Лекарственный комплекс
Номер патента: 1550
Опубликовано: 23.04.2001
Авторы: Кумазава Эйдзи, Сусаки Хироси, Иноуе Казухиро, Икеда Масахиро, Того Акико, Куга Хироси
Формула / Реферат
1. Лекарственный комплекс, где карбокси(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт и остаток лекарственного соединения связаны друг с другом спейсером, состоящим из одной аминокислоты, или спейсером, состоящим из 2-8 аминокислот, связанных пептидной связью, где остаток лекарственного средства означает структуру лекарственного соединения, остающуюся в этом соединении после образования связи между спейсером и лекарственным соединением.
2. Лекарственный комплекс по п.1, где декстрановый полиспирт, который является карбокси(С1-С4)алкилдекстрановым полиспиртом, получают путем обработки декстрана в условиях, обеспечивающих в основном полное превращение в полиспирт.
3. Лекарственный комплекс по п.1 или 2, в котором карбокси(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом.
4. Лекарственный комплекс по любому из пп.1-3, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством.
5. Лекарственный комплекс по п.4, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим зависимое от концентрации противоопухолевое действие.
6. Лекарственный комплекс по п.4, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим зависимое от времени противоопухолевое действие.
7. Лекарственный комплекс по п.4, в котором противоопухолевым средством является доксорубицин или (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино-[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)дион.
8. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-7, в котором спейсер является дипептидом формулы -X-Z-, где "-X-Z-" обозначает остаток, который состоит из дипептида, полученного путем соединения пептидной связью гидрофобной аминокислоты (X) и гидрофильной кислоты (Z), расположенных соответственно у N-концевого участка и С-концевого участка, и в котором удалены один атом водорода и одна гидроксильная группа соответственно из аминогруппы у N-конца из карбоксильной группы у С-конца, либо спейсер содержит дипептид в виде частичной пептидной последовательности.
9. Лекарственный комплекс по п.8, в котором гидрофобная аминокислота является фенилаланином и гидрофильная аминокислота является глицином.
10. Лекарственный комплекс по п.9, в котором спейсер является (N-конец)-Gly-Gly-Phe-Gly.
11. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 1-15 мас.%.
12. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 3-15 мас.%.
13. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 5-6 мас.%.
14. Лекарственный комплекс по п.1, в котором N-конец пептида формулы H2N-Gly-Gly-Phe-Gly-COOH связан с карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта посредством кислотно-амидной связи и С-конец пептида связан с 1-аминогруппой (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо-[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)диона посредством кислотно-амидной связи.
15. Лекарственный комплекс по п.14, в котором введенное количество остатка (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1H,12Н-бензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13-(9Н,15Н)диона составляет 2-10 мас.%.
16. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 5000-500000 и степень карбоксиметилирования от 0,01 до 2,0.
17. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 50000-450000 и степень карбоксиметилирования от 0,1 до 1,0.
18. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 200000-400000 и степень карбоксиметилирования от 0,3 до 0,5.
19. Лекарственный комплекс по п.14, в котором введенное количество остатка (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13-(9Н,15Н)диона составляет 5-6 мас.%, молекулярная масса карбокси-(С1-С4)алкилдекстранового полиспирта равна примерно 228000 и степень карбоксилирования равна примерно 0,4.
20. Носитель лекарственного вещества, предназначенный для связывания лекарственного соединения, который содержит карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт.
21. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 5000-500000 и степень карбоксиметилирования от 0,01 до 2,0.
22. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 50000-450000 и степень карбоксиметилирования от 0,1 до 1,0.
23. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С1-С4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 200000-400000 и степень карбоксиметилирования от 0,3 до 0,5.
24. Носитель лекарственного вещества по любому из пп.20-23, в котором карбокси-(С1-С4) алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом.
25. Применение карбокси-(С1-С4)алкилдекстранового полиспирта для получения лекарственного комплекса, в котором остаток лекарственного соединения и карбокси-(С1-С4) алкилдекстрановый полиспирт связаны друг с другом при помощи спейсера, где остаток лекарственного средства означает структуру лекарственного соединения, остающуюся в этом соединении после образования связи между спейсером и лекарственным соединением.
Текст
1 Область техники, к которой относится изобретение Настоящее изобретение относится к эффективному лекарственному комплексу. В частности, данное изобретение относится к лекарственному комплексу, в котором карбокси (C1-4) алкилдекстрановый полиспирт, являющийся производным полисахарида, и лекарственное соединение,например,противоопухолевое средство, связаны друг с другом при помощи спейсера. Уровень техники Противоопухолевые средства, применяемые для лечения твердых злокачественных опухолей, в частности, рака легкого или карциномы пищеварительных органов, и рака крови, например, лейкоза, вводят системно внутривенным или пероральным способом, затем вместе с кровотоком они переносятся в конкретные места локализации опухоли, где ингибируют или подавляют пролиферацию раковых клеток. Однако вводимые системно противоопухолевые средства часто поглощаются из крови печенью и ретикулоэндотелиальными органами или быстро выводятся с мочой, в результате чего их концентрация в крови снижается и воздействие на опухоль оказывается недостаточно эффективным. Кроме того, обычно применяемые противоопухолевые средства сами по себе характеризуются плохой избирательностью обнаружения мест локализации опухоли(избирательное воздействие на опухоль),поэтому указанные средства равномерно распределяются в разных тканях и клетках всего организма и воздействуют как цитотоксины на здоровые клетки и ткани, что ведет к возникновению вредных эффектов, например,рвоты, гипертермии или алопеции. Из вышесказанного следует, что существует насущная необходимость в способах эффективной и избирательной доставки противоопухолевых средств к местам локализации опухолей. одним из предложенных В соответствии с способов противоопухолевое средство связывают с полисахаридом, благодаря чему оно дольше сохраняется в крови и более избирательно воздействует на опухолевые ткани. Например, в публикации патента Японии(KOKOKU)(Неi) 7-84481/1995 рассматривается лекарственный комплекс, в котором даунорубицин, доксорубицин, митомицин С, блеомицин или подобное средство вводят в производное карбокси-метилированного манноглюкана при помощи основания Шиффа или кислотноамидной связи. В качестве производного манноглюкана по этому изобретению используют также полиспирты карбоксиметилированного манноглюкана. Однако производные манноглюкана имеют слишком разветвленную и сложную структуру, поэтому из них трудно получить однородный продукт, пригодный для изготовления лекарственных средств. 2 Помимо этого, в публикации международного патента WO 94/19376 описывается лекарственный комплекс, в котором пептидная цепь(количество аминокислотных остатков от 1 до 8) связывает между собой карбоксильную группу полисахарида, имеющего несколько подобных групп, и доксорубицин, даунорубицин, митомицин С, блеомицин и тому подобные. В качестве примеров полисахаридов с карбоксильными группами приведены полисахариды, изначально имеющие карбоксильные группы в своей структуре (например, гиалуроновая кислота), и полисахариды, не содержащие изначально карбоксильные группы (например, пуллулан, декстран, хитин и т.д.), у которых гидроксильные группы модифицированы карбонильными группами путем введения карбокси(С 14)алкильных групп или связывания путем этерификации с многоосновной кислотой, такой как малоновая кислота или янтарная кислота. Эти лекарственные комплексы отличаются в структурном отношении тем, что лекарственное средство, такое как доксорубицин, и вышеуказанная полисахаридная часть связаны друг с другом при помощи спейсера, благодаря чему указанные комплексы оказывают более сильное противоопухолевое действие по сравнению с доксорубицином, являются менее токсичными и не вызывают вредных эффектов. Методы получения лекарственных комплексов на основе производных полисахаридного полиспирта, используемых и качестве носителей лекарственного вещества, представлены и ряде отчетов, например, таких как "Researches оn polysaccharide-peptide-doxorubicin complexes Correlations between stabilities of polysaccharide(Рефераты 10-й конференции Японского общества по системам доставки лекарственных веществ к участкам действия, 279, 1994); "Researches on polysaccharide-peptide-doxorubicinactivity" (Рефераты 9-й ежегодной конференции Японского общества по изучению ксенобиотиков, 292, 1994); рефераты 19-го семинара по вопросам развития научно-исследовательной деятельности (The Organization for Drug A D Rtissue by polysaccharide carriers" (Рефераты 12-го симпозиума по коллоидным и межповерхностным технологиям. Химическое общество Японии, 51, 1995). Сущность изобретения Целью настоящего изобретения является создание лекарственного комплекса, способного избирательно доставлять активный ингредиент,например, такой, как противоопухолевое, к местам локализации опухолей или подобным участкам. В частности, целью настоящего изобретения является создание лекарственного комплекса, который содержит в своей структуре 3 лекарственное соединение, например, противоопухолевое средство, сохраняется в крови в течение длительного времени и может избирательно доставлять лекарственное соединение к местам локализаций опухоли. Кроме того, еще одной целью настоящего изобретения является создание метода получения лекарственных комплексов, обладающих вышеуказанными отличительными признаками. Для достижения вышеуказанной цели авторы настоящего изобретения предприняли попытку улучшить лекарственный комплекс, описанный в публикации международного патентаWO 94/19376. В результате этого они обнаружили, что при использовании в качестве полисахаридной части производного декстрана, полученного путем карбокси(C1-4)алкилирования декстранового полиспирта, вместо полисахаридов с карбоксильными группами, в крови длительное время после введения сохраняется высокая концентрация лекарственного средства и значительно улучшается избирательность воздействия на места локализации опухолей или очаги воспаления. Кроме того, указанные соединения характеризуются более высокой эффективностью, в частности, противоопухолевым действием и меньшей токсичностью. Эти открытия легли в основу настоящего изобретения. Таким образом, объектом настоящего изобретения является лекарственный комплекс, в котором карбокси(C1-4)алкилдекстрановый полиспирт и остаток лекарственного соединения связаны друг с другом спейсером, состоящим из одной аминокислоты, или спейсером, состоящим из 2-8 аминокислот, связанных с пептидной связью. Другим объектом настоящего изобретения является препарат, в состав которого входит вышеуказанный лекарственный комплекс; и фармацевтическая композиция, содержащая вышеуказанный лекарственный комплекс в качестве активного ингредиента, например, препараты для инъекций или капельных вливаний в виде лиофилизированных продуктов в ампулах. Кроме того, еще одним объектом настоящего изобретения является способ получения вышеуказанного лекарственного комплекса. К предпочтительным вариантам осуществления данного изобретения относится вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором декстрановый полиспирт является, в частности,карбокси(C1-4)алкилдекстрановым полиспиртом,который получают путем обработки декстрана в условиях, обеспечивающих практически полное превращение в полиспирт; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором карбокси(С 1-4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым или противовоспалительным 4 средством; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим противоопухолевое действие в зависимости от концентрации (противоопухолевое средство, оказывающее более сильное противоопухолевое действие при более высокой концентрации; в настоящем описании изобретения далее иногда определяется как зависящее от концентрации противоопухолевое средство); вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим противоопухолевое действие в зависимости от времени(противоопухолевое средство,оказывающее более сильное противоопухолевое действие при более продолжительном времени воздействия; в настоящем описании изобретения иногда определяется как зависящее от времени противоопухолевое средство); и вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором противоопухолевое средство является доксорубицином или (1S,9S)-1-амино-9-этил-5 фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1 Н,12 Нбензо[де]-пирано-[3',4':6,7]индолизино[1,2b]хинолин-10,13 (9 Н,15 Н)дионом. Кроме того, к предпочтительным вариантам осуществления данного изобретения относится вышеуказанный лекарственный комплекс,в котором спейсер является дипептидом формулы -X-Z-[символ "-X-Z-" означает остаток, который состоит из дипептида, полученного путем соединения пептидной связью гидрофобной аминокислоты (X) и гидрофильной аминокислоты (Z), расположенных соответственно у Nконцевого участка и С-концевого участка, и в котором удалены один атом водорода и одна гидроксильная группа соответственно из аминогруппы у N-конца и из карбоксильной группы у С-конца], либо спейсер содержит дипептид в виде частичной пептидной последовательности; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором гидрофобная аминокислота является фенилаланином и гидрофильная аминокислота является глицином; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором спейсер является(N-конец)-Gly-Gly-Рhе-Gly-; и вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором количество введенного остатка противоопухолевого средства составляет 1-15 мас.%, предпочтительно 3-10 мас.% и более предпочтительно 5-6 мас.%. К наиболее предпочтительным вариантам осуществления настоящего изобретения относится вышеуказанный лекарственный комплекс,в котором N-конец пептида формулы H2N-GlyGly-Phe-Gly-СООН присоединен к карбоксильной группе карбоксиметилдекстранового полиспирта с помощью кислотно-амидной связи и Сконец указанного пептида присоединен к 1 аминогруппе(1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор 2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1 Н,12 Нбензо[де] пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b] 5 хинолин-10,13(9 Н,15 Н)-диона с помощью кислотно-амидной связи; вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором количество введенного остатка (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор 2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1 Н,12 Нбензо[де] пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9 Н,15 Н)-диона составляет 2-10 мас.%; и вышеуказанный лекарственный комплекс, в котором карбокси (C1-4) алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом с молекулярной массой 5000-500000, предпочтительно 50000-450000 и более предпочтительно 200000-400000, при этом степень карбоксиметилирования на один составной остаток сахарида равна 0,01-2,0,предпочтительно 0,1-1,0 и более предпочтительно 0,3-0,5. Другим объектом настоящего изобретения является носитель лекарственного вещества,которым является карбокси(С 1-4)алкилдекстрановый полиспирт. В соответствии с предпочтительными вариантами осуществления данного изобретения молекулярная масса карбокси(C1 полиспирта составляет 4)алкилдекстранового 5000-500000, предпочтительно 50000-450000 и более предпочтительно 200000-400000, при этом степень карбоксиметилирования на один составной остаток сахарида равна 0,01-2,0,предпочтительно 0,1-1,0 и более предпочтительно 0,3-0,5. Наиболее предпочтительным носителем является карбоксиметилдекстрановый полиспирт. Другим объектом настоящего изобретения является использование карбокси(C1-4)алкилдекстранового полиспирта для получения лекарственного комплекса, в котором карбокси(C1-4)-алкилдекстрановый полиспирт связан с остатком лекарственного соединения. К предпочтительным вариантам осуществления настоящего изобретения относится использование карбокси(С 1-4)алкилдекстрано-вого полиспирта для получения лекарственного комплекса, в котором остаток лекарственного соединения и карбокси(С 1-4)алкилдекстрановый полиспирт связаны друг с другом при помощи спейсера; и использование карбокси(С 1-4) алкилдекстранового полиспирта для получения лекарственного комплекса, в котором карбокси(C1-4)алкилдекстрановый полиспирт и остаток лекарственного соединения связаны друг с другом спейсером, состоящим из одной аминокислоты, или спейсером, состоящим из 2-8 аминокислот с пептидной связью. Краткое описание чертежей На фиг. 1 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 8). На фиг. 2 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 8). 6 На фиг. 3 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 9). На фиг. 4 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 9). На фиг. 5 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 10). На фиг. 6 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 15). На фиг. 7 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 15). На фиг. 8 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 28). На фиг. 9 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 28). На фиг. 10 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 29). На фиг. 11 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 29). На фиг. 12 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 34). На фиг. 13 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 34). На фиг. 14 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 39). На фиг. 15 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 39). На фиг. 16 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 41). На фиг. 17 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 41). На фиг. 18 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного 7 комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 44). На фиг. 19 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 44). На фиг.20 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 47). На фиг. 21 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 47). На фиг. 22 изображен график гельпроникающей хроматографии лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 55). На фиг. 23 изображен ультрафиолетовый спектр поглощения лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 55). На фиг. 24 показана фармакокинетика лекарственного комплекса по настоящему изобретению (полученного в примере 15). Каждая точка на этой фигуре представляет собой среднее значение для трех экспериментов. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Предпочтительный вариант осуществления изобретения Лекарственный комплекс по настоящему изобретению отличается тем, что карбокси (C1-4) алкилдекстрановый полиспирт и остаток лекарственного соединения связаны друг с другом спейсером, состоящим из одной аминокислоты,или спейсером, состоящим из 2-8 аминокислот связанных с пептидной связью. Остаток лекарственного, соединения, входящий в состав лекарственного комплекса по настоящему изобретению, получают из лекарственного соединения, используемого для лечения и/или профилактики болезней у млекопитающих, в том числе, у человека, например, в качестве противоопухолевого средства, антибактериального средства или тому подобного, при этом он имеет частичную структуру лекарственного соединения. Однако лекарственные соединения, из которых может быть получен данный остаток, не ограничиваются вышеуказанными соединениями. Кроме того, в качестве лекарственных соединений можно использовать любые соединения, которые имеют одну или несколько реакционноспособных функциональных групп, способных участвовать в образовании связи со спейсером (к таким группам, например, относятся аминогруппа, карбоксильная группа, гидроксильная группа, тиольная группа,сложноэфирная группа или тому подобные). Термин "лекарственное соединение" в настоящем описании изобретения означает также пролекарство, которое в качестве своей части со 001550 8 держит основную структуру лекарственного средства, обладающую фармакологической активностью, и может воссоздать указанное соединение in vivo. Термин "остаток лекарственного соединения" в настоящем описании изобретения, в частности, означает частичную структуру лекарственного соединения, остающуюся в соединении после образования связи, при условии, что связь между спейсером и остатком лекарственного соединения образуется в результате взаимодействия реакционноспособной функциональной группы данного лекарственного соединения с реакционноспособной функциональной группой данного спейсера (например, в результате дегидратации и конденсации и т.д.). Например, когда лекарственное соединение выражено формулой D-NH2, D-COOH, D-COOR, DOH, D-SH, D-CONH2 или D-NH-COOR (R обозначает низшую алкильную группу или подобную группу), тогда остаток лекарственного соединения представляет собой соответственно DNH-(D-NH-CO-Q и т.д.), D-CO-(D-CO-NH-Q, DCO-О-Q, D-CO-S-Q и т.д.), D-CO-(D-CO-NH-Q,D-CO-O-Q, D-CO-S-Q и т.д.), D-O-(D-O-CO-Q,D-O-Q и т.д.), D-S-(D-S-CO-Q, D-S-Q и т.д.), DCONH-(D-CO-NH-CO-Q и т.д.) и D-NH-CO-(DNH-CO-O-Q, D-NH-CO-NH-Q и т.д.) (в скобках указана связь между спейсером и остатком лекарственного средства, в котором Q обозначает оставшуюся частичную структуру спейсера без реакционноспособной функциональной группы). Однако тип связи между спейсером и остатком лекарственного соединения не ограничивается указанными выше. Остаток лекарственного соединения может быть присоединен кN-концевой аминогруппе или С-концевой карбоксильной группе спейсера; альтернативно он может быть присоединен к реакционноспособной функциональной группе аминокислоты,образующей спейсер. В качестве остатка лекарственного соединения можно использовать, например, остатки противоопухолевых средств, таких как доксорубицин, даунорубицин, митомицип С, блеомицин, циклоцитидин, винкристин, винбластин,метотрексат, противоопухолевые средства на основе платины, (цисплатин или его производные), таксол или его производные, камптотецин или его производные (противоопухолевые средства, описанные в нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Hei) 6-87746/1994,причем предпочтение отдается (1S,9S)-1-амино 9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил 1 Н,12 Н-бензо[де]-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9H,15H)-диону, представленному в п.2, или подобному соединению). В качестве спейсера, связывающегося с остатком лекарственного соединения, можно использовать спейсер, состоящий из одной аминокислоты, или спейсер, состоящий из 2-8 аминокислот, связанных с пептидной связью. Такой 9 спейсер, в частности, представляет собой остаток одной аминокислоты, который получают,удаляя один атом водорода и одну гидроксильную группу соответственно из аминогруппы и карбоксильной группы аминокислоты, или остаток олигопептида, состоящий из 2-8 аминокислот, связанных пептидной связью, который получают, удаляя один атом водорода и одну гидроксильную группу соответственно из Nконцевой аминогруппы и С-концевой карбоксильной группы олигопептида. Предпочтительными спейсерами являются остатки олигопептидов, состоящие из 2-6 аминокислот. Тип аминокислоты, образующей спейсер, не имеет каких-либо ограничений. Например, можно использовать L- или D-аминокислоты, предпочтительно L-аминокислоты, аланин,-аминокапроновую кислоту,аминомасляную кислоту или тому подобные, а также -аминокислоты. Эти аминокислоты,кроме -аминокислот, предпочтительно должны находиться рядом с производным полисахарида. Направление связывания спейсера не имеет каких-либо ограничений. N-конец спейсера обычно присоединяют к карбоксильной группе карбокси (C1-4) алкилдекстранового полиспирта с помощью кислотно-амидной связи и С-конец спейсера присоединяют к аминогруппе лекарственного соединения. Когда составным звеном пептидного спенсера является остаток лизина,-аминогруппа и -аминогруппа остатка лизина предпочтительно образуют соответствующие кислотно-амидные связи с карбоксильными группами других аминокислот с получением Nконцов с обеих сторон пептидного спейсера, что способствует образованию связи с карбоксильными группами лекарственных соединений. Кроме того, если в качестве составных звеньев ввести в спейсер один или несколько остатков соединений диамина или дикарбоновой кислоты(например, остатки таких соединений диамина,как этилендиамин, или таких соединений дикарбоновой кислоты, как янтарная кислота),можно использовать спейсер, имеющий с обеих сторон N-концы или С-концы. Аминокислотная последовательность спейсера не имеет каких-либо ограничений. Предпочтение отдается спейсеру, представляющему собой остаток дипептида формулы -XZ-, где X является остатком гидрофобной аминокислоты и Z является остатком гидрофильной аминокислоты; -X-Z- обозначает остаток, который состоит из дипептида, полученного путем соединения пептидной связью гидрофобной аминокислоты (X) и гидрофильной аминокислоты (Z), расположенных соответственно у Nконцевого участка и С-концевого участка, и в котором удалены один атом водорода и одна гидроксильная группа соответственно из аминогруппы у N-конца и из карбоксильной группы у 10 С-конца, а также спейсеру, содержащему остаток дипептида в виде частичной пептидной последовательности. В качестве гидрофобной аминокислоты можно использовать фенилаланин, тирозин, лейцин или тому подобные и в качестве гидрофильной аминокислоты можно использовать глицин, аланин или тому подобные. Спейсер может иметь повторяющуюся последовательность дипептидного остатка (например, X-Z-X-Z-, -X-Z-X-Z-X-Z- и т.д.). Спейсер, имеющий такую дипептидную структуру, гидролизуется в местах локализации опухолей или в очагах воспаления, где, как известно, имеется избыток пептидазы, и высвобождает в указанных местах большое количество лекарственного соединения. Частичная структура, образованная путем связывания спейсера,содержащего вышеуказанный дипептид, с лекарственным соединением является предпочтительной частичной структурой лекарственного комплекса по настоящему изобретению. Когда в качестве остатка лекарственного соединения используется противоопухолевое средство, действующее в зависимости от концентрации, (например, доксорубицин) или подобное, наиболее предпочтительным является спейсер, содержащий вышеуказанный дипептидный остаток формулы -X-Z-, или спейсер, содержащий вышеуказанный дипептидный остаток в виде частичной пептидной последовательности. Кроме того, когда в качестве остатка лекарственного соединения используется противоопухолевое средство, действующее в зависимости от времени, которое требует сохранения высокой концентрации в течение длительного времени, вышеуказанный спейсер иногда способствует усилению противоопухолевого действия. В качестве примеров можно привести противоопухолевые средства, описанные в нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Неi) 6-87746/1994, в частности, противоопухолевое средство по п.2. Как правило, типы спейсеров не ограничиваются вышеуказанными, поэтому необходимо выбрать спейсер,приемлемый с учетом режима воздействия противоопухолевого средства, фармако-кинетики или токсичности, высвобождения противоопухолевого средства in vivo и подобных факторов. Для лечения карцином с быстрой пролиферацией клеток желательно использовать вышеуказанный спейсер, способный за короткое время высвобождать большое количество лекарственного соединения. В нижеследующей таблице приведены конкретные примеры спейсеров; однако спейсеры, используемые для получения лекарственных комплексов по настоящему изобретению не ограничиваются указанными спейсерами, и специалистам в этой области должно быть очевидно, что можно выбрать любой другой спейсер,обеспечивающий оптимальное высвобождение лекарственного соединения. В этой таблице ле 11 вые части пептидных последовательностей являются N-концами, и остатки лекарственных соединений присоединены к С-концам. D-Phe обозначает остаток D-фенилаланина, и другие аминокислоты являются L-аминокислотами. Степень высвобождения лекарственного соединения определяли исходя из эффективности воздействия лекарственных комплексов, связанных с доксорубицином, на крыс, пораженных опухолью Walker 256, или с учетом свободной концентрации доксорубицина в местах локализации опухоли у крыс, пораженных опухолью Walker 256. Из этих спейсеров с доксорубицином предпочтительно используют спейсер,который способен высвобождать большое количество лекарственного соединения в течение короткого времени, например, (N-конец)-GlyGly-Phe-Gly-. Таблица 1(а) Спейсеры с высокой степенью высвобождения лекарственного соединения(b) Спейсеры с относительно высокой степенью высвобождения лекарственного соединения(с) Спейсеры с относительно низкой степенью высвобождения лекарственного соединения(d) Спейсеры с низкой степенью высвобождения лекарственного соединения Хотя степень алкоголизации карбокси(С 1-4) алкилдекстранового полиспирта, который является производным полисахарида, входящим в состав лекарственного комплекса по настоящему изобретению, не имеет каких-либо ограничений, желательно, чтобы условия обработки декстрана обеспечивали практически полное превращение в полиспирт. Например, декстрановый полиспирт, полученный путем последовательной обработки декстрана большим из 001550 12 бытком перйодата натрия и борогидрида натрия, в результате которой достигается практически полное превращение в полиспирт, можно успешно использовать в качестве исходного вещества для получения лекарственного комплекса по настоящему изобретению. Однако объем настоящего изобретения не ограничивается вышеуказанным методом превращения декстрана в полиспирт, и специалисты в этой области могут использовать для этой цели любые другие приемлемые методы. Тип декстрана не имеет каких-либо ограничений, и используемый декстран может содержать любое число -D-1,6-связей. Например,можно использовать декстраны, в которых -D1,6-связи составляют 85% или больше, 90% или больше и 95% или больше. Молекулярная масса декстрана не имеет каких-либо ограничений; например, можно использовать декстраны с молекулярной массой от около 10000 до около 2000000, предпочтительно от около 50000 до около 800000. В качестве C1-4 алкильной группы,образующей карбокси(С 1-4)алкильную группу,можно использовать C1-4 алкильную группу с линейной или разветвленной цепью, в частности, метильную, этильную, н-пропильную, изопропильную, н-бутильную, втор-бутильную группу или тому подобные, при этом наиболее предпочтительной является метильная группа. Карбокси (С 1-4)алкилирование можно осуществлять, например, путем взаимодействия галогенсодержащей (С 1-4)алкилкарбоновой кислоты,такой как хлоруксусная кислота, бромуксусная кислота, -хлорпропионовая кислота, -метил-хлорпропионовая кислота, -хлорпропионовая кислота, -метилхлорпропионовая кислота, -хлормасляная кислота, -хлормасляная кислота или -хлормасляная кислота, предпочтительно хлоруксусной кислоты, с гидроксильньми группами декстранового полиспирта до достижения частичного или полного карбокси(C1-4) алкилирования гидроксильных групп. Декстрановый полиспирт, например, растворяют в инертном растворителе, который не участвует в указанных реакциях (таком как вода, N,N-диметилформамид или диметилсульфоксид), в присутствии основания (например,гидроксид натрия или гидроксид калия) добавляют к раствору галогенсодержащую (С 1-4) алкилкарбоновую кислоту или ее соль и подвергают смесь взаимодействию в течение периода времени от нескольких минут до нескольких дней при температуре охлаждения льдом до примерно 100 С. Степень введения карбокси(C1-4)алкильной группы можно легко контролировать, например, путем выбора соответствующей температуры для карбокси(C1-4)алкилирования или необходимых количеств используемых в качестве реагентов галогенсодержащей(С 1-4) алкилкарбоновой кислоты или оснований, что хорошо известно специалистам в этой области. 13 Степень карбокси(C1-4)алкилирования гидроксильных групп декстранового полиспирта не имеет каких-либо ограничений, при этом она может составлять от 0,01 до 2,0, предпочтительно от 0,1 до 1,0 и более предпочтительно от 0,3 до 0,5 на один составной остаток сахарида. Молекулярная масса карбокси(С 1-4)алкилдекстранового полиспирта, определяемая методом гель-фильтрации, составляет от около 5000 до 500000, предпочтительно от около 50000 до 450000 и более предпочтительно от около 200000 до 400000. Вышеуказанный карбокси(С 1-4)алкилдекстрановый полиспирт является эффективным носителем лекарственного вещества. Лекарственные комплексы, в которых лекарственное соединение и карбокси (С 1-4)алкилдекстрановый полиспирт связаны друг с другом, отличаются,например, великолепной избирательностью, в частности, избирательным воздействием на опухоль, и способны сохранять высокие концентрации лекарственного соединения в крови в течение длительного времени. Для образования связи между лекарственным соединением и карбокси(C1-4)алкилдекстрановым полиспиртом можно использовать метод связывания с помощью сложноэфирной связи или описанный выше альтернативный метод с использованием соответствующего спейсера. В случае использования спейсера лекарственный комплекс по настоящему изобретению можно получить путем присоединения спейсера, связанного с остатком лекарственного соединения, к карбоксильной группе вышеуказанного карбоксиметилдекстранового полиспирта. Спейсер присоединяют к карбоксильной группе карбоксиметилдекстранового полиспирта путем связывания N-концевой аминогруппы спейсера с карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта с помощью кислотноамидной связи. Однако связь между спейсером и карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта не ограничивается указанной выше; для этой цели можно использовать другие химические связи и связи, образуемые с помощью одного или нескольких спейсеров. Например, С-концевую карбоксильную группу спейсера и карбоксильную группу карбоксиметилдекстранового полиспирта можно связать друг с другом ангидридом кислоты, или, используя в качестве спейсера соединение диамина, такое как этилендиамин, все карбоксильные группы можно связать с аминогруппами соединения диамина посредством кислотно-амидной связи. Когда N-концевая аминогруппа спейсера связана с карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта с помощью кислотно-амидной связи, можно использовать осушающие и конденсирующие средства, обычно применяемые для синтеза пептидной цепи,например,N,N-дициклоалкилкарбодиимиды, 001550(НОВТ),1 этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (EEDQ) и тому подобные. Кроме того, эту реакцию можно осуществлять с использованием активированного сложного эфира и галогенангидрида кислоты. Хотя количество остатка лекарственного соединения, вводимого в карбоксиметилдекстрановый полиспирт, не имеет каких-либо ограничений, оно должно быть выбрано с учетом,например, физико-химических свойств остатка лекарственного соединения, фармакокинетики,эффективности и токсичности лекарственного комплекса по настоящему изобретению. Остаток лекарственного соединения обычно используют в количестве примерно 0,1-30 мас.%,предпочтительно примерно 1-15 мас.%, более предпочтительно примерно 3-10 мас.% и наиболее предпочтительно примерно 5-6 мас.%. Количество остатка лекарственного соединения,вводимого в карбоксиметилдекстрановый полиспирт можно легко определить, например, абсорбционным спектрометрическим анализом. В качестве примера получения лекарственного комплекса по настоящему изобретению приведена нижеследующая схема, на которой показан процесс введения остатка лекарственного соединения, в частности, противоопухолевого средства, описанного в п.2 нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Hei) 6-87746/1994; однако лекарственные комплексы по настоящему изобретению и методы их получения не ограничиваются показанными на этой схеме. На приведенной схеме вводимое количество остатка лекарственного соединения составляет, например, примерно 1-15 мас.%,предпочтительно примерно 2-10 мас.%. Кроме того, из всех составных звеньев полиспиртов на этой схеме показано только одно составное звено, которое вводится с одной или двумя карбоксиметильными группами. Однако очевидно, что производное полисахарида, являющееся составной частью лекарственного комплекса по настоящему изобретению, состоит не только из повторов указанного составного звена. Лекарственный комплекс по настоящему изобретению Известно, что равновесное состояние вышеуказанного лекарственного соединения достигается у соединений, имеющих замкнутое лактоновое кольцо (соединение с замкнутым кольцом) в кислой водной среде (например,примерно при рН 3), и у соединений, имеющих разомнутое кольцо (соединение с разомкнутым кольцом) в щелочной водной среде (например,примерно при рН 10). Лекарственный комплекс,в который введен остаток, соответствующий соединению с замкнутым или разомкнутым кольцом, обладает аналогичным противоопухолевым действием. Поэтому необходимо понять,что любые подобные соединения входят в объем настоящего изобретения. Когда в реакционной системе присутствует реагент с открытым лактоновым кольцом, реакция конденсации происходит между карбоксильной группой лактонового кольца и аминогруппой спейсера, что ведет к значительно меньшему выходу продукта, причем в некоторых случаях не удается получить однородный лекарственный комплекс. Такую побочную реакцию можно избежать, ис 001550 16 пользуя в качестве реагента соединение с замкнутым кольцом. То есть указанную побочную реакцию можно свести до минимума, превращая натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта в соль триэтиламмония и конденсируяN-концевую аминогруппу спейсера, связанную с остатком описанного выше лекарственного соединения, с помощью карбоксильной группы карбоксиметилдекстранового полиспирта в неводной системе (в органическом растворителе,не содержащем воды), что обеспечивает эффективный выход требуемого продукта. В качестве соли карбоксиметилдекстранового полиспирта,растворяющейся в органических растворителях,можно использовать, например, соль триалкиламмония, такую как соль триэтиламмония или соль триметиламмония, либо соль органических оснований, такую как N-метилпирролидин, Nметил-морфолин или диметиламинопиридин(DMAP). В качестве органических растворителей можно использовать N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид или тому подобные. Лекарственный комплекс по настоящему изобретению отличается тем, что он оказывает требуемое фармакологическое действие на конкретном участке, например, в месте локализации опухоли или в очаге воспаления, в зависимости от типа остатка лекарственного соединения (например, остаток лекарственного соединения, являющегося противоопухолевым средством или противовоспалительным средством),и уменьшает токсичность, присущую лекарственному соединению. Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, авторы настоящего изобретения считают нужным отметить, что производное полисахарида, являющееся составной частью лекарственного комплекса по настоящему изобретению (например, карбоксиметилдекстрановый полиспирт) хорошо сохраняется в крови и накапливается в большом количестве в местах локализации опухоли или в очагах воспаления, поэтому он является эффективным носителем лекарственного вещества и сообщает лекарственному комплексу по настоящему изобретению избирательность воздействия на места локализации опухоли и очаги воспаления. Кроме того, считается, что в местах локализации опухоли или очагах воспаления экспрессируется протеаза (пептидаза), вследствие чего спейсер лекарственного комплекса по настоящему изобретению легко гидролизуется,высвобождая лекарственное соединение, которое эффективно воздействует на очаг поражения. Препарат, содержащий лекарственный комплекс по настоящему изобретению, обычно находится в ампулах в виде лиофилизированного продукта или тому подобного и используется в клинических условиях для парентерального введения, например, для инъекций или капельных вливаний. Однако фармацевтические 17 препараты по настоящему изобретению не ограничиваются вышеуказанными формами. Для получения указанных фармацевтических препаратов можно использовать фармацевтические добавки, известные в этой области, например,солюбилизаторы, модификаторы рН, стабилизаторы и тому подобные. Доза лекарственного средства по настоящему изобретению конкретно не ограничена и должна быть определена с учетом типа и количества остатка лекарственного соединения, вводимого в лекарственный комплекс по настоящему изобретению, состояния нуждающегося субъекта, серьезности заболевания и подобных факторов. Например, лекарственный комплекс по настоящему изобретению, содержащий примерно 6 мас.% остатка противоопухолевого средства, описанного в пункте 2 нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Hei) 6-87746/1994, можно вводить парентерально в количестве примерно 1-500 мг/м 2, предпочтительно, 10-100 мг/м 2 поверхности тела один раз в день, и курс лечения желательно повторять через каждые 3-4 недели. Примеры Настоящее изобретение более подробно иллюстрируется нижеследующими конкретными примерами; однако приводимые примеры не ограничивают объем изобретения. В примерах"A-NH-" обозначает остаток лекарственного соединения с лактоновым кольцом, который аналогичен описанному в пункте 2 нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Hei) 6-87746/1994 (в примерах он иногда определяется как "DX-8951"), и лекарственное соединение с замкнутым лактоновым кольцом выражено формулой A-NH2. Пример включает группу формулы A-NH-, указанную на приведенной выше схеме, в которой образовано лактоновое кольцо. Кроме того, A'-NH- показывает,что лактоновое кольцо остатка лекарственного соединения формулы A-NH- является замкнутым или разомкнутым кольцом либо их смесью,-DXR обозначает остаток, полученный из доксорубицина, и -D51-7059 обозначает остаток,полученный из производного таксиола, приведенного в примере 55. В приведенных примерах за исключением особо оговоренных случаев степень карбоксиметилирования в карбоксиметилдекстрановом полиспирте (степень замещения карбоксиметильной группой на один составной остаток сахарида) определяют следующим образом: натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта превращают в свободную кислоту,полученную кислоту растворяют в 0,1 н. водном растворе гидроксида натрия и титруют 0,1 н. раствором хлористо-водородной кислоты. Водный раствор натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта вводят в колонку BioRad AG 50W-x 2 (Н+ форма), вытекающую жидкость лиофилизируют и используют в качестве образца. Указанный образец растворяют в за 001550 18 данном избытке 0,1 н. водного раствора гидроксида натрия и титруют 0,1 н. раствором хлористо-водородной кислоты, используя в качестве индикатора фенолфталеин. Степень карбоксиметилирования высчитывают по следующему уравнению: степень карбоксиметилирования = 13,4(a-b)/[s-5,8(a-b)], где "s" означает массу используемого образца (мг), "а" означает заданный избыток 0,1 н. водного раствора гидроксида натрия (мл) и "b" означает объем 0,1 н. раствора хлористо-водородной кислоты, израсходованного на титрование (мл). Количество введенного лекарственного средства (мас.%) определяют посредством абсорбционного спектроскопического анализа при типичных значениях поглощения данного лекарственного соединенияBoc-Gly-Gly-Phe-Gly (600 мг) и Nгидроксисукцинимид (160 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (20 мл), охлаждают до 4 С и добавляют N, N'-дициклогексилкарбодиимид (280 мг). К полученному раствору добавляют раствор лекарственного соединения,описанного в п.2 нерассмотренной публикации патента Японии (KOKAI)(Неi) 6-87746/1994N,N-диметилформамиде (30 мл) и перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (10:1), содержащий 0,5% уксусной кислоты), что дает целевое соединение (1, 0 г). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8. 40 (d, 1H, J = 8. 3(280 мг). К полученному раствору добавляют раствор DX-8951 (600 мг) и триэтиламина (0,16 мл) в N,N-диметилформамиде (30 мл) и перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (10:1), содержащий 0,5% уксусной кислоты), что дает целевое соединение (700 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.57 (d, 1 Н, J = 7.8Boc-Gly-Gly-Gly-Gly (120 мг) и N-гидроксисукцинимид (39 мг) растворяют в N,Nдиметилформамиде (20 мл), охлаждают до 4 С и добавляют N,N'-дициклогексилкарбодиимид (70 мг). К полученному раствору добавляют раствор DX-8951 (150 мг) и триэтиламина (0,039 мл) в N,N-диметилформамиде (10 мл) и перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (10:1, что дает целевое соединение (100 мг). 1DX-8951) (79 мг) растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (30 мл) и дважды с этанолом (30 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (80 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.59-8.61 (m, 1H),8.50 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 8.21-8.27 (m, 2H), 7.918.01 (br, 3H), 7.81 (d, 1H, J = 11.2 Hz), 7.32 (s,1H), 6.50-6.52 (br, 1H) , 5.57-5.59 (m, 1H), 5.43 (s,2H), 5.23 (s, 2H), 3.80-3.82 (m, 3H), 3.70-3.75 (m,3H), 3.15-3.25 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.05-2.25 (m,1H), 1.86-1.88 (m, 2H), 0.88 (t, 3H, J = 7.35 Hz). Пример 5. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстран Т 2000 (10 г, Pharmacia, средняя молекулярная масса: 2000000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера (рН 5,5, 1000 мл) и добавляют водный раствор (1000 мл) перйодата натрия (33,0 г). Смесь перемешивают в течение 10 дней при температуре 4 С в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (7,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют борогидрид натрия (14 г), растворяют его и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и, охлаждая льдом, доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтрBiomax-30 (микропористый), удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию. Полимерную фракцию лиофилизируют с получением декстранового полиспирта. Низкомолекулярную фракцию обрабатывают декстрановым полиспиртом при рН 3,0 в течение одного часа и отфильтровывают через мембранный фильтр Biomax-50, затем полимерную фракцию отфильтровывают через мембранный фильтр Biomax100 и полученный продукт лиофилизируют, что дает очищенный декстрановый полиспирт (2,0 г). Молекулярная масса указанного вещества равна 220000 (гель-фильтрация, декстрановый эталон). Очищенный декстрановый полиспирт (1,8 г) добавляют к раствору гидроксида натрия(10,5 г) в воде (45 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом 21 раствору добавляют монохлоруксусную кислоту(15 г), растворяют ее и оставляют смесь на 20 часов для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и фильтруют через мембранный ультрафильтр Biomax-10, удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию. Полимерную фракцию лиофилизуют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (1,8 г). Молекулярная масса этого вещества равна 330000 (гель-фильтрация, декстрановый эталон), и степень карбоксиметилирования составляет 0,8. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (300 мг) растворяют в воде,вводят в колонку Bio-Rad AG50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) (1,5 х 8,6 см) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (0,5 мл) и лиофилизируют, что дает триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (380 мг) . Отдельные порции натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (по 300 мг каждая) обрабатывают в вышеописанной колонке с получением триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (380 мг, 400 мг). Пример 6. Синтез натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (0,15 г), полученную в примере 5, добавляют к раствору гидроксида натрия(1,05 г) в воде (4,5 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту(1,5 г), растворяют ее и полученную смесь оставляют на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой, вводят по каплям в 90 мл метанола и добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (0,15 мл). Полученный осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин), промывают метанолом, растворяют в воде (5 мл) и добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (0,15 мл). Водный раствор фильтруют через микропористый фильтр (0,45 мкм), фильтрат добавляют по каплям к 35 мл этанола и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают этанолом, растворяют в воде и диализируют очищенной водой через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр(0,22 мкм) и лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (0,18 г). Степень карбоксиметилирования этого вещества на один остаток сахарида составляет 1,2 (алкалиметрия) . Пример 7. Синтез натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Очищенный декстрановый полиспирт (0,2 г), полученный в примере 5, добавляют к рас 001550 22 твору гидроксида натрия (0,84 г) в воде (6 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (1,2 г), растворяют ее и оставляют смесь на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой, вводят по каплям в 120 мл метанола и добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (0,2 мл). Полученный осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин), промывают метанолом, растворяют в воде (5 мл) и добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (0,2 мл). Водный раствор фильтруют через микропористый фильтр (0,45 мкм), фильтрат по каплям добавляют к 35 мл этанола и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают этанолом, растворяют в воде и диализируют очищенной водой через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (0,20 г). Степень карбоксиметилирования этого вещества на один остаток сахарида составляет 0,4 (алкалиметрия). Пример 8. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Gly-Phe-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 5 (380 мг, степень карбоксиметилирования 0,8), растворяют в N,N-диметилформамиде (30 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Gly-Phe)-NH-A (A-NH2DX-8951) (49 мг) в N,N-диметилформамиде (5 мл),триэтиламин(0,017 мл) и 1 этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидроксихинолин (380 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 10 с помощью 1 М водного раствора гидроксида натрия и 5 мл порции смеси по каплям добавляют к 25 мл этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (1 мл) и диэтиловый эфир (5 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Полученный осадок растворяют в воде и диализируют очищенной водой через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют. Сырой продукт растворяют в воде (30 мл), доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия и в течение одного часа выдерживают при температуре 37 С. Обработанный раствор анализируют, как описано выше, после чего раствор внутреннего диализата фильтруют 23 через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения(289 мг) . Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии (колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0,0,25 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 1 и фиг. 2. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,3% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 9. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Целевое соединение (300 мг) синтезируют аналогично способу, описанному в примере 8,для чего соль трифторуксусной кислоты 3'-N(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A, полученную путем удаления группы Воc из 3'-N-(Boc-Gly-Gly-PheGly)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (50 мг), вводят так же, как в примере 4, в триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта(380 мг), полученную в примере 5. Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии (колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 0,19 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 3 и фиг. 4. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,3% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 10. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Gly-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Целевое соединение (190 мг) синтезируют аналогично способу, описанному в примере 8,для чего соль трифторуксусной кислоты 3'-N(Gly-Gly-Gly-Gly)-NH-A, полученную путем удаления группы Воc из 3'-N-(Boc-Gly-Gly-GlyGly)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (41 мг) , вводят так же, как в примере 4, в триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта(380 мг), полученную в примере 5. Ультрафиолетовый спектр поглощения указанного соединения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 0,34 мг/мл) показан на фиг. 5. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,3% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трисбуфера (рН 9,0). 24 Пример 11. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей вызывали образование опухолиBALB/c (в возрасте 7 недель) (7 мышей в группе) подкожно трансплантировали в правую паховую область клетки фибросаркомы мышейMeth А в количестве 1 х 106. Начиная с 7-го дня в хвостовую вену мышей, пораженных опухолью Meth A, через каждые 4 дня четырежды делали инъекции лекарственного комплекса по примеру 9, растворенного в дистиллированной воде. На 21-ый день после трансплантации опухолевых клеток образовавшиеся опухоли иссекали и взвешивали для определения степени ингибирования роста опухоли по следующему уравнению: степень ингибирования роста опухоли (%) = [1-(средняя масса опухоли в группе,получавшей испытуемое соединение/средняя масса опухоли в контрольной группе)]х 100. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по настоящему изобретению, полученный в примере 9, оказывает значительно более сильное противоопухолевое действие по сравнению с лекарственным соединением, используемым отдельно без спейсера и производного полисахарида, и не является токсичнымH2N-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A (A-NH2=DX-8951),полученного путем удаления группы Воc из соединения по примеру 1 аналогично способу по примеру 4), оказались неэффективными. Таблица 2 Степень ингибирования Лекарственное соединение,7,5 х 4 76 используемое отдельно 1,875 х 4 46 0,9375 х 4 36 94 Соединение по примеру 9 1,41) х 4 59 0,71) х 4 1) 41 0,35 х 4 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Испытуемое соединение Пример 12. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей (6 мышей в группе) вызывали образование опухоли Meth А аналогично примеру 11 и противоопухолевое действие используемого отдельно лекарственного соединения сравнивали с действием лекарственных комплексов по примерам 8 и 9 при однократном введении на 7-ой день после трансплантации опухолевых клеток. Таким образом были получены нижеследующие результаты противоопухолевого действия: (производное полисахарида)-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A'(производное полисахарида)-Gly-Gly-Gly-Phe-NH-A'используемое отдельно лекарственное соедине 25 ние. Соединение, в котором остаток лекарственного соединения связан с карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта по примеру 5 без спейсера (количество введенного остатка лекарственного соединения равно 6,2 мас.%), оказалось неэффективным. Таблица 3 Степень Испытуемое соединение Доза (мг/кг) ингибирования% Лекарственное соединение,60 77 используемое отдельно 20 59 85 Соединение по примеру 8 101 51) 76 98 Соединение по примеру 9 51) 2,51) 87 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Пример 13. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстран Т 500 (10 г, Pharmacia, молекулярная масса 500000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера (рН 5,5, 1000 мл) и добавляют водный раствор (1000 мл) перйодата натрия (33 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (7,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (14 г),растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 5,5 уксусной кислотой,перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия, что дает раствор 1. Отдельно выполняют вторую серию вышеописанных процедур, используя в качестве исходного вещества декстран Т 500 (10 г, Pharmacia, молекулярная масса 500000), что дает раствор 2. Далее выполняют еще две серии вышеописанных процедур, используя в качестве исходного вещества декстран Т 250 (по 10 г в каждой серии, Pharmacia, молекулярная масса 250000), что дает раствор 3 и раствор 4. Растворы 1-4 объединяют и фильтруют через мембранный ультрафильтр Biomax-50, удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию. Полимерную фракцию лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (25 г). Молекулярная масса этого вещества равна 163000 (гельфильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (11 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (46,2 г) в воде(330 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (66 г), растворяют ее и оставляют смесь на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 9 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-30. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с полу 001550 26 чением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (13 г). Молекулярная масса этого вещества равна 228000 (гель-фильтрация,пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,4. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (600 мг) растворяют в воде,вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) (диаметр 44 мм, длина 210 мм) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (0,93 мл) и лиофилизируют с получением целевого соединения (690 мг). Пример 14. Синтез соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A(ANH2=DX-8951). Соединение 3'-N-(Boc-Gly-Gly-Phe-Gly)NH-A (A-NH2=DX-8951) (79 мг), полученное в примере 1, растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (30 мл) и дважды с этанолом (30 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (80 мг). 1(m, 1H) , 2.40 (s, 3H), 2.05-2.25 (m, 1H) , 1.841.92 (m, 2H) , 0.88 (t, 3H, J = 7.35 Hz). Пример 15. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 13,(400 мг) превращают в соль триэтиламмония(30 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (ANH2=DX-8951), полученной в примере 14, (62 мг) в N,N-диметилформамиде (5 мл), триэтиламин (0,02 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидро-ксихинолин (470 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием. Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия и диализируют очищенной водой через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор 27 внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (600 мг) . Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии(колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 0,1 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 6 и фиг. 7. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,8% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 16. Синтез соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Gly-Phe)-NH-A(ANH2=DX-8951). Соединение 3'-N-(Boc-Gly-Gly-Gly-Phe)NH-A (A-NH2=DX-8951) (79 мг), полученное в примере 2, растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (30 мл) и дважды с этанолом (30 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (80 мг). 1Hz), 4.57-4.59 (m, 1H), 3.57-3.71 (m, 6H), 3.153.25 (m, 2H), 3.00-3.02 (m, 1H), 2.80-2.90 (m,1H), 2.50 (s, 3H), 2.05-2.25 (m, 1H) , 1.86-2.00 (m,2H), 0.88 (t, 3H, J = 7.35 Hz). Пример 17. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Gly-Phe-NH-A' (ANH2=DX-8951). Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 13, (1,0 г) превращают в соль триэтиламмония (1,2 г) и растворяют в N,N-диметилформамиде (90 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'N-(Gly-Gly-Gly-Phe)-NH-A (A-NH2=DX-8951),полученной в примере 16, (158 мг) в N,Nдиметилформамиде (15 мл), триэтиламин (0,05 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (1,2 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием. Остаток растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водно 001550 28 го раствора гидроксида натрия и диализируют против очищенной воды через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр(0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (1,4 г). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,2% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трисбуфера (рН 9,0). Пример 18. Синтез Boc-Gly-Phe-Leu-OH.H-Gly-Phe-Leu-OH (3,0 г) добавляют к 50% водному раствору диоксана (48 мл) и охлаждают льдом. К полученному раствору добавляют 1 н. водный раствор гидроксида натрия (9,45 мл) и диоксана (24 мл), содержащий (Вос)H2O (2,27 г), и перемешивают смесь в течение ночи. К реакционной смеси добавляют 1 н. раствор хлористоводородной кислоты (9,45 мл) и выпаривают растворитель. Полученный остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (5:1, что дает целевое соединение (2,5 г). Пример 19. Синтез Boc-Gly-Phe-Leu-GlyOBzl.Boc-Gly-Phe-Leu-OH, полученный в примере 18, (2,4 г) и N-гидроксисукцинимид (656 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (50 мл), охлаждают до 4 С, добавляют N,N'дициклогексилкарбодиимид (1,17 г) и перемешивают смесь в течение 2 ч. К полученному раствору добавляют раствор тозилата H-GlyOBzl (1,9 г) и триэтиламина (0,79 мл) в N,Nдиметилформамиде (40 мл) и перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (50:1, что дает целевое соединение (2,0 г). 1Boc-Gly-Phe-Leu-OBzl (1,7 г), полученный в примере 19, растворяют в смешанном растворе этилацетата (30 мл) и метанола (30 мл), добавляют 5% Pd-C (1,5 г) и производят каталитическое восстановление. Реакционную смесь 29 фильтруют и фильтрат упаривают до сухого состояния при пониженном давлении, что дает целевое соединение (1,15 г). Пример 21. Синтез 3'-N-(Boc-Gly-Phe-LeuGly)-NH-A (A-NH2DX-8955).(58 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (5 мл). Полученный раствор охлаждают при температуре 4 С, добавляют N,N-дициклогексилкарбодиимид (104 мг) и растворяют. Затем к этому раствору добавляют раствор метансульфоната DX-8951 (224 мг) и триэтиламина (0,059 мл) в N,N-диметилформамиде (5 мл) и перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (10:1), содержащий 0,5% уксусной кислоты), что дает целевое соединение (200 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.35 (d, 1H, J = 7.8(d, 3H, J = 6.4 Hz), 0.82 (d, 3H, J = 6.4 Hz). Пример 22. Синтез соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Phe-Leu-Gly)-NH-A(ANH2=DX-8951). Соединение 3'-N-(Boc-Gly-Phe-Leu-Gly)NH-A (A-NH2=DX-8951) (97 мг), полученное в примере 21, растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (30 мл) и дважды с этанолом (30 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (95 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.57 (d, 1 Н, J = 8.3 30 1H), 1.45 (t, 2H, J = 6.0 Hz), 1.35 (s, 9H), 0.88 (t,3H, J = 7.4 Hz), 0.85 (d, 3H, J = 6.4 Hz), 0.80 (d,3H, J = 6.4 Hz). Пример 23. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Phe-Leu-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 13, (690 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (50 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Phe-Leu-Gly)NH-A (A-NH2=DX-8951) (95 мг), полученной в примере 22, в N,N-диметилформамиде (10 мл),триэтиламин (0,03 мл) и 1-этоксикарбонил-2 этокси-1,2-дигидроксихинолин (690 мг) и перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием. Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия и диализируют против очищенной воды через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и фильтрат лиофилизируют с получением целевого соединения (600 мг). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 4,8% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 24. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстран Т 500 (50 г, Phannacia, молекулярная масса 500000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера (рН 5,5, 5000 мл) и добавляют водный раствор (5000 мл) перйодата натрия (165,0 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль(35,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (70 г),растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой,перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтр Biomax-50, удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию. Полимерную фракцию лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (27,1 г). Молекулярная 31 масса этого вещества равна 140000 (гельфильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (5 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (21 г) в воде(150 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (30 г), растворяют ее и оставляют смесь на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (5,6 г). Молекулярная масса этого вещества равна 263000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,4. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,0 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) (диаметр 44 мм, длина 210 мм) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (4 мл) и лиофилизируют с получением целевого соединения (2,2 г). Пример 25. Синтез триметиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (1,0 г), полученную в примере 24, растворяют в воде, вводят в колонку Bio-RadAG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма Me3N) и элюируют водой. Вытекающую жидкость лиофилизируют с получением целевого соединения(950 мг). Пример 26. Синтез гидрохлорида 3'-N(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX-8951). В соответствии со способом, описанным в примере 14, соль трифторуксусной кислоты 3'N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-А, полученную из 3'-N(Boc-Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX-8951),(400 мг) растворяют в смеси воды и метанола(1:4), вводят в колонку Bio-Rad AG 1-X8 (200400 меш, Сl-1 форма) (1,5 см х 8,6 см) и элюируют вышеуказанным растворителем. Вытекающую жидкость концентрируют и лиофилизируют с получением целевого соединения (310 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.53 (d, 1H, J = 8.5 32 Триметиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 25, (0,1 г) растворяют в N,Nдиметилформамиде (6 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор гидрохлорида 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (АNH2=DX-8951) (24 мг), полученного в примере 26, в N,N-диметилформамиде (10 мл), триэтиламин (5 мкл) и 1-этокси-карбонил-2-этокси 1,2-дигидроксихинолин (0,1 г) и оставляют перемешиваемую смесь на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия(2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 минут). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-30. Раствор,не прошедший через мембранный фильтр,фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (90 мг). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 11% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера(рН 9,0). Пример 28. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триметиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 25, (0,1 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (6 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор гидрохлорида 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX-8951)(36 мг), полученного в примере 26, в N,Nдиметилформамиде (10 мл), триэтиламин (8 мкл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (0,1 г) и оставляют перемешиваемую смесь на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 12 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-30. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения(80 мг). Полученное соединение растворяют в 33 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии (колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0,36 мкг/мл) приведены соответственно на фиг. 8 и 9. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 15% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 29. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Gly-Phe-NH-A' (ANH2=DX-8951). Декстран Т 250 (20 г, EXTRASYNTHESE,средняя молекулярная масса 250000) растворяют в 0,1 М растворе буфера с уксусной кислотой(2000 мл) перйодата натрия (66,0 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (28 г),растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и, охлаждая льдом, доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтр Biomax-30, удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию, что дает задержанный раствор 1, не прошедший через фильтр. Отдельно декстран Т 250 (50 г, EXTRASYNTHESE, средняя молекулярная масса 250000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера(5000 мл) перйодата натрия (165 г) . Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (35,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (70 г),растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и, охлаждая льдом, доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Водный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтрBiomax-30, удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию, что дает задержанный раствор 2, не прошедший через фильтр. Задержанные растворы 1 и 2 объединяют, фильтруют 34 через мембранный ультрафильтр Biomax-30,удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию из фракции, не прошедшей через мембранный фильтр Biomax-50, и лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (25,7 г). Молекулярная масса этого вещества равна 47000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (5 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (35 г), в воде (150 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (50 г), растворяют ее и оставляют смесь на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (7,2 г). Молекулярная масса этого вещества равна 127000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,8. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,2 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) (диаметр 44 мм, длина 210 мм) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (4 мл) и лиофилизируют с получением триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,69 г). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,67 г) растворяют вN,N-диметилформамиде (200 мл). К этому раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-GlyPhe)-NH-A, полученной аналогично примеру 16 путем удаления группы Вос из 3'-N-(Boc-GlyGly-Gly-Phe)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (350 мг) по примеру 2, и триэтиламина (0,116 мл) в N,Nдиметилформамиде (10 мл) и раствор 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолина(2,67 г) в N,N-диметилформамиде (10 мл), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (100 мл), затем 8 мл порции смеси по каплям добавляют к 30 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (1 мл) и диэтиловый эфир (5 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают ацетоном, растворяют в воде, добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (10 мл), доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия и выдерживают при температуре 37 С в течение 1 ч. Обработанный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-10. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через Millipore микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с по 35 лучением целевого соединения (2,30 г). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии(колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 0,20 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 10 и 11. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,8% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 30. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. К раствору (2000 мл) декстрана Т 10 (20 г,Pharmacia, средняя молекулярная масса 10000) в 0,1 М растворе буфера с уксусной кислотой (рН 5,5) добавляют водный раствор (2000 мл) перйодата натрия (66,0 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 7,5, добавляя 8 М водный раствор гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и, охлаждая льдом, доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтрBiomax-5 (миллипоровый), удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию, и раствор, не прошедший через указанный мембранный фильтр, фильтруют через мембранный фильтрBiomax-30. Фильтрат лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (8,0 г). Молекулярная масса этого вещества равна 13000(гель-фильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (3,7 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (25,9 г) в воде(111 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (37 г), растворяют ее и оставляют смесь на 20 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (6,2 г). Молекулярная масса этого вещества равна 37000 (гель-фильтрация,пуллулановый эталон, и степень карбоксиметилирования составляет 0,9. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (6,0 г) растворяют в воде, вво 001550 36 дят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (9,3 мл) и лиофилизируют с получением целевого соединения (7,2 г). Пример 31. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстрановый полиспирт (3,9 г), полученный в примере 30, добавляют к раствору гидроксида натрия (16,3 г) в воде (117 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (23,4 г), растворяют ее и оставляют смесь на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (5,0 г). Молекулярная масса этого вещества равна 28000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,5. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (4,8 мг) превращают в соль триэтиламмония аналогично способу,описанному в примере 30, что дает целевое соединение (5,6 г). Пример 32. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Водный раствор (2000 мл) перйодата натрия (66,0 г) добавляют к раствору (2000 мл) декстрана 4 (20 г, Funakoshi, средняя молекулярная масса 4000-6000) в 0,1 М водном растворе буфера с уксусной кислотой (рН 5,5). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль (14,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом реакционную смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (28 г),растворяют его и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и, охлаждая льдом, доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор фильтруют через мембранный ультрафильтр Biomax-3 (миллипоровый), удаляя таким образом низкомолекулярную фракцию. Фильтрат лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (6,0 г). Молекулярная масса этого вещества равна 9000 (гель-фильтрация,пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (2,7 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (18,9 г) в воде (81 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту(27 г), растворяют ее и оставляют смесь на 20 часов для взаимодействия при комнатной тем 37 пературе. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (4,2 г). Молекулярная масса этого вещества равна 20000 (гельфильтрация, пуллулановый эталон, и степень карбоксиметилирования составляет 0,9. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (4,0 г) превращают в соль триэтиламмония аналогично способу, описанному в примере 30, что дает целевое соединение (4,8 г). Пример 33. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстрановый полиспирт (2,7 г), полученный в примере 32, добавляют к раствору гидроксида натрия (11,3 г) в воде (81 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (16,2 г), растворяют ее и оставляют смесь на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают,фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5. Раствор, не прошедший через фильтр,лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,7 г). Молекулярная масса этого вещества равна 16000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,5. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,7 г) превращают в соль триэтиламмония аналогично способу, описанному в примере 30, что дает целевое соединение (3,1 г). Пример 34. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 30, (1,5 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (90 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламина(0,07 мл) и соль трифторуксусной кислоты 3'-N(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (210 мг) в N,N-диметилформамиде (40 мл) и 1 этоксикарбонил-2-этокси-1,2-гидироксихинолин(1,5 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-3. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через милли 001550 38 поровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (1,3 г). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии(колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 65 мкг/мл) приведены соответственно на фиг. 12 и фиг. 13. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 6,4% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 35. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 31, (1,2 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (90 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламина(0,056 мл) и соли трифторуксусной кислоты 3'N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A(168 мг) в N,N-диметилформамиде (30 мл) и 1 этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (1,2 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-3. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения(1,0 г). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 4,8% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 36. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 32, (1,2 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (90 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламина (0,056 мл) и соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX8951) (168 мг) в N,N-диметилформамиде (30 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (1,2 г), после чего перемешиваемую 39 смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-3. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения(1,0 г). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,9% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 37. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 33, (1,5 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (90 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламина(0,07 мл) и соли трифторуксусной кислоты 3'-N(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (210 мг) в N,N-диметилформамиде (40 мл) и 1 этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (1,5 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-3. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения(1,3 г). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 4,6% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 38. Синтез Boc-Gly-Gly-Phe-GlyNH-A (A-NH2=DW-8286). 40 мг). К полученному раствору добавляют раствор (6 мл) гидрохлорида соединения формулы(0,01 мл) в N,N-диметилформамиде, после чего перемешиваемую смесь оставляют на 16 ч для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматогра-фией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (10:1), содержащий 0,5% уксусной кислоты), что дает целевое соединение (27 мг). 1H-ЯМР (CDCl3) : 8.10-8.20 (br, 1H), 7.958.05 (br, 1H), 7.70-7.80 (br, 2H), 7.50-7.60 (br,1H), 7.40-7.50 (br, 1H), 7.10-7.25 (m, 5H), 7.057.15 (br, 1H), 5.85-5.95 (br, 1H), 5.50-5.60 (br,1H), 5.40-5.50 (m, 1H), 5.25-5.35 (m, 1H), 5.055.15 (m, 1H), 4.90-5.00 (m, 1H), 4.70-4.80 (br,1H), 4.10-4.25 (br, 2H), 3.60-3.90 (m, 4H), 3.103.40 (m, 3H), 2.95-3.05 (br, 1H), 2.15-2.30 (br,1H), 1.75-1.90 (br, 2H), 1.39 (s, 9H), 0.80-1.00 (m,3H). Пример 39. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-NH-A' (ANH2=DW-8286). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (175 мг), полученную в примере 24, растворяют в N,N-диметилформамиде (20 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)NH-A (A-NH2=DW-8286) (29 мг), полученной из 3'-N-(Boc-Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (27 мг) по примеру 38 путем удаления группы Воc аналогично примеру 4, и триэтиламина (9 мкл) в N,Nдиметилформамиде (5 мл) и 1-этоксикарбонил 2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (175 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и,охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-30. Раствор, не прошедший через мембранный 41 фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр(0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (135 мг). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гельпроникающей хроматографии (колонка: гельTSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0, 99 мкг/мл) приведены соответственно на фиг. 14 и 15. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 6,1% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 40. Синтез 3'-N-(Boc-Gly-Gly-PheGly)-NH-A (A-NH2=DW-8089).Boc-Gly-Gly-Phe-Gly (163 мг) и Nгидроксисукцинимид (45 мг) растворяют в N,Nдиметилформамиде (10 мл), охлаждают до 4 С и добавляют N,N'-дициклогексилкарбодиимид (79 мг). К полученному раствору добавляют раствор (30 мл) тозилата соединения формулыN,N-диметилформамиде, после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (94:6), содержащий 0,5% уксусной кислоты), что дает целевое соединение (100 мг). 1 42 Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (1,6 г), полученную в примере 24, растворяют в N,N-диметилформамиде (60 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A(A-NH2=DW-8089) , полученной из 3'-N-(BocGly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (200 мг) по примеру 40 путем удаления группы Воc аналогично примеру 4, и триэтиламина (0,07 мл) в N,Nдиметилформамиде (20 мл) и 1-этоксикарбонил 2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (1,6 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,5 мл) и диэтиловый эфир (25 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (2500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают этанолом, растворяют в воде, добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (20 мл) и доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-10. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильруют через микропористый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (1,20 г). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии (колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh,растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0 26 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 16 и 17. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,0% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 42. Синтез Trt-Gly-Gly-Phe-GlyOH.Pd-C (100 мг) и формиат аммония (200 мг) добавляют к N,N-диметилформамиду (5 мл) и перемешивают в течение трех часов. Реакционную смесь фильтруют, фильтрат упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (8:1, что дает целевое соединениеTrt-Gly-Gly-Phe-Gly-OH (100 мг) и Nгидроксисукцинимид (22 мг) растворяют в N,Nдиметилформамиде (4 мл) и к смеси, охлаждаемой льдом и перемешиваемой при температуре 4 С в течение 2 ч, добавляют N,N'-дициклогексилкарбодиимид (40 мг). К полученному раствору добавляют раствор N-метилморфолина(DXR) (92 мг) в N,N-диметилформамиде (20 мл) и перемешивают смесь при температуре 4 С в течение 16 ч. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (20:1. Полученное соединение растворяют в 75% уксусной кислоте (1 мл) и перемешивают в течение 1 ч. Затем добавляют воду(20 мл), выпавшую в осадок твердую массу отфильтровывают, фильтрат лиофилизируют и полученный порошок растворяют в воде (5 мл). Этот раствор пропускают через колонку AG1X8 (Сl- форма) и элюируют водой, после чего вытекающую жидкость промывают дихлорметаном и водный слой лиофилизируют, что дает целевое соединение (40 мг). 1 Н-ЯМР (CD3OD) : 7.95 (d, 1 Н, J = 7.3 Hz),7.82 (t, 1H, J = 7.8 Hz), 7.54 (d, 1H, J = 8.3 Hz),7.16-7.26 (m, 5H), 5.43 (d, 1H, J = 3.4 Hz), 5.14Hz), 4.30 (q, 1H, J = 6.8 Hz), 4.14-4.18 (m, 1H),4.03 (d, 1H, J = 16.6 Hz), 4.02 (s, 3H) , 3.86 (d, 1H,J = 18.5 Hz), 3.83 (d, 1H, J = 17.1 Hz), 3.75 (d, 1H,J = 16.1 Hz), 3.73 (d, 1H, J = 16.1 Hz), 3.62 (br,1H), 3.58 (d, 1H, J = 16.6 Hz), 3.10-3.15 (m, 2H) 3.00 (d, 1H, J = 18.6 Hz), 2.94 (dd, 1H, J = 14.2,8.8Hz), 2.38 (d, 1H, J = 14.2 Hz), 2.18 (dd, 1H, J = 14.2, 4.4Hz), 1.94-2.00 (m, 1H) , 1.71 (dd, 1H, J = 12.7, 4.4Hz), 1.28 (d, 3H, J = 6.3 Hz). Пример 44. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-DXR. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (1,5 г), полученную в примере 24, превращают в соль триметиламмония (1,2 г) аналогично способу, описанному в примере 25,и 400 мг указанной соли растворяют в N,Nдиметилформамиде (24 мл). К полученному раствору последовательно добавляют гидрохлорид 3'-N-(Gly-Gly-Phe-Gly)-DXR (76 мг) в N,Nдиметилформамиде (24 мл), триэтиламин (24 мкл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидроксихинолин (400 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия(2,5 мл) и диэтиловый эфир (20 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и обессоливают,фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-30. Раствор, не прошедший через мембран 001550 44 бранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (40 мг). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии(колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 7,4, 36 мкл) приведены соответственно на фиг. 18 и 19. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 6,0% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 480 нм в физиологическом растворе с фосфатным буфером(PBS) (рН 7,4). Пример 45. Синтез триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстран Т 150 (20 г, Pharmacia, средняя молекулярная масса 150000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера (рН 5,5, 2000 мл) и добавляют водный раствор (2000 мл) перйодата натрия (66,0 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль(14,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Охлаждаемую льдом смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (28 г), растворяют его и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают льдом, доводят до рН 5,5 уксусной кислотой и перемешивают при температуре 4 С в течение 1 ч. Охлаждаемую льдом смесь доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор концентрируют до 500 мл,фильтруя через мембранный ультрафильтрBiomax-5 (миллипоровый), что дает раствор 1. Отдельно выполняют вторую серию вышеописанных процедур, используя в качестве исходного вещества декстран Т 110 (20 г), что дает раствор 2. Растворы 1 и 2 объединяют, доводят до рН 3,0 и инкубируют при температуре 40 С в течение 4 ч, затем доводят до рН 7 с получением раствора, содержащего декстрановый полиспирт с более низкой молекулярной массой. Этот раствор фильтруют через мембранный фильтр Biomax-30, обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5, и лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (4,6 г). Молекулярная масса этого вещества равна 17000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (2,5 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (17,5 г) в воде (75 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (25 г), растворяют ее и оставляют смесь на 20 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную 45 смесь доводят до рН 9 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-5. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (4,0 г). Молекулярная масса этого вещества равна 45000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,9. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (3,7 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (5,8 мл) и лиофилизируют с получением целевого соединения (4,4 г). Пример 46. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Gly-Phe-NH-A' (ANH2=DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 45, (4,4 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (300 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламина (0,19 мл) и соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Gly-Gly-Phe)-NH-A(ANH2=DX-8951) (580 мг) в N,N-диметилформамиде (45 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидроксихинолин (4,4 г), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь доводят до рН 10 с помощью 1 М водного раствора гидроксида натрия и 5 мл порции смеси по каплям добавляют к 25 мл порциям этанола. К смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (1 мл) и диэтиловый эфир (5 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием(3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в воде и диализируют против очищенной водой через мембрану для диализа (Spectrapore 1, предельная молекулярная масса 6000-8000). Раствор внутреннего диализата фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (3,4 г). Содержание остатка лекарственного соединения в этом соединении составляет 4,6% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 47. Синтез -метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-GlyPhe-NH-A' (A-NH2=DX-8951). Декстрановый полиспирт (2 г), полученный в примере 45, добавляют к раствору гидроксида натрия (14 г) в воде (60 мл) и растворяют его при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют -бромпропионовую кислоту (19 мл), растворяют ее и оставляют смесь на 18 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь 46 доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли -метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта (2,95 г). Молекулярная масса этого вещества равна 45000 (гельфильтрация, пуллулановый эталон). Степень метилкарбоксиметилирования на один остаток сахарида определяют с помощью карбоксиметилдекстранового полиспирта следующим образом. Водный раствор натриевой соли метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-Х 2 (Н+ форма), вытекающую жидкость лиофилизируют и используют в качестве образца. Этот образец растворяют в заданном избытке 0,1 н водного раствора гидроксида натрия и титруют 0,1 н раствором хлористо-водородной кислоты, используя фенолфталеин в качестве индикатора. Степень -метилкарбоксиметилирования определяют по уравнению: степень -метилкарбоксиметилирования = 13,4(a-b)/[s-7,2(a-b)], где"s" означает количество используемого образца(мг), "а" означает заданный избыток 0,1 н. водного раствора гидроксида натрия (мл) и "b" означает количество 0,1 н. раствора хлористоводородной кислоты, израсходованной на титрование (мл). Степень -метилкарбоксиметилирования, высчитанная по этому методу, равна 0,8. Натриевую соль -метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта (2,2 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-Х 2(200-400 меш, Н+ форма) (диаметр 44 мм, длина 210 мм) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (4 мл) и лиофилизируют с получением триэтиламмониевой соли -метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта (2,69 г). Триэтиламмониевую соль -метилкарбоксиметилдекстранового полиспирта (2,68 г) растворяют в N,N-диметилформамиде (60 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'N-(Gly-Gly-Gly-Phe)-NH-A (A-NH2=DX-8951),полученной аналогично примеру 16 путем удаления группы Воc из 3'-N-(Boc-Gly-Gly-GlyPhe)-NH-A (350 мг) по примеру 2, и триэтиламина (0,116 мл) в N,N-диметилформамиде (10 мл) и раствор 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидроксихинолина (2,68 г) в N,N-диметилформамиде (10 мл), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (40 мл) и 6 мл порции смеси по каплям добавляют к 30 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (1 мл) и диэтиловый эфир (5 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием(3500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают ацетоном, растворяют в воде, добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (10 мл), доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия и выдерживают при температуре 37 С в течение 1 ч. Обработанный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-10. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (2,15 г). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гель-проникающей хроматографии(колонка: гель TSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (0,1 М раствор трис-буфера, рН 9,0,0,21 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 20 и 21. Содержание остатка лекарственного соединения в полученном продукте составляет 5,9% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трис-буфера (рН 9,0). Пример 48 Синтез соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX8951). Смесь соли паратолуолсульфоновой кислоты Phe-Gly-Gly-OBzl (3,06 г), Boc-Gly-OH(1,56 г). Перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре и упаривают до сухого состояния при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана и метанола (98:2 с получением Boc-Gly-Phe-Gly-OBzl (1,93 г). 1Boc-Gly-Phe-Gly-OBzl (1,78 г) растворяют в этилацетате (60 мл) и в течение 24 ч подвергают каталитическому восстановлению в присутствии 5% Pd-C (1,8 г). Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением Boc-Gly-PheGly-OH (1,41 г). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) 5: 8.35 (t, 1 Н, J = 5.6N,N-диметилформамиде (10 мл). К полученному раствору добавляют раствор метансульфонатаN,N-диметилформамиде (50 мл). Смесь охлаждают до 4 С, добавляют N,N-дициклогексилкарбодиимид (268 мг) и, перемешивая, оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метанолеMass (FAB); m/e 797 (M+l). 3'-N-(Boc-Gly-Phe-Gly)-NH-A (A-NH2=DX8951) (100 мг) растворяют в трифторуксусной кислоте (3 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (30 мл) и дважды с этанолом (30 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (80 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.52-8.62 (m, 1H),7.94 (s, 3H), 7.79 (t, 1H, J = 11.1Hz), 7.34 (s, 1H),7.15-7.27 (m, 5H), 6.52 (s, 1H), 5.57-5.61 (m, 1H),5.36-5.46 (m, 2H), 5.24 (s, 2H), 4.66-4.70 (m, 1H),3.69-3.81 (m, 2H), 3.61-3.68 (m, 1H), 3.40-3.47Mass (FAB); m/e 697 (M+l). Пример 49. Синтез соли трифторкусусной кислоты 3'-N-(Phe-Gly)-NH-AN,N-диметилформамиде (10 мл). К полученному раствору добавляют раствор метансульфонатаN,N-диметилформамиде (50 мл). Смесь охлаждают до 4 С, добавляют N,N'-дициклогексилкарбодиимид (494 мг) и, перемешивая, оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состоя 49 ния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метанолеMass (FAB); m/e 741 (M+l). 3'-N-(Boc-Phe-Gly)-NH-A (170 мг) растворяют в трифторуксусной кислоте (4 мл) и оставляют выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (10 мл) и дважды с этанолом (10 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (100 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.88 (t, 1 Н, J = 4.8Mass (FAB); m/e 640 (M+1). Пример 50. Синтез соли трифторуксусной кислоты 3'-N-Gly-NH-A (A-NH2=DX-8951). Метансульфонат DX-8951 (530 мг) и триэтиламин (0,28 мл) растворяют в М,Мдиметилформамиде (10 мл), охлаждают до 4 С и добавляют N-гидроксисукцинимидоэфир BocGly (327 мг). Перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле 50 выстаиваться в течение одного часа. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (10 мл) и дважды с этанолом (10 мл), а затем промывают простым эфиром с получением целевого соединения (70 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.88 (d, 1 Н, J = 8.8.Mass (FAB); m/e 493 (M+l). Пример 51. Синтез триметиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта. Декстран Т 500 (50 г, Pharmacia, молекулярная масса 500000) растворяют в 0,1 М растворе ацетатного буфера (рН 5,5, 5000 мл) и добавляют водный раствор (5000 мл) перйодата натрия (165,0 г). Смесь перемешивают при температуре 4 С в течение десяти дней в защищенном от света месте, добавляют этиленгликоль(35,0 мл) и продолжают перемешивать в течение ночи. Реакционную смесь доводят до рН 7 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Затем добавляют боргидрид натрия (70 г),растворяют его и перемешивают смесь в течение ночи. Полученную смесь охлаждают льдом,доводят до рН 5,5 уксусной кислотой, перемешивают при температуре 4 С в течение одного часа и доводят до рН 7,5 с помощью 8 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор,не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением декстранового полиспирта (20,2 г). Молекулярная масса этого вещества равна 159000 (гель-фильтрация, пуллулановый эталон). Декстрановый полиспирт (7,5 г) добавляют к раствору гидроксида натрия (31,5 г) в воде(225 мл) и растворяют при комнатной температуре. К охлаждаемому льдом раствору добавляют монохлоруксусную кислоту (45 г), растворяют ее и оставляют смесь на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь доводят до рН 8 уксусной кислотой и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор, не прошедший через фильтр, лиофилизируют с получением натриевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта (8,5 г). Молекулярная масса этого вещества равна 274000 (гель-фильтрация,пуллулановый эталон) и степень карбоксиметилирования составляет 0,4. Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (2,0 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-RadAG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма) (диаметр 44 мм, длина 210 мм) и элюируют водой. К вытекающей жидкости добавляют триэтиламин (4 51 мл) и лиофилизируют с получением целевого соединения (2,2 г). Пример 52. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Phe-Gly-NH-A' (А-NН 2= РХ-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 51, (200 мг) растворяют в N,Nдиметилформамиде (7 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(Gly-Phe-Gly)NH-A (A-NH2=DX-8951), полученной в примере 48, (41 мг) в N,N-диметилформамиде (5 мл),триэтиламин (0,014 мл) и 1-этоксикарбонил-2 этокси-1,2-дигидроксихинолин (100 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия(2,0 мл) и диэтиловый эфир (25 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 минут). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор,не прошедший через мембранный фильтр,фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (190 мг). Содержание остатка лекарственного соединения в этом соединении составляет 4,5% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трисбуфера (рН 9,0). Пример 53. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Рhе-Gly-NH-A' (A-NH2=DX8951). Натриевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 24, (2,5 г) растворяют в воде, вводят в колонку Bio-RadAG 50W-X2 (200-400 меш, Н+ форма Et3N) и элюируют водой. Вытекающую жидкость лиофилизируют с получением триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта(2,5 г). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта (200 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (12 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-(PheGly)-NH-A (A-NH2=DX-8951) (42 мг), полученной в примере 49, и триэтиламина (0,016 мл) в(200 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре в защищенном от света месте. К реакционной смеси добавляют воду (300 мл) и фильтруют через мембранный ультрафильтр 52 10000 (Filtron). Раствор, не прошедший через указанный фильтр, доводят до рН 10 с помощью 0,1 н. водного раствора гидроксида натрия, и фильтруют через фильтрующую мембрану (0,16 мкм, Filtron). Фильтрат обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50,затем фильтруют через миллипоровый фильтр(0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (180 мг). Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляют 6,1% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трисбуфера (рН 9,0). Пример 54. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-NH-A' (A-NH2DX-8951). Триэтиламмониевую соль карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученную в примере 51, (370 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (10 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор соли трифторуксусной кислоты 3'-N-Gly-NH-A (ANH2=DX-8951), полученной в примере 50, (57 мг) в N,N-диметилформамиде (3 мл), триэтиламин (0,027 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидроксихинолин (185 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (5 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия(2,0 мл) и диэтиловый эфир (25 мл) и выпавший осадок собирают центрифугированием (3500 об/мин, 8 мин). Осадок растворяют в 0,5 М водном растворе хлорида натрия и, охлаждая льдом, доводят до рН 9 с помощью 0,1 М водного раствора гидроксида натрия. Полученный водный раствор обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор,не прошедший через мембранный фильтр,фильтруют через миллипоровый фильтр (0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (290 мг). Содержание остатка лекарственного соединения в этом соединении составляет 0,5% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 362 нм в 0,1 М растворе трисбуфера (рН 9,0). Пример 55. Синтез карбоксиметилдекстранового полиспирта-Gly-Gly-Phe-Gly-D51-7059.Boc-Gly-Gly-Phe-Gly-OH (200 мг) растворяют в трифторуксусной кислоте (4 мл) и перемешивают в течение 1,5 ч. Растворитель выпаривают и остаток подвергают азеотропной перегонке дважды с метанолом (10 мл) и дважды с этанолом (10 мл), а затем промывают простым эфиром с получением соли трифторуксусной кислоты Gly-Gly-Phe-Gly-OH (225 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.48 (dd, 1H, J = 5.6,5.6Hz), 8.59 (dd, 1H, J = 5.6, 6.4Hz), 8.29 (d, 1H, JJ = 5.6, 16.7 Hz), 3.76-3.79 (m, 2H) , 3.67 (dd, 1H,J = 5.6, 16.7 Hz), 3.56 (s, 2H). Соль трифторуксусной кислоты Gly-GlyPhe-Gly-OH (200 мг) растворяют в воде (10 мл),доводят до рН 9,0 триэтиламином, добавляют раствор 9-флуоренилметил-N-гидроксисукцинимидилкарбоната (200 мг) в ацетонитриле (5 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение четырех часов, поддерживая рН на уровне 8,0-8,5 с помощью триэтиламина. К реакционной смеси добавляют 1,5 н. раствор хлористо-водородной кислоты (50 мл). Выпавший осадок собирают фильтрованием, промывают водой и очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (4:1, что дает Fmoc-Gly-Gly-Phe-GlyOH (151 мг). 1 Н-ЯМР (DMSO-d6) : 8.28-8.32 (m, 1H),8.08-8.12 (m, 1H), 7.85-7.89 (m, 2H), 7.68-7.72[D51-7059: 9,10-О-(2-аминоэтилиден)-13 О-[3-(трет-бутоксикарбониламино)-2-гидрокси 3-фенил]пропаноил-10-деацетил-9-дигидробаккатин III] (20 мг) и N-гидроксисукцинимид (7 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (1 мл). Полученный раствор охлаждают до 4 С и добавляют N,N'-дициклогексилкарбодиимид (9 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (96:4, что дает Fmoc-GlyGly-Phe-Gly-D51-7059 (21 мг). 1Fmoc-Gly-Gly-Phe-Gly-D51-7059 (21 мг) растворяют в дихлорметане (1,8 мл), добавляют пиперазин (0,2 мл) и оставляют смесь на 1 ч для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь очищают хроматографией на колонках из силикагеля (элюент: раствор дихлорметана в метаноле (94:6 с получениемGly-Gly-Phe-Gly-D51-7059, полученный в соответствии с вышеописанным способом, (33 мг) растворяют в N,N-диметилформамиде (0,5 мл). К полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученной в примере 24, (180 мг) в N,N-диметилформамиде (7 мл) и 1-этоксикарбонил-2-этокси 1,2-дигидроксихинолин(180 мг), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Порции реакционной смеси (4 мл) по каплям добавляют к 10 мл порциям этанола. К каждой смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,0 мл) и диэтиловый эфир (25 мл), затем выпавший осадок собирают центрифугированием (2500 об/мин, 8 мин). Осадок промывают этанолом, растворяют в воде, вводят в колонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Na+ форма) (диаметр 15 мм, длина 85 мм) и элюируют водой, что дает раствор 1. Gly-Gly-PheGly-D51-7059 (10 мг) отдельно растворяют вN,N-диметилформамиде (0,5 мл) и к полученному раствору последовательно добавляют раствор триэтиламмониевой соли карбоксиметилдекстранового полиспирта, полученной в примере 24, (60 мг) в N,N-диметилформамиде (5 мл) и раствор 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2 дигидроксихинолина (60 мг) в N,N-диметилформамиде (0,25 мл), после чего перемешиваемую смесь оставляют на ночь для взаимодействия при комнатной температуре. Реакционную смесь по каплям добавляют к 10 мл этанола и к полученной смеси добавляют 3 М водный раствор хлорида натрия (2,0 мл) и диэтиловый эфир (25 мл). Выпавший осадок собирают центрифугированием (2500 об/мин, 8 мин), промывают этанолом, растворяют в воде, вводят в ко 55 лонку Bio-Rad AG 50W-X2 (200-400 меш, Na+ форма) (диаметр 15 мм, длина 85 мм) и элюируют водой, что дает раствор 2. Раствор 1 и раствор 2 объединяют и обессоливают, фильтруя через мембранный ультрафильтр Biomax-50. Раствор, не прошедший через мембранный фильтр, фильтруют через миллипоровый фильтр(0,22 мкм) и лиофилизируют с получением целевого соединения (208 мг). Полученное соединение растворяют в 0,1 М водном растворе хлорида натрия и анализируют. Результаты гельпроникающей хроматографии (колонка: гельTSK PW-4000XL, Tosoh, растворитель: 0,1 М раствор NaCl, скорость потока: 0,8 мл/мин) и ультрафиолетовый спектр поглощения (раствор метанола в воде (10:1), 1,69 мг/мл) приведены соответственно на фиг. 22 и 23. Содержание остатка лекарственного соединения в целевом соединении составляет 5,3% (в весовом отношении) по методу определения на основе поглощения при длине волны 240 нм в растворе метанола в воде (10:1). Пример 56. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей (6 мышей в группе) вызывали образование опухоли Meth А аналогично примеру 11 и исследовали противоопухолевое действие лекарственного комплекса по примеру 15,который однократно вводили в соответствии со способом, описанным в примере 12. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 15 оказывает гораздо более сильное противоопухолевое действие и отличается более широкими пределами зависимости доза-эффект по сравнению с лекарственным соединением по примеру 12. Степень ингибирования(% ) Соединение по примеру 15 10 100 5 99 2,5 95 1,25 83 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Испытуемое соединение Пример 57. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У "голых" мышей (бестимусные мыши с мутацией nude) (5 мышей в группе) вызывали образование опухоли SC-6 следующим образом: самцам "голых" мышей (BALB/c-nu-nu) подкожно трансплантировали в правую паховую область фрагмент опухоли SC-6 желудка человека. На 27-ой день после трансплантации производили однократное внутривенное введение лекарственного комплекса по примеру 15, растворенного в дистиллированной воде для инъекций, и противоопухолевое действие указанного комплекса сравнивали с действием лекарственного соединения, используемого отдельно. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 15 оказывает бо 56 лее сильное противоопухолевое действие по сравнению с лекарственным соединением, используемым отдельно, и не вызывает гибели животных вследствие токсичности. Испытуемое соединение Кол-во умерСтепень инДоза ших мышей/ гибирования кол-во исполь(мг/кг) Лекарственное соединение, используемое отдельно 100 0/5 Соединение по при 81) 21) 71 0/5 меру 15 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Пример 58. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У "голых" мышей (бестимусные мыши с мутацией nude) (5 мышей в группе) вызывали образование раковой опухоли QG-90 легкого человека аналогично примеру 57. На 16-ый день после трансплантации производили однократное внутривенное введение лекарственного комплекса по примеру 15, растворенного в дистиллированной воде для инъекций, и противоопухолевое действие указанного комплекса сравнивали с действием лекарственного соединения, используемого отдельно. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 15 оказывает гораздо более сильное противоопухолевое действие и отличается более широкими пределами зависимости доза-эффект по сравнению с лекарственным соединением,используемым отдельно. Испытуемое соединение Лекарственное соединение, используемое отдельно Соединение по при 71) 98 0/5 меру 15 11) 97 0/5 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Пример 59. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей (6 мышей в группе) вызывали образование опухоли Meth А аналогично примеру 11 и исследовали противоопухолевое действие лекарственного комплекса по примеру 41,который однократно вводили в соответствии со способом, описанным в примере 12. Затем противоопухолевое действие указанного комплекса сравнивали с действием лекарственного соединения, используемого отдельно. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 41 оказывает гораздо более сильное противоопухолевое действие и отличается более широкими пределами зависимости доза-эффект по сравнению с лекарственным соединением,используемым отдельно.(%) Лекарственное соединение,100 64 используемое отдельно 50 56 25 34 Соединение по примеру 41 251) 99 95 12,51) 81 6,251) 3,1251) 61 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Испытуемое соединение Пример 60. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей (6 мышей в группе) вызывали образование опухоли Meth А аналогично примеру 11 и исследовали противоопухолевое действие лекарственных комплексов по примерам 29, 46 и 47, которые однократно вводили в соответствии со способом, описанным в примере 12. Таким образом было установлено, что все эти лекарственные комплексы оказывают сильное противоопухолевое действие и отличаются широкими пределами зависимости доза-эффект. Испытуемое соединение(%) Соединение по примеру 29 30 99 20 99 10 89 5 79 Соединение по примеру 46 100 94 80 92 40 82 20 75 Соединение по примеру 47 100 96 80 94 40 97 20 75 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Пример 61. Противоопухолевое действие лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей (6 мышей в группе) вызывали образование опухоли Meth А аналогично примеру 11 и исследовали противоопухолевое действие лекарственного комплекса по примеру 44,который однократно вводили в соответствии со способом, описанным в примере 12. Затем противоопухолевое действие указанного комплекса сравнивали с действием лекарственного соединения (доксорубицин), используемого отдельно. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 44 оказывает гораздо более сильное противоопухолевое действие и отличается более широкими пределами зависимости доза-эффект по сравнению с лекарственным соединением, используемым отдельно. Испытуемое соединение 58 Лекарственное соединение, используемое отдельно Соединение по примеру 4 20 6/6 10 64 0/6 5 39 0/6 401) 96 0/6 201) 96 0/6 101) 87 0/6 51) 76 0/6 1) Высчитано на основе лекарственного соединения Пример 62. Фармакокинетика лекарственного комплекса по настоящему изобретению. У мышей вызывали образование опухолиMeth А аналогично примеру 11, затем однократно вводили лекарственный комплекс по примеру 15 в соответствии со способом, описанным в примере 12 (10 мг/кг; высчитано на основе лекарственного соединения), и определяли изменение концентрации лекарственного комплекса в разных тканях. Таким образом было установлено, что лекарственный комплекс по примеру 15 длительное время сохраняется в крови на высоком уровне, эффективно распределяется в опухолевых тканях и избирательно воздействует на опухоль, не накапливаясь в печени и тонкой кишке. Результаты приведены на фиг. 24. Практическое применение Лекарственный комплекс по настоящему изобретению, вводимый вместе с остатком лекарственного соединения, в частности, противоопухолевого средства, отличается великолепной избирательностью к местам локализации опухоли, благодаря чему он оказывает сильное противоопухолевое действие при низкой токсичности. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Лекарственный комплекс, где карбокси(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт и остаток лекарственного соединения связаны друг с другом спейсером, состоящим из одной аминокислоты, или спейсером, состоящим из 2-8 аминокислот, связанных пептидной связью, где остаток лекарственного средства означает структуру лекарственного соединения, остающуюся в этом соединении после образования связи между спейсером и лекарственным соединением. 2. Лекарственный комплекс по п.1, где декстрановый полиспирт, который является карбокси(С 1-С 4)алкилдекстрановым полиспиртом, получают путем обработки декстрана в условиях, обеспечивающих в основном полное превращение в полиспирт. 3. Лекарственный комплекс по п.1 или 2, в котором карбокси(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом. 4. Лекарственный комплекс по любому из пп.1-3, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством. 5. Лекарственный комплекс по п.4, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим зави 59 симое от концентрации противоопухолевое действие. 6. Лекарственный комплекс по п.4, в котором лекарственное соединение является противоопухолевым средством, оказывающим зависимое от времени противоопухолевое действие. 7. Лекарственный комплекс по п.4, в котором противоопухолевым средством является доксорубицин или (1S,9S)-1-амино-9-этил-5 фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1 Н,12 Нбензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино-[1,2-b]хинолин-10,13(9 Н,15 Н)дион. 8. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-7, в котором спейсер является дипептидом формулы -X-Z-, где "-X-Z-" обозначает остаток,который состоит из дипептида, полученного путем соединения пептидной связью гидрофобной аминокислоты (X) и гидрофильной кислоты(Z), расположенных соответственно у Nконцевого участка и С-концевого участка, и в котором удалены один атом водорода и одна гидроксильная группа соответственно из аминогруппы у N-конца из карбоксильной группы у С-конца, либо спейсер содержит дипептид в виде частичной пептидной последовательности. 9. Лекарственный комплекс по п.8, в котором гидрофобная аминокислота является фенилаланином и гидрофильная аминокислота является глицином. 10. Лекарственный комплекс по п.9, в котором спейсер является (N-конец)-Gly-Gly-PheGly. 11. Лекарственный комплекс по любому из пунктов 5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 1-15 мас.%. 12. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 315 мас.%. 13. Лекарственный комплекс по любому из пп.5-10, в котором введенное количество остатка противоопухолевого средства составляет 5-6 мас.%. 14. Лекарственный комплекс по п.1, в котором N-конец пептида формулы H2N-Gly-GlyPhe-Gly-COOH связан с карбоксильной группой карбоксиметилдекстранового полиспирта посредством кислотно-амидной связи и С-конец пептида связан с 1-аминогруппой (1S,9S)-1 амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4 метил-1 Н,12 Н-бензо-[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9 Н,15 Н)диона посредством кислотно-амидной связи. 15. Лекарственный комплекс по п.14, в котором введенное количество остатка (1S,9S)-1 амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4 метил-1H,12 Н-бензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13-(9 Н,15 Н)диона составляет 2-10 мас.%. 60 16. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 5000-500000 и степень карбоксиметилирования от 0,01 до 2,0. 17. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 50000-450000 и степень карбоксиметилирования от 0,1 до 1,0. 18. Лекарственный комплекс по п.14 или 15, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом, имеющим молекулярную массу 200000-400000 и степень карбоксиметилирования от 0,3 до 0,5. 19. Лекарственный комплекс по п.14, в котором введенное количество остатка (1S,9S)-1 амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4 метил-1 Н,12 Нбензо[де]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2b]хинолин-10,13-(9 Н,15 Н)диона составляет 5-6 мас.%, молекулярная масса карбокси-(С 1 С 4)алкилдекстранового полиспирта равна примерно 228000 и степень карбоксилирования равна примерно 0,4. 20. Носитель лекарственного вещества,предназначенный для связывания лекарственного соединения, который содержит карбокси-(С 1 С 4)алкилдекстрановый полиспирт. 21. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 5000-500000 и степень карбоксиметилирования от 0,01 до 2,0. 22. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 50000-450000 и степень карбоксиметилирования от 0,1 до 1,0. 23. Носитель лекарственного вещества по п.20, в котором карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстрановый полиспирт имеет молекулярную массу 200000-400000 и степень карбоксиметилирования от 0,3 до 0,5. 24. Носитель лекарственного вещества по любому из пп.20-23, в котором карбокси-(С 1-С 4) алкилдекстрановый полиспирт является карбоксиметилдекстрановым полиспиртом. 25. Применение карбокси-(С 1-С 4)алкилдекстранового полиспирта для получения лекарственного комплекса, в котором остаток лекарственного соединения и карбокси-(С 1-С 4) алкилдекстрановый полиспирт связаны друг с другом при помощи спейсера, где остаток лекарственного средства означает структуру лекарственного соединения, остающуюся в этом соединении после образования связи между спейсером и лекарственным соединением.
МПК / Метки
МПК: A61K 47/48
Метки: лекарственный, комплекс
Код ссылки
<a href="https://eas.patents.su/30-1550-lekarstvennyjj-kompleks.html" rel="bookmark" title="База патентов Евразийского Союза">Лекарственный комплекс</a>
Предыдущий патент: Гербицидная композиция и способ борьбы с сорняками
Следующий патент: Бензонафтиридины в качестве бронхиальных терапевтических средств
Случайный патент: Пептидное соединение с антимикробной активностью, полученное из bacillus clausii, и его применение