Применение композиции, содержащей покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин, для лечения цистиноза и способ лечения цистиноза

ПРИМЕНЕНИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩЕЙ ПОКРЫТЫЕ ЭНТЕРОСОЛЮБИЛЬНОЙ ОБОЛОЧКОЙ ЦИСТАМИН ИЛИ ЦИСТЕАМИН, ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЦИСТИНОЗА И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЦИСТИНОЗА Изобретение направлено на применение композиции, содержащей покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин в виде фармакологически приемлемых соли, эфира или амида, для лечения цистиноза, в котором указанная композиция принимается 2 раза в день. Изобретение также направлено на способ лечения пациента с цистинозом, включающий введение пациенту фармацевтической композиции, включающей цистеамин или цистамин, заключенные в энтеросолюбильную лекарственную форму, обеспечивающую увеличение доставки в тонкую кишку, в котором указанная фармацевтическая композиция вводится 2 раза в день.(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ТЕ РИДЖЕНТС ОФ ТЕ ЮНИВЕРСИТИ ОФ КАЛИФОРНИЯ 023971 Ссылка на родственные заявки Эта заявка заявляет приоритет согласно 35 U.S.С. 119 США Предварительной Заявки порядковый 60/762715, зарегистрированной 27 января 2006 г., раскрытие которой включено в данное описание путем отсылки. Область техники, к которой относится изобретение Изобретение направлено на применение композиции, содержащей покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин в виде фармакологически приемлемых соли, эфира или амида, для лечения цистиноза, в котором указанная композиция принимается 2 раза в день. Изобретение также направлено на способ лечения пациента с цистинозом, включающий введение пациенту фармацевтической композиции, включающей цистеамин или цистамин, заключенные в энтеросолюбильную лекарственную форму, обеспечивающую увеличение доставки в тонкую кишку, в котором указанная фармацевтическая композиция вводится 2 раза в день. Предшествующий уровень техники Цистиноз представляет собой редкую, аутосомно-рецессивную болезнь, которую вызывает внутрилизосомальное накопление аминокислоты цистина в различных тканях, включая селезенку, печень, лимфатические узлы, почки, костный мозг и глаза. Нефропатический цистиноз связан с повреждением почки, что делает необходимой трансплантацию почки. До настоящего времени единственным специальным лечением нефропатического цистиноза является сульфгидрильный препарат, цистеамин. Показано, что цистеамин понижает внутриклеточные уровни цистина, тем самым уменьшая скорость прогрессирования поражения почки у детей. Цистеамин, вследствие механизма повышенной выработки гастрина и кислоты желудочного сока,является ульцерогенным (вызывающим язву). При оральном применении у детей с цистинозом также было показано, что цистеамин вызывает 3-кратное увеличение выработки кислоты желудочного сока и увеличение на 50% уровней гастрина в сыворотке. В результате, субъекты, использующие цистеамин,испытывают желудочно-кишечные (GI) симптомы и часто не способны принимать цистеамин регулярно или в полной дозе. Для достижения продолжительного снижения уровней цистина в лейкоцитах пациентам обычно необходимо орально принимать цистеамин каждые 6 ч, что неизменно означает прерывание сна. Однако когда одиночная доза цистеамина вводится внутривенно, лейкоцитный уровень цистина остается подавленным в течение более 24 ч вероятно вследствие того, что концентрации цистеамина в плазме были выше и достигались быстрее, чем в том случае, когда препарат применяется орально. Регулярное внутривенное введение цистеамина не представляется возможным. Таким образом, существует необходимость в разработке композиций и способов доставки, которые будут приводить к более высокой концентрации в плазме и таким образом внутриклеточной концентрации, а также уменьшению числа ежедневных доз и, следовательно, улучшению качества жизни пациентов. Краткое описание изобретения Изобретение предусматривает применение композиции, содержащей покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин в виде фармакологически приемлемых соли, эфира или амида, для лечения цистиноза, в котором указанная композиция принимается 2 раза в день. Изобретение также предусматривает фармацевтический состав, содержащий композицию, содержащую покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин в виде фармакологически приемлемых соли, эфира или амида, в фармацевтически приемлемом носителе. Изобретение также направлено на способ лечения пациента с цистинозом, включающий введение пациенту фармацевтической композиции, включающей цистеамин или цистамин, заключенные в энтеросолюбильную лекарственную форму, обеспечивающие увеличение доставки в тонкую кишку, в котором указанная фармацевтическая композиция вводится 2 раза в день. Краткое описание чертежей Фиг. 1 показывает энтероободочную (enterocolonic) трубку. (А) Представляет собой абдоминальный рентгеновский снимок, показывающий рентгеноконтрастную утяжеленную верхушку трубки, входящую в восходящую ободочную кишку. (В) Представляет собой контрастное infused (при инфузии) изображение. Трубка проходит через тонкую кишку, причем верхушка (верхний конец) закреплена. Фиг. 2 демонстрирует значение уровней цистеамина в плазме, взятой у пациентов с цистинозом и у контрольных субъектов после доставки вещества в различные места кишечника. Планки погрешностей представляют собой стандартную ошибку значения. У 2 контрольных субъектов наиболее периферическим (дистальным) местом доставки препарата была средне-подвздошная область. Фиг. 3 демонстрирует значение изменения уровней цистина в лейкоцитах по сравнению с базисными уровнями в течение 12-часового периода времени после доставки цистеамина в разные места кишечника. Отрицательные уровни означают увеличенное истощение цистина в лейкоцитах по сравнению с базисным уровнем. Фиг. 4 демонстрирует диаграмму разброса данных плазменного цистеамина Cmax против АОС WBC изменений цистамина от базисного значения. Положительное значение означает понижение от базисного значения. Отрицательное значение означает повышение от базисного значения. Изменение АОС от ба-1 023971 зисного значения зависело от Cmax для цистеамина (Р 0,001). Фиг. 5 показывает последовательные уровни цистина в лейкоцитах после того, как препарат был дан в виде обычного Цистагона и в виде цистеамина с энтеросолюбильным покрытием (ЕС) через день. Эти последовательные уровни были получены в течение стационарной фазы исследования. Желательными уровнями цистина являются уровни ниже 1 ммоль/1/2 цистин/мг белка. Более высокая доза препарата с энтеросолюбильным покрытием (желтый) давала в результате длительное подавление цистина с 12 ч уровнями все еще в желательном пределе. Фиг. 6 показывает уровни цистеамина в крови после одной дозы 450 мг Цистагона (серия 1), 450 мг ЕС-цистеамина (серия 2) и 900 мг ЕС-цистеамина (серия 3). Cmax является самой высокой после введения ЕС препарата. Кроме того, время до Cmax является самым длинным после введения ЕС-препарата, наводя на мысль, что вещество высвобождается из капсулы в тонкой кишке, а не в желудке. Подробное описание изобретения В настоящем описании формы единственного числа включают и множественное число, если контекст явно не диктует иначе. Таким образом, например, "производное" включает множество таких производных, и "субъект" включает один или больше субъектов, известных специалистам в данной области техники, и так далее. Если не определено иначе, все технические и научные термины, использованные в данном описании, имеют одно и то же значение, как обычно понятно среднему специалисту в данной области техники,к которой это изобретение относится. Хотя в осуществлении на практике раскрытых способов и композиций могут быть использованы способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, в данном описании описаны типичные способы, устройства и материалы. Публикации, рассмотренные выше и на всем протяжении текста, предоставлены исключительно для их раскрытия до даты подачи настоящей заявки. Ничто в данном описании не подлежит истолкованию как признание, что изобретатели являются не имеющими права датировать задним числом такое раскрытие на основании предварительного раскрытия. Цистиноз представляет собой метаболическую болезнь, отличающуюся ненормальным накоплением аминокислоты цистина в различных органах тела, таких как почка, глаз, мышца, поджелудочная железа и мозг. Различные органы поражаются болезнью в разном возрасте. Существуют три клинических формы цистиноза: детский (или нефропатический) цистиноз; возрастной (с поздним началом) цистиноз и доброкачественный цистиноз. Последняя форма не вызывает повреждение почек. Детский цистиноз обычно диагностируется в возрасте от 6 до 18 месяцев по симптомам усиленной жажды и мочеиспускания, остановке в весе, рахиту и случаям обезвоживания. Эти явления вызывает расстройство, названное почечной тубулопатией или синдромом Фалкони. В результате важные питательные вещества и минералы выводятся с мочой. У детей с цистинозом также появляются кристаллы в глазах (в возрасте после одного года), что может приводить к светочувствительности. У них также наблюдается повышенный уровень цистина в белых клетках крови (лейкоцитах) без вредного влияния, что способствует установлению диагноза. Без специального лечения у детей с цистинозом развивается терминальная стадия почечной недостаточности, т.е. потеря их почечной функции, обычно в возрасте между 6 и 12 годами. Без лечения цистеамином у субъектов могут развиться осложнения в других органах вследствие продолжающегося накопления цистина по всему телу. Эти осложнения могут включать мышечное истощение, затрудненное глотание, диабет и гипотиреоидизм. Некоторые симптомы включают неспособность почек концентрировать мочу и предоставление возможности выведения значительного количества натрия, калия, фосфора, бикарбоната и субстанций,подобных карнитину, с мочой. Симптоматическое лечение возмещает эти почечные потери. Субъектам необходимо выпивать большое количество воды, так как каждый день теряется с мочой вплоть до 2-3 л воды, что вызывает чувство жажды. Кроме того, необходимо компенсировать потерю у субъекта электролитов в моче (натрия, калия, бикарбоната, фосфора). Часто необходимо добавлять солевые дополнения в виде хлорида натрия. Дети также теряют бикарбонат и калий с мочой, что можно компенсировать употреблением бикарбоната натрия и бикарбоната калия. Специфические способы лечения цистиноза нацелены на уменьшение накопления цистина в клетках. В настоящее время цистиноз лечат цистеамином (Цистагон). Цистеамин также улучшает рост детей больных цистинозом. Цистеамин является активным только в очень короткий период времени, не превышающий 5-6 ч, таким образом, необходимо введение капсул Цистагона 4 раза в день, то есть каждые 6 ч. К тому же такое лечение является эффективным, только если продолжается день за днем, бесконечно, для того, чтобы контролировать болезнь. Около 1000 детей нуждаются в пожизненном лечении для продления их жизни и предотвращения ухудшения почечной функции. Однако, как указано выше,введение цистеамина приводит к увеличенной желудочной секреции и является ульцерогенным. Кроме того, пути и регулирование времени введения представляют трудности для субъектов, нуждающихся в такой терапии. В последнее время сходное вещество, названное цистамином (дисульфидная форма цистеамина), исследовали при нейродегенеративных расстройствах, включая болезни Хантингтона и Паркинсона. Цистамин имеет сходные побочные эффекты и трудности дозирования, как цистеамин.-2 023971 Цистеамин является сильным стимулятором секреции кислоты желудочного сока, который используют для того, чтобы вызвать изъязвление двенадцатиперстной кишки у лабораторных животных; причем исследования на людях и животных показали, что вызванная цистеамином гиперсекреция кислоты желудочного сока наиболее вероятно является опосредованной через гипергастринемию. В предшествующих исследованиях, проведенных у детей с цистинозом, которые страдали от систематических "верхних" желудочно-кишечных симптомов, было показано, что однократная оральная доза цистеамина (11-23 мг/кг) вызывает гипергастринемию и 2-3-кратное увеличение гиперсекреции кислоты желудочного сока. Симптомы, испытываемые этими отдельными представителями, включали боли в животе, изжогу, тошноту, рвоту и потерю аппетита. Изобретение демонстрирует, что вызванная цистеамином гипергастринемия возникает, отчасти, как местное действие на желудочные антрально-преобладающие G-клетки у восприимчивых индивидуумов. Данные также означают, что это является также системным воздействием высвобождения гастрина посредством цистеамина. В зависимости от пути введения, уровни гастрина в плазме обычно достигают максимума после доставки внутрь желудка в течение 30 мин, тогда как уровни цистеамина в плазме достигают максимума позже. Субъектам с цистинозом необходимо принимать цистеамин (Цистагон) орально каждые 6 ч, днем и ночью. При регулярном приеме, цистеамин может уменьшить внутриклеточный цистин вплоть до 90%(как измерено в циркулирующих лейкоцитах), и как было показано, это уменьшает скорость прогрессии поражения почек/трансплантацию и также устраняет необходимость тиреотоксической заместительной терапии. К сожалению, вследствие жесткого лечебного режима и связанных с ним симптомов несоблюдение указаний врача при терапии цистамином остается проблемой, особенно среди подростков и молодых пациентов. Соблюдение терапевтического режима можно улучшить путем уменьшения частоты необходимого дозирования цистеамина. Изобретение демонстрирует, что доставка цистеамина в тонкую кишку уменьшает желудочное расстройство и изъязвление и улучшает бионакопление цитамина в циркуляции. Доставка цистеамина в тонкую кишку является успешной вследствие улучшенной скорости абсорбции из SI, большей площади поверхности SI, и/или меньше цистеамина подвергается разрушению"первого прохода" печенью при абсорбции через тонкую кишку. Изобретение демонстрирует значительное уменьшение цистеина в лейкоцитах в течение 1 ч после доставки цистеамина. Кроме того, сульфгидрильные (SH) соединения, такие как цистеамин, цистамин и глутатион относятся к числу наиболее важных и активных внутриклеточных антиоксидантов. Цистеамин защищает животных от костно-мозгового и желудочно-кишечного лучевого синдрома. Обоснование важности SHсоединений, кроме того, подтверждено данными наблюдения за митотическими клетках. Эти клетки являются наиболее чувствительными к лучевому поражению в плане репродуктивной смерти, как замечено, имеют самый низкий уровень SH-соединений. Наоборот, клетки в S-фазе, которые являются наиболее устойчивыми к лучевому поражению, при использовании тех же самых критериев показали самые высокие уровни собственного SH-соединения. Кроме того, когда митотические клетки были обработаны цистеамином, они становились очень устойчивыми к радиации. Также отмечено, что цистеамин может непосредственно защищать клетки от индуцированных мутаций. Полагают, что защита является следствием удаления свободных радикалов, или непосредственно или через высвобождение белок-связанного GSH. Фермент, который освобождает цистеамин из коэнзима А, был описан в птичьей печени и свиной почке. В последнее время появились исследования, демонстрирующие защитное действие цистеамина от гепатотоксических веществ ацетаминофена, бромбензола и фаллоидина. Было обнаружено, что цистамин, кроме его роли в качестве радиопротектора, смягчает тремор и продлевает жизнь у мышей с генной мутацией, относящейся к болезни Хантингтона (HD). Вещество может действовать, увеличивая активность белков, которые защищают нервные клетки, или нейроны, от дегенерации. Цистамин, по-видимому, инактивирует фермент, называемый трансглутаминазой, и таким образом приводит к уменьшению белка хантингтина (Mature Medicine 8, 143-149, 2002). Кроме того, было обнаружено, что цистамин увеличивает уровни определенных нейропротекторных белков. Однако,деградация и плохое поглощение, обусловленные современными способами и лекарственными формами доставки цистамина, требуют чрезмерного дозирования. Изобретение не ограничено в отношении конкретной соли цистеамина или соли цистамина или сложного эфира или производного; композиции изобретения могут содержать любой цистеамин или цистамин, производное цистеамина или цистамина, или комбинацию цистеамина или цистаминов. Активные вещества в композиции, т.е. цистеамин или цистамин, могут быть введены в виде фармакологически приемлемой соли, сложного эфира, амида, пролекарства или аналога или как комбинация этого. Соли,сложные эфиры, амиды, пролекарства и аналоги активных веществ могут быть получены с помощью стандартных методик известных специалистам в области синтетической органической химии и описаны,например, J. March, "Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure," 4th Ed, (NewYork: Wiley-Interscience, 1992). Например, соли присоединения основания (basic addition salts) получены из нейтрального вещества, с использованием обычных способов, включающих реакцию одной или больше свободных гидроксильных групп активного вещества с подходящим основанием. Обычно нейтральную форму вещества растворяют в полярном органическом растворителе, таком как метанол или этанол,и туда добавляют основание. Получающуюся соль или осаждают или извлекают из раствора добавлени-3 023971 ем менее полярного растворителя. Подходящие основания для образования солей присоединения основания (basic addition salts) включают, но не ограничиваются, неорганические основания такие как, гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, гидроксид кальция, триметиламин или тому подобное. Получение сложных эфиров включает функционализацию гидроксильных групп, которые могут присутствовать в молекулярной структуре вещества. Сложные эфиры являются обычно ацилзамещенными производными свободных спиртовых групп, т.е. компонентами, которые получены от карбоновых кислот формулы R-COOH, где R является алкилом и обычно является низшим алкилом. Сложные эфиры могут быть возвращены в свободные кислоты, если необходимо, с помощью обычных методик гидрогенолиза или гидролиза. Получение амидов и пролекарств может быть осуществлено аналогичным способом. Другие производные и аналоги активных веществ могут быть получены с помощью стандартных методик, известных специалистам в области синтетической органической химии, или могут быть установлены посредством ссылки на подходящую литературу. Изобретение обеспечивает способы доставки и композиции, которые преодолевают проблемы, связанные с доставкой цистеамина и цистамина. Способы компоновки изобретения предоставляют композиции с энтеросолюбильным покрытием, которые приводят к менее частому дозированию (2 Х/день против 4 Х/день), увеличению согласия пациентов и меньшим желудочно-кишечным побочным явлениям(например, боль, изжога, выработка кислоты, рвота) и другим побочным явлениям (например, пациенты пахнут подобно тухлым яйцам - отдельная проблема согласия, когда пациент достигает половой зрелости). Изобретение предоставляет цистеаминовые композиции (сульфгидрил/Цистагон) и цистаминовые композиции с энтеросолюбильным покрытием. Изобретение предоставляет способы лечения с применением цистеамина и цистамина с энтеросолюбильным покрытием соответственно. Изобретение предоставляет композиции, содержащие приготовленные энтеросолюбильным образом цистеамин и производные цистамина. Примеры производных цистеамина включают гидрохлорид,битартрат и фосфоцистеамин производные. Цистамин и производные цистамина включают сульфатированный цистамин. Энтеросолюбильные покрытия отсрочивают высвобождение до того, как цистамин,производное цистамина или производное цистеамин/Цистагон достигает кишечного тракта, обычно тонкой кишки. Вследствие энтеросолюбильных покрытий доставка в тонкую кишку улучшается, тем самым, улучшая поглощение активного ингредиента, в то время как желудочные побочные явления уменьшаются. Это будет приводить к уменьшению необходимости частого введения, с которым в настоящее время связана терапия Цистагоном, цистамином и цистеамином. Вещество или таблетка с "энтеросолюбильным покрытием" относится к веществу или таблетке, которая покрыта некоторой субстанцией, т.е. "энтеросолюбильным покрытием", которое остается неповрежденным в желудке, но растворяется и высвобождает препарат, как только достигает тонкой кишки,При использовании в данном описании "энтеросолюбильное покрытие" представляет собой материал, полимерный материал или материалы, которые полностью закрывают сердцевину из лекарства (например, цистамина; цистеамина, Цистагона). Обычно, значительное количество или весь энтеросолюбильный покрывающий материал растворяется до того, как медикамент или терапевтически активное вещество высвобождается из лекарственной формы, с тем, чтобы достичь отсроченного растворения сердцевины, состоящей из лекарства. Подходящий полимер, чувствительный к рН, представляет собой такой полимер, который будет растворяться в кишечных соках при высоком значении рН (рН больше,чем 4,5), таком, как в тонкой кишке, и, следовательно, допускать высвобождение фармакологически активной субстанции в областях тонкой кишки и не допускать в верхней части желудочно-кишечного тракта, такой как желудок. Покрывающий материал выбран так, что терапевтически активное вещество будет высвобождаться,когда лекарственная форма достигнет тонкой кишки или области, в которой значение рН больше, чем рН 4,5. Покрытия могут быть рН-чувствительными материалами, которые остаются незатронутыми при более низком значении рН среды желудка, но которые расщепляются или растворяются при значении рН,обычно имеющемся в тонкой кишке пациента. Например, энтеросолюбильный покрывающий материал начинает растворяться в водном растворе при рН приблизительно от 4,5 до 5,5. Например, рНчувствительные материалы не будут подвергаться значительному растворению до тех пор, пока лекарственная форма не покинет желудок. Значение рН тонкой кишки постепенно увеличивается приблизительно от 4,5 до 6,5 в дуоденальной луковице, до около 7,2 в дистальных частях тонкой кишки (подвздошной кишки). Для того чтобы обеспечить предсказуемое растворение, соответствующее времени прохождения до тонкой кишки около 3 ч (например, 2-3 ч), и сделать возможным воспроизводимое высвобождение здесь, покрытие должно начать растворяться в пределах значений рН двенадцатиперстной кишки и продолжать растворяться в пределах значений рН в тонкой кишке. Следовательно, количество энтеросолюбильного полимерного покрытия должно быть достаточным, для того чтобы в основном раствориться в течение приблизительно 3 ч транзитного времени в тонкой кишке (например, проксимальной и средней тонкой кишке). Энтеросолюбильные покрытия использовали в течение многих лет для задержки высвобождения-4 023971 лекарства из орально принимаемых внутрь лекарственных форм. В зависимости от композиции и/или толщины энтеросолюбильные покрытия являются устойчивыми к кислоте желудка в течение необходимых периодов времени до того, как они начнут расщепляться и сделают возможным высвобождение вещества в нижнем отделе желудка или верхней части тонкой кишки. Примеры некоторых энтеросолюбильных покрытий описаны в патенте США 5225202, который полностью включен в данное описание путем отсылки. Как далее установлено в патенте США 5225202, некоторыми примерами ранее применяемых покрытий являются воск и глицерилмоностеарат; воск, шеллак и целлюлоза и цетиловый спирт,мастика и шеллак, а также шеллак и стеариновая кислота (патент США 2809918); поливинилацетат и этилцеллюлоза (патент США 3835221); и нейтральный сополимер сложных эфиров полиметакриловой кислоты (Eudragit L30D) (F.W. Goodhart et al., Pharm. Tech., p. 64-71, April 1984); сополимеры метакриловой кислоты и метиловый эфир метакриловой кислоты (Эудрагиты), или нейтральный сополимер сложных эфиров полиметакриловой кислоты, содержащий стеараты металлов (Mehta et al., патенты США 4728512 и 4794001). Такие покрытия содержат смеси жиров и жирные кислоты, шеллак и производные шеллака и кислые фталаты целлюлозы, например, имеющие свободное карбоксильное содержимое. Описания подходящих энтеросолюбильных покрывающих композиций см. Remington's на с. 1590 и Zeitova etal. (патент США 4432966). Соответственно повышенная адсорбция в тонкой кишке вследствие энтеросолюбильных покрытий цистамина, производных цистеамина (включая Цистагон) может приводить в результате к положительной динамике цистиноза. Обычно энтеросолюбильное покрытие содержит полимерный материал, который предотвращает высвобождение цистеамина или цистамина при низком значении рН окружающей среды желудка, но который ионизируется при незначительно более высоком значении рН, обычно рН 4 или 5, и таким образом полностью растворяется в тонком кишечнике для того, чтобы здесь постепенно высвобождать активное лекарство. Таким образом, в числе наиболее эффективных энтеросолюбильных покрывающих материалов находятся поликислоты, имеющие pKa в пределах приблизительно от 3 до 5. Подходящие энтеросолюбильные покрывающие материалы включают, но не ограничиваются, полимеризованный желатин, шеллак, сополимер метакриловой кислоты типа С NF, целлюлозы бутират фталат, целлюлозы гидроген фталат, целлюлозы пропионат фталат, поливинилацетат фталат (PVAP), целлюлозы ацетат фталат (САР), целлюлозы ацетат тримеллитат (CAT), гидроксипропил метилцеллюлозы фталат, гидроксипропил метилцеллюлозы ацетат, диоксипропил метилцеллюлозы сукцинат, карбоксиметил этилцеллюлоза (СМЕС), гидроксипропил метилцеллюлозы ацетат сукцинат (HPMCAS), и полимеры акриловой кислоты и сополимеры, обычно образованные из метил акрилата, этил акрилата, метилметакрилата и/или этил метакрилата с сополимерами сложных эфиров акриловой и метакриловой кислоты (Эудрагит NE,Эудрагит RL, Эудрагит RS). Например, энтеросолюбильное покрытие может содержать Эудрагит L30D,триэтилцитрат и гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), Цистагон (или другое производное цистеамина), в котором покрытие составляет от 10 до 13% конечного продукта. Посредством "фармацевтически приемлемого носителя" или "фармацевтически приемлемого носителя" обозначены материалы, которые являются пригодными для орального введения и не являются биологически, или иным образом, неподходящими, т.е. которые могут быть введены субъекту вместе с активным ингредиентом без стимулирования любых нежелательных биологических эффектов или взаимодействующих вредоносным образом с любым из других компонентов фармацевтической композиции, в которой они содержатся. Подобным образом, "фармацевтически приемлемая" соль, сложный эфир или другое производное активного вещества включает, например, соли, сложные эфиры или другие производные, которые не являются неподходящими биологически или иным образом. "Стабилизирующие вещества" относятся к соединениям, которые снижают скорость, с которой фармацевтический препарат разрушается, особенно оральное лекарственное средство в условиях окружающей среды при хранении. Посредством терминов "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" энтеросолюбильных лекарственных форм цистеамина или цистамина упоминается нетоксичное, но достаточное количество препарата для обеспечения желательного терапевтического эффекта. Как будет отмечено ниже, точное необходимое количество будет изменяться от субъекта к субъекту, в зависимости от возраста, веса и общего состояния субъекта, серьезности состояния, которое необходимо лечить, и тому подобного. Соответствующее "эффективное" количество в любом индивидуальном случае может быть определено средним специалистом в данной области техники только с помощью обычного экспериментирования. В одном аспекте изобретения предоставлена стабилизированная фармацевтическая композиция для введения цистеамина или цистамина, в которой цистеамин или цистамин является покрытым энтеросолюбильной оболочкой. Цистеамин или цистамин присутствует в композиции в терапевтически эффективном количестве; обычно, композиция представляет собой форму единицы дозировки. Количество введенного цистеамина или цистамина будет, конечно, зависеть от возраста, веса и общего состояния субъекта, серьезности состояния, которое необходимо лечить, и предписания лечащего врача. Подходящие терапевтические количества будут известны специалистам в данной области и/или описаны в текстах подходящих ссылок и-5 023971 литературе. В одном аспекте, дозу вводят дважды в день приблизительно 0,5-1,0 г/м 2 (например, 0,7-0,8 г/м 2) площади поверхности тела. Современные дозировки без энтеросолюбильного покрытия составляют около 1,35 г/м 2 площади поверхности тела и вводятся 4-5 раз в день. Цистеамин или цистамин с энтеросолюбильной оболочкой может содержать различные эксципиенты, как хорошо известно в фармацевтическом деле, при условии, что такие эксципиенты не проявляют дестабилизирующего действия на любые компоненты в композиции. Таким образом, эксципиенты, такие как связующие вещества, агенты-наполнители, разбавители, дезинтегрирующие вещества, смазочные материалы, наполнители, носители и тому подобные могут быть скомбинированы с цистеамином или цистамином. Для твердых композиций разбавители обычно нужны для того, чтобы увеличить массу таблетки для обеспечения удобной величины для уплотнения. Подходящие разбавители включают дикальций фосфат, кальций сульфат, лактозу, целлюлозу, каолин, маннитол, натрий хлорид, сухой крахмал и порошкообразный сахар. Связующие вещества используют для придания связывающих свойств лекарственной форме в виде таблетки, и таким образом гарантировать, что таблетка остается неповрежденной после уплотнения. Подходящие связующие материалы включают, но не ограничиваются, крахмал (включая кукурузный крахмал и пептизированный крахмал), желатин, сахара (включая сахарозу, глюкозу, декстрозу и лактозу), полиэтиленгликоль, воски и природные и синтетические камеди, например аравийской камеди натрий альгинат, поливинилпирролидон, полимеры целлюлозы (включая гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу и тому подобное) и Веегум. Смазочные вещества используют для облегчения изготовления таблеток; примеры подходящих смазочных материалов включают, например, стеарат магния, стеарат кальция и стеариновую кислоту, и обычно присутствуют в количестве не более чем приблизительно 1 вес.% относительно веса таблетки. Дезинтегрирующие вещества используют для облегчения дезинтеграции или "разрушения" после введения, и представляют собой, как правило, крахмалы, глины, целлюлозы, альгинаты, камеди или поперечно сшитые полимеры. Если необходимо, фармацевтическая композиция, которую нужно ввести, может также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие вещества, буферные вещества для регулирования рН и тому подобные, например ацетат натрия, сорбит монолаурат, триэтаноламин натрий ацетат, триэтаноламин олеат и тому подобные. Если необходимо, также могут быть добавлены вкусовые, красящие и/или подслащивающие вещества. Другие необязательные компоненты для введения в оральную лекарственную форму здесь включают, но не ограничиваются, консерванты, суспендирующие вещества, загустители и тому подобное. Наполнители включают, например, нерастворимые материалы, такие как диоксид кремния, оксид титана, окись алюминия, тальк, каолин, порошкообразная целлюлоза, микрокристаллическая целлюлоза и тому подобное, а также и растворимые материалы, такие как маннитол, мочевина, сахароза, лактоза,декстроза, натрий хлорид, сорбитол и тому подобное. Фармацевтическая композиция может также содержать стабилизирующее вещество, такое как гидроксипропил метилцеллюлоза или поливинилпирролидон, как раскрыто в патенте США 4301146. Другие стабилизирующие вещества включают, но не ограничиваются, полимеры целлюлозы, такие как гидроксипропилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, ацетат фталат целлюлозы, ацетат тримеллитат целлюлозы, гидроксипропил метилцеллюлозы фталат,микрокристаллическую целлюлозу и натрий карбоксиметилцеллюлоза; и виниловые полимеры и сополимеры, такие как поливинилацетат, поливинилацетат фталат, винилацетат кротоновой кислоты сополимер и этилен-винил ацетат сополимеры. Стабилизирующий агент присутствует в количестве, эффективном для обеспечения желательного стабилизирующего эффекта; как правило, это означает, что соотношение цистеамина или цистамина со стабилизирующим веществом составляет по меньшей мере около 1:500 вес./вес., более обычно около 1:99 вес./вес. Таблетки изготавливают, сначала покрывая энтеросолюбильной оболочкой цистеамин или цистамин. Способом формования таблеток здесь является непосредственное сжатие порошков, содержащих покрытый энтеросолюбильной оболочкой цистеамин или цистамин, необязательно в комбинации с растворителями, связующими веществами, смазочными веществами, дезинтегрирующими веществами, красителями, стабилизаторами или тому подобным. В качестве альтернативы непосредственному сжатию,сжатые таблетки можно изготовить, используя процессы влажного гранулирования или сухого гранулирования. Таблетки также могут быть сформованы, а не сжаты, начиная с влажного материала, содержащего подходящее растворимое в воде смазочное вещество. В альтернативном варианте осуществления покрытый энтеросолюбильной оболочкой цистеамин или цистамин являются гранулированными, и гранулы сжаты в таблетку или заполнены в капсулу. Материалы для капсул могут быть или жесткими или мягкими, и обычно запаиваются, например желатиновыми полосками или тому подобным. Таблетки и капсулы для орального применения будут, как правило,включать один или больше обычно используемых эксципиентов, как рассмотрено здесь. Для введения лекарственной формы, т.е. таблетки или капсулы, содержащей покрытый энтеросолюбильной оболочкой цистеамин или цистамин, используют общий вес в пределах приблизительно от 100 до 1000 мг. Лекарственную форму вводят орально пациенту, страдающему от состояния, для которого обычно показан цистеамин или цистамин, включая цистиноз.-6 023971 Композиции изобретения могут быть использованы в комбинации с другими способами лечения,пригодными для лечения цистиноза. Например, лечение индометацином (Индоцид или Эндол) представляет собой противовоспалительное лечение, используемое при ревматоидном артрите и люмбаго, но также оно может применяться для уменьшения потери воды и электролитов с мочой. У детей больных цистинозом индометацин уменьшает объем мочи и, следовательно, потребление жидкости приблизительно на 30%, иногда наполовину. В большинстве случаев это связано с улучшением аппетита. Лечение индометацином обычно продолжается в течение нескольких лет. Другие способы лечения можно сочетать со способами и композициями изобретения для лечения болезней и расстройств, которые приписываются цистинозу или являются следствием цистиноза. Потеря фосфора с мочой, например, вызывает рахит, и может быть необходимым вносить дополнения фосфора. Карнитин теряется с мочой, и его уровни в крови низкие. Карнитин дает возможность мышцам использовать жир для выработки энергии. Иногда необходимо добавление гормонов. Иногда щитовидная железа не вырабатывает достаточное количество тиреоидного гормона. Его дают (назначают) как тироксин(капли или таблетки). Иногда необходимо лечение инсулином, если появляется диабет, когда поджелудочная железа не вырабатывает достаточно инсулина. Эти способы лечения редко становятся необходимыми для детей, которых лечат цистеамином, поскольку лечение защищает щитовидную и поджелудочную железы. Некоторые юноши нуждаются в лечении тестостероном, если задерживается половая зрелость. Может быть показано лечение гормоном роста, если рост недостаточен, несмотря на хороший водно-электролитный баланс. Соответственно, такие способы лечения можно сочетать с энтеросолюбильно покрытыми композициями цистеамина и цистамина и способами изобретения. Эффективность способа или композиции изобретения можно оценить посредством измерения концентраций цистина в лейкоцитах. Регулирование дозировки и лечения может проводить врач-специалист в зависимости, например, от тяжести цистеноза и/или концентрации цистина. Дополнительные способы лечения, включая применение омепразола (Прилосек) могут уменьшать эти симптомы. Кроме того, различные пролекарства могут быть "активированы" посредством применения энтеросолюбильно покрытого цистеамина. Пролекарства являются фармакологически инертными, сами по себе они не действуют в организме, но когда они абсорбируются, пролекарство растворяется. Применение пролекарств было успешно использовано в некотором количестве терапевтических областей, включая лечение антибиотиками, антигистаминными средствами и лечение язв. Преимущество применения пролекарств состоит в том, что активное вещество является химически замаскированным и активное вещество не высвобождается до тех пор, пока препарат не покинет пищеварительный канал и не перейдет в клетки организма. Например, некоторое количество пролекарств использует S-S связи. Слабые восстановители, такие как цистеамин, восстанавливают эти связи и высвобождают лекарство. Соответственно,композиции изобретения в комбинации с пролекарствами пригодны для рассчитанного во времени высвобождения лекарства. В этом аспекте пролекарство может быть введено после введения композиций цистеамина с энтеросолюбильным покрытием изобретения (в заданное время) для того, чтобы активировать пролекарство. Должно быть понятно, что хотя изобретение описано вместе с его отдельными вариантами осуществления, предшествующее описание, так же, как и примеры, которые следуют, имеют целью иллюстрировать, а не ограничивать рамки изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации в рамках изобретения будут очевидны для специалистов в данной области техники, к которой относится изобретение. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения Субъекты. Для исследования были отобраны дети, больные цистинозом, 12-летнего возраста, регулярно принимающие цистеамин битартарат (Цистагон; Милан, Morgantown, WV) (табл. 1). Взрослые контрольные пациенты были отобраны отдельно. У пациентов с цистинозом значение уровня цистина в лейкоцитах в течение последнего года было меньше, чем 2,0 нмоль полуцистин/мг белка. Терапия цистеамином была прервана за 2 дня перед входом (в исследование), а применение препаратов для подавления кислоты,антибиотиков, нестероидных противовоспалительных средств, про-кинетических средств, и антигистаминных веществ было прекращено за 2 недели перед входом. Не было пациентов, подвергшихся трансплантации почки. Были выполнены основной химический анализ, серологическое исследование на Helicobacter pylori, полный анализ крови и анализ мочи. Доставка цистеамин битартрата. Цистеамин вводили через силиконовую прорезиненную назоэнтеральную трубку (Dentsleeve PtyLtd, Австралия), 3 мм в диаметре и 4,5 м длиной. Трубка, специально изготовленная для этого исследования, имеет утяжеленную вольфрамом верхушку, и непосредственно проксимально к ней располагался надувной баллон (емкость 5 мл). Непосредственно проксимально к баллону находился инфузионный порт (1 мм диаметр), через который доставлялся препарат. После ночи поста (исключая воду), дозу цистеамин битартрата (10 мг/кг/доза основания, максимум 500 мг) растворяли в 10 мл воды и вливали в течение от 1 до 2 мин. В первый день исследования назоэнтеральная трубка была вставлена в желудок. В 3 день исследования трубка проходила в проксимальную тонкую кишку (SI) точно дистально до связки Трейтса (подтверждено рентгеноскопически). Затем баллон был накачан, и перистальтика толкала вперед трубку дистально. Положение трубки в слепой кишке было подтверждено рентгеноскопически на 5 день(у 4 пациентов на 7 день вследствие медленного прохождения). Если трубка мигрировала слишком далеко, ее оттягивали в желательное место. Измерения гастрина в сыворотке, цистеамина и цистина в лейкоцитах. После ночи поста (исключая воду) отбирали образцы крови (как базисное значение) и с переменными интервалами после внутрипросветной доставки цистеамина. Уровни гастрина в сыворотке затем были измерены через 30, 60, 90, и 120 мин и 3 и 4 ч; уровни цистеамина были измерены через 0, 5, 10, 20,30, 45, 60, 75, 90, 105, 120 и 150 мин и 3, 4, 6, 8, 10, 12 и 16 ч; уровни цистина в лейкоцитах были измерены через 1, 2, 3, 4, 6 и 12 ч только у пациентов с цистинозом. Гастрин был измерен в пикограмм/мл с помощью набора для радиоиммунологического исследования гастрина, изготовленного Diagnostic ProductsCorporation (Лос-Анджелес, Калифорния). Уровни цистина в лейкоцитах были измерены в нмол полуцистина на мг белка с помощью Cystine Determination Lab (La Jolla, Калифорния). Для измерения цистеамина в плазме образцы плазмы 100 мкл собирали в гепаринизированные вакутейнеры, откручивали в центрифуге в течение 1 ч и хранили плазму при -18 С. Концентрацию цистеамина измеряли с помощью тандем масс спектроскопии (API 2000 LC/MS/MS; Applied Biosystems, FosterCity, Калифорния). Концентрацию цистеамина вычисляли с помощью калибровочной кривой, которая была получена посредством смешивания плазмы с буферизованным раствором цистеамина, и качественные контрольные образцы были проанализированы с каждой порцией (batch). Статистические анализы. Смешанная модель ограниченной максимальной вероятности (REML) повторных критериев дисперсионного анализа (repeated measures analysis of variance) с субъектами в качестве случайного эффекта была выполнена по абсолютным уровням цистина в лейкоцитах, по изменениям уровней цистина в лейкоцитах от базисного, и по "площади над кривой" (АОС) для изменений уровня цистина в лейкоцитах от базисной линии после введения цистеамина у субъектов с цистинозом. АОС является численно аналогичной площади под кривой, но применяется, когда значения являются преимущественно уменьшенными ниже базисных значений. Большие значения АОС отражают большие уменьшения, и отрицательное значение АОС отражает чистое увеличение значения. Основные результаты для места доставки, время после доставки, и взаимодействие между местом и временем были проверены, за исключением только того, что действие места было проверено по АОС. При отсутствии значительной связи, когда основное воздействие было определено, применяли тест Тьюки действительно достоверного отклонения (HSD) для установления, когда имели место различия с вероятностью ошибки 5%. Метод Тьюки HSD проверяет общий уровень значимости при выполнении всех попарных сравнений. Дополнительное исследование было проведено с цистеамином плазмы Cmax дополнительно к модели АОС.REML repeated measures analyses of variance с субъектами в качестве случайного эффекта были также выполнены, как описано выше, по AUC и Cmax со временем для уровней цистеамина в плазме отдельно для субъектов с цистинозом и контрольных субъектов и объединенных групп с обоими субъектами. Были проверены различия между значениями для 3 мест, плюс группа и группа х эффекты, связанные с местом, для комбинированных групп. Если было определено влияние места, был применен тест ТьюкиHSD для того, чтобы определить, какие места отличаются друг от друга.REML repeated measures analyses of variance были также выполнены, как описано выше, по уровням гастрина. Анализы были выполнены по 2 вариантам набора данных: полный набор данных и все данные-8 023971 после исключения результатов наблюдения, собранных на 30 мин (у 1 субъекта был потерян образец крови, отобранный на 0 мин после доставки цистеамина в тонкую кишку). Использовали 5% уровень значимости без корректировки для всего статистического исследования,В исследование были отобраны шесть пациентов с цистинозом (3 мужчин, 3 женщины) со средним возрастом 15,2 лет (диапазон 13-19 лет) (табл. I). Были отобраны здоровые взрослые контрольные пациенты (6 мужчин, 2 женщины) со средним возрастом 23,2 года (диапазон 19-28 лет). Никто из детей с цистинозом не подвергался трансплантации почки. Все контрольные субъекты получали 500 мг основания цистеамина, тогда как средняя доза для субъектов с цистинозом составляла 453 мг (диапазон 406-500 мг). По результатам проверки у всех субъектов была нормальная функция печени. У всех субъектов назоэнтеральная трубка благополучно проходила из желудка в верхнюю тонкую кишку (SI); однако, у двух субъектов с цистинозом она не продвигалась сколько-нибудь сверх того. У 2 из контрольных субъектов трубка достигала только средне-подвздошной кишки, но, однако, продвигалась до слепой кишки у 8 субъектов (4 контрольных субъекта, 4 с цистинозом). Не было сообщено о вредных воздействиях введения или удаления назоэнтеральной трубки (фиг. 1). Симптомы. Только у 2 пациентов с цистинозом (1 мужчина, 1 женщина) наблюдались регулярные GI симптомы до исследования, и эти (пациенты) отвечали на кислото-подавляющую терапию. У мужчины была тяжелая рвота приблизительно через 15 мин после получения цистеамина интрагастрально, но не было какихлибо симптомов, когда препарат вливали в проксимальную тонкую кишку. У ребенка женского пола с цистинозом была только умеренная временная тошнота после доставки препарата в SI. Не сообщалось о других симптомах после любой другой доставки цистеамина у детей с цистинозом. Отсутствовали вредные воздействия, связанные с введением или удалением трубки. Цистеамин в плазме. Среди субъектов с цистинозом, как определено с помощью дисперсионного анализа, значение цистеамина в плазме Cmax и AUCs (градиента концентрация-время) различающиеся по месту доставки цистеамина (оба Р 0,03). Место ( ) относится или к пациентам с цистинозом или контрольным субъектам. Средние значения AUC для цистеамина в плазме различались между дуоденальным и желудочным и цекальным местами доставки (Тьюки HSD общая Р 0,05). Среди контрольных субъектов значение AUC не различалось между местами доставки (Р 0,4), но значение Cmax различалось (Р 0,05). Для группы с цистинозом и для контрольной группы средние значения Cmax различались только между двенадцатиперстной кишкой и слепой кишкой; затем Cmax значения при доставке дуоденальной против желудочной или желудочной против цекальной доставки не были статистически различными (табл. II и III). Таблица II Средние уровни цистеамина в плазме (нмол/л) и измерения площади под кривой (AUC) у субъектов с цистинозом, контрольных и комбинированных субъектов с цистинозом и контрольных после доставки цистеамина в желудок, тонкую кишку и слепую кишку В круглых скобках представлены стандартные отклонения. Таблица III Сравнения среднего значения цистеамина в плазме Cmax (нмол/л) и измерения AUC для комбинированных субъектов с цистинозом и контрольных между местами доставки+ Значимая разница при использовании теста Тьюки HSD (=0,05);- нет значимой разницы;ANOVA тест на равенство трех мест доставки. Когда данные от контрольных субъектов комбинировали с данными от субъектов с цистинозом,имелось и влияние группы (Р 0,05) и действие места (Р 0,01) для AUC, со значимой разницей между средними уровнями AUC для двенадцатиперстной кишки относительно и желудка и слепой кишки. Значения Cmax различались между местами (Р 0,01), но не между группами (Р 0,4). Группаотносится к-9 023971 месту кишечной доставки. Cmax различалось между двенадцатиперстной кишкой относительно и желудка и слепой кишки (фиг. 2). Цистин в лейкоцитах. Имелись значительные различия между 3 местами доставки по уровням цистина (р 0,04), изменениям от базисных значений (Р 0,0001), и АОС по изменениям от базисной линии (Р 0,02). Тест ТьюкиHSD, который проверяет множественные сравнения, показал, что средние уровни цистина в лейкоцитах различались между слепой кишкой и желудком, но слепая кишка против двенадцатиперстной кишки и желудок против двенадцатиперстной кишки давали сходные средние значения. Когда были оценены абсолютные уровни цистина или АОС для изменений от уровней базисной линии, были обнаружены значительные различия в действии места между двенадцатиперстной кишкой и желудком и слепой кишкой,но не между желудком и слепой кишкой (Тьюки HSD общая Р 0,05) (фиг. 3). Цистеамин в плазме Cmax иAUC способствовали статистическому влиянию на АОС (Р 0,001 и 0,02 соответственно), даже после контролирования места доставки (фиг. 4). Гастрин в крови. Что касается полного набора данных по гастрину, имела место значимая разница между средними значениями для различных мест доставки (Р 0,1) со слепой кишкой, давая в результате более низкое значение по сравнению со значением желудка и тонкой кишки. Значимые влияния и группы и места были определены после того, как не были включены результаты наблюдения на 30 мин после доставки (Р 0,05 и Р 0,01 соответственно). Данные наблюдения на 30 мин были изъяты вследствие потери набора данных. Что касается этих результатов наблюдения, средние уровни гастрина после доставки в слепую кишку отличались от уровней после доставки и в двенадцатиперстную кишку и в желудок, несмотря на то, что последние не чисто отличались друг от друга. У 1 мальчика (14 лет),имевшего тяжелые GI симптомы после внутрижелудочной доставки, но не после доставки цистеамина в энтеральную или в слепую кишку, доставка цистеамина в желудок приводила к повышению базисной линии гастрина от 70 до 121 пг/мл через 30 мин после доставки цистеамина. В контрольной группе более чем половина базисных уровней гастрина и уровней гастрина после введения цистемина оставались не обнаруживаемыми (25 пг/мл), и ни у кого из контрольных субъектов не было значительного подъема гастрина после доставки цистеамина в любое место. Пациентам с цистинозом необходимо принимать цистеамин (Цистагон) орально каждые 6 ч, днем и ночью. При регулярном приеме цистеамин может уменьшить внутриклеточный цистин вплоть до 90%(как измерено в циркулирующих лейкоцитах), и как было показано, это уменьшает скорость прогрессии поражения почек/трансплантацию и также устраняет необходимость тиреотоксической заместительной терапии. К сожалению, вследствие жесткого лечебного режима и связанных с ним симптомов несоблюдение указаний врача при терапии цистеамином остается проблемой, особенно среди подростков и молодых пациентов. Несомненно, соблюдение терапевтического режима можно улучшить посредством уменьшения частоты необходимого дозирования цистеамина. Изобретение показывает сильную статистическую связь между максимальной концентрацией в плазме цистеамина (Cmax) и измерениями АОС для цистина в лейкоцитах (Р 0,001). Более высокое значение Cmax достигается после доставки цистеамина в тонкую кишку, чем при вливании в желудок или ободочную кишку; это может происходить вследствие улучшенной скорости абсорбции из SI, большей площади поверхности тонкой кишки или того, что меньше цистеамина подвергается разрушению "первого прохода" печенью при абсорбции через тонкую кишку. Когда данные были объединены для пациентов с цистинозом и контрольных субъектов, наблюдалось статистическое различие Cmax цистеамина в плазме и уровней AUC (оба Р 0,05) между доставкой в двенадцатиперстную кишку и доставкой и в желудок и в ободочную кишку. Отсутствие подобной статистической значимости для группы с цистинозом просто может отражать маленькое число исследованных пациентов. Изменения от базисной линии уровней цистина в лейкоцитах были статистически значимыми для абсолютных уровней цистина и для АОС, когда цистеамин вливали в двенадцатиперстную кишку по сравнению и с желудком и с ободочной кишкой. Как показано на фиг. 3, уровни цистина в лейкоцитах оставались ниже уровней, которые были до доставки, в течение до 12 ч после одной дозы цистеамина в тонкую кишку. Это могло бы говорить о том, что эффективная абсорбция цистеамина через SI,by causing (по причине) более высокой Cmax и AUC по градиенту цистамина концентрация-время, может вести к продолжительному уменьшению цистина в лейкоцитах и возможно менее частому ежедневному дозированию. Другим объяснением могло бы быть то, что при достижении достаточно высокой концентрации цистеамина в плазме, больше препарата доходит до лизосомы (где цистин накапливается). В лизосоме цистеамин вступает в реакцию с цистином, образуя смешанный дисульфид из цистеамина и цистина. Смешанный дисульфид выходит из лизосомы предположительно с помощью носителя лизина. В цитозоле смешанный дисульфид может быть понижен посредством его реакции с глутатионом. Освобожденный цистеин может быть использован для синтеза белка или глутатиона. Цистеамин, выделенный из смешанного дисульфида, снова входит в лизосому, где он может вступать в реакцию с другой молекулой цистина. Таким образом, 1 молекула цистеамина может высвободить много молекул цистина из лизосомы. Это исследование показало существенное уменьшение цистина в лейкоцитах в течение 1 ч после- 10023971 доставки цистеамина. Возвращаясь назад, новым из этого исследования было то, что уровни цистина в лейкоцитах оставались на 1-часовом уровне в течение 24 ч, и даже через 48 ч после доставки уровни не возвращались к уровню, имевшемуся до введения цистеамина. Цистеамин является сильным стимулятором секреции кислоты желудочного сока, который используют для того, чтобы вызвать изъязвление двенадцатиперстной кишки у лабораторных животных; причем исследования на людях и животных показали, что вызванная цистеамином гиперсекреция кислоты желудочного сока наиболее вероятно является опосредованной через гипергастринемию. В предшествующих исследованиях, проведенных у детей с цистинозом, которые страдали от систематических "верхних" желудочно-кишечных симптомов, было показано, что однократная оральная доза цистеамина (11-23 мг/кг) вызывает гипергастринемию и 2-3-кратное увеличение гиперсекреции кислоты желудочного сока. Симптомы, испытываемые этими отдельными представителями, включали боли в животе, изжогу, тошноту, рвоту и потерю аппетита. Интересно, только 2 из 6 субъектов с цистинозом (которые, как было известно, испытывали регулярные GI симптомы, вызванные цистеамином) имели повышенные уровни гастрина и симптомы, включая тошноту, рвоту и дискомфорт после внутрижелудочного цистеамина. Уровни гастрина имелись только после введения в тонкую кишку у 1 из 2 детей, и уровни оставались такими же, как базисный уровень. Ни у одного ребенка не было симптомов после кишечной доставки цистеамина. Ни у кого из других пациентов с цистинозом или контрольных субъектов не было повышения уровней гастрина после вливания цистеамина в любое место. Это могло бы говорить о том, что гипергастринемия, вызванная цистеамином, может появляться как местное действие на желудочные антрально-преобладающие G-клетки у восприимчивых индивидуумов. Кроме того, уровни гастрина в плазме обычно достигают максимума после внутрижелудочной доставки в течение 30 мин, тогда как уровни цистеамина в плазме достигли максимума позже. В 2 предыдущих исследованиях было показано,что дети с цистинозом имеют значительное повышение уровней гастрина в плазме после получения цистеамина внутрижелудочно; в качестве части критериев включения в эти исследования: все субъекты, однако, испытывали регулярные GI симптомы. Данные, полученные из этого исследования, видимо означают, что цистеамин не вызывает гипергастринемию и, следовательно, гиперсекрецию кислоты у всех пациентов с цистинозом. Таким образом, лечение с подавлением кислоты можно было бы не рекомендовать пациентам с цистинозом без "верхних" GI симптомов. Данные означают, что прямое введение цистеамина в тощую кишку может приводить к продолжительному истощению цистина в лейкоцитах. В предыдущих исследованиях ребенок, который имел гастроеюнальную питательную трубку по причине аверсии (отвращения) орального питания и тяжелыеUGI симптомы, реагировал на интраеюнальный цистеамин 3-кратным повышением гастрина в плазме по сравнению с введением препарата в желудок. Ответ цистина в лейкоцитах не был измерен у этого ребенка. Поэтому пациенты с еюнальной питательной трубкой должны быть оценены в дальнейшем. Фиг. 5 и 6 показывают результаты у пациента, который оставался на режиме введения ЕСцистеамина дважды ежедневно в течение длительного периода времени. В течение этого периода уровни цистина в лейкоцитах пациента измеряли регулярно. Дозу ЕС- цистеамина дважды в день определяли в отношении к симптомам пациента и уровням цистина. Уровни цистина у пациента составляли 0,4; 1,0; 0,36. Это исследование предоставляет данные, которые могут быть использованы для улучшения качества жизни пациентов с цистинозом. Представленные лекарственные формы Цистагона содержат цистеамин в капсулах, которые будут быстро растворяться при контакте с водой, наиболее вероятно в желудке. Хотя некоторое количество вариантов осуществления изобретения и особенностей было описано выше, специалисту в данной области техники будет понятно, что модификации и изменения описанных вариантов осуществления изобретения и особенностей могут быть сделаны без отклонения от идей изобретения или рамок изобретения, как определено прилагаемой формулой изобретения. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение композиции, содержащей покрытые энтеросолюбильной оболочкой цистамин или цистеамин в виде фармакологически приемлемых соли, эфира или амида для лечения цистиноза, в котором указанная композиция принимается 2 раза в день. 2. Применение композиции, содержащей цистамин или цистеамин или их фармакологически приемлемые соль, эфир или амид и один или несколько материалов, которые обеспечивают повышенную доставку цистамина или цистеамина в тонкий кишечник, для лечения цистиноза. 3. Применение по п.2, в котором композиция принимается 2 раза в день. 4. Применение по п.3, в котором материал является энтеросолюбильным покрытием. 5. Применение по п.1, в котором энтеросолюбильная оболочка покрытого энтеросолюбильной оболочкой цистеамина или цистамина выделяет цистеамин или цистамин тогда, когда композиция достигает тонкой кишки или такого участка желудочно-кишечного тракта субъекта, в котором значение рН превышает 4,5. 6. Применение по п.5, в котором энтеросолюбильная оболочка выбрана из группы, состоящей из- 11023971 полимеризованного желатина, шеллака, сополимера метакриловой кислоты типа С NF, бутират-фталата целлюлозы, кислого фталата целлюлозы, пропионат-фталата целлюлозы, фталата поливинилацетата(HPMCAS) и полимеров и сополимеров акриловой кислоты, обычно получаемых из метилакрилата, этилакрилата, метилметакрилата и/или этилметакрилата с сополимерами сложных эфиров акриловой и метакриловой кислоты. 7. Применение по п.1 или 2, в котором композиция составлена для перорального введения. 8. Применение по п.1 или 2, в котором композиция дополнительно включает фармацевтически приемлемый носитель. 9. Применение по п.1 или 2, в котором композиция включает стабилизирующее вещество. 10. Применение по п.1 или 2, в котором композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,5 до 1,0 г/м 2. 11. Применение по п.1 или 2, в котором композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,7 до 0,8 г/м 2. 12. Применение по п.1 или 2, в котором композиция обеспечивает продолжительное падение цистина в лейкоцитах, при этом через 12 ч его уровень падает ниже 1 нмоль/1/2 цистина/мг белка. 13. Применение по п.1 или 2, в котором энтеросолюбильное покрытие обеспечивает повышенную абсорбцию по сравнению с цистеамином или цистамином, не заключенным в энтеросолюбильную лекарственную форму. 14. Применение по любому из пп.1-13, в котором композиция представляет собой таблетки или капсулы. 15. Фармацевтический состав, содержащий композицию по любому из пп.1-14 в фармацевтически приемлемом носителе. 16. Способ лечения субъекта с цистинозом, включающий введение субъекту композиции по любому из пп.1-14 два раза в день. 17. Способ по п.16, дополнительно включающий лечение субъекта вторым терапевтическим агентом. 18. Способ по п.16, в котором фармацевтическая композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,5 до 1,0 г/м 2. 19. Способ по п.16, в котором фармацевтическая композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,7 до 0,8 г/м 2. 20. Способ по п.16, в котором фармацевтическая композиция обеспечивает продолжительное падение цистина в лейкоцитах, при этом через 12 ч его уровень падает ниже 1 нмоль/1/2 цистина/мг белка. 21. Способ лечения пациента с цистинозом, включающий введение пациенту фармацевтической композиции, включающей цистеамин или цистамин, причем цистеамин или цистамин заключен в энтеросолюбильную лекарственную форму, чтобы обеспечить увеличение доставки в тонкую кишку, в котором указанная фармацевтическая композиция вводится 2 раза в день. 22. Способ по п.21, в котором фармацевтическая композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,5 до 1,0 г/м 2. 23. Способ по п.21, в котором фармацевтическая композиция составлена так, чтобы каждая доза цистеамина или цистамина содержала от 0,7 до 0,8 г/м 2. 24. Способ по п.21, в котором фармацевтическая композиция обеспечивает продолжительное падение цистина в лейкоцитах, при этом через 12 ч его уровень падает ниже 1 нмоль/1/2 цистина/мг белка. 25. Способ по п.16 или 21, в котором фармацевтическая композиция представляет собой таблетки или капсулы.