Фраксиностерин – 24β-этилхолеста-20-карбокси-6(7),8(9)-диен 3β-ола и его производное

Изобретение относится к новому химическому соединению стерино-стероидного ряда, а именно к фитостеринам и их производным, обладающим высокой биологической активностью. Изобретение предназначено для использования при создании новых фармацевтических препаратов. Техническим эффектом заявляемого изобретения является расширение сырьевой базы для удовлетворения возрастающей потребности в получении стеринов. Керимли Эльвин Гаджи оглы,Серкеров Сираджеддин Вели оглы,Керимов Юсиф Балакерим оглы,Сулейманов Тагир Аббасели оглы(71)(73) Заявитель и патентовладелец: КЕРИМЛИ ЭЛЬВИН ГАДЖИ ОГЛЫ Изобретение относится к новому химическому соединению стерино-стероидного ряда, а именно к фитостеринам и их производным, обладающим высокой биологической активностью. Изобретение предназначено для использования при создании новых фармацевтических препаратов. Современный период развития медицины и фармации характеризуется интенсивным использованием лекарственных средств растительного происхождения. В связи с этим одной из важных и перспективных проблем современной фармации является изыскание новых растительных источников биологически активных веществ, их выявление и создание на их основе эффективных лекарственных препаратов. Известно, что стерины присутствуют практически во всех тканях животных и растений и являются наиболее распространенными представителями стероидов в природе, при этом для каждого вида растений, в которых преобладают стерины С 28-С 29, характерен свой набор разнообразия стеринов. Наиболее близким к заявляемому стерину - фраксиностерину можно отнести стерины, выделенные из представителей бобовых. Задача изобретения состоит в выявлении нового индивидуального стерина и его производного из плодов Ясеня (Fraxinus excelsior L.). Сущность изобретения состоит в выделении индивидуального стерина - фраксиностерина из плодов Ясеня (Fraxinus excelsior L.), характеризующегося следующей C29H46O3 структурной формулой: Для анализа и идентификации выделенного стерина из плодов ясеня были использованы хромотографические и спектральные методы исследования. В ИК-спектре исследуемого вещества были найдены полосы поглощения гидроксильной группы (3432 см-1), карбонильной группы (1688 см-1) и двойных связей (1640 см-1). В ИК-спектре исследуемого вещества отсутствует интенсивная полоса при 892 см-1, указывающая на присутствие в молекуле метиленовой двойной связи, найденная в ИК-спектрах 3-ацетокси-24-метилхолест 20(21)-ена, эуканбина, артабростерина В и др. В спектре ЯМР 1 Н исследуемого соединения в области метильных групп (0.80-1.30 м.д) найдены перекрывающиеся сигналы, принадлежащие пяти метильным группам, в том числе двум ангулярным,одному этильному и двум метилам изопропиловой группы. Присутствие в молекуле пяти метильных групп подтверждают данные ЯМР 13 С-спектра. В спектре ЯМР 13 С исследуемого соединения, снятом с полным подавлением спин-спинового взаимодействия с протонами, обнаруживаются 29 синглетных сигналов, соответствующих числу атомов углерода в элементном составе соединения. Сопоставляя полученные данные с известными, можно заключить, что заявляемое вещество является новым и ему предложено название фраксиностерин. В спектре ЯМР 13C Dept 135 фраксиностерина проявляются 24 сигнала протонированных атомов углерода, в том числе пять метильных (15.50; 15.62; 16.50; 17.25 и 17.55 м.д.), десять метиленовых (18.00; 23.00; 24.00; 27.50; 28.00; 32.98; 34.00; 37.00; 38.00 и 46.00 м.д.) и девять метановых (28.50; 38.97; 41.16; 47.61; 52.74; 55.35;77,34; 122.02 и 125.11 м.д.). Сигналы непротонированных атомов углеродов, не найденные в спектре Dept 135, в спектре ЯМР 13 С обнаруживаются при 24.50 и 2.00 м.д. (2-С-); 138.00 и 144.20 м.д. (2 С=); 178.00 м.д. (-С=О). При установлении структурной формулы фраксиностерина было предположено, что местоположение гидроксильной группы - СООН в молекуле фраксиностерина расположено при С-20. При любом другом положении этой группы число сигналов, характеризующих метильные группы, соответствовало бы шести, а не пяти. Аналогичным образом изменяется число метиленовых, метановых или же непротонированных атомов углерода. Следовательно, при наличии в основе фраксиностерина углеродного скелета -ситостерина, карбоксильная группа может находиться только при С-20. Это подтверждается и значением химических сдвигов атомов углерода, находящихся в вицинальном (С 20-Н) и аллильном положении к -СООН группе. Сигналы С-20 и С-19 атомов углерода претерпевают парамагнитный сдвиг. Молекула фраксиностерина содержит две двойные связи, одна из которых является этиленовой и находится при С 6-С 7, а вторая - четырехзамещенной и находится при C8-C9. Это подтверждается сигналами,полученными на ЯМР 13 С: 122.01 и 125.11 м.д. (-СН=) и 138.00 и 144.20 м.д. (-С=) и ЯМР 13C Dept 135 122.02 и 125.11 м.д. (-СН=). Характер ИК интенсивной полосы 1688 см-1 позволяет определить однопротонный сигнал при 11.85 м.д., принадлежащий углероду -СООН группы. Гидроксильная группа фракциностерина вторичная и имеет традиционное для стериоориентации (3-ол) положение, что подтверждено данными ЯМР 1 Н (4.20 м.д.) и ЯМР 13 С (77.34 м.д.) спектров соединения. Присутствие в молекуле фракциностерина гидроксильной группы подтверждено ацетилированием, при этом получено новое индиви-1 024619 дуальное вещество - моноацетилированное производное состава С 31 Н 48 О 4. Следовательно, заявляемое вещество - фраксиностерин, формулы С 29 Н 46 О 3 имеет номенклатурное название 24-этилхолеста-20-карбокси-6(7),8(9)-диен 3-ола и строение является новым и оно может быть признано изобретением. Сущность изобретения также состоит в ацетилированном производном фраксиностерина, C31H48O4,структурной формулы Для анализа и идентификации полученного ацетилированного производного фраксиностерина были использованы хромотографические и спектральные методы исследования. ИК-спектр ацетилпроизводного имеет полосы поглощения 1732 см-1 (СО-, общая полоса ацетильной и карбоксильной групп) и 1691 см-1 (двойные связи). Полоса ОН-группы в спектре отсутствует. В ЯМР 1 Н спектре ацетилпроизводного проявляется дополнительный синглет метальной группы при 2.00 м.д. Образование моноацетилпроизводного также подтверждает спектр ЯМР 13 С Dept 135. В этом спектре наряду с сигналами метиленовых, метиловых и др. атомов углерода обнаруживаются сигналы шести метильных групп (15.53; 15.67; 17.05; 17.22; 17.75 и 21.36 м.д.), десять метиленовых (18.30; 23.00; 24.00; 28.00; 29.99; 33.00; 34.00; 37.00; 38.00 и 46.00 м.д.) и девять метановых (28.50; 38.71. 41.14; 47.60; 52.73; 55.34; 80,00; 121.86 и 124.93 м.д.). Сигналы непротонированных атомов углеродов, не найденные в спектре Dept 135, в спектре ЯМР 13 С обнаруживаются при 24.60; 26.00; 138.00; 144.00; 170.00 и 178.00 м.д. Следовательно, заявляемое вещество - ацетилпроизводное фраксиностерина, формулы С 31 Н 48 О 4 и структурного строения является новым и оно может быть признано изобретением. Способ получения фраксиностерина - 24-этилхолеста-20-карбокси-6(7),8(9)-диен 3-ола 350.0 г мелкоизмельченных, высушенных плодов Fraxinus excelsior L. трижды экстрагировали (каждый раз 24 ч) при комнатной температуре 2-л гексаном. Гексан отфильтровывали и отгоняли. Затем растительный материал в аналогичных условиях экстрагировали 70%-ным водным спиртом. Отфильтровали, а спирт отгоняли. Остаток неоднократно экстрагировали, взбалтывая в делительной воронке с 1-л гексаном. Органическую часть отделяли, водную часть аналогичным образом обрабатывали хлороформом. Хлороформ отделяли и высушивали безводным сернокислым натрием, отфильтровывали и отгоняли. Остаток хроматографировали на колонке (h=30, d=3,5 см), заполненной нейтральной окисью алюминия (III-IV ст. активности по Брокману). Элюировали смесью этилацетата и спирта в соотношении 7:1. Объем каждой фракции 50 мл. Из 2-ой фракции выделили индивидуальное кристаллическое вещество в количестве состава 2 г белого, жлтого цвета состава С 29 Н 46 О 3 с т.пл. 232-234 С. Способ получения моноацетилированного производного фраксиностерина 0,1 г фраксиностерина растворяют в пиридине, к смеси добавляют уксусный ангидрид. Нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 6 ч. К раствору добавляют 50 мл дистиллированной воды. При настаивании выпадает белый порошкообразный осадок. Осадок отфильтровывают, про-2 024619 мывают водой до нейтральной реакции и перекристаллизовывают из водно-спиртовой смеси, получают 0.08 г белого серый цвета, без запаха, моноацетилпроизводного кристаллического вещества с т.пл. 198200 С. Новые индивидуальные химические вещества - фраксиностерин и его моноацетилпроизводное, согласно изобретению получены с использованием известных технологических приемов из нового вида сырья. Они могут успешно применяться в фармации для получения стероидов и других фармацевтических препаратов. Техническим эффектом заявляемого изобретения является расширение сырьевой базы для удовлетворения возрастающей потребности в получении стеринов. Литература 1. http://www.xumuk.ru/encyklopedia/2/4215.html 2. С.В.Серкеров, С.И.Ибрагимов "Химия природных соединений", 2014, с.41. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Фраксиностерин - 24-этилхолеста-20-карбокси-6(7),89)-диен 3-ола, (С 29 Н 46 О 3), структурной формулы 2. Моноацетилированное производное фраксиностерина (С 31 Н 48 О 4) по п.1 структурной формулы