Пролекарство возбуждающей аминокислоты и его применение

011231 Данное изобретение относится к синтетическому пролекарству возбуждающей аминокислоты (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6 дикарбоновой кислоте или ее фармацевтически приемлемым солям. Далее изобретение относится к применению указанного пролекарства или его фармацевтически приемлемых солей, фармацевтическим композициям, включающим указанное пролекарство или его фармацевтически приемлемую соль для лечения неврологических и психиатрических расстройств. Уровень техники Лечение неврологических или психиатрических расстройств, таких как тревожные расстройства,было связано с селективной активацией метаботропных рецепторов возбуждающих аминокислот. Например, (+)-4-амино-2-сульфонилбицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновая кислота описана в качестве активного агониста mGluR2 рецептора в патенте США 5688826 (патент '826), опубликованном 18 ноября 1997 г. Кроме того, (+)-2-амино-4-фторбицикло[3.1.0]гексан-2,6-дикарбоновая кислота описана в качестве активного агониста mGluR2 рецептора в патенте США 5958960 (патент '960), опубликованном 28 сентября 1999 г. Настоящее изобретение относится к пролекарственным формам соединений агонистов mGluR2 рецептора, которые усиливают активность in vivo соответствующего исходного соединения и оказывают более сильное воздействие исходного соединения при пероральном применении. Соединения по настоящему изобретению представляют улучшенный подход для сохранения безопасности и эффективности описанных ранее агонистов mGluR2 рецептора при увеличенной биологической доступности при пероральном введении. Пролекарства синтетических возбуждающих аминокислот и способы их получения описываются в заявках РСТ, порядковыеPCT/US01/45866 и PCT/US02/00488. В WO 93/06127 раскрыты аминокислотные пролекарства ингибиторов ренина, в J.Med.Chem. 35,1764-1773 раскрыты хинолоновые пролекарства с повышенной растворимостью, в Anti-Cancer Drug Design 14, 539-548 раскрыты аминокислотные пролекарства аминокомбретастатинов, в Mol. Cancer Ther. I,239-246 раскрыты аминокислотные пролекарства бензотиазолов. Сущность изобретения Настоящее изобретение относится к соединению, которое представляет собой (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль. Настоящее изобретение также относится к моногидрату (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. Следующий аспект данного изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем, (1R,4S,5S,6S)4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль. Следующий аспект данного изобретения относится к применению (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио 2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения неврологического расстройства у пациента. Еще один аспект данного изобретения относится к применению (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения психиатрического расстройства у пациента.(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-Метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновая кислота может быть получена способом, аналогичным одному из известных из уровня техники способов получения структурных аналогов гетероциклических соединений, или новым способом, раскрытым в данном описании. Такие способы и промежуточные соединения, полезные для получения (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты проиллюстрированы далее на схемах, где, если не указано иначе, значения радикалов такие, как указано в описании. Способ получения(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26 тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты включает ацилирование соединения (ii)-1 011231 где X представляет собой SO2, R10 представляет собой водород и R11 представляет собой водород; соответствующим аминоацилом формулы III где PgN представляет собой защитную группу для атома азота, и А является метионилом; затем, для любой из вышеуказанных процедур, когда функциональная группа защищена с использованием защитной группы, удаление защитной группы, после этого, для любой из вышеуказанных процедур,когда требуется фармацевтически приемлемая соль(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты, взаимодействие основной формы (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26 тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты с кислотой, дающей фармацевтически приемлемый противоион; или взаимодействие кислотной формы(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты с основанием, которое дает фармацевтически приемлемый катион; или для цвиттерионной (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты нейтрализацию кислотно-аддитивной солевой формы или основно-аддитивной солевой формы(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6 дикарбоновой кислоты, или любой другой традиционной процедурой. Подробное описание изобретения Соединения по изобретению, как было обнаружено, представляют собой применимые пролекарства соединений, которые являются селективными агонистами метаботропных глутаматных рецепторов и,поэтому, применимы для лечения заболеваний центральной нервной системы, таких как неврологические расстройства, например, нейродегенеративных заболеваний, и в качестве антипсихотического, анксиолитического, антиабстинентного, антидепрессивного, противосудорожного, обезболивающего и противорвотного средства. Настоящее изобретение включает фармацевтически приемлемые соли (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. Данные соли могут существовать в сочетании с кислотной или основной частью молекулы и могут существовать в виде кислотно-аддитивных солей первичного, вторичного, третичного или четвертичного аммония, щелочных металлов или щелочно-земельных металлов. Обычно кислотно-аддитивные соли можно получить реакцией кислоты с (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо 26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислотой. Альтернативно, кислотно-аддитивные соли можно приготовить реакцией предпоследнего соединения (блокированного промежуточного соединения) с соответствующими эквивалентами кислоты с получением соответствующей солевой формы, которая, в свою очередь, может прореагировать с получением(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6 дикарбоновой кислоты или других солей. Соли щелочных металлов и щелочно-земельных металлов обычно получают взаимодействием гидроксидной формы соли желаемого металла с (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислотой. Некоторые конкретные соли дают определенные рецептурные преимущества благодаря своей кристаллической форме. Некристаллические аморфные формы соединений могут быть гигроскопичными. Кристаллические формы фармацевтических соединений иногда являются более желательными, поскольку они показывают благоприятные свойства в твердом состоянии. Кислоты, обычно используемые для получения таких солей, включают неорганические кислоты,например, хлористо-водородную, бромисто-водородную, азотную, серную или фосфорную кислоту, или органические кислоты, такие как органические карбоновые кислоты, например, гликолевую, малеиновую, гидроксималеиновую, фумаровую, яблочную, винную, лимонную, салициловую, оацетоксибензойную, или органические сульфоновые, например, 2-гидроксиэтансульфоновую, толуол-псульфоновую, метансульфоновую, нафталин-2-сульфоновую, бензолсульфоновую или этансульфоновую кислоту. Кроме фармацевтически приемлемых солей другие соли могут служить в качестве промежуточных соединений при очистке соединений или при получении других фармацевтически приемлемых кислотноаддитивных солей, или являются применимыми для идентификации, характеризации или очистки. В настоящее изобретение также включены сольваты (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. В частности,изобретение также включает гидраты (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2 диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. Было показано, что различные физиологические функции являются объектом воздействия чрезмерной или несоответствующей стимуляцией передачи возбуждающей аминокислотой. Считается, что соединения по настоящему изобретению обладают способностью лечить различные неврологические рас-2 011231 стройства у млекопитающих, связанные с данным состоянием, включая острое неврологическое расстройство, такое как церебральная недостаточность, являющаяся результатом операции шунтирования или имплантации на сердце, инсульт, ишемия головного мозга, травма спинного мозга, травма головы,перинатальная гипоксия, остановка сердца и гипогликемическое повреждение нейронов. Считается, что соединения по изобретению обладают способностью лечить различные хронические неврологические расстройства, такие как болезнь Альцгеймера, хорея Гентингтона, боковой амиотрофический склероз,СПИД-ассоциированная деменция, поражение зрения и ретинопатия, расстройства познавательной способности и идиопатическая и обусловленная действием лекарственного средства болезнь Паркинсона. Настоящее изобретение также относится к способу лечения данных расстройств с использованием эффективного количества(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26 тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли. Соединения по настоящему изобретению лечат множество других неврологических расстройств у пациентов, которые связаны с глутаматной дисфункцией, включая мышечные спазмы, конвульсии, мигрень, непроизвольное мочеиспускание, боль, предменструальное дисфорическое расстройство (PDD),психоз (такой, как шизофрения), толерантность к лекарству, абстиненцию, прекращение приема и пристрастие (например, к никотину, опиатам, кокаину, бензодиазепинам и этанолу), тревожные и родственные расстройства, рвоту, отек головного мозга, хроническую боль и позднюю дискинезию. Соединения по изобретению также применимы в качестве антидепрессантов и анальгетиков. Поэтому, настоящее изобретение также относится к способу лечения данных расстройств с использованием эффективного количества (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли. Следующие ниже определения объясняют смысл и рамки различных используемых в настоящем описании терминов. Общие используемые здесь термины имеют свои обычные значения. Термин "воздействие" относится к соединению формулы II, действующему в качестве агониста на рецептор возбуждающей аминокислоты. Термин "рецептор возбуждающей аминокислоты" относится к метаботропному глутаматному рецептору, рецептору, который соединен с клеточными нервными окончаниями посредством GTP-связывающих белков. Термин "связанный с цАМФ метаботропный глутаматный рецептор" относится к метаботропному рецептору, который связан с ингибированием аденилатциклазной активности. Термин "неврологическое расстройство" относится как к острому, так и хроническому нейродегенеративному состоянию, включая церебральную недостаточность, являющуюся результатом операции шунтирования или имплантации на сердце, ишемию головного мозга (например, инсульт, в результате остановки сердца), травму спинного мозга, травму головы, болезнь Альцгеймера, хорею Гентингтона,боковой амиотрофический склероз, СПИД-ассоциированную деменцию, перинатальную гипоксию, гипогликемическое повреждение нейронов, поражение зрения и ретинопатию, расстройства познавательной способности и идиопатическую и обусловленную действием лекарственного средства болезнь Паркинсона. Данный термин также включает другие неврологические состояния, которые вызваны глутаматной дисфункцией, включая мышечные спазмы, мигрень, непроизвольное мочеиспускание, толерантность к лекарству, абстиненцию, прекращение приема и пристрастие (например, к опиатам, бензодиазепинам, никотину, кокаину или этанолу), прекращение курения, рвоту, отек головного мозга, хроническую боль, нарушения сна, конвульсии, синдром Туретта, синдром нарушения внимания и позднюю дискинезию. Термин "психиатрическое расстройство" относится как к острым, так и хроническим психиатрическим состояниям, включая шизофрению, тревожное расстройство и родственные расстройства (например, острое тревожное состояние с реакцией паники и связанные со стрессом сердечно-сосудистые заболевания), депрессию, биполярный психоз, психоз, обсессивно-компульсивный синдром, генерализированное тревожное расстройство, острое стрессовое расстройство и расстройства панического типа. Используемый в настоящем описании термин "эффективное количество" относится к количеству или дозе соединения, которое при однократной или многократной дозе введения пациенту дает желаемый эффект у пациента, которому поставлен данный диагноз или проводится лечение. Эффективное количество может быть легко определено лечащим врачом, специалистом в данной области, с использованием известных методов и при наблюдении за результатами, полученными в аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества или дозы вводимого соединения,лечащим врачом рассматривается ряд факторов, включая, но не ограничиваясь этим, вид млекопитающего; его размер, возраст и общее здоровье; конкретное заболевание; степень или запущенность или серьезность заболевания; реакцию конкретного пациента; конкретное вводимое соединение; режим введения; характеристики биодоступности вводимого препарата; выбранный режим введения; использование сопутствующего лекарственного лечения и другие существенные обстоятельства. Например, типичная суточная доза может содержать примерно от 5 до 300 мг активного ингредиента. Соединения можно вводить разнообразными путями, включая пероральный, ректальный, трансдермальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный, трансбуккальный или интраназальный пути. Альтернативно, соединение-3 011231 можно вводить непрерывной инфузией. Используемый здесь термин "пациент" относится к млекопитающему, такому как мышь, морская свинка, крыса, собака или человек. Понятно, что предпочтительным пациентом является человек. Используемый здесь термин "лечение" (или "терапия") включает свои общепринятые значения, которые охватывают предотвращение, профилактику, сдерживание и замедление, остановку или изменение направления на обратное развития проистекающих симптомов. По существу, способы по данному изобретению охватывают как терапевтическое, так и профилактическое введение. Используемый здесь термин "защитная группа для азота", представленный в виде "PgN", относится к группам, предназначенным для защиты или блокирования азота от нежелательных реакций в течение процедур синтеза. Выбор используемой подходящей защитной группы для азота зависит от условий, которые будут использоваться в последующих реакционных стадиях, где требуется защита, как хорошо известно специалисту в данной области. Обычно используемые защитные группы для азота описаны в(1999. Предпочтительной защитной группой для азота является трет-бутоксикарбонил. Используемый здесь термин "защитная группа для карбоксила", представленный в виде "PgC", относится к одному из сложноэфирных производных карбоксильной группы, обычно применяемому для защиты или блокирования карбоксильной группы, когда осуществляют реакции на других функциональных группах соединения. Конкретные примеры включают, например, метил, этил, трет-бутил, бензил,метоксиметил, триметилсилил и аналогичные группы. Дополнительные примеры таких групп можно найти в T.W. Greene и P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed. (John WileySons, NewYork (1999. Предпочтительными защитными группами для карбоксила являются метил и этил. Сложный эфир разлагают, используя традиционную процедуру, которая не влияет на другую часть молекулы. Специалисту в области органической химии понятно, что термин "защитная группа для гидроксила" обозначает группу такого типа, который описан в Главе 2 книги Грина и Вутса. Типичные представители защитных групп для гидроксила включают, например, группы простых эфиров, группы замещенного этилового эфира, группы изопропилового эфира, группы фенилового и замещенного фенилового эфира, группы бензилового и замещенного бензилового эфира, группы алкилсилильного эфира, сложноэфирные защитные группы и аналогичные. Тип используемой защитной группы для гидроксила не является критичным при условии, что полученное производное гидроксильной группы является стабильным к условиям последующей(их) реакции(ий) в других положениях молекулы промежуточного соединения,и ее можно селективно удалить в соответствующий момент без разрушения оставшейся части молекулы,включая любую другую защитную(ые) группу(ы) для гидроксила. Хотя все соединения по изобретению являются применимыми активными агонистами mGluR2 рецептора, определенные соединения являются предпочтительными. Следующие ниже параграфы определяют предпочтительные классы.A) Соединение представляет собой свободное основание.C) Соединение является гидрохлоридной солью.D) Соединение является метансульфонатной солью.E) Соединение является этансульфонатной солью.F) Соединение является толуолсульфонатной солью.(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан 4,6-дикарбоновая кислота и ее фармацевтически приемлемая соль применимы для лечения расстройств у млекопитающих, и предпочтительным млекопитающим является человек. Соединения по настоящему изобретению можно получить различными процедурами, некоторые из которых иллюстрируются на приведенных ниже схемах. Конкретный порядок стадий, требующихся для получения соединений по изобретению, зависит от конкретных соединений, которые синтезируются, от исходного соединения и относительной лабильности замещенных групп. Некоторые заместители могут быть исключены из следующих ниже схем для ясности изложения, и они не имеют намерения какимлибо образом ограничивать описание схем. Специалист в данной области поймет, что заместители R15 иR16 представляют соответствующие боковые цепи для получения желаемого метионила. Если необходимые исходные вещества для приведенных ниже схем отсутствуют в продаже, то данные вещества можно изготовить процедурами, которые выбраны из стандартных методов органической и гетероциклической химии, методами, которые аналогичны синтезам известных, структурно-сходных соединений, и процедурами, описанными в методах получения и примерах, включая новые процедуры. где X представляет собой SO2, R10 представляет собой водород и R11 представляет собой водород.(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-Метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновую кислоту конвертируют посредством ферментных или гидролитических процессов in vivo с получением соединений формулы II, как показано на приведенной выше схеме 1. В частности, кристаллическую форму (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2 диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты можно получить способом, показанным в общих чертах на приведенной схеме 2. Схема 2 На схеме 2 X представляет собой SO2, R10 представляет собой водород и p равно 1. Гидролиз пептидильного соединения формулы (iii) с двумя защищенными сложноэфирными группами подходящим основанием, таким как гидроксид лития или гидроксид натрия, в подходящем растворителе, таком как ТТФ или смесь ТГФ/вода, дает пептидильное соединение формулы (iv) с двумя защищенными кислотными группами. С соединения формулы (iv) можно снять защиту подходящей кислотой в подходящем растворителе. Такие условия могут дать соответствующую кислую соль пептидильного соединения с двумя кислотными группами, изображенную как соль формулы I, в виде твердого аморфного вещества или, непосредственно, твердого кристаллического вещества, где X" представляет соответ-5 011231 ствующий анион. В случае твердого аморфного вещества далее можно осуществить кристаллизацию из подходящего растворителя. Карбоксилатные соли можно получить введением катионных частиц таким реагентом, как ацетат натрия. Наконец, цвиттерионное соединение можно получить обработкой соединения, представляющего собой кристаллическую соль, соответствующим основанием. Например, пептидильное соединение формулы (iv) с двумя защищенными кислотными группами при обработке газообразным хлористым водородом в подходящем растворителе дает гидрохлоридную соль со снятой защитой в виде твердого аморфного вещества. Аморфное гидрохлоридное соединение затем можно подвергнуть перекристаллизации из смеси ацетона и воды, получая кристаллическую гидрохлоридную соль соединения. В случае кристаллического твердого вещества, которое получают непосредственно, кристаллическую соль может дать фильтрование реакционной смеси. Цвиттерионное соединение получают обработкой кристаллической гидрохлоридной соли соединения гидроксидом натрия; альтернативно, обработка метансульфонатной соли соединения или толуолсульфонатной соли соединения гидроксидом натрия также будет давать цвиттерионное соединение. Специалист в данной области поймет, что соединение формулы I можно получить в течение одной процедуры, где указанные промежуточные соединения не выделяют. Схема 3 На схеме 3 X представляет собой SO2, R10 представляет собой водород и p равно 1. Сложный диэфир формулы (ii) ацилируют соединением формулы III, используя подходящий конденсирующий агент, получая пептидильное соединение формулы (iii) с двумя защищенными сложноэфирными группами. Альтернативно, данное превращение можно осуществить с использованием хлорангидрида соединения формулы III. Подходящие пептидные конденсирующие агенты включают дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид (EDC), изобутилхлорформиат, дифенилхлорфосфат, 2 хлор-4,6-диметокси-1,3,5-триазин (CDMT), хлорангидрид бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфиновой кислоты и гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония. Схема 4 На схеме 4 X представляет собой SO2 и R10 представляет собой водород. На вышеприведенной схеме 4 соединение формулы II, дикислоту, обрабатывают подходящим защищающим карбоксигруппу реагентом, таким как смесь каталитического количества хлористоводородной кислоты или тионилхлорида и метанола или этанола, получая соответствующий сложный диэфир формулы (ii). Альтернативно, соединение формулы II вначале можно обработать реагентом, защищающим атом азота, таким как ВОС 2 О, получая соединение формулы (i) с защитной группой на атоме-6 011231 азота. Затем соединение формулы (i) можно обработать реагентом, защищающим карбоксигруппу, таким как метилйодид, в присутствии основания, такого как карбонат калия, после чего следует обработка реагентом для снятия защитной группы с азота, таким как хлористо-водородная кислота или трифторуксусная кислота, получая соединение формулы (ii). Кроме того, специалист в данной области поймет, что в зависимости от X может требоваться соответствующий защищающий реагент. Соединения формулы II известны из уровня техники. Например, способы получения данных соединений можно найти в патентах США 5688826 (патент '826) и 5958960 (патент '960). По сравнению с ранее описанными способами были сделаны различные улучшения путей синтеза соединений формулы II. Улучшения включают окисление серы или спирта, а также оптическое разделение различных промежуточных соединений, как описывается ниже. Первое улучшение относится к превращению, описанному в патенте '826, столбец 8, строки 22-34 и столбец 7, начиная со строки 33 (формула V), включающему окисление соединения формулы VII патента с получением соединения формулы V патента '826 Было обнаружено, что комплекс триоксид серы/пиридин или трифторуксусный ангидрид в сочетании с ДМСО являются предпочтительнее многих методов окисления, известных из уровня техники. Во-вторых, что касается разделения соединения формулы III патента '826 где R2 представляет собой карбоксильную группу, ссылаясь на столбец 8, строки 3-7 и столбец 6, начиная со строки 1 (формула III), было обнаружено, что предпочтительными являются (R)-метилбензиламин и хинин. (R)метилбензиламин является особенно предпочтительным. Кроме того, было обнаружено, что при окислении сульфида соединения формулы III патента '826,где X представляет собой серу, с получением соединения формулы III патента '826, где X представляет собой сульфонил, как ссылаются в патенте '826, столбец 8, строки 39-53, предпочтительной является основная водная система и пероксид водорода, используемые в комбинации с катализатором. Следующие ниже примеры дополнительно иллюстрируют соединения по настоящему изобретению и способы их синтеза. Примеры не имеют намерения каким-либо образом ограничивать объем изобретения, и их не следует так истолковывать. Все эксперименты проводят при избыточном давлении сухого азота или аргона. Все растворители и реагенты получают из коммерческих источников и используют без дополнительной очистки, если это не указано иным образом. Сухой тетрагидрофуран (ТГФ) можно получить перегонкой с натрием или натрий бензофенонкетилом перед использованием. Спектры протонного ядерного магнитного резонанса (1 Н ЯМР) получают на Bruker Avance II bay-500 при 500 МГц, BrukerAvance I bay-200 при 200 МГц или Varian Inova/Varian 300/Varian 400 при 500 МГц. Масс-спектрометрию с электрораспылительной ионизацией (ЭРИ) осуществляют на приборе Agilent MSD/B, используя в качестве подвижной фазы смесь ацетонитрил/водный ацетат аммония. Масс-спектроскопию с ионизацией бомбардировкой быстрыми атомами (МС ББА) проводят на приборе VG ZAB-2SE. Масс-спектрометрию с ионизацией полевой десорбцией (МС ПД) осуществляют, используя либо спектрометр VG 70SE, либоVarian MAT 731. Оптическое вращение измеряют на поляриметре Perkin-Elmer 241. Хроматографическое разделение на Waters Prep 500 LC обычно проводят, используя линейный градиент растворителей, указанных в тексте. Завершенность протекания реакций контролируют, используя тонкослойную хроматографию (ТСХ). Тонкослойную хроматографию проводят с использованием пластин Е. Merck Kieselgel 60F254, 5 см 10 см, толщина 0,25 мм. Пятна детектируют с использованием комбинации УФ и химического определения (пластины погружают в раствор, содержащий соль церия и молибдат аммония [75 г молибдата аммония и 4 г сульфата церия (IV) в 500 мл 10% водного раствора серной кислоты], и затем нагре-7 011231 вают на горячей пластине). Флэш-хроматографию осуществляют, как описано в работе Still, et al. Still,Kahn, Mitra, J. Org. Chem., 43, 2923 (1978). Элементный анализ на углерод, водород и азот осуществляют на Control Equipment Corporation 440 Elemental Analyzer или проводят в Universidad Complutense Analytical Centre (Facultad de Farmacia, Madrid, Spain). Температуры плавления определяют в открытых стеклянных капиллярах на приборе для определения температуры плавления с горячевоздушной баней Gallenkamp или на приборе для определения температуры плавления Bchi, и они являются приблизительными. Сокращения, символы и термины, используемые в примерах, имеют следующие значения. Ас = ацетилAnal. = элементный анализ НПВО = нарушенное полное внутреннее отражениеEtOH = этанол ББА = бомбардировка быстрыми атомами (масс-спектрометрия) МСПД = масс-спектр полевой десорбции ИК-Фурье = инфракрасная спектроскопия с преобразованием ФурьеHOBt = 1-гидроксибензотриазол ВЭЖХ = высокоэффективная жидкостная хроматография МСВР = масс-спектр высокого разрешенияMeOH = метанол ЖХСД = жидкостная хроматография среднего давления Тпл. = температура плавления МТБЭ = трет-бутилметиловый эфирNBS = N-бромсукцинимид ЯМР = ядерный магнитный резонанс ПЦ-ТСХ = препаративная центрифугальная тонкослойная хроматографияi-Pr = изопропил соль Рошелля = тартрат калия натрия кт = комнатная температура ИВ = исходное веществоTBS = трет-бутилдиметилсилил ТЭА = триэтиламин Темп. = температура ТФУ = трифторуксусная кислота ТГФ = тетрагидрофуран ТСХ = тонкослойная хроматографияEDC сочетание между аминами и N-BOC-(L)-аминокислотами. Исходный сложный аминодиалкильный эфир (соединение формулы ii, схема 3) (1,0 экв.) суспендируют в сухом дихлорметане в атмосфере азота. Последовательно добавляют соответствующую N-Boc(L)-аминокислоту (1,5-2,0 экв.), EDC (1,5-2,0 экв.), HOBt (1,5-2,0 экв.) и диметиламинопиридин (ДМАП,-8 011231 0,1-0,2 экв.). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре до завершения реакции, о чем судят по данным ТСХ, если это не указано иным образом. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и последовательно промывают насыщенным водным раствором NaHCO3 и/или водным растворомNaHSO4 и насыщенным раствором соли. После сушки над сульфатом натрия и выпаривания под вакуумом неочищенный остаток (соединение формулы iii) очищают хроматографией на силикагеле, используя соответствующий элюент (типично смесь этилацетат/гексан). Общая процедура В. Последовательное удаление N-Boc защитной группы и защищающей сложноэфирной группы. Соответствующее N-Boc диэфирное пептидное производное (соединение формулы iii, схема 2)(1,0 экв.) перемешивают в смеси 1:1 ТГФ/2,5 н. LiOH (10-2 0 экв.) при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляют Н 2 О и промывают этилацетатом. Органический слой сливают. pH водной фазы доводят до 2, используя 1 н. HCl (к водной фазе добавляют NaCl для увеличения способности к экстракции до необходимого уровня) и полностью экстрагируют продукт, представляющий собойN-Boc дикарбоновую кислоту (соединение формулы iv) этилацетатом. Все органические слои объединяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют до сухого состояния под вакуумом, получая желаемый карбоксилатный продукт в виде твердого пенообразного вещества. Растворяют в этилацетате и охлаждают до 0 С. Реакционную смесь продувают безводным газообразнымHCl до насыщения HCl. Полученную в результате реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 4 ч. Выделяют пептидное производное с полностью снятой защитой (соединение формулы I) в виде его гидрохлоридной соли фильтрованием под атмосферой N2 или концентрированием реакционной смеси до сухого состояния, после чего следует растирание в этилацетате или Et2O и концентрирование до получения белого порошка. Необязательно, для удаления остаточного количества растворителя и избытка HCl,повторно разводят продукты в H2O, замораживают и затем подвергают лиофилизации, получая желаемые гидрохлоридные продукты. Метод получения 1. Диэтиловый эфир (1R,4S,5S,6S)-4-амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты К суспензии (1R,4S,5S,6S)-4-амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (10 г, 42,5 ммоль, патент США 5688826) в 100 мл 2 В этанола при комнатной температуре по каплям в течение 20 мин добавляют тионилхлорид (15,5 мл, 212,6 ммоль), после чего следует промывка 40 мл этанола. Суспензию кипятят с обратным холодильником и перемешивают в течение ночи. Анализ 500 МГц 1H ЯМР (CD3OD) концентрированной аликвоты показывает расходование исходного вещества и промежуточного моноэфира. Полученному в результате раствору дают охладиться до комнатной температуры, затем концентрируют до желатинообразного остатка. К желатинообразному веществу добавляют EtOAc (50 мл) и далее концентрируют до твердого вещества, затем разбавляют дополнительными 94 мл EtOAc. К смеси медленно добавляют 15% водный раствор карбоната натрия (70 мл) при вращении вручную, чтобы постепенно способствовать растворению, получая конечное значение pH 7,95. Отфильтровывают образовавшийся в результате осадок карбоната натрия, после чего экстрагируют слои. Осуществляют обратную экстракцию водного слоя EtOAc (2100 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (1100 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют под вакуумом, получая бледно-желтое маслянистое вещество, которое затвердевает, давая указанное в заголовке соединение в виде твердого, не совсем белого вещества (11,71 г, выход 95%). Перекристаллизация. Смесь указанного в заголовке соединения (200 мг) в EtOAc (800 мкл) нагревают до 56 С, и в данный момент происходит растворение. После перемешивания в течение 15 мин при 56 С к раствору по каплям добавляют гептан (1 мл). Нагрев выключают. Раствору дают охладиться до 52 С, и в данный момент происходит выпадение осадка. После охлаждения и дополнительного разбавления гептаном(600 мкл) образуется суспензия. Полученную в результате суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего фильтруют, промывают гептаном (2500 мкл) и сушат при 45 С в течение ночи, получая 145 мг (выход 73%) указанного в заголовке соединения в виде твердого белого вещества. Тпл. = 80-83 С. К быстро перемешиваемой суспензии (1R,4S,5S,6S)-4-амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (10,0 г, 42,5 ммоль, патент США 5688826) в MeOH (170 мл, 5 С) по каплям добавляют тионилхлорид (6,2 мл, 85,0 ммоль). После завершения добавления реакционной смеси дают медленно нагреться до комнатной температуры, затем кипятят с обратным холодильником в течение 48 ч. Удаляют летучие компоненты при пониженном давлении и остаток распределяют между насыщенным раствором NaHCO3 (200 мл) и этилацетатом (400 мл). Слои разделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом (2400 мл, каждый раз). Объединенные органические слои сушат над K2CO3 и концентрируют при пониженном давлении, получая 8,10 г (30,8 ммоль) указанного в заголовке соединения с выходом 72%. К суспензии (1R,4S,5S,6S)-4-амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (10 г, 42,5 ммоль, патент США 5688826) в 100 мл 2 В этанола при комнатной температуре по каплям в течение 20 мин добавляют тионилхлорид (15,5 мл, 212,6 ммоль), после чего следует промывка- 10011231 40 мл этанола. Суспензию кипятят с обратным холодильником и перемешивают в течение ночи. Полученный в результате раствор охлаждают до комнатной температуры и концентрируют до желатинообразного остатка. К остатку добавляют этилацетат (50 мл), после чего следует разбавление дополнительными 94 мл этилацетата. К смеси медленно добавляют 15% водный раствор карбоната натрия (70 мл),вращая вручную, чтобы постепенно обеспечить растворение, получая конечное значение pH 7,95. Фильтруют и слои разделяют. Водный слой экстрагируют этилацетатом (2100 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (1100 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют под вакуумом, получая указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого маслянистого вещества, которое затвердевает в твердое желтоватое вещество (11,71 г, выход 95%). Тпл. = 80-83 С.-22 С под атмосферой азота добавляют N-метилморфолин (14,4 мл, 130,9 ммоль), после чего по каплям в течение 7 мин добавляют изобутилхлорформиат (17 мл, 130,9 ммоль), поддерживая температуру реакционной смеси при -22 С. После завершения добавления получается жидкая суспензия. Перемешивают при температуре от -22 до -26 С в течение 30 мин. Добавляют раствор диэтилового эфира (1R,4S,5S,6S)-4 амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (35,65 г, 122,4 ммоль, метод получения 53) в 107 мл метиленхлорида в течение 15 мин, после чего следует промывка 36 мл метиленхлорида. Реакционную смесь снимают с охлаждающей бани и перемешивают при комнатной температуре в течение 70 мин. К раствору добавляют 51 мл 5 н. хлористо-водородной кислоты, затем слои разделяют. Проводят обратную экстракцию водного слоя метиленхлоридом (2107 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1107 мл), сушат[]25D=-12,7 (c=1,2, CH3OH). 1 Н ЯМР (500 МГц, CDCl3)7,53 (с, 1 Н), 5,06 (д, 1 Н, J=8,0 Гц), 4,34-4,20 (м, 6 Н), 3,41 (дд, 1 Н, J=4,0,7,0), 2,97-2,89 (м, 2 Н), 2,64-2,59 (м, 2 Н, J=4,0), 2,12-1,89 (м, 5 Н), 1,47 (с, 9 Н), 1,32 (т, 6 Н, J=7,0). 13 С ЯМР (125 МГц, CD3OD)172,53, 169,03, 167,88, 156,00, 80,62, 63,45, 62,56, 60,20, 55,33, 52,78,42,81, 31,52, 31,38, 30,12, 28,49, 22,69, 15,44, 14,23, 14,143. ИК (НПВО) 3341,88 (ушир.), 2979,38 (с), 1733,03 (с), 1674,92 (с), 1514,58 (с), 1315,80 (с), 1255,15 (с),1161,47 (с), 1142,63 (с), 1025,68 (с), 854,85 (с), 763,53 (с) см-1. Метод получения 6. Однозамещенная натриевая соль (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-(трет-бутоксикарбонил)аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. К раствору диэтилового эфира (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-(трет-бутоксикарбонил)аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (58,95 г,112,8 ммоль теоретических, метод получения 5) в 141 мл тетрагидрофурана при комнатной температуре добавляют 141 мл (282 ммоль) 2 н. раствора гидроксида натрия. Смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 2 мин. Раствор разбавляют 141 мл трет-бутилметилового эфира, затем слои разделяют. Дополнительно разбавляют водный слой 141 мл воды и по каплям добавляют концентрированную хлористо-водородную кислоту, понижая pH до 4,46. Перемешивают в течение 10 мин, по- 11011231 лучая жидкую суспензию. К суспензии добавляют дополнительное количество концентрированной хлористо-водородной кислоты, чтобы понизить pH до 1,4 (общее количество использованной конц. HCl составляет 17 мл, 204 ммоль). После перемешивания в течение 2 ч суспензию фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой (2118 мл) и сушат под вакуумом при 45 С в течение 1 ч, после чего переносят в чашку для взвешивания. Снова сушат осадок под вакуумом при 45 С в течение 16 ч и при 58 С в течение 5 ч, получая 52,96 г (массовый выход 96%) указанного в заголовке соединения в виде твердого белого вещества. Тпл. (с разложением)=258 С. К раствору диэтилового эфира (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-(трет-бутоксикарбонил)аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (166,15 г,318 ммоль, метод получения 5) в 480 мл тетрагидрофурана при комнатной температуре добавляют 397 мл (795 ммоль) 2 н. раствора гидроксида натрия. Энергично перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 2 мин, после чего реакционная смесь становится гомогенной с образованием прозрачного желтовато-зеленого раствора. Перемешивают в течение дополнительных двух часов при комнатной температуре. Раствор разбавляют 480 мл трет-бутилметилового эфира, затем слои разделяют. Водный слой по каплям добавляют к раствору концентрированной хлористо-водородной кислоты (71,5 мл, 858 ммоль) в воде (960 мл). Добавляют этилацетат (500 мл), после чего следует добавление оставшейся части водного слоя к полученной в результате эмульсии и дополнительно разбавляют этилацетатом (460 мл). Эмульсию перемешивают в течение 40 мин, фильтруют и промывают водой (2250 мл). Слои фильтрата разделяют и водный слой подвергают обратной экстракции этилацетатом (500 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли (75 мл), сушат (MgSO4), фильтруют и концентрируют под вакуумом, получая 125,26 г (скорректированный выход 84%) указанного в заголовке соединения в виде белого пенообразного вещества. Метод получения 8. Этил-(6S)-4-тиабицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилат В 3-х горлую, 5-литровую колбу, снабженную мешалкой, термопарой, тефлоновой трубкой для введения реагентов и патрубков для ввода N2, загружают 2000 мл тиофена (d=1,05 г/мл, 25,0 моль вначале и увеличивая до 45 моль, добавляя раствор этилдиазоацетата в тиофене, 17,1 экв., основываясь на общем добавлении этилдиазоацетата и не скорректированных с учетом чистоты EDA, 19,0 экв. основываясь на этилдиазоацетате со скорректированной чистотой). К данной смеси под атмосферой N2 добавляют 0,968 г Rh2 (октаноат)4 (1,24 ммоль, 0,0472 мол.%, основываясь на граммах этилдиазоацетата, не учитывая чистоту, 0,052 мол.%, основываясь на молях чистого этилдиазоацетата, Johnson Mathey: Lot059255001). Суспензию нагревают до 46 С и перемешивают при 46 С в течение 10 мин, осуществляя растворение с получением зеленого раствора. К данному раствору насосом вытесняющего действия добавляют раствор 300 г этилдиазоацетата (90% чистота, 2,63 моль, 2,37 моль чистых, 1,00 экв., Aldrich: Lot17603PI), растворенных в 1600 мл тиофена. Скорость добавления такова, что общее время добавления составляет 8 ч; медленная скорость добавления подавляет образование сложных этиловых эфиров ма- 12011231 леиновой и фумаровой кислот. Когда этилдиазоацетата не остается (примерно через 30 мин), реакционную смесь темно-янтарного цвета (3,985 г) охлаждают до 23 С. Реакционную смесь делят на части и большую часть (3,240 г из общего количества 3,985 г = 81,3%) непосредственно концентрируют до маслянистого вещества. Неочищенное вещество пропускают через дистилляционную установку пленочного типа при 1,5 торр и 23 С для дегазации продукта и удаления остаточных количеств тиофена. Затем продукт перегоняют при 120 С и 1,3 торр. Указанное в заголовке соединение (светло-желтого цвета) собирают двумя фракциями, 155,0 г и 32,2 г. Анализ ВЭЖХ показывает чистоту 78 и 76% для двух партий, соответственно. Кристаллизацию вышеуказанного дистиллята осуществляют, растворяя в метаноле (2 мл на 1 г дистиллята) и охлаждая до -10 С, после чего в раствор необязательно вносят затравку, если рост кристаллов не наблюдается. Как только начинается рост кристаллов, смесь дополнительно охлаждают до -45 С и перемешивают 2-3 ч, фильтруют и промывают холодным (-45 С) метанолом (11 мл на 1 г дистиллята). Вещество сушат под вакуумом при 24 С, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого желтоватого вещества с выходом 80-85% и чистотой 98%. Метод получения 9. Этил-(4S,6S)-4-гидрокси-2-тиабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат К раствору этил-(6S)-4-тиабицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилата (22,2 г, 131 ммоль) в 136 мл тетрагидрофурана под атмосферой азота при 0 С в течение 15-20 мин добавляют комплекс боран-ТГФ(98 мл, 98 ммоль). После перемешивания при 0 С в течение 30 мин, реакционной смеси дают нагреться до 15 С и перемешивают до завершения реакции по данным ВЭЖХ (1,5-2 ч). Реакционную смесь охлаждают до 0 С и через 10-15 мин переносят в 111 мл предварительно охлажденного (0 С) 1 н. буферного раствора с pH 7, в то же время поддерживая температуру 0 С. К смеси добавляют моногидрат пербората натрия (15,6 г, 157 ммоль) в виде твердого вещества пятью порциями, таким образом, чтобы поддерживать температуру ниже 20 С. Раствору дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч, после чего добавляют 222 мл воды. После перемешивания в течение 2 ч пероксиды гасят,добавляя пентагидрат тиосульфата натрия (9,7 г), растворенный в 24 мл воды, после чего перемешивают в течение 10 мин. Смесь экстрагируют этилацетатом (2222 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1222 мл), после чего следует промывка насыщенным раствором соли (1222 мл) и концентрирование под вакуумом до сухого состояния. Неочищенный продукт растворяют в 1,2-дихлорэтане (1 мл на 1 г неочищенного маслянистого вещества) и загружают в силикагелевую колонку (4 г силикагеля на 1 г неочищенного маслянистого вещества, причем силикагель суспендирован и наполнен с помощью смеси 15% этилацетат/гептан). Колонку элюируют смесью 15% этилацетат/гептан, пока продукт виден ТСХ, после чего растворитель меняют на смесь 50% этилацетат/гептан. Все фракции, содержащие указанный в заголовке продукт, объединяют и концентрируют под вакуумом до маслянистого вещества. Общий выход находится в диапазоне 55-65%. Метод получения 10. Этил-(6S)-4-оксо-2-тиабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат К раствору диметилсульфоксида (33,4 мл, 471 ммоль) в 194 мл метиленхлорида при -70 С в течение 30 мин медленно добавляют раствор трифторуксусного ангидрида (33,2 мл, 235 ммоль) в 73 мл метиленхлорида (температуру поддерживают ниже -66 С). После перемешивания в течение 20 мин добавляют раствор этил-(4S,6S)-4-гидрокси-2-тиабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилата (34,1 г, 181 ммоль) в 194 мл метиленхлорида в течение 60 мин, так чтобы поддерживать температуру ниже -60 С. После перемешивания в течение 1 ч реакционную смесь обрабатывают триэтиламином (75,7 мл, 543 ммоль) в течение 35 мин, так чтобы температура оставалась ниже -50 С. Реакционную смесь перемешивают в течение дополнительного 1 ч, после чего убирают охлаждающую баню и добавляют 400 мл 2 н. хлористоводородной кислоты. После нагревания до 0 С слои разделяют и органический слой промывают 2 н. хлористо-водородной кислотой (1300 мл), 1 н. водным раствором бикарбоната натрия (1670 мл) и водой(1300 мл), после чего следует сушка над сульфатом натрия, фильтрование и концентрирование под вакуумом до получения красного маслянистого вещества, которое со временем затвердевает. Неочищенный продукт наносят на слой силикагеля (2 г на 1 г исходного спирта, наполненный метиленхлоридом) и элюируют метиленхлоридом (200-300 мл). Все содержащие продукт фракции собирают и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого оранжево-коричневого вещества. Типич- 13011231 ные скорректированные выходы находятся в диапазоне 85-90%. Метод получения 11. Карбонат аммония (2,46 г, 25,6 ммоль) и цианид калия (0,817 мг, 12,5 ммоль) смешивают в 19,9 мл метанола и перемешивают в течение 30 мин. Смесь обрабатывают раствором этил-(6S)-4-оксо-2 тиабицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилата (2,39 г, 12,8 ммоль) в 19,9 мл метанола, реакционную смесь нагревают до 30 С и перемешивают в течение 23 ч. Летучие компоненты выпаривают, остаток растворяют в 2,75 н. растворе гидроксида натрия (13,1 мл) и перемешивают в течение 1 ч. После разбавления 13,1 мл воды pH понижают до 3,1 концентрированной хлористо-водородной кислотой и необязательно вносят в качестве затравки (6S,11S)-8,10-диоксо-2-тиаспиро[бицикло[3.1.0]гексан-4,5'-имидазолидин]-6-карбоновую кислоту. pH понижают до 1,0, суспензию охлаждают до 0 С и перемешивают в течение 1,25 ч. Собирают твердое вещество желтовато-коричневого цвета, промывают холодной водой (2,3 мл и 0,8 мл) и сушат под вакуумом в течение ночи при 40 С, получая 2,00 г (55% скорректированных с учетом чистоты) (6S,11S)-8,10-диоксо-2-тиаспиро[бицикло[3.1.0]гексан-4,5'-имидазолидин]-6-карбоновой кислоты. Фильтрат разбавляют 50 мл этилацетата и обрабатывают 18 г хлорида натрия. После перемешивания в течение 15 мин слои разделяют и водный слой далее промывают этилацетатом (250 мл). Объединенные органические экстракты сушат сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют под вакуумом до получения суспензии (примерно 5 мл), к которой добавляют трет-бутилметиловый эфир (25 мл), после чего следует перемешивание в течение ночи. Собирают твердое вещество, промывают трет-бутилметиловым эфиром и сушат под вакуумом при 40 С в течение 2 ч, получая 0,64 г (10% скорректированных с учетом чистоты) указанного в заголовке соединения в виде смеси 1:1 диастереомерных гидантоинов. Данную вторую порцию гидантоинов объединяют с первой порцией и подвергают следующей стадии. Разделение. К суспензии рацемической кислоты (15 г, 65,7 ммоль, отношение диастереомерных гидантоинов примерно 6:1) в смеси 300 мл этанола и 75 мл воды добавляют (R)-фенилглицинол (9,0 г, 65,7 ммоль). Смесь нагревают примерно до 80 С, чтобы добиться растворения. Темный раствор медленно охлаждают,и при 40-45 С наблюдается выпадение осадка. Суспензию далее охлаждают до 0 С и выдерживают в течение 1-1,5 ч. Твердое вещество собирают, промывают (при перемешивании) смесью 4:1 этанол:вода(160 мл, предварительно охлажденной до 0 С) и сушат под вакуумом при 65 С в течение 12-24 ч. Типичные выходы разделенной соли находятся в диапазоне 37-45%, причем наблюдается 98% de и 98%ee. Разделенную соль растворяют в 6 объемах (мл на г) воды, после чего следует обработка 1,1 экв. конц.HCl. Суспензию охлаждают до 0 С и перемешивают в течение 1 ч, после чего следует фильтрование,промывка 1 объемом холодной воды и сушка под вакуумом при 60 С. Типичные выходы указанного в заголовке соединения 90%, причем % de и % ее 99%. Метод получения 12. К смеси 6,8 мл воды, 0,7 мл 50% водного раствора гидроксида натрия и 186 мг (0,74 ммоль) вольфрамовой кислоты добавляют (6S,11S)-8,10-диоксо-2-тиаспиро[бицикло[3.1.0]гексан-4,5'-имидазолидин]6-карбоновую кислоту (3,4 г, 14,9 ммоль). Полученный в результате раствор нагревают до 50 С и медленно в течение 66 мин обрабатывают 35% пероксидом водорода (7,7 мл, 74,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивают при 47-48 С в течение 5 ч, после чего охлаждают до 0 С, фильтруют через тонкий слой целита и промывают холодной водой (12 мл). Фильтрат нагревают до 50 С и обрабатывают концентрированной хлористо-водородной кислотой до pH 1,5. Суспензии дают охладиться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. После охлаждения до 0 С суспензию фильтруют, промывают холодной водой (22 мл) и сушат под вакуумом при 55 С до постоянной массы, получая 3,19 г(82%) указанного в заголовке соединения в виде твердого белого вещества. В реактор Парра из нержавеющей стали добавляют (6S,11S)-2,2,8,10-тетраоксо-2 тиаспиро[бицикло[3.1.0]гексан-4,5'-имидазолидин]-6-карбоновую кислоту (2,50 г, 9,60 ммоль) и 2 н. гидроксид натрия (24,0 мл, 48,0 ммоль). После нагревания смеси до 95 С и перемешивания в течение 21 ч,смесь охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают активированным древесным углем (1,25 г). Смесь фильтруют через целит, фильтрат концентрируют до 17 г и разбавляют Н 2 О, получая массу 24 г. Используя конц. HCl, pH понижают до 6,5 и смесь нагревают до 62 С. После того, как pH понижают до 2,5, используя конц. HCl, происходит кристаллизация. Суспензии дают охладиться до 30 С, после чегоpH доводят до 1,7 и температуру понижают до 5 С. После выдерживания суспензии при данной температуре в течение 18 ч, твердое вещество собирают и промывают холодной H2O (22,9 мл). Твердое белое вещество сушат под вакуумом при 45 С, получая указанное в заголовке соединение (1,81 г, 80%). Из указанного в заголовке соединения готовят суспензию в 10 объемах воды и ее греют при 85 С в течение 3-4 ч, охлаждают до комнатной температуры, перемешивают 2-3 ч, фильтруют и промывают водой (11 объем). Выход составляет 95%. Пример 1. Гидрохлорид (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-амино-4'-метилсульфанилбутириламино)-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты Готовят в соответствии с общей процедурой В, используя диметиловый эфир (1R,4S,5S,6S)-4-(2'Sтрет-бутоксикарбониламино-4'-метилсульфанилбутириламино)-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан 4,6-дикарбоновой кислоты (0,77 г, 1,6 ммоль, метод получения 3), получая 0,41 г (54,9%) указанного в заголовке соединения.(1 Н, д, J=14,7 Гц). МСВР вычислено для C12H19N2O7S2, 367,0634. Найдено, 367,0634. Пример 2. Моногидрат (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты Суспензию однозамещенной натриевой соли(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-(третбутоксикарбонил)аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (110,04 г, 225,3 ммоль, метод получения 6) в смеси ацетона (110 мл) и воды (550 мл) нагревают до 55 С. К суспензии при перемешивании по каплям добавляют концентрированную хлористо-водородную- 15011231 кислоту (56 мл, 675,8 ммоль), постепенно добиваясь растворения. После завершения добавления раствор перемешивают при 55 С в течение 2 ч. Убирают источник тепла и раствору дают охладиться до комнатной температуры. Раствор фильтруют и промывают 20 мл воды. К раствору медленно добавляют 2 н. гидроксид натрия (165 мл, 330 ммоль), повышая pH до 1,71, в результате чего происходит осаждение. Перемешивают в течение 10 мин; образуется жидкая суспензия, и pH падает до 0,98. К полученной в результате суспензии добавляют еще 2 н. гидроксид натрия (62 мл, 124 ммоль), повышая pH до 3,06, после чего перемешивают в течение 3 ч, получая конечное значение pH 3,24. Суспензию фильтруют, промывают водой (2165 мл) и сушат при 45 С в течение 15 ч, получая 73,27 г (выход 85 мас.%) указанного в заголовке соединения в виде твердого белого вещества. Тпл. (ДСК)=203 С.(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-(трет-бутоксикарбонил)аминобутанонил)амино-2,2 диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты (118,09 г скорректированных, 253 ммоль,метод получения 7) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (54 г, 278 ммоль) в толуоле (1180 мл) нагревают до 75 С, что приводит к получению густой суспензии. Суспензию перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 165 мин. Убирают источник тепла и суспензии дают охладиться до комнатной температуры, после чего следует перемешивание в течение ночи. Суспензию фильтруют, промывают толуолом (3240 мл) и сушат под вакуумом при 45 С в течение 22 ч, получая 134,92 г- 16011231 13 мл пропионитрила нагревают до 85 С. К суспензии добавляют воду (540 мкл), затем по каплям добавляют метансульфоновую кислоту (225 мкл, 3,47 ммоль). Суспензию перемешивают в течение 90 мин. Удаляют источник тепла и добавляют пропионитрил (30 мл). Суспензию охлаждают до комнатной температуры и перемешивают в течение 90 мин. Фильтруют, промывают пропионитрилом (32,7 мл) и сушат при 45 С в течение ночи, получая 1,04 г (97%) указанного в заголовке соединения. Тпл. (ДСК)=244 С.(с), 1152,70 (с), 1118,55 (с), 1051,42 (с), 816,49 (с), 786,63 (с) см-1. Элементный анализ. Вычислено для C12H18N2O7S2CH4O3S: С 33,76; Н 4,79; N 6,06. Найдено: С 33,98; Н 4,82; N 5,98. Пролекарственные соединения по настоящему изобретению можно оценить относительно соответствующего исходного соединения с помощью различных анализов клеточного поглощения. Данные анализы могут предоставить сравнительные данные, позволяя специалисту в данной области идентифицировать соединения, которые легко поглощаются клеткой, обеспечивая превосходное воздействие. Два таких анализа включают анализ по поглощению Gly-Sar и анализ Сасо-2, описанные ниже. Анализ по поглощению Gly-Sar. Известно, что некоторые перорально вводимые лекарственные препараты, имитирующие свойства пептидов, поглощаются через кишечную пептидную транспортную систему. Yang, et al., Pharm. Res. 16(9) (1999). В частности, кишечный пептидный транспортер hPepT1 был исследован на проявление ингибирования пептидильного поглощения и на его соответствующий уровень распознавания внутри клетки. Meredith, et al., Eur. J. Biochem., 267, 3723-3728 (2000). Кроме того, описание механизма кишечного поглощения аминокислот в hPepT1-транспортере было заявлено в качестве эффективной стратегии идентификации улучшенного поглощения пероральных лекарственных препаратов. Han, et al., Polym. Prepr.(Am. Chem. Soc, Div. Polym. Chem.) 40(1): 259-260 (1999); Sawada, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 291(2): 705-709 (1999). Патент США 5849525 описывает способы, которые можно использовать для измерения уровня сродства соединений по настоящему изобретению с hPepT1-транспортером. Например, устойчиво трансфектируемые клетки яичника китайского хомячка (СНО), сверхэкспрессирующие hPepT1-транспортер, можно использовать для тестирования соединений по настоящему изобретению. Клетки СНО обычно контролировали на поглощение Gly-Sar, которое, когда поглощение в присутствии пролекарственных соединений по настоящему изобретению происходит в более существенных количествах, чем в случае, когда клетка не содержит пролекарственные соединения по настоящему изобретению, являлось бы показателем активности агониста; и которое, когда поглощение пролекарственных соединений по настоящему изобретению происходит в меньших количествах, чем поглощение в отсутствии пролекарственных соединений по настоящему изобретению, являлось бы показателем ингибирующей активности. Соединения по настоящему изобретению, как правило, показывают значение ЕС 50 меньше 5 мМ. Анализ с использованием Сасо-2. Другой конкретный метод измерения поглощения соединений по настоящему изобретению клетками состоит в изучении носителя пептидного транспорта кишечной клеточной линии человека Сасо-2. Клетки аденокарциномы человека (Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, Rye, NY и/или АТСС, Rockville, MD) переносят в среду Игла, модифицированную Дульбекко, содержащую 10% эмбриональной телячьей сыворотки и 1% минимальной поддерживающей среды, представляющей собой раствор несущественной аминокислоты без добавления пирувата натрия или антибиотиков. Данные клетки не содержат микоплазмы и их используют между пассажами с номерами 28 и 40. Для измерения потока 5-10104 клеток выращивают на покрытом коллагеном многолуночном планшете в течение 13-18 дней и среду меняют каждые 2-3 дня. Поглощение лекарственного препарата измеряют при 37 С с использованием тестируемого соединения, применяя кластерно-планшетную методику (см. Gazzola, et al., Anal. Biochem. 115, 368-74 (1981. Поток буфера представляет собой не содержащий бикарбонат сбалансированный солевой раствор Эрла,содержащий 25 мМ Mes, титрованный до pH 6,0 КОН, и холинхлорид вместо хлорида натрия. Осмомолярность потока буфера корректируют до 3005 мосм/кг холинхлоридом. [3 Н]Инулин используют в качестве маркера для внеклеточной жидкости, который присоединяется к клеткам в течение процедуры промывки для оценки нулевого времени для определения скорости поглощения. Свежие растворы тестируемых соединений и дипептидов готовят ежедневно. В конце экспериментов клетки лизируют в воде и- 17011231 тестируемые соединения можно определить в клеточных лизатах, используя ЖХ/МС/МС. Белки измеряют методом, описанным в работе Smith, et al., Anal. Biochem. 150, 76-85 (1985). Поглощение измеряют в течение 40 мин. Начальные скорости поглощения вычисляют на линейном участке зависимости от времени и оценивают нулевое время, как описано выше, используя линейную регрессию. Процент ингибирования вычисляют на основе контрольной скорости поглощения, измеренной в отсутствии дипептида. Для ознакомления с данным Сасо-2 анализом см. DantzigBergin, Biochim.Biophys. Acta 1027, 211-17 (1990). Действие in vivo, измеренное по концентрации в плазме крысы. Чтобы исследовать действие соединений формулы II in vivo после перорального введения дозы(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6 дикарбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли по сравнению с соединениями формулы II, проводят измерение концентраций в плазме соответствующего соединения формулы II у крыс. Взрослых самцов крыс Fischer 344 (190-270 г) приобретают у Harlan Sprague-Dawley, Камберленд, Ин.,США, и акклиматизируют в условиях проведения исследования в течение 3 суток. На четвертый день тестируемые соединения растворяют в содержащей буферное вещество воде (1 мг/мл = тестируемое соединение/20 мМ дигидрофосфата калия, pH 2) и дают перорально в виде однократной дозы 5 мг/кг. Образцы крови собирают из орбитального синуса или пункцией сердца (последний раз) через 0,5 и 1 ч или,альтернативно, через 1 и 3 ч. Образцы плазмы до анализа хранят при -20 С в присутствии фенилметилсульфонилфторида, ингибитора протеазы. Образцы плазмы и соединения, представляющие собой внутренний стандарт, предварительно подвергают твердофазной экстракции (носитель SAX, метанол/вода/разбавленная уксусная кислота). Концентрации в плазме (нг/мл) соответствующего соединения формулы II для каждого тестируемого соединения определяют ЖХ/МС/МС, и они представлены в виде суммы концентраций через время отбора проб, составляющее 0,5 и 1 ч или, альтернативно, 1 и 3 ч. При пероральном введении крысам соединения по настоящему изобретению показывают концентрации в плазме, сравнимые с исходными соединениями. Это демонстрирует, что соединения по настоящему изобретению превращаются в исходные соединения, соединения формулы II, in vivo. Предпочтительно, из соединений по настоящему изобретению перед введением составляют композиции. Поэтому, дальнейший аспект настоящего изобретения состоит в фармацевтической композиции,включающей(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель. Фармацевтические композиции можно изготовить процедурами, хорошо известными специалисту в данной области. При изготовлении композиций по настоящему изобретению активный ингредиент обычно будут смешивать с носителем, или разбавлять носителем, или включать в носитель, и он может находиться в форме капсулы, саше, бумаги или другого контейнера. Когда носитель служит в качестве разбавителя, он может представлять собой твердое, полутвердое или жидкое вещество, которое действует как растворитель, наполнитель или среда для активного ингредиента. Композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, леденцов, саше, облаток,эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей, мазей, содержащих, например, до 10 мас.% активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций и стерильных расфасованных порошков. Некоторые примеры подходящих носителей, наполнителей и разбавителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмал, камедь, гуммиарабик, фосфат кальция, альгинаты, трагакантовую камедь, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон,целлюлозу, водный сироп, метилцеллюлозу, метил- и пропилгидроксибензоаты, тальк, стеарат магния и минеральное масло. Рецептуры могут дополнительно включать смазывающие вещества, увлажняющие вещества, эмульгирующее и суспендирующее вещества, консерванты, подслащивающие вещества или ароматизирующие вещества. Композиции по изобретению могут быть составлены таким образом, чтобы предоставить быстрое, замедленное или пролонгированное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту, используя хорошо известные из уровня техники процедуры. Предпочтительно, композиции составляют в виде стандартной лекарственной формы, причем каждая форма содержит примерно от 5 до 500 мг активного ингредиента, предпочтительно, примерно от 25 до 300 мг активного ингредиента. Используемый здесь термин "активный ингредиент" относится к(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'-аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6 дикарбоновой кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли. Термин "стандартная лекарственная форма" относится к физически изолированной единице, подходящей в качестве единичной дозы для человека и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предварительно определенное количество активного вещества, вычисленное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим носителем, разбавителем или наполнителем.(1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль. 2. Соединение по п.1, которое представляет собой моногидрат (1R,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-метилтио-2'аминобутанонил)амино-2,2-диоксо-26-тиабицикло[3.1.0]гексан-4,6-дикарбоновой кислоты. 3. Применение соединения по п.1 или 2 для производства лекарственного средства для лечения неврологических расстройств у пациента. 4. Применение по п.3, где указанное неврологическое расстройство представляет собой церебральную недостаточность, являющуюся результатом операции шунтирования или имплантации на сердце,ишемию головного мозга, травму спинного мозга, травму головы, болезнь Альцгеймера, хорею Гентингтона, боковой амиотрофический склероз, СПИД-ассоциированную деменцию, перинатальную гипоксию,гипогликемическое повреждение нейронов, поражение зрения и ретинопатию, расстройства познавательной способности, идиопатическую и обусловленную действием лекарственного средства болезнь Паркинсона, мышечные спазмы, мигрень, непроизвольное мочеиспускание, толерантность к лекарственному средству, абстиненцию, прекращение приема и пристрастие к наркотикам, прекращение курения,рвоту, отек головного мозга, хроническую боль, нарушения сна, конвульсии, синдром Туретта, синдром нарушения внимания и позднюю дискинезию. 5. Применение по п.4, где указанное неврологическое расстройство представляет собой толерантность к лекарству, абстиненцию, прекращение приема и пристрастие к наркотикам или прекращение курения. 6. Применение соединения по п.1 или 2 для производства лекарственного средства для лечения психиатрического расстройства у пациента. 7. Применение по п.6, где указанное психиатрическое расстройство представляет собой шизофрению, тревожное расстройство и родственные расстройства, депрессию, биполярные расстройства, психоз и обсессивно-компульсивные расстройства. 8. Применение по п.7, где указанное психиатрическое расстройство представляет собой тревожное расстройство и родственные расстройства. 9. Применение по п.7, где указанное психиатрическое расстройство представляет собой шизофрению. 10. Фармацевтическая композиция, включающая в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем соединение по п.1 или 2.