Применение хлорида натрия для уменьшения вторичных желудочно-кишечных эффектов, обусловленных применением производных камптотецина

1 Настоящее изобретение относится к применению производных камптотецина, не приводящему к возникновению вторичных эффектов желудочно-кишечной непереносимости или имеющему сниженные вторичные желудочнокишечные эффекты. Настоящее изобретение относится также к применению растворов хлорида натрия для ослабления обусловленных применением производных камптотецина вторичных желудочно-кишечных эффектов. Известно, что применение производных камптотецина вызывает многочисленные побочные эффекты. В частности, они наиболее часто вызывают такие нарушения желудочнокишечного тракта, как очень тяжелые рвоты и диареи, что может привести к приостановлению лечения. В европейском патенте ЕР 137145 описаны производные камптотецина общей формулы в которой, в частности, R1 обозначает водород,галоген или алкил; Х обозначает атом хлора или группу NR2R3, в которой R2 и R3, одинаковые или разные, могут обозначать атом водорода,алкильный радикал, возможно замещенный, карбоцикл или гетероцикл, возможно замещенные,или алкильные радикалы (возможно замещенные), образующие вместе с атомом азота, с которым они связаны, гетероцикл, который может содержать еще один гетероатом, выбранный из О, S и/или NR4; где R4 является атомом водорода или алкильным радикалом; и группа Х-СО-Oнаходится в положении 9, 10 или 11 цикла А. Эти производные камптотецина являются противораковыми агентами, ингибиторами топоизомеразы I, из которых иринотекан, у которого группа Х-СО-O- представляет собой группу [4(1-пиперидино)-1-пиперидино]карбонилокси, является особенно эффективным активным началом в отношении солидных опухолей и в частности в отношении колоректального рака. В патентной заявке ЕР 74256 описаны также другие производные камптотецина, о которых также говорится как о противораковых агентах, в частности, описаны производные со структурой, аналогичной приведенной выше и в которой группа Х-СО-O-заменена на радикал-X'R', в котором X' обозначает О или S и R' обозначает атом водорода, алкил или ацил. Описаны также другие производные камптотецина,например, в патентах или патентных заявках ЕР 56692, ЕР 88642, ЕР 296612, ЕР 321122, ЕР 325247, ЕР 540099, ЕР 737686, WO 9003169, WO 9637496, WO 9638146, WO 9638449, WO 9700876,US 7104894, JP 57116015, JP 57116074, JP 59005188, JP 60019790, JP 01249777, JP 01246287,JP 91/12070 или в Canc. Res., 38, (1997) Abst. 1526(1997) Abst. PB-55 (Сеул - 27 июля-1 августа). Производные камптотецина обычно вводят в виде инъекций, преимущественно внутривенных, в форме стерильного раствора или эмульсии. Производные камптотецина могут также вводиться перорально в форме твердых или жидких композиций. Производные камптотецина могут также применяться в сочетании с другими противораковыми агентами, такими, например, как цисплатина, оксалиплатина, Tomudex, Taxotere,5-фторурацил и ингибиторы тимидилатсинтазы. К сожалению, из вторичных клинических эффектов, возникающих при лечении производными камптотецина, отмечают, в частности,появление диарей (третьей или четвертой степени), холинэргического синдрома, тошнот и рвот. В частности, у 38% больных наблюдаются тяжелые диареи, которые могут стать угрозой для жизни больных из-за обезвоживания и/или связанной с этим инфекции. С целью снижения кишечной токсичности,обусловленной применением активного начала,были разработаны различные способы борьбы с кишечной токсичностью или ее снижения. Однако до настоящего времени успеха это не принесло. Отсюда следует, что использование производных камптотецина ограничено их использованием только очень опытными онкологами и применительно лишь к нескольким категориям больных, которые могут переносить эти соединения. Заявителем обнаружено, и это составляет предмет настоящего изобретения, что защиты от желудочно-кишечных расстройств, вызываемых лечением производными камптотецина, можно добиться применением раствора хлорида натрия. Такая защита приводит к специфическому снижению и в некоторых случаях устранению вторичных гастроинтестинальных эффектов без уменьшения системного воздействия активного начала или противоопухолевой активности. Настоящее изобретение относится к применению хлорида натрия для получения агента,предназначенного для снижения или устранения вторичных желудочно-кишечных эффектов,вызванных применением производных камптотецина. Согласно изобретению, агентом, предназначенным для снижения или устранения вторичных желудочно-кишечных эффектов, вызванных применением производных камптотецина, является водный раствор хлорида натрия. Названная выше защита обеспечивается введением раствора хлорида натрия одновременно с введением производных камптотецина или за несколько дней до их введения и затем одновременно с их введением. Этот удивительный эффект исключительно благоприятен и в частности позволяет избежать перерывов в лечении, обусловленных слишком 3 тяжелыми вторичными гастроинтестинальными эффектами. Согласно изобретению используемый раствор хлорида натрия представляет собой водный раствор с концентрацией от 4 до 13 г/л. Он применяется пероральным способом. Предпочтительная концентрация используемого раствора хлорида натрия равна 9 г/л. Раствор хлорида натрия приготовляют обычными способами, растворяя хлорид натрия в воде (например, очищенной или стерильной воде). Этот раствор может также содержать другие агенты, в частности такие как подслащивающие или ароматизирующие агенты. Раствор хлорида натрия может вводиться в дозах от 5 до 10 мл/кг один или два раза в сутки,начиная за 5 дней до начала лечения и заканчивая на следующий день после завершения лечения, при длительности лечения производным камптотецина от 1 до 5 дней подряд. Согласно другому варианту применения раствор хлорида натрия вводится в дозах от 5 до 10 мл/кг один или два раза в сутки в течение периода лечения,преимущественно в дозе 10 мл/кг два раза в день в течение периода лечения производным камптотецина от 1 до 14 дней подряд. Второй вариант использования раствора хлорида натрия является предпочтительным. Производное камптотецина вводят в виде инъекций, преимущественно внутривенных, или пероральным путем. В том случае, когда производные камптотецина вводят внутривенно, их композиции могут также содержать вспомогательные добавки, в частности смачивающие, изотонизирующие,эмульгирующие, диспергирующие и стабилизирующие агенты. В качестве примера, иринотекан(СРТ-11) вводят растворенным в среде для внутривенных инъекций в дозах от 175 до 500 мг/м 2. Производные камптотецина могут также вводиться перорально в виде твердых композиций, например в виде твердых желатиновых капсул или полутвердого гидрофильного матрикса. Они могут вводиться также в виде таблеток, пилюль, желатиновых и других капсул, порошков или гранул. Композиции для перорального применения имеют преимущественно форму таблеток. Активное начало во всех этих композициях смешивают, в частности, с одним или несколькими разбавителями или инертными добавками, такими как сахара, производныеcахаров или гидрофильные макромолекулярные соединения, такие, в частности, как сахароза,лактоза, глюкоза, мальтоза, D-фруктоза, сорбит; крахмалы, такие как крахмал пшеницы, кукурузы или риса; целлюлоза и ее производные, такие, например, как этил- или метилцеллюлоза,гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, метилгидроксиметилцеллюлоза, метилгидроксипропилцеллюлоза или карбоксиметилцеллюлоза; камеди, такие как гуммиарабик, адрагантовая камедь, гуаровая смола; альгинаты, 002917 4 каррагенаты или декстрин; белки; синтетические продукты, такие как поливинилпирролидон, высокомолекулярные полиэтиленгликоли; или такие минеральные вещества, как коллоидальные кремнеземы или силикаты. Эти композиции могут содержать и другие вещества, такие, например, как смазочные добавки (например, стеарат магния) или оболочки, предназначенные для регулируемого высвобождения активного начала. Композиции могут также вводиться в виде фармацевтически приемлемых растворов, суспензий, эмульсий, сиропов и эликсиров, содержащих инертные разбавители,такие как вода или масла типа парафинового масла. Эти композиции могут, кроме того, содержать отличные от разбавителей вещества,такие как увлажняющие агенты, подслащивающие или ароматизирующие вещества, в частности сахара или полиолы. Само собой разумеется, что в настоящее изобретение входят также упаковочные наборы,содержащие состав, включающий производное камптотецина и агент на основе хлорида натрия,предназначенный для снижения или устранения вторичных желудочно-кишечных эффектов,вызванных применением производных камптотецина. Пригодна любая форма упаковочных наборов, в частности пригодны (в качестве примера) упаковки в виде двух или более флаконов; упаковки в виде флакона, содержащего производное камптотецина, и ампулы или ампул, содержащих агент; упаковки в виде резервуара для перфузии, содержащего производное камптотецина, и флакона(ов) или ампулы(л), содержащих агент; упаковки, в которых совмещаются упаковка для пероралыюго применения,содержащая производное камптотецина, и один(одна) или несколько флаконов или ампул, содержащих агент. Разумеется, хлорид натрия в названных выше флаконах или ампулах может находиться в виде предназначенного для разбавления порошка или в виде раствора, в частности готового к применению раствора. Экспериментальные исследования Настоящее изобретение было продемонстрировано в различных испытаниях, выполненных на мыши и собаке в описанных ниже условиях. Приготовление раствора для инъекций Раствор для инъекций на основе трехводного иринотекангидрохлорида приготовляют из расчета 20 мг/мл препарата в присутствии следующих составляющих: Трехводный иринотекангидрохлорид 20 мгD-Сорбит 45 мг Молочная кислота 0,9 мг Гидроксид натрия В достат. кол-ве для рН 3,5 Вода для инъецируемых В достат. кол-ве препаратов до 1 мл 5 1) Экспериментальное исследование на мыши. 1.1) Испытание I. Оценка защитного эффекта применяемого перорально раствора хлорида натрия в отношении интестинальной токсичности вводимого внутривенно СРТ-11. Мыши-самцы CD1 (в возрасте от 5 до 6 недель), разделенные на две группы по 10 мышей,получают в каждой группе по одной внутривенной инъекции (20 мл/кг со скоростью 0,5 мл/мин) водного раствора СРТ-11 с 9 г/л хлорида натрия при дозе 40 мг/кг (приблизительно 120 мг/м 2 поверхности тела) в течение 5 дней с 6-ого дня по 10-ый. За этим периодом лечения следует трехдневный период без лечения (до 13-го дня). Мыши в одной из групп получают наряду с этим ежедневно в течение 10 дней (с 1-ого по 10-ый день) 2 раза в день с перерывом приблизительно 10 ч перорально по 10 мл/кг за прием водного раствора 9 г/л хлорида натрия (группаCPT-11/NaCl). Животные второй группы не получают перорально водный раствор 9 г/л хлорида натрия (группа СРТ-11). Летальность и клинические признаки наблюдаются ежедневно. Вес тела записывают в 1-ый, 6-ой, 11-ый и 13-ый дни. На 13-ый день мышей забивают и вскрывают. У всех мышей вырезают целиком желудочно-кишечный тракт,который у мышей, доживших до окончания периода наблюдения, подвергают микроскопическому исследованию. Летальность, обусловленная применением СРТ-11 и наблюдаемая на 6-ой и 7-ой дни, наблюдается у 7 мышей из 15 в группе СРТ-11 и только у 2 из 10 мышей в группе CPT-11/NaCl. Снижение двигательной активности, дрожь,конвульсии и/или затрудненное дыхание, обусловленные применением СРТ-11, наблюдаются эпизодично после применения СРТ-11. Потеря веса тела наблюдается в группах СРТ-11 и CPT11/NaCl во время лечения с помощью СРТ-11. Потеря веса более значительна в группе СРТ-11,чем в группе CPT-11/NaCl, и продолжает иметь место после окончания лечения в группе СРТ 11. Природа наблюдаемых в кишечнике микроскопических изменений соответствует изменениям, ожидаемым при применении противоракового агента. В обеих группах преобладают изменения в тонком кишечнике. Эти изменения,в целом от умеренных до выраженных, характеризуются утерей крипт и укорочением ворсинок. Изменения в кишечнике менее значительны в группе CPT-11/NaCl, в частности минимальные утери крипт наблюдаются лишь в отдельных случаях. Таким образом, пероральное введение изотонического раствора 9 г/л хлорида натрия по 10 мл/кг за прием дважды в день (20 мл/кг/сутки) в течение 5 дней до и в период внутривенного применения СРТ-11 в течение 5 дней предупре 002917 6 ждает появление гистопатологических изменений в кишечнике, обусловленных применением СРТ-11. 1.2) Испытание II. Оценка защитного эффекта различных режимов введения раствора хлорида натрия пероральным путем в отношении интестинальной токсичности СРТ-11. Самцов мышей CD1 в возрасте от 5 до 6 недель разделяются на 5 групп по 10 мышей в каждой; каждое животное получает внутривенную инъекцию (20 мл/кг со скоростью 0,5 мл/мин) водного раствора СРТ-11 с 9 г/л хлорида натрия при дозе 40 мг/кг (приблизительно 120 мг/м 2 поверхности тела) в течение 5 дней с 6-ого по 10-ый день. В группе 1 вводят два раза в день с интервалом приблизительно 10 ч по 10 мл/кг за прием водного раствора хлорида натрия с концентрацией 9 г/л с 1-ого по 10-ый день; в группе 2 - два раза в день по 5 мл/кг за прием с 1-ого по 10-ый день; в группе 3 - один раз в день по 20 мл/кг за прием с 1-ого по 10-ый день; в группе 4 - два раза в день по 10 мл/кг за прием с 6-ого по 10-ый день. Животные из группы 5 не получают раствора 9 г/л хлорида натрия. Летальность и клинические признаки наблюдаются ежедневно. Вес тела записывают на 3-ий, 6-ой, 10-ый и 13-ый дни. На 13-ый день мышей забивают и вскрывают. У всех мышей вырезают целиком желудочно-кишечный тракт,который у мышей, доживших до окончания периода наблюдения, подвергают микроскопическому исследованию. Наблюдаемые клинические признаки во всех группах подобны тем, которые были отмечены в предыдущем испытании (испытание 1). Во всех группах наблюдается снижение веса тела. Наблюдаемые микроскопические изменения в кишечнике соответствуют изменениям,ожидаемым при применении противоракового агента. Во всех группах преобладают изменения в тонком кишечнике. Изменения в кишечнике менее значительны в группах, получавших раствор 9 г/л хлорида натрия пероральным путем,по сравнению с группой, в которой лечение осуществлялось только с СРТ-11. Напротив,частота и тяжесть изменений в кишечнике идентичны для групп 1-4, которые получали раствор 9 г/мл хлорида натрия перорально в разных режимах применения. Таким образом, пероральное применение изотонического раствора 9 г/л хлорида натрия один или два раза в день в разных режимах применения (от 5 до 20 мл/кг за прием) до и во время или только во время внутривенного применения СРТ-11 в течение 5 дней предупреждает появление гистопатологических изменений в кишечнике, обусловленных применением СРТ 11. 7 1.3) Испытание III. Оценка защитного эффекта изотонического раствора хлорида натрия, вводимого пероральным путем, на интестинальную и системную токсичность СРТ-11 и токсикокинетику СРТ-11 и ее главного метаболита SN-38. Самцов мышей CD1 в возрасте от 5 до 6 недель разделяют на 3 группы по 10 мышей. Животные двух групп получают внутривенную инъекцию (20 мл/кг со скоростью 0,5 мл/мин) водного раствора СРТ-11 с 9 г/л хлорида натрия при дозе 40 мг/кг (приблизительно 120 мг/м 2 поверхности тела) в течение 5 дней с 1-ого по 5 ый день. За этим периодом лечения следует трехдневный период без лечения (до 8-огодня). Мыши в одной из групп получают наряду с этим ежедневно в течение 5 дней (с 1-ого по 5 ый день) два раза в день с перерывом около 10 ч перорально по 10 мл/кг за прием водного раствора 9 г/л хлорида натрия, суточный объем 20 мл/кг,(группа CPT-11/NaCl). Животные из второй группы не получают перорально водный раствор 9 г/л хлорида натрия (группа СРТ-11). Мыши из третьей группы, которые не получали СРТ-11, получают водный раствор 9 г/л хлорида натрия два раза в день с перерывом приблизительно 10 ч перорально по 10 мл/кг за прием в течение 5 дней (с 1-ого по 5-ый день) (контрольная группа). 36 Дополнительных животных в группах СРТ-11 и CPT-11/NaCl используют для определения плазматических концентраций СРТ-11 и его главного метаболита SN38. Летальность и клинические признаки наблюдаются ежедневно. Вес тела измеряют в 1 ый, 3-ий, 6-ой и 8-ой дни. Забор плазмы для токсикокинетического анализа производят в 1 ый и 5-ый дни. На 8-ой день мышей забивают и вскрывают. Измеряют абсолютный и относительный веса тимуса, селезенки и семенников и вырезают у всех мышей целиком желудочнокишечный тракт, грудинный костный мозг, тимус, селезенку, семенники и их придатки с целью проведения микроскопического исследования. Максимальные плазматические концентрации (Сmах) и площади под кривой (AUC),измеренные для СРТ-11 и его главного метаболита SN-38 в 1-ый и 5-ый дни, одинаковы у животных групп СРТ-11 и CPT-11/NaCl. Летальность, обусловленная применением СРТ-11 и наблюдаемая на 8-ой день, наблюдается у 1 из 10 мышей в группе CPT-11/NaCl. Ослабление двигательной активности и затрудненное дыхание, обусловленные применением СРТ-11, наблюдаются после применения СРТ 11 в группах СРТ-11 и CPT-11/NaCl эпизодично,причем в группе CPT-11/NaCl в более тяжелой форме. Наблюдаемая потеря веса тела в процессе лечения с помощью СРТ-11 одинакова в группах СРТ-11 и CPT-11/NaCl и продолжает иметь место после окончания лечения. 8 Наблюдаемые в тимусе и кишечнике микроскопические изменения соответствуют изменениям, ожидаемым при применении противоракового агента. Микроскопические изменения,наблюдаемые в тимусе животных в группах СРТ-11 и CPT-11/NaCl, схожи и характеризуются лимфоидным истощением, связанным с уменьшением веса и размером этого органа. Микроскопические изменения в кишечнике преобладают в тонком кишечнике для групп СРТ-11 и CPT-11/NaCl и характеризуются,главным образом, утерей крипт и атрофией ворсинок. Изменения в кишечнике в группе CPT11/NaCl менее серьезны, чем в группе СРТ-11. Таким образом, пероральное введение изотонического раствора 9 г/л хлорида натрия по 10 шт/кг за прием дважды в день (20 мл/кг/сутки) в процессе внутривенного применения СРТ-11 в течение 5 дней не изменяет системного воздействия СРТ-11 и SN-38, не влияет на тимусную токсичность СРТ-11, но избирательно снижает тяжесть вызываемых СРТ-11 изменений в кишечнике. 1.4) Испытание IV. Оценка эффекта перорального введения раствора хлорида натрия на противоопухолевую активность вводимого внутривенно СРТ-11. Самок мышей С 3 Н/HeN с аденокарциномой молочной железы МА 16/С, имплантированной подкожно в 1-ый день, разделяют на две группы, и в каждой из них животные получают по одной внутривенной инъекции (20 мл/кг) водного раствора СРТ-11 с 5% глюкозы при дозе 14,6, 23,6, 38,0 или 61,3 мг/кг в течение 5 дней с 6-ого дня по 10-ый. Мыши в одной из групп получают наряду с этим ежедневно в течение 10 дней (с 1-ого по 10-ый день) два раза в день с перерывом приблизительно 10 ч перорально по 10 мл/кг за прием водного раствора 9 г/л хлорида натрия, суточный объем 20 мл/кг,(группа CPT-11/NaCl). Животные из второй группы не получают перорально водный раствор 9 г/л хлорида натрия (группа СРТ-11). Противоопухолевую активность СРТ-11 оценивают при максимальной нетоксичной дозе. Доза, приводящая к потере веса тела более 20% или частоте обусловленных применением СРТ-11 летальных случаев выше 20%, рассматривается как слишком токсичная. Оцененные параметры включают выраженное в % ингибирование роста опухоли (Т/С), задержку опухолевого роста (Т-С) и число убитых опухолевых клеток (Log tumor cell kill = T-C/3,32 х время удвоения опухоли). Значение Log tumor cell kill,равное 0,7, соответствует минимальной активности в то время, как значение выше 2,8 соответствует уровню повышенной активности. Максимальная нетоксичная доза СРТ-11 для животных группы СРТ-11 составляет 23,6 мг/кг/ сутки, что соответствует суммарной накопленной дозе 118 мг/кг; при этом максимальная потеря веса животных составляет 10% на 11-ый день, а значение Log cell kill равно 1,7. Для животных группы CPT-11/NaCl максимальная нетоксичная доза СРТ-11 составляет 38,0 мг/кг/ сутки, что соответствует суммарной накопленной дозе 190 мг/кг; при этом максимальная потеря веса составляет 14,1% на 12-ый день, а значение Log cell kill равно 2,3. Таким образом, пероральное введение изотонического раствора 9 г/л хлорида натрия по 10 мл/кг за прием дважды в день (20 мл/кг/сутки) в течение 5 дней до и в процессе внутривенного применения СРТ-11 в течение 5 дней не снижает противораковой активности СРТ-11. 2) Экспериментальное исследование на собаке. Оценка защитного эффекта вводимого перорально раствора хлорида натрия на интестинальную токсичность вводимого внутривенно СРТ-11. Шесть самок гончих в возрасте от 10 до 12 месяцев разделяют на две группы по 3 собаки в каждой, и в каждой из двух групп животные получают по одной внутривенной инъекции (5 мл/кг со скоростью 2 мл/мин) водного раствора СРТ 11 с 9 г/л хлорида натрия при дозе 20 мг/кг(приблизительно 400 мг/м 2 поверхности тела) на 6-ой день. Животные в одной из групп получают наряду с этим ежедневно в течение 7 дней (с 1-ого по 7-ой день) два раза в день с перерывом приблизительно 8 ч перорально по 10 мл/кг за прием водного раствора 9 г/л хлорида натрия,суточный объем 20 мл/кг, (группа CPT11/NaCl): начиная за 5 дней до и кончая на следующий день после применения СРТ-11. Животные второй группы не получают перорально водный раствор 9 г/л хлорида натрия (группа СРТ-11). После последнего применения 9 г/л хлорида натрия животные не получают ничего в течение 2 дней (до 9-го дня). Летальность и клинические признаки наблюдают ежедневно. Вес тела записывают в течение периода, предшествующего испытаниям, и в 5-ый и 9-ый дни. Животных забивают и вскрывают на 9-ый день. У всех животных взяты и подвергнуты микроскопическому анализу выборочные образцы тканей желудочнокишечного тракта. Эффекты, обусловленные применением СРТ-11 в течение периода лечения, включают в 10 себя слюноотделение, возбуждение, рвоты (во время или непосредственно после введения СРТ-11), поносы и небольшую потерю веса. Исследование толстого кишечника позволило выявить покраснения на слизистой оболочке,которые в группе СРТ-11 появлялись чаще, чем в группе CPT-11/NaCl. Наблюдаемые изменения(от умеренных до заметных в группе СРТ-11 и от минимальных до легких в группе CPT11/NaCl) возникают вследствие первичного изменения пролиферативного отдела и состоят в дегенерации слизистой оболочки. Таким образом, внутривенное введение единичной дозы СРТ-11 на собаках-самках в дозе 20 мг/кг вызывает гастроинтестинальную токсичность, совместимую с антимитотической активностью продукта. Пероральное введение изотонического раствора 9 г/л хлорида натрия по 10 мл/кг за прием дважды в день (20 мл/кг/ сутки) в течение 5 дней до и в день применения СРТ-11 предотвращает появление гистопатологических изменений, вызываемых СРТ-11. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Применение хлорида натрия для получения агента, предназначенного для уменьшения или устранения вторичных желудочнокишечных эффектов, обусловленных применением производных камптотецина, отличающееся тем, что указанный агент представляет собой водный раствор хлорида натрия и тем, что его вводят пероральным путем. 2. Применение по п.1, отличающееся тем,что концентрация раствора хлорида натрия составляет от 4 до 13 г/л. 3. Применение по п.2, отличающееся тем,что концентрация раствора хлорида натрия составляет 9 г/л. 4. Применение по одному из пп.2 и 3, отличающееся тем, что раствор хлорида натрия вводят в дозах от 5 до 10 мл/кг за один прием. 5. Применение по одному из пп.1-4, отличающееся тем, что раствор хлорида натрия вводят либо во время, либо до и во время применения производного камптотецина. 6. Применение по п.1, отличающееся тем,что производное камптотецина вводят путем инъекций или перорально.