Фармацевтическая композиция, содержащая гамма-бутиробетаин

006675 Настоящее изобретение относится ко второму медицинскому применению известного фармацевтического вещества и содержащей его композиции, в частности, для нормализации и стимулирования сексуальной активности и потенции у млекопитающих. В настоящем изобретении выявлен новый эффект известного вещества, показывающего в комбинации неожиданный уровень фармакологической активности. В частности, представлена фармацевтическая композиция, содержащая как активный компонент гамма-бутиробетаин (ГББ) в комбинации с 3-(2,2,2-триметилгидразиний)пропионатом (ТГП) или ингибитором фосфодиэстеразы. ГББ (актинин), из которого в организме млекопитающих синтезируется карнитин, первоначально был характеризован как токсичное вещество, ускоряющее дыхание, вызывающее саливацию и лакримацию, расширение зрачков, сужение сосудов и остановку сердца в диастоле (Linneveh W. Z. physiol.Chem., 1929, 42, 181). Однако в дальнейших исследованиях было показано, что ГББ является исключительно малотоксичным веществом (LD50 = 7000 мг/кг вещ.) (Rotzsch W., Lorenz I., Strack E. Acta biol.Med. Ger. 1959, 3, 28-36). Эффективность ГББ при сердечно-сосудистых заболеваниях была сравнена с эффективностью ацетилхолина (Hosein E.A., McLennan H. Pharmacological action of gamma-butyrobetaine.Nature 1959, 183, 328), в дальнейшем, однако, авторы сообщили, что на самом деле было исследовано действие метилового эфира ГББ. ГББ был охарактеризован как фармакологически инертное веществоChem. 1953, 295, 377). Однако позднее ГББ был характеризован как акцептор радикалов (Akahira M.,Hara A., Abiko Y. Effect of MET-88, a gamma-butyrobetaine hydroxylase inhibitor, on myocardial derangements induced by hydrogen peroxide in the isolated perfused rat heart. Fundam. Clin. Pharmacol. 1997, 11(4),356) и вещество, обладающее кардиозащитной активностью (Kalvins I., Veveris M. Латвийский патентLV11727). Было также обнаружено, что фармацевтическая композиция, содержащая ГББ как активное начало, применима для лечения дефицита карнитина (Cavazza С. Pharmaceutical composition comprisinggamma-butyrobetaine. Патентная заявка в Великобритании GB 2091101 (1982. До сих пор не имелось данных о влиянии ГББ на сексуальную активность и потенцию у млекопитающих. 3-(2,2,2-Триметилгидразиний)пропионат (ТГП) известен также как медикамент Милдронат или Кватерин (патент Великобритании UK 2105992). Механизм действия этого препарата основан на торможении скорости биосинтеза карнитина и связанного с этим транспорта жирных кислот с длинной цепью через мембраны митохондрий (Simkhovich B.Z., Shutenko Z.V., Meirena D.V. et al. 3-(2,2,2-trimethylhydrazinium)propionate (THP) - a novel -butyrobetaine inhibitor with cardioprotective properties. Biochem.Pharmacol. 1988, 37, 195). Таким образом, он применяется как корректор метаболизма при ишемических болезнях различного происхождения и цитопротектор при гипоксии. Фармацевтическая композиция для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, содержащая 3(2,2,2-триметилгидразиний)пропионат и -бутиробетаин, была описана в Латвийском патенте LV 11728. Однако нет данных о влиянии 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата (ТГП) или его комбинации с другими веществами на сексуальную активность и потенцию у млекопитающих. Было неожиданно обнаружено, что -бутиробетаин и/или ТГП вызывают значительное и продолжительное увеличение сексуальной активности у лабораторных животных. Более того, комбинация обоих веществ производит более продолжительное и более сильное увеличение внутрикавернозного давления,чем каждое из составляющих веществ отдельно. Более того, ГББ или его комбинация с ТГП оказывает положительное влияние на внутрикавернозное давление, вызванное рефлекторной стимуляцией. Таким образом, было неожиданно обнаружено, что ГББ или его комбинация с ТГП применимы для стимуляции как сексуальной активности, так и потенции у млекопитающих. Эта активность не может быть отнесена к известному эффекту ГББ и/или ТГП на обмен жирных кислот или к другим известным физиологическим эффектам упомянутых веществ. Фармакологический эффект ГББ, ТГП и их комбинации на сексуальную активность у млекопитающих был исследован, используя модель, основанную на копулятивном поведении крыс в состоянии физиологической депрессии. Эксперимент проводился на взрослых крысах линии Вистар обоих полов с начальным весом тела 300-330 г. Во время эксперимента животные содержались в стандартных клетках в группах по 6. Питание стандартная диета R70 (LABFOR, Lactamin AB, Швеция). Комнатная температура поддерживалась при 21-23 С, относительная влажность 6510%, 12-часовой цикл свет/темнота. В течение одной недели до начала эксперимента было установлено, что среднее употребление воды крысами было 8,2-12% (в среднем 10%) от их массы тела. Самцы крыс были произвольным образом разделены на 4 группы, в каждой по 6 животных, и обеспечивались в течение 6 недель следующими водными растворами: 1 группа (контрольная группа) - питьевая вода без каких-либо добавок; 2 группа (ГББ группа) - питьевая вода была дополнена -бутиробетаином (0,015 вес.%), в результате обеспечивая в среднем дневной прим -бутиробетаина 15 мг/кг;-1 006675 3 группа (ТГП группа) - питьевая вода была дополнена ТГП (0,06 вес.%), в результате обеспечивая в среднем дневной прим ТГП - 60 мг/кг; 4 группа (ГББ + ТГП группа) - питьевая вода была дополнена ТГП (0,06 вес.%) и гаммабутиробетаином (0,015 вес.%), в результате обеспечивая в среднем дневной прим ТГП - 60 мг/кг и прим -бутиробетаина - 15 мг/кг. Копулятивная активность самцов крыс была протестирована четыре раза: через одну неделю, через четыре недели, через шесть недель и через 48-50 ч после прекращения прима вещества, когда все животные уже принимали питьевую воду без добавок. Тесты проводились между 10 и 12 ч утра, 6 самцов крысы из одной группы были помещены в чистую, хорошо освещенную клетку (коробку). Через 5 мин адаптационного периода в коробку на 10 мин были помещены 2 самки. Для каждого самца были собраны следующие данные: 1) копулятивная активность (число половых актов в течение периода наблюдения); 2) период возбуждения, с раздельной регистрацией времени задержки - период пока самец крысы проявляет интерес к самке крысы и число попыток приближения/совокупления в течение периода наблюдения; 3) период после полового акта - поведение самцов крысы в течение 5 мин после удаления самок. Период после полового акта характеризовался следующими оценками: 0 - животное пассивно, лежит; 1 крыса спокойна, движется; 2 - крыса подвижна, ищет; 3 - животное активно, агрессивно. Использованные самки крысы были в фазе эструса, вызванной i.р. инъекцией 0,2 мл 0,1% дипропионата эстрадиола за 48 ч до опыта. Не наблюдались значительные изменения в употреблении воды в зависимости от наличия экспериментальных веществ, в то же время сексуальное поведение крыс в экспериментальных группах значительно отличалось по сравнению с контрольной группой. Уже через неделю после начала эксперимента животные, принимающие ГББ или ГББ+ТГП, проявляли более высокий сексуальный интерес и активность в сексуальных контактах, а также более длительный период возбуждения после полового акта. Длительное применение ГББ привело к увеличению сексуальной активности, отображаемой более высокой копулятивной интенсивностью, хотя влияние на поиск и общую активность животных было относительно небольшим (табл. 1-4). Таблица 1 Влияние терапевтических веществ на число попыток совокупления самцов крыс Таблица 2 Влияние терапевтических веществ на время задержки перед попыткой совокупления) р 0,05 от контроля Таблица 3 Влияние терапевтических веществ на количество копуляций Таблица 4 Влияние терапевтических веществ на период возбуждения после полового акта-2 006675 Комбинированное использование ГББ и ТГП вызывает повышение сексуального интереса и копулятивной активности в течение всего экспериментального периода. После прекращения лечения, только ГББ+ТГП группа показала более высокую копулятивную активность по сравнению с контрольной группой. Таким образом, было экспериментально показано, что ГББ один и в комбинации с ТГП после 6 недельного периода лечения вызывает значительное и продолжительное увеличение копулятивной активности у самцов крыс. Более того, было найдено неожиданное увеличение эффективности комбинации двух веществ по сравнению с активностью при их раздельном применении. В дальнейших экспериментах новые композиции были сравнены с известным стимулятором потенции папаверином (Sarosdy M.F., Hudnall C.H., Erickson D.R., Hardin T.C., Novicki D.E. A prospective double-blind trial of intracorporeal papaverine versus prostaglandin El in treatment of impotence. J. Urol., 1989,141, 551), который является эффективным стимулятором при внутрикорпоральной инъекции. Были использованы взрослые самцы крыс с массой 300-410 г. Влияние экспериментальных веществ на эрекцию полового члена было определено, используя экспериментальную модель, в которой измерялись изменения внутрикорпорального давления (Chen K.K. et al. J. Urol., 1992, 147, 1124). Крысы были анестезированы пентобарбиталом натрия (50 мг/кг i.р. плюс дополнительно 8 мг/кг/чi.v.). Температура тела поддерживалась при 37-37,4 С (ректальный контроль), нагревая лампой. Была вставлена эндотрахеальная трубка для обеспечения достаточного дыхания при анестезии. Игла номер 25,наполненная гепаринизированным солевым раствором, была присоединена к датчику давления и введена в кавернозное тело полового члена. Внутрикавернозное давление и ЭКГ во втором стандартном отведении одновременно записывались на физиографе DMP-4B (Narco Bio-Systems, США). В некоторых экспериментах также записывалось артериальное давление в сонной артерии. Эффект экспериментальных веществ определяли как при внутривенозном, так и при внутрикавернозном введении веществ. Для внутрикорпоральной инъекции, вещества были растворены в изотоническом (0,9%) растворе NaCl и доза вводилась в 0,05 мл жидкости. Гидрохлорид папаверина, использованный в клиническом исследовании потенции, был сохранн в качестве положительного стандарта (внутрикавернозная инъекция 0,2 мг на крысу; внутривенозно 2,0 мг/кг). Гамма-бутиробетаин (ГББ) вводился отдельно и в комбинации с ТГП или ингибитором фосфодиэстеразы, в частности силденафилом. Гамма-бутиробетаин (ГББ) (внутрикавернозная инъекция 0,02-0,1 мг на крысу, обычно 0,05 мг на крысу; внутривенно 2,0 мг/кг) и ТГП (внутрикавернозная инъекция 0,2 мг одной крысе; внутривенно 10,0 мг/кг) вводились отдельно и в комбинации (ГББ+ТГП). Силденафил (внутрикавернозная инъекция 0,15 мг одной крысе, внутривенно 3,0 мг/кг) вводился отдельно и в комбинации (ГББ+силденафил). Было обнаружено, что внутрикавернозная инъекция ГББ вызывает эффект с выраженной зависимостью от дозы, однако, увеличение внутрикорпорального давления относительно кратковременно (табл. 5). Таблица 5 Влияние внутрикавернозной инъекции терапевтических веществ на внутрикорпоральное давление у крыс под наркозом) в % от увеличения вызванного папаверином ТГП не вызывает значительных изменений внутрикорпорального давления. Активность ГББ в этом тесте также была ниже, чем у папаверина. Неожиданно, эффект комбинации ГББ с ТГП или силденафилом был таким же или даже более выраженным, чем у папаверина. Как эффект вызванный комбинацией,так и его длительность, были более выражены, чем вызванные каждым компонентом в отдельности. Так как внутрикавернозная инъекция не популярна из-за неудобства для пациента, для дальнейшего изучения был выбран внутривенный путь введения.-3 006675 Было показано, что внутривенно папаверин и ТГП оказывают небольшой эффект на внутрикорпоральное давление, тогда как ГББ и композиция ГББ+ТГП являются высокоэффективными в увеличении внутрикорпорального давления (табл. 6). Важно отметить, что ГББ+ТГП в комбинации и ГББ с силденафилом сохраняют свой эффект в 2,25 раза или даже, соответственно, в 5,46 раза дольше, чем один ГББ. Также необходимо отметить, что только ГББ+ТГП в комбинации вызывает значительный положительный отклик на рефлекс возбуждения полового члена, дающий увеличение внутрикорпорального давления, что является нетипичным для животных под наркозом. Таблица 6 Таким образом было показано, что фармацевтические композиции, содержащие ГББ или его комбинацию с ТГП или силденафилом, вызывают увеличение внутрикорпорального давления не только при внутрикавернозной инъекции, но также, в отличие от папаверина, и при внутривенозном введении. Была продемонстрирована неожиданная эффективность композиции, содержащей комбинацию ГББ и ТГП и ГББ с силденафилом, в инициировании повышения внутрикорпорального давления и неожиданного увеличения длительности эффекта, в сравнении с тем эффектом, который вызывает каждый компонент комбинации, применнный отдельно, а также в восстановлении положительного рефлекса, вызванного механической стимуляцией полового члена. Оценивая показанный положительный эффект веществ при пероральном приме, можно сделать вывод, что они применимы для стимуляции сексуальной активности и эрекции как в норме, так и при физиологической депрессии эректильной функции, при введении как энтерально, так и парентерально. В том случае, когда активные вещества вводятся парентерально в виде инъекции или перорально в виде капель, сиропа или напитка, фармацевтическая композиция содержит комбинацию гаммабутиробетаина с ТГП или гамма-бутиробетаина с силденафилом в общем количестве 0,5-40% от общего веса фармацевтической формы, а в качестве фармацевтически приемлемого растворителя - дистиллированную воду, физиологический солевой раствор, раствор глюкозы или буферный раствор. В том случае, когда комбинация активных веществ вводится в виде таблеток, каплет, капсул, драже,гранул или порошков, фармацевтическая композиция содержит комбинацию -бутиробетаина с ТГП или-бутиробетаина с силденафилом в общем количестве от 0,5 до 5 г по весу в таблетке, каплете, капсуле,драже или одной дозе гранул или порошка. В том случае, когда активные вещества вводятся через кожу, локально, подъязычно, внутриуретрально или внутриназально, их содержание составляет 0,5-40% от общего веса фармацевтической формы. Фармацевтическая композиция дополнительно может содержать другие фармацевтические вещества, такие как, например, другие ингибиторы фосфодиэстеразы V типа (варденафил, тадалафил и подобные). ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение гамма-бутиробетаина в виде свободного основания или фармацевтически приемлемой соли для получения медикамента для нормализации и стимуляции сексуальной активности и потенции у млекопитающих. 2. Фармацевтическая композиция для стимуляции сексуальной активности и потенции у млекопитающих, содержащая гамма-бутиробетаин и фармацевтически приемлемый растворитель или носитель. 3. Фармацевтическая композиция по п.2, дополнительно содержащая 3-(2,2,2-триметилгидразиний)пропионат в виде свободного основания или фармацевтически приемлемой соли. 4. Фармацевтическая композиция по п.2, дополнительно содержащая ингибитор фосфодиэстеразы. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, в которой ингибитор фосфодиэстеразы является ингибитором фосфодиэстеразы типа V.-4 006675 6. Фармацевтическая композиция по п.5, в которой ингибитор фосфодиэстеразы типа V выбран из группы, включающей силденафил, варденафил, тадалафил и подобные. 7. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.2-6 в производстве в получении медикамента для нормализации и стимуляции сексуальной активности и потенции у млекопитающих.