-карбоновой кислоты также анализировали с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) с использованием прибора Q1000 DSC, выпускающегося фирмой ТА instruments, и установлено, что начало плавления происходит примерно при 94 С(93,6 С). Примеры 112 и 144. Соединения, приведенные в табл. 17, получали по методикам, аналогичным использованным в примерах 42 или 112. Для энантиомерно чистых соединений рацемический предшественник (трет-бутиловый эфир [5-(5 амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты (пример 42j разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ на колонке Chiralpak AD-H 250 4,6 мм с использованием надкритической смеси СО 2/EtOH 9:1 в качестве элюента. Искомое соединение представляло собой медленнее элюирующийся (R)-энантиомер. Энантиомерный избыток=99,7%; []D=-109,7 (с=1, CHCl3). Таблица 17 Более подробное описание получения соединения примера 112: Гидрохлоридa) 5-Дифторметил-5-(2-фторфенил)морфолин-3-он 5-(5-Бром-2-фторфенил)-5-дифторметилморфолин-3-он (190 г, 586 ммоль) [пример 42, стадия е)] и ацетат натрия (57,7 г, 703 ммоль) суспендировали в 1850 мл метанола. Затем добавляли 10% Pd на древесном угле (18,7 г) и реакционную смесь встряхивали при КТ в аппарате Парра в атмосфере водорода. Через 60 мин реакционную смесь фильтровали через целит и выпаривали. Остаток растворяли в 2 л ТМБЭ и промывали водным раствором NaHCO3 и рассолом. Органический слой сушили над MgSO4.H2O и выпаривали и получали 143,2 г искомого соединения в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ: RtH1=0,792 мин; МСИЭР [М+Н]+=246; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 7,50-7,43 (m, 2 Н), 7,32-7,27 (m, 1 Н), 7,19 (dd, 1H), 6,62 (br, 1 Н), 6,37 (t, J = 54 Гц, 1H), 4,34 (d, 1H), 4,31 (d, 1H), 4,22 (d, 1H), 4,20 (d, 1 Н).(132 г, 316 ммоль) в 1400 мл ТГФ нагревали при 68 С в течение 1 ч, охлаждали и затем выпаривали. Остаток растворяли в 1 л ДХМ и фильтровали через 2 кг силикагеля с использованием 10 л ДХМ и получали 161 г искомого соединения в виде зеленоватой смолы, которая медленно кристаллизовалась. Соединение использовали без дополнительной очистки. ВЭЖХ: RtH1=1,799 мин; МСИЭР [М+Н]+=262; 1 Н-ЯМР (360 МГц, CDCl3): 7,42-7,35 (m, 1 Н), 7,28 (t, 1H), 7,19 (t, 1H), 7,11 (dd, 1H), 6,29 (t, J = 54 Гц,- 25020008c) 5-Дифторметил-5-(2-фторфенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламин 5-Дифторметил-5-(2-фторфенил)морфолин-3-тион (160 г, 570 ммоль) растворяли в 2,4 л 7 моль/л раствора NH3 в метаноле в течение 6,5 ч и затем выдерживали в течение ночи. Реакционную смесь выпаривали и переносили в 2 л 1 н. водного раствора HCl и 2 л ТМБЭ. Водную фазу промывали с помощью ТМБЭ и подщелачивали путем добавления 300 мл 30% водного раствора NaOH и небольшого количества льда. Смесь трижды экстрагировали с помощью ДХМ и объединенные органические слои сушили надNa2SO4 и концентрировали в вакууме. Искомое соединение получали путем кристаллизации из смеси ДХМ/гептаны (128,45 г). ВЭЖХ: RtH3 = 2,059 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 245; 1d) 5-Дифторметил-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламин Нитрат калия (60,3 г, 596 ммоль) порциями добавляли к 600 мл серной кислоты (температура 20 С). Этот раствор по каплям добавляли к раствору 5-дифторметил-5-(2-фторфенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин 3-иламина (112 г, 459 ммоль) в 600 мл серной кислоты, поддерживая температуру реакционной смеси 22 С в бане со льдом. После перемешивания в течение 1 ч смесь выливали в 10 кг льда. Добавляли ТМБЭ (6 л) и значение рН доводили до 12-14 путем добавления примерно 5 л 30% водного раствора NaOH. Фазы разделяли и водную фазу дважды экстрагировали с помощью ТМБЭ. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и выпаривали и получали 130 г желтого твердого вещества, которое затем использовали без очистки. ВЭЖХ: RtH3 = 2,063 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 290; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 8,71 (dd, 1 Н), 8,13 (dt, 1H), 7,13 (dd, 1H), 5,89 (t, J = 54 Гц, 1H), 4,55 (br,2H), 4,33 (dd, 1H), 4,10 (d, 1H), 3,87 (d, 1H), 3,82 (dt, 1H).e) Трет-бутиловый эфир [5-дифторметил-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты Раствор 5-дифторметил-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламина (144,5 г,500 ммоль), Вос-ангидрида (142 г, 650 ммоль) и ДИПЭА (131 мл, 749 ммоль) в 2500 мл ТГФ перемешивали в течение 3 дней при КТ, после чего все еще оставалось исходное вещество. Добавляли Восангидрид (56 г, 325 ммоль), смесь нагревали при 60 С и перемешивали в течение 10 ч до завершения реакции. Смесь выпаривали, растворяли в ТМБЭ, промывали охлажденным льдом 1 н. водным растворомHCl, водой, 10% водным раствором NaHCO3 и рассолом. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали. Продукт очищали путем кристаллизации из смеси ДХМ/гептаны. Выход: 182,8 г белых кристаллов. ВЭЖХ: RtH1 = 3,259 мин; МСИЭР [M+Na]+ = 412; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): 8,70 (dd, 1H), 8,27 (dt, 1H), 7,34 (br, 1H), 7,25 (dd, 1 Н), 6,09 (t, J = 54 Гц,1 Н), 4,85 (d, 1H), 4,58 (d, 1H), 4,49 (dd, 1H), 3,84 (dt, 1H).f) Трет-бутиловый эфир [5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты Трет-бутиловый эфир [5-дифторметил-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты (180 г, 462 ммоль) и 17,61 г Pd-C 10% суспендировали в 1760 мл ТГФ. Смесь встряхивали в аппарате Парра при КТ в атмосфере водорода. Через 6 ч реакционную смесь фильтровали через целит и выпаривали. Остаток кристаллизовали из смеси ДХМ/гептаны и получали 157,6 г искомого соединения в виде бежевых кристаллов. ВЭЖХ: RtH3 = 2,748 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 360; 1H-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): Спектр невозможно интерпретировать из-за наличия сложной смеси поворотных изомеров.[(R)-5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты Рацемический продукт (трет-бутиловый эфир (рац)[5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6 дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты) разделяли с помощью препаративной ВЭЖХ на колонке Chiralpak AD-H 20 мкм (8100 48 мм колонки для ВЭЖХ) на приборе Bayer SBM CC50 с использованием технологии ПДС и смеси гептан/EtOH/MeOH 70 : 20 : 10 в качестве элюента. Искомое соединение представляло собой медленнее элюирующийся (R)-энантиомер. Получали 72,29 г искомого соединения в виде бесцветного вспененного вещества. ЭИ = 99,3%; Оптическое вращение: []D -97,5(с=1, CHCl3) ВЭЖХ: RtH3 = 2,748 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 360; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц): Спектр невозможно интерпретировать из-за наличия сложной смеси поворотных изомеров. Трет-бутиловый эфир [(R)-5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3 ил]карбаминовой кислоты (35 г, 97,4 ммоль), 5-цианопиридин-2-карбоновую кислоту (15,87 г, 107,14 ммоль) и гидрат HOBt (22,35 г, 146,1 ммоль) растворяли в 185 мл ДМФ и перемешивали при охлаждении льдом. Когда температура становилась равной 0-5 С, по каплям добавляли ЭДХ (22,33 мл, 126,62 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч. Баню со льдом удаляли и перемешивание продолжали в течение 2 ч. Смесь переносили в EtOAc и воду. Фазы разделяли и органическую фазу промывали 5% водным раствором NaHCO3 и рассолом. Органическую фазу сушили над MgSO4.H2O и выпаривали и получали бежевое твердое вещество. Кристаллизация из EtOAc/гексан давала искомое соединение в виде бесцветных кристаллов. Выход 44,47 г. ВЭЖХ: RtH1= 2,888 мин; МСИЭР [M+Na]+= 512; 1 Н-ЯМР (CDCl3, 360 МГц, сигналы уширены из-за наличия поворотных изомеров): 8,95 (s, 1H), 8,48R)-5-5-[(5-цианопиридин-2-карбонил)амино]-2-фторфенил-5 дифторметил-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)карбаминовой кислоты (44,47 г, 91,0 ммоль) растворяли в 450 мл ДХМ и немного охлаждали в бане с водой при КТ. Добавляли ТФК (150 мл). Реакция была немного экзотермичной. Смесь перемешивали в течение 1,5 ч при КТ. Летучие вещества удаляли в вакууме при КТ. Остаток переносили в ДХМ и процедуру повторяли дважды. Остаток переносили в 3 л EtOAc и промывали 10% водным раствором Na2CO3 и рассолом. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и частично выпаривали. Добавляли iPrOH и смесь охлаждали. Искомое соединение собирали в виде снежно-белых кристаллов. Выход 30,56 г. ВЭЖХ: RtH3= 2,605 мин; МСИЭР [М+Н]+ = 390; 1[3-R)-5-Амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амид 5 цианопиридин-2-карбоновой кислоты гидрохлорид Раствор [3-R)-5-амино-3-дифторметил-3,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-ил)-4-фторфенил]амида 5 цианопиридин-2-карбоновой кислоты (277 мг, 0,71 ммоль) в 5 мл ТГФ растирали с 0,9 мл 1 М HCl в Et2O. Смесь частично выпаривали, разбавляли с помощью ТМБЭ и частично выпаривали (3), в заключение выпаривали досуха. Гидрохлорид содержал значительное количество ТГФ. Его переносили в EtOH и дважды выпаривали досуха. В заключение продукт лиофилизировали с использованием 15 мл воды. Выход: 261 мг белого лиофилизата. 1 Н-ЯМР (ДМСО-d6, 600 МГц): 11,05 (s, 1 Н), 11,01 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 9,25 (s, 1 Н), 8,73 (br s, 1H),8,61 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,12-8,07 (m, 2H), 7,41 (dd, 1H), 6,79 (t, J = 54 Гц, 1 Н), 4,70 (d, 1H), 4,65 (d, 1H),4,36 (d, 1H), 4,18 (d, 1H). Первая альтернативная методика получения соединения примера 144:(1,4 л, 3,5 моль, 2,5 М в гексане), поддерживая температуру реакционной смеси ниже -55 С. После добавления смесь перемешивали при -78 С в течение 15 мин. Затем раствор 4-бром-1-фторбензол (540 г,3,08 моль) в ТГФ (1 л) охлаждали до -60 С и затем постепенно добавляли к реакционной смеси, поддерживая температуру реакционной смеси ниже -55 С и полученный желтый раствор перемешивали при 78 С в течение 150 мин. К реакционной смеси в течение 15 мин добавляли этилдифторацетат (421 г, 3,39 моль) и затем смесь перемешивали при -78 С в течение 15 мин. К реакционной смеси при перемешивании добавляли 1 М HCl (6,0 л). Водный слой экстрагировали с помощью ТМБЭ (34 л). Объединенные органические фазы промывали водой, сушили (MgSO4) и выпаривали в вакууме. Полученный остаток перегоняли в вакууме (90-95 С/0,19 мбар) и собирали фракции с температурой кипения, равной 54-62 С,и получали искомое соединение в виде бесцветной жидкости. МСИЭР: 253 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):8,06 (dd, 1H), 7,75 (ddd, 1H), 7,13 (dd, 1H), 6,41 (dt, 1H).b) [1-(5-Бром-2-фторфенил)-2,2-дифторэт-(2)-илиден]амид 2-метилпропан-2-сульфиновой кислоты К смеси 1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифторэтанона (6,0 кг, 23,7 моль) и (S)-(-)-третбутансульфинамида (3,3 кг, 27,2 моль) при перемешивании при температуре окружающей среды добавляли толуол (73 л). Через 5 мин добавляли этоксид титана (6,5 кг, 28,5 моль) и смесь нагревали при 5055 С. Смесь перемешивали при 50-55 С в течение 3 ч и давали ей охладиться до температуры окружающей среды и затем концентрировали в вакууме. Полученный неочищенный продукт использовали для следующего химического превращения без дополнительной очистки. МСИЭР: 356 [(М+Н)+].c) [(S)-1-(5-Бром-2-фторфенил)-1-дифторметилаллил]амид (Ss)-2-метилпропан-2-сульфиновой кислоты К раствору бромида винилмагния (400 мл, 400 ммоль, 1 M в ТГФ) добавляли толуол (400 мл) и полученную смесь охлаждали до температуры ниже -65 С. К смеси в течение 20 мин добавляли раствор неочищенного [1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифторэт-(Z)-илиден]амида 2-метилпропан-2-сульфиновой кислоты (40,2 г, 113 ммоль) в толуоле (200 мл) и ее повторно охлаждали до температуры ниже -60 С,поддерживая температуру реакционной смеси ниже -65 С. После добавления полученную смесь перемешивали при -65-72 С в течение 40 мин и затем реакцию останавливали водным раствором H2SO4 (270 мл, 8,4 мас.%). Полученную смесь перемешивали и медленно нагревали до -20 С, к смеси шприцем медленно добавляли еще порцию водного раствора H2SO4 (540 мл, 8,4 мас.%), полученную смесь нагревали и перемешивали при 10-20 С в течение 1 ч. Эти два слоя разделяли и органический слой промывали водным раствором бикарбоната натрия (540 мл, 4 мас.%), затем рассолом. Органический слой фильтровали через слой целита, концентрировали в вакууме и получали неочищенное искомое соединение в виде смеси 3:1 диастереоизомеров, которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. МСИЭР: 384 [(М+Н) ].(Ss)-2-метилпропан-2 сульфиновой кислоты (20 г, 52 ммоль) в CH2Cl2 (640 мл) и МеОН (160 мл) при температуре окружающей среды добавляли ацетат калия (1 г, 10,4 ммоль). Затем при перемешивании смесь охлаждали до -70 С. Через реакционную смесь при перемешивании с помощью устройства подачи газа, расположенного под поверхностью реакционной смеси, в течение 15 мин при скорости потока, равной 1 л/мин, пропускали О 2. Затем О 2 заменяли на озон и его при перемешивании при -70 С пропускали, пока реакционная смесь не становилась синей. Затем подачу озона прекращали и через реакционную смесь пропускали О 2 до исчезновения синей окраски. Затем порциями добавляли борогидрид натрия (3,8 г, 104 ммоль), поддерживая температуру реакционной смеси-60 С. Смеси при перемешивании давали нагреваться до -20 С в течение 1 ч. Тестовую полоску Quantofix Peroxide 25 (Sigma Aldrich) использовали для определения содержания пероксида, оставшегося в реакционной смеси. Когда по результатам исследования с помощью тестовой полоски в реакционной смеси не оставалось пероксида, к реакционной смеси при перемешивании медленно добавляли насыщенный водный раствор NH4Cl до прекращения выделения Н 2. Смесь концентрировали в вакууме для удаления органических летучих веществ. Водный остаток подвергали распределению между этилацетатом и Н 2 О. Отделенный органический слой концентрировали в вакууме и получали неочищенное искомое соединение в виде смеси 3:1 диастереоизомеров. Маслообразное неочищенное искомое соединение растворяли в ТМБЭ и раствор нагревали при 50-55 С и затем при 5055 С добавляли н-гептан. Смеси в течение 20 мин давали постепенно охладиться до 40-45 С. Затем в колбу добавляли затравочные кристаллы искомого соединения и реакционную смесь при осторожном перемешивании в течение 2 ч постепенно охлаждали до 0-5 С и затем перемешивали при 0-5 С в течение еще 8 ч. Полученную взвесь фильтровали и осадок на фильтре промывали холодным смешанным растворителем (ТМБЭ:н-гептан = 1:2). Осадок на фильтре сушили в вакуумном сушильном шкафу при 40 С в течение 12 ч и получали чистое искомое соединение в виде белого кристаллического твердого вещества. МСИЭР: 388 [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6):7,80 (dd, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,21 (dd, 1H), 6,51 (t, 1H), 5,72 (s, 1H),5,23 (dd, 1H), 3,87 (d, 1H), 1,18 (s, 9H).e) (R)-2-Амино-2-(5-бром-2-фторфенил)-3,3-дифторпропан-1-ол К раствору [(R)-1-(5-бром-2-фторфенил)-2,2-дифтор-1-гидроксиметилэтил]амида 2-метилпропан-2 сульфиновой кислоты (10 г, 25,76 ммоль) в ДХМ (100 мл) в атмосфере аргона при температуре ниже 25 С добавляли 30% растворе HCl в изопропиловом спирте (10 мл, 91,6 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин при 25 С, охлаждали до -10 С, фильтровали и сушили и получали соль искомого соединения с HCl в виде белого кристаллического вещества: МСИЭР: 284, 286 [(М+Н)+],1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6):9,42 (Ъ, 3 Н), 7,84 (m, 1 Н), 7,74 (m, 1 Н), 7,35 (dd, 1 Н), 6,68 (t, 1 Н),4,03 (m, 2 Н). ммоль) в IPAc (5 мл) в атмосфере аргона при температуре ниже 25 С добавляли раствор K2CO3 (0,862 г,6,24 ммоль) в 5 мл воды. После перемешивания в течение 30 мин при 25 С получали двухфазный прозрачный раствор, охлаждали до -5 С, при температуре ниже 10 С медленно добавляли раствор 2 хлорацетилхлорида (0,41 г, 3,59 ммоль) в IPAc (2 мл). После перемешивания в течение 30 мин при 20 С органическую фазу собирали и использовали на следующей стадии без обработки. К полученному выше раствору добавляли ТГФ (3 мл), смесь охлаждали до 0 С. В атмосфере аргона при температуре ниже 10 С добавляли раствор KOtBu (0,35 г, 3,12 ммоль). После перемешивания при 20 С в течение 3 ч для остановки реакции добавляли воду. Органическую фазу промывали 1 н. водным раствором HCl (5 мл). Органическую фазу собирали и использовали на следующей стадии без обработки. К полученному выше раствору добавляли воду (5 мл) и Pd/C(10%, 50 мг), смесь перемешивали в атмосфере Н 2 (1,5 бар) при 25 С в течение 3 ч. Катализатор отфильтровывали. Фильтрат промывали 15% водным раствором NaCl. Растворитель удаляли в вакууме и получали искомое соединение в виде желтоватого твердого вещества. МСИЭР: 246 [(М+Н)+]. 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6):9,08 (s, 1 Н), 7,57 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,30 (m, 1 Н), 7,81 (m, 1 Н),7,30 (m, 2 Н), 6,55 (t, 1H), 4,1(m, 4 Н).g) (R)-5-Дифторметил-5-(2-фторфенил)-5,6-дигидро-2 Н-[1,4]оксазин-3-иламинсульфат К раствору (R)-5-дифторметил-5-(2-фторфенил)морфолин-3-она (120 г, 489,4 ммоль) в CH2Cl2 (1,2 л) при комнатной температуре добавляли P2S5 (108 г, 489,4 ммоль). Полученную желтую суспензию кипятили с обратным холодильником в течение 3,5 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой силикагеля (200-300 меш), 3 раза промывали с помощью CH2Cl2 и получали коричневый раствор. Растворитель удаляли и получали неочищенный продукт в виде оранжевого твердого вещества, которое диспергировали в ТГФ (100 мл), затем при комнатной температуре добавляли 25% водный раствор NH3 (750 мл). Через 27 ч реакционную смесь экстрагировали с помощью IPAC. Объединенную органическую фазу промывали водой, концентрировали и получали желтое масло. Неочищенный продукт растворяли в IPAC (1,2 л) и МеОН (60 мл) и небольшое количество нерастворившегося твердого вещества удаляли фильтрованием. Затем добавляли концентрированную H2SO4 (57,6 г, 587,3 ммоль) и получали белую суспензию. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и фильтровали и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: МСИЭР: 245; [(M-H2SO4+H)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6):9,60 (bs, 1H), 8,82 (br s, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,35 (m, 2 Н), 6,75 (t, 1 Н),4,65 (dd, 2 Н), 4,36 (d, 1 Н), 4,14 (d, 1H).(127,2 г, 371,6 ммоль) в концентрированной H2SO4 (380 мл) при 5-15 С добавляли HNO3 (25,8 г, 408,8 ммоль). После добавления реакционную смесь при 10-20 С медленно добавляли к 12% водному растворуNH3 (2,6 л). Полученную суспензию (рН 8) фильтровали и получали искомое соединение в виде желтого твердого вещества: МСИЭР: 290; [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, CDCl3):8,89 (m, 1H), 8,14 (m, 1H), 7,18 (dd, 1H), 6,10 (t, 1H), 5,65 (br s, 2H),4,57 (dd, 1H), 4,13 (dd, 2H), 3,88 (m, 1H).(20 г, 64,659 ммоль) в 2-Ме-ТГФ (20 мл) при комнатной температуре добавляли ДИПЭА (9,831 г, 76,066 ммоль) и (Вос)2 О (18,111 г, 82,884 ммоль). Полученную смесь нагревали при 60-65 С и перемешивали при этой температуре в течение 17 ч. К реакционной смеси добавляли н-гептан (200 мл), затем смесь охлаждали до -20 С. Суспензию фильтровали и получали искомое соединение в виде желтого твердого вещества: МСИЭР: 390; [(М+Н) ]; 1[(R)-5-(5-амино-2-фторфенил)-5-дифторметил-5,6-дигидро-2 Н[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты К суспензии трет-бутилового эфира [(R)-5-дифторметил-5-(2-фтор-5-нитрофенил)-5,6-дигидро-2 Н[1,4]оксазин-3-ил]карбаминовой кислоты (8 г, 19,23 ммоль) в МеОН (56 мл) добавляли Pd(OH)2/C (20%,50% воды, 0,8 г). Атмосферу в реакторе заменяли на водород (1 бар), затем реакционную смесь перемешивали при 20 С в течение 5 ч, фильтровали через микрокристаллическую целлюлозу и концентрировали. Неочищенный продукт перекристаллизовали из МеОН и воды и получали искомое соединение в виде белого твердого вещества: МСИЭР: 360,1521; [(М+Н)+]; 1 Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6):9,89 (s, 1H), 6,83 (dd, 1H), 6,74 (m, 1H), 6,50 (m, 1H), 6,22 (t, 1 Н),4,85 (s, 2 Н), 4,46 (dd, 2 Н), 4,03 (m, 1 Н), 3,84 (m, 1 Н), 1,42 (s, 9 Н).