Применение cci-779 в качестве противоопухолевого средства

007096 Данное изобретение относится к применению 42-эфира рапамицина с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (CCI-779) в качестве противоопухолевого средства. Рапамицин представляет собой макроциклический триеновый антибиотик, продуцируемыйStreptomyces hygroscopicus, у которого обнаружили наличие противогрибковой активности, в частности против Candida albicans, как in vitro, так и in vivo [С. Vezina et al., J. Antibiot. 28, 721 (1975); S.N. Sehgal etal., J. Antibiot. 28, 727 (1975); H.A. Baker et al., J. Antibiot. 31, 539 (1978); патент США 3929992; и патент США 3993749]. Кроме того, было показано, что рапамицин сам по себе (патент США 4885171) или в комбинации с пицибанилом (патент США 4401653) обладает противоопухолевой активностью. Иммуносупрессорные эффекты рапамицина были раскрыты в FASEB 3, 3411 (1989). Было показано, что циклоспорин А и FK-506, другие макроциклические молекулы также эффективны в качестве иммуносупрессорных средств, следовательно применимы для предотвращения отторжения трансплантата[FASEB 3, 3411 (1989); FASEB 3, 5256 (1989); R.Y. Calne et al. Lancet 1183 (1978); и U.S. Patent 5,100,899]. R. Martel et al. [Can. J. Physiol. Pharmacol. 55, 48 (1977)] раскрыл, что рапамицин эффективен на экспериментальной модели аллергического энцефаломиелита, на модели рассеянного склероза; на модели адъювантного артрита, модели ревматоидного артрита, и что рапамицин эффективно ингибировал образование IgE-подобных антител. Рапамицин также эффективен для предотвращения или лечения системной красной волчанки [патент США 5078999], воспаления легких [патент США 5080899], инсулинзависимого сахарного диабета[патент США 5321009], заболеваний кожи, таких как псориаз, [патент США 5286730], заболеваний кишечника [патент США 5286731], пролиферации гладкомышечных клеток и утолщения интимы после сосудистого повреждения [патент США 5288711 и 5516781], Т-клеточного лейкоза/лимфомы взрослых[заявка на европейский патент 525,960 A1], воспаления глаза [патент США 5387589], злокачественных карцином [патент США 5206018], воспалительного заболевания сердца [патент США 5496832] и анемии[патент США 5561138]. Получение и применение гидроксиэфиров рапамицина, включая CCI-779, описано в патенте США 5362718. Описание изобретения Данное изобретение относится к применению CCI-779 в качестве противоопухолевого средства, и в частности для опухолей, которые не поддаются стандартному лечению, или для опухолей, которым не подходит стандартное лечение. В частности, CCI-779 применим при лечении рака почек, рака мягких тканей, рака груди, нейроэндокринной опухоли легких, рака шейки матки, рака матки, рака головы и шеи, глиобластомы, не мелкоклеточного рака легких, рака простаты, рака поджелудочной железы, лимфомы, меланомы, мелкоклеточного рака легких, рака яичников, рака толстой кишки. В соответствии с данным изобретением, используемый термин лечение означает лечение млекопитающего, имеющего новообразование, путем введения указанному млекопитающему эффективного количества CCI-779 для ингибирования роста опухоли у такого млекопитающего, уничтожения опухоли или временного уменьшения опухоли. В соответствии с данным изобретением использованный термин введение в отношении введенияCCI-779 означает либо непосредственное введение CCI-779, либо введение пролекарства, производного или аналога, который образует эффективное количество CCI-779 внутри организма. В соответствии с данным изобретением используемый термин не поддающееся лечению новообразование относится к новообразованиям, которые типично прогрессировали после стандартного химиотерапевтического лечения, которое было приемлемо в случае данной опухоли. Получение CCI-779 описано в патенте США 5,362,718, который включен в описание в качестве ссылки. Противоопухолевая активность CCI-779 была подтверждена в доклинических in vitro и in vivo стандартных фармакологических испытаниях, которые оценивали способность CCI-779 при лечении клеточного рака почки человека (быстропрогрессирующее заболевание с очень ограниченными вариантами лечения), а также и в двух I фазах клинических испытаний на людях. Используемые методики и полученные результаты кратко описаны ниже. Методики доклинического испытания Методика испытания in vitro. Почечные опухолевые линии НТВ-44 и CRL-1161 были получены из American Tissue Culture Collection (ATCC), Bethesda, MD. Линия SN12-C была получена от Dr. J. Fidler, M.D. Anderson Hospital, Houston, TX. Клетки высевали в MEM (Gibco) с добавлением 2 мМ глутамина, 1 мМ пирувата натрия, 5 мл раствора пенициллин-стрептомицина, 1 мМ раствора заменимых аминокислот, 10% раствором фетальной бычьей сыворотки. Клетки (5 х 103) высевали на 96-луночных планшетах с конечным объемом 200 мл и инкубировали в течение 24 ч при 37 С. Логарифмические разведения CCI-779 начиная с 100 мкг/мл затем добавляли к культурам на 48 ч. В последние 5 ч клетки метили 1 мкКю 3H-тимидином (New England Nuclear, 6,7 Кю/мМоль). Затем клетки собирали и степень захвата тимидина определяли методом жидкостной сцинтилляционной спектрометрии. IC50 определяли как концентрацию, полученную при 50% максимального захвата тимидина в контрольных необработанных клетках.-1 007096 Методика испытания in vivo. Самки мышей Balb/c nu/nu были получены из Charles River Labs, Wilmington, DE, в возрасте 6-8 недель. Мышам (n=10 на группу) вводили подкожно 5 х 106 клеток, ресуспендированных в 50% раствореMatrigel (BD Biosciences) и давали опухоли развиться. Когда размер опухоли достигал 100 мг, мышам перорально вводили 25 мг/кг CCI-779. CCI-779 вводили в течение 5 последующих дней с повторными 14 дневными циклами на протяжении всего эксперимента. Лекарственная форма, используемая для CCI779, представляла собой 50% этанола, 49% phosal, 1% твина 80 для ресуспендирования CCI-779, систему доставки для ресуспендирования CCI-779, где исходный раствор ресуспендировали при разведении 1:10 в носителе до введения. Рост опухоли оценивали с использованием штангенциркуля и объем (1 х м х в) преобразовывали в массу по формуле: 1 х м 2/2. Результаты. Опухоли клеток почки человека выращивали in vitro в присутствии или отсутствии CCI-779 в течение 3 дней и влияние на рост опухоли определяли по включению 3H-тимидина в контрольные клетки по сравнению с обработанными. Табл. 1 показывает, что IC50 (концентрация при которой рост подавляется на 50%) для всех 3 исследуемых линий находилась в низком нМ диапазоне. Таблица 1 Влияние CCI-779 на рост опухоли клеток почки человека in vitro Почечная опухолевая линияSN12-C 5,5 Эффект CCI-779 в двух линиях почки человека (НТВ-44 и CRL-1161) оценивали in vivo путем пересаживания опухолевых клеток мышам nude на бока. По достижении размера опухолей примерно 100 мг,мышей обрабатывали CCI-779 или контрольным средством. Лечение с использованием CCI-779 в количестве 25 мг/кг в результате приводило к значительному подавлению роста опухолевых клеток у мышей(табл. 2). Таблица 2. Влияние CCI-779 на рост опухолевых клеток почки человека в ксенотрансплантатах мыши nude Клиническое испытание. Было проведено два клинических испытания I фазы отдельно взятого средства (CCI-779). В первом исследовании CCI-779 вводили в виде 30-минутной в/в инфузии ежедневно в течение 5 дней, каждые 2-3 недели. Во втором исследовании CCI-779 вводили в виде 30-минутной в/в инфузии еженедельно однократно. Оба испытания представляли собой одностороннее мультицентровые исследования со свободной выборкой и растущей дозой при переносимости CCI-779.-2 007096 Пациентам разрешали продолжать лечение при переносимости CCI-779 и когда доказательства очевидного прогрессирования заболевания отсутствовали. Были использованы следующие критерии отбора. Критерии отбора. 1. Пациенты с гистологическим диагнозом прогрессирующего рака (солидные опухоли и, в первом исследовании, лимфомы), которые невосприимчивы к стандартной терапии или для которых стандартная терапия неприемлема. 2. Заболевание, измеримое или поддающееся оценке. 3. По меньшей мере 3 недели после предшествующей химиотерапии и/или рентгенотерапии (6 недель после нитрозомочевины или митомицина С). 4. По меньшей мере 4 недели после любого другого исследуемого средства. 5. Возраст по меньшей мере 18 лет. 6. Удовлетворительная функция костного мозга, почек и печени. 7. Сывороточный холестерин 350 мг/дл и триглицериды 300 мг/дл. 8. ECOG состояние работоспособности 0-2. 9. Вероятная продолжительность жизни по меньшей мере 3 месяца. 10. Подписанное, датированное, заверенное письменное информированное согласие. Всего было зарегистрировано 63 пациента и 24 пациента в первом и во втором исследованиях соответственно. Уровни доз находились в диапазоне от 0,75-24 мг/м 2 и 7,5-220 мг/м 2, с 5-кратными ежедневными каждые 2 недели и еженедельными режимами приема лекарственно средства соответственно. Полученные результаты были суммированы. У пациентов с раком почки при еженедельном режиме приема лекарственного средства наблюдали 1 частичную реакцию (50% уменьшения размера опухоли) и 2 незначительных реакции (25% но 50% уменьшения размера опухоли). У пациентов с раком почки при 5-кратном ежедневном режиме приема лекарственного средства продолжительностью приблизительно по 5 месяцев наблюдали 1 незначительную реакцию, 1 неподтвержденную незначительную реакцию и 1 устойчивое заболевание (25% возрастание до 25% снижения размера опухоли) продолжительностью приблизительно 5 месяцев. У пациентов с саркомой мягких тканей при 5-кратном ежедневном режиме приема лекарственного средства наблюдали 1 возможную частичную реакцию, 2 незначительных реакции и 1 стабильное заболевание продолжительностью приблизительно 5 месяцев. У пациентов с раком груди при еженедельном режиме приема лекарственного средства наблюдали одну частичную реакцию. У пациентов с нейроэндокринной опухолью легких при еженедельном режиме приема наблюдали одну частичную реакцию. У пациентов с раком шейки матки при 5-кратном ежедневном режиме приема лекарственного средства наблюдали одну незначительную реакцию. У пациентов с раком матки, получающих лекарственное средство 5-кратно ежедневно, наблюдали одну неподтвержденную незначительную реакцию. У пациентов с раком головы и шеи, получающих лекарственное средство ежедневно 5-кратно, наблюдали 1 устойчивое заболевание приблизительно 8 месяцев. У пациентов с немелкоклеточным раком легких, получающих ежедневный 5-кратный режим приема, наблюдали одну частичную реакцию. Эти результаты особенно неожиданны,принимая во внимание, что у пациентов в этих исследованиях были прогрессирующие раковые опухоли,которые в основном не поддавались стандартному лечению, а также учитывая, что это были клинические испытания I фазы, в которых эффективность часто ограничена, поскольку главной целью I фазы испытания является определение безопасности и переносимости оцениваемого лекарственного средства. На основании результатов доклинических и клинических испытаний, CCI-779 эффективен при лечении новообразований, в частности трудноизлечимых опухолей. Особенно, CCI-779 эффективен при лечении карциномы почки, карциномы мягких тканей, рака груди, нейроэндокринной опухоли легких,рака шейки матки, рака матки, рака головы и шеи, глиобластомы, не мелкоклеточного рака легких, рака простаты, рака поджелудочной железы, лимфомы, меланомы, мелкоклеточного рака легких, рака яичников и рака толстой кишки. Как обычно при химиотерапии, режимы дозирования тщательно контролируются лечащим врачом,на основании многочисленных факторов, включающих тяжесть заболевания, ответ на заболевание, какие-либо интоксикации, связанные с лечением, возраст и состояние здоровья пациента. На основании результатов, полученных с CCI-779, определяют, что начальные дозы для в/в инфузии составят от 0,1 до 100 мг/м 2 при ежедневном режиме введения лекарственного средства, и от 1 до 1000 мг/м 2 при еженедельном режиме введения лекарственного средства. Заранее можно предвидеть другие режимы и варианты введения, которые будут определены под руководством врача. Предпочтительно введение CCI-779 посредством в/в инфузии или перорально, предпочтительно в виде таблеток или капсул. Также возможны другие пути введения, как например, через имплантаты, парентерально, (помимо в/в, как например интраперитонеальные и подкожные инъекции), ректально, интраназально, вагинально и трансдермально. Ожидается, что режимы дозирования варьируют в зависимости от пути введения. Например, дозы для перорального введения часто до десяти раз выше, чем для в/в введения. Допускается, что CCI-779 может быть введен как единственное химиотерапевтическое средство или может быть частью химиотерапевтической схемы лечения, содержащей более одного химиотерапевтического агента. Применение-3 007096 сопутствующих химиотерапевтических агентов часто позволяет снизить дозу каждого конкретного агента и следовательно поднять нижний предел безопасности каждого конкретного агента. Пероральные лекарственные средства, содержащие активные соединения по данному изобретению могут включать в любые, обычно используемые, пероральные формы, включая таблетки, капсулы, буккальные формы, пастилки, лепешки и жидкости для перорального применения, суспензии или растворы. Капсулы могут содержать смеси активных соединений (соединения) с инертными наполнителями и/или разбавителями, такими как фармацевтически приемлемые крахмалы (например кукурузный, картофельный крахмал или крупа из крахмала), сахара, искусственные подсластители, порошкообразные целлюлозы, такие как кристаллическая и микрокристаллическая целлюлозы, мука, желатин, камедь и т.д. Используемые таблетированные лекарственные формы могут быть изготовлены обычным прессованием, методами мокрой грануляции или сухой грануляции и использованы фармацевтически приемлемые разбавители, связующие агенты, смазывающие вещества, дезинтегрирующие агенты, поверхностно-активные модифицирующие вещества (включая сурфактанты), суспендирующие или стабилизирующие агенты,включая, но неограничиваясь ими, стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, лаурилсульфат натрия,микрокристаллическую целлюлозу, карбоксиметилцеллюлозу кальция, поливинилпирролидон, желатин,альгиновую кислоту, аравийскую камедь, ксантановую смолу, цитрат натрия, комплексные силикаты,карбонат кальция, глицин, декстрин, сахарозу, сорбит, дифосфат кальция, сульфат кальция, лактозу, каолин, маннит, хлорид натрия, тальк, сухие крахмалы и порошкообразный сахар. Предпочтительные поверхностно-активные модифицирующие вещества включают неионные и анионные поверхностноактивные модифицирующие вещества. Типичные примеры веществ модифицирующих поверхность включают, но не ограничиваясь ими, полоксамер 188, хлорид бензалкония, стеарат кальция, цетостеариловый спирт, цетомакроголевый эмульгирующий воск, сложные эфиры сорбитана, коллоидный диоксид кремния, фосфаты, додецилсульфат натрия, алюмосиликат магния и триэтаноламин. Пероральные лекарственные формы могут предусматривать применение стандартных составов замедленного или пролонгированного высвобождения для изменения всасывания активного соединения (соединений). Пероральная лекарственная форма также может состоять из вводимого в воду или в фруктовый сок активного ингредиента, при содержании, если необходимо, соответствующих растворяющих веществ или эмульгаторов. В некоторых случаях может требоваться введение соединений непосредственно в воздухоносные пути в виде аэрозоля. Соединения по данному изобретению также могут быть введены парентерально или интраперитонеально. Растворы или суспензии этих активных соединений в виде свободного основания или фармацевтически приемлемой соли могут быть приготовлены в воде, соответственно смешанной с сурфактантом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии также могут быть приготовлены в глицерине,жидких полиэтиленгликолях или их смесях в маслах. При обычных условиях хранения и использования,эти препараты содержат консерванты для предупреждения роста микроорганизмов. Фармацевтические формы, приемлемые для инъекционного использования, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для немедленного приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий. Во всех случаях, данная форма должна быть стерильной, и должна быть жидкой в степени, обеспечивающей легкое введение с помощью шприца. Форма должна быть стабильной в условиях производства и условиях хранения, а также должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носителем может быть растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, высокомолекулярный спирт (например глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), их стабильные смеси и растительные масла. Понятно, что для целей настоящего изобретения, трансдермальное введение включает введение через поверхность тела и внутренние выстилки трактов организма включающих эпителиальные и слизистые ткани. Такие введения могут быть выполнены с использованием представленных соединений или их фармацевтически приемлемых солей в лосьонах, кремах, пенах, пластырях, суспензиях, растворах и суппозиториях (ректальных и вагинальных). Трансдермальное введение может быть выполнено путем использования трансдермального пластыря, содержащего активное соединение и носитель, инертный по отношению к активному веществу, нетоксичный для кожи и позволяющий доставлять данное средство в кровоток для системной абсорбции через кожу. Носитель может принимать любое количество форм, таких как кремы и мази, пасты, гели и устройства замедленного высвобождения. Кремы и мази могут быть вязкими жидкостями или полутвердыми эмульсиями типа или масло в воде, или вода в масле. Также могут быть пригодны пасты, включающие абсорбирующие порошки, диспергированные в жидком парафине или гидрофильном жидком парафине, содержащие активный ингредиент. Могут быть использованы различные устройства замедленного высвобождения для высвобождения активного ингредиента в кровоток, такие как полупроницаемая мембрана, покрывающая резервуар, содержащий активный ингредиент с носителем или без него,или матрицу, содержащую активный ингредиент. В литературе известны другие устройства замедленного высвобождения.-4 007096 Лекарственные формы в виде суппозитория могут быть выполнены из традиционных материалов,включающих масло какао с добавлением или без добавления восков для изменения точки плавления суппозитория и глицерин. Также могут быть использованы водорастворимые основы для суппозиториев,такие как полиэтиленгликоли различных молекулярных масс. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Способ лечения новообразования у млекопитающего, нуждающегося в этом, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества 42-эфира рапамицина с 3-гидрокси-2(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (CCI-779), в котором новообразование выбрано из группы, состоящей из саркомы мягких тканей, рака шейки матки, рака матки, рака головы и шеи, немелкоклеточного рака легких и рака яичников. 2. Способ лечения новообразования, не поддающегося лечению, у млекопитающего, нуждающегося в этом, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества 42-эфира рапамицина с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (CCI-779), в котором указанное,не поддающееся лечению новообразование выбрано из группы, состоящей из саркомы мягких тканей,рака груди, нейроэндокринной опухоли легких, рака шейки матки, рака матки, рака головы и шеи, немелкоклеточного рак легких. 3. Способ по п.1 или 2, в котором новообразованием является саркома мягких тканей. 4. Способ по п.2, в котором новообразованием, не поддающимся лечению, является рак груди. 5. Способ по п.2, в котором новообразованием, не поддающимся лечению, является нейроэндокринная опухоль легких. 6. Способ по п.1 или 2, в котором новообразованием является рак шейки матки. 7. Способ по п.1 или 2, в котором новообразованием является рак матки. 8. Способ по п.1 или 2, в котором новообразованием является рак головы и шеи. 9. Способ по п.1 или 2, в котором новообразованием является немелкоклеточный рак легких. 10. Способ по п.1, в котором новообразованием является рак яичников. 11. Применение 42-эфира рапамицина с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (CCI-779) для изготовления лекарственного средства для лечения новообразования у млекопитающего, где новообразование выбрано из группы, состоящей из саркомы мягких тканей, рака шейки матки,рака матки, рака головы и шеи, немелкоклеточного рака легких и рака яичников. 12. Применение 42-эфира рапамицина с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (CCI-779) для изготовления лекарственного средства для лечения новообразования, не поддающегося лечению, у млекопитающего, где новообразование, не поддающееся лечению, выбрано из группы,состоящей из саркомы мягких тканей, рака груди, нейроэндокринной опухоли легких, рака шейки матки,рака матки, рака головы и шеи, немелкоклеточного рака легких.