Способ получения иммуномодулятора

008645 Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения препаратов с выраженной биологической активностью в отношении иммунологических реакций. Известен способ получения иммуномодулирующих препаратов из костного мозга морских млекопитающих, согласно которому выделяют костный мозг, измельчают его и осуществляют экстракцию измельченного сырья трехпроцентным раствором трихлоруксусной кислоты, отделяют примеси осаждением целевого продукта сульфатом аммония, после чего целевой продукт экстрагируют бидистиллированной водой, нагретой до температуры 37 С и осуществляют его окончательную очистку ультрафильтрацией и гельхроматографией, с последующей лиофилизацией целевого продукта (см. патент РФ 1836954, кл. А 61 К 35/28, 1990 г.) - наиболее близкий аналог. В результате анализа известного способа необходимо отметить, что при данном способе получения препарата выделяются вещества, которые стимулируют продукцию лимфоцитов, но не влияют на дифференцировку незрелых лимфоцитов. Задачей, решаемой настоящим изобретением, является разработка способа получения иммуномодулятора, обеспечивающего ускорение дифференцировки и активации функциональной активности фагоцитов. Поставленная задача обеспечивается тем, что в способе получения иммуномодулятора, согласно которому осуществляют экстракцию исходного материала с последующей лиофильной сушкой целевого продукта, новым является то, что в качестве исходного материала используют мышцы пресмыкающихся отряда чешуйчатых, которые перед экстракцией кипятят в дистиллированной воде в течение 40-120 мин,полученную водную вытяжку экстрагируют хлороформом для очистки от примесей и после удаления хлороформа очищенную водную фазу, представляющую собой целевой продукт, подвергают лиофильной сушке. Необходимо отметить, что имеющиеся в настоящее время иммуномодуляторы (в том числе и получаемые при использовании способа, принятого в качестве наиболее близкого аналога) либо активизируют пролиферацию клеток лимфоидной системы (тималин, Т-активин, тимактид) или (и) их дифференцировку (интерлейкины 2 и 12), либо активируют непосредственно зрелые клетки иммунной системы. Экспериментально подтверждено, что в мышцах пресмыкающихся отряда чешуйчатых имеются сильно действующие иммуномодулирующие вещества, которые активируют макрофаги и нейрофилы и значительно усиливают противораковый иммунитет (так у мышей они увеличивают продолжительность жизни в три раза при заражении 103 клеток гепатомы на мышь, весом в 10 г. При этом резко возрастает фагоцитирующая активность макрофагов в клетках крови мышей и увеличивается активность лизосомальных ферментов, маркеров фагоцитоза в этих клетках. Непосредственное цитостатическое действие препарата из мышц пресмыкающихся на клетки данной гепатомы в культуре невелико (торможение роста на 157%), что позволяет сделать вывод, что сильный противораковый эффект является следствием активации иммунной системы, производимой введенным препаратом). Как показали исследования, аналогичным образом проявляет свое действие препарат и на донорских пробах человека. Следовательно иммуномодулирующий эффект, который вызывает полученный данным способом препарат из мышц чешуйчатых, столь же характерен для иммунной системы человека,как и для иммунной системы подопытных мышей. Способ получения иммуномодулятора осуществляют следующим образом. Выделяют мышцы пресмыкающегося отряда чешуйчатых. Выделение мышц не представляет сложностей и, как правило, осуществляется специалистами с использованием стандартных средств. Помещают выделенные мышцы в емкость с дистиллированной водой, нагревают содержимое емкости до кипения воды и кипятят в течение 40-120 мин. В результате кипячения получают водную вытяжку, содержащую как водорастворимые, так и жирорастворимые вещества. Полученную водную вытяжку экстрагируют хлороформом. Затем осуществляют лиофильную сушку целевого продукта, которую ведут под вакуумом при температуре 50-60 С. В результате получают порошок грязно-белого цвета. Выбор сырья и осуществление операций именно в заявленной последовательности позволяет получить препарат, модулирующий неспецифический иммунитет. Режимы, используемые при получении данным способом иммуномодулирующего вещества, получены экспериментальным путем. Полученный данным способом иммуномодулятор представляет собой лиофилизированную порошковую смесь низкомолекулярных гидрофильных веществ. Срок хранения в лиофилизированом виде не более года. Легко растворяется в воде или в водном растворе. Применение препарата: перорально или в виде инъекций. Сущность способа будет более понятна из приведенных ниже примеров. Пример 1. Мышцы ужа обыкновенного (Natrix tesselata) в количестве 100 г помещали в емкость, заливали 0,5 л дистиллированой воды, нагревали до кипения и кипятили в течение 60 мин. Далее производили удаление гидрофобных примесей хлороформом, для чего продукт встряхивали на делительной воронке и разделяли воду и хлороформ. Удаление примесей именно хлороформом позволяет полностью удалить полярные,-1 008645 гидрофобные и амфифильные вещества. Далее производили сушку полученной водной вытяжки, которую осуществляли известным образом. Выход целевого продукта составил 1 г. Полученный препарат обладает противоопухолевой и иммуномодулирующей активностью при его тестировании на мышах и донорских тканях человека. Пример 2. Выделенные мышцы хамелеона (Chamaeleo chamaelon) в количестве 10 г помещали в емкость, заливали 50 мл дистиллированой воды, нагревали содержимое емкости до кипения и выдерживали при кипении 80 мин. Далее производили удаление гидрофобных примесей хлороформом, описанным в примере 1 образом. После проведения данной операции осуществляли лиофильную сушку полученной водной вытяжки, которую осуществляли под вакуумом при температуре 50-60 С. Выход целевого продукта составил 0,2 г. Полученный препарат обладает противоопухолевой и иммуномодулирующей активностью при тестировании его на мышах и донорских тканях человека. Исследование полученных данным способом иммуномодуляторов показало, что они вызывают оксидативный взрыв на препаратах цельной крови и выделенных нейтрофилах человека. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения иммуномодулятора, согласно которому осуществляют экстракцию исходного материала с последующей лиофильной сушкой целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве исходного материала используют мышцы пресмыкающихся отряда чешуйчатых, которые кипятят в дистиллированной воде в течение 40-120 мин, полученную водную вытяжку экстрагируют хлороформом для очистки от примесей и после удаления хлороформа очищенную водную фазу, представляющую собой целевой продукт, подвергают лиофильной сушке.