Высокоиммуногенная фармацевтическая композиция, включающая моноклональное антиидиотипическое анти-ca-125-антитело меn2234 и соединение алюминия в качестве адъюванта

Дата публикации и выдачи патента Номер заявки Данное изобретение относится к высокоиммуногенной фармацевтической композиции для парентерального применения, включающей моноклональные антиидиотипические анти-СА-125 антитела и соединение алюминия в качестве адъюванта.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: МЕНАРИНИ ИНТЕРНЕШНЛ ОПЕРЕЙШНЗ ЛЮКСЕМБУРГ С.А. 015543 Область техники, к которой относится изобретение Изобретение относится к области фармацевтических композиций, используемых в качестве вакцин для парентерального применения. Сведения о предшествующем уровне техники Как известно, чтобы усилить иммуногенность профилактических или лечебных вакцин, обычно рассматривается применение адъюванта, такого как соединение алюминия (Fiejka et al., Rocz. Panstw.Zakl. Hig. 1993, 73-80), в приготовлении фармацевтических лекарственных форм, таких как растворы или суспензии для парентерального применения. Цель данных формул - индуцировать максимальный и долговременный иммуногенный эффект. Однако на сегодняшний день в зарегистрированных и выпускаемых на рынок вакцинах применяется ограниченное количество алюминиевых адъювантов и в Европейской фармакопее даже установлен предел 1,25 мг/дозу. Также администрацией по пищевым продуктам и лекарственным средствам (FDA) в 21 CFR 610.15 установлено количество алюминия в рекомендованной индивидуальной дозе биологического продукта,которое не должно превышать:(1) 0,85 мг, если определяется количественным анализом; или(2) 1,14 мг, если определяется путем расчета на основании количества добавленного соединения алюминия; или(3) 1,25 мг, определенных с помощью количественного анализа, при условии, что данные демонстрируют, что количество использованного алюминия является безопасным и необходимым для получения предполагаемого эффекта. Иммуногенность антител, адсорбированных на алюминиевых адъювантах, как кажется, зависит от степени адсорбции (Capelle et al., Vaccine, 2005, 1686-1694), но неясно, какое наилучшее отношение можно использовать для достижения иммуногенного ответа, поддерживая профиль безопасности. Например,Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует адсорбцию на алюминиевых адъювантах при уровнях анатоксинов, превышающих 80% для столбнячного и дифтерийного анатоксинов (Gupta etal., Vaccine, 1995, 1263-1276; WHO Technical Report Series No. 5956, 1996, p. 6). Напротив, данные показывают, что адсорбция столбнячных компонентов на гидроксиде алюминия при уровнях, превышающих 80%, не усиливает иммунный ответ у здоровых взрослых (Paoetti et al., Infect. Immun. 2001, 6696-6701). Наиболее подходящее содержание соединения алюминия для максимизации иммуногенности (без риска неприемлемого побочного токсического эффекта) в моноклональных антителосодержащих вакцинах все ещ остается открытым техническим вопросом. Другим техническим вопросом является стабильность вакцин, которая значительно варьирует. Она может отличаться по устойчивости к хранению при повышенных температурах от дифтерийного и столбнячного анатоксинов и вакцины гепатита В, демонстрирующих высокую термостабильность, лиофилизированных вакцин против кори, желтой лихорадки и БЦЖ, занимающих среднее положение, и пероральной полиомиелитной вакцины, являющейся наименее устойчивой (Galazka et al., Thermostability ofvaccines, World Health Organisation, 1998). Восстановленные вакцины против кори, желтой лихорадки и туберкулеза (БЦЖ) являются нестабильными вакцинами, их необходимо использовать как можно быстрее после растворения и хранить на ледяной бане во время сеанса иммунизации. Хотя столбнячная и дифтерийная вакцины (например, адсорбированные на солях алюминия) в качестве моновалентных вакцин или компонентов комбинированных вакцин стабильны в течение недель при 35-37 С, каждое воздействие комнатной температуры приводит к некоторой деградации вакцины (Galazka et al., см. выше,р. 48). Таким образом, хранение в холодных условиях предписано также для этих "стабильных" типов вакцин (Rote Liste, Edition Cantor Verlag, 2005). Нерешенной технической задачей для данного типа вакцины, содержащей моноклональные антитела, является низкая стабильность при комнатной температуре. Из-за природы сложного белкового действующего начала эти готовые лекарственные формы нужно хранить в холодных условиях (2-8C), требующих постоянной холодовой цепи. Это обусловливает более высокую стоимость распространения, подвергает опасности общий профиль безопасности и, что возможно более важно, ограничивает мировое применение высокоцелебных лекарственных средств, таких как противораковая вакцина. Разработка формул вакцин, гарантирующих постоянное качество готовой лекарственной формы даже при комнатной и более высокой температуре (25-37 С) может, таким образом, повысить общую безопасность и профиль эффективности этих лекарственных средств. Это не только очень полезно для пациентов, но также в целом облегчает обращение с данными ценными лекарственными средствами. С другой стороны, важность иммунотерапии в лечении опухолей у человека, и в частности применения моноклональных и идиотипических антител в качестве лечебных вакцин против опухолей, хорошо известна. Такая вакцина активирует иммунную систему у хозяина, стимулируя гуморальное и клеточное действие против опухоли.-1 015543 Разработка и определение такого вида формулы особо важны для ACA-125/MEN2234 (описанного в ЕР 700305), очень многообещающего антиидиотипического моноклонального антитела, предназначенного для применения в качестве лечебной вакцины против карциномы яичников. Для MEN2234 присвоено следующее наименование по СА индексу: иммуноглобулин G1 анти(мышиный ОС 125) (мышиный моноклональный АСА-125 клон 3D5 g-цепь), дисульфид с мышиным моноклональным АСА-125-клоном 3D5 k-цепью, димер. Соответствующий номер в реестре информационной службы "Федерального химического журнала" CAS 792921-10-9. Предлагаемое международное непатентованное наименование (INN)MEN2234 является мышиным моноклональным антителом, выработанным против мышиного моноклонального антитела ОС-125, которое распознает ассоциированный с опухолью антиген (ТАА) CA-125.MEN2234 эффективно воспроизводит трехмерную структуру CA-125 ТАА и таким образом вызывает у хозяина продукцию антиантиидиотипических антител (Ab3), направленных на опухолевые клетки, экспрессирующие CA-125 антиген. MEN2234 также способен усилить клеточный иммунный ответ хозяина,специфически направленный против CA-125 опухолевых клеток. Примерно 80% пациенток с раком яичников поздней стадии имеют повышенную экспрессиюCA-125. Хотя CA-125 сверхэкспрессируется при раке яичников, человеческий организм сам по себе не способен выработать эффективный иммунный ответ против этих опухолевых клеток. Терапия лечебной вакциной, содержащей MEN2234, действительно способна вновь пробудить иммунную систему хозяина к атаке и разрушению диссеминированных клеток рака яичника. ЕР 700305 описывает моноклональные антиидиотипические анти-CA-125-антитела, но не описана специфическая фармацевтическая формула, пригодная для лечения патологий. В Hybridoma, 1995, 14(2), 164-174 были охарактеризованы антитела АСА-125, но не была разработана формула. В Clinical Cancer Research, 2004, 10, 1580-1587 была проведена вакцинация пациенток АСА-125; не было раскрыто указания на концентрацию алюминия в формуле, но специалист в данной области техники, основываясь на предшествующем уровне техники, смог бы легко предположить относительно низкую концентрацию алюминия в качестве адъюванта (ниже чем 1,25 мг на индивидуальную дозу). В Hybridoma, 2005, 133-140 описана система доставки для постоянного эндогенного высвобожденияACA-125hFc (химерной формы ACA-125) для улучшения иммуногенности в качестве вакцины против рака яичников, но она вырабатывалась как депо in vitro на основании технологии биоинкапсулирования. Дальнейшая публикация обобщает результаты доклинических и клинических исследований вакцин против рака яичника, включая MEN2234, но конкретные данные о формуле или использованной концентрации адъювантов не упоминаются (например, о соединении алюминия не говорится): Clinical CancerResearch, 2004, 1580-1587; Clinical Cancer Research, 2003, 3234-3240; Clinical Cancer Research, 2001, 11541162; Clinical Cancer Research, 2001, 1112-1115). Сущность изобретения Изобретение касается фармацевтической формулы для парентерального применения (предпочтительно подкожного или внутримышечного), содержащей моноклональные антиидиотипические антителаMEN2234, адсорбированные на соединении алюминия, выбранном из гидроксида алюминия (квасцов) или фосфата алюминия, и суспендированной в водной буферной системе. Применение высоких концентраций (выше тех, что обычно рассматриваются и рекомендуются) соединений алюминия в качестве адъюванта обеспечивает вакцину с неожиданными клиническими и фармацевтическими преимуществами, такими как:I) гарантия чрезвычайно высокой специфической иммуногенности в отношении гуморального и клеточного ответа;II) гарантия длительной индукции и поддержания иммунного ответа;III) гарантия безопасности применения лекарственного средства;IV) упрощение процедуры производства и выпуска для конечной готовой лекарственной формы;V) увеличение согласованности при производстве готовой лекарственной формы;VI) улучшение стабильности готовой лекарственной формы также в релевантных температурных диапазонах. Фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением содержат антиидиотипические антитела MEN2234 в количестве от 0,1 до 4 мг/мл, предпочтительно от 0,2 до 2,5 мг/мл, даже более предпочтительно в концентрации примерно 2 мг/мл (от 1,9 до 2,1 мг/мл). Антитела MEN2234 адсорбируются на соединении алюминия (предпочтительно в концентрации примерно 3,5 мг/мл алюминия) и суспендируются в забуференном и изотоническом солевом растворе. Представленные композиции не требуют какого-либо другого ингредиента в дополнение к антителам, адсорбированным на соединении алюминия и солей буферов, что приводит к очень простому раствору, избегающему любых дополнительных вопросов относительно безопасности, возникающих при использовании других агентов, таких как стабилизаторы, антиоксиданты, другие адъюванты и т.д.-2 015543 Предпочтительными буферами являются те, которые получены из фосфатных или нитратных солей. Окончательная композиция содержит предпочтительно 1 мл продукта для парентерального применения, предпочтительно путем подкожного или внутримышечного введения. Одной из главных характеристик данного изобретения является то, что относительно высокая концентрация соединения алюминия, выбранного из алюминия фосфата и гидроксида алюминия, требуется для обеспечения практически полной адсорбции MEN2234 на адсорбенте, причем высоко предпочтительным является гидроксид алюминия (см. табл. 1). Предпочтительная концентрация Al в композиции находится в диапазоне 2,4-5,2 мг/мл, наиболее предпочтительно примерно 3,5 мг/мл (в диапазоне 3,1-3,8 мг/мл), что соответствует содержанию гидроксида алюминия в диапазоне 0,7-1,5% мас./мас., предпочтительно 1% мас./мас. (в диапазоне 0,9-1,1%). Таблица 1 Зависимость адсорбции MEN2234 (неадсорбированный белок) от концентрации алюминия (гидроксида алюминия) Содержание гидроксида алюминия 1% соответствует примерно 3,5 мг алюминия Al на 1 мл, что значительно выше количества, используемого в настоящее время в зарегистрированных и выпускаемых в продажу вакцинах и обычно рекомендуемого властями. Представленные формулы могут быть приготовлены в соответствии со стандартными процедурами,хорошо известными в данной области техники. Общая процедура может применяться следующим образом. Производство конечного продукта осуществляют путем смешивания раствора антител и адъюванта(геля соединения алюминия) при заданных условиях. Готовая лекарственная форма удовлетворяет требованиям стерильности в соответствии со справочником Европейской фармакопеи "Препараты для парентерального применения". Следовательно, в соответствии с нормативными требованиями производственный процесс проходит строго при асептических условиях. Все используемые ингредиенты являются стерильными или профильтрованными в форме раствора через фильтр с диаметром пор 0,22 мкм в процессе производства. Формулы в соответствии с данным изобретением демонстрируют последовательную группу преимуществ.I. Гарантия чрезвычайно высокой специфической иммуногенности в отношении гуморального и клеточного ответа. Авторы изобретения продемонстрировали, что лечение в течение 1 месяца (подкожное введение в течение 4 недель) материалом композиции данного изобретения способно индуцировать специфический гуморальный ответ (специфические антитела, направленные против MEN2234) в количестве, зависящем от концентрации соединения алюминия. Фактически было показано, что уровень гуморального ответа,вызываемого формулой с 1% гидроксидом алюминия (пример 1), значительно выше уровня гуморального ответа, вызванного суспензией, содержащей 0,36% гидроксид алюминия (соответствующий пределу,указанному Европейской фармакопеей и руководствами FDA) или MEN2234 в буферном солевом растворе. Таблица 2 Титры антител в плазме против MEN2234, измеренные в плазме кролика,после 4 еженедельных подкожных введений Р 0,05 по сравнению с двумя другими условиями (критерий множественного сравнения Бонферрони). В дополнение была проведена гистологическая оценка на месте введения для измерения рекрутинга воспалительных клеток и антигенпрезентирующих клеток, необходимых для установления специфического клеточного иммунного ответа. Также для этого параметра ответ на формулу с 1% гидроксидом алюминия (пример 1) был значительно выше того, что достигался с суспензией при более низком содержании Al(OH)3 (0,36%) или раствором MEN2234 без Al(OH)3.-3 015543 Таблица 3 Полуколичественное определение воспалительных клеток в местах введения у кроликов, еженедельно обрабатываемых вакцинамиII. Гарантия длительной индукции и поддержания иммунного ответа. Авторы изобретения продемонстрировали на кроликах, что после иммунизации (4 еженедельные инъекции) материалом композиции примера 1 иммунный ответ поддерживается в течение более длительного периода и даже спустя несколько недель специфические антитела определяются в плазме. С другой стороны, когда иммунизацию проводили суспензией MEN2234 с более низким количествомAl(OH)3 (0,36%) или MEN2234 в растворе без адъюванта, присутствие антител выявлялось в течение более короткого периода времени.III. Гарантия безопасности применения лекарственного средства.MEN2234 суспензию вещества данного изобретения вводили в виде подкожных инъекций в дозе 2 мг/мл в течение 26 недель кроликам. Схема введения: один раз в неделю в течение первого месяца и затем один раз в две недели в течение оставшегося периода. Оценивали местную переносимость и системную безопасность. Даже спустя 15 введений не отмечалось токсических эффектов с точки зрения веса тела, клинических признаков, потребления пищи, гематологии, клинической химии, гистопатологии всех органов. В месте инъекций наблюдался только воспалительный и иммунный ответ как следствие фармакологического действия лекарственного средства. В дополнение данное изобретение, позволяющее снизить количество мышиных антител, также снижает их адсорбцию и пик в системной циркуляции, таким образом уменьшая риск анафилактической реакции(ий).IV. Упрощение процедуры производства и выпуска для конечной готовой лекарственной формы. Приблизительно 1% гидроксид алюминия гарантирует полное связывание MEN2234 (1% неадсорбированных антител). Это обеспечивает очень устойчивую адсорбцию и производственный процесс, не требующий тестов на высвобождение in vivo (иммуногенного ответа у экспериментальных животных),как обычно требуется для многих алюминийсодержащих вакцин, таких как столбнячная и дифтерийная. Полная адсорбция гарантирует оптимальную презентацию антител (Ab2) для иммунной системы хозяина. Подробные исследования механизма адсорбции MEN2234 на гидроксиде алюминия установили,что в фосфатном буферном растворе достигается почти идеальное стехиометрическое распределение обоих веществ. Это гарантирует, как упомянуто выше, простой и устойчивый производственный процесс благодаря способности материала изобретения к самосборке. Уже спустя 15 с осторожного смешивания антитела почти полностью адсорбируются на гидроксиде алюминия (табл. 4). Таблица 4 Зависимость адсорбции MEN2234 от времени смешивания Как видно из табл. 1, с концентрацией адъюванта менее 0,75% не достигается полной адсорбции; концентрации выше 1% (например, 2%) не демонстрируют какого-либо улучшения. Очень быстрая и полная адсорбция MEN2234 на соединении алюминия при более высоких, чем рекомендуемые, концентрациях адсорбента позволяет значительно упростить производство композиции в качестве лекарственного средства. За секунды конечную формулу получают простым смешиванием моноклональных антител с адъювантом. Этот этап смешивания можно проводить рутинно путем применения стандартного оборудования для асептической обработки на фармацевтических предприятиях. Самособирающиеся характеристики описанной системы ведут к совершенно новым перспективам производства и стабилизации данной формулы, а также адсорбированных моноклональных антител и вакцин в целом. Полная адсорбция MEN2234 на алюминиевом адъюванте за секунды может также позволить получать конечную суспензию непосредственно перед подкожным или внутримышечным введением просто путем смешивания требуемых количеств лекарственной субстанции и алюминиевого адъюванта в месте конечного применения у пациента, например в госпитале.-4 015543 Таким образом, конкретный аспект данного изобретения представлен в форме, где активное действующее вещество вакцины (антитела MEN2234) и адъювант (соединение алюминия, предпочтительно гидроксид алюминия) хранятся отдельно и готовы к смешиванию непосредственно перед введением пациенту. Предпочтительное время для этого этапа смешивания должно составлять от 10 с и 10 мин перед введением пациенту. Для этой конкретной формы композиция должна предоставляться с антителами и раствором адъюванта, хранящимися по отдельности, но разлитыми в фармацевтические стандартные контейнеры, такие как флаконы, ампулы, предварительно заполненные шприцы или подходящие двухкамерные системы для смешивания и/или восстановления. Моноклональные антитела могут применяться не только в форме забуференного в конечном итоге раствора, но также, например, в форме порошка. Возможность применения лекарственной субстанции в твердой форме позволяет использовать для него все методики, предназначенные для повышения стабильности моноклональных антител или вакцин (лиофилизацию, высушивание распылением и т.д.). Это представляет значительный прогресс в обработке и усовершенствовании стабильности для всех адсорбированных вакцин в целом и, в частности, для тех, которые содержат моноклональные антитела, такие как MEN2234. Главные недостатки адсорбированных вакцин, такие как непрерывная холодовая цепь при транспортировке и хранении, могут быть устранены и срок годности готовой лекарственной формы может быть увеличен. Как упоминалось, иммуногенная активность in vivo моноклональных антител, содержащих фармацевтические композиции, зависит вариабельным образом от степени адсорбции антител на применяемых адсорбентах (Capelle et al., Vaccine, 2005, 1686-1694). Таким образом, современным состоянием данной области техники является определение биологической иммуногенной активности (адсорбированных) вакцин in vivo у животных перед выпуском готовой лекарственной формы. Воспроизводимая адсорбцияMEN2234 на алюминиевом адъюванте значительно упрощает процедуру выпуска. Благодаря надежности адсорбции тестирование можно проводить только путем анализа in vitro для определения мощности композиции. Обычная процедура определения также биологической активности in vivo на животных для композиции данного изобретения является излишней.V. Увеличение согласованности при производстве готовой лекарственной формы. Воспроизводимость адсорбции MEN2234 с применением более высоких, чем рекомендовано, концентраций, например гидроксида алюминия, значительно повышает согласованность при производстве готовой лекарственной формы. Как показано в табл. 5, если концентрация гидроксида алюминия в формулах находится в диапазоне 0,7-2% в/о, адсорбция MEN2234 является полной (1% свободных антител) для всех произведенных серий. Таблица 5 Вариабельность адсорбции MEN2234 (неадсорбированные антитела) на гидроксиде алюминия при производстве Полная и воспроизводимая адсорбция предотвращает далее возможные осложнения при обработке,такие как образование агломератов антител. Антитела в растворе подвержены формированию агрегатов. Агрегация антител в растворе может быть вызвана избыточными силами сдвига в жидкой фазе, например, при перемешивании. Эти агрегаты не могут быть повторно растворены и ведут к значительному уменьшению биологической активности вакцины. Однако благодаря процессу полной и быстрой адсорбции, этого явления можно полностью избежать для композиций, являющихся предметом данного изобретения.VI. Улучшение стабильности готовой лекарственной формы также в релевантных температурных диапазонах. Неожиданно композиция из примера 1 является гораздо более стабильной (даже при 25 и 37 С) по сравнению с забуференным раствором MEN2234. Это простое, но очень эффективное средство (повышение концентрации гидроксида алюминия в 2-3 раза сверх рекомендуемой дозы) гарантирует почти полное связывание, а также соответственно стабильность. В табл. 6 представлены релевантные данные по стабильности для MEN2234 в растворе и в формуле по примеру 1.-5 015543 Таблица 6 Данные по стабильности для MEN2234 в растворе и при адсорбции на гидроксиде алюминия Соответственно, изобретение обеспечивает требуемую стабильность и активность антител при обычной температуре тела (36-37 С) после введения человеку. Примеры Не ограничивающими примерами изобретения являются следующие. Пример 1. Суспензия для инъекций. Используют для производства гидроксида алюминия, гидратированного, для адсорбции. Композицию готовили в соответствии со стандартной процедурой, как описано ранее, простым смешиванием MEN2234 с суспензией гидроксида алюминия, гидрата, в растворе, забуференном подходящими солями. Пример 2. Суспензия для инъекций. Используют для производства гидроксида алюминия, гидратированного, для адсорбции. Готовят, как в примере 1. Пример 3. Суспензия для инъекций. Используют для производства гидроксида алюминия, гидратированного, для адсорбции. Готовят, как в примере 1.-6 015543 Пример 4. Определение аминокислотной последовательности MEN2234 (абаговомаг). Первую часть определения аминокислотной последовательности абаговомаба проводили с использованием методики автоматического секвенирования в соответствии с процедурой деградации по Эдману, в белковом секвенаторе, где абаговомаб был ковалентно связан с мембраной для секвенирования(первые 15 аминокислот легкой цепи). Автоматизированное секвенирование по Эдману было не способно предоставить какие-либо данные о последовательности тяжелой цепи, что позволило предложить модификацию N-концевой группы тяжелой цепи пироглютаминовой кислотой, для более расширенного секвенирования с хорошо известной методикой секвенирования ЖХ-МС/МС с применением масс-спектрометрии (например, Proc. Natl.Acad. Sci. USA, 1986 Sep., 83(17), 6233-6237). Вкратце, различные образцы антител фрагментировали различными протеолитическими ферментами перед ЖХ-МС/МС анализом и получали несколько серий фрагментов с перекрывающейся последовательностью. При нахождении схемы перекрывания этих фрагментов можно определить общую последовательность легкой цепи антитела (полные аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей показаны на SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2). В качестве конечной проверки надежности экспериментальных результатов зарегистрированные последовательности также подтверждали с помощью анализа сходства последовательностей при помощи пакета программ BLAST против неизбыточной базы данных по структуре белка, оптимизированной для анализа белков (MSDB, загружена в марте 2007 с ftp-сайта Европейского института биоинформатики). Поскольку при масс-спектрометрии невозможно отличить изолейцин от лейцина, в приведенных последовательностях SEQ ID NO: 1 и 2 эта неопределенность выражена как "X".- 14015543 ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Высокоиммуногенная фармацевтическая композиция для парентерального введения, включающая моноклональное антитело и в качестве адъюванта соединение алюминия с концентрацией от 2,4 до 5,2 мг/мл иона алюминия, в которой указанным моноклональным антителом является моноклональное антиидиотипическое анти-СА-125 антитело MEN2234, включающее SEQ ID NO: 1 иSEQ ID NO: 2, содержащееся в количестве 0,1-4 мг/мл, а указанное соединение алюминия выбрано из гидроксида алюминия и фосфата алюминия. 2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой соединение алюминия содержится в концентрации, соответствующей 3,1-3,8 мг/мл иона алюминия. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, в которой соединение алюминия является гидроксидом алюминия. 4. Фармацевтическая композиция по п.3, в которой антитело MEN2234 содержится в количестве 0,2-2,5 мг/мл. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой антитело MEN2234 содержится в количестве 1,9-2,1 мг/мл. 6. Фармацевтическая композиция по пп.1-5, в которой антитело MEN2234 адсорбировано на соединении алюминия и суспендировано в забуференном и изотоническом физиологическом растворе. 7. Фармацевтическая композиция по пп.1-6 в форме жидкой суспензии. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, пригодная для подкожного или внутримышечного введения. 9. Фармацевтическая композиция по пп.1-8, имеющая следующий состав: а)Na2HPO47H2O вода для инъекций до 1,00 мл или б)Na2HPO47H2O вода для инъекций до 1,00 мл или в)Na2HPO47H2O вода для инъекций до 1,00 мл 10. Фармацевтическая композиция по пп.1-9 для применения в качестве противоопухолевой вакцины для лечения или профилактики опухолей. 11. Фармацевтическая композиция по п.10 для применения в качестве противоопухолевой вакцины для лечения опухолей яичников.