Производные спиротиенопиранпиперидина в качестве антагонистов рецептора orl-1 для применения для лечения алкогольной зависимости и злоупотребления алкоголем

ПРОИЗВОДНЫЕ СПИРОТИЕНОПИРАНПИПЕРИДИНА В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРА ORL-1 ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ ЗАВИСИМОСТИ И ЗЛОУПОТРЕБЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ Предложено применение антагонистов рецептора ORL-1 формулы Кен Линда Рорик (US)(71)(73) Заявитель и патентовладелец: ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ (US) Настоящее изобретение относится к применению антагонистов рецептора ноцицептин/орфанин FQ(NOC/OFQ), в частности антагонистов рецептора ORL-1, для лечения нарушений, связанных с употреблением алкоголя. Нарушения, связанные с употреблением алкоголя, такие как алкогольная зависимость и злоупотребление алкоголем, являются значительной медицинской и социальной проблемой. По данным Всемирной торговой ассоциации (ВТО) нарушения, связанные с употреблением алкоголя, определены как "третий по распространенности фактор риска, приводящий к преждевременной смерти и инвалидности, по всему миру". Ежегодно примерно 2,5 млн человек в мире умирают по причинам, связанным с алкоголем,причем примерно 10% из них составляют люди, не достигшие 30-летнего возраста. Пагубное употребление алкоголя составляет примерно 4,5% от глобального бремени болезней, измеряемого по количеству лет жизни, скорректированному с учетом нетрудоспособности, и является основным фактором риска возникновения нейропсихиатрических заболеваний и иных проблем со здоровьем, таких как сердечнососудистые заболевания, цирроз печени и раковые заболевания рта, гортани, глотки, пищевода, груди и кишечника. Существующие способы лечения представляют собой лечение налтрексоном и акампросатом, которые помогают пациентам воздерживаться от алкоголя за счет снижения тяги к алкоголю и блокировки аспектов положительного подкрепления при употреблении алкоголя. Тем не менее, доступные в настоящее время способы лечения оказывают недостаточное действие для излечения сопутствующих расстройств настроения. Фактически, у некоторых индивидуумов налтрексон может вызывать ангедонию. Таким образом, сохраняется необходимость в улучшенных фармацевтических терапевтических средствах для лечения нарушений, связанных с употреблением алкоголя. Рецептор ноцицептин/орфанин FQ (NOC/OFQ), в частности рецептор ORL-1, относится к классу А рецепторов, связанных с G-белками (GPCR), и экспрессируется, главным образом, в центральной нервной системе и периферической нервной системе, а также в желудочно-кишечном тракте, гладкой мускулатуре и иммунной системе. Несмотря на то, что система OFQ/ноцицептин структурно относится к опиоидным рецепторам, она не имеет значительной перекрестной реактивности с классическими опиоидными рецепторами ,и . Кроме того, ноцицептин обладает антиопиоидной активностью in vivo(например, сообщалось, что ORQ/ноцицептин, естественный лиганд рецептора ORL-1, обладает антиноцицептивными свойствами). На нескольких моделях депрессии и пищевого поведения на животных было показано, что антагонисты рецептора ноцицептин/орфанин FQ (NOC/OFQ), в частности антагонисты рецептора ORL-1, обладают активностью, схожей с антидепрессантами, а также анорексигенной активностью. Таким образом,считается, что антагонисты ORL-1 подходят для лечения депрессии и/или для лечения избыточного веса,ожирения и/или для поддержания веса после лечения избыточного веса или ожирения. Результаты других исследований позволяют предположить возможность применения антагонистов для лечения боли,слабоумия и болезни Паркинсона. С другой стороны, агонисты рецептора ноцицептин/орфанин FQ(NOC/OFQ) применяют для лечения нарушений, связанных с употреблением алкоголя, тревожности, вызванной стрессом, анорексии, кашля, нейрогенного мочевого пузыря, эдемы и наркотической зависимости. См., например, Murphy, Niall P. (2010), The Nociceptin/Orphanin FQ System as a Target for TreatingAlcoholism. CNSNeurological Disorders - Drug Tartgets 9:87-93; и Chiou, L.C., Liao, Y.Y., Fan, P.C., Kuo,P.H., Wang, С H., Riemer, С and Prinssen, E.P. (2007), Nociceptin/Orphanin FQ Peptide Receptors: Pharmacology and Clinical Implications. Current Drug Targets 8:117-135. В публикациях международных заявок WO 2011/060035 и WO 2011/060217 описаны некоторые спиропиперидиновые соединения в качестве антагонистов ORL-1 для применения для лечения депрессии, избыточного веса, ожирения, поддержания веса и мигрени. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что соединения-антагонисты ORL-1 могут подходить для лечения нарушений, связанных с употреблением алкоголя, например для лечения злоупотребления алкоголем или для лечения алкогольной зависимости. Таким образом, в настоящем изобретении предложено семейство 4',5'-дигидроспиро-[пиперидин-4,7'-тиено[2,3-с]пирановых] соединений,обладающих высокой антагонистической активностью в отношении рецептора ORL-1, для применения для лечения нарушений, связанных с употреблением алкоголя. Согласно одному из аспектов настоящего изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения нарушения, связанного с упот-1 022874R1 представляет собой фтор или хлор; каждый из R2a и R2b представляет собой водород или каждый из R2a и R2b представляет собой фтор;R6 представляет собой водород или метил;Ar2 представляет собой фрагмент, выбранный из группы, состоящей из имидазол-1-ила, имидазол 2-ила, 2-метилимидазол-1-ила, 1-метилимидазол-2-ила и 1,2,4-триазол-3-ила. В других вариантах реализации этого аспекта настоящего изобретения нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость или злоупотребление алкоголем или оба указанных нарушения. В другом варианте реализации применение проводят одновременно, раздельно или последовательно в комбинации с другим терапевтическим ингредиентом. Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для лечения нарушения, связанного с употреблением алкоголя, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, носителей или разбавителей. В другом варианте реализации этого аспекта настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для лечения алкогольной зависимости или злоупотребления алкоголем или обоих указанных нарушений, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, носителей или разбавителей. В другом аспекте этого аспекта настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель и возможно другие терапевтические ингредиенты. Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ лечения нарушения, связанного с употреблением алкоголя, у человека, включающий введение человеку, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В дополнительных вариантах реализации этого аспекта предложен способ лечения алкогольной зависимости или злоупотребления алкоголем или обоих указанных нарушений, включающий введение человеку, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения нарушения, связанного с употреблением алкоголя. В других вариантах реализации этого аспекта настоящего изобретения нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость или злоупотребление алкоголем или оба указанных нарушения. Соединения, подходящие для применения согласно настоящему изобретению, являются основаниями и, соответственно, взаимодействуют с рядом органических и неорганических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли каждого из соединений согласно настоящему изобретению охвачены объемом настоящего изобретения. Термин "фармацевтически приемлемая соль", используемый в настоящем описании, относится к любой соли соединения формулы I, которая является, по существу, нетоксичной для живых организмов. Указанные фармацевтически приемлемые соли и общая методология их получения хорошо известны в данной области техники. См.,например, P. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTIONAND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2008). В одном из вариантов реализации соль представляет собой тартратную соль. В другом варианте реализации соль представляет собой соль HCl. Предпочтительными соединениями, подходящими для применения согласно настоящему изобретению, являются соединения, в которых: 1) R1 представляет собой хлор; 2) каждый из R2a и R2b представляет собой фтор; 3) R1 представляет собой хлор, а каждый из R2a и R2b представляет собой фтор; 4) R1 представляет собой фтор, а каждый из R2a и R2b представляет собой водород; 5) R3 представляет собой водород, метил, гидроксиметил или метоксиметил; 6) R3 представляет собой метил; 7) R3 представляет собой гидроксиметил; 8) R1 представляет собой хлор, каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, a R3 представляет собой метил; 9) R1 представляет собой хлор, каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, a R3 представляет собой гидроксиметил; 10) R4 представляет собой фтор, гидроксиметил, метоксиметил или пиразол-1-илметил; 11) R4 представляет собой фтор; 12) R4 представляет собой гидроксиметил; 13) R4 представляет собой метоксиметил; 14) R4 представляет собой пиразол-1-илметил; 15) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9), где R4 представляет собой фтор; 16) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9), где R4 представляет собой гидроксиметил; 17) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9), где R4 представляет собой метоксиметил; 18) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9), где R4 представляет собой пиразол-1-илметил; 19) R7 представляет собой водород, фтор или хлор; 20) R7 представляет собой фтор; 21) R1 представляет собой хлор, каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, и R7 представляет собой фтор; 22) R1 представляет собой хлор, каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, R3 представляет собой метил, a R7 представляет собой фтор; 23) R1 представляет собой хлор, каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, R3 представляет собой гидроксиметил, a R7 представляет собой фтор; 24) R4' представляет собой фтор, гидроксиметил, метоксиметил, метилкарбонил или 2 метилимидазол-1-ил; 25) R4 представляет собой фтор; 26) R4 представляет собой гидроксиметил; 27) R4 представляет собой метоксиметил; 28) R4' представляет собой метилкарбонил; 29) R4 представляет собой 2-метилимидазол-1-ил; 30) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9) или от 19) до 23), где R4 представляет собой фтор; 31) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9) или от 19) до 23), где R4 представляет собой гидроксиметил; 32) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9) или от 19) до 23), где R4' представляет собой метоксиметил; 33) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9) или от 19) до 23), где R4' представляет собой метилкарбонил; 34) любой из предпочтительных вариантов реализации от 1) до 9) или от 19) до 23), где R4 пред-3 022874 ставляет собой 2-метилимидазол-1-ил. Конкретные предпочтительные соединения, подходящие для способов и применения согласно настоящему изобретению, включают соединения, приведенные в следующей таблице, и их фармацевтически приемлемые соли. Соединения, в которых каждый из R2a и R2b представляет собой фтор, являются предпочтительными, так как эти соединения имеют более выгодный профиль фармакокинетики за счет того, что обладают повышенной устойчивостью к окислительному метаболизму. В целом, это увеличивает пероральную биодоступность соединений. Соединения, подходящие для применения согласно настоящему изобретению, и способы их получения известны в данной области техники, указанные соединения характеризуют как высокоактивные и селективные антагонисты рецептора ORL-1. Их можно получать согласно известным схемам синтеза при помощи способов, хорошо известных и очевидных в данной области техники. См., например, публикации международных заявок WO 2011/060035 и WO 2011/060217. Данные, полученные в неклинических исследованиях животных, подтверждают роль антагонистов рецептора ORL-1 при лечении нарушений, связанных с употреблением алкоголя, таких как злоупотребление алкоголем и алкогольная зависимость. В частности, показано, что определенные антагонисты рецептора ORL-1 являются эффективными в моделях нарушений, связанных с употреблением алкоголя, на грызунах. Для демонстрации указанных характеристик соединений согласно настоящему изобретению типовые соединения можно испытывать в приведенных далее исследованиях in vivo. Самостоятельное употребление алкоголя у крыс, предпочитающих алкоголь. При помощи методик селекционного разведения создавали несколько линий крыс, предпочитающих алкоголь, удовлетворяющих критериям валидизированной модели злоупотребления алкоголем на животных. В частности, крысы добровольно потребляли фармакологически значимые количества этанола в отсутствие каких-либо ограничений в пище или воде, они употребляли избыточное количество этанола из-за его опьяняющего действия, а не из-за вкуса, запаха или энергетической ценности, находились в состоянии опьянения в течение продолжительных периодов времени, целенаправленно пытались получить доступ к этанолу, и при продолжительном доступе у них развивалась переносимость и зависимость. См., например, Lester D. and Freed E.X. (1973) Criteria for an animal model of alcoholism. Pharmacology BiochemistryBehavior 1:103-107. Считается, что указанные линии, включая крыс, предпочитающих алкоголь (Р), и крыс Marchigian Sardinian, предпочитающих алкоголь (msP), подходят для определения потенциальных фармакологических способов терапии нарушений, связанных с употреблением алкоголя,так как они удовлетворяют приведенным выше критериям, а агенты, которые снижают употребление алкоголя человеком, включая налтрексон и акампросат, снижают употребление алкоголя и для указанных линий. Для оценки возможной терапевтической активности новых антагонистов рецептора ноцицептин/ORL-1 в отношении привыкания у крыс Р и msP можно использовать оперантные и свободные способы самостоятельного употребления алкоголя. Оперантное самостоятельное употребление у крыс Р. Самок крыс Р получали из закрытой колонии (Taconic, Germantown, NY) и размещали в клетки по двое. Для снижения вызванного сменой обстановки избегания этанола за два дня до начала оперантного научения миску с водой в клетке заменяли на миску с 15% раствором этанола в воде (об./об., в воде). На протяжении оставшейся части эксперимента крысам обеспечивали неограниченный доступ к воде и стандартному лабораторному корму в отсутствие дополнительных источников алкоголя в клетке. Крыс обучали нажимать на рычаг для получения подкрепления в виде этанола в ходе ежедневных 30-минутных сессий, которые проводили в стандартных камерах оперантного поведения для крыс, находившихся внутри шумопоглощающих камер (MED Associates, Inc., St. Albans, VT). Камеры состояли из двух стенок из нержавеющей стали и двух стенок из прозрачного плексигласа. Пол в камерах оперантного поведения состоял из стальных стержней диаметром 0,5 см, расположенных на расстоянии примерно 1,5 см друг от друга. В каждой камере оперантного поведения находились два выдвижных оперантных рычага, расположенных примерно на 6 см выше уровня пола и на расстоянии 13 см друг от друга. Между рычагами находилась углубленная кормушка, из которой для доставки этанола (15%, об./об., в воде),обусловленной целенаправленным действием крыс, выдвигалась погруженная чашка (объемом 0,1 мл). В результате приложенного усилия над рычагом загорался световой стимул, после чего крысам предоставлялся доступ к погруженной чаше на 4 с. Стимуляцию и поведенческие ответы контролировали и записывали на персональный компьютер для оффлайн-анализа (MED Associates, Inc., St. Albans, VT). Во время оперантного научения ответы, выраженные в нажатии любого из рычагов, считали верными, вознаграждением являлось подкрепление в виде 0,1 мл этанола. После того как крысы обучались нажимать на рычаг для получения этанола в виде вознаграждения, сопряжение ответов изменяли с использованием схемы подкрепления через фиксированные интервалы (FR)-1 таким образом, что ответом на нажатие одного из рычагов (активного рычага) являлось подкрепление, тогда как нажатие другого(неактивного) рычага подкреплением не сопровождалось. После получения устойчивого ответа на исходном уровне для схемы подкрепления FR-1 сопряжение ответов повышали до FR-2, а затем и до FR-3,т.е. для получения подкрепления требовалось 3 нажатия на рычаг. После достижения устойчивого ответа на исходном уровне для схемы FR-3 сопряжение ответов изменяли по схеме подкрепления с увеличивающимися интервалами, при которой на протяжении экспериментальной сессии количество требуемых ответов медленно повышалось, таким образом, от крыс требовалось все больше усилий для получения каждого последующего вознаграждения в виде этанола. Более конкретно, требования к количеству ответов повышались следующим образом: все крысы начинали сессию по схеме подкрепления FR-1; после получения трех подкреплений схему изменяли до FR-2; после получения трех подкреплений на этом уровне количество ответов повышали до FR-4; после получения трех подкреплений количество ответов повышали еще на два до FR-6 и т.д. (см., например, Oster S.M., Toalston J.E., Kuc K.A., Pommer T.J., Murphy J.M., Lumeng L., Bell R.L., McBride W.J. and Rodd Z.A. (2006) Effects of multiple alcohol deprivations onoperant ethanol self-administration by high-alcohol-drinking replicate rat lines. Alcohol 38:155-164). Продолжительность каждой сессии составляла 30 мин, после чего отключали все стимулы и убирали рычаги. После завершения сессии отмечали количество ответов, выражаемых в нажатии активного и неактивного рычагов, а также контрольную точку, которую определяли как максимальное значение FR, достигаемое за время сессии. По числу нажатий на активный рычаг вычисляли количество употребленного этанола и переводили его в г/кг употребленного EtOH. Крысам перорально вводили носитель или исследуемое соединение в дозировке 3, 10 или 30 мг/кг (объем дозы 3 мл/кг растворяли в носителе, состоящем из 20%Captisol в 25 мМ фосфатном буфере с рН 2) или неселективный антагонист опиоидных рецепторов налтрексон (10 мг/кг) в качестве положительного контроля за 60 мин до начала сессии согласно внутригрупповой перекрестной схеме (период вымывания до введения последующей дозы составлял 3-4 дня). В отдельном испытании крысам перорально вводили носитель или 30 мг/кг исследуемого соединения (объем дозы 1 мл/кг растворяли в носителе, состоящем из 20% Captisol в 25 мМ фосфатном буфере) за 30 мин до начала сессии согласно перекрестной схеме. Типовые соединения исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они снижают количество ответов, обусловленных стимулом в виде этанола, а таким образом и потребление этанола у крыс Р при схеме подкрепления с увеличивающимися интервалами. Соединения 1 и 2 исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они снижают количество ответов, обусловленных стимулом в виде этанола, результаты приведены в табл. 1. Важно отметить, что антагонисты ORL-1 не влияли на количество ответов, выраженных в нажатии неактивного рычага, (р 0,05), что указывает на отсутствие неспецифических двигательных побочных эффектов.(анализ ANOVA: соединение 1: F(4,55)=5,2, p=0,001; соединение 2: F(l,24)=16,8, р 0,001) Вызванное стрессом возвращение к исходному состоянию у крыс msP. Стресс является ключевым стимулятором повторного проявления тяги к наркотикам и алкоголю у человека и грызунов (Sinha R (2008) Chronic stress, drug use, and vulnerability to addiction. Ann N. Y. Acad.Sci. 1141:105-130), эту ситуацию можно смоделировать на крысах при помощи исследования возвращения к исходному состоянию, вызванного стрессом. В этом способе повторную тягу к алкоголю, вызванную стрессом, возбуждают путем введения антагониста 2-адренорецептора йохимбина, который является известным фармакологическим стрессором (Le A.D., Harding S., Juzytsch W., Funk D. and Shaham Y.(2005) Role of alpha-2 adrenoceptors in stress-induced reinstatement of alcohol seeking and alcohol selfadministration in rats. Psychopharmacology (Berl) 179:366-373). Самцов крыс msP получали в университете Камерино (Marche, Italy) и размещали по отдельности,предоставляя неограниченный доступ к воде и стандартному лабораторному корму. Крыс обучали нажимать на рычаг для подкрепления в виде 10% этанола в воде (об./об.) в стандартных камерах оперантного поведения (MED Associates, Inc., St. Albans, VT), расположенных в шумопоглощающих вентилируемых климатических кабинках. Камеры состояли из двух стенок из нержавеющей стали и двух стенок из прозрачного плексигласа. Пол в камерах оперантного поведения состоял из стальных стержней диаметром 0,5 см, расположенных на расстоянии примерно 1,5 см друг от друга. Каждая камера оперантного поведения была оборудована резервуаром для питья, расположенным на 4 см выше уровня пола, а также двумя выдвижными оперантными рычагами, расположенными на расстоянии примерно 3 см по обе стороны от поилки. Доставку жидкости, нажатия рычагов и появление визуальных стимулов (включение белой лампы) контролировали при помощи компьютера, совместимого с IBM, для проведения офлайн-анализа. Сначала крыс обучали самостоятельному приему раствора этанола в ходе ежедневных 30-минутных сессий оперантного научения по схеме подкрепления FR1, где каждый ответ, выражаемый в нажатии на активный рычаг, обеспечивал доставку 0,1 мл этанола. Каждый эпизод доставки этанола был связан с 5 секундным временем ожидания, определяемым включением белой лампы. Обучение самостоятельному получению алкоголя проводили до достижения устойчивого ответа на исходном уровне. После достижения устойчивого ответа на исходном уровне животных использовали в 30-минутных сессиях торможения, во время которых ответы, выражаемые в нажатии на рычаг, активировали механизм доставки, но не обеспечивали доставку этанола. Процедуры во время каждой сессии были такими же, как и в сессиях с самостоятельным получением этанола, за исключением того, что нажатие на рычаг больше не обеспечивало подкрепление. Для привыкания к процедуре перорального введения животным в течение трех дней до начала введения антагонистов рецептора ORL-1 предварительно вводили носитель. Крыс msP затем испытывали в тесте на возвращение к исходному состоянию, который проводили в аналогичных условиях торможения. Процедура возвращения к исходному состоянию включала пероральное введение носителя или исследуемого соединения (3 или 30 мг/кг, n = 10/группу, соединение растворяли в 1:1 смеси дистиллированной воды и 1 М Н 3 РО 4 при осторожном нагревании на водяной бане при 45-60 С) и последующее интраперитонеальное введение йохимбина (2,0 мг/кг), которое проводили через 30 мин, после чего еще через 30 мин начинали сессию оперантного научения. Типовые соединения исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они снижают повторную тягу к этанолу, вызванную стрессом, дозозависимым образом. Важно отметить, что способ лечения не влиял на ответы, выражаемые нажатием неактивного рычага, это указывает на то, что снижение возвращения к исходному состоянию, вызванного йохимбином, происходило не по причине неспецифических изменений двигательной активности. Соединения 1 и 2 исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они снижают повторную тягу к этанолу, вызванную стрессом, результаты приведены в табл. 2. Анализ ANOVA: соединение 1 активный рычаг: F(2,27)=18,2, р 0,0001; неактивный рычаг: F(2,27)=0,2, р 0,05; соединение 2 активный рычаг: F(2,27)=18,16, р,0,001; неактивный рычаг: F(2,27)=1,2, р 0,05. Свободное самостоятельное получение этанола у крыс, предпочитающих алкоголь. Крысы Р. Для этой процедуры (в которой модифицировали способ, приведенный в работе Rodd-Henricks Z.A.,McKinzie D.L., Shaikh S.R., Murphy J.M., McBride W.J., Lumeng L. and Li T.K. (2000) Alcohol deprivationeffect is prolonged in the alcohol preferring (P) rat after repeated deprivations. Alcohol Clin Exp Res 24:8-16) получали самок крыс Р из закрытой колонии (Taconic, Germantown, NY) размещали по отдельности, предоставляли неограниченный доступ к пище, 15% этанолу (об./об., в воде) и воде и выдерживали в соответствии с 12-часовой схемой смены циклов свет/тьма (свет выключали в 16:00). Камеры оборудовали системой, преобразующей силовую нагрузку (TSE Systems, Bad Homburg, Germany), соединенной с поилками с этанолом, водой и кормушкой с пищей, для обеспечения непрерывного отслеживания употребления пищи и жидкостей. В течение нескольких месяцев до начала исследования лекарственного средства крысам предоставляли свободный доступ к 15% этанолу, среднее ежедневное потребляемое количество составляло примерно 5 г/кг. Крысам перорально вводили носитель или исследуемые соединения в дозировке 3, 10 или 30 мг/кг (объем дозы 3 мл/кг растворяли в носителе, состоящем из 20% Captisol в 25 мМ фосфатном буфере с рН 2) или налтрексон (10 мг/кг, объем дозы 1 мл/кг, растворяли в воде) непосредственно перед началом цикла тьмы согласно внутригрупповой перекрестной схеме (период вымывания перед введением последующей дозы составлял 3-4 дня). В отдельном эксперименте крысам перорально вводили носитель, а после этого ежедневно в течение 4 дней пероральные дозы носителя или исследуемого соединения в концентрации 30 мг/кг непосредственно перед началом цикла тьмы согласно внутригрупповой схеме дизайна. Крысы msP. Для отдельного исследования самцов крыс msP получали из закрытой колонии (университет Камерино, Marche, Italy), размещали по отдельности, предоставляя неограниченный доступ к пище, 10% этанолу (об./об., в воде) и воде, и выдерживали в соответствии с 12-часовой схемой смены циклов свет/тьма. Для определения объема потребляемого этанола измеряли количество этанола и воды с использованием мерных сосудов (Economidou D., Fedeli A., Fardon R.M., Weiss F., Massi M. and Ciccocioppo R. (2006) Effect of novel nociceptin/orphanin FQ-NOP receptor ligands on ethanol drinking in alcohol-preferring msP rats.Peptides 27:3299-3306). Употребление пищи отслеживали путем взвешивания кормушки с пищей. После достижения устойчивого количества добровольного употребляемого этанола, составляющего 5-6 г/кг/день на исходном уровне (примерно в возрасте 4-5 месяцев), крысам перорально вводили исследуемые соединения в дозировке 3 или 30 мг/кг в виде состава, состоящего из смеси 1:1 дистиллированная вода:1 М Н 3 РО 4 (объем дозы 1-5 мл/кг) за один час до начала цикла тьмы в соответствии с внутригрупповой перекрестной схемой (период вымывания перед введением следующей дозы составлял 3-4 дня). В начале цикла тьмы животным предоставляли доступ к этанолу, воде и пище, употребление пищи и жидкостей измеряли с интервалами 2, 8 и 24 ч. Типовые соединения исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они обеспечивают селективное снижение количества употребляемого этанола у крыс Р и msP,имеющих свободный доступ к этанолу, дозозависимым образом, в отсутствие существенного воздействия на употребление пищи или воды. Соединения 1, 2 и 5 исследовали по существу согласно приведенному описанию, было показано, что они значительно снижают употребление этанола, результаты приведены в табл. 3. В отдельном эксперименте было показано, что соединение 1 подавляет употребление этанола у крыс Р на протяжении 4 дней при введении доз один раз в день в отсутствие тахифилаксии, результаты приведены в табл. 4. Анализ ANOVA: соединение 1: крысы Р, F(4,40)=6,03, р 0,001, крысы msP, F(2,18)=27,78, р 0,001; соединение 2: крысы Р, F(3,52)=6,6; р 0,001, крысы msP, F(2,20)=18,05,p0,001; соединение 5: крысы Р, F(4,28)=3,48; р 0,02; отсутствует значимое действие на употребление пищи или воды, р 0,05. Таблица 4 Анализ ANOVA: F(2,19)=10,67, p0,001. Стимулируемое этанолом повышение внеклеточного уровня дофамина в центре удовольствия. Как известно, этанол и другие вещества, вызывающие привыкание, повышают внеклеточный уровень дофамина (DA) в системе поощрения мозга, в частности в центре удовольствия (Yoshimoto K.,McBride W.J., Lumeng L. and Li T.K. (1992) Alcohol stimulates the release of dopamine and serotonin in theSci USA 85:5274-5278). Величина увеличения уровня DA в центре удовольствия напрямую связана с субъективными ощущениями удовольствия и поощрения и относится к аддиктивному потенциалу. Налтрексон, реализуемое на рынке лекарственное средство для лечения алкогольной зависимости, блокирует стимулируемое этанолом высвобождение DA в центр удовольствия (Gonzales R.A. and Weiss F. (1998)increase in dialysate dopamine levels in the nucleus accumbens. J. Neurosci 18:10663-10671). В центры удовольствия самцов крыс линии Спраг-Доули с массой тела 260-300 г, полученных в Taconic Farms (Germantown, NY), поставщики имплантировали направляющую канюлю (Bioanalytical Systems Inc, West Lafayette, IN) за 5-7 дней до начала эксперимента. Стереотаксические координаты канюли в центре удовольствия включали А (перед брегмой) 1,7 мм; L (позади среднего сагиттального шва, с правой стороны) 1,0 мм и V (выше поверхности твердой мозговой оболочки) 6,00 мм (Paxinos and Watson,1986). Концентрический зонд (BR-2), полученный в Bioanalytical Systems Inc. (West Lafayette, IN), про-9 022874 мывали водой и осторожно вводили через канюлю примерно за 16 ч до начала эксперимента таким образом, что наконечник мембраны был на 2 мм ниже края направляющей канюли. Затем крысу помещали на ночь в пластиковую емкость для исследования для акклиматизации. Согласно модифицированному способу, описанному в работе Мелендез с соавторами (Melendez R.I., Rodd-Henricks Z.A., McBride W.J. andpallidus: a dual-probe microdialysis study. Neuropsychopharmacology 28:939-946), крысу соединяли с системой отбора фракций у свободно перемещающихся животных утром в день эксперимента (Raturn, BioAnalytical Systems Inc, West Lafayette, IN). Входную трубку диализного зонда соединяли со шприцевым насосом (BeeHive and BabyBee, Bioanalytical Systems Inc, West Lafayette, IN), который доставлял в зонд искусственную спинно-мозговую жидкость (150 мМ NaCl, 3 мМ KCl, 1,7 мМ CaCl2 и 0,9 мМ MgCl2 (pH 6,0 с конечной скоростью сбора 1,5 мкл/мин. Трубки, выходящие от крыс, присоединяли к охлаждаемому устройству сбора фракций (Bioanalytical Systems Inc, West Lafayette, IN). Примерно через час испытания с начальной скоростью перфузии 5,0 мкл/мин расход снижали до 2,0 мкл/мин для установления равновесия в зонде и установки устойчивого исходного уровня для 1-часового периода, затем в течение 20 мин проводили сбор фракций. Перед инъекцией каких-либо лекарственных средств собирали четыре образца на исходном уровне. Исследуемое соединение вводили перорально в дозировке 30 мг/кг (объем дозы 2 мл/кг, растворяли в носителе, состоящем из 20% Captisol в 25 мМ фосфатном буфере с рН 3). Соединение вводили отдельно (10 мин в 4-й образец; момент времени 0) или в комбинации с этанолом (10 мин в 1-й образец; момент времени -60). Этанол вводили интраперитонеально (и.п.) в дозировке 1,1 г/кг в виде 15% (об./об.) раствора в 0,9% солевом растворе, объем составлял 2,9 мл крысе. Этанол вводили в течение 10 мин в 4-й образец (момент времени 0). Образцы диализатов переносили в автоматический пробозаборник/дозатор образцов Alcott 718 с охлаждающим лотком с установленной температурой 5 С (Alcott Inc., Norcross, GA). При помощи способа аналитической ВЭЖХ в одном образце диализата одновременно определяли норэпинефрин (НЭ), дофамин (DA) и серотонин (5-НТ), а также их метаболиты 3,4 дигидроксифенилуксусную кислоту (DOPAC), гомованилиновую кислоту (ГВК), 3-метокси-4 гидроксифенилгликоль (MHPG) и метаболит серотонина, 5-гидроксииндолуксусную кислоту (5-ГИУК). Использовали аналитическую колонку BDS-Hypersil 3 мкм, С 18 (2150 мм, Thermo-Fisher) с десятиканальным клапаном ВЭЖХ и пробоотборной петлей 20 мкл совместно с небольшой колонкой для очистки образцов (BDS-Hypersil, 3 мкм, С 18, 210 мм), которая захватывала вещества, элюируемые с последним пиком, содержащиеся в образцах диализата. Мобильная фаза в обеих колонках была одинаковой и состояла из 75 мМ одноосновного фосфата натрия, 350 мг/л натриевой соли 1-октансульфокислоты, 0,5 мМ ЭДТА, 0,8% тетрагидрофурана (для ВЭЖХ, не содержащего ингибитор) и 8% ацетонитрила с рН 3 (доводили при помощи фосфорной кислоты). Расход в обеих колонках составлял 0,20 мл/мин. Аналитическую колонку выдерживали при 40 С с использованием нагревателя колонки, колонку для очистки образцов, присоединенную к десятиканальному клапану, выдерживали при комнатной температуре. Использовали электрохимический детектор (EGG PARC, Princeton, NJ) с парой стеклоуглеродных электродов (Е 1 = 680 мВ, Е 2 = 100 мВ, диапазон = 0,5 нА на обоих электродах). Метаболиты детектировали на Е 1, тогда как НЭ и DA детектировали на Е 2. Так как внеклеточные уровни DOPAC, ГВК и 5-ГИУК значительно превышают уровни DA и НЭ, пики DOPAC, ГВК и 5-ГИУК анализировали с использованием выходного напряжения 10 В на детекторе EGG, который направлял сигнал на компьютер по отдельному каналу, что позволяло размещать пики метаболитов на одной шкале. Данные всех трех каналов собирали с использованием системы обработки данных хроматографии EZChrom (Scientific Software, SanRamon, CA), при помощи которой проводили расчет высоты пиков и концентрации в образцах. Чувствительность к НЭ, DA и 5 НТ составляла 0,1 пмоль/мл диализата или 2 фмоль/образец (20 мкл). Введение носителя и этанола (1,1 г/кг и.п.) повышало внеклеточный уровень DA в центре удовольствия крыс примерно до 125-130% относительно исходного уровня, эффект был схожим с описанным в литературе и обеспечиваемым в различной степени всеми веществами, вызывающими привыкание. Типовые соединения исследовали по существу согласно приведенному выше описанию, было показано, что они предотвращают повышение внеклеточной концентрации DA в центрах удовольствия крыс. Важно отметить, что при введении в отсутствие этанола соединения не влияли на внеклеточный уровень DA в центре удовольствия. Соединение 1 исследовали по существу согласно приведенному выше описанию,было показано, что оно предотвращает повышение внеклеточной концентрации DA в центре удовольствия, результаты приведены в табл. 5. Анализ ANOVA: соединение 1+EtOH относительно носитель+EtOH: F(3,28)=7,25, р=0,001; соединение 1+носитель относительно носитель+носитель: р 0.05. С учетом полученных данных можно ожидать, что соединения согласно настоящему изобретению будут эффективными при лечении нарушений, связанных с употреблением алкоголя. Несмотря на то, что соединения, применяемые в способах согласно настоящему изобретению, можно вводить непосредственно без использования каких-либо составов, как правило, соединения вводят в виде фармацевтических композиций, содержащих по меньшей мере одно соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или наполнитель. Указанные композиции можно вводить при помощи различных способов, включая пероральный, интраназальный, трансдермальный, подкожный, внутривенный, внутримышечный и внутрилегочный. Указанные фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники. См., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (University of the Sciences in Philadelphia, ed., 21st ed., Lippincott WilliamsWilkins Co., 2005). Композиции предпочтительно получают в виде стандартной лекарственной формы, где каждая дозировка содержит от примерно 0,1 до примерно 500 мг, чаще от примерно 1,0 до примерно 200 мг, например от примерно 5 до 50 мг активного ингредиента. Термин "стандартная лекарственная форма" относится к физически раздельным частицам, подходящим для введения стандартных дозировок человеку и другим млекопитающим, где каждая частица содержит предварительно определенное количество активного вещества, которое согласно расчетам обеспечивает желаемое терапевтическое действие, совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем и/или наполнителем. Соединения формулы I, в целом, являются эффективными в широком диапазоне дозировок. Например, ежедневная дозировка обычно находится в рамках диапазона от примерно 0,01 до примерно 50 мг/кг, чаще от примерно 0,05 до 5,0 мг/кг, например от 0,1 до 1,0 мг/кг массы тела. В некоторых случаях может быть достаточной дозировка ниже нижнего предела указанного выше диапазона, тогда как в других случаях можно использовать даже более высокие дозы в отсутствие каких-либо вредных побочных эффектов, таким образом, приведенный выше диапазон дозировок не ограничивает каким-либо образом объем изобретения. Следует понимать, что фактически вводимое количество соединения определяется лечащим врачом с учетом важных обстоятельств, включая состояние, подвергающееся лечению, выбранный способ введения, фактически вводимое соединение или соединения, возраст, вес и ответ каждого пациента и степень тяжести симптомов пациента. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения нарушения, связанного с употреблением алкоголя, у человека, включающий введение человеку, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества соединения формулы или его фармацевтически приемлемой соли;R1 представляет собой фтор или хлор; каждый из R2a и R2b представляет собой водород или каждый из R2a и R2b представляет собой фтор;R6 представляет собой водород или метил;Ar2 представляет собой фрагмент, выбранный из группы, состоящей из имидазол-1-ила, имидазол 2-ила, 2-метилимидазол-1-ила, 1-метилимидазол-2-ила и 1,2,4-триазол-3-ила. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что каждый из R2a и R2b представляет собой фтор. 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что R1 представляет собой хлор, a R3 представляет собой метил или гидроксиметил. 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что R3 представляет собой метил. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что соединение представляет собой[2-[4-[(2-хлор-4,4-дифторспиро[5 Н-тиено[2,3-с]пиран-7,4'-пиперидин]-1'-ил)метил]-3-метилпиразол-1-ил]-3-пиридил]метанол,2-хлор-4,4-дифтор-1'-1-(3-фтор-2-пиридил)-3-метилпиразол-4-ил]метил]спиро[5 Н-тиено[2,3-с]пиран-7,4'-пиперидин] или 2-хлор-1'-1-(2,6-дифторфенил)-3-метилпиразол-4-ил]метил]-4,4-дифторспиро[5 Н-тиено[2,3-с]пиран-7,4'-пиперидин] или фармацевтически приемлемую соль указанных соединений. 6. Способ по п.1, отличающийся тем, что соединение представляет собой [2-[4-[(2-хлор-4,4 дифторспиро[5 Н-тиено[2,3-с]пиран-7,4'-пиперидин]-1'-ил)метил]-3-метилпиразол-1-ил]-3-пиридил]метанол или его фармацевтически приемлемую соль. 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость. 8. Способ по п.2, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость. 9. Способ по п.5, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость. 10. Способ по п.6, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость. 11. Способ по п.1, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой злоупотребление алкоголем. 12. Способ по п.2, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, пред- 12022874 ставляет собой злоупотребление алкоголем. 13. Способ по п.5, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой злоупотребление алкоголем. 14. Способ по п.6, отличающийся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой злоупотребление алкоголем. 15. Применение соединения формулы или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения нарушения, связанного с употреблением алкоголя,где А представляет собойR1 представляет собой фтор или хлор; каждый из R2a и R2b представляет собой водород или каждый из R2a и R2b представляет собой фтор;R6 представляет собой водород или метил;Ar2 представляет собой фрагмент, выбранный из группы, состоящей из имидазол-1-ила, имидазол 2-ила, 2-метилимидазол-1-ила, 1-метилимидазол-2-ила и 1,2,4-триазол-3-ила. 16. Применение по п.15, отличающееся тем, что каждый из R2a и R2b представляет собой фтор. 17. Применение по п.16, отличающееся тем, что R1 представляет собой хлор, а R3 представляет собой метил или гидроксиметил. 18. Применение по п.17, отличающееся тем, что R3 представляет собой метил. 19. Применение по п.15, отличающееся тем, что соединение представляет собой 2-хлор-4,4-дифтор-1'-1-(3-фтор-2-пиридил)-3-метилпиразол-4-ил]метил]спиро[5 Н-тиено[2,3 с]пиран-7,4'-пиперидин] или 2-хлор-1'-1-(2,6-дифторфенил)-3-метилпиразол-4-ил]метил]-4,4-дифторспиро[5 Н-тиено[2,3 с]пиран-7,4'-пиперидин] или фармацевтически приемлемую соль указанных соединений. 20. Применение по п.15, отличающееся тем, что соединение представляет собой [2-[4-[(2-хлор-4,4 дифторспиро[5 Н-тиено[2,3-с]пиран-7,4'-пиперидин]-1'-ил)метил]-3-метилпиразол-1-ил]-3-пиридил]метанол или его фармацевтически приемлемую соль. 21. Применение по любому из пп.15-20, отличающееся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой алкогольную зависимость. 22. Применение по любому из пп.15-20, отличающееся тем, что нарушение, связанное с употреблением алкоголя, представляет собой злоупотребление алкоголем.