Антитела к cd154, их фрагменты и способы применения антител и фрагментов

АНТИТЕЛА К CD154, ИХ ФРАГМЕНТЫ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИТЕЛ И ФРАГМЕНТОВ(71)(73) Заявитель и патентовладелец: БАЙОДЖЕН АЙДЕК МА ИНК. (US) Данное изобретение относится к антителам или их фрагментам, содержащим по меньшей мере одну аминокислотную замену в сравнении с антителом 5 с 8 дикого типа. Данное изобретение относится также к композициям и применению антител по изобретению или их фрагментов для лечения у субъекта заболеваний или нарушений, ассоциированных с CD154. 014226 Перекрестная ссылка на родственные заявки Данная заявка притязает на приоритет предварительной заявки США с регистрационным номером 60/591337, поданной 26 июля 2004 г., которая включена в настоящее описание в качестве ссылки в ее полном виде. Область техники, к которой относится изобретение Данное изобретение относится, частично, к анти-CD154-антителам и их фрагментам, которые содержат по меньшей мере одну замененную аминокислоту в вариабельной области либо легкой, либо тяжелой цепи, либо в обоих, и к композициям, содержащим такие антитела и их фрагменты, и к способам применения этих антител или их фрагментов. Уровень техники Генерирование гуморального и клеточно-опосредованного иммунитета управляется взаимодействием активированных хелперных Т-клеток с антигенпредставляющими клетками (ARC) и эффекторными Т-клетками. Активация хелперных Т-клеток не только зависит от взаимодействия антигенспецифического Т-клеточного рецептора (TCR) с его родственный пептид-МНС-лигандом, но также требует координированного связывания и активации ряда молекул клеточной адгезии и костимулирующих молекул (Salazar-Fontana et al., Curr. Opin. Hemat., 2001, 8, 5). Критической костимулирующей молекулой является CD154 (также известная как CD40-лиганд,CD40L, gp39, T-BAM, активирующая Т-клетки молекула, TRAP), трансмембранный белок типа II, который экспрессируется зависимым от активации, ограниченным по времени образом на поверхности CD4+ Т-клеток. CD154 экспрессируется также после активации на субпопуляции CD8+ Т-клеток, базофилах,тучных клетках, эозинофилах, природных клетках-киллерах, В-клетках, макрофагах, дендритных клетках и тромбоцитах. Контррецептор CD154, CD40 является мембранным белком типа I, который конститутивно и широко экспрессируется на поверхности многих типов клеток, в том числе АРС (Foy et al., Ann.Rev. Immunol., 1996, 14, 591). Передача сигнала через CD40 молекулой CD154 инициирует каскад событий, которые приводят к активации CD40-рецепторнесущих клеток и оптимальному праймированию CD4+ Т-клеток. Более конкретно, родственное взаимодействие между CD154 и CD40 стимулирует дифференцировку В-клеток в антителосекретирующие клетки и В-клетки иммунологической памяти (Burkly, In Adv. Exp. Med. Bio.,Vol. 489, D.M. Monroe, U. Hedner, M.R. Hoffman, С Negrier, G.F. Savidge and G.C.E. White, eds., KluwerAcademic/Plenum Publishers, 2001, p. 135). Дополнительно взаимодействие CD154-CD40 стимулирует клеточно-опосредованный иммунитет через активацию макрофагов и дендритных клеток и генерирование природных клеток-киллеров и цитотоксических Т-лимфоцитов (Burkly, выше). Было показано, что взаимодействие CD40-CD154 является важным в нескольких экспериментально индуцированных аутоиммунных заболеваниях, таких как индуцированный коллагеном артрит, экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЕАЕ), оофорит, колит, индуцированный лекарственным средством люпус-нефрит (волчаночный нефрит). Конкретно было показано, что индукция заболевания во всех этих моделях может быть блокирована антагонистами CD154 в момент введения антигена(Burkly, выше). Блокаду заболевания с использованием антагонистов против CD154 наблюдали также в животныхмоделях спонтанного аутоиммунного заболевания, в том числе инсулинзависимого диабета и волчаночного нефрита, а также в заболевании трансплантат против хозяина, в моделях трансплантата, фиброза легких и атеросклероза (Burkly, выше). Хотя было показано, что гликозилированные анти-CD154-антитела применимы для профилактики и лечения нескольких связанных с иммунной реакцией заболеваний, у некоторых субъектов использующие их терапии иногда осложняются тромбоэмболической активностью. Хотя механизм этого побочного эффекта неизвестен, он мог бы включать связывание анти-CD154-антитела или его агрегатов, FcRIIa иCD154, на тромбоцитах, что приводит к неуместной активации тромбоцитов. Связывание с другими FcYрецепторами и комплементом также может потенциировать это действие. Таким образом, формы антиCD154-антител, которые не связываются с эффекторными рецепторами, могут быть более безопасными и/или более эффективными для терапевтического применения. Механизм, при помощи которого анти-CD154-антитела ингибируют иммунную функцию, может быть более сложным, чем простое связывание с CD154 для блокирования взаимодействий с CD40, и,фактически, может включать воздействия эффекторными путями. Например, связывание антителоантиген может индуцировать делецию активированных Т-клеток посредством связывания Fc-домена сFcY-рецепторами или компонентами комплемента. Альтернативно, связывание антитела с CD154 может быть усилено образованием каркаса клеточной поверхности этого антитела на несущих FcY-рецептор клетках. Кроме того, доступ этого антитела к его месту действия может стимулироваться взаимодействиями связывания FcY-рецептора. Центральная роль CD154 в регуляции функции как гуморальной, так клеточно-опосредованной иммунной реакции пробудила большой интерес к применению ингибиторов этого пути для терапевтической иммуномодуляции (патент США 5474771). Было показано, что анти-CD154-антитела, как таковые, могут быть полезными в большом разнообразии моделей иммунного ответа на терапевтические-1 014226 белки или генотерапию, аллергены, аутоиммунитет и трансплантацию (патент США 5474771; Burlky,выше). Таким образом, существует потребность в антителах, которые не вызывают сильную иммунную реакцию, но все еще сильно связываются с их антигенами, и способах идентификации таких антител, в частности улучшенных анти-CD154-антител. Сущность изобретения Данное изобретение обеспечивает пептиды, содержащие аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID NO: 3, или ее фрагмент, где аминокислота в каждом из положений 24, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60, 93, 95, 96, 97, 98, 100 и 101 независимо является любой встречающейся в природе аминокислотой или любой не встречающейся в природе аминокислотой, где пептид не состоит из SEQ ID NO: 1 и где фрагмент содержит по меньшей мере одно из положений 24, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60, 93, 95, 96, 97, 98, 100 и 101, и при образовании комплекса с тяжелой цепью 5 с 8 дикого типа пептид или его фрагмент может связываться сCD154. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 24 выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp, Glu и Lys; аминокислота в положении 26 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Thr,Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp и Glu; аминокислота в положении 27 выбрана из группы, состоящей из Gln, Asn, Cys, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg и Lys; аминокислота в положении 28 выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala,Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 30 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg и Lys; аминокислота в положении 31 выбрана из группы,состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Arg, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Arg и Lys; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe,Thr, Trp, Tyr, Arg, Ala, Ile, Leu и Lys; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей изPro, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp и Glu; и аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Ala, He, Leu, Pro, Val,Asp и Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 выбрана из группы, состоящей из Ser и Asp; аминокислота в положении 27 выбрана из группы, состоящей из Gln и Glu; аминокислота в положении 28 выбрана из группы, состоящей из Arg и Glu; аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, His, Asn, Thr, Val и Trp; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Phe, Ile, Leu, Met и Trp; аминокислота в положении 33 выбрана из группы,состоящей из Thr, Ala, Phe, Met, Val, Trp, Asp, Arg, Tyr и Gln; аминокислота в положении 34 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Ala, Asp, Glu, Phe, Ile, Lys, Leu, Met, Arg, Val и Trp; аминокислота в положении 36 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Ala, Phe, Leu и Trp; аминокислота в положении 54 выбрана из группы, состоящей из Tyr и Glu; аминокислота в положении 96 выбрана из группы, состоящей из Trp,Asp, Glu, His, Arg, Ser и Thr; и аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Ile, Ala,Phe, His, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asp и Glu; аминокислота в положении 27 выбрана из группы, состоящей из Gln, Asp и Glu; аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, Thr и Tyr; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Val и Trp;-2 014226 аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly, Ser и Tyr; аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Ile, Asn, Cys, Gln, Gly, Ser, Thr и Tyr; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35,положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 28 является Glu; аминокислота в положении 31 является Val; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Asp и Arg; и аминокислота в положении 54 является Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из His и Asn; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Trp и Phe; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Trp, Tyr и Gln; аминокислота в положении 36 выбрана из группы, состоящей из Leu и Trp; аминокислота в положении 96 является His; и аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Phe и Gln. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 выбрана из группы, состоящей из Ser и Asp; аминокислота в положении 27 выбрана из группы, состоящей из Gln и Glu; аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser и Asn; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Ser и Phe; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Thr,Gln и Tyr; аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Ile и Gln; аминокислота в положении 24 и в положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO:3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His, аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 является Asn; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 и положении 31 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 32 является Phe; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении-3 014226 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 и положении 33 является Gln; аминокислота в положении 98 является Не; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 являетсяGln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления, пептид содержит SEQ ID NO:3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 33 является Tyr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 и положении 98 является Gln; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 являетсяGln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 является Asn; аминокислота в положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 является Ser; аминокислота в положении 32 является Phe; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Не; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Gln; аминокислота в положении 98 является Не; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,-4 014226 положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Tyr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Gln; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 и положении 36 является Trp и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 и положении 33 является Trp и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 32, положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 31 является Val и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 33 является Asp и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34 и положении 36 является Tyr; аминокислота-5 014226 в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 54, положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 являетсяTyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp и аминокислота в положении 100 является Pro. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 33 и положении 96 является Trp, аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. Данное изобретение обеспечивает также пептиды, которые содержат аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID NO: 6, или ее фрагмент, где аминокислота в каждом из положений 28, 30, 31, 32, 33, 35, 50, 52, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100,101, 102, 103, 104, 105, 106 и 107 независимо является любой встречающейся в природе аминокислотой или любой не встречающейся в природе аминокислотой, где пептид не состоит из SEQ ID NO: 4 и где фрагмент содержит по меньшей мере одно из положений 28, 30, 31, 32, 33, 35, 50, 52, 53, 54, 55, 57, 58,59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106 и 107, и при образовании комплекса с легкой цепью 5 с 8 дикого типа пептид или его фрагмент может связываться с CD154. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 выбрана из группы, состоящей из Ile, Asp, Glu, Arg, Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr; аминокислота в положении 30 выбрана из группы, состоящей из Thr, Asp, Glu, Arg, Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser,Thr, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Arg,His, Lys, Gln и Trp; аминокислота в положении 32 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asp, Glu, Arg,Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Ala, Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asp, Glu, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Ala, Ile, Leu,Pro и Val; аминокислота в положении 35 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asn, Cys, Gln, Gly, His,Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Asp и Glu; аминокислота в положении 50 выбрана из группы, состоящей из Glu иAsp; аминокислота в положении 52 выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe,Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Ala, Leu, Val и Lys; аминокислота в положении 53 выбрана из группы, состоящей из Pro, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp и Glu; аминокислота в положении 54 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Arg, Lys и Glu; аминокислота в положении 55 выбрана из группы, состоящей из Asn, Glu, Lys, Gln, Ser, Thr, Met и Val; аминокислота в положении 57 выбрана из группы, состоящей из Asp, Glu, Phe и Leu; аминокислота в положении 58 выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu,Pro и Val; аминокислота в положении 59 выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met,Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp и Glu; аминокислота в положении 60 выбрана из группы, состоящей из Phe, Asp, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr, Glu, Arg, Lys, Ala, Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 61 выбрана из группы, состоящей из Asn, Asp и Glu; аминокислота в положении 62 выбрана из группы, состоящей из Glu и Asp; аминокислота в положении 63 выбрана из группы, состоящей из Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Glu, Asp, Ala, Ile, Leu,Pro и Val; аминокислота в положении 64 выбрана из группы, состоящей из Phe, Asn, Cys, Gln, Gly, His,Met, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 65 выбрана из группы, состоящей из Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro и Val; аминокислота в положении 66 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asp и Glu; аминокислота в положении 99 выбрана из группы, состоящей из Ser, Asp, Glu и Ala; аминокислота в положении 100 выбрана из группы, состоящей из Asp и Glu; аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Gly, Phe и Leu; аминокислота в положении 102 выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr и Lys; аминокислота в положении 103 выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Lys, Arg и Val; аминокислота в положении 104 выбрана из группы, состоящей из Asp и Glu; аминокислота в положении 105 выбрана из группы, состоящей из Met, Asp, Glu, Arg, His, Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr; аминокислота в положении 106 выбрана из группы, состоящей из Asp и Glu; и аминокислота в положении 107 вы-6 014226 брана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu,Pro и Val. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 выбрана из группы, состоящей из Ile, His, Asn, Gln, Ser, Thr и Glu; аминокислота в положении 30 выбрана из группы, состоящей изLeu; аминокислота в положении 59 выбрана из группы, состоящей из Asn, Ala, Phe, Leu, Met, Pro, Val,Trp, Asp и Tyr; аминокислота в положении 99 выбрана из группы, состоящей из Ser и Ala; аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Gly, Phe и Leu; и аминокислота в положении 103 выбрана из группы, состоящей из Asn, Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Met, Arg, Ser, Thr, Val и Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 и положении 54 независимо выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Val, Trp, Asn, Cys, Gln, Gly, Ser, Thr иThr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Trp и Gln; аминокислота в положении 54 выбрана из группы, состоящей из Ser, Phe и Gln; аминокислота в положении 57 выбрана из группы, состоящей из Asp, Leu и Phe; аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Gly, Leu и Phe; аминокислота в положении 103 выбрана из группы, состоящей из Asn и Tyr; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 являетсяTyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 является Glu; аминокислота в положении 33 является Phe; аминокислота в положении 54 является Thr; и аминокислота в положении 59 выбрана из группы, состоящей из Asp и Leu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 30 выбрана из группы, состоящей из His и Arg; аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей Gln и Trp; аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из из Trp, Val и Pro; аминокислота в положении 52 выбрана из группы, состоящей из Met и Trp; аминокислота в положении 54 выбрана из группы, состоящей из Asn, Phe и Gln; аминокислота в положении 55 выбрана из группы, состоящей из Met, Lys и Val; аминокислота в положении 57 выбрана из группы, состоящей из Phe и Leu; аминокислота в положении 59 выбрана из группы, состоящей из Phe и Tyr; аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Phe и Leu; и аминокислота в положении 103 выбрана из группы, состоящей из His и Tyr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Trp; аминокислота в положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в поло-7 014226 жении 31 является Gln; аминокислота в положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Ser; аминокислота в положении 54 является Phe; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Ser; аминокислота в положении 54 является Gln; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Phe; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Leu; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Phe; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является-8 014226 В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Leu; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Tyr; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в полокении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 33 является Trp; и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57,положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 являетсяMet. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 33, положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; и аминокислота в положении 105 являетсяMet. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота вMet. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 59 является Leu; и аминокислота в положении 105 является Met. Данное изобретение относится также к композициям, содержащим любой из описанных здесь пептидов. Данное изобретение относится также к молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим любой из описанных здесь пептидов. Данное изобретение относится также к векторам, содержащим любую из описанных здесь молекул нуклеиновых кислот. Данное изобретение относится также к композициям, содержащим любую из описанных здесь молекул нуклеиновых кислот или любой из описанных здесь векторов. Данное изобретение относится также к клеткам-хозяевам, содержащим любую из описанных здесь молекул нуклеиновых кислот или любой из описанных здесь векторов. Данное изобретение относится также к антителам или их фрагментам, содержащим любой из описанных здесь пептидов, где эти антитела или их фрагменты могут связываться с CD154 человека. В некоторых вариантах осуществления фрагмент антитела выбран из группы, состоящей из одноцепочечного антитела (scFv), F(ab')2-фрагмента, Fab-фрагмента и Fd-фрагмента. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент помечены детектируемым маркером, таким как маркер, выбранный из группы, состоящей из радиоактивного изотопа, фермента, флуорохрома, коллоидного золота, красителя и биотина. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент конъюгированы с терапевтическим агентом, таким как терапевтический агент, выбранный из группы, состоящей из радиоизотопа, токсина, токсоида и химиотерапевтического агента, или конъюгированы с гранулой. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит по меньшей мере один высокомолекулярный полимер, такой как полимер, выбранный из группы, состоящей из полиэтиленимина и полилизина. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержат по меньшей мере одну аминокислоту, которая выбрана из группы, состоящей из ПЭГилированной и гликозилированной аминокислоты. Данное изобретение относится также к композициям, содержащим любые из описанных здесь антител или их фрагментов. Данное изобретение относится также к наборам, содержащим любые из описанных здесь антител или их фрагментов. Данное изобретение относится также к способам лечения или профилактики CD154-связанного заболевания или нарушения человека, предусматривающим введение человеку терапевтически или профилактически эффективного количества антитела или его фрагмента по любому из пп. формулы 55-77 или композиции по п.53, так что CD154-связанное заболевание или нарушение человека ослабляется или предотвращается. В некоторых вариантах осуществления заболеванием или нарушением человека является воспаление, такое как заболевание или нарушение, выбранное из группы, состоящей из воспаления, связанного с артритом, контактным дерматитом, гипер-IgE-синдромом, воспалительным заболеванием кишечника,аллергической астмой и идиопатическим воспалительным заболеванием. В некоторых вариантах осуществления артрит выбран из группы, состоящей из ревматоидного артрита, неревматоидного воспалительного артрита, артрита, связанного с болезнью Лайма, и воспалительного остеоартрита. В некоторых вариантах осуществления идиопатическое воспалительное заболевание выбрано из группы, состоящей из псориаза и системной красной волчанки.- 10014226 В некоторых вариантах осуществления заболевание или нарушение выбрано из группы, состоящей из тяжелой псевдопаралитической миастении, болезни Грейвса, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, гемолитической анемии, сахарного диабета, болезни Крона, рассеянного склероза и индуцированных лекарственными средствами аутоиммунных заболеваний. В некоторых вариантах осуществления нарушением является отторжение субъектом трансплантированного органа, такого как трансплантированный орган, выбранный из группы, состоящей из трансплантированных сердца, почки, печени, кожи, панкреатических островковых клеток и костного мозга. В некоторых вариантах осуществления нарушение выбрано из группы, состоящей из реакции трансплантат против хозяина, аллергических реакций, аутоиммунной реакции и фиброза у субъекта, такого как фиброз легких или фибротическое заболевание. В некоторых вариантах осуществления легочный фиброз выбран из группы, состоящей из фиброза легких (пневмофиброза), вторичного относительно респираторного дистресс-синдрома взрослых людей,индуцированного лекарственным средством фиброза легких, идиопатического фиброза легких и гиперчувствительного пневмонита; а фибротическое заболевание выбрано из группы, состоящей из гепатита С, гепатита В, цирроза, цирроза печени, вторичного относительно токсическопо повреждения, цирроза печени, вторичного относительно индуцированного лекарственными средствами заболевания, цирроза печени, вторичного относительно вирусной инфекции, и цирроза печени, вторичного относительно аутоиммунного заболевания. В некоторых вариантах осуществления аутоиммунная реакция выбрана из группы, состоящей из аутоиммунной реакции, происходящей из синдрома Рейтера, спондилоартрита, болезни Лайма, ВИЧинфекции, сифилиса и туберкулеза. В некоторых вариантах осуществления заболеванием или нарушением является желудочнокишечное заболевание, такое как заболевание, выбранное из группы, состоящей из нарушения моторики пищевода, воспалительного заболевания кишечника и склеродермии; или сосудистое заболевание, где это сосудистое заболевание выбрано из группы, состоящей из атеросклероза и реперфузионного повреждения. В некоторых вариантах осуществления этим заболеванием или нарушением является Т-клеточный рак, такой как рак, выбранный из группы, состоящей из Т-клеточного лейкоза и Т-клеточной лимфомы. Данное изобретение относится также к пептидам и их фрагментам для применения в лечении заболевания или нарушения человека, связанного с CD154, и в приготовлении лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения человека, связанного с CD154. Описание вариантов осуществления Данное изобретение обеспечивает пептиды, в частности вариабельные области легкой и тяжелой цепей и их фрагменты, и антитела и их фрагменты, содержащие их, где эти пептиды содержат по меньшей мере одну аминокислотную замену в сравнении с антителом 5 с 8 дикого типа. Термин антитело в данном контексте включает моноклональные антитела (в том числе полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела), химерные антитела, CDR-привитые антитела, гуманизированные антитела, антитела человека и т.п. и их фрагменты. Фраза фрагмент антитела или т.п. включает в данном контексте, например, легкую цепь антитела(VL), тяжелую цепь антитела (VH), одноцепочечное антитело (scFv), F(ab')2-фрагмент, Fab-фрагмент, Fab'фрагмент, Fd-фрагмент, Fv-фрагмент и фрагмент единственного домена антитела (DAb). Термин CDR включает в данном контексте определяющие комплементарность районы, описанные, например, Kabat, Chothia или MacCallum et al., (см., например, Kabat et al., In "Sequences of Proteinsof Immunological Interest", U.S. Department of Health and Human Services, 1983; Chothia et al., J. Mol. Biol.,1987, 196, 901-917 и MacCallum et al., J. Mol. Biol., 1996., 262, 732-745). Положения аминокислотных остатков, которые обычно включают CDR, описанные каждой из цитируемых выше ссылок, представлены ниже для сравнения. Определения CDR Фраза каркасный район включает в данном контексте последовательность антитела, которая находится между этими CDR и разделяет их. Таким образом, каркас вариабельной области имеет длину приблизительно 100-120 аминокислот, но обычно называют только аминокислоты, находящиеся вне этихCDR. В качестве конкретного примера вариабельной области тяжелой цепи и для CDR, определенныхKabat et al., каркасный район 1 соответствует домену вариабельной области, включающему аминокислоты 1-30; район 2 соответствует домену вариабельной области, включающему аминокислоты 36-49; район 3 сответствует домену вариабельной области, включающему аминокислоты 66-94, и район 4 соответствует домену вариабельной области от аминокислоты 103 до конца вариабельной области. Каркасные участки для легкой цепи подобным образом отделены друг от друга посредством CDR вариабельной области легкой цепи. Подобным образом, согласно определению CDR Chothia et al. или MacCallum et al.,границы каркасной области разделены соответствующими концами CDR, как описано выше. Фраза вариабельная область включает в данном контексте аминоконцевую часть антитела, которая ответственна за связывание антигена на этой молекуле и которая не является константной областью. Предполагается, что этот термин включает функциональные фрагменты, например антигенсвязывающий фрагмент, которые поддерживают некоторую часть функции связывания или всю функцию связывания всей вариабельной области. Фраза антитело 5 с 8 относится к антителу, которое связывает CD154 и которое заявлено и описано в патенте США 5474771. mAb-Гибридома hu5c8 является доступной из АТСС (НВ 10916). Аминокислотная последовательность для легкой и тяжелой цепи вариабельных областей антитела 5 с 8 дикого типа представлена в SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 4 соответственно. В одном аспекте данное изобретение обеспечивает производные антитела 5 с 8, содержащие по меньшей мере одну аминокислотную замену в вариабельной области легкой цепи. Вариабельная область легкой цепи 5 с 8 дикого типа представлена в SEQ ID NO: 1 (аминокислотная последовательность). Данное изобретение обеспечивает пептиды, содержащие вариабельную область легкой цепи 5 с 8 дикого типа,в которой сделана по меньшей мере одна аминокислотная замена (т.е. эти пептиды не содержат SEQ IDNO: 1). Этот пептид легкой цепи может содержать всю легкую цепь, включающую константную область и вариабельную область, или может содержать только вариабельную область. Этот пептид легкой цепи может также содержать всю вариабельную область и часть константной области, которая может находиться в диапазоне от всей константной области без одной аминокислоты до всего лишь одной аминокислоты константной области, или может быть в любом диапазоне внутри указанного диапазона. Альтернативно, пептид легкой цепи может содержать вариабельную область, слитую с любой неродственной пептидной последовательностью, с образованием, следовательно, слитого белка. В некоторых вариантах осуществления пептид легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в любом из следующих положений вариабельной области легкой цепи антитела 5 с 8 дикого типа (см. SEQ ID NO: 1): положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 24, 26, 27,28, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60, 93, 95, 96, 97, 98, 100 и 101 или любой их подгруппы. Такой пептид, содержащий эти положения, которые могут содержать аминокислотную замену, представлен в SEQ ID NO: 3 (аминокислотная последовательность). Эти пептиды легкой цепи могут также содержать по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19, по меньшей мере 20, по меньшей мере 21, по меньшей мере 22 или по меньшей мере 23 аминокислотные замены или замену в каждом из 24 положений. В некоторых вариантах осуществления пептид легкой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в любом из положений 26, 27, 31, 32, 33 и 98 или их любую подгруппу. Такой пептид,содержащий эти положения, который может содержать аминокислотную замену, представлен в SEQ IDNO: 3 (аминокислотная последовательность), где положения 24, 28, 30, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60,93, 95, 96, 97, 100 и 101 являются аминокислотами дикого типа. Эти пептиды могут также содержать по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4 или по меньшей мере 5 аминокислотных замен или замену в каждом из 6 положений. Замененная аминокислота в каждом из предыдущих положений (т.е. в положениях 24, 26, 27, 28, 30,31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60, 93, 95, 96, 97, 98, 100 и 101) может быть независимо любой встречающейся в природе аминокислотой или любой не встречающейся в природе аминокислотой. Таким образом, конкретный пептид легкой цепи может содержать одну или несколько аминокислотных замен, которые являются встречающимися в природе аминокислотами, и/или одну или несколько аминокислотных замен, которые являются не встречающимися в природе аминокислотами. Отдельные аминокислотные замены выбраны из любой из следующих серий: 1) серии аминокислот с неполярными боковыми цепями, например Ala, Cys, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Val; 2) серии аминокислот с отрицательно заряженными боковыми цепями, например Asp, Glu; 3) серии аминокислот с положительно заряженными боковыми цепями, например Arg, His, Lys; и 4) серии аминокислот с незаряженными полярными боковыми цепями, например Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, к которым добавлены Cys, Gly, Met и Phe. Встречающиеся в природе аминокислоты включают, например, аланин (Ala), аргинин (Arg), аспара- 12014226 гин (Asn), аспарагиновую кислоту (Asp), цистеин (Cys), глутамин (Gln), глутаминовую кислоту (Glu),глицин (Gly), гистидин (His), изолейцин (Ile), лейцин (Leu), лизин (Lys), метионин (Met), фенилаланин(Phe), пролин (Pro), серии (Ser), треонин (Thr), триптофан (Trp), тирозин (Tyr) и валин (Val). Не встречающиеся в природе аминокислоты включают, например, норлейцин, омитин, норвалин,гомосерин и другие аналоги аминокислотных остатков, такие как аналоги, описанные в Ellman et al.,Meth. Enzym., 1991, 202, 301-336. Для генерирования таких не встречающихся в природе аминокислотных остатков могут быть использованы процедуры Noren et al., Science, 1989, 244, 182 и Ellman et al.,выше. Вкратце, эти процедуры включают химическую активацию супрессорной тРНК не встречающимся в природе аминокислотным остатком с последующей транскрипцией и трансляцией этой РНК in vitro. В некоторых вариантах осуществления пептид легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95% идентична соответствующему району SEQ ID NO: 3. Так, например, пептид легкой цепи, который содержит две аминокислотные замены в положениях 26 и 27, может все еще иметь дополнительные замены где-нибудь в другом месте в этом пептиде (т.е. в положениях, других, чем положения, обозначенные "Хаа" в SEQ ID NO: 3), до тех пор, пока этот пептид имеет, по меньшей мере, указанный процент идентичности. Таким образом, здесь обсуждаются пептиды, имеющие дополнительные аминокислотные замены или аминокислотные инсерции или делеции. Должно быть понятно, что при определении процентной идентичности пептида, который содержит часть константной области легкой цепи, только вариабельная область рассматривается для целей определения процентной идентичности (т.е. часть константной области не включена в процентную идентичность). Фрагмент может содержать по меньшей мере 8, по меньшей мере 10, по меньшей мере 15, по меньшей мере 20, по меньшей мере 25, по меньшей мере 30, по меньшей мере 35, по меньшей мере 40, по меньшей мере 45, по меньшей мере 50, по меньшей мере 55, по меньшей мере 60, по меньшей мере 65,по меньшей мере 70, по меньшей мере 75, по меньшей мере 80, по меньшей мере 85, по меньшей мере 90, по меньшей мере 95, по меньшей мере 100, по меньшей мере 105 аминокислот, максимально 110 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления этот фрагмент содержит по меньшей мере одно из положений 24, 26, 27, 28, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 54, 57, 58, 59, 60, 93, 95, 96, 97, 98, 100 и 101 или любую подгруппу из них в соответствии с SEQ ID NO: 3. В некоторых вариантах осуществления фрагмент содержит одну или несколько из любых из предыдущих аминокислотных замен легкой цепи. Пептиды легкой цепи и их фрагменты, обсуждаемые здесь, сохраняют их способность связываться с CD154. То есть замена соответствующих аминокислот дикого типа антитела 5 с 8 описанными здесь пептидами или фрагментами все еще будет позволять полученному антителу связывать CD154 человека. Например, замена всех аминокислот вариабельной области легкой цепи 5 с 8 дикого типа соответствующими аминокислотами описанного здесь пептида или фрагмента будет приводить к антителу, которое сохраняет способность связывать CD154 человека. В некоторых вариантах осуществления легкая цепь может иметь замены следующими типами аминокислот в указанных положениях: R24 (отрицательная, положительная, полярная, неполярная); S26 (отрицательная, полярная, неполярная); Q27 (положительная, отрицательная, полярная); R28 (отрицательная, полярная, неполярная); S30 (положительная, отрицательная, полярная); S31 (положительная, полярная, неполярная); S32 (положительная, полярная, неполярная); Т 33 (положительная, отрицательная, полярная, неполярная); Y34 (положительная, отрицательная, полярная, неполярная); S35 (полярная); Y36(отрицательная, полярная, неполярная); N57 (отрицательная, полярная); L58 (отрицательная, полярная); Е 59 (отрицательная, полярная); S60 (отрицательная); Q93 (положительная, отрицательная, полярная, неполярная); S95 (отрицательная, полярная); W96 (отрицательная, положительная, полярная); Е 97 (отрицательная); 198 (отрицательная, полярная, неполярная); Р 100 (отрицательная, полярная) и Т 101 (отрицательная, полярная, неполярная). В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 24 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp, Glu и Lys или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 24 может быть также предпочтительно Arg. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp или Glu или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислотой в положении 26 является предпочтительно Ser или Arg. Аминокислота в положении 26 может быть также предпочтительно Ser, Asp или Glu; или предпочтительно Ser или Asp. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 27 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Gln, Asn, Cys, Gly, His,Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 27 является предпочтительно Gln или Glu. Аминокислота в положении 27 может быть также предпочтительно Gln, Asp или Glu; или предпочтительно Gln или Glu.- 13014226 В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro или Val или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 28 может быть предпочтительно Arg или Gln. Аминокислота в положении 28 может быть также предпочтительно Arg. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 30 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 30 может быть также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Arg и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно,аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, His, Asn, Thr, Val и Trp. Аминокислота в положении 31 может быть также выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,Thr и Tyr; или предпочтительно является Ser или Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 32 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Arg, Ala, Ile, Leu и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 32 выбрана также из группы, состоящей из Ser, Ala, Phe, Ile, Leu, Met и Trp. Аминокислота в положении 32 может быть также выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Ile, Leu, Met, Phe,Pro, Val и Trp; или предпочтительно является Ser или Phe. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 33 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg, Ala, Val и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Thr, Ala, Phe, Met, Val, Trp, Asp, Arg, Tyr иGln. Аминокислота в положении 33 выбрана также из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly, Ser иTyr; или предпочтительно является Thr, Gln или Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 34 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 34 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Ala, Asp, Glu, Phe, Ile, Lys,Leu, Met, Arg, Val и Trp. Аминокислота в положении 34 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 35 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Thr, Trp и Tyr или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 35 может быть также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 36 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Asp, Ala, Leu и Glu или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 36 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Ala, Phe, Leu и Trp. Аминокислота в положении 36 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 38 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из His, Asn, Cys, Gln, Gly,Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 38 может быть также предпочтительно His. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 54 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp и Glu или их любой подгруппы. Альтернативно,аминокислота в положении 54 является предпочтительно Tyr или Glu. Аминокислота в положении 54 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 57 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly, His,Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 57 может быть также предпочтительно Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 58 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Leu, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 58 может быть также предпочтительно Leu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 59 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Glu, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr и Asp или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 59 может быть также предпочтительно Glu.- 14014226 В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 60 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asp и Glu или любой их подгруппы. Аминокислота в положении 60 может быть также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 93 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Gln, Asn, Cys, Gly, His,Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 93 может быть также предпочтительно Gln. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 95 (в соответствии с SEQ IDNO:3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 95 может быть также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 96 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Trp, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Tyr, Asp, Glu, Arg и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 96 выбрана из группы, состоящей из Trp, Asp, Glu, His, Arg, Ser и Thr. Аминокислота в положении 96 может быть также предпочтительно Trp. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 97 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента является Glu или Asp или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 97 может быть также предпочтительно Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 98 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ile, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Ala, Leu, Pro, Val и Glu или их любой подгруппы. Альтернативно,аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Ile, Ala, Phe, His, Leu, Met, Asn, Pro, Gln,Ser, Thr, Val, Trp и Tyr. Аминокислота в положении 98 выбрана из группы, состоящей из Ile, Asn, Cys,Gln, Gly, Ser, Thr и Tyr; или предпочтительно является Ile или Gln. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 100 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Pro, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 100 может быть также предпочтительно Pro. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 101 (в соответствии с SEQ IDNO: 3) пептида легкой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 101 может быть также предпочтительно Thr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 28 является Glu; аминокислота в положении 31 является Val; аминокислота в положении 33 является Asp или Arg; и аминокислота в положении 54 является Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 является His или Asn; аминокислота в положении 32 является Trp или Phe; аминокислота в положении 33 является Trp, Tyr или Gln; аминокислота в положении 36 является Leu или Trp; аминокислота в положении 96 является His; и аминокислота в положении 98 является Phe или Gln. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO:3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является Hxs; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот мутант называют здесь мутантом 6. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот мутант называют здесь мутантом 7. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 и по- 15014226 ложении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот мутант называют здесь мутантом 14. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 и положении 36 является Trp; и аминокислота в положении 100 является Pro. Этот мутант называют здесь мутантом 3. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 и положении 33 является Trp; и аминокислота в положении 100 является Pro. Этот мутант называют здесь мутантом 5. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 32, положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 31 является Val и аминокислота в положении 100 является Pro. Этот мутант называют здесь мутантом 8. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 33 является Asp и аминокислота в положении 100 является Pro. Этот мутант называют здесь мутантом 9. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 27 и положении 93 является Gln; аминокислота в положении 26, положении 31, положении 32,положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 33 и положении 101 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 34 и положении 36 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 54, положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 96 является Trp и аминокислота в положении 100 является Pro. Этот мутант называют здесь мутантом 10. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 33 и положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот мутант называют здесь мутантом- 1601422615. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln, аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 31 является Asn; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 и положении 31 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 32 является Phe; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 и положении 33 является Gln; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 являетсяGln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 является Gln; аминокислота в положении 33 является Tyr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 являетсяPro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где в положении 26, положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 27 и положении 98 является Gln; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в- 17014226 положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 является Asn; аминокислота в положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот пептил называют здесь также пептидом "S26D/Q27E/S31N". В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 является Ser; аминокислота в положении 32 является Phe; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30, положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот пептид называют здесь также пептидом "S26D/Q27E/S32F". В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Gln; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот пептид называют здесь также пептидом "S26D/Q27E/T33Q". В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Tyr; аминокислота в положении 98 является Ile; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот пептид называют здесь также пептидом "S26D/Q27E/T33Y". В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 3, где аминокислота в положении 26 является Asp; аминокислота в положении 27 является Glu; аминокислота в положении 31 и положении 32 является Ser; аминокислота в положении 33 является Thr; аминокислота в положении 98 является Gln; аминокислота в положении 24 и положении 28 является Arg; аминокислота в положении 30,положении 35, положении 60 и положении 95 является Ser; аминокислота в положении 34, положении 36 и положении 54 является Tyr; аминокислота в положении 38 является His; аминокислота в положении 57 является Asn; аминокислота в положении 58 является Leu; аминокислота в положении 59 и положении 97 является Glu; аминокислота в положении 93 является Gln; аминокислота в положении 96 является Trp; аминокислота в положении 100 является Pro; и аминокислота в положении 101 является Thr. Этот пептид называют здесь также пептидом "S26D/Q27E/I98Q". В другом аспекте данное изобретение обеспечивает производные антитела 5 с 8, содержащие по меньшей мере одну аминокислотную замену в вариабельной области тяжелой цепи. Вариабельная область тяжелой цепи 5 с 8 дикого типа представлена в SEQ ID NO: 4 (аминокислотная последовательность). Данное изобретение обеспечивает пептиды, содержащие вариабельную область тяжелой цепи 5 с 8 дикого типа, в которой сделана по меньшей мере одна аминокислотная замена (т.е. эти пептиды не содержатSEQ ID NO: 4). Этот пептид тяжелой цепи может содержать всю тяжелую цепь, включающую константную область (СН 1 и/или СН 2 и/или СН 3) и вариабельную область, или может содержать только вариабельную область. Этот пептид тяжелой цепи может также содержать всю вариабельную область и часть константной области, которая может находиться в диапазоне от всей константной области без одной аминокислоты до всего лишь одной аминокислоты константной области, или может быть в любом диа- 18014226 пазоне внутри указанного диапазона. Альтернативно, пептид тяжелой цепи может содержать вариабельную область, слитую с любой неродственной пептидной последовательностью, с образованием, следовательно, слитого белка. В некоторых вариантах осуществления пептид тяжелой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в любом из следующих положений вариабельной области тяжелой цепи антитела 5 с 8 дикого типа (см. SEQ ID NO: 4): положениях, выбранных из группы, состоящей из положений 28, 30,31, 32, 33, 35, 50, 52, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106 и 107 или любой их подгруппы. Такой пептид, содержащий эти положения, который может содержать аминокислотную замену, представлен в SEQ ID NO: 6 (аминокислотная последовательность). Эти пептиды тяжелой цепи могут содержать по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19, по меньшей мере 20, по меньшей мере 21, по меньшей мере 22, по меньшей мере 23, по меньшей мере 24,по меньшей мере 25, по меньшей мере 26, по меньшей мере 27, по меньшей мере 28 или по меньшей мере 29 аминокислотных замен или по меньшей мере одну аминокислотную замену в каждом из этих 30 положений. В некоторых вариантах осуществления пептид тяжелой цепи содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену в любом из положений 31, 54, 57, 101 и 103 или любой их подгруппы. Такой пептид, содержащий положения, которые могут содержать аминокислотную замену, представлен в SEQ IDNO: 6 (аминокислотная последовательность), где положения 28, 30, 32, 33, 35, 50, 52, 53, 55, 58, 59, 60,61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100, 102, 104, 105, 106 и 107 являются аминокислотами дикого типа. Эти пептиды могут также содержать по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10,по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19, по меньшей мере 20, по меньшей мере 21, по меньшей мере 22, по меньшей мере 23 или по меньшей мере 24 аминокислотные замены или одну аминокислотную замену в каждом из этих 25 положений. Замененная аминокислота в каждом из предыдущих положений (т.е. положений 28, 30, 31, 32, 33,35, 50, 52, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106 и 107) может быть независимо любой встречающейся в природе аминокислотой или любой не встречающейся в природе аминокислотой. Таким образом, конкретный пептид тяжелой цепи может содержать одну или несколько аминокислотных замен, которые являются встречающимися в природе аминокислотами, и/или одну или несколько аминокислотных замен, которые являются не встречающимися в природе аминокислотами. В некоторых вариантах осуществления пептид тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере на 95% идентична SEQ ID NO: 6. Так, например,пептид тяжелой цепи, который содержит аминокислотную замену в положении 31, может все еще иметь дополнительные замены где-нибудь в другом месте в этом пептиде (т.е. в положениях, других, чем положения, обозначенные Хаа в SEQ ID NO: 6), пока этот пептид имеет, по меньшей мере, указанный процент идентичности. Таким образом, здесь обсуждаются пептиды, имеющие дополнительные аминокислотные замены или аминокислотные инсерции или делеции. Должно быть понятно, что при определении процентной идентичности пептида, который содержит часть константной области тяжелой цепи,только вариабельная область рассматривается для целей определения процентной идентичности (т.е. часть константной области не включена в процентную идентичность). В некоторых вариантах осуществления обеспечен фрагмент пептида тяжелой цепи, который содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере на 95% идентична соответствующему району SEQ ID NO: 6. Этот фрагмент может содержать по меньшей мере 8, по меньшей мере 10, по меньшей мере 15, по меньшей мере 20, по меньшей мере 25, по меньшей мере 30, по меньшей мере 35, по меньшей мере 40,по меньшей мере 45, по меньшей мере 50, по меньшей мере 55, по меньшей мере 60, по меньшей мере 65, по меньшей мере 70, по меньшей мере 75, по меньшей мере 80, по меньшей мере 85, по меньшей мере 90, по меньшей мере 95, по меньшей мере 100, по меньшей мере 105 по меньшей мере 110 или по меньшей мере 115 аминокислот, максимально 117 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления этот фрагмент содержит по меньшей мере одно из положений 28, 30, 31, 32, 33, 35, 50, 52, 53, 54, 55, 57,58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106 и 107 или любую их подгруппу в соответствии с SEQ ID NO: 6. В некоторых вариантах осуществления этот фрагмент содержит одну или несколько любых из предыдущих аминокислотных замен тяжелой цепи. Пептиды тяжелой цепи и их фрагменты, описанные здесь, сохраняют их способность связываться сCD154. То есть замена соответствующих аминокислот дикого типа антитела 5 с 8 описанными здесь пеп- 19014226 тидами или фрагментами все еще будет позволять полученному антителу связывать CD154 человека. Например, замена всех аминокислот вариабельной области тяжелой цепи 5 с 8 дикого типа соответствующими аминокислотами описанного здесь пептида или фрагмента будет приводить к антителу, которое сохраняет способность связывать CD154 человека. В некоторых вариантах осуществления описанные здесь антитела могут контактировать с количеством остатков CD154, меньшим на один или несколько остатков, чем антитело 5 с 8 дикого типа. В некоторых вариантах осуществления тяжелая цепь может иметь замены следующими типами аминокислот в указанных положениях: 128 (положительная, отрицательная, полярная); Т 30 (положительная, отрицательная, полярная, неполярная); S31 (положительная, полярная); Y32 (положительная,отрицательная, полярная, неполярная); Y33 (положительная, отрицательная, полярная, неполярная); Y35(полярная), Е 50 (отрицательная); N52 (полярная, неполярная); Р 53 (отрицательная, полярная); S54 (положительная, отрицательная, полярная); N55 (отрицательная, полярная, неполярная); D57 (отрицательная, неполярная); Т 58 (полярная, неполярная); N59 (отрицательная, полярная, неполярная); F60 (отрицательная, положительная, полярная, неполярная); N61 (отрицательная); Е 62 (отрицательная); K63 (отрицательная, положительная, полярная, неполярная); F64 (отрицательная, полярная, неполярная); K65 (отрицательная, положительная, полярная, неполярная); S66 (отрицательная); S99 (отрицательная, неполярная); D100 (отрицательная); G101 (неполярная); R102 (положительная, полярная); N103 (отрицательная,положительная, полярная, неполярная); D104 (отрицательная); М 105 (отрицательная, полярная, положительная); D106 (отрицательная) и S107 (отрицательная, полярная, неполярная). В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ile, Asp, Glu, Arg, Lys,Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr и Trp или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 28 выбрана из группы, состоящей из Ile, His, Asn, Gln, Ser, Thr и Glu. Аминокислота в положении 28 может быть также предпочтительно Ile. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 30 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Thr, Asp, Glu, Arg,Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 30 выбрана из группы, состоящей из Thr, His, Asn, Gln, Ser, Tyr иArg. Аминокислота в положении 30 может быть также предпочтительно Thr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 31 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Arg, His, Lys, Gln и Trp или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 31 является предпочтительно Ser, Gln или Trp. Аминокислота в положении 31 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Ile, Leu,Met, Phe, Pro, Val, Trp, Asn, Cys, Gln, Gly, Ser, Thr и Tyr; или предпочтительно является Ser, Trp или Gln. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 32 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asp, Glu, Arg,Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 32 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 33 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asp, Glu, Asn,Cys, Gln, Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 33 выбрана из группы, состоящей из Tyr, Ala, Pro, Ser, Thr, Val и Trp. Аминокислота в положении 33 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 35 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Tyr, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 35 может быть также предпочтительно Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 50 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Glu или Asp или любой их подсерией. Аминокислота в положении 50 может быть также предпочтительно Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 52 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Ala, Leu, Val и Lys или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 52 выбрана из группы, состоящей из Asn, Ala, Phe, His, Leu, Met, Ser, Thr, Val иTrp. Аминокислота в положении 52 может также быть предпочтительно Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 53 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Pro, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp и Glu или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 53 может также быть предпочтительно Pro. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 54 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Arg, Lys и Glu или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в- 20014226 положении 54 выбрана из группы, состоящей из Ser, Glu, His, Lys, Asn, Gln, Arg, Thr, Trp, Tyr и Phe. Аминокислота в положении 54 выбрана из группы, состоящей из Ser, Ala, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Val, Trp,Asn, Cys, Gln, Gly, Ser, Thr и Tyr; или предпочтительно Ser, Phe или Gln. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 55 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asn, Glu, Lys, Gln, Ser,Thr, Met и Val или любой их подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 55 выбрана из группы, состоящей из Asn, Glu, Lys, Gln, Ser, Thr, Met и Val. Аминокислота в положении 55 может быть также предпочтительно Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 57 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asp, Glu, Phe и Leu или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 57 является предпочтительно Asp,Phe или Leu. Аминокислота в положении 57 выбрана из группы, состоящей из Asp, Ala, Ile, Leu, Met, Phe,Pro, Val и Trp; или является предпочтительно Asp, Leu или Phe. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 58 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Thr, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или любой их подгруппы. Аминокислота в положении 58 может быть также предпочтительно Thr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 59 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Ala, Ile, Leu, Pro, Val, Asp и Glu или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 59 выбрана из группы, состоящей из Asn, Ala, Phe, Leu, Met, Pro, Val, Trp,Asp и Tyr. Аминокислота в положении 59 может быть также предпочтительно Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 60 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Phe, Asp, Asn, Cys,Gln, Gly, His, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Arg, Lys, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 60 может быть также предпочтительно Phe. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 61 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Asn, Asp или Glu или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 61 может также быть предпочтительно Asn. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 62 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Glu или Asp или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 62 может также быть предпочтительно Glu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 63 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Lys, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Glu, Asp, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 63 может быть также предпочтительно Lys. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 64 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Phe, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 64 может быть также предпочтительно Phe. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 65 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Lys, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Arg, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 65 может быть также предпочтительно Lys. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 66 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Ser, Asp или Glu или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 66 является также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 99 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Ser, Asp, Glu или Ala или их любой подгруппой. Альтернативно, аминокислота в положении 99 является предпочтительно Ser или Ala. Аминокислота в положении 99 может быть также предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 100 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Asp или Glu или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 100 может быть также предпочтительно Asp. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 101 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Gly, Phe или Leu или их любой подгруппой. Альтернативно, аминокислота в положении 101 является предпочтительно Gly, Phe или Leu. Аминокислота в положении 101 выбрана из группы, состоящей из Gly, Ala, Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Val и Trp; или является предпочтительно Gly, Leu или Phe. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 102 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Arg, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Sec, Thr, Trp, Tyr и Lys или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 102 мо- 21014226 жет быть также предпочтительно Arg. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 103 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Asn, Cys, Gln, Gly,His, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Lys, Arg и Val или их любой подгруппы. Альтернативно, аминокислота в положении 103 выбрана из группы, состоящей из Asn, Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys,Met, Arg, Ser, Thr, Val и Tyr. Аминокислота в положении 103 выбрана также из группы, состоящей изAsn, Cys, Gln, Gly, Ser, Thr и Tyr; или является предпочтительно Asn или Tyr. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 104 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Asp или Glu, или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 104 может быть также предпочтительно Asp. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 105 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Met, Asp, Glu, Arg,His, Lys, Asn, Cys, Gln, Gly, Phe, Ser, Thr, Trp и Tyr или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 105 может также быть предпочтительно Met. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 106 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента является Asp или Glu или их любой подгруппой. Аминокислота в положении 106 может также быть предпочтительно Asp. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 107 (в соответствии с SEQ IDNO: 6) пептида тяжелой цепи или его фрагмента выбрана из группы, состоящей из Ser, Asn, Cys, Gln,Gly, His, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr, Asp, Glu, Ala, Ile, Leu, Pro и Val или их любой подгруппы. Аминокислота в положении 107 может также быть предпочтительно Ser. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 28 является Glu; аминокислота в положении 33 является Phe; аминокислота в положении 54 является Thr; и аминокислота в положении 59 является Asp или Leu. В некоторых вариантах осуществления аминокислота в положении 30 является His или Arg; аминокислота в положении 31 является Gln или Trp; аминокислота в положении 33 является Trp, Val или Pro; аминокислота в положении 52 является Met или Trp; аминокислота в положении 54 является Asn, Phe или Gln; аминокислота в положении 55 является Met, Lys или Val; аминокислота в положении 57 является Phe или Leu; аминокислота в положении 59 является Phe или Tyr; аминокислота в положении 101 является Phe или Leu; и аминокислота в положении 103 является His или Tyr. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Tyr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His; и аминокислота в положении 105 является Met. Этот мутант называют здесь мутантом 1. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 33 является Trp; и аминокислота в положении 105 является Met. Этот мутант называют здесь мутантом 2. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57,положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 являетсяMet. Этот мутант называют здесь мутантом 4. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота вMet. Этот мутант называют здесь мутантом 11. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 59, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в полжении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 являетсяMet. Этот мутант называют здесь мутантом 12. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Tyr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Thr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 59 является Leu и аминокислота в положении 105 является Met. Этот мутант называют здесь мутантом 13. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Trp; аминокислота в положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Gln; аминокислота в положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 является Ser; аминокислота в положении 54 является Phe; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в поло- 23014226 жении 31 является Ser; аминокислота в положении 54 является Gln; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32, положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Phe; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser, аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Leu; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Phe; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Leu; аминокислота в положении 103 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31 и положении 54 является Ser; аминокислота в положении 57 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103 является Tyr; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32,положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 100, положении 104 и положении 106 являетсяAsp; аминокислота в положении 102 является Arg и аминокислота в положении 105 является Met. Идентичность или сходство в отношении этой последовательности определяется здесь как процент аминокислотных остатков в модифицированной последовательности, которые являются идентичными(т.е. теми же самыми остатками) с остатками антитела 5 с 8 дикого типа после сопоставления этих последовательностей и введения гэпов, если необходимо, для получения максимальной процентной идентичности последовательности. Обычно N-концевые, С-концевые или внутренние удлинения, делеции или инсерции в последовательности антитела вне вариабельной области не считаются влияющими на идентичность или сходство последовательности. Это антитело может содержать одно или несколько аминокислотных изменений в его одном или нескольких гипервариабельных районах или вблизи них. Процентная идентичность может быть определена, например, с использованием программы Gap (WisconsinSequence Analysis Package, Versiora 8 for Unix, Genetics Compuner Group, University Research Park, Madison WI), с использованием установок по умолчанию, которая использует алгоритм Smith and Waterman(Adv, Appl. Math., 1981, 2, 482-489). Данное изобретение обеспечивает также молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие любой из описанных здесь пептидов или их фрагментов. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая пептидID NO: 6, представлена в SEQ ID NO: 5. Специалист с квалификацией в данной области, имеющий аминокислотные последовательности описанных здесь пептидов, может сконструировать и получить молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие эти пептиды. Данное изобретение обеспечивает также векторы, содержащие любую молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует любой из описанных здесь пептидов или их фрагментов. Специалисту с квалификацией в данной области будут известны многочисленные векторы, многие из которых являются коммерчески доступными. Данное изобретение обеспечивает также клетки-хозяева, содержащие любые из описанных здесь молекул нуклеиновых кислот или векторов. Эти клетки-хозяева могут быть использованы, например, для экспрессии пептидов и антител или их фрагментов. Пептиды и антитела или их фрагменты могут быть также экспрессированы в клетках in vivo. Клетка-хозяин, которая трансформирована (например, трансфицирована) для продуцирования этих пептидов или антител или их фрагментов, может быть иммортализованной клеточной линией млекопитающего, такой как клеточные линии лимфоидного происхождения (например, линии клеток миеломы, гибридомы, триомы или квадромы). Клетка-хозяин может также включать лимфоидные клетки, такие как В-клетки, которые были иммортализованы трансформацией вирусом (например, вирусом Эпштейна-Барра). Некоторые иммортализованные лимфоидные клеточные линии, такие как миеломные клеточные линии, в их нормальном состоянии секретируют легкую или тяжелую цепи антител. Если такую клеточную линию трансформируют вектором, который содержит мутантное антитело или его фрагмент, полученные во время способа данного изобретения, может быть необязательным проведение остальных стадий этого способа, при условии, что нормально секретируемая цепь является комплементарной вариабельному домену цепи Ig, кодируемому полученным ранее вектором. Однако если эта иммортализованная клеточная линия не секретирует эту цепь или не секретирует комплементарную цепь, будет необходимо введение в эти клетки вектора, который кодирует соответствующую комплементарную цепь или ее фрагмент. В случае, когда иммортализованная клеточная линия секретирует комплементарную легкую или тяжелую цепь, эта трансформированная клеточная линия может быть получена, например, трансформацией подходящей бактериальной клетки этим вектором и затем слиянием этой бактериальной клетки с иммортализованной клеточной линией (например, слиянием сферобластов). Альтернативно, эта ДНК может быть непосредственно введена в иммортализованную клеточную линию электропорацией. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения клетки-хозяева включают, но не ограничиваются ими, бактериальные клетки, такие как Е. coli, Caulobacter crescentus, Streptomyces species иpombe, Pichia patoris, Pichia methanolica; линии клеток насекомых, такие как клетки из Spodopterafrugiperda (например, клеточные линии Sf9 и Sf21 и клетки expresSF (Protein Sciences Corp., Meriden,CT, USA, клетки Drosophila S2 и клетки Trichoplusia в High Five Cells (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA); и клетки млекопитающих, такие как клетки COS1 и COS7, клетки яичника Китайского хомячка (СНО),клетки миеломы NS0, клетки NIH ЗТЗ, клетки 293, клетки HEPG2, клетки HeLa, L-клетки, HeLa, MDCK,HEK293, WI38, мышиная клеточная линия эмбриональных стволовых клеток (ES) (например, из штаммов 129/SV, C57/BL6, DBA-1, 129/SVJ), K562, клетки Jurkat и BW5147. Другие применимые клеточные линии млекопитающих хорошо известны и легко доступны из Американской Коллекции типовых культур ("АТСС") (Manassas, VA, USA) и National Institute of General Medical Sciences (NIGMS) Human Genetic Cell Repository at Coriel Cell Repositories (Camden, NJ, USA). Эти типы клеток являются только репрезентативными клетками и не предназначены для того, чтобы служить исчерпывающим перечнем. Пептиды и антитела и их фрагменты могут быть получены в прокариотических и эукариотических клетках. Таким образом, это изобретение обеспечивает также клетки, которые экспрессируют антитела данного изобретения, в том числе гибридомные клетки, В-клетки, плазматические клетки, а также клетки-хозяева, рекомбинантно модифицированные для экспрессии антител данного изобретения.- 25014226 Среди других рассмотрений, некоторые из которых описаны выше, штамм клетки-хозяина может быть отобран на его способность процессировать экспрессируемые пептид или антитело или их фрагмент желаемым образом. Посттрансляционные модификации этого полипептида включают, но не ограничиваются ими, гликозилирование, ацетилирование, карбоксилирование, фосфорилирование, липидирование и ацилирование, и одним аспектом данного изобретения является обеспечение антител или их фрагментов с одной или несколькими посттрансляционными модификациями. Данное изобретение обеспечивает также антитела или их фрагменты, содержащие любой описанный здесь пептид, причем это антитело или его фрагмент может связываться с CD154 человека. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит любой из описанных здесь пептидов легкой цепи или их фрагментов. В других вариантах осуществления это антитело или его фрагмент содержит любой из описанных здесь пептидов тяжелой цепи или их фрагментов. В дополнительных других вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит любой из описанных здесь пептидов тяжелой цепи или их фрагментов и любой из описанных здесь пептидов легкой цепи или их фрагментов. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который является пептидом мутанта 1. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 16. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который является пептидом мутанта 2. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 17. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который является пептидом мутанта 1. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 18. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который является пептидом мутанта 4. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 19. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который является пептидом мутанта 4. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 20. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который является пептидом мутанта 2. Такой композиционный (составной) мутант называют здесь мутантом 23. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 54, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His; аминокислота в положении 33 является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 21. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 54, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His; аминокислота в положении 33 является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 22. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении- 26014226 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His, аминокислота в положении 33 является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 24. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 54, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 является His, аминокислота в положении 33 является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 25. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 54, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 в положении 33 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 30 являетсяHis; и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 26. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 15, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 54, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 33; является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 27. В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент содержит первый пептид, который является пептидом мутанта 14, и второй пептид, который содержит SEQ ID NO: 6, где аминокислота в положении 31, положении 66, положении 99 и положении 107 является Ser; аминокислота в положении 57, положении 100, положении 104 и положении 106 является Asp; аминокислота в положении 101 является Gly; аминокислота в положении 103, положении 52, положении 54, положении 55, положении 59 и положении 61 является Asn; аминокислота в положении 28 является Ile; аминокислота в положении 30 и положении 58 является Thr; аминокислота в положении 32 и положении 35 является Tyr; аминокислота в положении 50 и положении 62 является Glu; аминокислота в положении 53 является Pro; аминокислота в положении 60 и положении 64 является Phe; аминокислота в положении 63 и положении 65 является Lys; аминокислота в положении 102 является Arg; аминокислота в положении 33 является Trp и аминокислота в положении 105 является Met. Такой составной мутант называют здесь мутантом 28. Антитело является гликопротеином с приблизительной молекулярной массой (MW) 150 кДа, которое продуцируется гуморальной ветвью иммунной системы позвоночных в ответ на присутствие чужеродных молекул в теле. Функциональное антитело или производное антитела способно узнавать специфический антиген in vitro и in vivo и связываться с ним, и может инициировать любые последующие действия, ассоциированные со связыванием антитела, в том числе, например, прямую цитотоксичность,комплементзависимую цитотоксичность (CDC), антителозависимую цитотоксичность (ADCC) и продуцирование антител. После связывания с антигеном антитела активируют одну или несколько из многих эффекторных систем иммунной системы, которые способствуют нейтрализации, деструкции и элиминации инфицирующего микроорганизма или другой антигенсодержащей частицы, например раковой клетки. Антитела и их фрагменты, описанные здесь, имеют увеличенную или уменьшенную аффинность,- 27014226 авидность и/или специфичность в сравнении с антителом 5 с 8 дикого типа. В некоторых вариантах осуществления эти антитела и их фрагменты, описанные здесь, имеют увеличенную аффинность, авидность и/или специфичность в сравнении с антителом 5 с 8 дикого типа. Аффинность, авидность и/или специфичность могут быть измерены различными путями. Обычно, независимо от конкретного способа, в котором определяют или измеряют аффинность, способы данного изобретения улучшают аффинность антитела, когда они генерируют антитело, которое является превосходящим в любом аспекте его клинического применения относительно антитела (или антител), из которого (которых) оно произведено (например, способы этого изобретения считаются эффективными или успешными, когда модифицированное антитело может вводиться в более низкой дозе или менее часто или более удобным способом введения,чем антитело или антитела, из которых оно получено). Специалистам с квалификацией в данной области будет ясно, что определение аффинности не всегда является таким простым, как рассмотрение в единственной, конечной конфигурации. Поскольку антитела имеют два плеча, их кажущаяся аффинность является обычно гораздо более высокой, чем внутренняя аффинность между вариабельной областью и антигеном. Внутренняя аффинность может быть измерена с использованием scFv- или Fab-фрагментов. В некоторых вариантах осуществления этот фрагмент антитела является одноцепочечным антителом (scFv), F(ab')2-фрагментом, Fab-фрагментом, Fab'-фрагментом или Fd-фрагментом или их антигенсвязывающими фрагментами. Одноцепочечное антитело получают из вариабельных областей, связанных белковыми спейсерами в единой белковой цепи. В других вариантах осуществления фрагменты антител включают гетеромерные комплексы антител и слияния антител, такие как биспецифические антитела,полудимерные антитела и поливалентные антитела (например, тетравалентные антитела). Полудимерное антитело получают из Fc-части и одной Fab-части. В некоторых вариантах осуществления антитела или их фрагменты могут также включать белки,содержащие одну или несколько легких цепей и/или тяжелых цепей иммуноглобулина, такие как мономеры или гомо- или гетеромультимеры (например, димеры или тримеры) этих цепей, где эти цепи являются необязательно связанными дисульфидными связями или сшиты иным образом. Эти антитела или их фрагменты могут связываться с одним или несколькими антигенами. Описанные здесь фрагменты антитела сохраняют их способность связывать CD154. Например, для фрагмента 5 с 8, который способен связываться с CD154, соответствующий фрагмент, который содержит любую описанную здесь мутацию, также способен связывать CD154. Аминокислоты, присутствующие на CD154, с которыми контактирует 5 с 8, включают V126, I127, S128, Е 129, А 130, S131, S132, K133,Т 134, Q139, W140, А 141, Е 142, K143, G144, Y145, Y146, Т 147, М 148, S149, N150, N151, V153, Т 154,L155, Е 156, N157, G158, K159, Т 176, F177, С 178, S179, N180, Е 182, А 183, S184, R200, F201, Е 202, R203,I204, L205, А 209, А 215, K216, Р 217, С 218, G219, Q220, Q221, D243, Р 244, S245, Q246, V247, S248, Н 249,G250, Т 251, G252, F253 и Т 254. В некоторых вариантах осуществления некоторые или все из этих остатков на CD154 взаимодействуют с описанными здесь мутантами. В некоторых вариантах осуществления описанные здесь мутанты могут контактировать с количеством остатков CD154, на один или несколько остатков меньшим, чем антитело дикого типа. В некоторых вариантах осуществления это антитело или его фрагмент помечены детектируемым маркером. Детектируемые маркеры включают, но не ограничиваются ими, радиоактивные изотопы (такие как Р 32 и S35), ферменты (такие как пероксидаза хрена, хлорамфениколацетилтрансфераза (CAT), галактозидаза (-gal) и т.п.), флуорохромы, хромофоры, коллоидное золото, красители и биотин. Эти меченые антитела или их фрагменты могут быть использованы для проведения диагностических процедур (многие диагностические анализы основаны на детектировании белкового антигена (такого какPSA в различных типах клеток и тканей. Для процедур визуализации, in vitro или in vivo, измененные антитела, полученные описанными здесь способами, могут быть помечены дополнительными агентами,такими как ЯМР-контрастные агенты, рентгеноконтрастные агенты или квантовые точки. Способы присоединения детектируемого агента к полипептидам, в том числе антителам или их фрагментам, известны в данной области. Антитела могут быть также присоединены к нерастворимой подложке (такой как гранула, стеклянное или пластиковое предметное стекло или т.п.). В некоторых вариантах осуществления антитело или его фрагмент конъюгируют с терапевтическим агентом, который включает, но не ограничивается ими, радиоизотопы (такие как 111In или 90Y), токсины(такие как столбнячный токсоид или рицин), токсоиды и химиотерапевтические агенты (см. патент США 6307026). В некоторых вариантах осуществления эти антитела или их фрагменты модифицируют конъюгированием с визуализирующим агентом. Визуализирующие агенты включают, например, метящую часть(такую как биотин, флуоресцентные части молекул, радиоактивные части молекул, гистидиновая метка или другие пептидные метки) для облегчения выделения и детектирования. При введении антитела часто выводятся быстро из кровотока и, следовательно, могут индуцировать относительно краткосрочную фармакологическую активность. Таким образом, могут требоваться частые инъекции относительно больших доз антител для поддержания терапевтической эффективности лечения- 28014226 антителами. В некоторых вариантах осуществления эти антитела и их фрагменты могут быть модифицированы(например, присоединением к другим молекулам) для увеличения целостности и продолжительности существования антитела in vivo. Например, эти антитела или их фрагменты могут быть модифицированы для включения части молекулы, которая может увеличивать стабилизацию, пролонгируя посредством этого полупериод существования в сыворотке этого антитела. В некоторых вариантах осуществления это антитело или его фрагмент содержит по меньшей мере один высокомолекулярный полимер, который включает, но не ограничивается ими, полиэтиленимин и полилизин. В других вариантах осуществления эти антитела и их фрагменты модифицированы ковалентным присоединением водорастворимых полимеров, таких как полиэтиленгликоль, сополимеры полиэтиленгликоля и полипропиленгликоля, карбоксиметилцеллюлоза, декстран, поливиниловый спирт,поливинилпирролидон или полипролин, все из которых, как известно, проявляют существенно более длительные полупериоды существования в крови после внутривенной инъекции, чем соответствующие немодифицированные белки (Abuchowski et al., In: "Enzymes as Drugs", 1981; Holcenberg et al., Ed., 1981,Wiley-Interscience, New York, NY, 367-383; Anderson, Human Gene Therapy. Science, 1992, 256, 808-813;Newmark et al., J. Appl. Biochem., 1982, 4, 185-189; и Katre et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 1487-1491). В некоторых вариантах осуществления это антитело или его фрагмент является ПЭГилированным или гликозилированным по меньшей мере в одном положении аминокислоты или модифицированным другими подходящими водорастворимыми полимерами, в том числе, но не только, ПЭГ, сополимерами этиленгликоля и пропиленгликоля, карбоксиметилцеллюлозой, декстраном, поливиниловым спиртом,поливинилпирролидоном, поли-1,3-диоксоланом, поли-1,3,6-триоксаном, сополимером этилена и малеинового ангидрида, полиаминокислотами (либо гомополимерами, либо статистическими сополимерами) и декстраном или поли(н-винилпирролидоном), ПЭГ, гомополимерами полипропиленгликоля, сополимерами полипропиленоксида и этиленоксида, полиоксиэтилированными полиолами (например, глицерином), поливиниловым спиртом и их смесями. Этот полимер может иметь любую подходящую молекулярную массу и может быть разветвленным или неразветвленным. Для ПЭГ подходящая средняя молекулярная масса находится в диапазоне приблизительно 2-100 кДа. Это обеспечивает легкость манипулирования и получения. Специалистам с квалификацией в данной области будет понятно, что в препаратах ПЭГ некоторые молекулы имеют большую массу, некоторые меньшую массу, чем указанная молекулярная масса. Таким образом, молекулярная масса обычно указывается как средняя молекулярная масса. Могут быть использованы другие молекулярные массы (размеры) в зависимости от желаемого терапевтического профиля (например, желаемой продолжительности поддерживаемого высвобождения; действий, если они имеются, на биологическую активность; легкости в манипулировании; степени или отсутствия антигенности и других известных действий ПЭГ на терапевтический белок). В различных вариантах осуществления молекулярная масса равна приблизительно 2, приблизительно 5, приблизительно 10, приблизительно 15, приблизительно 20, приблизительно 25,приблизительно 30, приблизительно 40 или приблизительно 100 кДа. В некоторых вариантах осуществления средняя молекулярная масса каждой цепи ПЭГ равна приблизительно 20 кДа. В других вариантах осуществления средняя молекулярная масса равна приблизительно 10 кДа. Количество присоединенных таким образом молекул может варьироваться, и специалист с квалификацией в данной области будет способен определить действие на функцию. Можно монодериватизировать или можно получить ди-, три-, тетра- или некоторую комбинацию дериватизации с одними и теми же или различными химическими частями молекул (например, полимерами, такими как ПЭГ с различными молекулярными массами). Отношение молекул полимера к молекулам белка (или полипептида) будет варьироваться, как и их концентрация в реакционной смеси. Обычно оптимальное отношение (в смысле эффективности реакции, заключающейся в том, что нет избытка непрореагировавшего белка или полимера) будет определяться такими факторами, как желаемая степень дериватизации (например, моно-,ди-, три- и т.д.), молекулярная масса выбранного полимера, является ли этот полимер разветвленным или неразветвленным, и условия реакции. Молекулы ПЭГ (или другие химические части молекул) должны быть присоединены к этому белку с учетом действий на функциональные или антигенные домены этого белка. Имеется ряд способов присоединения, доступных специалистам с квалификацией в данной области. См., например, ЕР 0401384(связывание ПЭГ с G-CSF); Malik et al., Exp. Hematol., 1992, 20, 1028-1035 (где сообщается ПЭГилирование GM-CSF с использованием трезилхлорида). Например, ПЭГ может быть ковалентно связанным (ПЭГилирование) посредством аминокислотных остатков через реакционноспособную группу, такую как свободная аминогруппа или карбоксильная группа. Аминокислотные остатки, имеющие свободную аминогруппу, включают остатки лизина и аминоконцевой аминокислотный остаток. Остатки, имеющие свободную карбоксильную группу, включают остатки аспарагиновой кислоты, остатки глутаминовой кислоты и С-концевой аминокислотный остаток. Для присоединения ПЭГ-молекулы (ПЭГ-молекул) в качестве реакционноспособной группы могут быть также использованы сульфгидрильные группы. Для терапевтическиих целей присоединение может про- 29