Интерферон-индуцирующее средство для лечения острых респираторных вирусных инфекций (орви)

ИНТЕРФЕРОН-ИНДУЦИРУЮЩЕЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ (ОРВИ) Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и созданию лекарственных средств,обладающих интерфероногенным действием, и может быть использовано для лечения острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Предложено интерферон-индуцирующее средство для лечения острых респираторных вирусных инфекций, представляющее собой гидрохлорид 1[6-бром-1-метил-5-метокси-2-фенилтиометил-1-н-индол-3-ил]карбонил-4-бензилпиперазин. Подгородниченко Владимир Константинович, Цыб Анатолий Федорович, Розиев Рахимджан Ахметджанович, Гончарова Анна Яковлевна (RU) Базанов Ю.Б. (RU) Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и созданию лекарственных средств, обладающих интерфероногенным действием, и может быть использовано для лечения острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). ОРВИ является самым распространенным инфекционным заболеванием в развитых странах. Взрослый болеет ОРВИ не реже 2-3 раз в год, в дошкольном возрасте дети болеют ОРВИ 6-12 раз в год (Пискунов Г.З., Пискунов С.З. Клиническая ринология. - М.: 2006, с. 181). В России на ОРВИ, включая грипп, ежегодно приходится до 90% от всей регистрируемой инфекционной заболеваемости. По данным Минздравсоцразвития РФ в 2004 г. экономические потери от этой группы заболеваний составили 86% от всего ущерба, наносимого инфекционными болезнями. ОРВИ вызывается большим числом возбудителей, среди которых не менее 7 различных групп вирусов. Наиболее частыми возбудителями ОРВИ является вирус гриппа, парагриппа, аденовирусы, респираторно-синцитиальный вирус, риновирусы, реовирусы, пикорнавирусы. Против большинства возбудителей ОРВИ в настоящее время не разработаны химиопрепараты. Большое количество вирусных агентов, вызывающих ОРВИ, и достаточно высокая к ним восприимчивость способствуют возникновению смешанной инфекции. Поскольку дифференциальная диагностика вирусной инфекции хотя и возможна, но затруднена, для лечения ОРВИ рекомендуют использовать в первые часы заболевания препараты интерферона, которые эффективны в отношении всех вирусов-возбудителей ОРВИ, независимо от вида. Профилактическая эффективность интраназального применения интерферона достаточно убедительно доказана и подтверждена результатами метаанализа (Jefferson Т.О., Tyrrell D., Antivirals for the common cold. Thehttp://www.cochrane.org/reviews/en/pkl67000032810144047.html). Однако применение экзогенного интерферона с лечебной целью имеет низкую эффективность действия, возможно, вследствие низкой его концентрации в растворе (Пискунов Г.З., Пискунов С.З. Клиническая ринология. - М.: 2006, с. 218). Поскольку в патогенезе ОРВИ самым важным звеном являются изменения в месте входных ворот инфекции(слизистая оболочка носа), то вполне оправданно местное интраназальное применение препарата. Недостатком интраназально вводимых препаратов человеческого лейкоцитарного интерферона является высокая частота нежелательных реакций: кровянистые выделения из носа, гриппоподобные симптомы, сонливость, аллергические реакции и другие. Перспективным направлением в терапии больных гриппом является использование препаратов, которые стимулируют продукцию собственных эндогенных интерферонов, т.е. индукторов интерферонов. Применение индукторов интерферонов не требует многократного введения, они не обладают антигенностью, у них отсутствуют побочные эффекты, свойственные препаратам интерферонов (Малый В.П., Романцов М.Г., Сологуб Ю.В. Грипп. Пособие для врачей. - СанктПетербург-Харьков, 2007, с. 61). Кроме того, с помощью индукторов интерферонов можно добиться стимулирования образования собственных интерферонов в организме человека в таких концентрациях,которые обладают высокой противовирусной активностью. Авторами настоящего изобретения установлено, что соединение гидрохлорид 1-[6-бром-1-метил 5-метокси-2-фенилтиометил-1-н-индол-3-ил]карбонил-4-бензилпиперазин (далее препарат) обладает противовирусной активностью в отношении вирусов гриппа А. Указанный препарат имеет следующую структуру: Целью настоящего изобретения является расширение применимости препарата путем распространения его противовирусного действия на другие вирусы - возбудители ОРВИ. Поставленная цель достигается тем, что обнаруженная у препарата способность индуцировать интерфероныипозволяет его использовать для лечения ОРВИ независимо от вируса, вызвавшего данное заболевание. При этом имея ввиду, что вирус гриппа является наиболее частой причиной ОРВИ, в большинстве случаев заболевания препарат будет оказывать двойное лечебное действие: как химиотерапевтический препарат и как индуктор интерферона. В тех случаях, когда причиной ОРВИ будут другие вирусы, лечебный эффект будет достигаться за счет эндогеннообразующегося интерферона. Для доказательства интерферон-индуцирующей активности препарата были проведены эксперименты по определению уровней -, - и -интерферонов в крови мышей, которым вводили препарат в двух дозах. В качестве препарата сравнения был использован Арбидол, который, как было установлено ранее, обладает противовирусной и интерферон-индуцирующей активностью (патент 2033157; опубл. 20.04.1995. "Средство, обладающее интерферон-индуцирующей и иммуномоделирующей (иммуностимулирующей) активностью"). Определение различных типов интерферонов проведено с помощью метода ИФА. Пример 1. Определение -интерферона. Все эксперименты в данном исследовании выполнены на мышах-самцах F1(CBAC57BL)6 массой 22-24 г. Животные были разделены на 13 групп (12 опытных и 1 контрольную). В качестве контроля использованы интактные мыши. Препаратом сравнения служил Арбидол. Препарат изучали в двух дозах(90 и 180 мг/кг). На каждую точку наблюдения использовано по 10 мышей. Препараты, приготовленные на 1%-ном крахмальном геле, вводили однократно по 0,2 мл, внутрижелудочно. Уровень -интерферона в сыворотке крови изучали в сроки через 16, 24 и 48 ч после введения препаратов. Кровь забирали под нембуталовым наркозом (60 мг/кг) из сердца, полученные образцы крови оставляли на 2 ч при комнатной температуре для свертывания. Сыворотку крови отделяли центрифугированием, замораживали и хранили при -20 С вплоть до проведения иммуноферментной реакции. Для определения концентрации интерферона использован коммерческий набор реагентов производства фирмы "RD". Иммуноферментную реакцию проводили в пулированной сыворотке (две мыши/пул). Разведенный стандарт и испытуемые образцы вносили на планшеты в дубликатах. Оценка содержания -интерферона проводилась в соответствии с инструкцией фирмы-производителя набора. Использованный набор ИФА имел предел чувствительности 2 пг/мл. Показатели концентрации интерферона в сыворотке крови анализировали статистически: рассчитывали Мм. Различия между сравниваемыми группами оценивали с помощью t-критерия Стьюдента. Результаты исследования Как показало проведенное исследование, препарат не обладает -интерферон-индуцирующей активностью. Незначительные концентрации -интерферона, близкие к уровню минимально выявляемой концентрации в данной тест-системе, зафиксированы во все сроки исследования в тестируемых образцах сывороток от животных, получавших препарат в двух дозах (табл. 1, 2). Статистически значимых различий по концентрации -интерферона в этих группах не выявлено. Во всех остальных обследованных образцах сывороток (с введением препарата сравнения Арбидола и группы биоконтроля) уровень интерферона был ниже возможности их выявления. Концентрация -интерферона оставалась ниже предела чувствительности используемого набора ИФА (табл. 3, 4). Таблица 1 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг Таблица 2 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг Таблица 3 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 90 мг/кг Таблица 4 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 180 мг/кг В сыворотках интактных мышей -интерферон не определяется. Таким образом, на основании полученных результатов можно заключить, что препарат обладает крайне низкой -интерферон-индуцирующей способностью. Препарат сравнения Арбидол также не является индуктором -интерферона. Пример 2. Определение -интерферона. Условия эксперимента описаны в примере 1. Результаты исследования -интерферона в сыворотке мышей, получавших препарат. Результаты определения -интерферона в сыворотках мышей после введения им препарата и Арбидола в различные сроки после введения препарата приведены в табл. 5-8. Как показало проведенное исследование, препарат индуцирует образование -интерферона в количествах, сопоставимых с продукцией -интерферона препаратом сравнения Арбидолом. Таблица 5 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг Таблица 6 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг Таблица 7 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 90 мг/кг Таблица 8 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 180 мг/кг Таким образом, представленные результаты свидетельствуют о том, что препарат, введенный per os,индуцирует образование -интерферона в организме мышей. Эффект характеризуется некоторой дозной зависимостью. Пример 3. Определение -интерферона. Условия эксперимента описаны в примере 1. Результаты исследования -интерферона в сыворотках мышей, получавших препарат. Как свидетельствуют результаты, представленные в табл. 9-12, препарат является эффективным индуктором -интерферона, который по своей интерферон-индуцирующей активности сопоставим с активностью препарата сравнения Арбидолом. Таблица 9 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 90 мг/кг Таблица 10 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата в дозе 180 мг/кг Таблица 11 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 90 мг/кг Таблица 12 Концентрация -интерферона в сыворотке крови мышей в различные сроки после введения противовирусного препарата Арбидола в дозе 180 мг/кг Таким образом, результаты представленных экспериментов свидетельствуют о том, что препарат не индуцирует образование -интерферона, но является эффективным индуктором - и -интерферонов. По интерферон-индуцирующей способности препарат не уступает препарату сравнения Арбидолу. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Применение гидрохлорида 1-[6-бром-1-метил-5-метокси-2-фенилтиометил-1-н-индол-3 ил]карбонил-4-бензилпиперазина следующей структурной формулы для получения интерферониндуцирующего средства для лечения острых респираторных вирусных инфекций