1-дезокси-1-n-(метил-(2-акридон-9-он-10-ил-ацетат)-аммоний-d-глюцитола, обладающий пролонгированной интерфероногенной активностью в отношении всех типов интерферона

1 Изобретение относится к медицине, а именно, к биологически активным веществам,получаемым химическим путем, и касается нового производного 9 акриданонов, имеющего брутто формулу C22H28N2O8 и химическую структуру (I): и обладающего способностью к индукции в организме человека и животного интерферонов , и -типов в высоких концентрациях и, вследствие этого, проявляющего широкий спектр биологической активности. Известны соединения, относящиеся к классу акриданонов природного происхождения, а также соединения, модифицированные на их основе путем химического синтеза, проявляющие различные виды биологической активности (патент Японии 64-40426, кл. А 61 К 31/47, C 07D 219/06, 491/052 от 10.02.89, патент Японии 63-310826, кл. А 61 К 31/435, C 07D 219/06, 491/052 от 19.02.88, патент США 4244954, кл. А 61 К 31/47 от 13.01.78, патент ЕР 110298, кл. А 61 К 31/47 от 13.06.84). Ближайшим структурным аналогом заявляемого соединения является N-метил-N-/,Dглюкопиранозил/ аммония-2-/акридон-9-он-10 ил/ ацетат структуры (II) проявляющий различные виды биологической активности (патент РФ 2036198, кл. С 07 Н 5/06, C 07D 219/10 от 01.04.93). Проявление биологической активности указанных соединений связано со способностью их индуцировать выработку в организме человека собственного эндогенного интерферона. Известно, что вырабатываемый организмом интерферон различен по своей химической структуре и биологическому назначению и относится к ,и -типам. Определенные группы препаратов стимулируют синтез определенных антигенных типов интерферона. Так, известно,что соединения (II) из класса акриданонов обладают высокой активностью в отношении выработкии -интерферонов и практически не вырабатывают -интерферон (Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. М.,"Медицина", 1996 г., с. 71; Ершов Ф.И., Чижов И.П., Тозулахова Э.Б. Противовирусные средства. С.-Петербург, 1993 г., с. 104). Индукторами интерферона -типа являются вещества, относящиеся к классу двухспиральных РНК как природного (двухспиральные РНК, выделенные из вирусов, бактерий и дрожжей), так и синтетиче 000382 2 ского происхождения (полирибонуклеотиды). Индукторами интерферонатипа выступают Тклеточные митогены, такие как лектины, оксиданты, антилимфоцитарные сыворотки, иммуноглобулины и другие вещества. С другой стороны, разные типы интерферонов продуцируются разными клетками крови и органов. Так, продуцентами -интерферона считаются макрофаги и -лимфоциты, клетки миндалин, селезенки, костного мозга, лимфы человека. Основными продуцентами -типа интерферона являются клетки фибробластного и эпителиоидного типа, а -интерферон синтезируется Т-лимфоцитами при участии моноцитов и макрофагов, т.е. только иммунокомпетентными клетками. Известно, чтои -интерфероны обладают, в основном, высокой противовирусной активностью и слабым иммуномодулирующим действием, -интерферон, являясь иммунным интерфероном, наряду с противовирусной активностью сам оказывает выраженный модулирующий эффект на иммунокомпетентные клетки (макрофаги, Т и -лимфоциты), что приводит к значительному повышению гуморального и клеточного иммунитета макроорганизма, в результате чего восстанавливается или усиливается естественная защита организма от инфекции любой природы и локализации. Кроме того, интерферон играет важнейшую роль в регуляции аутоиммунных процессов в организме. Чем большее число звеньев иммунной системы активизирует индуктор (вещество), тем более выраженными иммуномодулирующими свойствами оно обладает, т.е. тем эффективнее его воздействие на организм и шире спектр биологической активности. Задачей настоящего изобретения является получение вещества, индуцирующего в организме синтез всех трех (, , ) типов интерферона, воздействующего одновременно на гуморальный и клеточный иммунитет, обладающего пролонгированным действием при низкой токсичности. Решение поставленной задачи достигается синтезом соединения (I) 1-дезокси-1-N-[-метил(2-акридон-9-он-10-ил-ацетат)]-аммоний-Dглюцитола структурной формулы: При проведении исследований заявителем эмпирическим путем было установлено в заявляемом соединении (I) наличие высокой интерфероногенной активности в отношении всех трех типов (, , ) интерферонов, в особенности иммунного -интерферона, в то время как соединение-прототип (II) обладает высокой ак 3 тивностью только в отношениии интерферонов. Аминоспирт, входящий в структурную формулу (I), имитирующий концевые участки полиглюкозаминов клеточной стенки бактерий,действуя на рецепторы иммунокомпетентных клеток, модулирует иммунокомпетентные клетки и вызывает синтез в них -интерферона. Пример 1. 19,52 г 1-дезокси-1-/метиламино/-D-глюцитола растворяют в 150 мл воды,прибавляют порциями при перемешивании 25,32 г 2-/акридон-9-он-10-ил/ уксусной кислоты. Смесь нагревают до 90 и перемешивают до полного растворения компонентов. Затем раствор охлаждают и фильтруют от механических примесей, замораживают при 40-45 и лиофилизируют до остаточной влажности 0.01%. Получают аморфный порошок желтого цвета, горького вкуса, без запаха. Физико-химические свойства соединения представлены в табл. 1. Мутагенным, терратогенным, эмбриотоксическим и аллергенным действием 1-дезокси 1-N-[-метил-(2-акридон-9-он-10-ил-ацетат)]аммоний-D-глюцитола не обладает. Изучение медико-биологических свойств 1-дезокси-1-N-[-метил-(2-акридон-9-он-10-илацетат)]-аммоний-D-глюцитола (I) проведено в эксперименте на животных в сравнении с прототипом - N-метил-N-/,D-глюкопиранозил/ аммония-2-/акридон-9-он-10-ил/ ацетатом (II). Пример A. Острая токсичность соединений(I) и (II) была изучена на линейных мышах линии СВА и линейных крысах линии Вистар. Препараты вводили внутримышечно и перорально в различных дозах от 3000 мг/кг и ниже с двухкратным интервалом. Срок наблюдения - 14 дней. Летальную дозу (ЛД 50) рассчитывали по методу Кербера. Сравнительные данные по острой токсичности представлены в табл. 2. Сопоставляя и анализируя полученные результаты по острой токсичности, полученные при исследовании двух видов лабораторных животных, можно сделать вывод, что заявляемое соединение, имеющее формулу (I), обладает в два раза меньшей токсичностью по отношению к исследуемым мышам и в 1,5 раза меньшей токсичностью по отношению к исследуемым крысам, чем соединение-прототип, имеющее формулу (II), при внутримышечном введении указанных соединений. При этом дозы по токсичности соединения(I) при пероральном введении были выше, чем соединения (II), что свидетельствует о незначительном всасывании соединения (I) из желудочно-кишечного тракта. Пример Б. Интерфероногенная активность. Интерфероногенную активность соединений (I) и (II) изучали на линейных мышах линии СВА массой 12-15 г. Заявляемое соединение, 000382 4 имеющее формулу (I), вводили однократно подкожно в дозе 200 мг/кг. Через определенные интервалы времени определяли титры интерферона в крови стандартным методом на гомологичных клетках L929, выращенных в 96 луночных планшетах в термостате с СО 2. Тест-вирусом служил вирус энцефаломиокардита мышей. Одновременно определяли титры / и интерферонов в ME 1 мл у соединения (I) в сравнении со структурным аналогом (II). Сравнительные данные по интерфероногенезу представлены в табл. 3. Как видно из табл. 3, соединение (I) вызывает индукцию всех трех типов / и интерферонов у мышей с достижением максимальной их величины от 8 до 18 ч и последующим снижением к 48 ч, т.е. заявляемое соединение (I) обладает высокой активностью и пролонгированным действием в отношении всех трех типов (, , ) интерферонов. При этом доля иммунного -интерферона составляет 2530% от общего количества интерферона, индуцируемого в организме под действием соединения (I). В то же время соединение-прототип,имеющее формулу (II), вызывает индукцию преимущественно -интерферона (95-99%) с достижением максимальной его величины к 4 ч и последующим снижением к 24 ч. Таким образом, общебиологическое действие на организм, определяемое как суммарным количеством выработанного интерферона (,и -типов), так и долей "иммунного" интерферона, у соединения (I) в 4,5-5 раз выше,чем у соединения-прототипа (II). Кроме того, у соединения (I) в 2 раза выше продолжительность индукции интерферона, чем у соединения-прототипа (II). Это обусловлено тем, что индуцируемый интерферон через каскад цитокиновых реакций вызывает дополнительную индукциюиинтерферонов, что обеспечивает усиление иммунного ответа и более высокий лечебный эффект(Грачева Л.А. Цитокины в онкогематологии, М.,"Алтус", 1996 г., с. 29-31). Таким образом, заявляемое соединение является модулятором гуморального и клеточного звена иммунной системы, проявляет низкую токсичность и оказывает пролонгированное действие на индукцию интерферона, что обусловлено особенностями структурной формулы заявляемого соединения. Таблица 1 Данные анализа Аморфный порошок желтого цвета 127-130 (с разложением) Хорошо растворимо в воде, диметилформамиде, диметилсульфоскиде. Мало растворимо в низших спиртах аустонитриле,нерастворимо в бензоле, эфире, ацетоне. 35,73; 50,622; 51,671; 63,253; 69,17; 70,851; 71,139; 72,094; 116,103; 120,970; 123,151; 127,347; 133,931; 174,782; 180,427 4482,4662 Показатель Внешний вид Температура плавления С Растворимость ЯМР (С 13) Спектр Спектр флюоресценции, нм Элементный анализ % Путь введения перорально внутримышечно перорально внутримышечно Мыши линии СВА Крысы линии Вистар ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Соединение класса акриданонов, а именно 1-дезокси-1-N-[-метил-(2-акридон-9-он-10-илацетат)]-аммоний-D-глюцитола структурной формулы: обладающий пролонгированной интерфероногенной активностью в отношении эндогенного интерферона , , -типов.