Применение комбинации d-аспарагиновой и l-аспарагиновой кислот или их солей для лечения мужского бесплодия

ПРИМЕНЕНИЕ КОМБИНАЦИИ D-АСПАРАГИНОВОЙ И L-АСПАРАГИНОВОЙ КИСЛОТ ИЛИ ИХ СОЛЕЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МУЖСКОГО БЕСПЛОДИЯ Настоящее изобретение касается применения комбинации, состоящей из D-аспарагиновой иL-аспарагиновой кислот или L-аспарагиновой кислоты, используемой по отдельности, для стимуляции детородной активности у человека посредством увеличения количества и подвижности сперматозоидов. Настоящее изобретение касается применения комбинации D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей для лечения мужского бесплодия. В частности, изобретение касается применения смеси, состоящей из смеси D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей предпочтительно, по меньшей мере, при отношении 1:1, чтобы стимулировать детородную активность мужчин посредством возрастания количества и подвижности сперматозоидов. Мужское бесплодие может быть вызвано расстройствами, относящимися к выработке, выделению или функциональности сперматозоидов, и представляет приблизительно 35% причин бесплодия пар. Оно может быть вызвано возможными прошлыми или происходящими в настоящее время мочеполовыми инфекциями; заболеваниями, такими как ветряная оспа, корь или паротит, вирусным заболеванием, которое у людей может приводить к орхиту (инфекции яичек); болезнями, передающимися половым путем; прошлыми операциями или травмами на генитальном уровне. Кроме того, образ жизни, такой как прием алкоголя, курение, наркотики и работа во вредных условиях и факторы окружающей среды, может играть важную роль. Варикозное расширение вен семенного канатика (варикоцеле) может приводить к недостатку выработки активных сперматозоидов. Измененные уровни ФСГ (фоллитропина), ЛГ (лютеотропина), ПРЛ (пролактина) и Т (тестостерона) также могут воздействовать на процесс выработки сперматозоидов. Применяемые в настоящее время терапии для мужского бесплодия включают применение инъецируемых или перорально вводимых лекарственных средств. Среди инъецируемых лекарственных средств применяют Менотропин, активное начало в меногонных пузырьках, содержащий препарат гонадотропинов (ФСГ и ЛГ, в равных количествах), экстрагируемый из мочи женщин в пост-менопаузе, следовательно, называемый человеческим гормоном менопаузы (ЧМГ). ЧМГ действует на яичники и семенники посредством стимуляции процесса овуляции, сперматогенеза и стероидогенеза. В семенниках ФСГ, по существу, включен в стимуляцию созревания клеток Сертоли и воздействует, кроме того, на созревание семявыводящих трубочек и развитие сперматозоидов. Поскольку высокая концентрация андрогенов является необходимой в яичках, он может быть получен при предварительном лечении HCG или в соответствии с терапевтической схемой, включающей комбинацию с HCG 5000 Ед еженедельно в течение 3 месяцев. Однако эта терапия проявляет несколько недостатков, например HCG неэффективен, если его вводят перорально, и он должен вводиться внутримышечно. В некоторых случаях может иметь место образование антител против-HCG в результате циклического повторного введения продукта, таким образом приводя к неэффективной терапии. Дополнительным недостатком этой терапии является высокая стоимость, так как наиболее используемая схема терапии включает в себя внутримышечное введение три раза в неделю в течение трехмесячного цикла и низкое согласие пациента вследствие повторных внутримышечных еженедельных введений. Альтернативная терапия включает в себя лечение гонадотропин-высвобождающим гормоном(GnRH). Эта терапия включает импульсное введение с использованием переносного насоса (внутривенно или подкожно) при 90-120-минутных интервалах. Несмотря на то что такое лечение в пределах трех месяцев восстанавливает концентрации тестостерона и гонадотропинов и стимулирует сперматогенез, с другой стороны, она подразумевает, что пациент должен нести переносной насос, оборудованный мочевым катетером, и это может быть неудобным для этих пациентов. Что касается пероральных терапий, то они могут включать в себя антиэстрогены. Эти соединения(кломифена цитрат и тамоксифен) широко применялись для лечения мужского бесплодия при отсутствии эндокринных патологий. Антиэстрогены поддерживают способность конкурентно связываться с эстрогеновыми рецепторами как на гипоталамическом, так и на периферийном уровне, таким образом индуцируя увеличение уровней гонадотропина в плазме и вторичного интратестикулярного тестостерона. Фармакологический эффект на сперматогенез, по-видимому, проявляется через увеличение концентрации этих гормонов, действующих непосредственно на сперматогенез. В частности, кломифена цитрат при низких дозировках (25-50 мг), вводимый в течение 3-5 месяцев, является подходящим для улучшения характеристик спермы, в то время как более высокие концентрации (200-400 мг) индуцируют подавление сперматогенеза и снижение концентрации спермы. В разнообразных неконтролируемых исследованиях приведены результаты по возрастанию концентрации спермы и степени беременности, изменяющихся от 0 до 80%, и где ответ на лечение наблюдали почти исключительно для пациентов, страдающих олигозооспермией от слабой до умеренной (10-20 млн/мл). В свете указанных данных Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ) провела двойное слепое многоцентровое исследование сравнения плацебо с кломифена цитратом для идиопатических пациентов, страдающих олигозооспермией, и эти исследования не обнаружили улучшения степени беременности у пациентов, подвергнутых лечению этим лекарственным средством (ВОЗ, Специальная Программа Исследования, Развития и Исследовательского Обучения в Ежегодном Техническом Отчете по Репродукции Человека, 1990. Женева: ВОЗ 1991: 146-7). Также в качестве пероральной терапии могут применяться ингибиторы ароматазы, как, например,тестолактон. В неконтролируемых исследованиях введение тестолактона (1 г/день) субъектам, страдающим олигозооспермией, оказалось подходящим для увеличения концентрации спермы и процента беременности. При последующих рандомизированных, плацебо-контролируемых и двойных слепых испыта-1 021832 ниях, с более увеличенными дозами тестолактона (2 г/день), не было обнаружено никаких изменений параметров спермы, и в таким образом подвергнутых лечению и принимающих плацебо группах не было обнаружено беременности. Еще одним соединением, проявляющим селективную ингибиторную активность по отношению к ароматазе, является анастрозол, который при ежедневной дозе, равной 1 мг, оказался сходным с тестолактоном по эффектам на сперматогенез. Безусловно, необходимы дополнительные исследования, чтобы оценить действительную эффективность этих лекарственных средств для лечения мужского бесплодия вследствие крайне низкого количества субъектов, исследованных до настоящего времени. Введение андрогенов представляло одну из первых терапевтических попыток улучшения параметров семенной жидкости у пациентов, пораженных олигозооспермией. В настоящее время используют два слабых андрогенных соединения. Местеролон, 5 а-восстановленное производное тестостерона, не оказывающее воздействие на секрецию гонадотропина, применяли в качестве монотерапии при ежедневной концентрации от 50 до 150 мг в различных испытаниях, приводящих в результате к различным модификациям параметров семенной жидкости. Самые недавние исследования и анализ ВОЗ не документировали значительные изменения всех анализируемых параметров семенной жидкости и процент беременности по сравнению со значениями для предварительного лечения и группы, принимавшей плацебо. Аналогично тестостерона ундеканоат показал свою пригодность при улучшении параметров семенной жидкости в контролируемых исследованиях, не оказывая воздействия на уровни гонадотропина и тестостерона; однако последующие испытания не подтвердили эти результаты и, следовательно, применение этого соединения нуждается в дополнительной верификации. Наконец, L-аргинин или другие комбинации L-аминокислот и/или витаминных добавок стали применять в качестве соадъювантов при олигоастеноспермии и гипосомии, посредством перорального введения 2-3 раза ежедневно в течение трех месяцев. В свете вышесказанного, существует очевидная потребность в предоставлении новых способов для лечения мужского бесплодия, преодолевающих недостатки известных способов.D-аспарагиновая кислота является природной аминокислотой, обнаруженной первоначально в 1977 г. Antimo D'Aniello в мозге осьминога (морского моллюска, имеющего научное наименование Octopusvulgaris), как опубликовано в сотрудничестве с Antonio Giuditta в J. of Neurochemistry (ссылки 1-2). Последующие исследования, проведенные тем же автором в сотрудничестве с другими итальянскими и неитальянскими исследователями, продемонстрировали, что D-аспарагиновая кислота встречается не только в нервной, но также в эндокринной системе многих морских организмов, таких как моллюски, ракообразные, заднежаберные и рыбы (ссылки 3-5) и земных животных, таких как лягушки (ссылки 6-1), луцертола (ссылка 8), цыплята (ссылки 9), крысы (ссылки 9-11), овцы (12) и люди (ссылки 13-15). Концентрация является переменной от вида к виду. Как правило, у менее развитых животных D-аспарагиновая кислота присутствует в больших количествах по сравнению с более развитыми животными. Кроме того,было обнаружено, что эта аминокислота у млекопитающих, включая людей, во время жизни эмбриона обнаруживается при повышенных концентрациях в мозге, где она играет роль в развитии нервной системы. Напротив, во время взрослой жизни D-аспарагиновая кислота присутствует при повышенных концентрациях в эндокринной системе и, особенно, в шишковидной железе (эпифизе) и семенниках (яичках), где она играет роль в эндокринной системе. Для полного обзора см. ссылку 16 и следующую табл. 1, взятую из публикации авторов изобретения (Brain Reserch Review, vol. 53, pages 215-234, 2006), показывающую содержание D-аспартата в нервной и эндокринной тканях нескольких классов животных. Таблица 1. Концентрации D-аспарагиновой кислоты в тканях различных видов животных Значения представляют среднюю концентрацию в нмоль D-Asp/г в свежих тканях (A. D'Aniello;Brain Research Review, 53, 215-234, 2006) (ссылка 16. Исследования по D-аспарагиновой кислоте у крыс свидетельствуют о том, что, если это соединение вводят перорально, оно является пригодным, чтобы индуцировать временное повышение в крови некоторых гормонов, таких как лютеинизирующий гормон (ЛГ) (ссылки 17-18), гормон роста (ссылка 18),пролактин (ПРЛ) (ссылка 19) и тестостерон (ссылки 17-18). В конечном счете, недавно было также продемонстрировано, что D-аспарагиновая кислота вовлечена в мужское бесплодие у людей (ссылка 20). Для мужчин наблюдали, что в семенной жидкости и сперматозоидах физиологически способных к деторождению людей (людей, у которых количество сперматозоидов выше чем 20 млн/мл семенной жидкости и подвижность выше чем 70%) D-аспарагиновая кислота присутствует при концентрации 8024 нмоль/мл в семенной жидкости и 13030 фмоль/сперматозоид. Наоборот, в семенной жидкости бесплодных людей, то есть людей, которые имеют ниже, чем нормальное количество сперматозоидов в семенной жидкости, и их подвижность ниже физиологических значений (страдающих олигоастенозооспермией) и в семенной жидкости людей, не имеющих сперматозоидов (страдающих азооспермией), содержание D-аспарагиновой кислоты значительно снижено как в семенной жидкости, так и сперматозоидах. Конкретно, в семенной жидкости субъектов, страдающих олигоастенозооспермией, D-аспарагиновой кислоты содержится приблизительно в 3 раза ниже и у субъектов, страдающих азооспермией, в 6 раз ниже. От 130+35 фмоль/сперматозоид, обнаруженных у детородных, до значений 60+10 фмоль/сперматозоид, обнаруженных у людей, страдающих олигоастенозооспермией. Табл. 2 показывает содержаниеD-аспарагиновой кислоты в человеческой семенной жидкости и сперматозоидах. Таблица 2. Содержание D-аспарагиновой кислоты в человеческой семенной жидкости и сперматозоидах Значения показывают средние значения и среднеквадратическое отклонение, полученные от 10 образцов семенной жидкости от нормальных доноров, 10 образцов семенной жидкости от олигоастенотератоспермических доноров (семенная жидкость, содержащая количество сперматозоидов ниже чем 20 млн/мл спермы) и 10 образцов семенной жидкости от не обструктивных азооспермических доноров (доноров с количеством сперматозоидов ниже чем 1 млн/мл спермы). Значение D-аспарагиновой кислоты было получено с использованием специфичного хроматографического метода ВЭЖХ в комбинации с D-аспартатоксидазой. Различие по D-аспарагиновой кислоте между нормоспермическими и олигоастенотератоспермическими донорами было значимым для Р 0,01, а различие между олигоастенотератоспермическими и азооспермическими донорами также было значимым для Р 0,01. Эти результаты вместе с другими результатами, относящимися к активности D-аспарагиновой кислоты по отношению к возрастанию уровня гормона ЛГ (лютеинизирующий гормон) и тестостерона(ежедневно одна или две дозы по 3 г) в течение по меньшей мере 30 дней индуцировало увеличение значений ЛГ и тестостерона и количества и подвижности сперматозоидов также у мужчин (патентная заявка Италии RM 2005A000468 от сентября 2005 г.). Авторы настоящего изобретения в настоящее время обнаружили, что комбинация D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот приводит к заметному увеличению эффективности по сравнению с введением равного количества одной D-аспарагиновой кислоты. Авторы провели исследования на животных и людях, демонстрирующие более высокое возрастание количества и подвижности сперматозоидов для субъектов, подвергнутых лечению комбинацией изобретения, по сравнению с субъектами, подвергнутыми лечению одной D-аспарагиновой кислотой. В частности, у людей также наблюдали увеличение уровней гормонов ЛГ и тестостерона. Результаты исследования, проведенного на кроликах и людях (не опубликовано), показывают, что комбинация D-аспарагиновой кислоты и L-аспарагиновой кислоты или их солей, где кислоты нейтрализуют, как, например, ионами Na+, может применяться, чтобы стимулировать детородную активность мужчин посредством возрастания количества и жизнеспособности сперматозоидов. Применение комбинации в соответствии с изобретением для терапии бесплодия предлагает замечательное преимущество, обеспечивающее возможность осуществлять только однократное ежедневное введение и при затратах для 60-90-дневного цикла лечения ниже, чем для известных терапий. Следовательно, конкретной целью настоящего изобретения является композиция, содержащая комбинацию или состоящая из комбинации D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или одной или более их соответствующих солей с щелочными или щелочно-земельными металлами, или содержащая одну Lаспарагиновую кислоту или состоящая из нее, указанные активные начала находятся возможно в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемым эксципиентом и/или соадъювантом, для применения в лечении мужского бесплодия. В случае комбинации D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или одной или более их соответствующих солей с щелочными или щелочно-земельными металлами концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей может изменяться от 50 до 99,5%, в то время как концентрация L-аспарагиновой кислоты или ее солей может изменяться от 0,05 до 50%, указанные значения процентного содержания приведены на основании расчета от общей массы D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей. В соответствии с альтернативным вариантом осуществления концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей может изменяться от 50 до 80% и концентрация L-аспарагиновой кислоты или ее солей может изменяться от 20 до 50%, указанные значения процентного содержания основаны на расчете от общей массы D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей. В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей равна 80% и концентрация L-аспарагиновой кислоты или ее солей равна 20%, указанные значения процентного содержания основаны на расчете от общей массы D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей. Альтернативно, концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей или L-аспарагиновой кислоты или ее солей равна 50%, указанные значения процентного содержания основаны на расчете от общей массы D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей. В соответствии с дополнительным вариантом осуществления концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей равна 99,5% и концентрация L-аспарагиновой кислоты или ей солей равна 0,05%, указанные значения процентного содержания основаны на расчете от общей массы D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или их солей. Предпочтительно настоящее изобретение относится к необструктивному мужскому бесплодию, характеризуемому олиго- и/или астенозооспермией с гипогонадотропным гипогонадизмом или без него. В частности, соль D-аспарагиновой кислоты или L-аспарагиновой кислоты представляет собой натриевую соль или смесь солей натрия и калия, или магния, или цинка. Как изложено выше, композиция в соответствии с изобретением может содержать один или более соадъювантов, выбранных из группы, состоящей из аминокислот, витаминов, минералов, гормонов, стимулирующих репродуктивную функцию, калликреина, антибиотиков, противовоспалительных средств,антиандрогенов, андрогенов, пентоксифиллина, гонадотропина, гонадотропин-высвобождающего гормона (GnRH), адренергических стимуляторов, диетических добавок, антиоксидантов (альфа-липоевой кислоты, кофермента Q10, глутатиона и других не упомянутых здесь антиоксидантов), кетокислот, как,например, оксалоуксусная и альфа-кетоглутаровая кислоты. Конкретно, аминокислоты могут быть выбраны из группы, состоящей из аланина, аргинина, карнитина, цистеина, глутамина, глицина, лейцина,лизина, изолейцина, метионина, орнитина, фенилаланина, треонина, триптофана, валина, серина. Витамины могут быть выбраны из группы, состоящей из витаминов А, С, D3, Е, K, B1, B2, В 6, В 12,РР, биотина-(Н), фолиевой кислоты, липоевой кислоты. Наконец, минералы выбирают из группы, состоящей из магния, калия, цинка, марганца, молибдена,хрома, селена, пантотената кальция, железа, меди, йода, фосфора, фтора, кальция. Витамины могут применяться при изменяющейся концентрации, как указано ниже: витамин А от 0,0048 до 0,024%, витамин С от 0,36 до 3,6%, витамин D3 от 0,00003 до 0,00015%, витамин Е от 0,06 до 0,6%, витамин K от 0,00042 до 0,0021%, витамин В 1 от 0,0084 до 0,042%, витамин В 2 от 0,0096 до 0,048%, витамин В 6 от 0,012 до 0,06%, витамин В 12 от 610-6 до 310-5%, витамин РР от 0,108 до 0,54%,биотин от 0,0009 до 4,410-5%, фолиевая кислота от 0,0012 до 0,006%, указанные значения процентного содержания являются % массы в расчете от общей массы композиции. Концентрации минералов могут изменяться в соответствии со следующими значениями процентного содержания: магния от 3,2 до 9%, калия от 0,4 до 4%, цинка от 0,09 до 0,45%, марганца от 0,02 до 0,07%, молибдена, хрома или селена от 0,0003 до 0,002%, пантотената кальция от 0,04 до 0,15%, железа от 0,084 до 0,021%, меди от 0,02 до 0,1%, йода от 0,0009 до 0,0045%, фосфора от 2,5 до 20%, фтора от 0,005 до 0,02%, кальция от 3,24 до 16,2%, указанные значения процентного содержания являются % массы в расчете от общей массы композиции. Концентрации аминокислот в дополнение к D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислотам могут изменяться от 0,6 до 10 мас.% в расчете от общей массы композиции. В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения композиция может содержать, в дополнение к D- и L-аспартату, фолиевую кислоту, витамин В 6, витамин В 12 и консерванты, сорбат калия и бензоат натрия. В частности, концентрации могут изменяться, как указано ниже: фолиевой кислоты от 0,002 до 0,006%, витамина В 6 от 0,02 до 0,06%, витамина В 12 от 110-5 до 310-5%, сорбата калия от 0,002 до 0,008%, бензоата натрия от 0,002 до 0,008%. Композиция в соответствии с настоящим изобретением может вводиться в виде ежедневной дозы,изменяющейся от 0,001 до 10 г/день. На основании вышесказанного концентрации витаминов и минералов, следовательно, могут изменяться от 30 до 150% от RDA (предлагаемая ежедневная доза). В частности, в табл. 3 приведены разнообразные соединения и их минимальные и максимальные дозы, которые могут содержаться в лекарственной стандартной однократной дозе композиции в соответствии с изобретением. Таблица 3. Минимальные и максимальные дозы соединений, которые могут содержаться в лекарственной стандартной однократной дозе Кроме того, композиция может содержать следующие другие вещества, играющие роль соадъювантов в чистом виде, в расчете от массы композиции с 3 г промышленной дозы активного начала. Ксилит 700, 0,1-10% Аромат апельсина 0,1-10% Ванилин 0,05-0,5% Фруктоза 0,2-20% Сахароза 0,2-20% Мальтодекстрины 0,2-10% Аспартам 0,03-0,3% Чистый дегидратированный апельсиновый сок 0,1-20% Гидроксид магния 0,1-1% Оксид кремния 0,1-20% Значения процентного содержания представляют собой мас.% в расчете от массы композиции с 3,12 г промышленной дозы активного начала. Композиция находится в виде солевого раствора, содержащего 9-11 мл/бутыль, или в форме гранул с 3 г дозы активного начала D/L-аспартата и других ингредиентов, составляющих количество до 3,5-6,0 г общей сухой массы. Настоящее изобретение теперь будет описано иллюстративным, но не ограничивающим образом. В соответствии с его предпочтительными вариантами осуществления с подробной ссылкой на прилагаемые чертежи, где фиг. 1 показывает возрастание ЛГ (лютеинизирующого гормона) в человеческой плазме после лечения композицией в соответствии с изобретением. Приведенные значения представляют средние значения и среднеквадратическое отклонение (S.D.), полученные от десяти 25-40-летних людей в нулевой момент времени (в начале отсчета) и 10, 20 и 30 день после лечения (см. библиографию ниже); фиг. 2 показывает возрастание тестостерона в человеческой плазме после лечения композицией в соответствии с изобретением. Приведенные значения представляют средние значения и среднеквадратическое отклонение (S.D.), полученные от десяти 25-40-летних людей в нулевой момент времени (в начале отсчета) и 10, 20 и 30 день после лечения (см. библиографию ниже); фиг. 3 показывает возрастание количества сперматозоидов в человеческой семенной жидкости после лечения композицией в соответствии с изобретением (см. библиографию ниже); фиг. 4 показывает возрастание количества сперматозоидов в человеческой семенной жидкости после лечения композицией в соответствии с изобретением. Приведенные значения представляют средние значения и среднеквадратическое отклонение (S.D.), полученные от десяти 25-40-летних людей в нулевой момент времени (начало отсчета) и 30, 60 и 90 день после лечения (см. библиографию ниже); фиг. 5 показывает результат анализа ВЭЖХ известного образца, состоящего из стандартной смесиD-аспарагиновой кислоты вместе со смесью L-аминокислоты (см. библиографию ниже). Пример 1. Получение комбинации D-аспартата натрия и L-аспартата натрия в виде раствора или форме порошкаD-аспарагиновая и L-аспарагиновая кислоты являются доступными для приобретения в форме водонерастворимого порошка. Необходимо, следовательно, чтобы аминокислота была солюбилизирована посредством образования натриевой, калиевой или магниевой соли. Здесь ниже приведен пример получения D-аспартата натрия при 2 М концентрации, соответствующей 266 г D-аспарагиновой кислоты/л, в свою очередь, соответствующей 312 г D-аспартата натрия/л. Пример получения 1 л водной смеси, состоящей из 80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия, и упаковки по 10 мл/бутыль Смешивают 212,8 г D-аспарагиновой кислоты и 53,2 г L-аспарагиновой кислоты в 250 мл дистиллированной воды. Затем при непрерывном перемешивании добавляют по частям 480 мл NaOH 4 М(NaOH 4 М соответствует 160 г/л) и перемешивание осуществляют, чтобы солюбилизировать Dаспарагиновую кислоту и L-аспарагиновую кислоту. После солюбилизации рН раствора будет составлять 6,0-7,0. Если значение рН составляет больше чем 7,0, затем регулируют до рН 6,0-7,0 с несколькими млHCl 2 М, если, напротив, рН составляет менее чем 6,0-7,0, затем добавляют больше NaOH до тех пор,пока значение рН снова не станет 6,0-7,0. Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм (миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить нерастворимый остаток и в то же самое время стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты, 1,5 мкг витамина В 12 и возможно аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве, устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 2,49 г D-аспартата натрия и 0,63 г Lаспартата натрия (соответствующих 2,128 г D-аспарагиновой кислоты и 0,530 г L-аспарагиновой кислоты соответственно). Альтернативная методика Альтернативно, вышеуказанный препарат может быть получен в соответствии со следующей методикой, которая является также более практической: к 750 мл 2,66 М NaOH (2,66 М раствор NaOH соответствует 106,6 г NaOH/л) добавляют при перемешивании 212,8 г D-аспарагиновой кислоты и 53,2 г Lаспарагиновой кислоты. Продолжают перемешивание до растворения всей аминокислоты. После полной солюбилизации проверяют значение рН, которое должно находиться между 6,0 и 7,0. Если рН составляет больше чем 7,0, затем добавляют несколько мл 2 М HCl, до тех пор, пока рН не окажется между 6,0 и 7,0. Если, напротив, рН составляет ниже чем 6,0, затем добавляют несколько мл 2 М NaOH, пока рН не окажется между 6,0 и 7,0. Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм (миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить возможный нерастворимый остаток и стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты, 1,5 мкг витамина В 12 и, возможно, аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве, устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 2,49 г D-аспартата натрия и 0,63 г L-аспартата натрия (соответствующих 2,128 г D-аспарагиновой кислоты и 0,530 г L-аспарагиновой кислоты соответственно). Пример получения 1 л водного раствора одного D-аспартата натрия Смешивают 266 г D-аспарагиновой кислоты в 250 мл дистиллированной воды. Затем при перемешивании добавляют 480 мл NaOH 4 М (раствор NaOH 4 М соответствует 160 г/л) и перемешивают, чтобы солюбилизировать D-аспарагиновую кислоту. После солюбилизации рН раствора должен находиться между 6,0-7,0. Если рН составляет больше чем 7,0, затем доводят рН до 6,0-7,0 несколькими мл 2 М HCl. Если напротив, рН составляет меньше чем 6,0-7,0, затем добавляют больше NaOH, пока рН не достигнет 6,0-7,0. Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм(миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить нерастворимый остаток и в то же самое время стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты, 1,5 мкг витамина В 12 и, возможно, аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве, устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 3,12 г D-аспартата натрия, соответствующие 266 г Dаспарагиновой кислоты. В качестве альтернативы указанной выше методике раствор D-аспартата натрия получают, как указано ниже. К 750 мл NaOH 2,66 М (NaOH 2,66 М соответствует 106,6 г NaOH/л) добавляют при встряхивании 266 г D-аспарагиновой кислоты. Перемешивают непрерывно до растворения всей D-аспарагиновой кислоты. После солюбилизации рН раствора должен составлять между 6,0-7,0. Если он выше чем 7,0, затем доводят рН 6,0-7,0 несколькими мл 2 М HCl. Если, напротив, рН ниже чем 6,0-7,0, затем добавляют больше NaOH до достижения 6,0-7,0. Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм (миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить нерастворимый остаток и в то же самое время стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты, 1,5 мкг витамина В 12 и, возможно, аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве, устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 3,12 г D-аспартата натрия, соответствующие 266 г D-аспарагиновой кислоты. Пример получения 1 л водной смеси, состоящей из 50% D-аспартата натрия и 50% L-аспартата натрия, и упаковки в 10-мл бутыли Смешивают 133 г D-аспарагиновой кислоты и 133 г L-аспарагиновой кислоты в 250 мл дистиллированной воды. Затем при непрерывном перемешивании добавляют 480 мл NaOH 4 М (4 М=160 г/л) и перемешивают, чтобы солюбилизировать D-аспарагиновую кислоту и L-аспарагиновую кислоту. После солюбилизации рН раствора будет составлять 6,0-7,0. Если значение рН составляет больше чем 7,0, затем доводят до рН 6,0-7,0 несколькими мл HCl 2 М. Если, напротив, рН составляет меньше чем 6,0-7,0, затем добавляют больше NaOH, пока значение рН не станет снова 6,0-7,0. Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм (миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить нерастворимый остаток и в то же самое время стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты,1,5 мкг витамина В 12 и, возможно, аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве,устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 1,56 г Dаспартата натрия и 1,56 г L-аспартата натрия (соответствующие 1,33 г D-аспарагиновой кислоты и 1,33 гL-аспарагиновой кислоты соответственно). В качестве альтернативы приведенной выше методике получение смеси D-аспартата натрия и Lаспартата натрия осуществляют, как указано ниже. К 750 мл 2,66 М NaOH (2,66 М NaOH=106,6 гNaOH/л) при постоянном перемешивании добавляют 133 г D-аспарагиновой кислоты и 133 г Lаспарагиновой кислоты. Продолжают перемешивание до растворения всей аминокислоты. После полной солюбилизации проверяют значение рН, которое должно находиться между 6,0 и 7,0, Если рН составляет больше чем 7,0, затем добавляют несколько мл 2 М HCl, пока рН не станет между 6,0 и 7,0, Если, напротив, рН ниже чем 6,0-7,0, затем добавляют больше 2 М NaOH, пока рН не составит между 6,0 и 7,0, Затем добавляют 0,9 г сорбата калия и 0,9 г бензоата натрия. В конце добавляют дистиллированную воду до конечного объема, равного 1 л. Фильтруют через мембраны с порами 0,45 мкм (миллипор) или 3-мм бумагу, чтобы отделить возможный нерастворимый остаток и стерилизовать раствор. Последовательно распределяют в 10-мл бутыли. В конце добавляют в дозирующий колпачок бутыли 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты, 1,5 мкг витамина В 12 и, возможно, аромат апельсина или фруктозу или другой эксципиент в количестве, устанавливаемом в зависимости от желательного вкуса лекарства. 10 мл Раствора содержат 1,56 г D-аспартата натрия и 1,56 г L-аспартата натрия (соответствующие 1,33 г Dаспарагиновой кислоты и 1,33 г L-аспарагиновой кислоты). Получение D-аспартата натрия и L-аспартата натрия в форме порошкаD-аспартат и L-аспартат в виде солей натрия, или калия, или магния являются доступными для приобретения. Соль DL-аспартата натрия, состоящая из рацемической смеси DL-аспартата, т.е. 50% Dаспартата натрия и 50% L-аспартата натрия, также является доступной для приобретения. Следовательно, также возможно получить монодозу саше, содержащую определенную дозу D-аспартата натрия (3,12 г). К этой дозе затем добавляют 2 мг витамина В 6, 0,3 мг фолиевой кислоты и 1,5 мкг витамин В 12 и,возможно, определенные количества апельсинового или другого аромата, сахарозы или других эксципиентов, чтобы получить приятное глотание. При этом получении не добавляют ни бензоат натрия, ни сорбат калия, поскольку лекарственное средство находится в форме порошка и, таким образом, не является заражаемым микроорганизмами. Затем саше растворяют в питьевой воде и принимают внутрь. Пример 2. Исследование эффектов комбинации 80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия на кроликах Исследование проводили на двух группах кроликов (10 кроликов для каждой группы), чтобы тестировать эффект D-аспартата натрия и D-аспартата натрия в комбинации с определенным количеством Lаспартата натрия на качество семенной жидкости, т.е. на количество сперматозоидов/мл и на их нарастающую быструю подвижность. Эксперимент включал в себя прием внутрь группой 10 взрослых самцов кроликов, в возрасте 6 месяцев, количества D-аспартата натрия, соответствующего 0,250 г ежедневно (1,6 мкмоль/кролик; 0,26 мкмоль/кг массы тела) в течение 20 дней. Практически, D-аспартат натрия смешивали с пищей в таких количествах, что пища, ежедневно принимаемая внутрь кроликом, содержала 0,250 г D-аспартата натрия. Таким же образом, во втором эксперименте, проводимом на еще одной группе из 10 взрослых самцов кроликов того же возраста, вводили смесь, состоящую из 0,2 г D-аспартата натрия и 0,05 г L-аспартата натрия (80% D-Asp:20% L-Asp). Перед началом эксперимента и в конце приема внутрь лекарственного средства, длящегося 20 дней, от каждого кролика собирали образец спермы, полученный посредством стимуляции с использованием искусственной вагины, и определяли общее количество сперматозоидов/мл эякулята и их подвижность. Количество сперматозоидов и нарастающую быструю подвижность определяют в соответствии с рекомендациями (Всемирной Организации Здравоохранения), ВОЗ, с использованием Камеры Маклера для подсчета (Sefi Medtstl Instrument, Хайфа, Израиль), и в том же месте определяли нарастающую быструю подвижность. Сперму кролика разбавляли 1:10 в изоосмотическом растворе вследствие избыточной концентрации. Результат, полученный от этого исследования, продемонстрировал, что в первом эксперименте, т.е. у кроликов, подвергаемых лечению одним D-аспартатом натрия, эта аминокислота статистически улучшала количество сперматозоидов в семенной жидкости, т.е. выработку, в среднем, на 19,3%. Исходя из среднего значения, равного от 300000000 сперматозоидов/мл семенной жидкости для контрольных кроликов (сбор перед началом лечения), до среднего значения, равного 358000000/мл после приема внутрьD-аспартата натрия в течение 20 дней, соответствующее 19,3% увеличение (табл. 5; часть А; 1 группа из 10 кроликов). Кроме того, в тех же самых семенных жидкостях кроликов, подвергнутых лечению, также было обнаружено улучшение нарастающей быстрой подвижности сперматозоидов, изменяющейся от 40 до 55%, что составляет 37% увеличения по сравнению с контрольными значениями (табл. 5, часть В, 1 группа кроликов). Во втором эксперименте, проводимом с другими 10 кроликами того же возраста, которым вводили ежедневно дозу, состоящую из 0,2 г D-аспартата натрия и 0,05 г L-аспартата натрия (D-Asp 80%: L-Asp 20%), и в течение такого же времени, качество семенной жидкости дополнительно улучшилось. В этом случае, фактически, количество сперматозоидов в семенной жидкости перед лечением составляло 320000000 сперматозоидов/мл в качестве среднего значения, в то время как после лечения L-аспартатом натрия, объединенным с D-аспартатом натрия, составляло 410000000/мл сперматозоидов/мл семенной жидкости, что является увеличением на 28,1% (табл. 5; часть А; 2 группа кроликов). Кроме того, нарастающая быстрая подвижность сперматозоидов также статистически улучшалась. Фактически, нарастающая быстрая подвижность сперматозоидов, обнаруженная в семенной жидкости кроликов первой группы, доходит до 40%, в то время как после лечения D-аспартатом ее среднее значение составляло 55%,что является увеличением на 37%. Результаты после приема внутрь смеси, состоящей из D-аспартата натрия и L-аспартата натрия, см. в табл. 5, часть В; 2 группа кроликов. Во второй группе кроликов, которым вводили D-Asp + L-аспартат, среднее значение количества быстрых сперматозоидов изменялось от 39 до 58%, что является увеличением на 48% (табл. 5; часть В; 2 группа кроликов). С точки зрения статистики, улучшения исследованных параметров, как с использованием одного Dаспартата натрия, так и с использованием смеси, состоящей из L-аспартата натрия, объединенного с Dаспартатом натрия, проанализированное с использованием Т-теста Стьюдента, были все значимыми для Р 0,01. Приведенные выше результаты показаны в приведенной ниже табл. 5, показывающей эффект Dаспартата натрия и D-аспартата+L-аспартат натрия на улучшение количества и качества сперматозоидов в семенной жидкости кролика. Результаты относятся к средним значениям, полученным на одной группе из 10 взрослых кроликов(в возрасте 6 месяцев) перед лечением и через 20 дней после приема внутрь 0,25 г D-аспартата натрия(1,60 мкмоль/кролик; 0,26 мкмоль/кг массы тела) и на группе из других 10 кроликов того же возраста перед лечением и через 20 дней после приема внутрь смеси, состоящей из 0,2 г D-аспартата натрия и 0,05 г L-аспартата натрия ежедневно и в течение 30 дней (80% Na-D-аспартата и 20% Na-L-аспартата). Значения, приведенные в части А таблицы, относятся к общему количеству сперматозоидов/мл семенной жидкости перед и после соответствующего лечения лекарственным средством, в скобках приведено процентное значение возрастания количества сперматозоидов. В части В таблицы значения со звездочкой относятся к процентным значениям количества быстрых нарастающих, медленных, неподвижных сперматозоидов в расчете от 100. Значения в скобках относятся к процентным значениям увеличения быстрых нарастающих сперматозоидов по отношению к значениям перед соответствующим лечением лекарственным средством. Увеличения количества и подвижности сперматозоидов у кроликов, подвергнутых лечению Dаспартатом натрия и L-аспартатом натрия, объединенным с D-аспартатом натрия, были все значимыми(Стьюдент Т; Р 0,01). Пример 3. Исследование эффектов комбинации D-аспартата натрия 50% и L-аспартата натрия 50% у кроликов Исследование включало в себя введение смеси, состоящей из 0,125 г D-аспартата натрия + 0,125 гL-аспартата натрия (D-Asp 50%:L-Asp 50%) группе из 10 кроликов в соответствии со методикой примера 2. Полученный результат показывает, что в этом случае также получали улучшение качества спермы с точки зрения общего количества сперматозоидов и нарастающей быстрой подвижности по сравнению с контролями, но этот эффект был немного менее действенным по отношению к эффекту от применения смеси, состоящей из 80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия. В этом случае выработка количества сперматозоидов увеличивалась на 25% и подвижность на 55% по сравнению с контролями, показывающими, что в этом случае также получали улучшение по сравнению с одним D-аспартатом, но оно было ниже, чем для смеси, состоящей из 80% D-аспартата и 20% L-аспартата. Пример 4. Исследование эффектов комбинации 80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия на человеке Комплектовали группы из 25-40-летних добровольцев и оценивали эффект одного D-аспартата натрия и эффект L-аспартата натрия, дополненного L-аспартатом натрия, на человеческий сперматогенез. Исследование включает в себя пероральный прием внутрь (после завтрака или основной пищи) группой из 10 25-40-летних людей ежедневно дозы, состоящей из 3,12 г D-аспартата натрия (19,2 мкмольD-аспартата натрия; 0,27 мкмоль/кг массы тела для персоны массой 70 кг) в течением 30 дней. Еще одна группа из 10 25-40-летних людей (после завтрака или основной пищи) принимала внутрь ежедневно дозу смеси, состоящей из 2,49 г D-аспартата натрия и 0,63 г L-аспартата натрия (80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия) в течение такого же периода. Перед началом исследования и в сыворотке, полученной из крови, собранной через 10, 20 и 30 дней лечения, определяли значения ЛГ, тестостерона и количества и нарастающей быстрой подвижности сперматозоидов. Гормональные анализы ЛГ и тестостерона осуществляли с использованием специфичных промышленных наборов для клинического химического применения. Семенную жидкость собирали посредством мастурбации после 3-5 дней воздержания. Количество сперматозоидов и их нарастающую быструю подвижность определяли в соответствии с рекомендациями(Всемирной Организации Здравоохранения), ВОЗ, с использованием камеры Маклера для подсчета (SefiMedtstl Instrument, Хайфа, Израиль) и в том же месте определяли нарастающую быструю подвижность. Следует указать на то, что это исследование проводили на выбранных субъектах, имеющих количество сперматозоидов в семенной жидкости от 15000000 до 20000000/мл, что является минимальными пороговыми значениями в пределах нормального интервала. Этот подход был основан на предварительных исследованиях, указывающих на то, что эффект D-аспартата на улучшение сперматогенеза оценивался с более высокой очевидностью у субъектов, вырабатывающих не слишком высокое количество сперматозоидов. Вероятно, это является результатом того факта, что субъекты, вырабатывающие относительно низкое количество сперматозоидов, имеют также более высокий % сперматозоидов, не достигающих созревания и деградирующих во время сперматогенеза. В этом случае, следовательно, действиеD-аспартата стимулирует их созревание до жизнеспособных сперматозоидов. Полученный результат указывает на то, что применение D-аспартата натрия статистически улучшало значения для гормонов ЛГ и тестостерона (специфичных гормонов, вовлеченных в сперматогенез) и количества и нарастающей быстрой подвижности сперматозоидов. Конкретно, ежедневное лечение 3,12 г D-аспартата натрия индуцировало среднее увеличение значений ЛГ в крови на 25,6%. Исходя из среднего значения, равного 4,3 мЕд/мл для контролей, получали значение, равное 5,4 мЕд/мл у людей после приема внутрь D-аспартата (Р 0,01). Такой же эффект наблюдали для тестостерона, проходящего от значения в сыворотке, равного 4,8 нг/мл перед лечением до значения в сыворотке, равного 6,3 нг/мл после лечения, что составляет 31,2% увеличение (Р 0,01) (табл. 6, часть А, 1 группа людей). Кроме того, количество и нарастающая подвижность сперматозоидов значительно увеличиваются по сравнению с контролями. В этом случае, фактически, общее количество сперматозоидов, обнаруженное перед приемом внутрь D-аспартата, составляло 18000000, и после лечения D-аспартатом 23000000, оба средние значе- 11021832 ния, следовательно, 27% увеличение (табл. 6, часть В; первая группа из 10 людей). Кроме того, подвижность также значительно увеличивалась на 28% после лечения D-аспартатом по сравнению со значениями перед лечением (табл. 6, часть В, 1 группа из 10 людей) (Р 0,01). Интересно отметить, что далее наблюдали, что как для кроликов (см. выше), так и для людей лечение смесью, состоящей из L-аспартата натрия, объединенного с D-аспартатом натрия, приводило к невыраженному улучшению по сравнению с применением одного D-аспартата натрия как для гормонов в крови (ЛГ и тестостерона), так и качества семенной жидкости. В этом втором эксперименте, фактически,авторы наблюдали, что в группе людей, которые принимали ежедневно дозу, состоящую из 2,49 г Dаспартата натрия и 0,63 г L-аспартата натрия (80% D-Asp; 20% L-Asp), дополнительно улучшалась эффективность детородного действия по сравнению с контролем. Среднее значение ЛГ увеличивалось на 38,6% по сравнению с контролем (те же люди перед лечением) против 25,6% возрастания, наблюдаемого с использованием одного D-аспартата натрия (табл. 6, часть А; 2 группа из 10 людей). Такое же явление имеет место для тестостерона. Этот стероидный гормон, в действительности, после лечения Lаспартатом, объединенным с D-аспартатом, увеличивался на 47,8% по сравнению с контролем (те же люди перед началом терапии), в то время как с использованием одного D-аспартата возрастание происходило на 31,2% (табл. 6, часть А; вторая группа из 10 людей). Кроме того, улучшались также количество и подвижность сперматозоидов. Исходя из среднего значения, равного 19500000/мл перед терапией до значения, равного 28000000/мл, улучшение на 43% (табл. 6, часть В; 2 группа из 10 людей). Кроме того,для последней терапии также получали улучшение качества сперматозоидов. Фактически, количество быстрых нарастающих сперматозоидов, полученных с применением L-аспартата натрия с соадъювантом в виде D-аспартата натрия, проходит путь значений от 34 до 50% перед и после лечения соответственно,что составляет 47% увеличение (табл. 6, часть В; 2 группа из 10 людей). Табл. 6 показывает эффект Dаспартата натрия и D-аспартата натрия + L-аспартат натрия на увеличение гормонов ЛГ и тестостерона и на количество и качество сперматозоидов в человеческой семенной жидкости. Результаты относятся к средним значениям от 10 25-40-летних субъектов перед лечением и после ежедневного приема внутрь в течение 30 дней 3,0 г D-аспартата натрия/день (1 группа из 10 людей) и группе из 10 субъектов того же возраста перед лечением и после ежедневного приема внутрь в течение 30 дней 2,49 г D-аспартата натрия и 0,63 г L-аспартата натрия (80% D-аспартата натрия и 20% Lаспартата натрия). Значения в скобках в части А таблицы относятся к проценту возрастания ЛГ и тестостерона перед соответствующим лечением и после него. Значения со звездочкой части В таблицы относятся к процентному значению, равному количеству быстрых нарастающих, медленных, неподвижных сперматозоиды в расчете от 100. Значения в скобках части В таблицы относятся к проценту увеличения общих и быстрых нарас- 12021832 тающих сперматозоидов. Увеличения всех значений в скобках (ЛГ, тестостерона, общего количества и быстрых нарастающих сперматозоидов) все являются значимыми (Т-Стьюдент; Р 0,01). Результаты, полученные от этих экспериментов, продемонстрировали, что значения ЛГ и тестостерона увеличиваются значительно в течение дней лечения и до приблизительно 30 дней лечения по сравнению с исходным значением (перед лечением). В последующем, такое увеличение остается постоянным, если лечение продолжается в течение дальнейшего периода времени. Напротив, количество сперматозоидов в семенной жидкости продолжает увеличиваться нарастающе вплоть до 90-го дня терапии. На фиг. 1 и 2 приведена диаграмма возрастающих значений для ЛГ и тестостерона в человеческой крови перед лечением и после лечения композицией в соответствии с изобретением (80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия). На фиг. 3 и 4 приведена диаграмма возрастающих значений количества сперматозоидов и их нарастающей быстрой подвижности перед лечением и после лечения композицией в соответствии с изобретением. Определение D-аспарагиновой кислоты в человеческой семенной жидкости 2 мл Семенной жидкости, полученной от каждого пациента, разбавляли в 10 мл 0,2 М ТСА (трихлоруксусной кислоты) для депротеинизации и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 30 мин. Супернатант, содержащий D-аспарагиновую кислоту и другие аминокислоты, очищали на катионообменной колонке (14 см), как описано в ссылках 18-21. Вкратце, на 24 AG-50W-X8; 200-400 меш, BioRad, в колонку с ионообменной смолой добавляли полученный выше ТСА супернатант семенной жидкости. После абсорбции образца колонку промывали 10 мл 0,001 М HCl и затем элюировали 10 мл 4 М гидроксида аммония. Этот элюат, содержащий очищенные аминокислоты, сушили на теплой пластине для удаления аммиака, и остаток растворяли в 2 мл дистиллированной воды, и D-аспарагиновую кислоту определяли посредством ВЭЖХ или колориметрическим методом, основанным на применении Dаспартатаоксидазы (очищенной из бычьей почки), как приведено в статье авторов изобретения (ссылки 18-21). Фиг. 5 показывает пример результата анализа ВЭЖХ стандартного образца, состоящего из стандартной смеси D-аспарагиновой кислоты вместе со смесью L-аминокислот. Левое изображение показывает результат анализа ВЭЖХ стандартной смеси, состоящей из D-Asp и других L-аминокислот. Диаграмма представляет пример хроматограммы, полученной с использованием 10 пикомолей D-Asp и 20 пикомолей следующих других аминокислот: Glu, Asn, Gin, Ser, Thr, His, Gly,Arg, Wing, Таурина, ГАМК, Tyr, Val, Met, Leu, Ile, Phe и Lys. D-Asp элюируется при 5,2 мин, с последующим элюированием L-Asp и других L-аминокислот. Правое изображение относится к тому же образцу, но после обработки D-аспартатоксидазой. В этом случае фермент D-аспартатоксидаза, который является специфичным для окисления только D-Asp,устраняет пик при времени элюирования, равного 5,2 мин, таким образом, подтверждая, что этот пик действительно происходит от D-аспарагиновой кислоты. Статистический анализ данных выражен как среднее значениеSD с использованием Стьюдент Т-теста. Р 0,05 считали статистически значимым. Пример 5. Исследование эффектов комбинации 50% D-аспартата натрия и 50% L-аспартата натрия на людях Проводили дополнительные исследования, включающие лечение другой группы из 10 25-40-летних людей, смесью, состоящей из 1,56 г D-аспартата натрия + 1,56 г L-аспартата натрия (50% D-Asp:50% LAsp), в виде ежедневной дозы в течение 30 дней. Полученные результаты указывают на то, что в этом случае также получали улучшение как значений в крови ЛГ и тестостерона, так и качества семенной жидкости, но менее эффективное по сравнению с применением смеси, состоящей из 80% D-аспартата натрия и 20% L-аспартата натрия. В этом случае в действительности значения ЛГ и тестостерона увеличивались значительно, т.е. на 30 и 38% соответственно, по сравнению с исходными значениями. Кроме того, количество сперматозоидов и их нарастающая быстрая подвижность также значительно увеличивались на 45% по сравнению с контролями (данные не показаны в таблице). Следовательно, также с использованием D-Asp+L-Asp наблюдали очень значительное улучшение параметров спермы, но ниже, чем с использованием 80% D-Asp и 20% L-Asp. В заключение, как наблюдали для кроликов, так и для людей лечение L-аспартатом натрия, объединенным с D-аспартатом натрия, приводит к значительному улучшению как значений ЛГ и тестостерона в крови, так и количества и подвижности сперматозоидов в семенной жидкости по сравнению с лечением,состоящим из применения одного D-аспартата натрия. Пример 6. Получение пищи для кроликов, содержащей несколько комбинаций D-аспарагиновой иL-аспарагиновой кислот Пример 6 А. Получение пищи, содержащей комбинацию 80% D-аспарагиновой и 20% Lаспарагиновой кислот 2 кг Пищи для кроликов в 4 л дистиллированной воды гомогенизируют миксером при 60-70 С вплоть до образования гомогенной смеси. Затем добавляют 9,12 г D-аспарагиновой кислоты и 2,28 г L- 13021832 аспарагиновой кислоты (всего 11,4 г) и смесь снова гомогенизируют с получением гомогенной дисперсии D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот в пищевом замесе. В конце воду упаривают посредством нагрева в печи, пока пища снова не станет твердой. Пищу охлаждают, нарезают кубиками по 5-10 г и применяют для кормления животных. Таким образом, 1 г пищи будет содержать 4,56 мг D-аспарагиновой кислоты и 1,14 мг L-аспарагиновой кислоты. Пример 6 В. Получение пищи, содержащей комбинацию 50% D-аспарагиновой и 50% L-аспарагиновой кислот 2 кг Пищи для кроликов в 4 л дистиллированной воды гомогенизируют миксером при 60-70 С вплоть до образования гомогенной смеси. Затем добавляют 5,7 г D-аспарагиновой кислоты и 5,7 г Lаспарагиновой кислоты (всего 11,4 г) и смесь снова гомогенизируют с получением гомогенной дисперсии D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот в пищевом замесе. В конце воду упаривают в печи или нагревом на слабом огне, пока пища снова не станет твердой. Пищу охлаждают, нарезают кубиками по 510 г и применяют для кормления животных. Таким образом, 1 г пищи будет содержать 2,85 мг D-аспарагиновой кислоты и 2,85 мг L-аспарагиновой кислоты. Пример 6 С. Получение пищи, содержащей комбинацию 99,5% D-аспарагиновой и 0,05% L-аспарагиновой кислот 2 кг Пищи для кроликов или крыс в 4 л дистиллированной воды гомогенизируют кухонным миксером при 60-70 С вплоть до образования гомогенной смеси. Затем добавляют 11,43 г D-аспарагиновой кислоты и 0,570 г L-аспарагиновой кислоты (всего 11,4 г) и смесь снова гомогенизируют с получением гомогенной дисперсии D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислоты в пищевом замесе. В конце воду упаривают посредством нагрева в печи или на слабом огне, пока пища снова не станет твердой. Пищу охлаждают, нарезают кубиками по 5-10 г и применяют для кормления животных. Таким образом, 1 г пищи будет содержать 5,67 мг D-аспарагиновой кислоты и 0,03 мг L-аспарагиновой кислоты. Пример 6D. Получение пищи, содержащей только D-аспарагиновую кислоту или только L-аспарагиновую кислоту 2 кг Пищи для кроликов или крыс в 4 л дистиллированной воды гомогенизируют миксером при 6070 С вплоть до образования гомогенной смеси. Затем добавляют 11,4 г D-аспарагиновой кислоты или 11,4 г L-аспарагиновой кислоты и смесь снова гомогенизируют с получением гомогенной дисперсии Dаспарагиновой или L-аспарагиновой кислоты в пищевом замесе. В конце воду упаривают посредством нагрева в печи или на слабом огне, пока пища снова не станет твердой. Пищу охлаждают, нарезают кубиками по 5-10 г и применяют для кормления животных. Таким образом, 1 г пищи будет содержать 5,7 мг D-аспарагинов кислоты или 5,7 мг L-аспарагиновой кислоты. Пример 7. Исследование эффектов комбинации 80% D-аспарагиновой и 20% L-аспарагиновой кислоты на количество и подвижность сперматозоидов кролика Исследование проводили на двух группах кроликов. Первую группу, состоящую из 10 кроликов, в возрасте 6 месяцев (приблизительно 5 кг массы тела), кормили в течение 20 дней пищевой смесью, содержащей смесь 80% D-аспарагиновой и 20% L-аспарагиновой кислот (см. выше "Пример получения пищи, содержащей комбинацию 80% D-аспарагиновой кислоты и 20% L-аспарагиновой кислоты"). Вторую группу того же возраста из 10 кроликов, представляющую контрольную группу (или плацебо), кормили в течение 20 дней пищей такого же типа, как полученной выше, но без добавления смеси Dаспарагиновой и L-аспарагиновой кислот. Эксперименты проводили на ферме по разведению кроликов("Potenza Breeders' Association", Потенца, Италия). Перед началом и в конце эксперимента от каждого кролика собирали образец спермы посредством стимуляции с искусственной вагиной (см. статью G.Macchia et al., DL-aspartic acid administration improve semen quality in rabbit bucks, опубликованную в "Animal Reproduction Science", 118, 337-343, 2010) и определяли общее количество сперматозоидов/мл эякулята и их подвижность. Количество сперматозоидов и нарастающую быструю подвижность определяют в соответствии с рекомендациями (Всемирной Организации Здравоохранения), ВОЗ, с использованием камеры Маклера для подсчета (Sefi Medtstl Instrument, Хайфа, Израиль) и в том же месте определяли нарастающую быструю подвижность. Сперму кролика разбавляли 1:10 в изоосмотическом растворе, вследствие избыточной концентрации, и затем анализировали (замечание: каждый кролик весил приблизительно 5 кг и потреблял приблизительно 200 г пищи ежедневно. Поскольку 1 г пищи содержал 4,56 мг D-аспарагиновой кислоты и 1,14 мг L-аспарагиновой кислоты, в результате получали, что в день кролик потреблял всего 912 мг D-аспарагиновой кислоты и 228 мг L-аспарагиновой кислоты). Результат, полученный от этого исследования, продемонстрировал, что прием внутрь смеси 80% Dаспарагиновой кислоты и 20% L-аспарагиновой кислоты статистически улучшал количество сперматозоидов в семенной жидкости, т.е. выработку, в среднем, на 22%. Исходили из среднего значения, равного 320000000 сперматозоидов/мл семенной жидкости для кроликов перед лечением, до среднего значения,равного 358000000/мл после приема внутрь смеси D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот (табл. 7; часть А; 1 группа из 10 кроликов). Кроме того, в тех же самых семенных жидкостях кроликов, подвергнутых лечению, также наблюдали улучшение нарастающей быстрой подвижности сперматозоидов, изменяющейся от 38% (это значение процентного содержания относится к количеству быстрых нарастающих сперматозоидов от полного количества, равного 100 сперматозоидам, наблюдаемым в микроскопе) до 54%, как и для среднего значения, которое составляет увеличение в 1,42 раза с Р 0,01 значимостью(табл. 7, часть В, 1 группа кроликов). В группе кроликов, т.е. контрольной группе (или плацебо), отсутствовало статистически значимое улучшение как общего количества сперматозоидов/мл семенной жидкости (табл. 7, часть А, 2 группа кроликов), так и их подвижности (табл. 7, часть В, 2 группа кроликов). Таблица 7. Эффект смеси, состоящей из 80% D-аспарагиновой кислоты и 20% L-аспарагиновой кислоты,на увеличение количества и качества сперматозоидов в семенной жидкости кролика Результаты представляют средние значения для группы из 10 взрослых кроликов (в возрасте 6 месяцев приблизительно 5 кг масса тела) перед лечением и через 20 дней после приема внутрь смеси Dаспарагиновой и L-аспарагиновой кислот. Количество аминокислот, принимаемое внутрь ежедневно кроликом, составляло 912 мг D-аспарагиновой кислоты и 228 мг L-аспарагиновой кислоты. Значения, приведенные в части А таблицы, относятся к среднему количеству сперматозоидов/мл семенной жидкости перед лечением лекарственным средством и после 20 дней лечения. Значения, приведенные в части В таблицы, относятся к подвижности сперматозоидов с точки зрения быстрых, медленных и неподвижных сперматозоидов в расчете от 100. Увеличения количества сперматозоидов и их подвижности у кроликов, подвергнутых лечению смесью D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот, являются все значимыми (Стьюдент Т=Р 0,01). Пример 8. Исследование эффектов комбинации 50% D-аспарагиновой кислоты и 50% L-аспарагиновой кислоты на количество и подвижность сперматозоидов кролика Это исследование также проводили на двух группах с одними и тем же возрастом и массой кроликов, как использовали для предыдущего исследования. Различие в данном случае состояло в том, что группе кроликов, подвергаемых лечению, вводили пищу, содержащую смесь 50% D-аспарагиновой кислоты и 50% L-аспарагиновой кислоты, в течение 20 дней (см. выше получение "Пример получения пищи, содержащей комбинацию 50% D-аспарагиновой кислоты и 50% L-аспарагиновой кислоты"), а вторую группу из 10 кроликов использовали в качестве контроля. В этом случае также семенную жидкость собирали перед и после экспериментом и затем исследовали количество сперматозоидов и их подвижность. Результаты, полученные от этого исследования, продемонстрировали, что с использованием смеси,состоящей из 50% D-аспарагиновой кислоты и 50% L-аспарагиновой кислоты, также получали улучшение выработки, т.е. количества сперматозоидов в семенной жидкости и их подвижности (см. табл. 8). В действительности, как приведено в табл. 8, при этом лечении получали 16% возрастание количества сперматозоидов, значимое для Р 0,01, а также возрастание их подвижности в 1,27 раза, снова значимое для Р 0,01. В табл. 8 полученные результаты представлены подробно. Результаты представляют средние значения, полученные для группы из 10 взрослых кроликов (в возрасте 6 месяцев приблизительно 5 кг масса тела) перед лечением и через 20 дней лечения посредством приема внутрь смеси D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот. Количества аминокислот, вводимых ежедневно кроликам, составляло 570 мг D-аспарагиновой кислоты и 570 мг L-аспарагиновой кислоты. Значения, приведенные в части А таблицы, относятся к среднему количеству сперматозоидов/мл семенной жидкости перед лечением лекарственным средством и после 20 дней лечения. Значения, приведенные в части В таблицы, относятся к подвижности сперматозоидов с точки зрения быстрых, медленных и неподвижных сперматозоидов в расчете от 100. Увеличения количества сперматозоидов и их подвижности у кроликов, подвергнутых лечению смесью D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот, являются все значимыми (Стьюдент Т=Р 0,01). Для контрольных кроликов сделана ссылка на ту же группу кроликов, как приведено в табл.7. Пример 9. Исследование эффектов комбинации 99,5% D-аспарагиновой кислоты и 0,05% L-аспарагиновой кислоты на количество и подвижность сперматозоидов на кроликах Это исследование, проведенное на кроликах, также выполняли тем же образом, что и предыдущие исследования. Отличие в этом случае состояло в том, что группе кроликов, подвергнутых лечению, вводили пищу, содержащую смесь D-аспарагиновой и L-аспарагинов кислот при отношении 99,5:0,05 (см. выше пример 3 "Получение пищи, содержащей комбинацию из 99,5 % D-аспарагиновой кислоты и 0,05%L-аспарагиновой кислоты"). В этом случае также общее количество D-Asp + L-Asp, принимаемое внутрь ежедневно кроликами, составляло приблизительно 1,140 г. Результаты, полученные от этого исследования, продемонстрировали, что с использованием смеси,состоящей из 99,5 % D-аспарагиновой кислоты и 0,05% L-аспарагиновой кислоты, также получали 18,6% улучшение выработки, т.е. количества сперматозоидов в семенной жидкости, и 31% (+1,31) возрастание их быстрой подвижности (см. табл. 9). Результаты представляют средние значения для группы из 10 взрослых кроликов (в возрасте 6 месяцев приблизительно 5 кг масса тела) перед лечением и через 20 дней приема внутрь смеси D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот. Количества аминокислот, принимаемых внутрь ежедневно кроликом,составляло 570 мг D-аспарагиновой кислоты и 570 мг L-аспарагиновой кислоты. Значения, приведенные в части А таблицы, относятся к среднему количеству сперматозоидов/мл семенной жидкости перед лечением лекарственным средством и после 20 дней лечения. Значения, приведенные в части В таблицы, относятся к подвижности сперматозоидов с точки зрения быстрых, медленных и неподвижных сперматозоидов в расчете от 100. Увеличения количества сперматозоидов и их подвижности у кроликов, подвергнутых лечению смесью D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот, являются все значимыми (Стьюдент Т=Р 0,01). Пример 10. Исследование эффектов L-аспарагиновой кислоты на количество и подвижность сперматозоидов на кроликах В литературе сообщается, что D-аспарагиновая кислота в тканях животных, включая человека, обнаружена в некоторых тканях при высокой концентрации в эндокринных железах: гипофизе и семенниках, и синтезируется в организме посредством фермента, называемого D-аспартатрацемаза, имеющего свойство синтезировать D-аспарагиновую кислоту посредством конверсии L-аспарагиновой кислоты Ферментативную активность определяют посредством инкубации 1 мл реакционной смеси, состоящей из 10 мМ L-Asp 10 в боратном буфере 0,М рН 8,0 при 37 С в течение 60 мин, с 1 мл гомогената ткани 1:10 в боратном буфере, 0,1 М рН 8,0. После инкубации количество синтезированной D-аспарагиновой кислоты определяли посредством ВЭЖХ (см. ссылку 23). 1 Единица фермента определяется как количество фермента, подходящее для превращения 1 мкмоль L-Asp в D-Asp в условиях ферментативного теста. Поскольку рацемизация является равновесной реакцией, если посредством диеты количество Lаспарагиновой кислоты принимают внутрь, ее определенное количество будет превращаться в D- 17021832 аспарагиновую кислоту, которая, в свою очередь, будет захвачена семенником, что приводит в результате к улучшенным выработке тестостерона и качеству семенной жидкости с точки зрения количества и подвижности сперматозоидов. На основе этой концепции авторы изобретения провели эксперимент на кроликах, сходный с предыдущими экспериментами, но вводя пищу, содержащую L-аспарагиновую кислоту (полученную, как описано выше), но с использованием L-аспарагиновой кислоты вместо D-аспарагиновой кислоты. В этом случае также общее количество L-аспарагиновой кислоты, ежедневно принимаемое внутрь кроликом, составляло приблизительно 1,1 г. Результат, полученный от этого исследования, продемонстрировал, что посредством кормления кроликов пищей, содержащей L-аспарагиновую кислоту вместо D-аспарагиновой кислоты, также получали улучшение выработки, т.е. количество сперматозоидов в семенной жидкости, не в такой степени,как для смеси D-Asp/L-Asp, но все еще значимое. В этом случае наблюдали возрастания количества сперматозоидов на 14,5% и быстрой подвижности сперматозоидов на 18% по сравнению с соответствующими значениями для спермы перед лечением (см. табл. 11). Результаты представляют средние значения, полученные на группе из 10 взрослых кроликов (в возрасте 6 месяцев приблизительно 5 кг масса тела) перед лечением и через 20 дней приема внутрь смеси Dаспарагиновой и L-аспарагиновой кислот. Количество аминокислоты, принимаемое внутрь ежедневно кроликом, составляло 1,14 г. Значения, приведенные в части А таблицы, относятся к среднему количеству сперматозоидов/мл семенной жидкости перед лечением лекарственным средством и после 20 дней лечения. Значения, приведенные в части В таблицы, относятся к подвижности сперматозоидов с точки зрения быстрых, медленных и неподвижных сперматозоидов в расчете от 100. Увеличения количества сперматозоидов и их подвижности у кроликов, подвергнутых лечению Lаспарагиновой кислоты, являются все значимыми (Стьюдент Т=Р 0,01). Вывод по результатам, полученным по эффекту применения D-аспарагиновой кислоты и Lаспарагиновой кислоты на улучшение семенной жидкости кролика. Исследование, проводимое на кроликах, по эффекту L-аспарагиновой кислоты вместе с соадъювантом в виде D-аспарагиновой кислоты продемонстрировало, что эта аминокислота, а также Dаспарагиновая кислота, используемая по отдельности или в комбинации с L-аспарагиновой кислотой,необязательно нейтрализованные ионами натрия, проявляет способность к улучшению активности спермы у экспериментальных животных, что является аналогичным применению D-аспартата натрия по отдельности или в комбинации с L-аспартатом натрия. Однако интересно отметить, что, когда применяют D-аспартат натрия и L-аспартат натрия, а также применяют D-аспарагиновую кислоту в комбинации с L-аспарагиновой кислотой в соотношении, равном 80% D-аспарагиновой и 20% L-аспарагиновой кислот, существует формула дозы, проявляющей лучший эффект на активность спермы (см. сравнение табл. 7, 8 и 9). Кроме того, другие исследования, проводимые также с использованием только L-аспарагиновой кислоты, продемонстрировали, что в любом случае получали улучшение параметров семенной жидкости,хотя и не такое высокое, как в случае применения D-аспарагиновой кислоты, улучшение параметров семенной жидкости также было значимым (см. табл. 11). Причиной этих результатов, очевидно, является превращение L-аспарагиновой кислоты в D-аспарагиновую кислоту посредством рацемазы. Пример 11. Исследование на человеке - эффекты комбинации из 80% D-аспарагиновой кислоты и 20% L-аспарагиновой кислоты на мужское бесплодие Это исследование проводили, чтобы узнать, может ли в дополнение к D-аспартат/L-аспартату смесь, состоящая из D-аспарагиновой кислоты в комбинации с L-аспарагиновой кислотой, приводить к значимым улучшениям возрастания мужского полового гормона и улучшению семенной жидкости, как это происходит с использованием аспартата натрия, как приведено в первой части настоящего патента. Эксперимент проводили на 10 25-40-летних мужчинах-добровольцах, выбранных по качеству семенной жидкости, которая была нормальной или почти нормальной. Исследование включало в себя пероральный прием внутрь тестируемыми субъектами дозы, состоящей из 1,6 г D-аспарагиновой кислоты и 0,4 г L-аспарагиновой кислоты (общее количество 2,0 г) после ланча и аналогичной дозы после обеда. С точки зрения процентного содержания композиции смесь состояла из 80% D-аспарагиновой кислоты и 20% L-аспарагиновой кислоты. Подобно методике приема внутрь смесь D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислоты предпочтительно диспергировали в наполовину заполненном стакане, содержащем воду или свежий или хранимый фруктовый сок (апельсиновый, яблочный, грушевый и т.д.), затем перемешивали и принимали внутрь. Перед началом исследования и после 20 дней лечения утром от каждого субъекта собирали кровь и концентрацию ЛГ (лютеинизирующего гормона) и тестостерона определяли в сыворотке, полученной из указанной крови. Кроме того, от каждого субъекта также собирали семенную жидкость, для которой определяли быструю нарастающую подвижность вместе с общим количеством сперматозоидов/мл спермы. Семенную жидкость собирали посредством мастурбации после 3-5 дней воздержания. Количество сперматозоидов и нарастающую быструю подвижность определяли в соответствии с рекомендациями(Всемирной Организации Здравоохранения), ВОЗ, с использованием камеры Маклера для подсчета (SefiMedtstl Instrument, Хайфа, Израиль), и в том же месте, определяли нарастающую быструю подвижность. Результат, полученный от этого исследования, показывает, что у 8 из 10 людей, подвергнутых лечению, происходило увеличение гормонов ЛГ и тестостерона (специфичных гормонов, вовлеченных в человеческий сперматогенез) в сыворотке, для значений перед лечением и после 20 дней лечения и такое увеличение было значимым для Т-Стьюдента р 0,01. Полученные результаты приведены в табл. 10. Как выводится из этой таблицы, лечение двумя ежедневными дозами D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот приводило к среднему увеличению значений ЛГ в крови на 34%. Исходя из среднего значения,равного 4,1+1,2 мЕд/мл у субъектов в нулевой момент времени до среднего значения, равного 5,51,5 мЕд/мл у тех же субъектов после 20 дней терапии, это означает 34% увеличение. Аналогичный эффект наблюдали для тестостерона. В этом случае, в действительности, от среднего значения тестостерона 3,4+0,9 мЕд/мл у субъектов в нулевой момент времени (начале отсчета) до среднего значения, равного 5,81,6 мЕд/мл у тех же субъектов после 20 дней терапии (70% увеличение), р 0,01 (табл. 10, часть А). В дополнение к гормональному эффекту исследование очевидно показывает, что в результате лечения смесью D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот количество сперматозоидов в семенной жидкости и их нарастающая подвижность значительно увеличиваются по сравнению с контролем (табл. 11). В действительности, как приведено в табл. 10, у 9 из 10 субъектов общее количество сперматозоидов в семенной жидкости в результате лечения существенно увеличивалось с 51,4% среднего возрастания (табл. 11). Заслуживает упоминания также наблюдение, что субъект совсем не реагировал на стимуляцию лекарственным средством (образец 4 в таблице). Очевидно, очень вероятно, что эти результаты обусловлены наличием у субъекта не метаболического, но обструктивного нарушения семявыводящих протоков. В дополнение к увеличенному количеству сперматозоидов также наблюдали значимое возрастание их подвижности. По эффектам лекарственное средство также индуцировало значительную активацию нарастающей подвижности сперматозоидов. В этом случае также, в действительности, все субъекты ( 4 исключен) проявляли значимое улучшение подвижности сперматозоидов (на 67,6%) по сравнению с теми же субъектами перед терапией (табл. 11). Таблица 12. Эффект D-аспарагиновой (80%) кислоты и L-аспарагиновой кислоты (20%) на возрастание ЛГ и тестостерона в человеческой сыворотке и на количество и качество сперматозоидов в человеческой семенной жидкости Часть С Быстрая нарастающая подвижность сперматозоидов Замечание Каждое значение подвижности относится к жидкому образцу семенной жидкости такого же субъекта, как приведено в разделе В. Подвижность сперматозоидов означает нарастающую скорость, как определяют на основании времени пробега в поле окуляра и выражают в виде процентной части нарастающих быстрых сперматозоидов из 100 наблюдаемых сперматозоидов. Средние возрастания для гормонов,количество и подвижность сперматозоидов все являются значимыми по Т-Стьюденту; Р 0,01. Дополнительно, следует обратить внимание, что дополнительные эксперименты проводили на других группах из 10 людей с использованием комбинаций из 50% D-аспарагиновой и 50% L-аспарагиновой кислот и 99,5% D-аспарагиновой и 0,05% L-аспарагиновой кислот, как применяли для экспериментов на кроликах. На людях также получали статистически положительные результаты, касающиеся увеличения половых гормонов и качества спермы. В этом случае, однако, активность усиления была ниже, чем для комбинации 80% D-аспарагиновой и 20% L-аспарагиновой кислот, но, однако, все еще статистически значимой. В конце, на людях проводили эксперимент с применением одной L-аспарагиновой кислоты вместо комбинации D-Asp/L-Asp, как приведено выше. В этом случае значения для ЛГ и тестостерона в крови перед терапией и после нее не изменялись, но параметры семенной жидкости были статистически улучшены (см. табл. 13). В действительности, как показано в указанной таблице, количество сперматозоидов в семенной жидкости у субъектов, подвергнутых лечению L-аспарагиновой кислотой, значительно увеличивалось на 22,7% перед лечением и после лечения D-аспарагиновой кислотой. Таблица 13. Эффект L-аспарагиновой кислоты на качество человеческой семенной жидкости Часть В Нарастающая быстрая подвижность сперматозоидов Замечание Каждое значение подвижности относится к жидкому образцу семенной жидкости такого же субъекта, как приведено в разделе В. Подвижность сперматозоидов означает нарастающую скорость, как определяют на основании времени пробега в поле окуляра и выражают в виде процентной части нарастающих быстрых сперматозоидов из 100 наблюдаемых сперматозоидов. Средние возрастания для гормонов,количество и подвижность сперматозоидов все являются значимыми по Т-Стьюденту; Р 0,01. Получение добавки и комбинации с эксципиентами Что касается пути приема внутрь добавки, то следует обратить внимание на то, что D-аспарагиновая и L-аспарагиновая кислоты обе являются труднорастворимыми в водных растворителях. Следовательно, 2 г предлагаемой дозы (2 г 2 раза ежедневно, см. выше), смешанные с водой или половиной стакана фруктового сока, полностью не растворяются. Однако также, если дозу принимают внутрь в виде полунерастворимой смеси, в желудке она разбавляется обильной жидкостью и желудочными соками,таким образом, становясь растворимой и всасываемой в кишечнике. Прием использовать добавку в виде двух доз, каждая из которых содержит 2 г, при двух основных кормлениях, приводит к лучшей эффективности, чем применение ежедневной дозы. Что касается возможности добавления эксципиентов (витаминов, кофермента Q-10, минеральных солей и т.д.) к указанному лекарственному средству во время промышленного получения, добавление подходящей дозы следующих добавок может быть полезным для усиления действия лекарственного средства с точки зрения эффективности: оксида цинка в количестве 5-10 мг/доза лекарства (цинк присутствует в семенной жидкости и полагают, что он положительно воздействует на регуляцию тестостерона в простате). Кофермент Q-10 в количестве 10-20 мг/доза лекарства (кофермент Q-10 является важным антиоксидантным средством и защищает клетки от свободных радикалов) и другие эксципиенты являются полезными для улучшения приемлемости лекарственного средства, как, например, витамины, фолиевая кислота и т.д. в количествах, принятых для пищевого применения. Библиография ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения мужского бесплодия, включающий введение композиции, содержащей комбинацию или состоящей из комбинации D-аспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или одной или более их соответствующих солей с щелочными или щелочно-земельными металлами. 2. Способ по п.1, где в композиции, содержащей комбинацию или состоящей из комбинации Dаспарагиновой и L-аспарагиновой кислот или одной или более их соответствующих солей с щелочными или щелочно-земельными металлами, концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей составляет от 50 до 99,5%, а концентрация L-аспарагиновой кислоты или ее солей составляет от 0,05 до 50%, указанные значения процентного содержания приводятся в расчете от общей массы D-аспарагиновой и Lаспарагиновой кислот или их солей. 3. Способ по любому из пп.1, 2, где концентрация D-аспарагиновой кислоты или ее солей составляет от 50 до 80%, а концентрация L-аспарагиновой кислоты или ее солей составляет от 20 до 50%, указанные значения процентного содержания приводятся в расчете от общей массы D-аспарагиновой и L- 23021832 аспарагиновой кислот или их солей. 4. Способ по любому из предшествующих пунктов, где композиция дополнительно включает один или более фармацевтически приемлемых эксципиентов и/или соадъювантов, где указанные соадъюванты выбраны из группы, состоящей из аминокислот, кетокислот, витаминов, минералов, гормонов, стимулирующих репродуктивную функцию, калликреина, антибиотиков, противовоспалительных средств, антиандрогенов, андрогенов, пентоксифиллина, гонадотропина, гонадотропин-высвобождающего гормона(GnRH), адренергических стимуляторов, диетических добавок, антиоксидантов, кетокислот. 5. Способ по п.4, где аминокислоты выбирают из группы, состоящей из аланина, аргинина, карнитина, цистеина, глутамина, глицина, лейцина, лизина, изолейцина, метионина, орнитина, фенилаланина,треонина, триптофана, валина, серина. 6. Способ по п.4, где витамины выбирают из группы, состоящей из витамина А, С, D3, Е, K, B1, B2,В 6, В 12, РР, биотина (Н), фолиевой кислоты, липоевой кислоты и кофермента Q10. 7. Способ по п.4, где минералы выбирают из группы, состоящей из магния, калия, цинка, марганца,молибдена, хрома, селена, кальция, железа, меди, йода, фосфора, фтора. 8. Способ по любому из пп.4-7, где концентрации витаминов изменяются, как указано ниже: витамина А от 0,0048 до 0,024%, витамина С от 0,36 до 3,6%, витамина D3 от 0,00003 до 0,00015%, витамина Е от 0,06 до 0,6%, витамина K от 0,00042 до 0,0021%, витамина B1 от 0,0084 до 0,042%, витамина В 2 от 0,0096 до 0,048%, витамина В 6 от 0,012 до 0,06%, витамина В 12 от 610-6 до 310-5%, витамина РР от 0,108 до 0,54%, биотина от 0,0009 до 4,410-5%, фолиевой кислоты от 0,0012 до 0,006%, указанные значения процентного содержания являются % массы в расчете от общей массы композиции. 9. Способ по любому из пп.4-8, где концентрации минералов изменяются в соответствии со следующими значениями процентного содержания: магния от 3,2 до 9%, калия от 0,4 до 4%, цинка от 0,09 до 0,45%, марганца от 0,02 до 0,07%, молибдена, хрома или селена от 0,0003 до 0,002%, пантотената кальция от 0,04 до 0,15%, железа от 0,084 до 0,021%, меди от 0,02 до 0,1%, йода от 0,0009 до 0,0045%,фосфора от 2,5 до 20%, фтора от 0,005 до 0,02%, кальция от 3,24 до 16,2%, указанные значения процентного содержания являются % массы в расчете от общей массы композиции. 10. Способ по любому из пп.4-9, где концентрации аминокислот в дополнение к D-аспарагиновой иL-аспарагиновой кислотам составляют от 0,6 до 10 мас.% в расчете от общей массы композиции. 11. Способ по любому из пп.4-10, где указанная композиция дополнительно содержит фолиевую кислоту, витамин В 6, витамин В 12 и консерванты сорбат калия и бензоат натрия. 12. Способ по п.11, где концентрация фолиевой кислоты составляет от 0,002 до 0,006%, концентрация витамина В 6 от 0,02 до 0,06%, концентрация витамина В 12 от 110-5 до 310-5%, концентрация сорбата калия от 0,002 до 0,008%, концентрация бензоата натрия от 0,002 до 0,008%. 13. Способ по любому из предшествующих пунктов, где мужское бесплодие не является обструктивным, отличающееся олиго- и/или астенозооспермией с гипогонадотропным гипогонадизмом или без него. 14. Способ по любому из пп.1-13, где ежедневная доза указанной композиции составляет от 0,001 до 10 г/день.